CTEDRA DE MEJORAMIENTO VEGETAL Y PRODUCCIN DE SEMILLAS

GUA TERICA

TEMA:

LAS MUTACIONES EN EL MEJORAMIENTO VEGETAL

2009

MUTACIONES. CONCEPTO. TIPOS Trmino introducido por De Vries en 1901, que lo defini como cambios bruscos que ocurren en los caracteres de una especie. Lleg a esta definicin estudiando la planta Oenothera lamarckiana, al observar que de vez en cuando aparecan plantas con caractersticas distintas a otras. Fueron Luria y Delbruck los que empezaron los primeros estudios sobre sus causas y su importancia de manera rigurosa. La clula dispone de mecanismos que aseguran que el ADN no cambie. Los primeros son mecanismos de correccin de la replicacin, as se mantiene la fidelidad con que se transmite de generacin a generacin. Otros mecanismos reparan los cambios espontneos o lesiones que sufre el ADN. Pero cuando dichos mecanismos fallan aparece la mutacin. En sentido amplio, mutacin es todo cambio en el material gentico de las clulas detectable. Estos cambios pueden ser en la estructura cromosmica o en su nmero. En sentido estricto, es un cambio en la secuencia de nucletidos (de bases) del material gentico debidos a errores en la duplicacin y en los sistemas de reparacin del ADN. Las mutaciones generan nuevas variantes o formas de un mismo gen, es decir, nuevos alelos, por lo que se dice que es fuente de diversidad o variabilidad gnica, sobre ellos acta la seleccin natural. Los nuevos alelos que aparecen se denominan mutantes (y el individuo portador tambin) y el alelo ms frecuente alelo silvestre o normal. Estos alelos proporcionan ventajas o no a los individuos que las portan, y son seleccionados o eliminados por la seleccin natural. Cuando se expresa el gen mutado, se traduce como una protena. Esta protena puede ser resultar perjudicial, beneficiosa o neutra. La clasificacin de las mutaciones se hace con distintos criterios: 1. Segn la clula afectada a. Mutacin somtica, si afectan a una clula no germinal. Slo se transmite a las clulas que derivan de una clula somtica, pero no a la descendencia (no son heredables). b. Mutacin germinal, si se produce en las clulas sexuales o las clulas madre de los gametos, se transmite a la descendencia (heredables). Todas las clulas del nuevo individuo portarn la mutacin y, por tanto, contribuyen al aumento de la variabilidad de la poblacin. Sobre estos individuos (sobre estas mutaciones) actuar la SN, responsable de la evolucin.

2. Por el tipo de alteracin provocada (amplitud de la afeccin) a. Mutacin gnica o puntual, si afecta la secuencia de bases de un gen. Debido a errores en la duplicacin, mutgenos o son espontneas. Origina nuevas formas variantes de un gen llamadas alelos. Son las mutaciones en sentido estricto y es el mnimo cambio que puede haber en el ADN. Afecta a una base y su pareja en la otra cadena. b. Cromosmicas, si afecta a la estructura del cromosoma (delecin, inversin, traslocacin) c. Genmicas o numricas, si cambia el nmero cromosomas (monosomas, trisomas, triplodias, poliploidias). 3. Por la viabilidad del mutante (efecto sobre el mutante) a. Mutaciones neutras, si no perjudican ni benefician al individuo b. Mutaciones perjudiciales o Mutaciones beneficiosas, si les confiere o no alguna caracterstica ventajosa que les permite ser ms eficaz. 4. Por su origen: a. Mutaciones espontneas, si aparecen por s solas b. Mutaciones inducidas o provocadas por agentes mutgenos (fsico o qumico) Las mutaciones son fuente de variabilidad gentica en los organismos. La variabilidad causada por las mutaciones inducidas no es esencialmente diferente de la causada por las mutaciones espontneas durante la evolucin. El uso directo de las mutaciones es una herramienta muy valiosa para el mejoramiento de plantas, particularmente cuando se desea mejorar uno o dos caracteres fcilmente identificables en una variedad bien adaptada. Los principales mtodos de utilizacin de las mutaciones en el mejoramiento de plantas son las siguientes. I. Uso de mutaciones puntuales. 1. Plantas autgamas. a) Uso directo de de las mutaciones: uso de los mutantes como variedades. b) Mejoramiento por cruzamientos con mutantes. Cruce de un mutante con el parental. Cruce de diferentes mutantes del mismo parental. Cruce de diferentes mutantes de diferentes parentales. Cruce de un mutante con una variedad o lnea diferente.

2. Plantas algamas: induccin de mutaciones para incrementar la variabilidad. a. Mejoramiento de la heterosis: induccin de mutaciones en lneas mejoradas. b. Induccin de esterilidad masculina. II. Uso de mutaciones cromosmicas.

1. Uso de translocaciones: para transferir caracteres de otras especies y gneros. 2. Uso de translocaciones (con puntos de rompimiento conocidos) para la produccin duplicaciones dirigidas. 3. Diploidizacin de poliploides. III. Uso de agentes mutagnicos para problemas especficos de mejoramiento. 1. Uso de radiacin para producir haploides. 2. Uso de mutgenos para incrementar o reducir la frecuencia de quiasmas. 3. Uso de radiacin para la produccin de sexualidad transitoria en apomcticos. 4. Uso de radiacin para reducir incompatibilidad en cruces alejados. 5. Uso de mutaciones inducidas para estudios especficos de los procesos genticos, fisiolgicos, morfolgicos y bioqumicos en las plantas. En el mejoramiento mediante induccin de mutaciones se utilizan bsicamente dos tipos de agentes mutagnicos. 1. Mutgenos qumicos. El nmero de mutgenos qumicos es muy grande y continuamente se est incrementando, sin embargo para propsitos de mejoramiento en plantas cultivadas solo unos pocos son realmente tiles. La mayora de ellos pertenecen al grupo de los agentes alquilantes y dentro de ellos se pueden sealar los siguientes: metanosulfonato de etilo (EMS), sulfato de dietilo (dES) y a los compuestos nitrosos como la N-metil-Nnitrosourea (MNH). Una sustancia qumica de interesantes caractersticas, cuya utilizacin como inductor de mutaciones es la azida sdica. Los principales grupos de mutgenos qumicos son los que se relacionan: a). Anlogos de bases. b). Antibiticos. c). Agentes alquilantes. d). Otros compuestos. 2. Radiacin mutagnica. En los ltimos aos existe la tendencia a incrementar el uso de las radiaciones sobre los mutgenos qumicos. Los principales tipos de radiacin son los siguientes: a) Rayos X. b) Radiacin Gamma: Cesio137 y Cobalto60 las principales fuentes de rayos Gamma utilizados en trabajos de radiobiologa. El Cesio137 es usado en muchas instalaciones teniendo en cuenta que tiene una vida media ms larga que el Cobalto60.

c) Radiacin Ultravioleta: Tiene limitada habilidad de penetracin en los tejidos por lo que su uso en experimentos biolgicos est restringido al tratamiento de esporas o granos de polen. d) Radiacin Beta: Las partculas Beta (electrones) como de P32 y S35 producen un efecto similar a aquellos rayos X o Gamma, pero con ms baja habilidad de penetracin. e) Neutrones: Tienen un amplio rango de energa y son obtenidos de la fisin nuclear en un reactor nuclear con U235. Los neutrones han mostrado ser muy efectivos en la induccin de mutaciones en plantas. f) Partculas de aceleradores: Protones, deuterones, partculas alfa. Se ha utilizado bsicamente para estudios fundamentales en la determinacin de los efectos radiobiolgicos. Objetivos de la induccin de mutaciones. Un programa de mejoramiento por induccin de mutaciones exitoso debe tener claramente definidos los objetivos con relacin a los tipos de mutantes buscados. Los principales objetivos que se deben ser los siguientes: 1. Mejorar una o pocas caractersticas de una variedad o lnea. 2. Inducir un marcador morfolgico (color, aristas, etc) para establecer la identidad de una lnea promisoria para su registro como variedad. 3. Inducir esterilidad masculina o restaurar la fertilidad en lneas para la produccin de hbridos. 4. Obtener dentro de genotipos bien adaptados mutantes para caractersticas de herencia simple tiles para el mejoramiento o para inducir mutaciones posteriormente. Criterios de seleccin de los parentales. Para seleccionar la variedad parental que ser usada el mejorador debe tener en cuenta lo siguiente: 1. Reducir la probabilidad de introducir variabilidad debido a mezclas o cruzamientos. 2. La variedad parental usualmente debe ser: Un cultivar recin liberado. Una lnea avanzada promisoria a punto de ser liberada. Una lnea avanzada promisoria o una variedad introducida que no puede ser liberada por una limitacin especfica. 3. Procedencia de la semilla. Preferentemente se debe usar semilla original o bsica para evitar la contaminacin. Si no se dispone de semilla de calidad se debe incrementar el rea de control no tratado para comparar y eliminar las mezclas.

Dosis y mutgenos a emplear. Lo recomendado es utilizar dos tipos diferentes de mutgenos y tres dosis de cada uno de ellos ms el control no tratado. Normalmente las dosis seleccionadas en cereales causan entre el 30 y el 50 % de reduccin del crecimiento en las pruebas de laboratorio. Cuando se usan radiaciones densamente ionizantes las dosis deben estar entre el 15 y 30 % y con mutgenos qumicos entre el 10 y 30 %. Poblacin M1 Existen estimados para establecer el nmero de semillas a tratar. Asumiendo un 90 % de probabilidad de xito en la obtencin de un mutante, ocurriendo a una frecuencia de 1x10-3 por unidades tratadas y que cada planta debe producir tres unidades, la cantidad de semillas a ser tratadas en la M1, considerando un 80 % de sobrevivencia, debe ser 600 semillas. No obstante, teniendo en cuenta los errores que pueden producirse en la estimacin de las frecuencias, la severidad del tratamiento, etc. es mejor tratar aproximadamente 10 veces ms o sea unas 6000 semillas. Generalmente se considera que los hijos primarios son los que presentan el mayor potencial de variabilidad gentica inducida. En la generacin M1 se debe cosechar una pancula del hijo primario, aunque esto depender de la densidad y el tamao de la poblacin. Poblacin M2 El manejo de la poblacin M2 depender de muchos factores entre los que se encuentran los siguientes: Cosecha de la M1: masal, por panoja, una sola semilla por panoja, etc. El tamao de la poblacin M2 est relacionado con el carcter buscado. Existen caracteres que son comunes como altura de la planta, ciclo vegetativo, etc., mientras que otros son muy raros como resistencia a insectos y enfermedades. Normalmente se utilizan entre 10 000 y 15 000 para caracteres comunes y ms de 20.000 y hasta 40 000 plantas M2 en caracteres ms difciles de encontrar. Aunque normalmente se considera que la generacin M2 es crtica para la seleccin, tambin la generacin M3 es de gran importancia teniendo en cuenta que aparecern mutantes que no se expresaron en la M2. Durante los ltimos 50 60 aos, se han realizado en todo el mundo millares de experimentos sobre la mutacin de genes vegetales, con el fin de obtener propiedades especialmente ventajosas para la agricultura. Existen dos mtodos principales para

inducir artificialmente dichas mutaciones: el empleo de agentes qumicos y las tcnicas de irradiacin. En realidad estos dos mtodos son ms bien complementarios, puesto que actan de forma totalmente diferente el uno del otro. Ahora bien, en ciertos genes vegetales, especialmente en los de algunas plantas, como las frutales, las mutaciones se producen con mayor facilidad mediante la irradiacin. Entre los logros ms importantes se encuentran:

Aumento de la resistencia al encamado: Se reduce la altura de la planta y se consigue un tallo ms firme. Maduracin ms temprana o ms tarda: La maduracin de cultivos importantes, tales como el trigo, el arroz o la cebada, puede adelantarse en cinco o diez das, con la ventaja de tener ms posibilidades de escapar a los peligros de las sequas, las heladas o las plagas.

Mejora de las caractersticas de las semillas: Mejora del valor nutritivo (contenido en protenas o en grasas). Aumento de la resistencia a las enfermedades: Este aspecto es muy importante, ya que muchas cosechas quedan destruidas por ellas. Mejora de las caractersticas agronmicas: Estas pueden consistir en una mayor capacidad para soportar los rigores del invierno, mayor tolerancia al calor y mejor adaptabilidad a condiciones de suelo adversas.

Mejora del rendimiento: Hasta ahora, se ha podido aumentar el rendimiento de alrededor de un centenar de variedades de cultivo en proporciones entre el 3 y 10%. En alguno de los casos, el aumento puede ser de hasta el 45%.

rganos de aplicacin del agente mutagnico

a- semillas

b- granos de polen