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1.En tubos de tapa esmerilada colocar 10 ml de vino. 25 ml de solucin A. 2,5 ml de solucin B. TESTIGOS: igual cantidad, se deja reposar 15 minutos. 2.Luego se centrfuga durante 10-15 minutos. 2.Se midan 2 ml del sobrenadante y se colocan en tubos de tapa esmerilada de 10 ml y se agrega: 2 ml de muestra. 1 ml de solucin A. 1 ml de solucin B. 2,5 ml de solucin C. TESTIGOS: igual cantidad (100 mg/l, 200 mg/l, 300 mg/l, 400 mg/l) 3.Dejar reposar 15 minutos y luego leer por turbimetra. PREPARACIN DE TESTIGO: Se parte de una solucin 1 g/l (PM: 210,15; 0,546 g cido en 500 ml) 1100 mg/l se toman 25 ml se llevan a 250 ml con H2O destilada. 2200 mg/l se toman 50 ml se llevan a 250 ml con H2O destilada. 3300 mg/l se toman 75 ml se llevan a 250 ml con H2O destilada. 4400 mg/l se toman 100 ml se llevan a 250 ml con H2O destilada. SOLUCIN A: Se pesan 25 g de BrK y se llevan a 250 ml con agua destilada. SOLUCIN B: Se pesan 6,25 g de bromato de potasio (KBrO3) se disuelven en 125 ml de agua y se agregan 6,25 ml de H2SO4 concentrado y se llevan a 250 ml con agua destilada. Para un litro de solucin B agregar en 500 cm3 de agua 25 ml de H2SO4 pesar 25 g de KBrO3 y llevar todo a 1000 ml. SOLUCIN C: Se pesan 2,5 g pentxido de vanadio (V2O5). Se disuelven en 50 ml de H2SO4 concentrado densidad 1,84, se mezcla lentamente y luego con el agua para llevarlo a 250 ml.
Investigacin Antispticos.
Elementos necesarios: Una cepa de levaduras en medio de cultivo estndar Medio de cultivo estndar: Extracto de levadura 0.5% Glucosa 2% Agar Agar 1.75% Solucin Problema. El vino debe ser acondicionado a un grado alcohlico de 9 y a un PA 2.9 y una concentracin de SO2 libre de 20mg/l Preparacin de la pelcula: Se coloca en BM a fundir los tubos de ensayos con el medio de cultivo, se enfra a 55C y a esa temperatura se agrega 1 cm de suspensin de levaduras en agua estril a razn de 150.000 clulas por microlitro, se homogeneiza. Antes que se enfre se vierte sobre un porta formando una capa delgada, se deja secar. Luego se introduce en el vino problema, se tapa y se deja en estufa 28-30 C durante 24 hs. Luego se observa si hubo desarrollo durante varios das. Antispticos: cido saliclico. cido benzoico.
Vino
Clculos: relativa: (P x To o)/Po x T R: (689 x 273 x 2.927)760 x 301 (x) 15-20 = 2.264 (dens relativa del aire dada en tablas) = Densidad del aire en condiciones normales = 1.2931 o = (x) x = 1.2931 x 2.264 = 2.927 To = 273 Po = 760 T= 273 + T ambiente en el momento de la experiencia (supongamos 28C) T = 273 + 28 = 301
P = presin atmosfrica en el momento de la experiencia (ej 689) Aplicando la frmula: relativa (689 x 273 x 2.927)/760 x 301 = 2.407 R x V =2.407 x 321 = 772.6 V = volumen de la ampolla Ejemplo: Supongamos que me quedaron sin combinar 24.9 ml
24.9 32 = 796 1000
Si V = 772.6 (vol ampolla) 796 100 x = 99.4% Preparacin solucin tiosulfato de sodio 1N Se pesa 248.18 g y se lleva a un litro. Yodo Normal: 127g 1000 ml, se coloca doble cantidad de KI Titulacin de yodo Se colocan 10 ml de anhdrido arsenioso 1N mas 1g de bicarbonato de sodio y almidn. Titulacin de tiosulfato de sodio. Coloco 10 ml de I2 1N y 5 ml de cido sulfrico y almidn.
Determinacin de amonio
Ensayo en blanco: Colocar en el Joulmes 50 ml de agua destilada y 40 ml de soda al 30 % y 50 ml de ClH normal. Recoger sobre 30 ml de cido brico de 40 g/l destilar 140 ml, es decir la mitad de las cantidades colocadas. Agregar 5 gotas del indicador El viraje del indicador se obtiene con el agregado de 0.1 ml deClH 0.1 N Ensayo con sulfato de amonio: Se hace una solucin de sulfato de amonio 0.1N. Se colocan 10 ml y se destilan, luego se titula con ClH 0.1N, debo gastar 10 ml ms el ensayo en blanco. Tcnica: En una columna de 50 ml aprox se coloca resina catinica IRC 50 (80-100) Luego se hace pasar una solucin de NaOH normal y una solucin de ClH N. Se lava con agua destilada hasta reaccin negativa de cloruros frente a una solucin de nitrato de plata. Luego se agrega una solucin de tampn neutra 50 ml. Lavar con agua destilada hasta total eliminacin de fosfatos frente a solucin saturada de acetato de plomo. Modo de operar: Se toman 50 ml de muestra en un vaso de 250 ml y se le agregan una cantidad de NaOH equivalente a la mitad de (n-0.5) ml; donde n = volumen de NaOH 0.1N que se utiliz para titular la acidez total. Se hace pasar por la columna a razn de una gota cada 2 segundos. Se lava con 50 ml de agua destilada (el catin amonio se fija a la resina) Se agregan 50 ml de ClH N y luego 50 ml de agua destilada. El eluido y el lquido de lavado se pasan a un baln de destilacin (Joulmes). Se agrega una gota de fenolftalena al 1% y soda al 30% hasta reaccin fuertemente alcalina. Destilar alrededor de la mitad, recogiendo en 30 ml de cido brico de 100 g/l Se titula con ClH 0.1N usando verde de bromocresol como indicador. Clculos: Sea n los ml de ClH 0.1 N utilizados, la cantidad de amonio ser: 0.034 x n = g/l Para realizar una nueva determinacin se hacen pasar por la columna 50 ml de solucin tampn y luego se lava con agua destilada hasta eliminacin de fosfatos
Preparacin Reactivos de Amonaco. Solucin Tampn neutra: Fosfato disdico HNa2PO4 12 H2O: 12 g Fosfato monopotsico H2KPO4 3.35 g Agua destilada 1000 ml Verificar que el pH 70.2 Hidrxido de sodio al 30% 30 g en 100 (en masa) densidad 1.33 Verde de bromocresol: Verde de bromocresol 1 g Disolver en una solucin N/10 de NaOH 14 ml Agua destilada 100 ml Solucin cido brico cido brico puro 40 g Agua destilada 1000 ml A esta solucin se le agrega 5 gotas de rojo de metilo, debe volverse rosa por la adicin de 0.1 ml de ClH N/10
DETERMINACIN DE BENTONITA:
Determinacin de: 1) Humedad: En una cpsula de platino tarada se pesan 2g de bentonita y se llevan a estufa a 100C hasta peso constante. Sea P: peso de cpsula + 2g de bentonita P: peso cpsula despus de 110C Si 2g _____ M (P-P) 100g _____ X % de Humedad
2) Prdida por calcinacin: Una vez determinada la humedad, la cpsula con la sustancia se lleva a mufla a 800C Clculos: Ejemplo: Tara: 29.9396 2g : 31.9396 P Peso despus de estufa: 31.7432 P - Humedad: P P: 31.9396 31.7432 = 0.1964
Si 2g _____ 0.1964 100g _____ X - Prdida por calcinacin: Sobre sustancia seca: Peso Mufla: 31.6438 Peso despus de estufa: 31.7432 Peso despus de mufla: 31.6438 ________ 0.0994 Si 1.8036 ______ 0.0994 100 ______ X
3) Capacidad de Hinchamiento: En una probeta de 100ml se llena con agua comn y se deja caer lentamente 2g de bentonita, y luego se leen los ml depositados. (aproximadamente de 18 a 20 ml) 4) Determinacin de extracto: Se toma un vino y se divide en 2 partes aproximadamente 100 ml c/parte. A una se le agrega 1 g/l de bentonita y se la deja 48 hs, a la otra se la deja de testigo. Luego se le determina: Extracto, Acidez total, Hierro y Cal. 5) Hierro: En un tubo se colocan: 10 ml de vino 1 ml de ClH al 50% 1 ml de SCNK al 50% 1 gota de Agua Oxigenada 6) Informe: La muestra analizada est constituida por un polvo fino, inodoro, amarillo claro, grasa al tacto y que en agua da una solucin coloidal con regular aumento de volumen. Humedad Prdida por calcinacin (sobre sustancia seca) pH (suspensin acuosa) Capacidad de Hinchamiento
2g de bentonita suspendida en 100 ml de agua una vez decantado dan un volumen de ..... Ensayo sobre un vino al que se le dosifica 1g/l de bentonita despus de 48 hs. ANTES Extracto Seco Acidez Total ( en Acidez Tartrica) Hierro Cal Identificacin de Bentonita: - Microscopio: Pequeas placas irregulares amarillentas - Ensayo: Insoluble en cidos y lcalis No se quema pero puede ennegrecerse por los prtidos absorbidos. DESPUS
Ensayo de Identificacin: El benzoato de sodio por calor funde y da olor a cido benzoico. En un tubo colocar 0.05g de Benzoato de Na + 5 gotas de SO4H2 + 5 gotas de alcohol de 96 en B.M. se desprenden vapores de cido Benzoico de olor a manzanas.
CRISTALES DE TARTRATO DE CALCIO: Son cristales en forma de vigas, estn biselados en ngulos diferentes en las dos extremidades. Su investigacin se realiza agregando ClH diluido, en caso (+) se disuelven.
Investigacin de cido benzoico y benzoatos: EXTRACCIN: En un vaso de precipitacin o cpsula de porcelana se colocan 100 ml de vino y se concentra en B.M. a la mitad de su volumen, se deja enfriar, se acidula con ClH o SO 4H2 diluido. Se pasa a una ampolla de decantacin y se extrae con igual volumen de ter, repitiendo la operacin con la mitad de eter. Se lavan los extractos etreos con pequeas porciones de agua destilada y se transvasa a una cpsula de porcelana, se evapora el ter a t ambiente o calor muy suave, se disuelve el residuo en un poco de agua destilada y sobre el se aplican algunas de las siguientes reacciones: REACCIN DE ANNA JONESCU: Solucin Cloruro Frrico 2.5% Solucin N/10 de SO4H2 Agua oxigenada al 0.3% 1ml de H2O2 de 10 volmenes se le agrega 9 ml de H2O destilada. TCNICA: A la solucin que contiene el residuo obtenido se le aade gota a gota solucin de cloruro frrico hasta que no precipite ms benzoato frrico (generalmente 2 gotas); se agrega luego gota a gota solucin N/10 SO4H2 hasta que se disuelva el precipitado formado ( si no se form precipitado por hallarse ausente o en pequea cantidad el cido benzoico, basta con el agregado de 1 gota de cido comprobando, para mayor seguridad si el lquido posee reaccin cida. Se agrega enseguida 1 gota de solucin de sulfato ferroso. 1 gota de agua oxigenada
Se calienta suavemente en B.M. poco tiempo o dejarlo a t ambiente hasta el otro da. INTERPRETACIN: La aparicin de una coloracin violeta indica la presencia de cido benzoico. Nota: Si al agregar la solucin de cloruro frrico al comienzo de la reaccin aparece una coloracin violeta, presencia de cido saliclico, se elimina agregando: cido sulfrico para acidificar se calienta a 70-80C y se agrega una gota de permanganato de potasio al 1% hasta aparicin de un tinte rosado persistente, se deja enfriar, se extrae 3 veces con 20 ml de cada uno, se lava con 30 ml de agua destilada adicionada de 5 ml de alcohol se coloca en cpsula de porcelana se evapora el eter aadiendo un poco de agua destilada caliente antes de llegar a sequedad y sobre la solucin acuosa obtenida se investiga el cido benzoico Determinacin de Benzoato de Sodio Se hace una solucin patrn de cido benzoico de 2000 mg/l. Para ello se pesan 16.9 mg de cido benzoico ms 20 ml de alcohol de 95 y se llevan a 100 ml con agua destilada. De esta solucin madre se preparan los patrones de 10 mg/l y 20 mg/l: Para 10 mg/l se toman 2.5 ml y se llevan a 50 ml. Para 20 mg/l se toman 5.0 ml y se llevan a 50 ml. Luego se hacen las lecturas en el aparato a una long de honda de 235.6 donde la absorsin da: Para patrn de 10: 0.494 Para patrn de 20: 0.958. Muestra: Se hace un destilado como para cido srbico en el Joulmes (10 --- 200 ml) Se toman 10 ml del destilado y se llevan a 50 ml con agua dstilada. Se hace pasar por el aparato donde me da: un valor de absorsin y de concentracin. Se usa el MTODO 4: El valor obtenido est expresado en cido Benzoico que lo debemos pasar a Benzoato de sodio Si Luego: 122.12 0.9 144.12 X = 0.9*144.12 122.12 122,12 g cido Benzoico Valor obtenido 144,12 g Benzoato de sodio X=
El valor obtenido se multiplica por 100 que es la dilucin 10200 (1/20) 10 50 (1/5) = D100
Determinacin de Cloruros:
Se toman: (10) 25 ml de vino. (2.5) 5 ml de cido ntrico (10) 10 ml de nitrato de plata. Se agrega permanganato de potasio y se calienta hasta que quede un precipitado completamente blanco. Titulacin: Se titula con sulfocianuro de K N/20 usando como indicador alumbre frrico, hasta coloracin rosada. Clculos: ClNa g/l = 1/20 x M x 0.0585 x 40 (10 - V) x 0.117--- 25 ml Clculos para: 20 ml de vino: (10-n) x 0.145 = 10 ml de vino: (10-n) x 0.2925 = Preparacin de permanganato de K saturada: Se pesan 65 g de permanganato de K y se disuelven en agua bidestilada en caliente y luego se lleva a un litro Solucin de sulfocianuro de K: Para: 1N: 97.17 g N/10: 9.717 g N/20: 4.8585 g Se pesan para N/20 4.8585 g de sulfocianuro de potasio y se llevan a 1 litro con agua destilada. Preparacin de nitrato de plata N/20: Se pesan 8.4945 g y se llevan a 1 litro con agua bidestilada. Se constata frente a una solucin de ClNa N/20. Se pesan 0.0292 g de ClNa para 10 ml de nitrato de plata problema, se le agrega agua destilada y como indicador cromato de K y luego se titula con la solucin de nitrato de Ag hasta viraje del indicador. Para ttulo debo gastar 10 ml Titulacin del sulfocianuro de K: Se titula con una solucin de nitrato de Ag N/20 exacto colocando 10 ml de nitrato de Ag y 2 ml cido ntrico y alumbre. Debo gastar 10 ml.
Cloruro en mostos: Mostos sulfitados: Se toman 10 ml y se llevan en cpsula de Pt a cenizas. Se retoma con 10 ml de agua acidulada con cido ntrico y se sigue igual que la tcnica para cloruros. Alumbre 15%: 15 g de Hierro III y amonio sulfato (alumbre) ms 20 ml de agua, calentar hasta disolver, llevar a 100 ml con cido ntrico.
Determinacin de Cenizas:
Se toman 20 ml de vino y se colocan en una cpsula de Pt previamente tarada, se lleva a bao mara y luego a bao de arena, se lleva hasta cenizas blancas colocarla en mufla a 530 - 550C durante 15 minutos. Por diferencia nos da los g% El resultado se se multiplica por 100 para obtener g por mil
Determinacin de Carbn:
1-Humedad: Se coloca en una cpsula de Pt previamente tarada 1 g de carbn y luego se lleva a estufa hasta peso constante: P - P' = % de humedad. Se considera como lmite aceptable no ms de 15%. 2-Cenizas: Luego de determinar humedad se lleva la capsula a mufla a 525C durante 15 minutos y se determinan cenizas en %. Se considera aceptable no ms del 10% de cenizas referido a carbn seco. Poder decorante: Se hace una solucin 0.15 g% de azul de metilano. Se pesa en varios vasos de precipitacin 100 mg de carbn y se le agrega a cada uno una cantidad creciente de solucin de azul de metileno (Ej: 3,4,5,6,7,8 ml) Se agita constantemente durante 5 minutos, luego se filtra. Se considera como titulo la mxima cantidad de azul de metileno decolorada. Determinacin de sulfato: A 10 ml de muestra se le aade 1 ml de ClH y 1 ml de solucin de cloruro de bario 12%. Se mezcla bien y se deja en reposo durante 10 minutos. Interpretacin: La turbidez producida no debe ser mayor de la de una solucin tio reparada al mismo tiempo con 1 ml de solucin de 0.02N de cido sulfrico, 1 ml de ClH y 1 ml de solucin de cloruro de bario al 12%. Como los 10 ml del tubo problema corresponden a 0.4g de carbn seco, si la turbidez fuera igual a la del testigo, contendra 0.24g de sulfatos por 100 g de carbn seco. 1 ml solucin de cido sulfrico 0.02N 1 ml de ClH 1ml de solucin de cloruro de Ba 10% Determinacin de cloruros: Se pesan 2g de carbn, se le agregan 50 ml de agua destilada se hierve durante 5 minutos, se filtra y se lava con agua en pequeas porciones, el agua debe estar caliente, hasta obtener un volumen de 100 ml. Al filtrado fro se le agrega 2 ml de solucin de cromato de K al 5% como indicador y se titula con nitrato de Ag N/30 hasta lograr una coloracin pardo rojizo, siendo los ml gastados (N). Se hace un blanco con agua destilada y 2 ml de indicador y se titula con nitrato de Ag (N'): 50 x (N - N') x 0.00118 = g % de cloruro Preparacin de nitrato de Ag N/30: Si tenemos una solucin N/20 se toma 66.6 ml de sta y se llevan a 100ml.
Lmite aceptable de cloruros, no ms de 0.2645 g cada 100 g de carbn seco. Determinacin de hierro: Se pesa 1 g de carbn seco y se lleva a cenizas en mufla a 550C Se retoman las cenizas con 5 ml de cido ntrico 4N, trasvasndolo a un tubo de Nessler de 50 ml y se lava la cpsula con pequeas porciones de agua destilada. Preparacin de patrones: En tubo de Nessler colocar como indica en la tabla cantidades de solucin diluida (1:100) de una solucin de hierro de 1 g/l ms 5 ml de cido ntrico 4N. Luego a la muestra y patrones se la agrega 5 ml de sulfocianuro de K 3N se enrasan con agua destilada a 50 ml. Solucin madre de Hierro (1 g/l): 1 gramo de hierro metlico se disuelve en 50 ml de ClH. Patrn 1 2 3 4 5 6 7 8 ml soluc. madre 2.5 ml 5.0 ml 7.5 ml 10.0 ml 12.5 ml 15.0 ml 17.5 ml 20.0 ml g % Fe 0.0025 0.0050 0.0075 0.0100 0.0125 0.0150 0.0175 0.0200 p.p.m. de Fe 25 50 75 100 125 150 175 200
Informe: La muestra analizada est constituida por un polvo fino, negro impalpable, inodoro, inspido que responde a las siguientes caractersticas analticas: Cenizas sobre producto seco: Cloruros, Sulfatos, Hierro. Ensayo de carbonizacin incompleta. Reaccin de sulfuros. Poder decolorante. 0.100 g de carbn decoloran ............ ml de una solucin de azul de metileno de 0.15 %
Combinaciones Cianhuradas:
Materiales: 1 Baln de 500 ml, 1 refrigerante, 1 vaso de 50 ml y bao de hielo Se basa en la destilacin cida del vino, donde se liberan los iones cianuros y se destilan junto a los libres y fijacin en medio alcalino y su posterior titulacin por argentimetra. Reactivos: Soluciones: Sol. de Ioduro de Potasio Ioduro de potasio: 250 g _____ 1000 ml
Solucin de NO3Ag 0,001 N Sol. NO3Ag 0,1 ______ 10 ml - N/20 cido Ntrico dens: 1,33 ______ 0,5 ml Agua Destilada _______ 1000ml Solucin de Rojo Fenol Rojo de Fenol Sol. NaOH 0,1 Agua Destilada Solucin de SO4H2 1/5 Tcnica Se introduce 100 ml de vino (filtrado o no) en un baln de 500 ml, se agregan 5 mg de Cloruro cprico, 10 ml SO4H2 1/5. Se colocan 5 ml de OHNa N en el erlenmeyer receptor de 50 ml, recogiendo 45 ml aproximadamente. Este destilado se coloca en un vaso de 250 ml y se lleva a B.M. hirviente y sobre el mismo se dirige una corriente de aire fro. Se reduce el volumen de 5 a 7 ml operacin que demanda unos 30'. Se pone el residuo en un tubo de 20 mm de dimetro y se ilumina fuertemente con un haz de luz blanca y se contrasta con un fondo negro. El lquido debe ser lmpido. Se agregan dos gotas de solucin de Rojo de Fenol para 0,05 mg 1,4 ml 1000ml 20 ml
sensibilizar el viraje y una gota de solucin de ioduro de potasio. Se vierte ahora la solucin de NO3Ag 0,001N en cantidad suficiente para obtener una turbidez estable. Sean n los ml empleados Se prepara un testigo con 5 ml de solucin de NaOH N, 2 gotas de Rojo de Fenol, una gota de solucin de ioduro de K y una cantidad de agua suficiente para obtener un volumen igual del ensayo anterior. Se agrega la solucin de NO3Ag 0,001 N en cantidad suficiente para obtener la misma turbidez. Sean n' los ml gastados 1 ml de Solucin de NO3Ag 0,001 N corresponden a 54 mg de cido Cianhdrico. Luego 0,54 (n-n') es la cantidad de cido cianhdrico total expresada en mg/l. Considerar como significativo la presencia de cido cianhdrico en el destilado de la muestra cuando: n-n' sea superior a 0,5 ml
DETERMINACIN DE COBRE (CENIZAS) Se toman 20 ml de vino y se llevan a cenizas blancas, sin que se arda el residuo se puede calcinar sobre mechero, sin necesidad de llevar a mufla, una vez obtenidas las cenizas, se retoman con 20 ml de una solucin de ClH de 1:1 Se lee directamente en espectrofotmetro de absorcin atmica.
CROMATOGRAFA CAPA FINA: SACAROSA - GLUCOSA - FRUCTOSA FUNDAMENTO: Los azcares son desarrollados por cromatografa descendente y posteriormente revelados. TCNICA DESCENDENTE SOBRE PAPEL: MATERIALES: 1) Cuba para cromatografa descendente 50 cm de alto por 30 cm de ancho. 2) Papel Watman N 1 3) Micropipetas 4) Secador de aire 5) Estufa de secado a 80C 6) Pulverizador REACTIVOS: SOLVENTES Butanol normal .................... 4 partes (40 ml) Acetona .................... 5 partes (50 ml) Agua .................... 1 parte (10 ml) SOLUCIN DE REFERENCIA: Solucin de Sacarosa 1% Solucin de Glucosa 1% Solucin de Fructosa 1% SOLUCIN DE REVELADO Anilina al 4% en etanol 96 .............. 5 partes (50 ml) 1/25 Difenilamina 4% en etanol 96 .............. 5 partes ( 50 ml) 1/25 cido Fosfrico siruposo ............... 1 parte ( 10 - 13 ml) 5 ml Los 3 componentes se mezclan en el momento de usarlos ( agitar si aparece precipitado) TCNICA:
Cortar la hoja de papel Watman N1, 2 cm menos que el ancho de la cuba (Cortar la hoja aproximadamente de 14 cm) La concentracin mxima de azcares reductores en la muestra debe ser de 160 g/l (80 g/l) Sembrar 5 microlitros de c/u de los testigos y de la muestra. Se coloca la hoja en la cuba y se deja correr 24 hs. Se retira y se deja secar el solvente y se revela por pulverizador o inmersin en lquido de revelado. Se seca con aire fro y se coloca en estufa a 85C durante 5' o hasta que aparezcan las manchas correspondientes a los testigos. OBTENCIN DE LOS RESULTADOS: Se determina la concentracin de azcares por cromatografa comparando las manchas con las de los testigos. Dado que la sacarosa se hidroliza rpidamente, para la toma de muestra se debe proceder as: En el momento de la extraccin se le agrega a 100 ml de Muestra o Vino. 30 ml de Solucin compuesta de: Acetona ....... 14 ml Na OH 1N ....... 16 ml
CROMATOGRAFA DE CIDOS
Los cidos orgnicos del vino se pueden identificar por cromatografa descendiente sobre papel (cido succinico y lctico tienen el mismo Rt), usando reveladores en el solvente que al evaporarse el mismo pone de manifiesto las manchas. Material: Cuba, papel Natman N 1 (50 cm de largo y 2 cm menos que la cuba), micropipetas y ampolla de decantacin. Solventes: Solucin verde de bromocresol al 1%: 15 ml Agua destilada: 100 ml. Butanol normal: 100 ml. cido frmico concentrado: 10.7 ml Agregar estos reactivos en el orden dado en ampolla d decantacin de 500 ml agitar unos minutos. Dejar decantar, cuando se hayan separado bien las dos capas, desecar la capa acuosa y la capa orgnica filtrarla por varios papeles de filtro (5) para eliminar humedad. Soluciones testigo: cido tartrico: 1 g/l cido ctrico: 1 g/l cido lctico: 1 g/l cido mlico: 1 g/l cido succnico: 1 g/l Tcnica: Sembrar 20 microlitros de muestra y testigos. Poner el papel en la cuba y el sobrante en la cubeta y un poquito en el fondo de la cuba. Dejar correr 24 hs. secar con aire fro. Se observan manchas amarillas sobre el fondo verde.
DETERMINACIN DE FOSFATOS
Se basa en la obtencin de un compuesto coloreado por medio de un reactivo de vanadomolibdico y posteriores lecturas en el espectrofotmetro. Reactivos: Molibdato de amonio cristalino, metavanadato de amonio. Se toman 40 g de molibdato y 1 g de metavanadato. El molibdato de amonio se disuelve en 300 ml de agua destilada caliente. Aparte se disuelven en 300 ml de agua destilada y 200 ml de cido ntrico de densidad 1.42 el metavanadato de amonio. Se mezclan y se llevan a 1 litro con agua destilada. Tcnica: Se evaporan 5 ml de vino en cpsula de Pt sobre bao de arena, se carboniza el extracto sobre placa caliente y se lleva a mufla a 500-550C hasta cenizas. Se retoma con 5 ml de ClH 3N, se lava la cpsula con agua destilada (50 ml) se recibe en matrz aforado de 100 ml. Se agregan 20 ml de vanado molbdico se deja desarrollar el color durante 20 minutos, se enrasa, se lee en el espectrofotmetro a 425 (visible). Se preparan testigos conteniendo: 100, 200, 300, 400 y 500 mg/l de fosfato (P2O5) Clculos: Se parte de fosfato monopotsico (136.10) 2 fosfatomonopotsico_______ P2O5 272.18 __________________ 142 x _______________________ 1 x = 1.9169. Se pesan 1.9169 g se llevan a 1000 ml y luego se toma: 10 ml, se llevan a 100, se obtiene un concentracin de: 100 mg/l. 20 ml, se llevan a 100, se obtiene un concentracin de: 200 mg/l. 30 ml, se llevan a 100, se obtiene un concentracin de: 300 mg/l. 40 ml, se llevan a 100, se obtiene un concentracin de: 400 mg/l. 50 ml, se llevan a 100, se obtiene un concentracin de: 500 mg/l. Se toman 5 ml de los testigosy se procede igual que las muestras. El resultado se expresa en mg/l de P2O5. Los valores obtenidos se multipican directamente por 100 y nos dan mg/l de P2O5, para pasarlos a fosfato de sodio se multiplica por 2.16 Se hace un blanco colocando los reactivos y llevando a 100 con agua destilada. Se colocan las dos cubas con el blanco. Para pasar al ion fosfato se multiplica por el factor: P2O5 x 0.669 = Fosfato.
DETERMINACIN DE FERROCIANURO
Se toman 10 ml de vino, ms 1 ml de ClH concentrado y 1 ml de alumbre frrico. Si el vino es tinto se agregan 2.5 ml de cido sulfrico al 20 % y 5 ml de cloruro de bario. Si aparece una coloracin azul en el precipitado la reaccin es positiva.
DETERMINACIN DE FERROCIANURO DE K
Tcnica: Se pesa 1g ( 0,5 g) de muestra y se disuelven en 80 ml de agua destilada, ms 20 ml de cido sulfrico 1:5 y una gota de cloruro frrico al 1% como indicador o fenantrolina frrica. Se titula con sulfato cesico 0,1 N permanganato de K 0,1N. Se hace sobre los 100 ml de muestra y va del color anaranjado al amarilo con fenantrolina frrica y del azul al amario verdoso y al marrn con el uso de cloruro frrico. Clculos: a) Con sulfato csico: debo gastar aproximadamente 27,19 ml porque: 1000 ml de sulfato 0,1 corresponden a 36,78 g de ferrocuanuro de potasio anhidro, para un gramo de ferrocuanuro de K: x = 27,19 ml Si 100 ml sulfato csico _____ 36,78 g ferrocianuro. 27,19 ml ______________ x = 1,00 g Si 1 g muestra ____________ 1,00 g ferrocianuro de K 100 g muestra __________ x = 100 % Pureza: 100 % de ferrocianuro de K b) Con permanganato de K: Se toma la mitad de muestra (0,5 % g) se titula con cloruro frrico que va del azul al amarillo verdoso y al marrn. Supongamos haber gastado 11,75 ml. Clculos: 1000 ml permanganato 0,1N ___________ 42,23 g Ferrocianuro 11,75 ml permanganato _______________ x = 0,4984 g 0,5 g muestra ________ 0,4984g 100 g muestra ________ x = 49,84g Identificacin de: Ferrocianuro frrico: Es soluble en hidrxido de sodio precipita acidificandolo con ClH diluido. Microscpio: pequeas aglomeraciones o masas azules. Ferrocianuro ferroso-potsico: Insoluble en ClH diluido y en ditionito de sodio, se colorea de azul tratada con agua oxigenada, soluble en NaOH diluido. Ferrocianuro frrico: Anin color amarillo dbil. Es un reductor dbl y precipita con numerosos cationes. Con cidos minerales en caliente descomone el in ferrocianuro con liberacin de cianuro y
formacin de color o precipitado azul. Fe(CN6) + 6 H ______ 6 CNH + Fe II El in ferroso es oxidado y con el resto de ferrocianuro sin descomponer forma azul de pruzia. Con catin Ag da ferrocianuro de Ag que es un precipitado blanco insoluble en cido ntrico e hidrxido de amonio. Con cobre: precipitado pardo rojizo. Con FeIII: azul de prusia. Con Pb, Zn, Mg: Blanco Reaccin del in frrico: En presencia de in frrico se produce un precipitado de ferrocianuro frrico de color azul de prusia en medio neutro o cido que se descompone por la accin de los lcalis concentrados. Colocar en un tubo pequeas cantidades de la solucin y acidular con ClH 2N y aadir una gota de cloruro frrico en presencia de ferrocianuro se produce un intenso color azul. Ferricianuro: Amarillo intenso. Con la plata da un color rojo anaranjado de ferrocianuro de plata insoluble en cido ntrico pero soluble en amonaco, si a la disolucin amoniacal de ferricianuro de plata se aade agua oxigenada el in frrico es reducido y aparece un precipitado blanco de ferrocianuro de plata: ECUACIN: Con el in ferroso: Precipitado azul denominado azulturnbul de ferricianuro ferroso.
DOSAJE DE GLICERINA
La glicerina y el 2-3 butilenglicol son separados de otros componentes polihidroxilados por pasaje atravz de una resina donde son debilmente retenidos y eluidos mediante pasaje de agua destilada son dosados y luego por oxidacin peridica transformados en formaldehidos y acetaldehidos respectivamente mediande reaccin de color. El formaldehido desarrolla una coloracin rojo naranja con la floroglucina en medio alcalino y el acetaldehido da una coloracin violeta fugaz en medio tamponado de acetato de sodio con el metaprusiato de sodio y piperidina Reactivos: Resina amnica IRA 400 bajo forma OHSoluciones de: NaOH 5% cido peridico N/10 NaOH N Floroglucina al 0,2% Acetato de sodio al 27% Piperidina al 10% cido peridico N/50 yodo Anhdrido arsenioso N/50 Solucin A: preparar una solucin de 100 mg/l de glicerol con el titulo verificado Solucin B: preparar una solucin de 1,25 g/l de 2-3 butilen glicol y verificar el titulo. Tcnica: 1) Regular la resina con 100 ml NaOH al 5%. 2) Lavar con agua destilada hasta reaccin negativa de iones hodroxilos, usando como indicador fenolftaleina. Aprox. unas 5 ampollas de 200 ml. 3) Se toman 10 ml de vino se llevan a un matrz de 50 ml y se enrasa con agua destilada. se decolora con 300 mg de carbn y se filtra. 4)Tomar 10 ml del filtrado y se hacen pasar por la columna 2-3 gotas por segundo o 2-3 ml por minuto. Recibiendo el eluido en un matraz de 100 ml colocando agua destilada en la ampolla y dejando pasar hsata enrase de 100 ml. 5) ste eluido determinamos: Glicerina y 2-3butilen glicol. Glicerina: Testigos: Se parte de la solucin A: 20 ml llevar a 100, se obtiene: 4 g/l 30 ml llevar a 100, se obtiene: 6 g/l 40 ml llevar a 100, se obtiene: 8 g/l 50 ml llevar a 100, se obtiene: 10 g/l 60 ml llevar a 100, se obtiene: 12 g/l
Colorimetra: 1) En un matrz de 100 ml se coloca 5 ml del eluido (muestra) y 15 ml de agua dstilada. 2) e enciende el espectrofotmetro a 480 usando cubas de 1 cm y aire como referencia. 3)Se agrega a cada testigo y muestra 10 ml de cido peridico 0,05M con un intervalo de 5 minutos para cada unoagitando y luego agregar: 4) 10 ml de NaOH N 5)10 ml de floroglucina al 0,2 %. Aparece una coloracin rojo violcea cuya lectura se hace a la mxima absorvancia entre 70 y 75" 6) Con los testigos se sigue el mismo procedimiento colocando 20 ml de cada uno.
Procedimiento: 1. Abrir el agua de refrigerante. 2. Coocar en el baln 400 ml de agua dstilada y 90 ml de ClH 1+2 (600 agua y 300 ClH). 3. Cerrar las llaves A y C. 4. Colocar en el refrigarante de West 25 ml de NaOH 4N 20 ml de EDTA agua destilada hasta aproximdamente M. 5. Colocar en bao de hielo un erlenmeyer seco de 200 ml donde el pico toque el fondo (N) 6. Pesar 50 ml de mosto. Para ello en un vaso de precipitacin que pesa aproximadamente 47... coloco mosto y lo llevo a 116 g luego lo paso a la otra balanza y peso aproximadamente 116 (ej: 116.3648) Luego este mosto se pasa a la ampolla, en ese momento se enciende el fuego y se debe estar abierta la llave B Clculo del peso: Una vez colocado el mosto en la ampolla se deja caer hasta la ltima gota y sin lavar el vaso se pesa nuevamente, suponiendo que pesa 48,1345: 116,3648 - 48,1345 = 68,2303 (M'). Con ste valor se hacen los clculos: Ejemplo17.5 ml y 20 ml gastados: 20 - 17.5 = 2.5 ml de I consumido 1 ml I ____ 1.6 mg SO2 2.5 ml I ___ x = N Si M' g de muestra ______ N mg de SO2 1000 g muestra _________ x = .... mg/Kg Luego de encender el fuego, esperar a que hierva. Una vez eliminado todo el oxigeno cierro la llave B y abro la llave C y la A. El lquido debe mantenerce ms de la mitad del refrigerante. El mosto comienza a caer lentamente hasta su total eliminacin de la bureta. Se sigue el destilado hasta recoger en el erlenmeyer unos 175 ml. Titulacin: Em el erlenmeyer de 500 ml colocar:
30 ml de cido sulfrico 1/5, 20 ml I N/20, 10 ml IK, almidn y el destilado frio se ... con agua destilada ms ..... Se valora el exceso de yodo con una solucin de tiosulfato de sodio N/20 usando como indicador 2 ml de almidn. Al llegar al punto final se hace lentamente hasta incoloro agitando constantemente. Nota: mostos de cartellone se debe colocar el doble de I y IK gasto aproximado: 22 ml. Clculos: Supongamos haber colocado 40 ml de I N/20. Gastamos en la titulacin: 25.1 . Ej: 67,7807. 40 - 25.1 = 14.9 1____ 1.6 14.9___x = 23.84 23.84 _____ 67.7807 x _________ 1000 x = 347 mg/K SO2 Preparacin de reactivos: Almidn: 250 mg ms agua fra hasta que se disuelva, luego se lleva a 100 con agua destilada caliente NaOH 4N: 160 g los llevo a 1000 ml Acido sulfrico 1/5: 190 ml y los llevo a 1000 ml Se coloca en vaso de precipitacin 600 ml de agua ms 190 ml del cido concentrado, se agrega lentamente, se deja enfriar y luego se lleva a 1000 ml. ClH 1+2: 600 ml agua y 300 ml ClH conc Yodo N/20: Pesar 6.35 g de Yodo ms 20 g IK y lo llevo a 980 ml con agua destilada y luego titulo con tiosulfato de Na. En un erlenmeyer colocar 10 ml de tiosulfato y 2 ml engrudo de almidn. Tiosulfato de Na: Se pesan 12.41 g de droga, se agrega agua bidestilada para disolver, se pasa a una probeta de 1000 ml se completa con agua bidestilada hasta 950 ml Titulacin: Erlenmeyer de 250 ml se colocan 10 ml de yodo N/20 mas almidn, se titula con tiosulfato. Se debe gastar 10 ml si gast 9.6 est concentrado: Si 10 ml ________ 0.4 en 950 ml _______ x = 38 ml Titulacin del yodo: Se colocan 10 ml de anhidrido arsenioso N/10 ms bicarbonato de sodio y almidn se titula con Yodo debo gastar 20 ml Clculos: (20 - ml gastados x 1.600) / diferencia de la pesada.
DETERMINACIN DE ARSNICO
En un tubo para determinar As 0,5 g de muestra ms 4 ml de agua, 3 ml ClH concentrado, ... ml de cloruro estaoso , 1 granalla de ..., algodon en acetato de Pb. Papel de filtro con solucin de cloruro de Hg. Cloruro estaoso: A 20 gr de granallas de estao se le agregan 100 ml de ClH concentrado.
DETERMINACIN DE MALVIDINA
En un tubo de ensayo colocar: 1 ml de vino, 1 gota de ClH 1N y 1 ml de nitrito de Na 1%. Agitar y dejar reposar 2 minutos. Agregar 10 ml de solucin de NH3 5% en alcohol. Se deja 5 minutos en reposo, se mezcla bien se filtra y se lee a 490 nm. las cubetas deben usarse en forma individual (porque el error es menor) Clculos: (T - 6) x 0,426 x 11,5/10 = (T - 6) x 0,49 = mg de cloruro de malvidina por 100 Ej 21,5 de transmicin: (21,5 -6) x 0.049 = 0.66 x 10 = 6.6 mg/l. Se usa como testigoSulfato de quinina.
Malvidina en mosto: Se hace una dilucin del mosto 1/5 y luego otra dilucin al medio
Sulfato de quinina: Pesar 10 mg de sulfato de quinina en 100 ml de cido sulfrico 0.1N Se toman 20 ml de la solucin madre y se llevan a 1000 ml con cido sulfrico 0.1N.
Se toma la solucin C y se preparan tres testigos de concentracin 0.90, 1.35, y 1.80 g/l Solucin C: 10 ml llevo a 100 con sulfato de Na: 0.90 g/l: (T1) Solucin C: 15 ml llevo a 100 con sulfato de Na: 1.35 g/l: (T2) Solucin C: 20 ml llevo a 100 con sulfato de Na: 1.80 g/l: (T3) Segunda parte: Se toman tubos de 50 ml con tapa esmerilada: Testigos: 10 ml solucin de cada uno. Muestras 10 ml eluido. Testigo y muestra con 10 ml de sulfato crico. Llevo todo a bao a 65C durante 10 minutos, enfriar a 20C y agregar 5 ml de NaOH 2.5N y filtar. Tercera parte: Tomar 15 ml del filtrado, colocar en matraces de 100 ml y agregar 5 ml de acetato de Na al 27 % y 2 ml de cido sulfrico 2N. Leer a 570 nm de absorvancia colocando el uno con agua agua destilada y aire como referencia. Se agrega a cada matraz, comenzando por los testigos: 5 ml de nitroprusiato de K al 2 % y 5 ml de piperidina al 10 %. Inmediatamente de agregados se lee porque el color aumenta y disminuye rpidamente. Luego se grafican los valores. Titulacin solucin A y C Tomar 50 ml de la solucin B agregar unas gotas de fenolftalena y titular con cido sulfrico 1N. El titulo de la solucin A ser: N = (50 - (3 x m)) / 50 = factor. m = ml de H2SO4 1N gastados. Lectura aproximada de testigos: 0.90 g/l: 0.45 1.35 g/l: 0.70 1.80 g/l: 0.90
DETERMINACIN DE MANITA
Ensayo cualitativo. Se evaporan en fro 2-3 ml de vino, preferentemente decolorado con un mnimo de carbn, en un vidrio de reloj, al cabo de 24 hs el manitol se presenta bajo la forma de agujas cristalinas muy finas de un brillo sedoso, que irradian alrededor de diferentes centros, perfctamente diferenciados de los cristales de tartrato de potasio o de calcio. Para dosificarlos en forma cuantitativa: Se concentra en bao mara 50 ml de vino hasta alcanzar la consistencia de un jarabe fluido, se daja cristalizar el extracto durante 2-3 das en un lugar fresco y luego se mezcla el residuo con 2 g de arena fina calcinada. Se tritura despus la masa con una mano de mortero de gata, diluyendo poco a poco con 100 ml de alcohol de 85, saturada de manita a la misma temperatura. Se filtra y se deja secar 2 hs El filtro se somete a extraccin en caliente con 100 ml de alcohol de 85 durante 1 hora. Despus dl enfriamiento se destilan los 4/5 de alcohol, se agrega un poco de carbn al lquido restate y se filtra, se lava el carbn 2 veces con 50 ml de alcohol de 85 hirviendo, todo el lquido se filtra, se evapora a 60C. El residuo es manitol puro.
VINAGRES
1. Determinacin de alcohol: 200 ml de muestra ms soda. Se redestila agregando soda y azul de bromotimol hasta azul. 2. Acidez total: Se hace una dilucin 1/10, se toman 5 ml y se titula con NaOH N/20. 3.Acidez volatil Se parte de la dilucin 1/10 y se toman 5 ml. Clculos: Valor obtenido por titulacin (tabla) lo multiplico por 2 (porque tome 5 ml) y luego por 10. Obtengo el resultado en g/l de acidez en cido tartrico. Luego debemos pasarlo a cido actico: 1 mol cido tartrico 75 _____ 60 c actico valor obtenido ____________ x = 60/75 = 0.8 factor. Valor obtenido x 0.8 = g/l cido acetico. ej: ml gastados: 10.5 ml ____ 3.94 x 2 = 7.88 x 10 = 78.8 c tartrico. 0.8 x 78.8 = 63.00 g/l cido actico
DETERMINACIN DE POLIFENOLES
Mtodo de FOLIN CIOCALTEV: ste mtodo se realiza con una mezcla de cido fosfotungstico y cido fosfomolibdico que son reducidos por la oxidacin de los fenoles dando una mezcla de xidos azules de tungsteno y de molibdeno. La coloracin azul producida posee una absorcin mxima alrededor de 700 nm ella es proporcional al total de los compuestos fenlicos. Blancos: En un matrz de 100 ml colocar: 1 ml de vino, 5 ml de reactivo de Folin ciocalten, 20 ml de carbonato de sodio al 10 %. Se lleva a 100 con agua destilada se deja en reposo 30 minuos y luego se lee a 700 nm y el dato se multiplica por 20. Reactivo: Tomar 100 g de tungstato de sodio y 25 g de molibdato de sodio, son disueltos en 700 ml de agua destilada, se agregan 50 ml de cido fosfrico al 85 % ms 100 ml ClH concentrado y se coloca a ebullicin a reflujo durante 10 horas. Se agrega enseguida 150 g de sulfato de litio, algunas gotas de bromo y se coloca nuevamente en ebullicin durante 15 minutos. Se enfria y se completa a 1 litro con agua destilada. Si el vino es tinto se hace una dilucin 1:5 con agua destilada y el resultado se multiplica por 100. Los resultados son expresados bajo la frmula de ndice obtenido al multiplicar la densidad ptica por 20 de manera de tener una escala comparable a la utilizada en el caso de vinos tintos. ste indice es comprendido entre 4 y 10 para vinos de gota, en vinos de borras y prensa puede alcanzar de 15 a 20. Nota: Cuando el reactivo tama un color amarillo verdoso, para volverlo al color original amarillo, se lo calienta suavemente y se le agregan unas gotas de bromo.
SORBATO DE POTASIO
Informe: La muestra analizada est constituida por un granulado color blanco, soluble en agua y responde a las siguientes caractersticas analticas: Humedad: En una cpsula de platino se pesa 1 g y se lleva a estufa durante una hora y 15 minutos a 100C, luego por diferencia de peso hobtengo la humedad. Aproximadamente 0.1 a 2 %. Pureza: Se pesa un gramo de sorbato de K y se lleva a 500 ml con agua destilada: 2 g/l. de esa solucin tomo 20 ml y llevo a 200 ml: 200 mg/l. De esa solucin tomo 1 ml y llevo a 200: 1 mg/l. Se lee directamente colocando el cero con agua destilada y la cuba de referencia con agua destilada (256) Si 1 g c srbico ___________ 1.340 g sorbato de K lectura: 0.065______________ x =0.087 g de S de K 0.087/80 = 0.00108 g a mg = 1.08 mg Si 1 mg _________ 100 % 1.08 mg _________ x = 108 % Debo leer 0.17 que corresponde a 0.061 g para que me de al 100 % de pureza. Otra tcnica: Se pesan 1.340 g de sorbato y se llevan a 1 litro de agua destilada (A) 1 ml de A lo llevo a 100 ml con agua (B) (10 mg/l) 10 ml de B lo llevo a 100 ml con agua (1 mg/l) 20 ml de B lo llevo a 100 ml con agua (2 mg/l) 30 ml de B lo llevo a 100 ml con agua (3 mg/l) Se lee directamente dividiendo el valor que corresponda a la lectura por 80. El valor 80 se obtiene de la siguiente manera: Cuando se hace srbico en vinos se hace una dilucin 1/20 para obtener el destilado y luego se vuelve a diluir 1/4 para la colorimetra es decir que la dilucin total es de 1/80. Como los datos de la tabla estn multiplicados por 80 nosotros dividimos por 80 para obtener el dato real. Ej: lectura 0.21 que corresponde en la tabla a 77 mg de cido srbico:77/80 = 0.96. 1 mg/l __________ 100 % 0.96 mg/l ________ x = 96 % Curva de calibracin para c srbico: Se hace una solucin de 1.3388 g/l de sorbato de K PM sorbato de K: 150.13 _____________ 112.13 g cido srbico x ________________________________ 1 g x = 1.3388 g _______ 1000 ml (A) Sorbato de K en alcohol. Se preparan 2 litros agregando 22.23 ml de alcohol de 96 considerando el 7 % de retraccin de volumen Tomo 2 ml de A y llevo a 100 ml, obtengo 20 .. solucin B Tomo:
5 ml solucin B y llevo a 100 ml obtengo: 0.5 mg/l 10 ml solucin B y llevo a 100 ml obtengo: 1 mg/l 15 ml solucin B y llevo a 100 ml obtengo: 1.5 mg/l 20 ml solucin B y llevo a 100 ml obtengo: 2 mg/l Para la muestra se hace la misma forma: Peso 1.3388 g _________ 1000 ml (1g/l) (A) De la solucin A tomo 1 ml y llevo a 100 ml (B) Tomo 10 ml de B y llevo a 100 ml (C) Suponiendo lectura de solucin C = 0.22 0.5 mg/l: 0.11 1.0 mg/l: 0.22 1.5 mg/l: 0.33 2 mg/l: 0.44
SACAROSA
Se pesan 10 g de azcar y se llevan a 100 ml con agua destilada. Luego se hace la observacin polarimtrica y aplicamos la siguiente frmula: C = (L x 100) / (2 x (a)) = (L x 100) / (2 x 66.5) = M L = lectura Si 10 g ___________ M g 100 g _____________________ x = .... %
HIDRLISIS DE SACAROSA
Se toman 90 ml de la muestra, se le agrega 1 ml de ClH concentrado y se lleva a B M hasta llegar a los 70C luego se mantiane esa temperatura sin sobrepasar durante 15 minutos. Luego se enfra a temperatura ambiente y se neutraliza con solucin de NaOH al 20 % y al llegar cerca del punto final con NaOH N/20 en el peachmetro. Conviene colocar en B M al principio en el centro una vez llegado a los 70C se coloca en los extremos del bao, una vez fro se determina el azucar. Clculos: Determinacin de la relacin glucosa-fructosa. Ej: Azucares reductores (antes de hidrlisis) = 35.79g/l Azucares reductores (despus de hidrlisis) = 56.38 g/l Desviacin polarimetrica (antes) 0.0 Desviacin Polarimetrica (despus) -3.2 Aplicando la siguiente frmula: X g (glucosa) = - (df/(dg - df)) x P + (1/(dg - df)) x a (1) Y = (g fructosa) = P - X Donde: dg: desviacin que corresponde a 1 g de glucosa disuelto en 1 litro de agua a 15C (+0.484) df: desviacin de 1 g fructosa en 1 litro de agua 15C (-0.864) a: desviacin polarimtrica. P peso de azcares reductores por litro. Reemplazando en (1) X = -(-0.864/0.484- (-0.864)) x 35.79 + (1/0.484 -(-0.864)) x 0.0 = 22.9378 g glucosa. Y = 35.79 - 22.9378 = 12.85 g de fructosa. Clculo de desviacin polarimtrica: 1 g de glucosa: +0.484 22.93 g: x = +11.09 glucosa. 1 g fructosa: -0.864 12.85 g: x = -11.10 fructosa. Clculo de sacarosa hidrlisis: Posterior a la hidrlisis se determina la cantidad de azcares reductores por el mtodo de Fehling dando: 56.38 g/l:
56.38 - 35.79 = 20.59 g Glucosa. Existe un factor de conversin de glucosa en sacarosa (0.95) que se deduce de la siguiente relacin: 2 moles glucosa: 1 mol sacarosa. 360.32 g glucosa: 342.30 g sacarosa. z = 20.59 x 0.95 = 19.56 g sacarosa. Desviacin polarimtrica despus de hidrlisis: 1 g azucar invertida: -0.190 19.56 g a invertida: x: -3.7
PREPARACIN DE SOLUCIONES
cido sulfrico: Para concentracin 1N: N = m / (Peq x V) m = N x Peq x V m = 1 x 49 x 1 = 49 g para 1000 ml m = 1 x 49 x 1/4 = 12.25 g para 250 ml Buscamos en la etiqueta delfrasco: Densidad: 1.835 y concentracin: 96 % Si 96 g de cido corresponden a 10 g % 49 g son x = 51.04 y 12.25 g son x = 12.76 V = P/densidad = 12.76g / 1.835g/ml = 6.95 ml Se toman 6.95 ml de cido sulfrico puro y se llevan a 250 ml. Para 1000 ml 1N: 27.81 ml de cido sulfrico concentrado Para 250 ml 1N: 6.95 ml de cido sulfrico concentrado Para 1000 ml 2N: 55.60 ml de cido sulfrico concentrado Para 1000 ml 0,1N: 2.9 ml aprox. ( 5.56 ml y los llevo a 2 litros) Suponiendo que sali ms concentrado, para ello se titula con NaOH. Ej: se gastan 11 ml de NaOH 1N: Si 10 ml corresponden a 1 ml de diferencia, para 1000 ml: x = (1000 x 1)/10 = 100 ml. en un matrz de 1000 coloco 1000ml de agua destilada y luego enraso con la solucin problema. Pureza del cido sulfrico: Se toma 1 ml de la solucin problema y se titula con NaOH 1N usando fenolftaleina como indicador supongamos un gasto de 36 ml de NaOH: V x N x mEq x V' = 36 x 1 x 0.049 x x1000/1 = 1.764 g Si 1.835 g de cido: 100 % 1.764 g: x = 95.8 g % Pureza 95.8 % (para titulo exacto conviene colocar 28.5 ml de cido, 3 gotas en 1000 ml equivalen aproximadamente a 0,1) Factor: conocido/desconocido = ml gastados / ml que debera gastar por clculo. cido clorhidrico: Para 1N: m = N x Peq x V = 1 x 36.46 x 1 = 36.46g Si 37 g ClH son 100 %, 36.46 g x = 98.5 g V = P/densidad = 98.5/1.190 = 82.80 ml Para 1N tomo 82.80 ml (84 ml) y lo llevo a 1000 ml Para 0.2N tomo 16.57 ml y lo llevo a 1000 ml Para 0.5N tomo 41.40 ml y lo llevo a 1000 ml Para 0.05N tomo 4.140 ml y lo llevo a 1000 ml Para 0.01N tomo 0.828 ml y lo llevo a 1000 ml
Para 3N tomo 248.40 ml y lo llevo a 1000 ml Hidrxido de sodio: Pesar 40g y llevar a 1000 ml (conc 1N). Se titula con biftalato de potasio, se pesan 204.4 g (PM del biftalato de K: 204.4g) Si 1000 ml NaOH 204.4 g biftalato 10 ml NaOH: x = 2.044 g En la prctica se pesan 40 g de NaOH ms 15 lentejas 41.5 g En caso de que resulte concentrado: Suponiendo un gasto de 9.6 ml de NaOH para 10 ml, la diferencia es de 0.4: Si 10 ml: 0.4 1000 ml: x = 40. Se agregan 40 ml de agua destilada. Para 2.5N se pesan 106 g de NaOh y se llevan a 1000 ml se titulan con biftalato de K (5,11 g en 10 ml) se usa como indicador fenolftalena. Nitrato de plata: PM = Peq = 169.89 g 1N 169.89 g llevo a 1000 ml 0.1N 16.989 g llevo a 1000 ml 0.05N 8.4945 g llevo a 1000 ml Se constata fernte a una solucin de ClNa (PM: 58.45g) 1 N 58.45 g para 10 ml 0.5845 1N 0.1 N 5.845 g para 10 ml 0.0584 1/10 0.05 N 2.9225 g para 10 ml 0.0292 1/20 Se pesan N/20 0.0292 g de ClNa se le agrega agua destilada ms cromato de potasio como indicador y se titula con la solucin problema de nitrato de Ag debo gastar 10 ml. Sulfocianuro de potasio: PM 97.17 Para 1N peso 97.17 g y llevo a 1000 ml 1/10N peso 9.717 g y llevo a 1000 ml 1/20N peso 4.8585 llevo a 1000 ml Se pesan 4.86 g sulfocianuro de K y se llevan a 1000 ml se titula con solucin de nitrato de plata N/20 colocando 10 ml y 2 ml de alumbre, debo gastar 10 ml. Alumbre frrico: Se puede usar sulfato frrico amnico en solucin al 15 %. Se agrega cido ntrico hasta coloracin amarilla plido en caliente Solucin saturada de permanganato de potasio: Se pesan 65 g de permanganato de K se disuelven en caliente y se lleva a un litro. Mezcla sulfocrmica: Se pesan 45 g de dicromato de Kms 120 ml de agua destilada, luego agrego 880 ml de cido sulfrico concentrado. Solucin hidroalcoholica:
Para llevar de 96 a 13: Regla de las mezclas: 1. Se coloca en el extremo superior izquierdo el grado que tengo. 2. En el centro el grado que debo obtener. 3. En el extremo inferior izquierdo el grago del agua que es cero y luego resto: 96 - 13 = 83 de agua. 0 - 13 = 13 de alcohol. Es decir que debo tomar 13 ml de alcohol y 83 ml de agua. Si 96: 13 1000: x = 136.8 ml de alcohol y lo llevo a 1000 ml Agua oxigenada: De 100 volmenes (30 %) Para hacer una solucin de 10 volumenes, tomo 10 ml de la de 100 volumenes y llevo a 100 ml. Almidn: 50-60 g de almidn se disuelven en un becker (vaso de precipitacin) con agua destilada fra. En un erlenmeyer de 4 litros se hierve agua destilada, cuando est en ebullicin se agrega la solucin de almidn agitando. Yodo N/50: Para 1 litro pesar 2.54 g de yodo y 8.00 g de IK. Para 16 litros 40.64 g y 128.01 g respectivamente). Se mezclan y se humedecen con agua destilada y luego se disuelven lentamente pasando a otro recipiente. Por cada 1 g de yodo se agregan 3.15 g de IK. Titulacin: Con arsenito de sodio N/10. En un erlenmeyer colocar bicarbonato de sodio , almidn y 2 ml de arsenito. Debo gastar 10 ml de yodo N/50. Licor Gipsometrico: Para 15 litro peso 40.06 g de cloruro de bario bihidratado y 375 ml de ClH concentrado. Se disuelven por separado y luego se mezclan y se enrasa. Bromotimol 4 %: 1. Disolver 8 gramos en 400 ml de alcohol. 2. Agregar 400 ml de agua. 3. Se neutraliza con NaOH 1N hasta azul verdoso pH7. 5. Enrasar a 2 litros con agua destilada. Solucin para controlar Baume: B: g de ClNa 10.......................... 109.93 g por mil 11.......................... 122.50 g por mil 12.......................... 135.28 g por mil
13.......................... 148.57 g por mil 14.......................... 161.26 g por mil Heliantina: Se pesa 0,1 g de anaranjado de metilo y se lleva a 100 ml con agua hervida. Se regula el pH entre 3.1 y 4.0
CIDO CTRICO
Mtodo de Deniges: Se colocan en varios tubos de ensayo de dimensiones idnticas colocados en una gradilla metlica. Se vierten 5 ml de vino (semejante al vino problema pero excento de cido ctrico) al que se le han aadido dosis de 0.25, 0.50, 0.75, y 1.00 g/l de cido ctrico. En otro tubo el vino problema. Se dejaran con bixido de plomo y sulfato mercrico. Se aade 1 ml de permanganato de K 1 %, se agita y se lleva a B M en ebullicin. El permanganato no tarda en reducirse, se espera a que todos los tubos estn completamente blancos, se retiran del B M y se dejan enfriar. Es fcil comprobar los enturviamientos, si se encuentra una concentracin de cido ctrico que pase de 0.75 g/l es conveniente repetir el ensayo sobre el vino diluido a la mitad, con el vino que se us para preparar los patrones. Error 20 %
DETERMINACIN DE E.D.T.A.
1. Decolorar 20 ml de vino con carbn. 2. dejar 2 horas como mnimo en fro. 3. Filtrar y aadir a 10 ml del filtrado 5 gotas de cido actico y 2 gotas de una solucin de nitrato de cobalto al 2 % 4. Calentar 15 minutos a bao Maria. 5. Enfriar a 40C y aadir 0.5 ml de agua oxigenada. 6. Mezclar y calentar a la llama de mechero hasta que se produzca crepitaciones debido a la dscomposicin del agua oxigenada. 7. Se retira de la llama, se produce lentamente una coloracin rosa violcea. Se llega a la mxima intensidad a la temperatura normal, es estable varias horas. Testigos: T = 20 ml de T. 1- 19 ml de T ms 1 ml con EDTA: 0.5 ppm 2- 18 ml de T ms 2 ml con EDTA: 1 ppm 3- 17 ml de T ms 3 ml con EDTA: 1,5 ppm 4- 16 ml de T ms 4 ml con EDTA: 2 ppm 5- 15 ml de T ms 5 ml con EDTA: 2,5 ppm ppm de una solucin que tiene 33 % de EDTA