CONOCIMIENTO DE TCNICAS ANALTICAS PARTE I: FUNDAMENTOS DE ESPECTROFOTOMETRA

I. OBJETIVO GENERAL Conocer y aplicar los fundamentos de la espectrofotometra para la determinacin de concentraciones en soluciones.

II. OBJETIVOS PARTICULARES a. Conocer los fundamentos de la espectrofotometra y las variables involucradas en la ley de LambertBeer-Bourger. b. Seleccionar la longitud de onda apropiada para las mediciones de absorbancia c. Construir una curva patrn de soluciones de yodo (serie tipo)

III. PROBLEMA Determinar el coeficiente de absortividad molar de soluciones acuosas de yoduro de potasio a partir de una curva patrn

A1. INTRODUCCIN. La espectroscopia de absorcin es la medida de la cantidad de luz absorbida por un compuesto en funcin de la longitud de onda de la luz. En general, e irradia una muestra con una fuente de luz y se mide la cantidad de luz transmitida a varias longitudes de onda, utilizando un detector y registrando el fenmeno en un grfico. La espectroscopia UV-Visible estudia el fenmeno de adsorcin de la radiacin UV Visible de molculas orgnicas e inorgnicas. La regin visible, a la que es sensible el ojo humano, se localiza entre los 380 y 780 nm. La absorcin de la radiacin ultravioleta o visible por molculas orgnicas e inorgnicas, generalmente se produce por la excitacin de los electrones de enlace, por lo tanto, la longitud de onda de los mximos de absorcin se puede relacionar con los enlaces de las especies absorbentes. Para la determinacin del espectro de absorcin de una solucin colorida existen dos mtodos fotomtricos generales: La fotometra directa: Es el mtodo ms general. Se mide la absorbancia de la especie a determinar, si es coloreada, o bien el producto de su reaccin de un reactivo si no presenta color. La absorbancia es proporcional a la concentracin de la sustancia. La fotometra indirecta: la sustancia a determinar origina la desaparicin del color que se aprovecha con fines cuantitativos. La disminucin de absorbancia es proporcional a la concentracin de la sustancia a determinar. La radiacin que incide sobre la muestra absorbente debe de ser lo ms monocromtica posible, es decir, debe tener slo un pequeo rango de longitudes de onda, porque: Cuanto ms monocromtica sea la radiacin, mejor se cumplir la ley de Beer- Bourger. Puede aumentarse la selectividad, puesto que las sustancias absorban a otra longitud de onda no interferirn si el rango es estrecho. La sensibilidad es mucho mayor si se selecciona la longitud de onda de mxima absorcin.

De esta manera, podemos decir que la ley de Beer- Bourger, establece una relacin lineal entre la absorbancia y la concentracin: A = -log T A = log ( I / I0 ) = ( x b) x c ABSORBANCIA = ( x b) x c Mediante el registro de la absorbancia adecuada se construye una curva patrn y a partir de aqu realizar los anlisis cuantitativos para determinar las concentraciones desconocidas en disoluciones de las muestras. La curva de calibracin se construye con las parejas de datos concentracin y absorbancia. A2. PROPUESTA DEL DISEO EXPERIMENTAL Llevar a cabo una discusin grupal, identificar las variables involucradas y plantear la hiptesis para proponer el diseo del experimento que pueda conducir a la resolucin del problema planteado (considerar que en el laboratorio se dispone del material indicado en el punto A3). Anotar la propuesta en el Cuadro 1.

Cuadro 1. Variables, hiptesis y propuesta del diseo de experimento. 1.- Espectro de absorcin Lo que queremos hacer es saber a partir de que longitud de onda, una disolucin, a una concentracin constante, tiene una absorbancia constante. Lo vamos a hacer variando la longitud de onda, para as poder construir el espectro de absorcin y elegir la longitud de onda que ms se adecue.

2.- Curva patrn Lo que queremos hacer es conocer y aplicar los fundamentos de la espectrofotometra para la determinacin de concentraciones en soluciones, y lo haramos variando las concentraciones, a una longitud de onda constante, para despus crear la curva patrn. A3. REACTIVOS Y MATERIALES I2 KI (0.002M - 0.2M) H2O destilada 1 Espectrofotmetro 2 celdas espectrofotomtricas 4 vasos de precipitados de 50 ml 6 tubos de ensayo (15 mL) 1 pipeta graduada de 10 mL 1 pipeta graduada de 1 mL Nota: Usar siempre las mismas celdas y el mismo espectrofotmetro

A4. METODOLOGA EMPLEADA. Describir detalladamente la metodologa empleada despus de haber realizado el experimento.

Calibracin del espectrofotmetro y barrido del espectro de absorcin

1. Encender el espectrofotmetro

2. Esperar 15 minutos

3. Calibracin: oprimir la tecla MODE, hasta que la luz roja se encuentre en A (absorbancia)

4. Seleccionar la longitud de onda girando la perilla

5. Introducir la celda con el blanco (con un volumen por arriba de la mitad; nunca llena) en la portacelda, oprime la tecla (0A/100%T) y esperar a que se ponga en ceros la Absorbancia

6. Tomar la lectura de absorbancia como blanco agua destilada.

7. Repetir el procedimiento desde el punto 4 dando incrementos regulares a la longitud de onda. Registrar los datos en la tabla 1

Curva Patrn 8. Preparar soluciones de distinta concentracin a partir de la solucin de referencia I2 KI

(0.0002M - 0.2M) (Serie tipo)

9. Seleccionar una longitud de onda adecuada para hacer las lecturas de Absorbancia para las soluciones de la serie tipo.

10. Introducir la celda con el blanco(agua destilada), con un volumen por arriba de la mitad; nunca llena, en la porta-celda, oprimir la tecla (0A/100%T) y esperar a que se ponga en ceros la Absorbancia

11. Tomar la lectura de absorbancia de las soluciones propuestas para la serie tipo, a la longitud de

12. Registrar las lecturas de absorbancia y concentracin de la serie tipo en la tabla 2

A5. DATOS, CLCULOS Y RESULTADOS Temperatura: tabla 1. Temperatura: 21C -4 1. Registrar los datos experimentales del espectro de absorcin de yodo (2x10 M) de la tabla 1. Tabla 1. Absorbancia de la disolucin de I2 a diferentes longitudes de onda. Evento 1 2 3 4 5 6 7 8 9 (nm) 370 380 390 400 410 420 430 440 450 Absorbancia 1.643 1.125 0.692 0.451 0.315 0.240 0.180 0.139 0.101 Evento 10 11 12 13 14 (nm) 460 470 480 490 500 Absorbancia 0.072 0.045 0.025 0.018 0.013 Registrar los datos experimentales del espectro de absorcin de yodo (2*10 M) en la
-4

2.- Registrar los datos experimentales de la curva patrn en la tabla 2.

3. Algoritmo de clculo Determinar la concentracin del I2 en las mezclas Tabla 2. C1V1 = C2 V2 C2 = C1V1 / V2

1. 2. 3. 4. 5.

( ( ( ( (

)( )( )( )( )(

) ) ) ) )

TABLA 2. Absorbancia a diferentes concentraciones molares de I2 Mezcla 1 2 3 4 5 I(0.002M)(mL) 10 8 6 4 2 HO (mL) 0 2 4 6 8 I (mol/L) 0.002 0.0016 0.0012 0.0008 0.0004 Absorbancia 1.589 1.245 0.917 0.595 0.292

A6. ELABORACIN DE GRFICOS 1) Trazar la grfica Absorbancia vs. (Espectro)

Absorbancia vs Longitud de onda

1.8 1.6 1.4 Absorbancia 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 . 100 200 300 (nm) 400 500 600 Series1

2) Trazar la grfica Absorbancia vs. Concentracin (Curva patrn)

Absorbancia vs Concentracin
1.8 1.6 1.4 Absorbancia 1.2 1 Absorbancia vs Concentracion Linear (Absorbancia vs Concentracion)

y = 811x - 0.0456 R = 0.9995

0.8
0.6 0.4 0.2

0
0 0.0005 0.001 0.0015 0.002 0.0025 Concentracin (mol/L)

A7. ANLISIS DE RESULTADOS.

1) A qu longitud de onda se localiza el mximo de Absorbancia de la disolucin de yodo 4 2x10 M? En este caso se localizo en 370 nm 2) Qu longitud de onda empleaste para construir la curva patrn y porque? 450 nm, ya que es donde la Absorbancia empieza a mantenerse constante 3) Qu representa la pendiente de la grafica de la curva patrn?

4) Qu relacin presenta la Absorbancia con la concentracin en la curva patrn? La concentracin es directamente proporcional a la Absorbancia, es decir, si aumenta la concentracin, tambin aumenta la Absorbancia. A8. CONCLUSIONES.

(Merino Gonzlez Arturo) En esta prctica se pudo aprender que el anlisis espectrofotomtrico nos ayuda a saber o a predecir cmo est constituida la materia y nos puede dar una interpretacin de cmo es la estructura interna de la misma. En esta prctica se construyo una curva patrn para una disolucin de yoduro de potasio, que ser utilizada en el siguiente experimento. Mediante esta curva se pudo determinar que a la longitud de onda de 450nm la absorbancia se mantuvo constante, esto nos quiere decir que en esta longitud de onda es donde retuvo ms la radiacin que se le hizo recibir a diferentes longitudes de onda. Tambin se aprendi que al obtener la absorbancia alta, la concentracin de la sustancia a estudiar tambin va a ser alta, en pocas palabras la absorbancia es directamente proporcional a la concentracin.
A9. MANEJO DE RESIDUOS Agua.- Se van a la tarja. Yodo.- Se van a la tarja, debido a que est demasiado diluido.

A10. BIBLIOGRAFA Conceptos de fsica, Hewitt P. G., Limusa, 1997 Fisicoqumica, Castellan G. W., Addison Wesley Longman, 2 Edicin, 1987. Fisicoqumica, Keith J. Laidler, John H. Meiser, CECSA, 1a. Edicin, 1997. Fisicoqumica, Ira N. Levine, Mc Graw Hill, 4 edicin, 1996.