La sealizacin JAK / STAT camino Jason S. Rawlings, Kristin M. Rosler y Douglas A.

Harrison * Universidad de Kentucky, Departamento de Biologa, 101 TH Edificio Morgan., Lexington, KY 40506, EE.UU. * Autor para la correspondencia (correo electrnico: dough@uky.edu) Diario de la clula de la Ciencia 117, 1281-1283 Publicado por La Compaa de bilogos de 2004 doi: 10.1242/jcs.00963 La quinasa Janus / seal de transductores y activadores de transcripcin (JAK / STAT) y la va es una de las pocas de las cascadas de transduccin de pleiotrpicos utilizados para una multitud de seales para el desarrollo y la homeostasis de los animales, de humanos a las moscas. En los mamferos, la va JAK / STAT es el principal mecanismo de sealizacin para una amplia variedad de citoquinas y factores de crecimiento. La activacin de JAK estimula la proliferacin celular, la diferenciacin, la migracin celular y la apoptosis. Estos eventos celulares son esenciales para la hematopoyesis, el desarrollo inmunolgico, el desarrollo de la glndula mamaria y la lactancia, la adipognesis, el crecimiento del dimorfismo sexual y otros procesos. Como era de esperar, las mutaciones que reducen la va JAK / STAT actividad de la va influyen en estos procesos (revisados por Igaz et al, 2001;.. O'Shea et al, 2002). Por el contrario, las mutaciones que activan constitutivamente o no para regular la sealizacin JAK adecuadamente causar enfermedad inflamatoria, eritrocitosis, gigantismo y una serie de leucemias. Aqu presentamos un panorama general de la va JAK / STAT e ilustrar los principales mecanismos de activacin y regulacin de esta cascada de sealizacin esenciales. Mecnica, JAK / STAT de sealizacin es relativamente simple, con slo unos pocos componentes principales (para revisiones, vase Aaronson y Horvath, 2002; Heinrich et al, 2003;. Kisseleva et al, 2002;.. O'Shea et al, 2002) . Como se ha descrito anteriormente, una variedad de ligandos y sus receptores estimular la JAK / STAT va. La activacin intracelular se produce cuando la unin del ligando induce la multimerization de subunidades del receptor. Para algunos ligandos, tales como eritropoyetina y hormonas de crecimiento, las subunidades del receptor estn unidos como homodmeros, mientras que para otros, tales como interferones y las interleucinas, las subunidades del receptor son heteromultmeros. Para la propagacin de la seal a travs de cualquiera de homodmeros o heteromultmeros, los dominios citoplasmticos de dos subunidades del receptor debe estar asociado con quinasas de tirosina JAK. JAKs son distintivos en tndem que tienen quinasa dominios homlogos en el extremo C-terminal. El primero es un dominio regulador no cataltico, mientras que el segundo tiene actividad de tirosina quinasa. En los mamferos, la familia JAK cuenta con cuatro miembros: Jak1, JAK2, Jak 3 y Tyk2. La activacin de JAK se produce por el multimerizacin ligando del receptor mediada por dos JAKs se ponen en las proximidades, lo que permite trans-fosforilacin. El JAKs activado posteriormente fosforilar objetivos adicionales, incluyendo tanto los receptores y los sustratos grandes, estadsticas. STAT estn latentes los factores de transcripcin que residen en el citoplasma hasta que se activa. Los siete STAT mamferos soportar un residuo conservado tirosina cerca del extremo C-terminal que es fosforilado por JAKs. Este fosfotirosina permite la dimerizacin de estadsticas a travs de la interaccin con una conservadas dominio

SH2. STAT fosforilados entrar en el ncleo por un mecanismo que es dependiente de importina -5 (tambin llamado interactor nucleoprotena 1) y la va de Ran importacin nuclear. Una vez en el ncleo, dimerizado STAT se unen secuencias reguladoras especficas para activar o reprimir la transcripcin de genes diana. As, la cascada de JAK / STAT proporciona un mecanismo directo para traducir una seal extracelular en una respuesta transcripcional. Adems de los componentes principales de la va, otras protenas efectoras se han identificado que contribuyen a por lo menos un subconjunto de JAK / STAT eventos de sealizacin. STAMS (transduccin de seales molculas adaptadoras) son molculas adaptadoras con VHS y conservada dominios SH3 (Lohi y Lehto, 2001). STAM1 y STAM2A puede ser fosforilada por JAK1-JAK3 de una manera que depende de un tercer dominio presente en algunos Stams, el ITAM (inducible tirosina basado motivo de activacin). A travs de un mecanismo poco conocido, los STAMS facilitar la activacin transcripcional de los genes diana especficas, incluyendo myc. Un segundo adaptador que facilita JAK / STAT activacin de la va es CTPI (STAT-que interactan las protenas), una protena WD40. Finalidad de ese tipo puede asociarse tanto con JAK y STAT fosforiladas, tal vez sirve como un andamio para facilitar la fosforilacin de Estadsticas por JAK. Una tercera clase de adaptador con la funcin de JAK / STAT de sealizacin es la familia SH2B/Lnk/APS. Estas protenas contienen homologa pleckstrin y los dominios SH2 y tambin son sustratos para la fosforilacin de JAK. Tanto el SH2-B y APS asociado con JAK, pero el primero facilita JAK / STAT de sealizacin mientras que el segundo se inhibe. El grado en que cada una de estas familias adaptador contribuye a JAK / STAT de sealizacin todava no se entiende bien, pero es evidente que diversas protenas fuera de la va bsica maquinaria influencia JAK / STAT de sealizacin. Adems de los efectores de la va JAK / STAT, hay tres clases principales de regulador negativo: SOCS (supresoras de la sealizacin de citoquinas), Pias (inhibidores de la protena activada de estadsticas) y PTP (la protena tirosina fosfatasas) (revisado por Greenhalgh y Hilton, 2001) . Quizs el ms simple son las fosfatasas de tirosina, que revierten la actividad de la JAKs. El mejor caracterizado de ellos es SHP-1, el producto del gen del ratn apolillada. SHP-1 contiene dos dominios SH2 y pueden unirse a cualquiera fosforilado JAKs o receptores fosforilados para facilitar la desfosforilacin de estas molculas activadas de sealizacin. Otros tirosina fosfatasas, como CD45, parecen tener un papel en la regulacin de JAK / STAT de sealizacin a travs de un subconjunto de receptores. Protenas SOCS son una familia de por lo menos ocho miembros que contiene un dominio SH2 y una caja de SOCS en el Cterminus (revisado por Alexander, 2002). Adems, una regin inhibidora de quinasa pequea situada N-terminal al dominio SH2 ha sido identificado por SOCS1 y SOCS3. Los SOCS completar un simple bucle de retroalimentacin negativa en el circuito de JAK / STAT: STAT activado estimular la transcripcin de los genes y las protenas SOCS resultantes SOCS bind fosforilada JAKs y sus receptores para apagar la va. Los SOCS pueden afectar a su regulacin negativa por tres medios. En primer lugar, por fosfotirosinas de unin en los receptores, SOCS bloquear fsicamente el reclutamiento de transductores de seal, tales como STAT, al receptor. En segundo lugar, las protenas SOCS pueden unirse directamente a JAK o para los receptores de inhibir especficamente la actividad de la quinasa JAK. SOCS En tercer lugar, interactan con el complejo Elongin aC y cullin 2, lo que facilita la ubiquitinacin de JAK y, presumiblemente, los receptores.

La ubiquitinacin de estos objetivos se reduce su estabilidad en blancos de la degradacin proteasomal. La tercera clase de regulador negativo es que las protenas PIAS: PIAS1 y PIAS3 y PIASx y PIASy. Estas protenas tienen una unin de Zn-dedo anular de dominio en la porcin central, un bien conservado SAP (SAF-A/Acinus/PIAS) de dominio en el extremo N-terminal, y un dominio carboxilo menos wellconserved. Los dominios de estos ltimos estn implicados en la unin protena diana. Las protenas se unen a PIAS dmeros STAT activados y evitar que la unin al ADN. El mecanismo por el cual las protenas PIAS acto an no est claro. Sin embargo, las protenas PIAS han sido recientemente demostrado que asociar a la Ubc9 conjugasa E2 y E3 tienen actividad conjugasa de sumoylation que est mediada por el dominio dedo anular (revisado por Jackson, 2001). Aunque no hay evidencia de que STAT puede ser modificado por sumoylation (Rogers et al., 2003), la funcin de que la modificacin en la regulacin negativa todava no se conoce. Aunque el mecanismo de JAK / STAT de sealizacin es relativamente simple en teora, las consecuencias biolgicas de la activacin de la va se complica por la interaccin con otras vas de sealizacin (revisado por Heinrich et al, 2003;. Rane y Reddy, 2000; Shuai, 2000). La comprensin de esta interferencia est empezando a emerger, pero las mejores interacciones caracterizadas de la va JAK / STAT estn con el receptor tirosina quinasa (RTK) / Ras / MAPK (quinasa activada por mitgenos protena). La relacin entre estas cascadas es compleja y sus caminos se cruzan en varios niveles, cada activacin de la mejora de la otra.En primer lugar, activado JAKs puede fosforilar tirosinas en sus receptores asociados que pueden servir como sitios de atraque para adaptador de protenas que contienen SH2 de otras vas de sealizacin. Estos incluyen SHP-2 y Shc, que contratar el adaptador GRB2 y estimular la cascada de Ras. El mismo mecanismo estimula cascadas otros, tales como la fosforilacin de contratacin y JAK de sustrato del receptor de insulina (IRS) y p85, lo que resulta en la activacin de la fosfoinositida 3-quinasa (PI3K) va [para ms informacin sobre sealizacin PI3K, vase Foster et al . (Foster et al., 2003)]. JAK / STAT de sealizacin tambin se promueve indirectamente la sealizacin de Ras a travs de la activacin transcripcional de SOCS3. SOCS3 une RasGAP, un regulador negativo de la sealizacin Ras, y reduce su actividad, promoviendo as la activacin de la va de Ras. Recprocamente, la actividad RTK va promueve JAK / STAT de sealizacin por lo menos dos mecanismos. En primer lugar, la activacin de algunos RTK, incluyendo EGFR y PDGFR, resulta en la fosforilacin de la tirosina JAKindependent de estadsticas, probablemente por la quinasa Src.En segundo lugar, RTK / Ras va estimulacin provoca la activacin de MAPK abajo. MAPK fosforila una serina en concreto cerca de la Cterminus la mayora de los STATS. Aunque no es absolutamente necesario para la actividad STAT, esta fosforilacin de serina mejora dramticamente la activacin transcripcional por STAT. Adems de RTK y PI3K interacciones con JAK / STAT de sealizacin, de mltiples niveles de cross-talk con el TGF- va de sealizacin se han informado recientemente [para una revisin de TGF-, ver (Moustakas, 2002)]. Por otra parte, las funciones de estadsticas activadas puede ser alterado mediante la asociacin con otros factores de transcripcin y cofactores que estn regulados por otras vas de sealizacin. Por lo tanto la integracin de las aportaciones de muchas vas de sealizacin debe tenerse en cuenta si queremos entender las consecuencias biolgicas de la estimulacin de citoquinas. La va de JAK / STAT es omnipresente entre los vertebrados, pero tambin se puede encontrar como una va intacta en

algunos, pero no todos, los otros metazoos. Una completa JAK / STAT va de sealizacin necesarios para una gran cantidad de funciones biolgicas se encuentra en Drosophila (para revisiones, vase la hombra y Brown, 2002;. Zeidler et al, 2000). Hay homlogos individuales para JAK, STAT y PIAS, as como tres homlogos SOC. Cada uno de estos componentes acta de la misma manera como su homlogo de mamferos, aunque no mutantes en los genes SOCS ventanas estn todava disponibles. Adems, no hay una sola JAK / STAT va del receptor, Domeless, que muestra similitudes dbiles a los mdulos de unin de la citoquina-interleuquina vertebrado 6 (IL-6) familia de receptores. Una prediccin de genes, CG14225, codifica una protena putativa con similitud a Domeless, pero no hay anlisis funcionales han sido reportados. Slo los miembros de la unpaired (UPD) de la familia de ligandos secretados, la UPD y la Upd3, se ha demostrado que activar la va JAK / STAT en las moscas (Agaisse et al, 2003;.. Harrison et al, 1998). La activacin de un homlogo en tercer lugar, UPD2, an no se ha reportado. A pesar de los Unpaireds no tienen ninguna secuencia similar a las citocinas, la prediccin altamente -hlice naturaleza es consistente con una estructura general que podra ser similar a las citoquinas. La secuenciacin del genoma de Drosophila ha puesto al descubierto los posibles homlogos de otras molculas de la va JAK / STAT, incluyendo STAM, Stip y SH2-B / EPA / Lnk adaptadores de la familia. No hay mutaciones de estos genes estn todava disponibles para probar su funcin en la va JAK / STAT de sealizacin.Para algunos otros organismos, tales como C. elegans y Dictyostelium, no es un completo y funcional de JAK / STAT cassette, pero homlogos de algunas protenas JAK / STAT se puede encontrar (Dearolf, 1999; hombra y Brown, 2002).Por ejemplo, en Dictyostelium homlogos STAT son necesarios para la quimiotaxis, el movimiento prestalk celular durante la diferenciacin, y la represin del tallo de genes especficos. Sin embargo, no hay JAKs en Dictyostelium, sino ms bien la activacin de STAT est mediada por receptores acoplados Gprotein-(GPCRs) (revisado por Williams, 2000). Aunque la relacin an es controvertido y el mecanismo poco claro, hay pruebas crecientes de que GPCRs tambin seal a travs de estadsticas en los mamferos. Este potencial comunalidad en el mecanismo sugiere que partes de la va JAK / STAT puede haber surgido incluso antes de la aparicin de los metazoos. Secuencias del genoma de los organismos adicionales y mutantes en homlogos identificables ser de gran ayuda elucidacin del mecanismo de la evolucin de la va JAK / STAT de sealizacin.