La Prueba Luminol

INTRODUCCION
Una presentación
Es difícil sintetizar en estas pocas líneas la satisfacción que significa
para mí haber podido concretar un anhelo ferviente desde hace tanto
tiempo, que fue la confección de este primer manual sobre el uso y manejo
de la Prueba del Luminol y para el cual he dedicado muchas horas de
trabajo y sacrificio de tiempo para mi familia. Este es el primer objetivo de
un camino que apenas se inicia, las siguientes etapas de este proyecto
estarán llenas de pruebas, estudios, análisis, recopilaciones y notas que
implicaran un nuevo esfuerzo.
Ello tiene explicaciones; por un lado, significa volcar algo de lo que

aprendí en mi paso por las diferentes Secciones del Organismo de
Investigación Judicial, a lo largo de estos años. Por otro lado, queda
reflejado en un trabajo escrito lo que puede ser. Modestamente, una clara y
concreta guía de seguimiento de la Interpretación del Escenario de un
Homicidio aplicando la Prueba del Luminol. Especialidad poco conocida en
nuestro medio, como así sus alcances y técnicas preponderantes que se
utilizan para investigar pericialmente una escena que es susceptible de
una prueba de este tipo.
Finalmente, significa volcar en un manual los hasta ahora dispersos

conocimientos sobre esta disciplina, ya que aún no habían sido plasmados
en un trabajo de esta naturaleza. Este manual puede servir también como
material de consulta para jueces, fiscales, abogados, policías y estudiosos
vinculados de algún modo a la investigación criminalística.
Nace el proyecto la Prueba del Luminol

El proyecto de la Prueba del Luminol, nació como idea en nuestro
país, en los primeros días del mes de octubre del año de 1997; cuando al
observar un vídeo sobre esta prueba, que proyecto el Discovery Chanel,
(T.V. de cable ), se pudo observar como la Policía del Estado de
Arkansas, E.E.U.U., pudo resolver el Homicidio de una mujer, que
Química Forense / la Prueba del Luminol 2
Interpretación del escenario de un Homicidio
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primeramente fue denunciada como desaparecida, pero la astucia de los

investigadores los llevó a sospechar del esposo de esta mujer, que tenía
un récord policial extenso. Estas sospechas llevan a la Policía a aplicar la
Prueba de Luminol en la casa de este matrimonio. Logrando determinar
que en el cuarto principal, había ocurrido la muerte de la mujer. Al
inspeccionar y reactivar con Luminol toda la vivienda, se pudo interpretar
que el sospechoso mató a la mujer en la habitación, posteriormente la
envolvió en una alfombra y la arrastro hasta sacarla de la vivienda,
llevando el cuerpo hasta un predio a varios kilómetros de su casa.
Al analizar este caso de homicidio el cual fue resuelto bajo las

técnicas de la Química Forense, se pensó de inmediato en varios casos de
homicidio, en circunstancias parecidas, que habían ocurrido en nuestro
país en los últimos años y que todavía se encuentran en el misterio.
Homicidios como los de las señoras KATTIA SEVILLA y MARLEN
ALFARO QUESADA, como algunos otros.
De inmediato se procedió a comentar esta situación con varios

compañeros investigadores, donde de algunos se contó con apoyo para el
proyecto, de otros sin embargo, sólo desconfianza. Pero hoy al final de
esta primera etapa demostramos que teníamos razón.
A pesar de que teníamos la idea, la disponibilidad de realizarlo en el

país, no contábamos con lo principal, que son los reactivos químicos para
llevarlo a cabo. Para ese mes de octubre del año 1997, concidió la idea
del proyecto con la visita de funcionarios de la Policía de Metro Dale de
Miami, Estados Unidos, a los cuales se les informó sobre el proyecto que
teníamos entre manos. Desde el primer momento se contó con todo el
apoyo de estos funcionarios, los cuales donaron al Organismo de
Investigación Judicial, Sección de Homicidios, un litro de este reactivo
químico.
De inmediato se procedió a realizar la segunda etapa del proyecto:

conseguir toda la literatura referente al tema disponible en el país. Sin
embargo, no logramos encontrar ningún tipo de información o trabajo de
investigación sobre el tópico, buscando incluso en las Universidades
privadas y estatales.
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La única información que se logró levantar, fue la encontrada a

traves de la línea Internet, la cual llevó muchos días de estudio y discusión
por parte de todos los involucrados con el proyecto.
Para los primeros días del mes de diciembre de 1997, ya contamos

con un litro del Luminol, razón por la cual se inició la coordinación con
nuestros laboratorios forenses; propiamente con los Doctores MARCO
MADRIGAL QUESADA y CARLOS TRABADO, de la Sección de
Bioquímica, como así con el Dr. LUIS DEL VALLE CARAZO, Jefe de la
Sección de Patología. Por último se coordino con la Sección de Audio y
Vídeo, con la señorita ROSARIO MURILLO SOTO.
Al analizar los diferentes casos de Homicidio que teníamos sin

resolver, y al contar con información nueva sobre el Homicidio de MARLEN
ALFARO QUESADA, se disidió aplicar la prueba del Luminol en la vivienda
donde ella convivía con su esposo.
Para el día 23 de diciembre de 1997, al ser las 18:00 horas con

treinta minutos, se procedió aplicar la prueba en dicho lugar. Logrando
obtener resultados muy positivos. Incluso recolectar manchas de sangre
para análisis de marcadores genéticos, resultados que aún se encuentran
pendientes, y que se darán a conocer en marzo de 1999.
Para esta primera ocasión el grupo de trabajo, estuvo conformado

por los siguientes funcionarios judiciales:
Coordinador general: Jairo Mora Fonseca Inves. Homicidios
Personal científico: Dr. Marco Madrigal Quesada Secc. Bioquímica.
Asesor científico: Dr. Luis del valle Carazo Patología Forense.
Personal audiovisuales: Rosario Murillo Soto

Germán Fonseca Secc. Fotografía.
De esa primera vez, hasta noviembre del año de 1998, hemos estado
realizando varios trabajos con la prueba del Luminol, donde se ha venido
perfeccionado la técnica y la interpretación del lugar del suceso.
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Llevándonos a poder darle un giro por completo a una investigación y

logrando esclarecer un triple homicidio el día 26-11-98. Por tanto, al
confeccionar este manual, nuestro objetivo es de entregarles una
experiencia criminalística, que esperamos que sirva como un instrumento
más, para esclarecer la verdad en los Delitos contra la Vida.
Modulo 1:
La Química forense
El aporte que hace la química a la criminalística es enorme, tanto que
se ha estructurado una rama, la Química Forense, quizás una de las más
importantes de la disciplina, que analiza, sobre la base de sus
procedimientos aplicados, los problemas planteados por la justicia. Se
puede afirmar, casi con certeza, que la Química Forense es la ciencia
auxiliar más importante de la criminalística moderna.
Tiene por misión analizar los elementos relacionados con un hecho

delictuoso, que requieren para su examen la determinación de su origen,
su tipificación, su concentración y todo otro dato relacionado para la
investigación.
En el escenario delictivo es posible hallar elementos útiles a la

investigación, por su naturaleza, composición y presentación, sólo pueden
brindar datos por medio de procedimientos determinados en el laboratorio
químico. Los resultados obtenidos podrán modificar, en algunos casos, y
consolidar, en otros, la investigación en determinado rumbo.
Por tanto, los análisis de manchas de sangre, rastros de sangre, de

semen, de orina, de alcohol, se realizan utilizando procedimientos, técnicas
y métodos de neta raíz química. También corresponden a la química las
investigaciones para la determinación de estupefacientes y drogas
diversas; el análisis comparativo de pinturas; el revenido de marcas
borradas en metales; las determinaciones de tóxicos y venenos; las
precisiones sobre la antigüedad de una escritura; el examen de tintas, su
naturaleza y composición; el análisis del papel, etc.
En el caso concreto que nos ocupa La prueba del Luminol, la Química

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Forense, ocupa un campo de suma importancia en nuestro país.
Interpretación del escenario del hecho

Cuando se llega al escenario de un homicidio, cualquiera que sea su
índole, en una vivienda o aun campo abierto, es fundamental que el
investigador debe tomar perfecta conciencia de la importancia que tiene la
dominación completa del lugar; como debe también medir muy
detenidamente cada paso que da en el lugar y sobre todo deberá tener
todos los sentidos alerta e ir con el ánimo predispuesto a no recibir
influencias de ninguna naturaleza, aun de camaradas o de personas
interesadas en el caso.
Toda la investigación, en suma exige esfuerzos considerados y

requiere que el profesional sea persistente y no considere rutinaria una
investigación hasta estar seguro de que esto es así, en caso contrario,
toda su labor provocará lagunas imposibles de llenar posteriormente.
El investigador encargado de la causa deberá tener presente que,

cada cien hechos que le toca investigar, sólo en uno o dos podrá descubrir
inmediatamente al autor, en los demás, todo será fruto de una paciente
búsqueda con base a un detenido, pormenorizado y sistemático examen
de todos los factores; será una lucha larga y tediosa para obtener
resultados provechosos.
Las ideas preconcebidas deben descartarse de plano al iniciar la

investigación y interpretación del sitio, no se deben elaborar hipótesis
anticipadas o teorías con base a lo denunciado o a lo que surja de las
declaraciones de terceros. Las teorías o hipótesis han de surgir
exclusivamente con base en los indicios hallados.
El objeto indiscutible de toda investigación es esclarecer el hecho e

identificar al autor, para cumplir con estos objetivos deberá acometer su
tarea con tranquilidad y desapasionamiento. Por ejemplo en el caso que se
trate de un suicidio o accidente, sólo se arribará a esta conclusión luego de
concluir la tarea de interpretar el escenario, nunca al iniciarla.
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El investigador deberá tener dispuesta una serie de preguntas, las

cuales deberá responder al pisar el sitio del suceso, por ejemplo:
1 ¿Cómo estaban las puertas de la vivienda? ¿cerradas? ¿abiertas?

¿forzadas? ¿Con llave?.
1 ¿Qué fue lo que mayor impresión me causó al llegar al lugar?
1 ¿Cómo y dónde se encontraba el cuerpo?
1 ¿Las heridas son compatibles con los indicios hallados?
1 ¿ Se corrieron las cosas del lugar?
Las anteriores preguntas son apenas una pequeña muestra de lo que

el investigador tratará de dar respuesta a las interrogantes que se plantee
con motivo del hecho, con base a las evidencias que en el lugar se le
presenten a la vista o no. Esto le permitirá ser objetivo, percibir la aparición
de evidencias importantes y descartar aquellas que no se relacionen con el
hecho o que pueda ser producto de la imaginación del investigador o de un
tercero.
En suma el investigador al interpretar el escenario del homicidio

deberá ser objetivo, cuestionarse todo que encuentre en el lugar,
determinar si lo hallado corresponde o no al hecho; todo bajo las
evidencias arrojadas por la escena. Esto lo que le permitirá, es primero a
reconstruir la dinámica del hecho, segundo es tener un cuadro completo
del hecho.
En otras palabras, el investigador podrá, al interpretar el escenario

del crimen, reconstruir lo que paso antes del hecho, el hecho, y lo que
pasó después del hecho; lo que al final nos permitirá en la mayoría de las
ocasiones esclarecer la verdad y detener al autor del ilícito.
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A manera de conclusión debemos de reafirmar que la interpretación

del lugar de los hechos, debe sin lugar a dudas, contar con la ayuda de las
diferentes disciplinas de la criminalística, para una mejor resolución
positiva del caso. Por tanto, debemos de tratar de dejar atrás el divorcio
que existe en la policía y los laboratorios. Sólo trabajando unidos y en
equipo seremos de verdad. Por tal razón, para la aplicación de la Prueba
del Luminol, la Química Forense y la Policía Judicial, forman un equipo que
esta realizando grandes logros a pasos pequeños.
MODULO 2:
La Historia del Luminol

El Luminol químicamente denominado como: 3 aminophtalahidrazida
(5-amino-2,3-dihidro-phthalazino-1,4– diona), fue sintetizado por Schmitz en
el año de 1902, comprobando a la vez, que esta sustancia produce una
brillante quimioluminiscencia (producción de luz por reacción química: Una
fuerte luz fluorescente azul en soluciones ácidas con pH menor de 7).
Posteriormente, en el año de 1927 otro investigador de apellido

Lommel, observó dicha quimioluminiscencia después de la oxidación del
compuesto en medio alcalino (Soluciones con pH mayores de 7).
En 1934 el investigador Albrecht denominó a este compuesto

LUMINOL, por las propiedades quimioluminiscentes que presentaba.
Además descubre que la reacción quimioluminiscente se da en presencia
del peróxido de hidrógeno.
En 1936 Gleu y Pfannstiel descubrieron que el Luminol presentaba

luminiscencia en presencia de sangre. Esto es debido a la capacidad
peroxidásica de la hemoglobina, que es una Proteína presente en altas
concentraciones en los glóbulos rojos.
En el año de 1937 se reportó la primera aplicación forense del

Luminol, como prueba presuntiva de detección de sangre, dicho ensayo
fue realizado por Walter Specht. Este investigador roció sangre en varios
substratos como paredes, gradas, piedras, y tierra dejándola expuesta por
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14 días a las condiciones ambientales. Seguidamente aplicó el Luminol y

fotografió los resultados. Todas las áreas que contenían manchas de
sangre presentaron luminiscencia que perduró por 15 minutos. En esta
ocasión el Luminol funcionó bien con manchas de sangre frescas y viejas;
de hecho se observó mayor respuesta quimioluminiscente en las manchas
de sangre viejas, que en las manchas frescas o nuevas.
En el año de 1939, los investigadores Moody y Proescher, basándose

en la investigación de Specht, aplicaron el Luminol, en papel, tela y piezas
de hierro que contenían manchas de sangre de tres años de antigüedad,
obteniendo resultados satisfactorios. En 1942, McGrath, recomendó el uso
de la prueba de Luminol, para la detección de sangre, él notó que las
manchas de sangre viejas, daban respuestas más fuertes y prolongas,
debido a que en estas, hay una mayor concentración de metahemoglobina
y hemática.
Los investigadores Lytle y Hedgecock, en el año de 1978 estudiaron

los efectos del Luminol en solución alcalina, en la sangre detectada por la
prueba, concluyendo que no afectaba la actividad enzimática de los
eritrocitos, pero no reportan los efectos del reactivo en la determinación de
grupo ABO en las manchas, ni análisis de marcadores genéticos (ADN).
La prueba de Luminol es extremadamente sensible en la detección

de sangre. En 1986 Thornton y colaboradores detectaron luminiscencia, a
simple vista, proveniente de sangre que fue diluida 1:10000 partes.
Enseñanza de la historia
Por la experiencia adquirida a través de los años por muchos
investigadores médicos y científicos, desde el año de 1902 hasta nuestros
días, podemos considerar esta reacción química como la más indicada
para la localización de manchas invisibles y también para ensayos directos
de naturaleza catalítica, que presenta ventajas sobre otros métodos, en
mérito a los argumentos que se especifican:
Es altamente sensible.

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Es comparativamente, aunque no totalmente, específica.

Permite tratar en forma rápida grandes superficies para la localización
de las manchas no visibles al examen ocular directo.
No interfieren en la ejecución de ensayos similares o de otro tipo.
MODULO 3
Fundamento Teórico de la Prueba del Luminol

La prueba del Luminol emplea el Carbonato de Sodio para crear una
solución alcalina de pH 10.4-10.8, Perborato de Sodio como agente
oxidante, y el Luminol como la sustancia a ser oxidada con la subsecuente
emisión de luz. La sangre es el sistema peroxidasa que cataliza la
reacción.
Los Reactivos que se utilizan para preparar la

prueba
A.Carbonato de Sodio
B.Perborato de Sodio Trihidratado
C. Luminol (5-amino-2,3-dihydrophthalazine 1,4-dione)
Preparación del reactivo
1. Pesar 3,5 gramos de Perborato de Sodio en una balanza analítica.
Depositar la medida en un beaker de 1.000 ml de volumen.
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2. Pesar 25 gramos de Carbonato de Sodio y 0,5 gramos de Luminol en

una balanza analítica y colocarlos juntos en un recipiente limpio.
3. Medir un volumen de agua destilada de 500 ml con una probeta de

1.000 ml de capacidad.
4. Agregar los 500 ml de agua destilada al beaker con los 3,5 gramos de
Perborato de Sodio.
5. Agitar hasta disolver por completo.

6. Agregar a esta solución la medida de Carbonato de Sodio y Luminol.
7. Agitar hasta disolver por completo.
8. Verter la solución disuelta en el atomizador.
Como se aplica la Prueba del Luminol
Antes de la aplicación del reactivo el personal debe vestir prendas
que lo protejan del contacto directo con el Luminol. Es imprescindible la
utilización de mascarillas que impidan la inhalación del atomizado.
Se debe procurar una completa oscuridad para la aplicación del

reactivo.
Aplicar el reactivo por aspersión, en las zonas del escenario en

donde se sospecha la presencia de sangre.
En un lapso no menor de 10 segundos debe aparecer una reacción

lumínica que evidencia la actividad peroxidasa que posee la sangre
entre otras sustancias.
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Después de localizar los diferentes focos lumínicos se procede a

evaluar la naturaleza de estos.
De sospechar que los focos lumínicos se deben a la presencia de

sangre (manchas de color y aspecto característico), se debe delimitar el
área de reacción positiva con cinta adhesiva o bien con un marcador a
base de agua, esto con el objetivo de facilitar el levantamiento de
muestra y el registro fotográfico.
Cuidados que se deben de tener al aplicar la

Prueba del Luminol
Procurar en la medida de lo posible no entrar en contacto directo

con la sustancia. Es necesario asegurarse de que todo el personal
presente este debidamente protegido.
La vida media del Luminol ya preparado, es de 8 horas, por lo que

debe tenerse la precaución de no exceder este tiempo en su aplicación.
La prueba de Luminol es presuntiva para detectar la presencia de

sangre, esto significa que requiere de otras técnicas como la
determinación de especie para afirmar la presencia de sangre.
Esta sustancia no es corrosiva y no mancha
Se ha observado que no tiene efectos destructivos e inhibitorios

sobre la sangre, permitiendo la realización de análisis posteriores de
ABO y ADN.
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Una desventaja de esta técnica es que por ser basada en la

actividad peroxidasa y esta estar presente en muchas sustancias tales
como ciertos metales, jugo de fruta, detergentes y productos de
limpieza en general, es común obtener reacciones inespecíficas, de ahí
que sea aconsejable que la aplicación del reactivo y el levantamiento de
muestras sea realizada por personal calificado.
Antes de la aplicación de la prueba se debe realizar un ensayo

previo con controles positivos, falsos positivos y negativos, para
evaluar la efectividad del reactivo.
El reactivo de Luminol muestra una alta sensibilidad ante la

presencia de sangre, se observan reacciones positivas en muestras
diluidas, hasta diez mil veces y capaz de detectar manchas de 25 años
de antigüedad.
MODULO 4:
Fotografía de la Prueba Luminol

La fotografía en la Prueba del Luminol es de suma importancia para
la investigación criminalística, ya que ella muestra toda la labor realizada
por el equipo de aplicación, como a la vez permitirá al juzgador en el
proceso del debate, como se manifestaron las manchas de sangre, su
dinámica, arrastre, etc.
Fijar fotográficamente escenarios reactivados con Luminol, depende de

varios factores:
ISO de la película
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Tiempo de exposición
Duración de la luminiscencia del químico
Intensidad de la luminiscencia
Tomas en total oscuridad
Para obtener imágenes positivas de la escena aplicando la Prueba

de Luminol, se deben de controlar varios factores, sujetos algunos a
variaciones como el tiempo de exposición, espacio y luz.
Estas variaciones son las que nos han causado problemas desde
que fue usado el Luminol por primera vez (23-12-1997). Para esa época se
tenía poca información al respecto por lo no se logró fijar imagen alguna de
la luminiscencia del reactivo. Sin embargo, a lo largo de once meses de
pruebas se logró obtener imágenes de las zonas expuestas al Luminol,
pero no así todo el detalle del sector donde se ubica la luminiscencia.
En estos meses de aprendizaje de esta nueva técnica, hemos

llegado a implantar un método el cual nos ha dado buenos resultados, el
cual exponemos a continuación:
1. Revisar el escenario, para asegurarse de que NO hay filtraciones de

Luz que puedan afectar la exposición (ventanas, puertas, tragaluces),
de haberlas se deben de tapar con cartones o mantas de color oscuro.
2. Apagar las luces para confirmar el punto anterior.
3. El personal encargado de aplicar el Luminol, procede a reactivar la

zona y desmarcarla.
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4. Encender la luz.
5. Marcar la zona a fotografiar
6. Colocar la cámara en el trípode en la posición que mejor convenga

para hacer la toma, guiándose por la demarcación
7. Ajustar la cámara en la opción “manual”, V/Bulbo, F/ 1.8 ó F / 2.8
8. Apagar la luz, reactivar de nuevo la zona con Luminol.
9. Exponer la película inmediatamente:
a.- 1600 ISO a 1:00 minuto.

b.- 400 ISO a 1:30 minuto.
10.Fijar la próxima escena.

11. Seguir los pasos del 3 al 9.
El revelado y ampliación del negativo, no necesita de un proceso

especial, se realiza el proceso normal para película C - 41.
Se recomienda el uso de película para color, porque con está, se

obtiene mucho más detalle que con películas para Blanco y negro.
Vídeo para la Prueba del Luminol

Al igual que para la fotografía, el vídeo juega un papel de suma
importancia a la hora de aplicar la Prueba del Luminol, ya que con esta
técnica queda de una manera más viva y práctica, lo reactivado con el
químico. Además nos permite con más claridad la reconstrucción de la
dinámica de la aplicación, incluso luego nos podrá indicar, si hubo o no,
errores a la hora de la aplicación por parte del equipo y poder corregirlos
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en una nueva aplicación. Para los escenarios de homicidio se

recomienda la siguiente técnica o método a seguir:
1. Realizar tomas del escenario tal como se encuentra.

2. Hacer una narración de cada parte de la escena con comentarios
iniciales.
3. Realizar las tomas de los lugares donde se reactivara con el químico,

grabando los comentarios que el investigador considere oportunos.
4. Colocar la cámara en trípode para lograr tomas más seguras.

5. En la oscuridad realizar las tomas necesarias de toda la escena.
6. Encender la luz y realizar las tomas de las zonas que marcara el equipo
de aplicación
7. Realizar tomas del escenario después de fijarlo con las evidencias, y

grabar los comentarios del equipo sobre los alcances del trabajo.
8. Análisis del vídeo posteriormente para ver errores y aciertos.

Para este tipo de método se recomienda el uso de cinta para vídeo
de cámara en blanco y negro y utilizar lámpara para oscuridad (infrarroja).
MODULO 5
Interpretación del escenario al aplicar

la Prueba del Luminol
Al tener la misión de llegar a un escenario de un homicidio para
aplicar la Prueba del Luminol nos enfrentamos a un hecho poco común. Ya
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que de antemano sabemos que este sitio puede estar ligado directamente
la muerte de una persona, razón de más para deducir objetivamente que
existe una relación directa entre la víctima y el victimario. Esta relación el
victimario trata de disimularla, ocultarla, es decir, despistar a los
investigadores para que tomen otro rumbo en sus pesquisas.
En algunos de los homicidios que son susceptibles a la aplicación de

la Prueba del Luminol, debemos contar que el victimario o personas
cercanas al victimario, han tratado de destruir alguna evidencia que los
pueda ligar directamente al hecho. Se da el caso que laven o pinten
paredes, puertas, pisos, cielos rasos, alfombras, mesas, colchones, etc.
Como así, la de quemar o destruir ropas y objetos.
Como se puede deducir de las líneas anteriores, para la llegada del

equipo aplicador de la Prueba del Luminol, ya se debe manejar mucha
información sobre el hecho. La que permitirá en determinando momento la
de saber, que demos reactivar y en que forma. Pero lo más importante de
esto, es saber, qué es lo que buscamos y cómo debemos de buscarlo.
Primero que nada al aplicar la Prueba del Luminol en el caso de un

homicidio, debemos de saber lo siguiente:
1. Cuándo y dónde apareció el cuerpo.
2. En qué condiciones apareció: amarrado o envuelto en alguna tela o

alfombra.
3. Estaba en un vehículo o en lugar solitario.
4. Esta vestido o no.
5. La ropa presenta daños compatibles con las lesiones.
6. Tenía sus pertenencias.
7. Qué tipo y cuántas lesiones presentaba.

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8. Como pudieron ser los sangrados de las lesiones.
9. Con que tipo de arma u objeto fueron causadas las lesiones.
10.Trayectorias de las lesiones.
11. Cualquiera otra circunstancia que se considere oportuna.
Esta información la logramos obtener de los diferentes informes

policiales, así como, del reporte de la Autopsia. Sin embargo, no debemos
de olvidar la entrevista con el médico forense, y el investigador encargado
del caso.
El segundo paso a considerar antes de aplicar la prueba, es conocer

la victimología, esta nos permitirá conocer algunos detalles importantes,
tales, como gustos y preferencias de la víctima, relaciones con familiares y
amigos, en fin podemos saber algo de su personalidad. También debemos
de considerar la información sobre quienes viven en donde se aplicara la
prueba, como calidades de estos.
Con toda esta información a mano, de inmediato se realizará un plan

de trabajo, en donde se dibujara la manera de cómo se reactivara, que ruta
de acción se llevara a cabo, y así lograr encontrar las evidencias que se
están buscando. En este plan también es de suma importancia determinar
que tipos de superficies se van a reactivar, es decir, por ejemplo, si las
paredes y pisos son de madera o de otro material, y así, también con las
otras superficies de la vivienda.
Antes de empezar a realizar la prueba, debemos de ubicar y

decomisar todos los artículos de limpieza que se encuentren en el lugar;
por ejemplo: Trapeadores, mechas, trapos, paños, etc. Estos artículos
serán enviados de inmediato a los Laboratorios para los análisis de rigor.
Por último, debemos de ubicar y revisar la basura, en algunos casos
aparecen rastros importantes, como también, la de revisar el patio o
lugares cercanos donde posiblemente se pueda quemar algún objeto.
Al tener todos los puntos anteriores cubiertos damos por iniciada la

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Prueba del Luminol, de acuerdo al plan diseñado con anterioridad. Sin

olvidar que lo que buscamos no se ve a simple vista, que posiblemente las
evidencias fueron limpiadas con diferentes componentes químicos, como
limpiadores con base de cloro, oxido u otros componentes. Como también
se han utilizado posiblemente ceras, jabón, etc. Por tanto, lo que vamos a
encontrar son rastros de sangre que han sido tratados con limpiadores de
todo tipo y componentes.
Al iniciar la prueba nos encontraremos manchas que talvés, sean o

no de origen biológico, siempre constituyen un indicio muy trascendente, y
la confirmación de sus características y del modo en que asentaron será el
elemento orientador e importante que arrojará el análisis para llegar a una
interpretación del escenario.
El dibujo que producen las manchas de sangre reactivadas por el

Luminol, al depositarse en prendas de vestir, sobre el piso, paredes o
muebles, permite realizar al investigador coordinador del equipo,
deducciones elementales orientadoras. A través de ellas será posible
obtener información fidedigna sobre la manera en que posiblemente fue
herida la víctima, proyecciones por salpicaduras, en piso, paredes, cielo
raso. Como así, si hubo o no arrastre del cuerpo. La manipulación de
algún objeto impregnado en sangre y movido de un lugar a otro.
A través de los dibujos que dejan las manchas de posible sangre

podemos empezar a reconstruir la dinámica del hecho. Saber casi con
certeza donde se inició el hecho, donde continuó y terminó. Por tanto,
estos dibujos se deben de marcar y numerar y plasmarlos luego en un
plano forense. Para que posteriormente, el juzgador a la hora del debate,
tenga otro instrumento fidedigno, además de fotos y vídeo.
Otro punto importante para analizar, es la cantidad de sangre que

refleja el dibujo, donde se pueda luego con un profesional en Física de
Fluidos, determinar posible cantidad de sangre y peso posible. Esto para
luego ser analizado también por el médico forense y comparar con sus
resultados de la autopsia.
Pero lo más importante de realizar la Prueba del Luminol, es la de
encontrar rastros de sangre que se puedan levantar y enviar luego al
laboratorio para determinar marcadores genéticos.
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De acuerdo con la superficie donde se halla asentada la mancha

sanguínea será el procedimiento que se deba utilizar para su recolección,
aunque no exista mejor método que tratar de llevar intacto el objeto que
contiene la mancha hasta el laboratorio.
No obstante esto, se dan algunas ideas de cómo tratar las manchas,

según el lugar donde se encuentren depositadas:
A.- Manchas en piso de madera

Con un bisturí u hoja de afeitar se raspa el material que se halle
sobre la superficie. Si al finalizar esta operación la muestra recogida
no es suficiente ilustrativa, será necesario proceder el corte o sección
del piso, con un formón o sierra. En todo caso, las uniones de las
tablas siempre guardan rastros importantes de sangre, como la parte
inferior de las tablas. Siempre se recomienda cortar y enviar al
laboratorio.
B.- Manchas en piso de mosaicos

También en este caso se procede a raspar convenientemente
la mancha con un elemento cortante. Para el caso de que la muestra
recogida resulte insuficiente, se embeberá con agua destilada un
papel filtro y con una pinza o aplicador se presionará sobre la
mancha para recoger lo que aún quede de ella. En este caso, deberá
tenerse la precaución de evitar el contacto de las manos del operador
con el papel en todo momento, a pesar de los guantes, para no
enmascarar la muestra.
C.- Manchas en telas o alfombras.

Se recomienda cortar los fragmentos en donde se encuentra la
muestra. Sin embargo si la pieza completa es perfectamente
transportable, es mejor decomisarla entera.
Por último debemos de aclarar que la Prueba del Luminol por ser una
técnica basada en la actividad peroxidasa y estar está presente en muchas
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sustancias tales, como metales, jugos de fruta, detergentes y productos de

limpieza en general, es muy común obtener dibujos de reacciones
inespecíficas. Que son los dibujos denominados FALSOS POSITIVOS.
Los dibujos de rastros de sangre por lo general presentan

características muy similares en la mayoría de los casos, por ejemplo, son
muy regulares en todo su cuerpo con la luminiscencia. Caso contrario de
los dibujos de rastros de jabón que la luminiscencia se da en el núcleo del
cuerpo y los bordes son opacos. Así también las manchas de cera que la
luminiscencia se da cortada a lo largo de todo el dibujo, similar a los gajos
de las mandarinas.
Por el estilo los dibujos de FALSOS POSITIVOS, pueden confundir al

ojo no entrenado, por tanto, se recomienda, que esta prueba sea realizada
únicamente por personal debidamente entrenado en esta técnica.
Después de terminar la Prueba del Luminol se debe de recopilar toda

la información hallada, para ser procesada y analizada posteriormente.
Donde luego los resultados de las conclusiones serán llevados a la cámara
virtual, donde se hará una reconstrucción de la dinámica del hecho, en tres
aspectos, a saber:
Acontecimientos antes del hecho.
Acontecimientos durante el hecho.
Acontecimientos después del hecho.
Debemos de aclarar que el equipo de trabajo de la Prueba de

Luminol, se encuentra preparándose en los campos de vídeo, fotografía y
vídeo virtual. Como así, en los análisis de dibujos en manchas
inespecíficas (falsos positivos).
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------
MODULO 6
EQUIPO NECESARIO
1. Agitador magnético.
2. Potenciómetro.
3. Balanza analítica.
4. Espátulas acanaladas.
5. Platos de pesada.
6. Beaker (1000 mL).
7. Probeta de 1000 mL.
8. Atomizador plástico oscuro.
9. Quimonos de color oscuro.
10. Mascarillas con lentes protectores.
11. Guantes.
12. Marcadores a base de agua.
13. Tiza blanca y a colores.
14. Cinta métrica.
15. Lámpara potente.

16. Caja plástica con manigueta para transportar materiales
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------
17. Lupa
18. Dos focos.
19. Testigos métricos fosforecentes.
20.Dos Cámaras de 35 mm (con opción manual y bulbo).
21. Lente de 50 mm Macro (F / 1,8 o 2,8).
22. Lente zoom 35 – 105 mm (F / 1,8 o 2,8).
23. Flash.
24.Dos Trípodes.
25. Película de 35 mm 1600 ISO a color.
26. Película de 35 mm 400 ISO a color.
27. Una cámara de vídeo.
28. Vídeo120 para blanco y negro.
29. Lámpara infrarroja.
BIBLIOGRAFIA
1. Mosher, Stewart L. Lumino Photography, Broward SheriffeOffice,

Forensic Service. 1993.
2. Messenger, Starry. The Science of Law & Order: Luminol, copyright,

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------
1996.
3. Zeiger, Errol. Chemical Nomination Office Environmental Toxicology

Program, 1996.
4. Yeshion, Ted. Luminol: A presumptive blood test. Florida Department of

Law Enforcement, 1996.
5. Yeshion, Ted. The forensic application of luminol as a presumptive test.

Florida Departament of Law Enforcement, 1997.
6. Varios Autores. Blood identification-Catalytic. Fotocopias.
7. Stanley, Philip E. y Kricka, Larry J. Bioluminescence and

Chemiluminescence, Cambridge, 1990.
8. Zajaczkowski, Raúl Enrique. Manual de Criminalística. Ediciones

Ciudad Argentina. Buenos Aires, 1998.
9. Geberth, Vermon. Practical Homicide Investigation. Lightning Powder

Co. Salen Oregon, E.E.U.U., Tercera Edición, 1996.
INTEGRANTES ACTUALES
DEL GRUPO DE TRABAJO
Desde el inicio de este grupo de trabajo, nació con la idea de tratar
los escenarios de Homicidios, de la manera más eficiente posible. Donde
fuera la ciencia y la técnica las que marcaran las pautas a seguir en las
investigaciones. Todos sus integrantes somos participes de la idea que el
Organismo de Investigación Judicial, a sus veinticinco años de existencia,
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debe contar con un Equipo de Tratamiento de la Escena del Crimen, cuyos

integrantes sean profesionales en las diferentes ramas de la criminalística.
Esto motivado a que la criminalidad en el país se encuentra en un aumento
inesperado, que los delitos cada día se cometen con mayor impunidad, al
tener el delincuente mayores conocimientos y preparación para cometer el
ilícito. Si partimos de la teoría criminalística, donde nos dice que el
escenario del hecho, nos habla, nos indica que pasos debemos de seguir,
es hora que nos preparemos para trabajar estos sitios de la mejor manera
y eficiencia. Por tanto, así podremos combatir la delincuencia con mejores
armas, como lo son la Ciencia y la Técnica. Creemos que el grupo de
trabajo del Proyecto Luminol, es un primer paso a la formación de un Equipo
de Tratamiento de la Escena del Crimen.
Actualmente el grupo de trabajo se integra por los siguientes

funcionarios del Organismo de Investigación Judicial:
1. Jairo Mora Fonseca: Coordinador general del grupo. De la Sección de
Homicidios.
2. Dr.Luis Del Valle Carazo: Asesor científico. Jefe de Patología Forense.
3. Dr.Marco Madrigal Quesada: Personal científico. Licenciado en Microbiología y

Química Clínica, con una especialidad en Ciencias Forenses. De la Sección de
Bioquímica. Unidad de A.D.N.
4. Dip.Jeremy Fallas Rodríguez: Personal científico. Diplomado en Asistente de

Laboratorio. De la Sección de Bioquímica. Unidad de A.D.N.
5. Rosario Murillo Soto: Técnico en fotografía. De la Sección de Fotografía.
6. Marco Herrera Charraun: Técnico en vídeo. De la Sección de Fotografía.

La Prueba Luminol

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INTRODUCCION

Ello tiene explicaciones; por un lado, significa volcar algo de lo que

Finalmente, significa volcar en un manual los hasta ahora dispersos

Nace el proyecto la Prueba del Luminol

primeramente fue denunciada como desaparecida, pero la astucia de los

Al analizar este caso de homicidio el cual fue resuelto bajo las

De inmediato se procedió a comentar esta situación con varios

A pesar de que teníamos la idea, la disponibilidad de realizarlo en el

De inmediato se procedió a realizar la segunda etapa del proyecto:

La única información que se logró levantar, fue la encontrada a

Para los primeros días del mes de diciembre de 1997, ya contamos

Al analizar los diferentes casos de Homicidio que teníamos sin

Para el día 23 de diciembre de 1997, al ser las 18:00 horas con

Para esta primera ocasión el grupo de trabajo, estuvo conformado

Coordinador general: Jairo Mora Fonseca Inves. Homicidios

Personal científico: Dr. Marco Madrigal Quesada Secc. Bioquímica.

Asesor científico: Dr. Luis del valle Carazo Patología Forense.

Personal audiovisuales: Rosario Murillo Soto

Llevándonos a poder darle un giro por completo a una investigación y

Tiene por misión analizar los elementos relacionados con un hecho

En el escenario delictivo es posible hallar elementos útiles a la

Por tanto, los análisis de manchas de sangre, rastros de sangre, de

En el caso concreto que nos ocupa La prueba del Luminol, la Química

Forense, ocupa un campo de suma importancia en nuestro país.

Interpretación del escenario del hecho

Toda la investigación, en suma exige esfuerzos considerados y

El investigador encargado de la causa deberá tener presente que,

Las ideas preconcebidas deben descartarse de plano al iniciar la

El objeto indiscutible de toda investigación es esclarecer el hecho e

El investigador deberá tener dispuesta una serie de preguntas, las

1 ¿Cómo estaban las puertas de la vivienda? ¿cerradas? ¿abiertas?

1 ¿Qué fue lo que mayor impresión me causó al llegar al lugar?

1 ¿Cómo y dónde se encontraba el cuerpo?

1 ¿Las heridas son compatibles con los indicios hallados?

1 ¿ Se corrieron las cosas del lugar?

Las anteriores preguntas son apenas una pequeña muestra de lo que

En suma el investigador al interpretar el escenario del homicidio

En otras palabras, el investigador podrá, al interpretar el escenario

A manera de conclusión debemos de reafirmar que la interpretación

La Historia del Luminol

Posteriormente, en el año de 1927 otro investigador de apellido

En 1934 el investigador Albrecht denominó a este compuesto

En 1936 Gleu y Pfannstiel descubrieron que el Luminol presentaba

En el año de 1937 se reportó la primera aplicación forense del

14 días a las condiciones ambientales. Seguidamente aplicó el Luminol y

En el año de 1939, los investigadores Moody y Proescher, basándose

Los investigadores Lytle y Hedgecock, en el año de 1978 estudiaron

La prueba de Luminol es extremadamente sensible en la detección

Es altamente sensible.

Es comparativamente, aunque no totalmente, específica.

No interfieren en la ejecución de ensayos similares o de otro tipo.

Fundamento Teórico de la Prueba del Luminol

Los Reactivos que se utilizan para preparar la

2. Pesar 25 gramos de Carbonato de Sodio y 0,5 gramos de Luminol en

3. Medir un volumen de agua destilada de 500 ml con una probeta de

5. Agitar hasta disolver por completo.

Se debe procurar una completa oscuridad para la aplicación del

Aplicar el reactivo por aspersión, en las zonas del escenario en

En un lapso no menor de 10 segundos debe aparecer una reacción

Después de localizar los diferentes focos lumínicos se procede a

De sospechar que los focos lumínicos se deben a la presencia de

Cuidados que se deben de tener al aplicar la

 Procurar en la medida de lo posible no entrar en contacto directo

 La vida media del Luminol ya preparado, es de 8 horas, por lo que

Es altamente sensible.

Es comparativamente, aunque no totalmente, específica.

No interfieren en la ejecución de ensayos similares o de otro tipo.

Procurar en la medida de lo posible no entrar en contacto directo

La vida media del Luminol ya preparado, es de 8 horas, por lo que

La prueba de Luminol es presuntiva para detectar la presencia de

Esta sustancia no es corrosiva y no mancha

Se ha observado que no tiene efectos destructivos e inhibitorios

Una desventaja de esta técnica es que por ser basada en la

Antes de la aplicación de la prueba se debe realizar un ensayo

El reactivo de Luminol muestra una alta sensibilidad ante la

Duración de la luminiscencia del químico

Tomas en total oscuridad

Acontecimientos antes del hecho.

Acontecimientos durante el hecho.

Acontecimientos después del hecho.