Introduccion a la Teoria de Liofilizacion

AGENDA Introduccion & Aplicaciones Los 4 pasos que llevan acabo el proceso de una liofilizacion Resumen

Liofilizacion
La liofilizacion, comunmente conocido tambien como freeze-drying, es el proceso que remueve el agua y/o solventes de un producto atraves de una sublimacion y desorpcion. En donde las propiedades biologicas o quimicas del producto se mantienen de forma intacta.

Liofilizacion
Es un excelente metodo de remover agua y solventes organicos de un producto, para incrementar la vida del producto en su campo de venta y mantener su estabilidad sin exponer dicho producto a temperaturas elevadas potenciales en el campo.

Liofilizacion
Es una operacion de lotes de un proceso que usualmente lleva mucho tiempo y requiere no unicamente de un proceso de desarrollo, pero de un equipo especifico tambien.

Un producto liofilizado se define de forma lograda o exitosa cuando cumple con los siguientes requisitos:
Cuando el producto en seco esta visualizado y su funcionamento esta aceptable Cuando su reconsitucion es de poco tiempo Cuando la potencia del ingrediente activo es medible Cuando el producto es almacenable por vida Cuando se a logrado un proceso respetable

Aplicaciones: Salud Humana y Animal Medicamentos y Diagnosticos

Vacunas y Productos Farmaceuticos Kits de diagnosticos Suplementos nutricionales Sistemas de entrega de medicamentos Otros: virus, bacteria y quimicos al granel
Compliments of West Pharmaceuticals

Oakwood Laboratories

Bancos de Tejido y Productos de Tratamiento de Heridas

Colagen y vendaje de heridas Productos quirurgicos Bancos de tejido y huezo

Flores, Preservacion de Algun Especimen y/o Aplicaciones Industriales

Preservacion de flores Especimen biologico entero Taxidermia animal Polvos de ceramica, objetos porosos

Proceso de Liofilizacion
1. Pre-tratamiento 2. Congelamiento (Tratamiento Termal) 3. Secado Primario (Sublimacion) 4. Secado Secundario (Desorpcion)

Pre-tratamiento
Maximizar la surficie de area Minimizar el gruesor del producto Maximizar el contacto con el anaquel (bandeja/charola) Anadicion del protegedor de cryo o lyo

Objetivos del Congelamiento

Retener la estructura del producto *Garantizar que el producto este completamente congelado y de por debajo de su temperatura critica* Controlar el tamano del cristal y la velocidad de crecimiento (ayuda a optimizar la eficiencia del proceso de sublimacion) de dichos cristales

Temperatura de Colapse Critica

Temperatura Eutectica (Teu)
Para productos cristalinos

Temperatura de Transicion de Vidrio (Tg)

Para productos amorforos (los cuales son la mayoria de productos)

Determinacion de la Temperatura de Colapse Critica

Calorimetro de Escaneo Diferencial (Differential Scanning Calorimetry - DSC) Microscopia de Liofilizacion Medicion de Resistividad

Tratamiento Termal / Anillamiento

Este proceso es requerido para asegurar una completa cristalizacion de ciertos productos amorfos (manitol, glicina, etc.) Para anillar: - Congelar por debajo de la temperatura critica - Calentar un poco de por encima de la temperatura critica o Tg - Recongelar por debajo de la temperatura critica

Imagenes de una Microscopia de Liofilizacion

Congelamiento Frontal

Secado Frontal

Congelamiento

Derretimiento/desvanecimiento

Estas imagenes son una cortesia del Dr. Steve Nail y Dr. Jeff Schwegman, de la Facultad de Farmacia de la Universidad de Purdue.

Crystallization of mannitol Product Temp Shelf temp

Annealing step

Crecimiento de Cristales Durante el Proceso de Congelamiento

La velocidad de congelamiento afecta el tamano del cristal de hielo en el producto Super-enfriamiento Cristales grandes Rapido secado Crecimiento de cristales de un punto de nucleacion Del fondo del vial o de las paredes del vial, frasco, etc. (o contenedor/recipiente) Termopares Particulas (diferente para cuartos limpios)

Secado Primario
(Proceso de Sublimacion)
Congelamiento garantiza que el producto este completamente congelado Vacio el producto posteriormente se coloca pone bajo un vacio profundo Secado Energia de calor es agregado de nuevo al producto para que el hielo se sublimize

Diagrama de Fases para el Agua

PRESSURE (torr)

Solid
760 4.58

Vapor

TEMPERATURE (C)

0.00075 100

Kenneth G. Libbrecht

- Caltech

Durante el Secado Primario

La temperatura del producto es tipicamente mas fria que la temperatura del anaquel (bandeja) porque el calor es utilizado en el cambio de la fase de sublimacion (enfriamiento evaporativo)

Transferencia de Calor

Presion de Vapor del Hielo y Sistema de Presion

En el producto congelado, el punto determinado (set point) del sistema de vacio tiene que ser menor que la presion de vapor de hielo para que el proceso de sublimacion ocurra. La presion de vapor de hielo depende de la temperatura del producto (hielo). Es recomendable que el punto determinado sea de 20-30% de la presion de la evaporacion de hielo.

Presion de Vapor de Hielo

TEMP PRESION (C) (mTorr) (bar)
0 -2 -4 -6 -8 -10 -12 -14 -16 -18 -20 -22 -24 -26 4579 3880 3280 2765 2326 1950 1632 1361 1132 939 776 640 526 430 6105 5173 4373 3686 3101 2600 2176 1754 1509 1252 1035 853 701 573

TEMP PRESION (C) (mTorr) (bar)

-28 -30 -32 -34 -36 -40 -44 -48 -52 -56 -60 -64 -68 351 285 231 187 150 97 61 38 23 14 8 5 3
1

-76

468 381 309 250 201 129 81 50 30 18 11 6 3

1

Flujo de Vapor Hielo del producto Camara Condensador basado en las presiones diferenciales
Punto determinado de presion de la camara: 80 mTorr Temp / Presion del Condensador -85C / 0.2 mTorr

-30C Temp. del Prod. Presion de Vapor de Hielo = 285 mTorr Punto determinado de Shelf la temperatura del Set anaquel: -15C

Porque es dificil liofilizar en temperaturas muy bajas?

Punto determinado de presion de la camara: ????

Temp / Presion del condensador -85C / 0.2 mTorr

-52C Temp. del prod. Presion de vapor de hielo = 23 mTorr

Temp determinada del anaquel: -30C

Como Medir la Temperatura del Producto Durante el Secado Primario

El termopar se coloca al final y al centro del producto y en el centro de la bandeja/charola

Sublimacion Frontal Durante el Secado Primario

Producto Seco Sublimacion Frontal Liofilizacion Interfase del Hielo Producto Congelado

(Calentamiento)

La Interfase de Hielo en una Liofilizacion

Producto Colapsado (Meltback)

Si la temperatura del producto sube a mas de su temperatura critica, meltback ocurrira o el producto se colapsera

Optimizando el Tiempo de un Secado Primario

Determinar la temperatura apropriada del anaquel/bandeja (y presion del sistema) para mantener el producto lo mas caliente que se pueda, pero de forma segura y sin dejar a que esta baje a la temperatura de colapse critica del producto. Si es posible, mantener el gruesor del producto a un minimo menos de de pulgada (19mm). Aumentar el tamano del cristal (protocol de congelamiento). Evitar utilizar presiones del sistema extremadamente bajas puede resultar en un secado disparejo (sin ningun tipo de conveccion).

Cuando sabe usted que el secado primario ya ha terminado?

Cuando la temperatura del producto se acerca a la temperatura del anaquel o bandeja Comparando las medidas de presion de la Valvula Pirani vs. el Manometro de Capacitancia Utilizando el metodo de subida de presion Barometric End Point (cerrando la valvula de aislamiento y monitoriando la subida de presion de la camara pero para realizar esto, se requiere que el sistema tenga un condensador externo) Cuando la liofilizacion se hace atraves de un manifold, el frasco ya no tendra mas condensacion en las paredes externas o el vidrio del frasco se siente frio

Data From Actual Product Run

Slide courtesy of Dr. Henning Gieseler/University of Erlangen

Al Final de un Secado Primario

El producto estara en una forma de pastel (cake) y aparecera seco (sin hielo). El producto todavia tendra un contenido de humedad de 5-10% debido a que moleculas de agua todavia estan presente y aderidas al producto. La temperatura del producto ahora si puede aumentarse dramaticamente.

Secado Secundario (Proceso de Desorpcion)

Este es el proceso que remueve las moleculas de agua que todavia estan quimicamente aderidas al producto. Siempre se ejecuta a temperaturas mas altas (30C - 50C) El nivel de la humedad residual va depender del producto. Pero en general, lo aceptable en la industria son los siguientes niveles de humedad residual: - proteinas:1-2% - standares biologicos: 0.1-0.5% - celulas vivas: >2-3%

Ventana de Ladronismo (Sample Thief)

Este accesorio se puede utilizar periodicamente para remover viales y medir el contenido de humedad en el producto, sin interrumpir el funcionamiento del liofilizador.

Resumen
Hemos definido lo que es una liofilizacion y porque seguimos utilizando este metodo. Lo que es un producto liofilizado y cuando se considera un producto logrado o aceptado en la industria. Los 4 pasos principales que se deben de llevar acabo en una liofilizacion.

Cont. de Resumen
Puntos que se deben tomar en cuenta para obtener un exito en el proceso de liofilizacion: Conocer la temperatura critica de su producto. Maximizar la superficie de area de su producto relativo con la profundidad del producto. Como su producto se congela tiene un impacto significativo en la eficiencia de su liofilizacion. En el secado primario, mantenga la temperatura de su producto a 2-3 de por debajo del punto de colapse, controlando la presion de la camara y la temperatura del anaquel o bandeja. Conocer la importancia de la tabla que muestra la presion de vapor de hielo. Utilizar equipos de liofilizacion que le puedan ayudar a determinar el punto final del secado primario las dos valvulas de medicion de vacio - el manometro de capacitancia y la valvula pirani son los mejores metodos en cualquier producto. Conocer el % de humedad residual que es necesario obtener en el producto en el secado secundario (<3% = farmaceutica, <5% = alimenticia).