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Tamao forma y arreglos de las clulas bacterianas Cpsula y Capa S Pared celular

Miguel Talledo

Palabras clave
Procariontes Cocos Bacilos Peptidoglucano Murena Acido N-acetilmurmico N-acetilglucosamina Quitina Quitosano Slime layer (capa S)

Estructura de una clula procaritica

Las clulas procariticas no poseen organelas encerradas en membranas. Todas poseen citoplasma, ribosomas, membrana plasmtica y nucleoide. Casi todas poseen pared celular.

Caractersticas distintivas de una clula procaritica


Su DNA no est encerrado en una membrana y en general est estructurado como un cromosoma circular singular Su DNA no est asociado con histonas Carecen de organelas rodeadas de membrana Sus paredes celulares casi siempre contienen peptidoglucano Se dividen usualmente por fisin binaria

TAMAO, FORMA Y ARREGLOS

Caractersticas
Dimetro = 0.2 2.0 m Longitud = 2 8 m Bacterias ms pequeas: Mycoplasma (100-200 nm) Promedio: Escherichia coli (1.1 1.5 m x 2-6 m) Ms grandes: Epulopiscium fishelsoni (600 m x 80 m) Tres formas bsicas:
Cocos (esfricos) Bacilos (abastonados, cilndricos) Espiralados

Cocos
Plano de divisin

Diplococos

Estreptococos

Divisin celular en un solo plano, formando pares o cadenas.

Azotobacter macrocytogenes

Cocos
Ttradas

Divisin de clulas en dos, tres y en mltiples planos y que permanecen unidas. Sarcinas

Sarcina spp.

Staphylococcus spp.

Estafilococos

Bacilos

Bacilo simple

Diplobacillus variablis

Los bacilos solo se dividen por el plano ms corto. Pueden aparecen ovales a pesar de ser bacilos. Estreptobacilo
Streptococcus spp.

Cocobacilo
E.coli

Formas espiraladas

Cuando tienen forma de bastn curvado, toman el nombre de vibriones. Vibrin

Helicoidales y flexibles, y se mueven por filamentos axiales contenidos en una capa flexible externa: espiroquetas Espiroqueta

Helicoidales, pero no flexibles, se mueven por flagelos. Espirilo

Formas inusuales

Bacteria de forma estrellada


Stella sp.

Haloarcula sp.

Bacteria rectangular o cbica

CUBIERTAS EXTERNAS A LA PARED CELULAR

Capas S, capas superficiales o estructuras paracristalinas


Disposicin bidimensional de protenas o glicoprotenas En casi todas las bacterias y en todas las arqueas (donde puede actuar como pared celular) Puede tener apariencia cristalina con simetra hexagonal, tetragonal o trimrica Se pueden asociar a diferentes estructuras
LPS Peptidoglucano Membrana

Barrera de permeabilidad externa? Proteccin contra defensa del entorno?

Capas S
Siendo un arreglo con subunidades arregladas regularmente, existe una red de poros de idntico tamao capaces de filtrar selectivamente macromolculas de acuerdo a su tamao y carga. Podran contribuir a la virulencia si se presenta como componente estructural de patgenos
Aspecto de la capa S de Aquaspirillum (Spirillum ) serpens (una arquea) con simetra hexagonal, vista al microscopio electrnico de transmisin

Capa S

Microsocopia electrnica de transmisin de Methanococcus voltae, una arquea que solo posee una capa S por fuera de la membrana plasmtica, de forma que cumple el rol de pared celular.

Capa S
Aplicaciones propuestas en la actualidad:

Unin a molculas biolgicamente funcionales (enzimas, anticuerpos) como biosensores Semiconductores de ancho en nanmetros Plantillas para la formacin de nanopartculas Estructuras de apoyo para membranas lipdicas funcionales

Capas S

Capas S

Capas S - Funciones
Proteccin. Resistencia en ambientes cidos. Barrera contra sustancias de alto peso molecular (enzimas?). Adherencia. Estabilizacin de la membrana. Brinda zonas de enlace a exoprotenas. En grampositivos, proporciona un compartimento junto con el peptidoglucano y la membrana.

Glucoclix o glucocliz
Cubierta de azcar . Se refiere a cualquier sustancia que rodea a la clula. Polmero gelatinoso y viscoso externo a la pared celular. Polisacrido, polipptido o ambos. Se sintetiza dentro de la clula y se secreta. Si la sustancia secretada est bien organizada y firmemente pegada a la pared celular: cpsula Si no es bien organizada y solo se fija levemente a la pared celular: capa de limo

Microscopa de contraste de fases por tincin negativa de las cpsulas de Acinetobacter.

Cpsula
Contribuye a la virulencia bacteriana Protege a la bacteria de la fagocitosis Bacillus anthracis produce una cpsula de cido Dglutmico: forma patgena del ntrax Streptococcus pneumoniae solo produce neumona si la forma bacteriana est rodeada de una cpsula polisacrida.

Micrografa electrnica de un corte de Rhizobium trifolii en que se viisualiza la cpsula.

Cpsula
Es muy importante en la adherencia de la bacteria a su hospedador. Cpsula Es un componente importante de las biopelculas, tomando el nombre de sustancia polisacrida extracelular (SPE). Protege a la clula en la Tincin negativa biopelcula, la comunica con otras clulas y le Cultivo de Klebsiella penumoniae mostrando cpsulas permite sobrevivir por su adherencia a superficies. La bacteria puede crecer en sustratos diversos gracias al glicoclix: rocas en ros, races vegetales, dientes humanos, implantes mdicos, tuberas de agua, e inclusive sobre otras bacterias.

Constituyentes
Polisacridos:
Heteropolisacridos aninicos Homopolisacridos neutros:
Levanos Dextranos Celulosa

cpsula

Alginatos

Polipeptdicos (solo Bacillus):


Glutamilpolipptidos

Surface layers of bacteria. Microbiol Rev 55(4):684-705.

Microscopa electrnica de un corte de Lepthotrix discophora, mostrando su densa cpsula. Beveridge TJ y Graham LL.

Capa de limo, limo externo o slime layer


Tambin son homo o heteropolmeros Constituyentes comunes de biopelculas A veces son excedentes de la produccin de cpsulas o producto de la falla en el anclaje de las cpsulas a las superficies y son expulsados, flotando libremente hasta que se asocian a otras superficies slidas.

Seccin de una biopelcula de una mezcla de cianobacterias y hetertrofos. En la flecha grande se sealan clulas lisadas y en la pequea, fragmentos de envoltura con excedentes de homo y heteropolmeros. Beveridge TJ y Graham LL. Surface
layers of bacteria. Microbiol Rev 55(4):684-705.

PARED CELULAR

Generalidades de la pared
Estructura semirrgida, compleja y que es responsable de la forma de la clula bacteriana. Rodea a la frgil membrana plasmtica Su funcin principal es prevenir que la clula se rompa cuando la presin del agua dentro de la clula sea mayor que afuera. Sirve de punto de anclaje para el flagelo. Contribuye a que algunas especies bacterianas causen enfermedad. Sitio de accin de algunos antibiticos. Su composicin qumica ayuda a clasificar a los principales grupos bacterianos.

Composicin qumica
Red macromolecular llamada peptidoglucano (= murena). Solo o en combinacin con otros compuestos. El peptidoglucano consiste en una red de unidades repetidas de un disacrido enlazado por polipptidos y que rodea a toda la clula. Porcin disacrida:
N-acetilglucosamina (NAG) cido N-acetilmurmico (NAM)
La zona en amarillo resalta la diferencia entre ambas molculas. El enlace que las une es de tipo -1,4.

Pared celular de bacterias grampositivas


Muchas capas de peptidoglucano formando una estructura gruesa y rgida. Las gramnegativas solo tienen una capa delgada de peptidoglucano. En grampositivas hay cidos teicoicos que consisten en
Un alcohol (glicerol o ribitol) Fosfato

Dos clases de cidos teicoicos:


cido lipoteicoico (abarca capa de peptidoglucano y est ligado a la membrana plasmtica) cido teicoico de pared (ligado a la capa de peptidoglucano)

cidos teicoicos tienen carga negativa y se unen y regulan el movimiento de cationes dentro y fuera de la clula Participan en el crecimiento, evitan el rompimiento de pared y la lisis celular. Los cidos teicoicos proveen la especificidad antignica de la pared.

porcin azucarada del peptidoglucano (aa)

fila de 10 a 65 azcares

porcin peptdica del peptidoglucano (siempre 4 aa unidos al NAM)

cido teicoico de pared cido lipoteicoico

Pared celular de bacterias gramnegativas


Una o muy pocas capas de peptidoglucano Una capa externa El peptidoglucano est enlazado a lipoprotenas en la membrana externa y est en el periplasma Periplasma: fluido del tipo gel entre la membrana externa y la membrana plasmtica El periplasma contiene gran cantidad de enzimas degradadoras y protenas de transporte No hay cidos teicoicos Son paredes ms susceptibles a rompimiento mecnico

Bacillus subtilis (gram+)

Escherichia coli (gram-)

Mecanismo de la coloracin Gram


Hans Christian Gram (1885) desarrolla un mtodo de tincin, basndose en los estudios de Ehrlich. Usa lugol y observa que algunas bacterias retienen colorante utilizado. Sirvi para la gran divisin de bacterias en Gram positivas y en Gram negativas Usa en secuencia:
1. 2. 3. 4. Cristal violeta (colorante principal) Lugol (mordiente) Alcohol-acetona (desecador) Safranina o fucsina bsica (colorante de contraste)

Paredes celulares atpicas


Mycoplasma no posee pared celular Bacterias ms pequeas En sus membranas tienen esteroles

Paredes celulares atpicas - cidorresistentes


Se refiere a la resistencia a decoloracin por cidos que presenta la pared celular de algunas bacterias Mycobacterium tuberculosis, Nocardia spp. No se tien bien al gram (dan gram+) Se usan tintes concentrados y combinados con calor Ya teidos resisten la decoloracin con cidos o con etanol Esto se debe a la presencia de cido miclico en la pared celular Se usa la tcnica de Ziehl-Neelsen

Paredes celulares atpicas - acidorresistentes

Estructura de la pared celular de Mycobacterium tuberculosis

Mtodo de tincin de Ziehl-Neelsen


1. Cubrir con colorante Fucsina. 2. Calentar por 5 minutos 3. Cubrir con alcohol-cido hasta que corra incoloro. 4. Lavar con agua corriente. 5. Recolorear con azul de metileno, durante 1 minuto. 6. Lavar con agua corriente. 7. Secar a la llama del mechero

Resultado

Dao a la pared celular de grampositivas


Las sustancias que atacan la pared celular a menudo no daan a la clula eucaritica por su diferente composicin. Por tal razn la sntesis de pared celular es blanco de antimicrobianos. Lisozima: hidroliza los enlaces entre los azcares del esqueleto de pepidoglucano. Si no hay lisis, la clula sin pared toma el nombre de protoplasto, esfrico y capaz de seguir metabolizando. Algunas bacterias, como Proteus, pierden su pared y se transforman en clulas irregulares llamadas formas L, espontneamente o en respuesta a la penicilina (que inhibe la sntesis de pared celular) o lisozima (que remueve la pared celular)..

Dao a la pared celular de gramnegativas


La lisozima no causa un dao tan extenso a las gramnegativas. El contenido celular, la membrana plasmtica y lo que queda de la membrana externa se llaman esferoplasto. Si se desea causar un efecto degradador en bacterias gramnegativas, previamente deben ser tratadas con cido etilendiaminotetraactico (EDTA), que debilita los enlaces inicos de la membrana externa y la daa permitiendo el acceso al peptidoglucano. Debido a que los antibiticos como la penicilina inhiben la formacin de los puentes cruzados peptdicos del peptidoglucano, la mayora de bacterias gramnegativas no son tan susceptibles a la Penicilina como las grampositivas, porque la membrana externa de las gramnegativas forma una barrera que inhibe la entrada de esta y otras sustancias (y tiene pocos puentes cruzados peptdicos) Sin embargo, son muy susceptibles a antibiticos beta-lactmicos que penetran esta regin mucho mejor.

Sntesis de peptidoglucano
1. 2.

3.

4.

5.

Sntesis de precursores solubles en el citoplasma. Transferencia a un transportador lipdico de la membrana citoplsmica (un poli-isoprenol fosfatado llamado undecaprenil-fosfato), donde se forman las unidades disacridas con el pentapptido. Polimerizacin de las unidades disacardicas en cadenas lineales fuera de la membrana, todava unidas al undecaprenil-fosfato de la membrana. Unin del polmero lineal as formado al peptidoglucano preexistente de la pared celular, por entrecruzamiento de parte de sus pptidos respectivos. Regeneracin del transportador lipdico a un nuevo ciclo de sntesis.

Incorporacin a la estructura del glucopptido y formacin de enlace peptdico Enlace transversal por transpeptidacin (rompimiento de la unin entre los dos restos de DALA y el COOH liberado se une al grupo amino de la lisina del otro oligopptido. D-ALA se libera Queda libre el undecaprenil-difosfato Hidrlisis del undecaprenildifosfato El undecaprenilmonofosfato vuelve al ciclo

Formacin de cido murmicopentapptido: Formacin de N-acetilglucosamina-1fosfato Se forma ter lctico y se unen 5 aminocidos La molcula permanece unida al UDP (portador)

Conversin de molcula hidroflica en lipoflica: Cambio del UDP por un polisoprenoide de 55 C (undecaprenil-fosfato) Unn de cido murmico-pentaptido con N-acetilglucosamina Adicin de 5 restos de glicina Transporte a travs de la membrana

Elongacin final - Transpeptidacin

(3)

C=O (4)

NUEVA

PREEXISTENTE

Pared celular en arqueas


No hay peptidoglucano Hay polisacridos diversos Pueden no poseer pared Poseen pseudomurena o pseudopeptidoglucano La pseudomurena contiene cido Nacetiltalosaminurnico en vez de NAM Carece de D-aminocidos No se pueden colorear con Gram pero se ven gramnegativas (por no tener peptidoglucano)

Pseudomurena

Pared celular en hongos


Estructuralmente es ms simple que la clula eucaritica Muchas algas contienen celulosa. El principal componente es la quitina [polmeros de N-acetilglucosamina] Componente estructurales:
Microfibrillas de quitina Quitosano en zigomicetos polmero de glucosamina con enlaces (1-4) Glucanos con enlaces

Componentes tipo Gel:


Manoprotenas (formando una matriz a travs de la pared celular)

Quitosano

Glucanos y mananos en levaduras

Pared celular en hongos


Melaninas pigmentos oscuros (le dan resistencia a lisis enzimtica,
fuerza mecnica y proteccin ante la luz UV, radiacin solar y desecacin).

Pared celular en hongos

Tabla comparativa

Tabla comparativa