11.2.

- En un laboratorio de gentica, en el que se trabaja con una determinada especie de insecto, se cruz una hembra doble heterocigota en fase de repulsin (Ab/aB) por un macho doble homocigoto recesivo (aabb) y se obtuvieron 180 individuos AB, 422 Ab, 416 aB y 182 ab. Cuando se realiz el cruzamiento recproco de un macho doble heterocigoto en fase de repulsin (Ab/aB) por una hembra doble homocigota recesiva (aabb) se obtuvieron 355 individuos Ab y 350 aB. a) Cmo explicara las diferentes segregaciones obtenidas en estos dos cruzamientos recprocos? En ambos casos, se trata de un cruzamiento prueba y, por tanto, el fenotipo de cada individuo de la descendencia nos muestra la combinacin de alelos que ha recibido en el gameto correspondiente al parental diheterocigoto. Dependiendo de si los dos genes segregan independientemente o no, las frecuencias con que se producen los cuatro tipos de gametos en la meiosis del parental diheterocigoto se correspondern con algunas de las recogidas en la tabla siguiente:

Gameto AB Ab AB Ab

Loci independientes

Loci ligados fase de acoplamiento

Loci ligados fase de repulsin

En nuestro caso, en ambos cruzamientos, el doble heterocigoto est en fase de repulsin y, por tanto esperaramos que la segregacin fenotpica y, por tanto la gamtica, se ajustara a la de la primera columna de frecuencias, en el caso de los loci fueran independientes o a la de la tercera, en el caso de que los loci estn ligados. En cualquier caso, esperaramos que la segregacin de la descendencia incluya cuatro clases fenotpicas, salvo en el caso extremo en el y, , en la que no habra gametos recombinantes (en fase de acoplamiento). Esto slo

ocurrir si que los genes son tan prximos que, prcticamente, nunca se da recombinacin entre ellos, o en el caso de que el individuo sea aquiasmtico debido a alguna circunstancia. Los resultados obtenidos en el primer cruzamiento sugieren que estos genes no son independientes. Por tanto, el valor de c ser menor que 0,5 (caso de independencia) pero mayor que 0, porque se aprecian cuatro clases fenotpicas. No obstante, los resultados obtenidos en el segundo cruzamiento indican que los genes estn totalmente ligados, porque slo aparecen gametos en fase de repulsin (de tipo parental). Otra diferencia entre ambos cruzamientos consiste en que, en el primer caso, el parental doble heterocigoto es la madre y, en el segundo, el parental doble heterocigoto es el padre. Por tanto, concluiremos que, probablemente, la diferencia entre los dos cruzamientos se debe a que, en esta especie, el macho es aquiasmtico. Con los resultados obtenidos en el primer cruzamiento realizaremos una prueba para comprobar que los loci no segregan independientemente. Frecuencias esperadas con loci independientes

Gameto

Frecuencias Observadas 180 422 416 182 1200

AB Ab aB ab Total

1200

La de la prueba tiene 3 grados de libertad (4 1 que se pierde al calcular el nmero de individuos en la descendencia) y el valor crtico ser . Por tanto, como 188,88 > 7,815 concluimos que los loci no segregan independientemente.

(Esta prueba se puede realizar, alternativamente, en la pgina de chicuadrado incluida en el curso) b) A qu distancia gentica se encuentran los loci A,a y B,b? Para estimar la distancia entre los loci calcularemos la frecuencia de recombinantes en la descendencia del primer cruzamiento:

La distancia gentica entre dos loci, medida en centimorgans (cM) es igual a la fraccin de recombinacin expresada en tanto por ciento.

11.3.- En un laboratorio de Gentica se mantienen unas lneas consanguneas de Drosophila melanogaster, entre las que existen algunas que son homocigotas para alelos con un efecto fenotpico claramente identificable. Un investigador est interesado en estudiar tres de estos genes, cuyos loci estn situados sobre el mismo cromosoma, a los que, provisionalmente se ha llamado: o (cuerpo oscuro), p, (ojos prpura) y c (alas cortas) El investigador realiz un cruzamiento entre moscas de dos estirpes trihomocigticas para distintos alelos en estos loci para obtener una F1 compuesta de individuos triheterocigotos y, posteriormente, hizo un cruzamiento prueba entre hembras triheterocigotas y machos de una estirpe triple homocigota recesiva, obtenindose la siguiente descendencia: OPC, 73: OPc, 340: OpC, 2; Opc, 96; oPC, 110: opC, 310; opc, 66; oPc, 3. El esquema experimental utilizado por el investigador es el de un problema de los tres puntos. La idea es obtener una descendencia en la que todos los individuos reciban de uno de sus parentales (el macho en este caso) un gameto con los tres alelos recesivos, de tal forma que el fenotipo de los individuos refleje exactamente la aportacin a su genotipo del parental triheterocigoto. De este modo, podremos tener informacin precisa acerca de los tipos de gametos que produce este parental y de sus frecuencias respectivas. Una vez clasificada la descendencia, observaremos que existen, en principio, ocho clases fenotpicas que se corresponden con los ocho tipos de gametos que se pueden formar combinando tres alelos, uno por locus, de tres loci biallicos (23 = 8) En el caso de que los tres genes estn sobre el mismo cromosoma, de los ocho tipos de gametos dos sern gametos de tipo parental, es decir, con

la misma constitucin que los cromosomas que el individuo triheterocigoto recibi de sus padres. stos sern los de mayor frecuencia pues proceden de meiosis sin recombinacin en todo el segmento cromosmico comprendido entre los loci extremos. Todos los dems gametos mostrarn algn cambio, en uno u otro locus, respecto a las combinaciones allicas parentales. Entre stos, algunos sern el resultado de un nico proceso de recombinacin entre los dos loci situados en los extremos y, en principio, podremos distinguir dos parejas de gametos con constituciones complementarias, cuyas frecuencias sern similares y dependern de en qu tramo haya ocurrido el sobrecruzamiento: entre uno de los loci extremos y el central o entre el otro locus extremo y el central. Por ltimo, existir otra pareja de gametos con constituciones complementarias que tendr frecuencia mnima por ser el resultado de un doble sobrecruzamiento, uno entre cada uno de los dos loci extremos y el centrmero. Estos gametos dobles recombinantes contienen una combinacin de alelos que difiere de la parental en que el alelo del locus central ha cambiado. La frecuencia de dobles recombinantes depende, en principio, de las frecuencias de recombinacin entre cada uno de los loci extremos y el central. En algunas regiones cromosmicas un sobrecruzamiento en un punto inhibe o favorece la ocurrencia de otros sobrecruzamientos en zonas prximas. Cuando esto ocurre se dice que existe interferencia. Se llama coeficiente de coincidencia al cociente entre la frecuencia observada de dobles sobrecruzamientos y la frecuencia esperada de dobles sobrecruzamientos y, en ausencia de interferencia, su valor esperado es uno. As pues, el valor que se asigna a la interferencia es el de uno menos el coeficiente de coincidencia. Por tanto: 1. Los gametos de frecuencia mxima nos indican cules eran las combinaciones parentales. 2. A partir de los gametos de frecuencia mnima podemos deducir cul es el locus central. 3. Considerando parejas de loci podemos deducir la distancia gentica entre ellos. 4. Podemos calcular la interferencia y el coeficiente de coincidencia.

a) Determine el orden de estos tres genes en el cromosoma. Determinar el orden de los tres genes en el cromosoma es decidir cul de los tres es el locus central. La cuestin de cul est a uno u otro lado del locus central no tiene sentido. Empezaremos observando la segregacin fenotpica / gamtica: Gameto Frecuencia OPC 73 OPc 340 OpC 2 Opc 96 oPC 110 opC 310 opc 66 oPc 3

Los gametos de frecuencia ms alta son OPc y opC, luego stas deben ser las combinaciones parentales. Los gametos de frecuencia ms baja son OpC y oPc, luego stas deben ser las combinaciones dobles recombinantes. Si comparamos ambas parejas vemos que la diferencia entre una y otra es que, en los gametos parentales, pC est asociado al alelo o, mientras que en los dobles recombinantes est asociado al alelo O. Adems, en los gametos parentales, Pc est asociado al alelo O, mientras que en los dobles recombinantes est asociado al alelo o. Por tanto, O,o es el locus central. b) Determine el genotipo de los padres del triheterocigoto utilizado. Los gametos de tipo parental son OPc y opC, por tanto, el triheterocigoto tendr un genotipo:

. Sabemos que los padres del triheterocigoto eran triples homocigotos y, dado que el hijo hereda un cromosoma de cada padre, los genotipos de los parentales sern:

c) Determine la distancia gentica entre los loci. Para calcular la distancia gentica tenemos que calcular la frecuencia de recombinantes entre cada pareja de loci: Loci O y P En la segregacin anterior agrupamos los individuos que tienen el mismo fenotipo para estos loci:

Fenotipo OP Frecuencia 73+340 = 413

Op 2+96 = 98

oP 110+3 = 113

op 310+66 = 376

Los gametos recombinantes son Op y oP, por tanto, p1 , la frecuencia de recombinantes, ser:

Loci O y C En la segregacin anterior agrupamos los individuos que tienen el mismo fenotipo para estos loci: Fenotipo Frecuencia OC 73+2 = 75 Oc oC 340+96 = 436 110+310 = 420 oc 66+3 = 69

Los gametos recombinantes son OC y oc, por tanto, p2 , la frecuencia de recombinantes, ser:

Loci P y C En la segregacin anterior agrupamos los individuos que tienen el mismo fenotipo para estos loci: Fenotipo PC Frecuencia 73+110 = 183 Pc 340+3 = 343 pC 2+310 = 312 pc 96+66 = 162

Los gametos recombinantes son PC y pc, por tanto, p, la frecuencia de recombinantes, ser:

En definitiva, el mapa de esta regin cromosmica ser.

d) Determine el coeficiente de coincidencia y la interferencia. El coeficiente de coincidencia se calcula utilizando las frecuencias de recombinantes calculadas anteriormente

y la interferencia ser , es decir, en esta regin analizada el hecho de que se produzca un sobrecruzamiento reduce la probabilidad de que se d otro.

11.4.- En un experimento de laboratorio se realizaron los siguientes cruzamientos con Drosophila melanogaster: 1. Se cruz una hembra triheterocigota para los loci A,a; B,b y C,c (autosmicos y que presentan dominancia completa del alelo mayscula) con un macho triple recesivo y se obtuvo la siguiente descendencia: 26 ABC ; 101 ABc ; 99 AbC ; 24 aBC ; 25 Abc ; 102 aBc ; 98 abC y 25 abc.

2. Se realiz el cruzamiento recproco, es decir, una hembra triple recesiva por un macho triheterocigtico y se obtuvo la siguiente descendencia : 126 ABc ; 122 AbC ; 124 aBc y 128 abC. Responda a las siguientes cuestiones : a) Estn ligados estos tres loci? El esquema experimental utilizado en el experimento es el de un problema de los tres puntos. La idea es obtener una descendencia en la que todos los individuos reciban de uno de sus parentales (el macho, en este caso) un gameto con los tres alelos recesivos, de tal forma que el fenotipo de los individuos refleje exactamente la aportacin a su genotipo del parental triheterocigoto. De este modo, podremos tener informacin precisa acerca de los tipos de gametos que produce este parental y de sus frecuencias respectivas. Existen, en principio, ocho clases fenotpicas que se corresponden con los ocho tipos de gametos que se pueden formar combinando tres alelos, uno por locus, de tres loci biallicos (23 = 8) En el caso de que los tres genes estn sobre el mismo cromosoma, observaremos que de estos ocho tipos de gametos, dos sern gametos de tipo parental, es decir, con la misma constitucin que los cromosomas que el individuo triheterocigoto recibi de sus padres. stos sern los de mayor frecuencia pues proceden de meiosis sin recombinacin en todo el segmento cromosmico comprendido entre los loci extremos. Todos los dems gametos mostrarn algn cambio, en uno u otro locus, respecto a las combinaciones allicas parentales. Entre stos, algunos sern el resultado de un nico proceso de recombinacin entre los dos loci situados en los extremos y, en principio, podremos distinguir dos parejas de gametos con constituciones complementarias, cuyas frecuencias sern similares y dependern de en qu tramo haya ocurrido el sobrecruzamiento: entre uno de los loci extremos y el central o entre el otro locus extremo y el central. Por ltimo, existir otra pareja de gametos con constituciones complementarias que tendr frecuencia mnima por ser el resultado de un doble sobrecruzamiento, uno entre cada uno de los dos loci extremos y el centrmero. Estos gametos dobles recombinantes contienen una combinacin de alelos que difiere de la parental en que el alelo del locus central ha cambiado.

En el caso de que los tres genes no estn sobre el mismo cromosoma, observaremos que el nmero de clases de frecuencias gamticas es inferior porque algunas parejas de genes segregarn independientemente, es decir, con frecuencias iguales. Si dos de los genes estn ligados y el tercero es independiente, las diferencias en las frecuencias se debern a la segregacin de los genes ligados y, por tanto, habr dos grupos de frecuencias similares. Si cada gen est situado en un cromosoma diferente los tres segregarn independientemente, y todas las frecuencias gamticas sern aproximadamente iguales. La segregacin del primer cruzamiento, tal como se indica en el enunciado, es: Gameto Frecuencia ABC 26 ABc 101 AbC 99 Abc 25 aBC 24 aBc 102 abC 98 abc 25

Como vemos, la mitad de los fenotipos/gametos tiene una frecuencia prxima a 25 y la otra mitad tiene una frecuencia prxima a 100. De ello se deduce que dos de los loci estn ligados y el otro debe ser independiente. La segregacin del segundo cruzamiento tal como se indica en el enunciado es: Gameto Frecuencia ABC 0 ABc 126 AbC 122 Abc 0 aBC 0 aBc 124 abC 128 abc 0

Lo primero que llama la atencin es que slo aparecen cuatro de las ocho clases fenotpicas. No obstante, si tenemos en cuenta que dos de los genes estn ligados y que enDrosophila melanogaster los machos son aquiasmticos, concluiremos que, en esta segregacin, slo debe de haber cuatro clases fenotpicas porque los genes ligados no recombinan y slo aparecen en las combinaciones parentales. As pues, basta con fijarse en cuales son los loci que aparecen en combinaciones fijas en esta descendencia para saber cuales son los loci ligados. Como vemos en la tabla, el alelo B slo aparece en combinacin con c y el alelo b slo aparece en combinacin con C. As pues, a) B y C estn ligados y A es el locus independiente.

b) El genotipo del heterocigoto para los loci B y C es b) Averige la distancia gentica entre los loci ligados.

Para la distancia gentica entre B y C tenemos que calcular la frecuencia de recombinantes entre ellos en el cruzamiento 1: Loci B y C En la segregacin anterior agrupamos los individuos que tienen el mismo fenotipo para estos loci: Fenotipo Frecuencia BC 26+24 = 50 Bc 101+102 = 203 bC 99+98 = 197 bc 25+25 = 50

Los gametos recombinantes son BC y bc. Por tanto, p, la frecuencia de recombinantes, ser:

El mapa gentico ser.

c) Explique la diferencia entre las segregaciones obtenidas en los dos experimentos. La diferencia entre las segregaciones obtenidas en ambos experimentos se deben, tal como dijimos anteriormente, al hecho de que los machos de Drosophila son aquiasmticos y, por ello, no se produce recombinacin entre genes ligados.
Problemas Resueltos (extrados de Modern Genetic Analysis) 1. En una poblacin experimental de Tribolium (escarabajos de la harina), el largo del cuerpo muestra una distribucin continua con una media de 6 mm. Un grupo de machos y hembras con un largo de cuerpo de 9 mm fueron removidos y entrecruzados. El largo del cuerpo de su descendencia es en promedio de 7.2 mm. A

partir de estos datos, calcula la heredabilidad en sentido estricto de la caracterstica largo del cuerpo en esta poblacin. Solucin: El diferencial de seleccin (S)= media de los individuos seleccionados media de la poblacin original S=9-6=3 La respuesta a la seleccin (R)= media de la descendencia media de la poblacin original R = 7.2 - 6 = 1.2 Entonces la heredabilidad en sentido estricto ser: h2 = R/S h2 = 1.2/3 = 0.4

2. En algunas especies de pjaros cantores, las poblaciones que viven en diferentes regiones geogrficas cantan en diferentes dialectos de la cancin de la especie. Algunas personas creen que estas diferencias son el resultado de diferencias genticas entre las poblaciones, mientras que otros creen que estas diferencias surgen solamente de idiosincrasias individuales en los fundadores de estas poblaciones y han sido pasadas de generacin en generacin por aprendizaje. Esquematice un programa experimental que determine la importancia de los factores genticos y no genticos y su interaccin en los dialectos de los pjaros cantores. Si existiera alguna evidencia de diferencias genticas, qu experimentos podran ser realizados para proveer una detallada descripcin del sistema gentico, incluyendo el nmero de genes, su relacin de ligamiento y su fenotipo aditivo y no aditivo? Si existen evidencias de diferencias genticas, qu experimentos se podran realizar para proveer una descripcin detallada del sistema gentico involucrado, incluyendo el nmero de genes que estn segregando, su relacin de ligamiento, y los efectos fenotpicos aditivos y no aditivos. Solucin: Este ejemplo ilustra las dificultades experimentales que surgen cuando se trata de examinar la base gentica de algunas caractersticas cuantitativas. Para poder decir algo acerca del rol de los genes y del ambiente se requiere, como mnimo, que los organismos puedan ser criados a partir de huevos fecundados en condiciones controladas de laboratorio. Para poder realizar aseveraciones ms detalladas de los genotipos que subyacen en la variacin de los caracteres cuantitativos, se requiere adems, que los resultados de los cruzamientos entre padres de fenotipos conocidos, y de antecedentes fenotpicos conocidos, se puedan observar; y que la descendencia de algunos de esos cruzamientos pueda a su vez cruzarse con individuos de fenotipo y antecedentes genticos conocidos. Muy pocas especies animales satisfacen estos requerimientos, ya que es francamente ms fcil llevar a cabo cruzamientos controlados en las plantas. Asumiremos que la especie de pjaros cantores en cuestin pueden ser criadas y cruzadas en cautiverio. a. Para determinar si existe alguna diferencia gentica que determina las diferencias fenotpicas observadas en el dialecto entre poblaciones, se necesita criar pjaros pertenecientes a las distintas poblaciones, desde estado de huevo, en ausencia de toda

influencia auditiva de sus propios ancestros y en varias combinaciones de ambientes auditivos de otras poblaciones. Esto se realiza criando pjaros a partir del huevo y agrupndolas de la siguiente manera: 1)En aislamiento. 2)Rodeados de polluelos de la misma poblacin. 3)Rodeados de polluelos provenientes de aves derivadas de otras poblaciones.4) En presencia de adultos cantores, de otras poblaciones. 5) En presencia de adultos de su propia poblacin, que canten (como control de las condiciones de cra). Si no existen diferencias genotpicas y todas las diferencias de los dialectos son aprendidas entonces las aves del grupo 5 cantarn el dialecto de su propia poblacin y aquellos del grupo 4 cantarn el dialecto diferente. Los grupos 1,2 y 3, podrn simplemente no cantar, ellos podran cantar un canto generalizado que no corresponda a ninguno de los dialectos; o podran cantar el mismo dialecto que representara un programa de desarrollo intrnseco sin estar modificado por el aprendizaje. Si las diferencias en los dialectos estn totalmente determinadas genticamente los pjaros de los grupos 4 y 5 cantarn el mismo dialecto que sus padres. Las aves de los grupos 1,2 y 3 si cantan- ser el dialecto de la poblacin parental independientemente de los otros pjaros del grupo Existen por supuesto posibilidades no tan definitivas que indiquen que tanto las diferencias genticas como las aprendidas tienen influencia en la caracterstica. Por ejemplo las aves del grupo 4 pueden cantar con elementos de ambas poblaciones. Ntese que si los pjaros del grupo 5, control, no cantan el dialecto normal, el resto de los resultados no se pueden interpretar ya que las condiciones de la cra artificial estn interfiriendo con el programa normal de desarrollo. b. Si los resultados de los primeros experimentos muestran alguna heredabilidad en el sentido amplio, entonces es posible realizar anlisis posteriores. Este anlisis requiere una poblacin que segregue, obtenida a partir de un cruzamiento entre poblaciones de dos dialectos, digamos A y B. Un cruzamiento entre machos de la poblacin A y hembras de la poblacin B y el cruzamiento recproco dar una estimacin del grado promedio de dominancia de los genes que influencian el carcter, y si estn ligados al sexo. (Recuerden que en las aves el sexo heterogamtico es el femenino, las hembras son ZW).La descendencia de estos y subsiguientes cruzamientos deben necesariamente criarse bajo condiciones que no confundan los componentes genticos y los aprendidos, de las diferencias entre los dialectos tales como se revelen en los experimentos de la parte a. Si los efectos aprendidos no pueden delimitarse los anlisis genticos no pueden llevarse a cabo.

c. Para localizar los genes que influencian las diferencias entre los dialectos se requerir un gran nmero de marcadores genticos que segreguen. Estos marcadores podran ser mutantes morfolgicos o variantes moleculares tales como polimorfismos en sitios de restriccin. Tendrn que estudiarse las familias que segreguen para las diferencias en los caracteres cuantitativos para ver si existe una co-segregacin de los loci marcadores con estos caracteres cuantitativos. Estos loci que co-segregan seran los candidatos para estar ligados a los loci que controlan los caracteres cuantitativos. Los cruzamientos posteriores entre individuos con y sin marcadores mutantes y las medidas de los valores de los caracteres cuantitativos en los individuos de la F2 establecern si existe un verdadero ligamiento entre los marcadores y los loci de los caracteres cuantitativos. En la prctica es poco factible que esos experimentos se puedan llevar a cabo con especies de aves cantoras, debido al tiempo y esfuerzo que

requerira establecer lneas que lleven un gran nmero de genes marcadores diferentes y de polimorfismos moleculares.

3. Una poblacin de trigo genticamente heterognea tiene una varianza en el nmero de das para la maduracin igual a 40, mientras que dos poblaciones endocriadas derivadas de sta tienen una varianza de 10. a) Cul es la varianza genotpica vg , la varianza ambiental Ve y la heredabilidad en sentido amplio H2 de los das para la maduracin en esta poblacin? B) Si las lneas endocriadas fueran cruzadas, qu varianza se podra predecir para el carcter das para la maduracin en la generacin F1 . Solucin: La varianza fenotpica Vp = en la poblacin genticamente heterognea es la suma de la varianza gentica + la varianza ambiental, y sta es 40. La varianza en las lneas endocriadas es igual a la varianza ambiental, ya que la varianza gentica es igual a 0, en una poblacin genticamente homognea. Entonces la varianza gentica Vg en la poblacin heterognea es 40 10 = 30. La heredabilidad en sentido amplio H2 = Vg Vg+ Ve H2 = 30/40 = 0,75 Si las lneas endocriadas fueran cruzadas, la generacin F1 sera genticamente uniforme y en consecuencia la varianza gentica sera 0 y la varianza ambiental sera 10.

4. Se lleva a cabo una seleccin artificial para el peso del fruto en una poblacin de tomate. Se pesan todos los frutos de una planta y el peso promedio se toma como el fenotipo de esa planta. En la poblacin como un todo el peso promedio del fruto es de 75 g. Las plantas cuyo peso promedio es de 100g se seleccionan y se cruzan al azar para obtener la siguiente generacin. La heredabilidad en sentido estricto para el peso del fruto en esta poblacin se estima en 0,20. a) Cul es el peso promedio del fruto esperado despus de una generacin de seleccin? b) Cul es el peso promedio del fruto esperado despus de 5 generaciones de seleccin si en cada generacin los padres elegidos tienen un peso promedio de 25 g por encima de la media de la poblacin? Asuma que la heredabilidad en sentido estricto permanece constante durante el tiempo considerado. Solucin a. En la primera generacin de seleccin la media de la poblacin es M = 75 g. y la de los padres seleccionados es M* = 100 g. La heredabilidad en sentido estricto h2es 0,20. La frmula Mi = M + h2 (M* - M) nos da la media en la primera generacin, Mi = 75 + 0,20 (100 75) = 80 g. b. En cada generacin M* - M = 25 y h2 permanece en 0,20, de manera que la ganancia en peso promedio por generacin sera de 5 g. Despus de 5 generaciones la

ganancia esperada es de 25 g. Dando un peso promedio por fruto de 100 g. En el supermercado representa una disminucin en el nmero de tomates por peso en libras de 6 a 4 o 5 tomates.