APICOMPLEXA (SPOROZOA) difcil definir os apicomplexos em termos de morfologia.

. As diferenas na forma e tamanho so bastante significativas, e as organelas locomotoras, no que pode-se chamar de estgios adultos, esto sempre ausentes. Labb descreveu o grupo desta forma:

Protozorios unicelulares ou multicelulares que sempre exibem uma cobertura protoplasmtica externa (ectoplasma ou pelcula); no apresentam clios ou flagelos no estgio adulto; tm digesto endosmtica; so parasitas obrigatrios de clulas, tecidos ou cavidades de outros animais; reproduzem-se atravs de diviso e especialmente por esporulao. Esporozotos, amebides ou nonamebides nucleados podem ser o produto direto ou indireto da esporulao.

Quase toda forma concebvel pode ser encontrada entre os apicomplexos. No s a comparao das espcies que revela uma grande diversidade, pois diferentes estgios do ciclo de vida de uma mesma espcie normalmente tm pouca semelhana. Nos Coccidia, as formas intracelulares vegetativas, ou trofozotos, so grandes, e os esporozotos, diminutos. O contraste entre as gregarinas adultas e os esporozotos de que se formam ainda mais extremo: os primeiros so grandes organismos vermiculares, que possuem o "epimerito", uma organela de adeso, enquanto que os ltimos so filamentos muito pequenos. Apicomplexos adultos no tm organelas motoras, mas ainda assim muitas espcies so capazes de movimentar-se sozinhas durante certos perodos de seu ciclo de vida. Os microgametas, por exemplo, frequentemente so flagelados e ativos. Dentre algumas semelhanas entre os indivduos desse grupo, pode-se destacar o complexo apical, do qual o nome deste filo deriva. Ele composto por estruturas excretoras (roptrias e micronemas), uma estrutura cnica (o conide), e cercado por anis polares. As organelas apicais tm funes relacionadas adeso e invaso das clulas-hospedeiras. Outras caractersticas dos apicomplexos so: ausncia de estruturas lomotoras na fase adulta (o gameta mvel possui de 1 a 3 flagelos);presena de corpo basal, ncleo haplide e mitocndrias de cristas tubulares; ausncia de cloroplastos e centrolos; presena de complexo golgiense e de plastdeos incolores, em algumas espcies; e presena de uma membrana de trs camadas com microporos recobrindo a clula. CICLO DE VIDA Muitos aspectos do ciclo de vida variam de acordo com a espcie de Plasmodium em questo: o tempo de durao e caractersticas gerais de cada fase, a morfologia externa e o

tipo de hospedeiros e vetores so alguns deles. O tempo de durao das etapas pode, ainda, variar com a temperatura e a umidade do ambiente. Quatro espcies parasitam o ser humano: P.ovale, P.falciparum, P.malariae e P.vivax, tendo geralmente como hospedeiro invertebrado as fmeas de Anopheles. De modo geral, a infeco comea com uma forma infectante inicial (esporozoto), que invade o organismo atravs da saliva do mosquito e, se no destrudo por macrfagos, dirige-se atravs da corrente sangnea para o fgado, onde penetra nos hepatcitos para reproduzir-se assexuadamente por esquizogonia, formando grandes sacos carregados de ncleos denominados esquizontes teciduais primrios. Dentro de alguns dias, os esquizontes amadurecem e rompem, liberando merozotos nos capilares intra-hepticos. Em P.ovale e P.vivax, formas latentes (hipnozotas) podem permanecer no fgado durante meses ou anos, sendo chamadas de recidivas tardias. Um receptor especfico na superfcie dos eritrcitos interage com a membrana dos parasitas e esses, por sua vez, invadem rapidamente essas clulas, em cujo interior os merozotos sofrem um ciclo de multiplicao assexuada parte para a metabolizao da hemoglobina, chamado esquizogonia eritroctica, onde se transformam, respectivamente, em trofozotos, esquizontes e novamente em merozotos, dessa vez em maior nmero, que rompem os eritrcitos infectados e passam a parasitar outros glbulos vermelhos. Eventualmente, os merozotos se diferenciam em gamontes masculino (microgametcito) e feminino (macrogametcito). Ao serem ingeridos pelo mosquito, esses gametcitos produzem gametas, iniciando-se o ciclo sexuado. Os gametas unem-se para formar um zigoto, que posteriormente se transforma em oocinetos, formas alongadas e mveis que, por sua vez, atravessam a parede do estmago e desenvolvem-se em oocistos, corpsculos esfricos envoltos de uma membrana elstica. Nesta etapa, os oocistos aumentam de tamanho e, por esporogonia, formam esporozotos em seu interior. A ruptura do oocisto libera os esporozotos na hemocele do inseto, migrando para as glndulas salivares. Ao picar outro indivduo humano, o inseto transmite os novos esporozotos infectantes a outro hospedeiro, reiniciando o ciclo. MORFOLOGIA DOS HEMATOZORIOS Todos os esporozotos e merozotos tm complexo apical (composto por roptrias, micronemas e microesferas), ncleo, mitocndria, retculo endoplasmtico, ribossomos, microtbulos que vo de um plo a outro da clula e uma membrana simples que reveste a clula externamente, combinada com uma membrana dupla, interna. Os merozotos possuem uma cobertura externa de glicoprotenas relacionadas com a adeso, reorientao (de modo que o complexo apical coincida com o ponto de aderncia), e penetrao do

parasita no eritrcito. Os esporozotos e os merozotos so mveis, mas eles no possuem estruturas locomotoras, e o mecanismo que produz esse movimento ainda pouco conhecido. Depois de penetrar na clula heptica o esporozoto perde o aparelho apical e a membrana dupla interna. Semelhantemente, depois de invadir o eritrcito, o merozoto perde o complexo apical, a membrana interna e a cobertura externa de glicoprotenas, transformando-se no trofozoto. O trofozoto, que quando jovem tem forma de anel, se alimenta de componentes do citoplasma do eritrcito atravs da citstoma, inclusive de hemoglobina, cuja digesto tem como produto o pigmento hemozona. Conforme o trofozoto amadurece, toma forma arredondada, multiplica as mitocndrias, os ribossomos, os retculos endoplasmticos e produz um complexo de Golgi. Quando o trofozoto, j maduro, se divide por esquizogonia, os merozotos liberados possuem a membrana externa, o complexo apical e os microtbulos, assemelhando-se ao merozoto que inicialmente invadiu o eritrcito. Os gametcitos produzidos por alguns merozotos so liberados no sangue, e j se originam com sexo determinado (microgametcito e macrogametcito). A gametognese induzida pela ingesto do gametcito pelo mosquito. Os macrogametas em geral apresentam massa de cromatina mais concentrada, so ovais e sem mobilidade. Os microgametas so menores, possuem uma massa de cromatina mais difusa, apresentam flagelo e se movimentam ativamente at encontrar um macrogameta. Depois da formao do zigoto, o parasita transforma-se em um oocineto, que possui movimento amebide, duas membranas (uma simples e uma dupla) e no tem roptrias no complexo apical, fixando-se como oocisto em um tecido ou clula. O ooscisto se forma pelo recobrimento do oocineto por uma grossa cpsula, dentro da qual se desenvolvero os esporozotos. A posio, forma, tamanho e quantidade de ncleos, protoplasma e pigmentos presentes nesses estgios da vida do Plasmodium variam de acordo com a espcie, sendo caractersticas utilizadas no diagnstico da malria. Abaixo, esto listadas algumas diferenas entre as espcies que parasitam o ser humano: Plasmodium falciparum As formas jovens de trofozoto tm forma de anel, e no caso do P. falciparum, esses anis apresentam-se menores e mais numerosos do que em outras espcies, e com um ou dois pontos de concentrao de cromatina. Os trofozotos maduros e os esquizontes de P. falciparum raramente so encontrados em esfregaos de sangue porque os eritrcitos que abrigam o protozorio neste estgio aderem ao endotlio dos capilares sanguneos. Quando observados, os trofozotos de P. falciparum parecem anis maiores e com citoplasma mais denso. Os esquizontes observados em geral apresentam de 16 a 24 merozotos. Os gametcitos tm forma de lua crescente.

Plasmodium vivax Os eritrcitos portadores do P. vivax em geral ficam maiores e o estgio de anel muito semelhante ao do P. ovale, com geralmente um ponto de concentrao de cromatina. Conforme o trofozoto fica maduro, no citoplasma do eritrcito comeam a aparecer grnulos de Schffner (oriundos de microtbulos degradados). O trofozoto toma uma forma amebide. Os merozotos do esquizonte preenchem todo o eritrcito. Os gametcitos de P. vivax so redondos e grandes, muito semelhates aos de P. ovale. Plasmodium ovale As fases de anel, trofozoto e gametcito so muito semelhantes ao do P. vivax: eritrcito aumentado com grnulos de Schuffner, trofozoto amebide e gametcitos arredondados. A diferena entre os dois que o P. ovale tende a ser mais compacto, os esquizontes em geral produzem menos merozotos que o P. falciparum e o P. vivax e o formato do eritrcito infectado levemente mais alongado. Plasmodium malariae Os estgios eritrocticos de anel e gametcito do P. malariae so semelhantes aos das demais espcies, porm so mais compactos, no modificam o tamanho do eritrcito, e no produzem os grnulos de Schffner na clula hospedeira. Os trofozotos maduros tm forma de faixa ou anel esticado, que vai de um extremo ao outro do eritrcito, e produzem em geral menores nmeros de merozotos do que as outras espcies, os quais ficam arranjados em roseta. MECANISMOS DE IMUNIDADE CONTRA O PLASMODIUM - Consideraes gerais sobre a malria e estado atual de desenvolvimento A malria considerada uma das cinco doenas infecciosas mais letais. Sua maior incidncia se d em regies tropicais, mas atualmente vem ocorrendo progressivamente uma maior disperso em vastas reas do globo. O aumento de populaes em reas endmicas, a migrao para e das reas de transmisso, a degradao ambiental causadora do desequilbrio ecolgico e a carncia de polticas e estratgias adequadas para o controle da doena nos pases onde existe a transmisso so algumas das causas para tal. O conhecimento limitado sobre a relao do plasmdio com o sistema imunitrio humano o principal desafio para a criao de uma vacina antimalrica, que poderia

representar uma queda exorbitante na taxa de mortalidade em pases tropicais. Segundo as estimativas, ocorrem de 400 milhes a 5 bilhes de episdios por ano (90% na frica) e, destes episdios, de 700 mil a 3 milhes so fatais. - Imunidade antimalrica e associao com hospedeiros O aumento da faixa etria da populao, associada ao desenvolvimento de imunidade antimalrica em determinadas populaes, faz cair o ndice de prevalncia da doena. A imunidade antimalrica se d devido a prolongadas co-infeces, de modo que o sistema imunolgico do hospedeiro estar mais resistente a cada infestao subseqente. Por essa razo, a imunidade exige manuteno, pois quando afastados de reas endmicas durante alguns anos, indivduos anteriormente imunes voltam a apresentar susceptibilidade malria. Entretanto, essa resistncia adquirida tem uma baixa efetividade e, mesmo aps o contato prolongado com o plasmdio em decorrncia de um grande nmero de episdios prvios de malria, o grau de proteo no suficiente para livrar o indivduo de uma nova infeco. De forma resumida, a imunidade antimalrica de lenta aquisio, necessita de repetidos contatos com o plasmdio, no se mantm na ausncia deste e insuficiente para erradic-lo do organismo, ou seja, trata-se de uma situao onde o parasita se encontra no hospedeiro, porm em estado assintomtico. - Mecanismos imunes humanos Um diagnstico claro e coerente contra o plasmdio ainda est longe de ser atingido, sendo que muitos deles so apenas estabelecidos a partir de observaes in vitro que nem sempre representam a realidade. Mecanismos imunitrios que se contrapem ao desenvolvimento do plasmdio no organismo - Fagocitose: Mediada por receptores para imunoglobulina e/ou complemento. - Linfcitos B e anticorpos: 1. Bloqueio da invaso dos esporozotos nos hepatcitos. 2. Facilitao da fagocitose dos esporozoitos pelos macrfagos. 3. Citotoxidade dependente de anticorpos dos hepatcitos infectados.

4. Bloqueio da invaso dos merozotos nos eritrcitos. 5. Interferncia sobre o desenvolvimento intra-eritrocitrio. 6. Facilitao da fagocitose de merozotos e de eritrcitos parasitados. 7. Lise, via complemento, de plasmdio livre e eritrcitos infectados. 8. Inibio da sequestrao endotelial. 9. Neutralizao do efeito patolgico de citocinas. 10. Bloqueio da fertilizao dos gametas. 11. Bloqueio da maturao do oocineto. - Linfcitos T: Citotoxidade de linfcitos CD4+ e CD8+ para hepatcitos infectados. Ativao de macrfagos com aumento de sua capacidade fagocitria. - Linfcitos citotxicos naturais (clulas Natural Killers): Citotoxidade para o plasmdio e eritrcitos parasitados. - Citocinas: Interferncia com o desenvolvimento intra-eritrocitrio. Interferncia com o desenvolvimento intra-heptico. Toxicidade para gametcitos.

ESTRATGIAS DE SOBREVIVNCIA DO PLASMODIUM NO HOSPEDEIRO A longa convivncia do homem e do Plasmodium, estimada entre 45 e 80 mil anos, revela a existncia de mecanismos adaptativos entre as duas espcies. Uma vez que apenas uma pequena parcela das infeces causadas pelo protozorio evolui para formas graves ou letais, natural que esse relativo estado de benignidade tenha sido propiciado por processos que selecionaram os indivduos mais aptos para uma convivncia conjunta. Algumas espcies de Plasmodium, por serem responsveis por formas severas de infeco, so descritas como as que exercem maior presso seletiva sobre o ser humano, sendo que essa influncia contribui para a seleo de variantes allicas que propiciam maior resistncia ao protozorio; portanto, a espcie humana, na condio de hospedeiro,

acumulou inmeras adaptaes j descritas que lhe conferiram resistncia ao Plasmodium e aos efeitos que a sua infeco provoca no organismo. Essa presso, entretanto, no unidirecional. Ao mesmo tempo em que o homem adquire resistncia ao Plasmodium, este, na condio de parasita, tambm desenvolve estratgias capazes de permitir e/ou tornar mais vivel a sua sobrevivncia no hospedeiro humano. As principais estratgias so: - Diversidade antignica: polimorfismo e variao antignica O polimorfismo presente no Plasmodium decorre da fertilizao cruzada de gametas originados de diferentes populaes do protozorio durante a fase de vida dentro do vetor. Os indivduos dessas populaes, mesmo pertencendo mesma espcie, possuem diferentes composies allicas em relao aos seus genes, e quando ocorre uma recombinao desses alelos surgem diferentes variantes polimrficas. A fertilizao cruzada ocorre porque o mosquito pode picar um indivduo infectado com protozorios de populaes diferentes ou mais de um indivduo infectado, cada qual com um protozorio diferente. A principal vantagem do polimorfismo que a imunidade gerada contra uma variante polimrfica no se mostra eficiente contra outra variante recm-criada. Outra manifestao da diversidade antignica do Plasmodium a variao antignica, que consiste na expresso de mltiplas formas antgenos a partir de protozorios geneticamente idnticos. Agindo de maneira diferente do polimorfismo, a variao antignica decorre da presso exercida pelo sistema imunolgico do hospedeiro em resposta infeco, de acordo com a sensibilidade do hospedeiro para o protozorio. Embora esse mecanismo no esteja completamente elucidado, acredita-se que essa presso seletiva exercida possa induzir delees, transies e transverses no genoma do Plasmodium; se essas mutaes puntiformes representarem alguma vantagem seletiva, elas podem se tornar fixas na populao parasitria e gerar novas formas allicas, que, por sua vez, contribuiro para o surgimento de novas variantes polimrficas na espcie. Dessa forma, tanto o polimorfismo quanto a variao antignica contribuem para que o Plasmodium evite a resposta antignica do hospedeiro. - Mimetismo molecular De maneira semelhante ao que ocorre com outros agentes infecciosos, o Plasmodium compartilha certo grau de similaridade entre as sequencias de aminocidos das suas protenas com as sequncias do hospedeiro como uma forma de tentar dificultar o seu reconhecimento pelo sistema imunitrio. Como conseqncia, essas sequencias comuns

poderiam: a) no ativar o sistema imunitrio e gerar tolerncia; b) simular funes biolgicas caractersticas das molculas prprias do organismo; c) induzir reaes auto-imunes no hospedeiro. No existem, de fato, evidncias claras de o hospedeiro pode tornar-se tolerante ao protozorio mimetizado no organismo; contudo, existem relatos da ocorrncia de reaes auto-imunes provocadas pelo Plasmodium, onde este possui sequencias diferentes o suficiente para que sejam reconhecidas pelo sistema imune, mas com certo grau de semelhana para que os anticorpos produzidos para agir contra elas se tornem autoreativos. - Induo de anticorpos pr-plasmdio A induo de anticorpos pr-plasmdio ocorre quando o protozorio utiliza as defesas criadas pelo hospedeiro para o seu prprio benefcio. Na maioria dos casos, esse beneficiamento se d quando os anticorpos produzidos pelo hospedeiro contra uma determinada fase de vida do plasmodium so ingeridos pelo msoquito quando este se alimenta. No interior do mosquito, esses anticorpos podem causar diversos efeitos, como o aumento da produo e da infectabilidade dos esporozotos ou impedir a ao inibitria do soro imune sobre a invaso dos hepatcitos pelos esporozotos. Esse mecanismo de ao ainda pouco conhecido e no se sabe exatamente o efeito dos anticorpos nas diferentes fases de vida do Plasmodium; entretanto, a induo de anticorpos pr-plasmodio considerada como o principal fator que impede o desenvolvimento de uma vacina contra esse protozorio. - Induo de imunodepresso Desenvolvendo sua mais importante estratgia de sobrevivncia, o Plasmodium promove a imunodepresso desregulando a resposta imunitria do seu hospedeiro atravs da hiperativao de diferentes partes do sistema de defesa do hospedeiro. Essa hiperativao se d pela interferncia na capacidade fagocitria, plasmodicida e de processamento de macrfagos e linfcitos, supresso da atividade de tipos especficos de linfcitos e produo de substncias, como as citocinas, que interferem ou mesmo inibem a resposta imunitria. Com essa estratgia, portanto, ocorre a reduo da reatividade ao Plasmodium pelo hospedeiro. O que ocorre, entretanto, que a imunodepresso pode tornar o organismo mais susceptvel a outras doenas, como o linfoma induzido por vrus, hepatite, candidase lpus eritematoso.

REFERNCIAS APICOMPLEXA. Disponvel em: <www.biosci.ohio-state.edu/~parasite/plasmodium.html>. Acesso em: 30/05/2011. BRUSCA, R. C. & BRUSCA, G. J. Invertebrados. (coord. trad.) F. L. Silveira, 2 edio, Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 2007. 989 p. + il. DOGIEL, V. A. General Protozoology. 2 ed. Oxford: Clarendon Press, 1965. 435 p. HOFFMAN, R. et. al. Hematology: Basic Principles and Pratice. 4 ed. Pennsylvania: Elsevier Churchill Livingstone, 2000. HUTNER, S. H.; LWOFF, A. The Chemotherapy of Malaria, Piroplasmosis, Trypanosomiasis and Leishmaniasis. In: ______. Protozoa. 1 ed. New York: Academic Press Inc., 1955. vol. II, p. 225-254. HUTNER, S. H.; LWOFF, A. The Chemotherapy of Malaria. In: ______. Protozoa. 1 ed. New York: Academic Press Inc., 1955. vol. III, p. 525-561. MALRIA. Disponvel em: <www-micro.msb.le.ac.uk/224/Bradley/Biology.html>. Acesso em: 29/05/2011. MANWELL, R. D. Introduction to Protozoology. 2 ed. New York: Dover Publication Inc., 1968. RUPERT, E. E.; FOX, R. S.; BARNES, R. D. Zoologia dos Invertebrados. Livraria Roca Ltda, 7 edio, 2005. 1168 p. VERONESI: Tratado de Infectologia. 3 ed. (rev. cientf.) Roberto Focaccia. So Paulo: Editora Atheneu, 2005.