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  • Métodos para Cuantificar La Glucosa Plasmática

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    Alan Alvarez
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    Este documento describe tres métodos para cuantificar la glucosa plasmática: el método de Folin-Woo, el método de ortotoluidina y el método enzimático. El método de Folin-Woo y el método de ortotoluidina se consideran obsoletos debido a varias desventajas como la inclusión de otras sustancias no glucosa y efectos cancerígenos. El método enzimático actual es más específico y cuantifica la glucosa midiendo la formación de un compuesto coloreado a través de una reacci

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    Métodos para cuantificar la Glucosa plasmática

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    Métodos para Cuantificar La Glucosa Plasmática

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    Este documento describe tres métodos para cuantificar la glucosa plasmática: el método de Folin-Woo, el método de ortotoluidina y el método enzimático. El método de Folin-Woo y el método de ortotoluidina se consideran obsoletos debido a varias desventajas como la inclusión de otras sustancias no glucosa y efectos cancerígenos. El método enzimático actual es más específico y cuantifica la glucosa midiendo la formación de un compuesto coloreado a través de una reacci

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    Mtodos para cuantificar la Glucosa plasmtica

    Alan Sal lvarez Suarez Gpo: 605

    2/28/2012
    Pruebas metablicas Profesora: Sandra Luz Gonzlez Rivera

    Mtodo De Folin-Woo:
    Objetivo: Detectar y cuantificar glucosa en una muestra biolgica. Utiliza un filtrado de cido tngstico de sangre total, que se calienta con una solucin de cobre, con reduccin de los iones cpricos a cuprosos.Los iones cuprosos son entonces medidos fotomtricamente (colorimtricamente) por la adicin de un exceso de cido fosfomolbdico para formar azul de molibdeno. V.N. = de 80 a 120 mg / 100ml Desventajas: 1. La mayor objecin que se hizo a este mtodo fue su inclusin del 15 al 30% de sustancias sacaroideas que no son glucosa. 2. La cantidad de xido cuproso formado por cantidades crecientes de azcar no aumenta con estricta proporcionalidad, adems, este xido cuproso tiende a reoxidarse cuando est expuesto al aire en suspensin caliente, a eso se debe la forma de los tubos de Folin-Wu con una estrechez seguida por ensanchamiento y adems la precaucin de no agitarlos durante la reaccin para evitar la reoxidacin. 3. Una tercera objecin al resultado, reside en la inestabilidad colorimtrica del azul de molibdeno. 4. Por lo anterior este mtodo dej de emplearse aproximadamente en los aos 60s.

    Mtodo de ortotoluidina:
    Objetivo: Detectar y cuantificar glucosa en una muestra biolgica. Al suero o plasma se aade ortotoluidina disuelta en cido actico glacial y se calienta en bao de agua hirviendo. El color verde estable que forma se mide por medio del espectrofotmetro. V.N. = 60 100 mg / 100ml Desventajas: 1. Mtodo que data de 1959. 2. Se han demostrado sus efectos cancergenos. 3. Durante el calentamiento se eliminan vapores txicos por lo que es necesario usar campana de extraccin. 4. Los reactivos al contacto con la piel producen quemaduras, ya que contienen cido actico a concentracin elevada, y por lo tanto son corrosivos. 5. Interfieren la galactosa y manosa y en sus resultados elevados la solucin final exhibe turbidez con lo cual pierde linealidad mtodo. 6. Por todo lo anterior este mtodo tambin se considera obsoleto. Ventajas: Tienen la ventaja de ser simples, rpidas y poco onerosas.

    Mtodo Enzimtico:
    Objetivo: Detectar y cuantificar glucosa en una muestra biolgica. El mtodo enzimtico se basa en la especificidad de la enzima glucosa oxidasa (GOD) por la -D-glucosa. La enzima cataliza la oxidacin de la glucosa por oxgeno molecular dando el D-gluconato y perxido de hidrgeno (H2O2, agua oxigenada). Para detectar y cuantificar esta oxidacin se ocupa una reaccin acoplada. En forma cuantitativa el H2O2 es oxidado por un reactivo comercial (4-aminofenazona (4-AF) y 4hidroxibenzoato), reaccin catalizada por la enzima peroxidasa, para dar como producto un compuesto coloreado rojo (quinonimina) que se cuantifica midiendo la absorbancia a 505 nm.

    >>http://www.monografias.com/trabajos/muestrasang/muestrasang.shtml >>http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=s032529572004000200011 >> www.cursos.ucv.cl/qui34302/X.../Laboratorio3REVGuia03.doc

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