INMUNIDAD CELULAR

METODOS DE LABORATORIO Dr. Folch

SEPARACION DE POBLACIONES CELULARES

CENTRIFUGACIN DIFERENCIAL a) b) c) d) Linfocitos Polimorfonucleares neutrfilos Monocitos Eosinfilos y basfilos

ESTUDIO DE SUBPOBLACIONES LINFOCITARIAS

Leucocitos totales: CD-45 Linfocitos B: CD-19, Igs de membrana Linfocitos T: CD-3 Linfo. Helper / hiper.retardada CD-3, CD-4 Linfo. Citotxico CD-3, CD-8 Clula NK: CD-56, CD-16 Clula NKT: CD-56, CD-3 Clula madre: CD-34 Macrfagos: CD-14 Otras: CD-4, CD25, FoxP3

SEPARACION DE POBLACIONES CELULARES

SEPARACION INMUNOMAGNTICA CITOMETRA DE FLUJO (SORTING)

IMMUNOBEADS

Perlas magnticas pueden ser separadas

SEPARACION DE POBLACIONES CELULARES

SEPARACION INMUNOMAGNTICA CITOMETRA DE FLUJO (SORTING)

Un esquema de citometra

citmetro

Clulas CD-3, CD-4 positivas

Medicion de subpoblaciones

Un ejemplo de citometra de flujo

Qu nos pueden decir las subpoblaciones celulares?

inmunodeficiencias capacidad de responder enfermos de Ca cap. de respuesta inmunosuprimidos

en pacientes con linfomas o leucemias permite su tipificacin

Pruebas funcionales
Prolifercin celular Citotoxicidad

Activacin de linfocitos:una forma de evaluar su capacidad funcional

Proliferacin Medicin de citoquinas Medicin de Ca intracelular Expresin de IL 2-R CUANDO SE PIDE?

Citotoxicidad
Linfocitos T CD-8 Clulas NK y NKT Clulas macrofagicas y otras (ADCC)

Apoptosis: una forma de morir

Fragmentacion del DNA Medicin de anexina V Determinacin de caspasas

Significado biolgico de la Apptosis

Fragmentacin DNA nuclear

Clula apopttica

Produccin de citoquinas

RT-PCR Microarrays Elisa Ensayo biolgico Tincin intracelular

microarray

Tincin de citoquinas intracitoplasmticas

Inmunidad celular natural

Neutrfilos
Fagocitosis

Actividad microbicida reduccin de azul de nitrotetrazolium quemiluminiscencia

Eosinfilos
Monocitos

generacin de LTC4, ensayo de unin superoxido

fagocitosis

actividad microbicida produccin de citoquinas (monoquinas)

El neutrofilo

Neutrofilo y mecanismos de ataque a patgenos

Reaccin de azul de Nitrotetrazolium

Emisin de luz