FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS QUMICO FARMACUTICO BILOGO

4 A

Prctica No. 1

Preparacin de Disoluciones Amortiguadoras y Determinacin de la Capacidad Amortiguadora de Fluidos Biolgicos

M en C Nlida Araceli Medina Pineda

Integrantes: Acevedo Zambrano Carlos de Jess Bautista Roblada Carlos Eduardo Castillo Lpez Patricio Alejandro Covarrubias de la Rosa Paola Alexandra Reyes Mndez Nancy Aide

Coquimatln, Colima, 01 de marzo de 2010

INTRODUCCIN
Antecedentes

Una reaccin qumica o cambio qumico es todo proceso qumico en el cual dos o ms sustancias (llamadas reactivos), por efecto de un factor energtico, se transforman en otras sustancias llamadas productos. Esas sustancias pueden ser elementos o compuestos. Un ejemplo de reaccin qumica es la formacin de xido de hierro producida al reaccionar el oxgeno del aire con el hierro. Para que una reaccin se lleve acabo se debe dar un intercambio de electrones, en palabras ms sencillas: que una sea cida y otra bsica es decir, segn la definicin de Lewis la base ser el compuesto que puede donar un par electrnico, y el cido el que puede recibir dicho par electrnico. Dichas reaccin deben estar en equilibrio cumpliendo con la ley de la conservacin de masas, las reacciones acido-base son medidas con el pH el cual indica la concentracin de iones hidrnio [H3O+] presentes en determinadas sustancias. La sigla significa "potencial de hidrgeno" Este trmino fue acuado por el qumico dans Srensen, quien lo defini como el logaritmo negativo de base 10 de la actividad de los iones hidrgeno. Esto es:

Entendiendo esto se asigna una escala de pH que va desde el 1 al 14, su cero se encuentra en el 7, este valor es tomado para el agua pura, que no es ni acida ni bsica, es neutra. Valores menores a 7 se consideran cidos, y valores mayores a 7 son alcalinos o bsicos. El pH corporal oscila entre 7.35-7.45. La concentracin de H+ compatible con la vida es relativamente estrecha: de 16 a 160 nEq/l (pH de 7.8 a 6.8). Ahora imagina que cada vez que ingieres algn alimento tu pH sube o baja es decir si tomas una coca tu pH corporal desciende por esos niveles o cada que respiras el intercambio de gases de CO2 y O2 variaran esos niveles (7.35-7.45) sin duda moriramos, afortunadamente los mecanismos de defensa inmediatos, para evitar cambios en el pH en respuesta a modificaciones en la acidez de los lquidos corporales, son realizados por los sistemas amortiguadores (buffers) del cuerpo. (Baynes, J. W., Dominiczak, M. H., 2005) Las Soluciones Amortiguadoras (buffers o tampones) son aquellas soluciones cuya concentracin de hidrogeniones vara muy poco al aadirles cidos o bases fuertes. El objeto de su empleo, tanto en tcnicas de laboratorio como en la finalidad funcional del plasma, es precisamente impedir o amortiguar las variaciones de pH y, por eso, suele decirse que sirven para mantener constante el pH. Los ms sencillos estn formados por mezclas binarias de un cido dbil y una sal del mismo cido con base fuerte. La capacidad de amortiguacin puede definirse como "La cantidad de cido o base fuerte que deben aadirse a un litro de solucin amortiguadora para producir un cambio de pH de una unidad". Tambin puede definirse como". El cambio de pH que se produce por la adicin de una cantidad dada de cido o base fuerte". (Heitz, U.; Horne, M. M., 2005)

Los amortiguadores contienen en proporciones anlogas, las formas disociada y no disociada de un cido dbil (A) o de una base dbil (B): AH A- + H+ BH B + H+ Esto se consigue mezclando las proporciones adecuadas de cido dbil y base fuerte o base dbil y cido fuerte. As se origina una mezcla de electrolito dbil y una sal fuerte. En cualquiera de los casos, cualquier factor externo que tienda a aumenta la concentracin de hidrogeniones desplazar el equilibrio correspondiente hacia la izquierda, hasta que la nueva [H+] sea parecida a la inicial. Por el contrario, el consumo de los hidrogeniones del medio desplazar el equilibrio hacia la derecha, restaurando una [H+] parecida a la inicial. Para todos los amortiguadores o tampones existen unas reglas las cuales nos indican que: 1. El pH de una disolucin amortiguadora no de pende de las concentraciones absolutas de acido (o base) y sal, sino de las proporcin entre las formas disociadas y no disociada (sal/cido o base/sal). En consecuencia, se puede aadir agua a un amortiguador sin que vare su pH. 2. Aunque el pH no vara con la concentracin, los amortiguadores ms concentrados tienen mayor capacidad de amortiguacin, es decir, resisten mejor los intentos de cambiar el pH. 3. La amortiguacin es mxima cuando el pH del medio coincide con el pK del amortiguador. Cuando la diferencia entre el pH y el pK es superior a 2, la capacidad amortiguadora es prcticamente nula 4. Un cido dbil funcionar como un amortiguador al aadirle una base fuerte, siempre que al reaccionar entre s quede algn exceso de cido: (Goi, Felix M.; Macarulla, Jos M.; Goi, Flix M., 2000) cido + base sal + agua (reaccin de neutralizacin) 5. Una base funcionar como un amortiguador al aadirle un cido fuerte, siempre que al reaccionar entre s quede algn exceso de base: Base + cido sal + agua Inters fisiolgico

El funcionamiento armnico de los procesos biolgicos en el organismo requiere la accin concentrad de numerosas encimas, cuya accin cataltica depende crticamente del pH. En los medios extracelulares el pH se mantiene constante en torno a 7.4. Variaciones de unas dcimas por encima o por debajo de este valor pueden ser incompatibles con la vida. (Goi, Felix M.; Macarulla, Jos M.; Goi, Flix M., 2000)

Utilidad

Como ya sabemos el pH de los distintos tejidos y clulas se hallan rigurosamente controlados, de los amortiguadores fisiolgicos. Algunos usos en los laboratorios clnicos de estas disoluciones tampn pueden ser las siguientes: a) preparacin de disoluciones de pH conocido y estable para la calibracin de pHmetros, b) preparacin de disoluciones de pH controlado para ensayos de actividad enzimtica, o para el mantenimiento de de cultivos celulares. c) programacin de variaciones paulatinas (gradientes) de pH para los anlisis aminocidos y protenas, u otras tcnicas. de

d) Por ultimo las disoluciones amortiguadoras de utilizan a veces con fines farmacolgicos, en forma de sueros inyectables, cuando por alguna razn hay que suplementar la capacidad amortiguadora del enfermo (por ejemplo, se administra lactosa en tratamiento de acidosis). Tampones fisiolgicos

Los tampones estn presentes en todos los lquidos corporales y actan inmediatamente (en cuestin de 1 segundo) despus de que tenga lugar una anomala en el pH. Se combinan con el exceso de cidos o bases para formar sustancias que no afecten al pH. Sin embargo, el efecto de los tampones es limitado. Las disoluciones amortiguadoras del cuerpo humano se basan en los mismos principios expuestos a) fosfatos. El acido fosforito tiene 3 tomos de hidrogeno disociables. Sin embargo, su disociacin es grupal: cada uno de ellos tiene un pK especfico.

Solo la disolucin del 2 protn (pK2 = 6.8) tiene inters fisiolgico. En los tejidos el fosfato se halla o bien como sal inorgnica o, lo que mas importante, en forma de fosfatos orgnicos, combinado con azucares, lpidos o cidos nucleicos. En casi todos estos casos el fosfato tiene algn protn con pK prximo a 7, es decir, con propiedades amortiguadoras en condiciones fisiolgicas. (Goi, Felix M.; Macarulla, Jos M.; Goi, Flix M., 2000) b) bicarbonato. el equilibro correspondiente a este amortiguador es:

Pero, adems, el acido carbnico se hallan en equilibrio con su anhdrido voltil

La cantidad de CO2 y por lo tanto, la concentracin de H2CO3 en sangre se pueden modificar rpida y eficazmente variando la ventilacin pulmonar. En general, como se deduce de su pK, la mayor parte de este amortiguador se halla en forma salina (HCO-3). Sin embargo, en caso de necesidad, la concentracin de acido puede aumentar fcilmente al disminuir la eliminacin pulmonar de CO2. c) Protenas. Como vemos, las protenas contienen grupos funcionales que son cidos y bases dbiles con una amplia gama de pK, de manera que funcionan como buenos amortiguadores casi a cualquier pH. Las protenas son amortiguadores intercelulares ms importantes. d) Hemoglobina. Por su abundancia en la sangre y su papel protagonista en la respiracin, la hemoglobina debe destacarse como amortiguador entre el rastro de las protenas. Su peculiaridad ms notable es que, segn est o no est oxigenada, su pK varia, y esto le confiere una capacidad amortiguadora adicional. En este sentido, la hemoglobina es un sper amortiguador. (Goi, Felix M.; Macarulla, Jos M.; Goi, Flix M., 2000) Son los sistemas encargados de mantener el pH de los medios biolgicos dentro de los valores compatibles con la vida. Permitiendo con ello la realizacin de funciones bioqumicas y fisiolgicas de las clulas, tejidos, rganos, aparatos y sistemas. Segn su naturaleza qumica, los amortiguadores se clasifican en orgnicos e inorgnicos y, as mismo, atendiendo a su ubicacin, se distribuyen en plasmticos y tisulares. (Heitz, U.; Horne, M. M., 2005)

Ejemplos
Amortiguador en leche

La leche contiene una gran cantidad de sustancias que pueden actuar tanto como cidos dbiles o como bases dbiles, debido a las propiedades caractersticas de las protenas que contiene la leche. Cuando la leche se acidifica, se aade un gran nmero de iones hidrgeno (H +), casi todos estos iones estn unidos a grupos amino de las cadenas de los aminocidos, formando los iones NH2+ y el valor del pH apenas se ve afectado; pero cuando se aade una base a la leche se liberan lo iones H+ de los grupos COOH de los aminocidos, formando grupos COO-, debido a esto el valor del pH permanecer ms o menos constante. Cuanto mayor es la cantidad de base aadida, mayor es el nmero de iones hidrgeno liberados. La propiedad de actuar como solucin tampn de la leche se pierde casi por completo cuando sta se acidifica debido a un largo almacenamiento a altas temperaturas. En este caso slo con una pequea adicin de cido se podr cambiar el valor de pH. (Gsta B., A.; Lpez G., A.; 2003) Amortiguadores del semen

Al momento en el que el semen atraviesa el conducto deferente, se hace una mezcla con las secreciones liquidas de las vesculas seminales y la prstata. El liquido prosttico (pH: 6.5) es rico en cido ctrico y ascrbico, fosfatasa acida, Zinc e iones de magnesio, mientras que el de la vescula seminal (mas del 60% de su composicin) tiene mucha fructosa (la cual es su principal fuente de energa) y prostaglandinas. Tambin contiene agua, enzimas y amortiguadores de fosfato y bicarbonato. (Crooks, R.; Baur, K., 2000)
4,5

Amortiguadores de la orina

El pH mnimo de la orina es de alrededor de 4,5, lo que corresponde a una [H +] de 10mEq/L. La excrecin de grandes cantidades de H + por la orina solo puede hacerse mediante la combinacin de estos iones H con los amortiguadores del liquido tubular, los mas importantes son el fosfato y el amoniaco. El amortiguador de fosfato est formado por HPO42+ y H2PO4-. El H+ que permanece en el tbulo renal sobrante tras la reaccin con el HCO3- puede reaccionar con el HPO42+ para formar H2PO4-, que puede excretarse en forma de sal sdica (NaH 2PO4). Por cada H+ excretado co el amortiguador fosfato se genera en el tbulo un nuevo HCO 3- que se reabsorbe. En condiciones normales, alrededor del 75% del fosfato filtrado se reabsorbe y solo existen 30-40 mEq/da disponibles para la amortiguacin del H+. El sistema amortiguador del amoniaco esta formado por NH3 e ion amonio NH4+. El ion de amonio se de sintetiza a partir de la glutamina, transportada de forma activa al interior de las clulas de los tbulos proximales, las ramas gruesas del asa de Henle y los tbulos dstales. Una vez dentro de la clula, cada molcula de glutamina se metaboliza para formar dos NH4+ y dos HCO3-. El NH4+ se secreta hacia la luz tubular mediante intercambio con el sodio y el HCO3- pasa por la membrana basolateral junto con el ion de sodio reabsorbido. Por cada molcula de glutamina metabolizada, se secretan a la orina dos molculas de NH 4+ y se reabsorben hacia la sangre dos de HCO3-. Una de las caractersticas ms importantes del sistema renal amortiguador del amoniaco es que la acidosis produce una importante estimulacin del metabolismo renal de la glutamina lo que aumenta la formacin de NH4+ y de nuevo HCO3-, que se utilizan para el amortiguamiento de los iones hidrogeno. (Guyton, Arthur C., 2007) Amortiguadores de la saliva

La saliva es una secrecin mucoserosa clara y ligeramente acida, compuesta en su mayor por agua (99%) y de constituyentes orgnicos e inorgnicos (1%) que actan colectivamente para modular el medio ambiente oral. La saliva completa es una mezcla de fluidos de las glndulas salivales mayores y menores y menores y de fluido gingivical cervicular, que contiene bacterias orales, virus, restos de alimentos y restos de expectoraciones bronquiales. Desempea un papel primordial en el mantenimiento de las condiciones normales de los tejidos orales y es un factor de gran importancia en las caries, ya que ejerce una accin de autolimpieza y tiene alta capacidad de amortiguacin que ayuda a neutralizar los cidos producidos en la placa bacteriana. Sus principales componentes son el calcio y fosfatos. (Acosta, A. G.; Agudelo, C. M.; Barrientos, S. S.; Chvez, M. C) Amortiguadores del plasma y suero sanguneo Para dar una idea de la importancia de los amortiguadores de la sangre, sabemos que la concentracin de hidrogeniones del agua pura experimenta una elevacin cuando se

aade un mnimo de cualquier acido, y crece paralelamente a la cantidad del acido aadido. En la sangre no ocurre as, pues admite cantidades del mismo acido, notablemente mayores, sin que aumente la concentracin de hidrogeniones. En el hombre, uno de los principales sistemas amortiguadores que mantienen el pH de la sangre en el par fosfato-difosfato (H2PO4-/HPO42-) los sistemas amortiguadores en sangre son tan eficientes, que si se agarra un mililitro de HCL 10 M a un litro de sangre, el pH es de sta slo vara de 7.4 a 7.2 en cambio, si se agrega la misma cantidad a un litro de solucin salina fisiolgica (NaCl 0.15 M) el pH varia de 7.0 a 2.0. En el primer caso la concentracin de H+ slo aumenta 1.58 veces mientras que en el segundo aumenta 100 000 veces. La utilidad de las mezclas amortiguadoras en la regulacin del equilibrio acido-base del plasma sanguneo, estriba en la posibilidad de mantener la concentracin de iones hidrogeno dentro de lmites estrechos, que puede considerarse invariable. El pH se puede mantener muy aproximadamente al nivel que convenga, escogiendo las mezclas adecuadas.

Capacidad de amortiguacin

La capacidad de amortiguacin puede definirse como La cantidad de acido o base fuerte que deben aadirse a un litro de solucin amortiguadora para producir un cambio de pH de una unidad. O bien como El cambio de pH que se produce por la adicin de una cantidad dada de acido o base fuerte.

OBJETIVOS
Objetivo General

 Preparar y experimentalmente determinar algunas propiedades bsicas de las disoluciones amortiguadoras. Objetivos Especficos Preparar disoluciones amortiguadoras de acetatos y fosfatos Demostrar la accin amortiguadora que ejercen las disoluciones de acetatos y fosfatos Comprobar el efecto de dilucin sobre el pH de la disolucin amortiguadora y su capacidad amortiguadora Calcular la capacidad amortiguadora en fluidos biolgicos (suero de sangre, semen, saliva, orina, jugo gstrico, leche) y comprobar los resultados obtenidos con los reportados en literatura

MATERIALES
15 Tubos de ensayo de 13 x 100 1 Gradilla metlica para tubo de ensayo 2 Pinzas para tubo de ensayo 2 Pipetas graduadas 1ml 3 Pipetas graduadas de 5 ml 2 Pipetas graduadas de 10 ml 2 Propipetas 2 Pipetas Pasteur c/ mbolo de succin 4 Matraces Erlen Meyer de 50 ml 1 Bureta graduada de 50 ml 1 Soporte universal 1 Aro metlico 1 Pinzas para bureta 1 Taza de porcelana Indicador universal - Azul de timol - Azul de bromotimol - Dimetilaminoazobenceno - Rojo de metilo - Fenolftalena - Etanol Disolucin de fenolftalena Disolucin de Rojo Congo Hidrxido de sodio 0.1N HCl 0.1N Agua destilada.

EQUIPO 1 Potencimetro manual

REACTIVOS Fosfato potsico monosustitudo disolucin 0.15 M Fosfato sdico disustitudo disolucin 0.15 M cido actico 0.1N Acetato sdico disolucin 0.1 N

MATERIAL BIOLGICO Suero de sangre Leche Orina Saliva Semen Plasma

PROCEDIMIENTO
1.- PREPARACIN DE DISOLUCIONES AMORTIGUADORAS

Marcha de los trabajos. 1. En seis tubos de ensayo previamente numerados se vierten las disoluciones de cido actico y acetato sdico en las siguientes proporciones:
DISOLUCIN Cantidad (ml) de CH3COOH 0.1N Cantidad (ml) de CH3COONa 0.1N Magnitud de pH calculada 1 9 1 3.7 NMERO DE TUBO DE ENSAYO 2 3 4 5 8 2 4.0 5 5 4.6 3 7 5.0 2 8 5.2 6 1 9 5.6

A las mezclas preparadas, se aadieron 2 gotas de indicador universal y por el carcter de la coloracin se determin el pH de cada mezcla. Se determin el pH de las soluciones preparadas por el mtodo potenciomtrico. 2. Se numeraron ocho tubos de ensayo y se vertieron en cada uno de ellos disoluciones 0.15 M de KH2P04 en las siguientes proporciones (Mezclar cuidadosamente).
DISOLUCIN KH2 PO4 0.15M Acetato de sodio 0.1N Magnitud de pH calculada 1 9.5 0.5 5.59 2 9.0 1.0 5.91 NMERO DE TUBO DE ENSAYO 3 4 5 6 8.0 7.0 6.0 5.0 2.0 6.24 3.0 6.47 4.0 6.64 5.0 6.81 7 4.0 6.0 6.98 8 3.0 7.0 7.17

2.- PROPIEDADES DE LAS DISOLUCIONES AMORTIGUADORAS A).- ACCIN AMORTIGUADORA DE LA DISOLUCIN.1. 2. a. b. En un matraz se midieron y se vertieron 4 ml de cido actico 0.1N y 16 ml de disolucin de acetato sdico 0.1N. Se numeraron 4 tubos de ensayo. Y se hicieron los ensayos siguientes: En los tubos de ensayo 1 y 3 se vierten en cada uno de ellos 5 ml de mezcla amortiguadora preparada, y en los tubos de ensayo 2 y 4 5 ml de agua destilada. En los tubos de ensayo 1 y 2 se aaden 1 o 2 gotas de fenolftalena y su contenido se valoran de una bureta con lcali, contando las gotas o ml hasta la aparicin de una coloracin rosada. En los tubos de ensayo 3 y 4 se aaden 1 o 2 gotas de Rojo Congo y el contenido se valoran con HCl, contando las gotas o los ml hasta la aparicin de una coloracin azul B).- EFECTO DE LA DILUCIN SOBRE EL pH DE LA DISOLUCIN AMORTIGUADORA Y LA CAPACIDAD AMORTIGUADORA. 1. Se toman tres tubos de ensayo. 2. En cada uno de ellos se vierten 2 ml de cido actico y 2 ml de acetato de sodio.

c.

3. El contenido del tubo de ensayo 1 se deja sin diluir. El contenido del tubo de ensayo 2 se diluye en dos veces, aadiendo a la mezcla amortiguadora obtenida igual volumen de agua (4 ml). 4. El contenido del tubo de ensayo 3 se diluye en cuatro veces aadiendo (12 ml) de agua. Las disoluciones en cada tubo de ensayo se agitan y se usan para el experimento: I. Se numeran tres tubos de ensayo y en cada uno se vierten respectivamente 2 ml de disolucin amortiguadora: No diluida, Diluida en dos veces; Diluida en cuatro veces. Luego se aaden en cada tubo de ensayo tres gotas de indicador universal y por su coloracin se evala la reaccin (pH) de cada disolucin amortiguadora. II. Se numeran tres tubos de ensayo y en ellos se vierten respectivamente 2 ml de una disolucin amortiguadora no diluida, diluida en dos veces y diluida en cuatro veces. En cada tubo de ensayo se aaden de 2 a 3 gotas de fenolftalena, y se valora de una bureta con lcali, contando las gotas o ml hasta la aparicin de una coloracin rosada. 3.- CAPACIDAD AMORTIGUADORA DE LOS LQUIDOS BIOLGICOS 1. Con la ayuda de un indicador universal determina en una taza de porcelana el pH aproximado de los lquidos biolgicos que va a investigar. 2. Se miden y se vierten en tubos de ensayo 5 ml de los lquidos que va a investigar y se aaden 2 o 3 gotas de fenolftalena y se valora de la bureta con lcali hasta la aparicin de una coloracin rosada, contando las gotas o los ml gastados. 3. Se miden otra vez y se vierten en tubos de ensayo 5 ml. De los lquidos biolgicos y se aaden a cada uno de ellos de 2 a 3 gotas de Rojo Congo. Se valora de la bureta con HCl contando las gotas o ml hasta la transicin de la coloracin roja a azul. 4. Para obtener datos absolutos sobre la capacidad amortiguadora, se lleva una cuenta exacta de la cantidad de cido o lcali consumida en la valoracin hasta el desplazamiento del pH en una unidad (control se realiza por medio de un potencimetro.

OBSERVACIONES

RESULTADOS
1.- Preparacin de disoluciones amortiguadoras Ensayo 1.- Marcha de disoluciones amortiguadoras

DISOLUCIN Cantidad (ml) de CH3COOH 0.1N Cantidad (ml) de CH3COONa 0.1N Magnitud de pH calculada Magnitud de pH experimental

1 9 1 3.7 4

2 8 2 4.0 4.5

NMERO DE TUBO DE ENSAYO 3 4 5 5 5 4.6 5 3 7 5.0 5.5 2 8 5.2 6

6 1 9 5.6 6.5

Ensayo 2.- Marcha 2 de disoluciones amortiguadoras

DISOLUCIN KH2 PO4 0.15M Acetato de sodio 0.1N Magnitud de pH calculada pH experimental 1 9.5 0.5 5.59 5.5 2 9.0 1.0 5.91 6 NMERO DE TUBO DE ENSAYO 3 4 5 6 8.0 7.0 6.0 5.0 2.0 6.24 6 3.0 6.47 6.5 4.0 6.64 6.5 5.0 6.81 7 7 4.0 6.0 6.98 7 8 3.0 7.0 7.17 7

2.- Propiedades de las disoluciones amortiguadoras a) Accin amortiguadora de la disolucin. Ensayo 3 Tubos Gotas 1 mezcla amort c/ NaOH 20 2 agua dest c/NaOH 2 3 mezcla amort c/HCl 108 4 agua dest c/HCl 2

b) Efecto de la dilucin sobre el pH de la disolucin amortiguadora y la capacidad amortiguadora. Ensayo 4 Tubo pH 1 4.5 2 5.5 3 4.5

Tubo Gotas

1 11

2 6

3 5

3.- Capacidad amortiguadora de los lquidos biolgicos.

Ensayo 5.- Tabla de resultados de los lquidos biolgicos

a1: cantidad de cido consumido 4 gotas Se resisti Se resisti 2 gotas 9 gotas 37 gotas a2: cantidad de lcali consumido Se resisti 3 gotas 1 gota 1 gota 1 gota 6 gotas b: cantidad de liquido biolgico 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 0.5 ml 1 ml pH0 investigado en literatura 7.35-7.4 7.36-7.42 6.8-7.3 6.5-7.5 7.5 5-8 pH1: pH del liquido biolgico al final de la valoracin cido lcali No se ----report ----7.5 ----7 7 7 5 10 2.3 7

Fluido Suero sanguneo Plasma Leche Saliva Semen Orina

En base a los datos obtenidos se calcula la capacidad amortiguadora del lquido segn la frmula:

C = (N) (a) (1000) (pH1 pH0) (b)

C = Capacidad amortiguadora N = Normalidad del cido o lcali a = Cantidad de cido o lcali consumida en la valoracin de la prueba b = Cantidad de lquido biolgico utilizado en la valoracin pH0 = ndice de hidrgeno del lquido biolgico a investigar antes de la valoracin pH1 = ndice de hidrgeno del lquido biolgico al final de la valoracin Ensayo 6.- Tabla con las capacidades amortiguadoras de los fluidos biolgicos utilizados en la prctica. Fluido Suero sanguneo Plasma Leche Saliva Semen Orina Capacidad amortiguadora cido lcali No se report ------Se resisti a se cido 187.5 Se resisti a se cida -16.6 10 -20 -36 4 -68.51 -30

Nota: se tom en cuenta el pH menor (del rango de pH de los fluidos) para el pH0 cido y el pH mayor para el pH0 lcali. Ejemplo: Para la orina los clculos son: rango de pH 5-8 pH0 cido: 5 pH0 lcali: 8 C = (0.1 N) (1.85 ml) (1000) = -68.51 (2.3 - 5) (1 ml) C = (0.1 N) (0.3 ml) (1000) = -30 (7 - 8) (1 ml)

DISCUSIONES

Para el mecanismo de la accin amortiguadora tomamos un amortiguador constituido de acido actico y acetato de sodio. El acido est parcialmente disociado estableciendo equilibrio entre las partculas de acido sin disociar los iones hidrgenos y los iones de base conjugada. El acetato de sodio, esta disociado completamente y, por eso el ion acetato desplaza el equilibrio hacia la formacin de acido, disminuyendo la concentracin de hidrogeniones libre. La presencia conjunta de la sal y el acido hace decrecer la acidez libre. Si las cantidades de sal y acido son del mismo orden de magnitud, la concentracin de iones hidrgenos se regulara por la reaccin de equilibrio del acido, es decir:

Es comn que en los textos se considrenla par cido carbnico bicarbonato como un sistema amortiguador en sangre. Sin embargo, si se toma en cuanta que el pKa del acido carbnico es de 6.1, y el pH de la sangre es de aproximadamente 7.4, entonces queda claro que por lo que hemos mencionado (estos sistemas funcionan bien, hasta una unidad de pH por encima, y una unidad por debajo del pKa) que este par no es un sistema amortiguador eficiente. El acido carbnico y el bicarbonato participa en la regulacin de pH de la sangre porque cuando ste cambia, aumentan o disminuyen las concentraciones de ambos elementos del par, debido a la ventilacin pulmonar; pero ello no quiere decir que estos compuestos representan un sistema amortiguador importante. Si aadimos al sistema un acido fuerte, como HCl, se produce un aumento instantneo de la concentracin de iones hidrgenos, los cuales son neutralizados por la base conjugada del acido, liberando as una cantidad equivalente de acido dbil. Si aadimos al sistema una base fuerte como NaOH, los iones hidroxilos consumen rpidamente iones hidrgenos del sistema para formar agua, lo que provoca la trasformacin de una parte del acido actico libre en acetato que es menos fuerte que el NaOH. En la prctica se considera que una mezcla de un acido dbil y su base conjugada forman un amortiguador satisfactorio sobre el margen de pH desde pK -1 hasta pK +1. Una mezcla cuyo pH sea igual a pK -1 en la que la produccin sal / acido es 0.1, es un amortiguador efectivo contra un lcali, pero mucho menos efectivo contra un acido fuerte y la eficacia mxima est en el punto de pH igual a pK - 0.5. Una mezcla cuyo pH es igual a pK mas uno y cuya proporcin sal / acido es 10, es un amortiguador efectivo contra cidos fuertes, pero mucho menos efectivos contra bases y la eficacia mxima esta en el punto de pH igual a pK + 0.5. El inters fisiolgico de los aminocidos como amortiguadores sanguneos depende de la proximidad del pK al pH fisiolgico, destacando por su importancia la histidina por su pK2= 6.0. Las protenas del plasma, cuyo pK es dbilmente acido, a pH ligeramente alcalino se comportan como cidos dbiles y as, el pH de la sangre son aniones, efecto esencial para la interpretacin correcta de su accin amortiguadora correspondiente al contenido de protena.

El sistema bicarbonato/anhdrido carbnico es uno de los amortiguadores sanguneos principales. El acido carbnico se ioniza como un acido diprtico dbil tpico. Sin embargo,

la mayora del acido conjugado disuelto en la sangre y en el citoplasma esta como anhdrido carbnico y no como acido carbnico. El anhdrido carbnico disuelto esta en equilibrio con el anhdrido carbnico gaseoso relacionados de acuerdo a La Ley de Henry. En el plasma sanguneo la etapa de ionizacin de inters biolgico es la segunda cuyo pK2 = 6.1, y para un pH sanguneo de 7.4 la relacin concentracin de bicarbonato / concentracin de anhdrido carbnico es de 20/1. Todo cambio en esta relacin significa, variacin de pH. Su aumento corresponde al trastorno denominado alcalosis y si disminuye se llama acidosis. En condiciones in vivo, el amortiguador bicarbonato / anhdrido carbnico es un sistema abierto en el que la concentracin de anhdrido carbnico disuelto se mantiene constante. Cualquier exceso de anhdrido carbnico producido por la reaccin entre el ion hidrogeno y el ion bicarbonato es eliminado por los pulmones y contribuye, por lo tanto, a mantener el pH alrededor de 7.4. A primera vista podra parece que en un sistema abierto, la reserva de bicarbonato podra agotarse rpidamente. Sin embargo, in vivo, el bicarbonato se recupera constantemente mediante los procesos metablicos oxidativo.

CONCLUSIONES
Los amortiguadores se usan en todo tipo de reacciones qumicas en las que se desean mantener el pH de una solucin a un nivel relativamente constante. Estas soluciones tienen la capacidad tanto de cidos como de bases. Podemos concluir que un cambio brusco de pH en un sistema biolgico puede causar daos irreversibles el cuerpo humano. La eficacia de un sistema amortiguador depende del pH de la disolucin amortiguadora, el pKa del cido dbil debe ser parecido al pH deseado lo cual asegura tener cantidades comparables de ese cido y de su base conjugada.

BIBLIOGRAFA

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CUESTIONARIO

 Cuestionario de procedimiento b).- Efecto de la dilucin sobre el pH de la disolucin amortiguadora y la capacidad amortiguadora. Vara o no el pH a consecuencia de la dilucin de la mezcla amortiguadora? Si no vara Por qu? Varia en lo mnimo, ya que las sustancias amortiguadoras tienen la propiedad de hacer que las concentraciones de hidrogeniones existentes varen solo un poco. Cmo influye la dilucin sobre la capacidad amortiguadora de la disolucin? En la variacin del pH que se produce por la adicin de un cido o base fuerte 3.- Capacidad amortiguadora de los lquidos biolgicos. Qu lquido a investigar posee la mayor capacidad amortiguadora? La saliva, por que su mecanismo de amortiguacin tiene una velocidad muy alta. Pero tambin el suero sanguneo y el plasma ya que contienen pares fosfato-difosfato, anhdridos carbonicos y adems la hemoglobina que es un sper amortiguador. En relacin a que sustancia (cido o lcali) es ms pronunciada la capacidad amortiguadora de los lquidos biolgicos? A los cidos Qu sistemas amortiguadores contiene el suero de la sangre? Sistema amortiguador de bicarbonato.

Cuestionario de Prctica.
1.- Cules son las funciones que desarrolla el agua en el organismo humano? Explique cada una de ellas

solvente universal en ella son transformados la mayora de los nutrientes y sustancias necesarias para el buen funcionamiento celular. Es desintoxicante, los residuos generados durante el metabolismo de las protenas, se disuelven en la sangre y son removidos antes de que se acumulen en concentraciones txicas. El trabajo de los riones consiste en filtrar esos residuos de la sangre y excretarlos, mezclados con el agua formando la orina. Es amortiguadora, bsicamente de las articulaciones, ya que de hecho protege de traumatismos. Lubricante, del aparato digestivo y de todos los tejidos que son protegidos por mucosas, evitando friccin entre ellos. Termo reguladora: Regula la temperatura corporal mediante la transpiracin, que se traduce en el refrigerante del cuerpo. La piel es el principal rgano mediante el cual se elimina el exceso de calor corporal. Adems el agua es fundamental para mantener la piel saludable.

Provoca intercambio gaseoso en los alvolos pulmonares, sacando el aire pobre en el oxgeno resultante de las combustiones energticas, junto con el vapor de agua. Produce saciedad: Esto es especialmente importante para aquellas personas que se encuentran bajo un plan de adelgazamiento. Esta funcin se debe a que el lquido defiende las paredes gstricas adems de combinarse con la fibra y brindar volumen retrasando el vaciado del estmago y contribuyendo a comer menos. Es activadora del metabolismo: Beber lquido en abundancia favorece el aumento del gasto metablico, es decir beber 2 litros de agua por da puede llegar a producir un incremento del gasto calrico de alrededor de 30 a 60 caloras. Es diurtica: Al beber agua en cantidades, los riones funcionan mejor, evitando retencin de lquidos. Es laxante: Al formar parte de la materia fecal y aumentar su volumen, los movimientos intestinales se ven estimulados previniendo enfermedades como el estreimiento, los divertculos y las hemorroides.

2.- La molcula del agua tiene efecto amortiguador? S o No? Por qu? El agua si es un amortiguador debido a su calor especfico que es la cantidad de calor necesaria para elevar la temperatura de una cierta masa de agua. El agua almacena o libera una gran cantidad de calor al calentarse o al enfriarse; lo que permite que el agua acte como amortiguador trmico, evitando bruscas alteraciones de la temperatura y evitando de esta forma que, algunas molculas, muy sensibles a los cambios trmicos, se alteren. 3.- Cules son las proporciones de agua en el cerebro, pulmones, hgado, piel dientes, huesos, corazn, riones y msculo? Cerebro: 90% Pulmones: 79% Hgado: 70% Piel: 71% Dientes: 10% Huesos: 22% Corazn: 79% Riones: 80% Msculos: 77%

4.- Cules de los componentes qumicos tienen capacidad amortiguadora? Ac. cloroactico Ac. nitroso Ac. frmico Ac. hipoclorito Ac. cianhdrico Ac. actico Ac. carbnico Ac. fosfrico dietilamina metilamina amoniaco hidracina hidroxilamina piridina anilina

5.- Investigue la composicin qumica del fluido biolgico que utiliz en su prctica

Semen Fosfatasa cida cido ctrico Fructosa cidos grasos combinados cidos grasos libres cidos orgnicos Amonaco Lpidos neutros Lpidos totales Nitrgeno Tripsina Urobilingeno Protenas Aminocidos Cloruros Glucosa Fsforo inorgnico Fsforo Colesterol cido lctico CO2 Fosfatasa cida Fosfatasa alcalina Hialuronidasa fosforilcolina c. Ascrbico Espermina cido ctrico Fibrinolisina Leche Lactosa triacilglicridos diacilglicridos monoacilglicridos fosfolpidos cidos grasos libres esteroles steres carbohidratos casena-s1, - y

Saliva Protenas -Mucina acido silico o N- acetil neuroamnico fuclico D-galactosa N-acetil glucosamina Manosa Aminocidos -nihidrina Vitaminas -Vitamina B12 Fosfoetanolamina Urea Glucosa Lactato CO2 O2 N2 Calcio Fsforo Sodio Potasio Flor Cloro

Plasma y suero sanguneo Protenas plasmticas (70%) -fibringeno (7%) -inmunoglobulinas (38%) -albminas (54%) Otras protenas (1%): -VLDL -LDL -HDL -protrombina -transferrina... Componentes inorgnicos (10%) -NaCl -Bicarbonato -Fosfato -CaCl2 -MgCl2 -KCl -Na2SO4

Orina urea nitrgeno cloruros cetosteroides fsforo amonio creatinina cido rico