Junior Gómez herrera 1

DEFINICION

 Es un prueba diagnostica que por medio del

cultivo nos permite la información del origen
de la causa de las gastroenteritis y también
nos dan una idea de cual es el tratamiento
mas optimo e idóneo para el caso.
FASE PRE ANALITICA
MATERIAL DE RECOLECCION

 Un recipiente limpio de boca ancha

 Cierre hermético
VOLUMEN DE LA MUESTRA

 Heces pastosas: muestras del tamaño de

una nuez son muy adecuadas pues permiten
realizar la mayoría de los estudios.

 Heces líquidas entre 5 y 10 ml.

OBTENCION DE LA MUESTRA
 Solo se procesan materias líquidas o a lo sumo pastosas.

 Si son pastosas se toma una porción del recipiente y se

transfieren al sistema elegido para el envío al laboratorio.

 Se seleccionan las partes con mucus, pus o sangre.

 En caso de heces líquidas puede utilizarse jeringa para aspirado

del material fecal del recipiente

 No se procesarán las muestras de materias sólidas ni

contaminadas con orina.
MUESTRA
 TRANSPORTE
 Para bacterias. ( Cary- Blair o solución de glicerol tamponado)

 Si la muestra no se envia en forma inmediata se debe refrigerar.

4 ºC

 Si se va a procesar en el plazo de 1 o 2 horas después de su

emisión, no necesitan medio de transporte.

 Mientras tanto mantener refrigerada las muestras, para evitar el

sobrecrecimiento de la flora normal que puede enmascarar o
destruir a los enteropatógenos. El frío puede afectar la viabilidad
de Shigella spp.

 Para el estudio de toxinas de Clostridium difficile la muestra se

puede mantener hasta 48 horas
 FASE
ANALITICA
PROCESAMIENTO DE LA MUESTRAS

 HECES LIQUIDAS:

 No necesitan procesamiento.

 HECES SÓLIDAS:

 Hay que licuarlas.

 Mover con un bajalegua las heces hasta que
haya quedado lo suficiente liquida para tomar
un inoculo.
 Los retos al contenedor de bioriesgo:
 PROCEDIMIENTO:

 La tinción Gram. de la muestra:

 Siembra de los cultivos.

 TINCION GRAM
Cristal v. 1-2’
Lavar
Lugol 1’
Alcohol 1-3’’
Safranina 1’

 2.-La extensión sobre una

 1.- siembra con asa en
gota de Agua Destilada en
atmósfera estéril:
Porta y Fijarla.
TINCION GRAM
 IDENTIFICACION
 Una ves que
identifiquemos a
que tipo de
Bacteria tenemos,
identificaremos a
cada una, para ello
realizaremos
distintas pruebas
que nos llevaran a
la bacteria.
 SIEMBRA

 1.- siembra con asa en  2.- siembra por agotamiento

atmósfera estéril: en distintos medios
Incubación

37ºC x 24Hrs
 AISLAMIENTO

 Se realiza un aislamiento de cada colonia

para obtener un cultivo puro en un medio
general como TSA, Siguiendo en mismo
proceso de siembra con asa.
AISLAMIENTO
TSI
TSI
LIA
LIA
CITRATO SIMONS
CITRATO SIMONS
SIM (Sulfuro-Indol-Motilidad)
SIM (Sulfuro-Indol-Motilidad)
 ANTIBIOGRAMA
 Una vez que realizamos nuestra identificacion de bacterias en
nuestros aislamientos se realiza el ANTIBIOGRAMA para la
prueba de suseptibilidad de la bacteria frente a antibioticos
para un tratamiento adecuado e optimo.

 El sembrado se realiza por agotamiento, se deja secar 4-5’

luego se colocan los discos de antibioticos con una pinzas.
MEDIO MUELLER HINTON AGAR
 Este medio de cultivo ha sido recomendado universalmente
para la prueba de sensibilidad a los antimicrobianos. Además
es útil con el agregado de sangre 0.5%
 Para el cultivo y aislamiento de microorganismos
nutricionalmente exigentes.

FUNDAMENTO:
 presenta buena reproducibilidad lote a lote en las
pruebas de sensibilidad.
 su contenido en inhibidores de sulfonamidas,
trimetoprima y tetraciclina es bajo.
 la mayoría de los patógenos crece satisfactoriamente
 ANTIBIOGRAMA

Amoxicilina
18mm  Sensible

Cloranfenicol
22mm  Sensible

Amikacina
8mm  Resistente

Se usan: Amoxicilina, amikacina, cloranfenicol, Ampicilina, Penicilina, Vancomicina.

 RESULTADOS
 Consultar en la sección “prueba de sensibilidad a los
antimicrobianos”, la metodología apropiada.

Pseudomona aeruginosa
Chromobacterium violaceum Streptococcus pyogenes