COLEGIO SALESIANO LICEO GUATEMALA. QUETZALTENANGO, QUETZALTENANGO.

PRIONES

HERBERT RENE MALDONADO TOJIN. 5TO. MEDICINA. 26/01/12.

Introduccin En la dcada de 1950, el Pediatra americano Carleton Gajdusel estudi en Nueva Guinea una enfermedad fatal del sistema nervioso que se conoce con el nombre de kuru ("escalofro"). El kuru afecta de modo epidmico a la tribu de los Fore. Gajdusek observ que el kuru no se corresponde con ningn modelo gentico conocido, y apunt al canibalismo ritual practicado por los Fore como causa de transmisin de la enfermedad. En 1959 el veterinario W.J. Hadlow puso de manifiesto las similitudes clnicas y neuropatolgicas existentes entre kuru y el scrapie ("tembladera") de los carneros. En consecuencia, se afirm que ambas enfermedades eran debidas a virus lentos. Asimismo, Gajdusek observ que el kuru es parecido a la enfermedad de Creutzfeldt Jacob (CJD), curiosa demencia presenil descrito a principios del siglo XX. Desde finales de los aos 60 diversas enfermedades se han agrupado bajo la denominacin de Encefalopatas Subagudas Espongiformes Transmisibles (ESET). Esta expresin evoca la evolucin lenta e irreversible de los sntomas que conducen a la muerte, las lesiones del sistema nervioso que las caracterizan (Espongiosis) y la posibilidad de transmisin. A finales de los aos 60 dos investigadores sugieren, de forma independiente, la posibilidad de la existencia de un agente infeccioso carente de cidos nucleicos, capaz de causar y transmitir enfermedades. En 1982, Stanley Prusiner descubri y aisl las "partculas proteicas infecciosas" y les asign el nombre de PRIONES. Prusiner sugiri que una coleccin de enfermedades cerebrales, algunas genticas, algunas infecciosas y otras espordicas, eran todas resultado de un proceso comn. En 1983 se identific la protena de los priones, y se la denomin PrP ("Prion Protein"). Los niveles de PrP se van incrementado a medida que avanza la enfermedad. Actualmente los priones constituyen las nicas partculas vivas que contradicen el gran Dogma Central de la Biologa: "Todas las formas de vida, desde los virus hasta las plantas y los animales superiores, transmiten sus caracteres a las siguientes generaciones a travs del DNA (excepcionalmente RNA)". El flujo de informacin es en todos los casos: DNA mRNA Secuencia Aminocidos Estructura Tridimensional Protenas.

Historia del prion: Aunque resulta explicar en forma sencilla tan fascinante investigacin, la trascendencia del trabajo del Dr., Stanley Prusiner ha consistido en demostrar a la comunidad cientfica que adems de los microorganismos con cdigo gentico como son los agentes que producen enfermedades infecciosas tales como los protozoarios (parsitos unicelulares, las bacteria, los hongos, y los virus existen otros elementos inertes, no vivos, ultra microscpicos, que producen enfermedades transmisibles y mortales del sistema nervioso central conocidas como encefalopatas espongiformes. Esos elementos son priones. La increble historia del descubrimiento de los priones empieza cuando el Dr. Prusiner era residente en neurologa de la Escuela de Medicina de laUniversidad de California, perdi en 1972 a un paciente que padeca la enfermedad de Creutzfeldt Jacob y desde entonces despert su curiosidad. Al revisar la literatura cientfica encontr que la enfermedad que afecta a las cabras y ovejas conocida como "scrapie", la enfermedad de Creutzfeldt Jacob y la enfermedad del kuru o "muerte de la risa" se transmitan a travs de la inyeccin de extractos de cerebros enfermos en el cerebro deanimales sanos. Estas infecciones se atribuan a un virus lento, que nadie haba conseguido aislar. Prusiner tambin encontr en la bibliografa un trabajo del Dr. Tikvad Alper y colaboradores del Hospital Hammersmith de Londres, quienes haban descubierto que el agente infeccioso causante de la enfermedad "Scrapie" o "prurito lumbar" en la ovejas y cabras no contena ADN ni ARN. El agente infeccioso suele degradarse por radiaciones ultravioleta o ionizantes. Cuando los cidos nucleicos de los extractos retenan su capacidad transmisora del prurito lumbar. Si la entidad careca de ADN o ARN, resultaba evidente que no se trataba de un virus o de cualquier otro tipo conocido de agente infeccioso, todos los cuales contienen material o sea ADN o ARN. De que agente se trataba?. Los investigadores dejaron volar la imaginacin, pero nadie aport una respuesta slida. Entonces el Dr. Prusiner instal su propio laboratorio en la Universidad de California en San Francisco, se propuso resolver el misterio. Ocurra en 1974. El primer paso que realiz fue de carcter mecnico, consista en purificar el material infeccioso de los cerebros de animales afectados por prurito lumbar y analizar su composicin. La tarea result ser agobiante; muchos lo haban intentado en el pasado, sin xito. Para 1982 el Dr. Prusiner y colaboradores haban hecho algunos progresos, produciendo extractos de cerebro de hmster construidos casi exclusivamente por material infecciosos. haban sometido tambin los extractos a una serie de pruebas que revelaran la naturaleza del componente activo. Todos estos resultados apuntaban hacia una conclusin desconcertante; el agente infeccioso del prurito lumbar (y quiz de enfermedades afines), careca de cido nucleico y estaba constituido sobre todo, si no exclusivamente por protenas. No habr ADN ni ARN, pues lo mismo que Alper, comprobaron que los procedimientos degradantes de cidos nucleicos no redujeron la infectividad. se saba que la protena si era componente esencial porque las tcnicas desnaturalizadoras de protenas mermaban la eficacia infeccin. As acuo el Dr. Prusiner para este tipo de vector el trmino "Prion patolgico" (Partculas protenas infecciosas), que lo distinguiera de virus, bacterias, hongos, y otros agentes patgenos conocidos. -Carlton Gajdusek obtuvo el premio Nobel en 1957 por demostrar la etiologa infecciosa del Kuru, e introducir medios para el anlisis inicial del agente causal.

-El neurlogo norteamericano Stanley Prusiner, recibi el da Martes 7 de Octubre de 1997, el mximo galardn de investigacin mdica; el Premio Nobel de Medicina, el cual consider como una reivindicacin a su trabajo de mas de veinte aos frente al escepticismo con que fue recibido en un principio por la comunidad cientfica. Desarrollo En la decada de 1950, el doctor Carleton Gajdusek estudiaba en Nueva Guinea una enfermedad fatal del sistema nervioso que se conoce como Kuru (escalofrio) esta enfermedad afectaba a una tribu canibal llamada Fore, lo interesante de todo esto era que la enfermedad no correspondia con ningun modelo anteriormente estudiado (ya sea virus, bacteria) especialmente en la transmisin de la enfermedad. Al paso del tiempo en 1959 el veterinario Wj. Hadlow puso de manifiesto las similitudes entre el Kuru y el Scrapie (tembladera) de los ovinos, y ms interesante aun estas enfermedades tenian similitudes con la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob CJD (Creutzfeldt-Jakob dissease) una curiosa demencia presenil que se presentaba en la poblacin humana a principios del siglo XX. De manera ms importante en el reino unido estaba ocurriendo un extrao mal al ganado Bovino , al parecer los animales estaban sufriendo daos de tipo nervioso por un agente infeccioso no convencional (Encefalopatia espongiforme) vacas locas. Todas estas patologas convergen en un mismo ente infeccioso EL PRION. Estos agentes patgenos formados por una protena ( protena del prin o PPr ) Producen entre otras, la enfermedad de las "vacas locas" o encefalopata bovina espongiforme. Esta protena se acumula en el cerebro de animales enfermos , dando lugar a la estructura esponjosa de la corteza cerebral que da nombre a la enfermedad. El Prin, protena codificada por un gen celular, presenta dos isoformas: normal (PrP) y anormal (PrPcs) o infecciosa. La protena del prin normal tiene una secuencia de aminocidos (estructura primaria) idntica a la protena de prin patgena. La diferencia entre las dos recae en la estructura secundaria y terciaria, o sea, en su plegamiento. En humanos, el gen que codifica para PrP se ha localizado en el brazo corto del cromosoma 20. Schnittger determin que dentro de la regin 20p12-pter, el locus es pter-PRP-SCG1. El gen completo ha sido secuenciado y se ha visto la secuenciacin para la proteina Prp. La forma de propagacin del carcter infeccioso se debe a una reaccin en cadena cuando una proteina patogena (PrpCs) (rica en estructura 2ria lminas beta) induce a una cambio configuracional a una proteina sana Prp. Este cambio de configuracin es crucial, ya que las protenas con lminas beta son muy resistentes a las enzimas proteolticas, al calor y no se disuelven en agua. Pero sobre todo, la protena alterada tiene una caracterstica nica: interacciona con una molcula de protena normal, le cambia la conformacin y la hace capaz de convertir las estructuras de ms protenas normales. Ah radica el poder infectivo de los priones. Ya producida la protena anmala, su contacto con las cadena PrP, modifica a estas ltimas y el proceso se amplifica de manera exponencial. PrPsc se combina con Prp y produce dos molculas PrPsc, en un segundo ciclo las dos molculas de PrPsc de combinan con PrP y producen cuatro molculas de PrPsc, y as sucesivamente. La presencia de PrP parece ser indispensable, y de

hecho, modelos carentes o nulos de PrP ( ratones transgnicos knockout) inoculados con material cerebral infectado con scrapie no desarrollan la enfermedad.

Proteina sana PrP ;Proteina patgena PrPsc ; Induccin al cambio de estructura Es importante esclarecer las diferencias entre los patogenos conocidos y los priones para darnos cuenta que estos carecen de acidos nucleicos (DNA y RNA) macromolecula fundamental en la replicacin en donde todas las formas de vida incluida los virus desde bacterias plantas y animales transmiten sus caracteres a las siguientes generaciones a travs de algun acido nucleico. Cronologa 1920. Creutzfeldt describe por primera vez un caso de CJD. 1921. Jackob describe CJD en tres pacientes. 1938, J. Cuill y P.L. Chelle demuestran que scrapie es transmisible. 1947. Primera descripcin de TME en Wisconsin. 1957. C. Gajdusek y V. Zigas describen por primera vez el kuru,. Gajdusek propone que el kuru se trasmite a travs del canibalismo. 1959. Hadlow pone de manifiesto la similitud entre el kuru y el scrapie. 1965. Por primera vez se baraja la posibilidad de la existencia de molculas replicativas independientes de los cidos nucleicos. 1966. C. Gajdusek y M. Alpers logra transmitir el kuru al chimpanc. Hiptesis del "virus lento". 1967. T. Alper comprueba la resistencia del agente infeccioso a la radiacin ultravioleta 2540 A. 1968. C. Gajdusek transmite la CJD a chimpancs. 1970. Jacques Monod expresa categricamente el paradigma fundamental de la Biologa Molecular. 1976. Cartelon Gajduse recibe el Premio Nobel de Medicina. 1978. Lura Manuelidis transmite CJD o roedores. 1981. GSS es transmitido a primates. 1982. S. Prusiner pblica su hiptesis del agente infeccioso de naturaleza exclusivamente proteica. Creacin del concepto de prion. 1985. El gen de PrP se halla en todas las especies afectadas por priones. 1986. Primeros casos istrogenos de CJD en Francia. Primera descripcin de EUE.

1988. Demostracin del origen alimenticio de la epidemia de BSE. 1990. Descubrimiento de FSE. 1994. Diriger descubre partculas desconocidas al microscopio electrnico. 1995. Manuelidis disminuye la infecciosidad del agente CJD mediante Gdn-HC1 6 M. Constata adems su resistencia a SDS 1 %. 1996. El 20 de marzo, Stephen Dorrel, secretario de Estado de Sanidad en el Reino Unido, hace referencia a la posible transferencia de BSE al hombre. Definicin de Prion Prion es una protena normal que se encuentra, formando parte estructural de las clulas del sistema nervioso central; forma tridimensional es patgena, porque produce enfermedades conocidas como encefalopatas espongiformes en humanos y animales; en el humano provoca la demencia El prion patgeno del scrapie se simboliza as: PrPsc (prion protena scrapie), sta expresin designa las molculas de protena que constituyen los priones de todas las enfermedades semejantes al scrapie que se dan en animales y en el hombre. Fisiologa y Patologa Los priones son gentes que puede filtrarse y pueden causar enfermedades transmisibles, pero por lo dems no se adaptan a la definicin estndar de los virus, a diferencia de los virus convencionales, no poseen cidos nucleicos, no provocan respuestas inmune y se muestra extremadamente resistentes a la inactivacin por el color a 80 C, los desinfectantes y la radiacin. Los priones atraviesan los filtros que bloquean el paso de partculas mayores de 100 nm, y desde luego transmiten la enfermedad. estos agentes se acumulan en gran concentracin en rganos como el cerebro. Despus de periodos de incubacin muy largos, estos agentes causan lesin delsistema nervioso central (SNC), que a encefalopata espongiforme, recibe este nombre porque el encfalo del paciente se llena gradualmente de huecos (vacuolas) dando la apariencia de una esponja. El periodo de incubacin prolongado, que puede durar 30 aos, en el hombre ha hecho difcil el estudio de estos agentes. Cabe resaltar, que los priones se le estudia dentro del campo de la virologa, considerndosele como virus lentos no convencionales, por su tamao pequea (menor de 100 nm), peso molecular de 27000 a 32000 daltons y por ser una protena patgena, no se puede estudiarle en otro capitulo por separado como "protena patgena" porque no se puede responder a la pregunta: Cmo puede una protena que no posee material gentico dar lugar a una enfermedad infecciosa cuando se ingiere?, sin embargo, el Dr. Prusiner ha sugerido diversos mecanismos mediante los que una protena infecciosa puede incluir que se vuelvan infecciosas las copias de una protena normal; el detalle de uno de los mecanismos se tratarn ms adelante en conformacin biofsica de los priones lo cual permitir estudiar al prion en otro capitulo denominndose: "Prion protenas patgenas". Hipotesis hipotesis de hipotesis.

Mediante el uso de tcnicas de DNA te combinante, se clor el gen que codifica la principal protena del prin del cerebro del criceto. El gen y su mRNA correspondiente que existe en el tejido cerebral de borregos normales e infectados con scrapie. 1ro.- Scrapie es un virus convencional con un genoma de cido nucleico muy pequeo que no se ha podido identificar. 2do.- El agente infeccioso es una molcula pequea de RNA no codificante que se fija a la protena prin con elevada afinidad y cambia su conformacin de una forma de autopropagacin a otra patolgica. 3ro.- La protena prin es por s misma el agente infeccioso que induce la sntesis de enzimas modificante postranslacin que convierte una protena normal a la forma prin patolgica. De los 3 hiptesis tericos mencionados el tercero que mas aceptado, en la que el Dr. Prusiner y colaboradores lo demostraron. Hipotesis de hipotesis: Despus de que fue aceptado la tercera hiptesis por Prusiner, formulo una nueva hiptesis cuyo enunciado es: El organismo del ser humano y los animales poseen un gen que comanda la sntesis de una molcula de protena normal en las clulas: El prin (Pr P = prin protena), pero cuando este gen normal en el ADN muta, el gen anormal manda un mensaje gentico distorsionado sintetizndose en las clulas un prin protena patgeno; que se denomina Pr Psc. Al examinar muestras de extracto de cerebro de animales con prurito lumbar el Dr. Prusiner y colaboradores observ que el prion del prurito lumbar contena una sola protena al cual le dio el nombre de Pr P ("protena del prin") En 1984 se identificaron de 15 aminocidos en un extremo de la Pr P. para acotar esa secuencia corta de aminocidos contaron con la ayuda de Leroy E. Hood. El conocimiento de la secuencia permiti construir sondas moleculares o detectores, capaces de indicar si las clulas de mamferos transportaban el gen de la Pr P. con sondas producidas por el equipo de Hood. Bruno Oesh demostr que las clulas de Hmster portaban un gen para la Pr P. casi al mismo tiempo Bruce Cheseboro prepar sus propias sondas y estableci que las clulas del ratn tambin albergaban ese gen. Se aisl el gen y se estableci que no resida en los priones si no en los cromosomas del hmster, ratn, hombre y otros mamferos. y lo que revesta mayor inters: se observ que la mayora de las veces estos animales producen Pr P sin que desarrollen la enfermedad. entonces se demostr que la Pr P se presenta bajo dos formas una causante de la enfermedad y otra inocua. Degradacion por proteasas: La clave decisiva que la resistencia que la PrP encontrada en los cerebros infectados opona a la degradacin por proteasas, enzimas celulares. La mayora de las protenas de las clulas se degradan con bastante facilidad, por tanto presiones sospecho que exista una forma de PrP normal que debera de ser susceptibles de degradacin. Ronal A. Barry, identific esta forma hipottica, sensible a proteasas, quedaba pues claro que la PrP causante del prurito lumbar era una variante de una protena normal. En muchos ejemplos humanos, las enfermedades afines del prurito lumbar aparecan ocurrir sin un contagio previo, en algunas familias tienen visos de heredarse (Los cientficos saben hoy que

al veoledor del 50% de las enfermedades prinicas son familiares y afectan a la mitad de los componentes). En 1988 se obtuvo la primera prueba de enfermedades prionicas. Prusiner clon en gen de PrP de un moribundo que padeca la enfermedad de Gerstman - Straussler - Scheiaker afeccin que le venia de familia. Al comparar su gen con se encontr una leve anomala una mutacin puntual. El paciente agonizante presentaba un par de bases sustituido por otro (uno entre ms de 750). El cambio haba alterado la informacin del Codon 102, que reemplazaba el aminocido prolina por la lamina en la PrP. Con la ayuda del equipo de Tiun J. Crow y Yurg Ott, se descubro dicha mutacin en genes de un gran numero de individuos con la enfermedad de Gerstmann Straussler - Scheinke, y demostraron la significacin estadstica de la elevada incidencia en las familias afectadas. En otras palabras, establecimos la vinculacin gentica entre la mutacin y la enfermedad, lo que respalda la hiptesis que se atribuyo a la causa de la mutacin mencionada. El descubrimiento de las mutaciones permiti desechar la posibilidad de que un cido nucleico acompaarse al prin y dirigirse su multiplicacin. Se crearon ratones transgenicos que portasen un gen de PrP mutado. Si la presencia del gen modificado en estos animales comportara la aparicin del prurito lumbar, y si el tejido cerebral de los animales transgenicos causara el prurito lumbar en animales sanos; se podra afirmar entonces que la protena codificada por el gen mutado haba sido la nica responsable de la transmisin de la enfermedad. Con la colaboracin de Karen Hsiao. Dar Lene Groth y Stephen J. De - Armond, Prusiner demostr que el prurito lumbar se genera y se transmite de ese modo. Considerados en su conjunto, los estudios sobre transmisin ofrecen una argumentacin bastante convincente de que, despus de todo, los priones representan una clase de agentes infecciosos sin precedentes, en cuya composicin interviene slo una protena modificada perteneciente a mamferos. Esta conclusin viene avalada por la bsqueda tenaz de un cido nucleico especfico del prurito lumbar, que no ha aportado ningn dato que vincule el material gentico a los priones. Prion y su conformacin biofsica: Las protenas contenidas en el interior de las clulas (citoplasma) son elementos qumicos que caracterizan el comportamiento especfico normal de cada tipo o clase de clula de un organismo vivo y que su sntesis se debe al "ensamblaje" de aminocidos controlado por los genes. La clase de protenas se debe al ensamblaje de 20 aminocidos, lo que permite la gran variedad de protenas que hay en las clulas. Las protenas se forman de la siguiente manera: Los aminocidos se unen qumicamente por la seleccin especfica que de ellos hace el mensaje gentico del ADN por medio de ARN que es el "obrero" ensamblador dentro de la clula, segn el dogma de la gentica molecular: ADN ----- ARN --------- protena. El ensamblaje o la unin de los aminocidos lo realiza un ARN especializado llamado Acido ribonucleico de transferencia (ARNt), formando "enlaces peptdicos" entre el radical amino de un aminocido y el radical cido (carboxilico) de otro aminocido

Es as como el mensaje del ADN puede formar cadenas enormes de aminocidos enlazados. Al unirse dos aminocidos forman una molcula llamada dipptido; si se unen tres aminocidos, un tripptido; en caso de ser cuatro, un tetrapptido y as sucesivamente hasta formar largas cadenas de aminocidos unidos (polipptidos). Estos ltimos, debido a ciertos enlaces de aminocidos azufrados conocidos como enlaces disulfuros y otros enlaces llamados de hidrgeno hacen que esta cadena de aminocidos se doble y se retuerza sobre s misma o se extienda y aplane, adoptando formas tridimensionales conocidas como hlice alfa y lmina beta. La forma final de las protenas (estructura secundaria y terciaria) no se forma espontneamente; se ha demostrado recientemente que se necesita de unas protenas denominadas tutores o tutores moleculares stas ayudan al plegamiento de otras protenas. Los tutores moleculares proporcionan una estructura donde tienen lugar el plegamiento correcto de las protenas, se unen a una protena en una etapa temprana y evitan plegamientos intiles. El hombre y todos los mamferos codifican una protena PrPc (Protena prion celular) es producida normalmente en el cerebro de los individuos sanos. El prototipo de estas protenas patgenas es el agente del scrapie, que ha sido adaptado para infectar al hmster. Los animales infectados muestran fibrillas asociadas con el scrapie (FAS) en el cerebro. La FAS son infecciosas y contienen el prion. El prion carece de Acido nucleico detectable y consiste en agregados de una glucoprotena hidrofbica resistente a las proteasas, que en el caso del scrapie se denomina Pr Psc (protena prion del scrapie), como se manifest anteriormente el hombre y los animales codifican una protena PrPc (protena prion celular) ntimamente relacionada con la PrPsc en cuanto a la secuencia de aminocidos, pero diferente en muchas de sus propiedades. Las diferencias en las modificaciones post traduccin hacen que dos protenas se comporten de modo diferente. Los amiloides (fibrillas), se encuentran en vesculas citoplasmticas y es secretada por las clulas. La PrPc normal es sensible a las protesas y aparece en la superficie celular. Stanley Prusiner propuso un mecanismo mediante lo que una protena infecciosa puede incluir que se vuelvan infecciosas las copias de una protena normal , uno de estos mecanismos implica en la superficie celular y hace que sea procesada en Pr Psc, que despus se agrega para formar placas similares a las amiloides en el cerebro. La clula responde la Pr Pc consumida y el ciclo contina. El hecho de que esas placas se compongan de protenas del husped explicara la falta de respuesta inmune frente a estos agentes en los pacientes con encefalopata espongiforme . Cuando la Pr Psc que es infecciosa se una a una Pr Pc normal da lugar a dos Pr Psc. Segn esto, una produce dos, dos producen cuatro, cuatro producen ocho y as sucesivamente; entonces la acumulacin de protenas prion infecciosa sigue una progresin geomtrica de razn 2 elevado a n (2n), donde es el nmero de PrPsc. Cabe resaltar que en el hmster protena prion celular, es normalmente codificado por un gen designado gen Pr P, situado en el brazo corto del cromosoma 20. PROPIEDADES FISICAS , QUIMICAS Y BIOLOGICAS.

Propiedades Biolgicas: Algunas Propiedades Fsicas y Qumicas de los Agentes Infecciosos no Convencionales Resistencia a: Formaldehdo EDTA Proteasas (Tripsina, pepsina) Nucleasas (Ribonucleasas A y III, Desoxiribonucleasa I) Calor (80C) Radiacin ultravioleta (2540 A) Invisibles al microscopio electrnico. Largo periodo de incubacin (meses, aos, dcadas) No producen respuestas inflamatoria Patologa crnica progresiva Fatal en todos los casos Carecen de estructuras visibles al microscopio electrnico No antignicos Carecen de cuerpos de inclusin Presencia de cido nucleico no Demostrada

Propiedades Clsicas de los Agentes Infecciosos no Convencionales: Filtrables con poros 25 nm o 100 nm Periodo de adaptacin a nuevos hospedadores Control gentico de la susceptibilidad de algunas especies Existencia de distintas cepas 10. Las Formas PrPc y PrPsc : PrPc posee una estructura en hlices alfa (42 % hlices alfa, lminas beta ), mientras quePrPsc presentan gran proporcin de lminas beta ( 43 % lminas beta, 30 % hlices alfa). datos obtenidos por FTIR. PrP consta de 254 aminocidos en ratones y hmsters y de 253 en el hombre. La protena PrP est muy conservada a travs de muchas especies, incluyendo humanos, ovejas, ratones, hamsters, drosophila y bovinos. En su forma normal no infecciosa, PrP es una glicoprotenas hidrofbica soluble en presencia de cantidades significativas de solutos solubles no polares. En ratones, concentraciones excesivas de PrPc pueden acarrear neurodegeneracin y destruccin de msculos y nervios perifricos.

PrPc se presenta como una protena anclada a la superficie de las neuronas por medio de una molcula de GPI, y constituye un productoampliamente expresado en las clulas. Los mRNA para PrP se han descubierto en diversos rganos como el bazo, msculo esquelticos o pulmones. Pero generalmente con ndices de 10 a 50 veces inferiores que en el cerebro. En el SNC, PrP es esencialmente neuronal, situndose sobretodo en los botones sinpticos. An se desconoce la funcin que desempea la PrP normal en las neuronas, pero su distribucin hace sospechar que podra estar implicada en el proceso sinptico. Fuera del SNC, PrP se encuentra en los epitelios secretores, lo cual podra tener incidencia en la transmisin por va oral. Segn el trabajo de D.R. Borchelt, A. Taraboulus y S.B. Prusiner, publicado, en 1992, PrPc es sintetizada en el RER, modificada en el aparato de Golgi y transportada a la superficie celular. Propiedades que caracterizan a la forma patgenas de PrP :

Resistencia parcial a las proteasas. En ocasiones se degrada y los fragmentos se agregan formando placas amiloides extracelulares. Purificada por centrifugacin, al microscopio electrnico, presentan aspectos de fibrillas o bastoncillos. Estas agregaciones se denominan SAF ( Scrapie Associated Fibrils or Prion Rods ) y corresponden a polmeros de PrPsc.

11. Conversiones De Pr Pc EN PrPsc Para justificar la conversin de PrPc en PrPsc se han propuesto diversas hiptesis: 12. Diferencia entre prin normal (Pr Pc) y prin anormal (Pr Psc).

Segn la teora pura del prion de S.B. Prusiner, habra una interaccin directa entre la molcula de PrPc y una de PrPsc .PrPsc inducira la conversin de PrPc en una segunda molcula de PrPsc, copia identificada de la primera. Tambin se ha propuesto que la modificacin estructural podra ser el resultado de un proceso de polimerizacin en cadena, iniciando por la PrPsc inoculada que actuara como cristal iniciador. An se rebaja la posibilidad de una modificacin qumica post-traduccional, aunque esta no se haya detectado. Tambin se contempla la posibilidad de la existencia de otros elementos ajenos a PrP que en presencia de PrPsc interferiran con PrPc, induciendo su cambio conformacional. Otros investigadores apoyan la intervencin de chaperonas las cuales modificaran el plegamiento de PrPc o de su precursor, concluyendo que estas chaperonas podran desempear un papel importante en la propagacin de la PrPsc de los mamferos, y que determinados niveles de expresin de las chaperonas podran curar las clulas infectadas de priones, sin daar su viabilidad.

13. Enfermedades causadas por priones Las enfermedades de origen prinico reciben la denominacin comn de ENCEFALOPATIAS ESPONGIFORMES - ENCEFALOPATIAS VRALES ESPONGIFORMES SUB AGUDAS

El termino de Encefalotopata espongiforme se refiere a la degeneracin caracterstica de las neuronas y los axones de la sustancia gris cortical. 14. Caractersticas Las enfermedades se confinan al Sistema Nervioso. Se observa vacuolacin de las neuronas, proliferacin e hipertrofia de los astrocitos, placas que contienen amieloide, fibrillas y fusin entre neuronas y clulas gliales adyacentes . Los priones se acumulan hasta alcanzar alta concentraciones en el cerebro. El inicio de la enfermedad va prendida por periodos prolongados de incubacin (meses a dcadas) Seguida de una patologa progresiva crnica (semanas a aos ) Las enfermedades son mortales y no se conocen casos de remisin recuperacin El husped no manifiesta respuesta inflamatoria ni inmunitaria (los agentes no parecen ser antignicos. No se desencadenan la produccin de interfern y no hay efecto sobre la funcin de las B T del husped La inmunosupresin del Husped carece de efecto sobre la patogenia de la enfermedad. Agrupacin de las Enfermedades Enfermedades HumanasKURU.- "Muerte de la Risa"Enfermedad neurolgica progresiva que se observa solo en los nativos Fore de la montaas de Nueva Guinea. Segn investigaciones en 1956 se reportaron 2,500 casos con dicha enfermedad, de lo que se pudo establecer que de la poblacin de hombres, mujeres y nios la poblacin ms sensible a la enfermedad eran las mujeres y los nios en un 80% ; esta enfermedad era transmitida por los rituciles de canibalismo. En 1957, el Kuru fue descrita por Vicente Zigas y D. Carleton Cajdusk, ellos sealaron que los habitantes de esa zona haban adquirido la enfermedad a travs del canibalismo ritual, cuyos integrantes para honrar a sus muertos cumplan con el rito comindose el cerebro (seso) de los fallecidos. Hasta principios de 1960 esta enfermedad ya esta adquiriendo una baja mortalidad debido a que las prcticas de canibalismo (ritual) se est abandonando notablemente La enfermedad del Kuru consiste en ataxia cerebelosa progresiva (afecta al cerebelo) progresiva irrefrenable, temblores disartria y labilidad emocional sin demencia importancia. La enfermedad se va presentar en 3 etapas:- Etapa ambulante.- Transtornos de movimiento, movimientos atetsicos y coreiformes y el enfermo muestra una respuesta de alarma exagerada.- Etapa Sedentaria.- Hay labilidad emocional, con crisis patolgicas de risa, en fase ms avanzada hay demencia. - Etapa Terminal.- El enfermo est totalmente apacible mudo y sin responder nada. La muerte sobreviene por lceras por decbito graves, por neumona aspirativa, habitualmente entre 3 y 12 meses despus del inicio de la enfermedad. Enfermedad de Creutzfeldt - Jacob - encepalopatia espongiforme sub aguda ( ECJ )

Enfermedad del sistema nervioso central por virus lentos no convencionales, progresiva e inevitablemente mortal caracterizada por demencia progresiva, convulsiones mioclnicas, ataxia somnolencia, que afecta a los adultos de mediana edad (clemencia presenil aguda) y produce la muerte en 8 a 12 meses en un 50% (4). Esta enfermedad es de distribucin mundial, aparece como una enfermedad espordica afectando a una persona por milln (60 aos), puede ser hereditaria con herencia autosomal dominante, puede ser y astrgenica se propaga al intentar y tratar algn otro problema mdico, puede presentarse como enfermedad conyugal, de familias, de un paciente (por transplante de cornea, etc.) tambin inoculando el agente infeccioso a un animal chimpancs y ratn. Los sntomas ms frecuentes de esta enfermedad son: - Demencia siempre presente (acompaada con descuido personal apata irritabilidad) - Fatiga rpida, somnolencia, insomnio y otras alteraciones del sueo. - Desorientacin, con alteraciones globales y profundas. - Anomalas de la funcin cortical superior, reflejos palmomenteoneanos y labio fruncido. - Alteraciones cerebelosas, afectacin de la neurona (asta anterior). Parlisis de los nervios craneales (hipocinecia, postura distnica) rigidez en una rueda dentada, temblor y movimientos coreatatosicos. - Alteraciones oculares (diplopia, visin borrosa y agnocia visual.) - La enfermedad conduce a la muerte al cabo de q-12 meses. Habitualmente causada por una neumona que complica el cuadro, entre el 5 y el 10% de los casos pueden presentarse una evolucin de 2 aos. Sndrome de Gertmann - Strauler - Scheinkery e Insomnio fatal familiar Es una enfermedad que se manifiesta por ataxia y otros signos de dao cerebral, es un tipo de demencia hereditaria que va ocasionar dao a nivel del cerebelo. El Insomnio familiar letal, que presenta una demencia muy rara seguida de la dificultad de no conciliar el sueo. Forma de demencia que va ocasionar dao en el tlamo (habiendo perdida de memoria). Ambas afecciones, hereditarias por lo comn, aparecen en la madurez. El insomnio familiar letal - fatal ha sido descubierto recientemente por Elio Lugarest, Rosella Medor y Pierlnige Gambetti. Enfermedad de Alzheimer. Hay algunas semejanzas neuropatolgicas entre la enfermedad E y A y la enfermedad de Alzheimer, incluyendo aparicin de placas amiloides. Es la causa ms frecuente de deterioro mental tanto presenil como senil. Es una enfermedad hereditaria en un 10% con transmisin autsonica dominante. No se ha tenido xito hasta ahora en las transmisin de la enfermedad a primates roedores mediante muestras de pacientes con la enfermedad de Alzheimer. Esa enfermedad se manifiesta con perdida de memoria reciente, falta de concentracin, comprensin del lenguaje y trastornos praxicos y visuoespaciales.

Existe alteraciones del sistema motor en forma mioclonias y rigidez extrapiramidal. Al final el paciente pierde la capacidad depercepcin, de hablar, de moverse quedando en el estado vegetativo. Enfermedades en animales SCRAPIE Se comporta como un rasgo gentico tecesivo en la oveja y manifiesta diferencias notables de sensibilidad en las diferentes razas. La sensibilidad al scrapie transmisible de manera experimental varia entre 0 a cerca de 80% en las ovejas; en tanto que las cabras son sensibles casi el 100% se ha transmitido tambin la enfermedad a macacos en el laboratorio. La transmisin a ratones y cricetos en los que se reduce mucho el periodo de incubacin, ha facilitado el estudio de la enfermedad. Puede recuperarse infectividad de tejidos linfoides tempranamente en la infeccin, pero los ttulos altos del agente se encuentran solo en el encfalo, medula espinal y ojo. Los ttulos mximos de infectividades alcanzan en el encfalo muchos antes de que se producen sntomas neurolgicos. Un aspecto de la enfermedad es el desarrollo de placas amiloides en el sistema nervioso central de los animales infectados. Estas reas representan acumulaciones extracelulares de protenas ; se tien con rojo corzo. Recientemente se purifico el cerebro infectado por el agente de scrapie , una protena designada PrP (P.M. 27000 a 30000) . Se copurifica con el agente infeccioso de scrapie , se agrega y se comporta como amiloide. Se ha encontrado que son infecciosos los preparados que contienen nicamente PrP y no cido nucleico detectable . PrP es codificada por un gen celular ( en el cromosoma 20 en el ser humano). Se encuentran copias de este gen en muchos tejidos normales e infectados. No obstante, la concentracin de PrP de eleva en encfalos infectados conforme se hace resistente a la degradacin. La susceptibilidad gentica a infeccin por scrapie se relaciona con mutaciones en un punto en el gen que codifica PrP. Los ratones alterados genticamente para carecer de PrP son resistentes al scrapie . Aun no hay certeza de que esta protena representa el elemento estructural esencial del agente infeccioso o un producto patolgico que se acumula como resultado de la enfermedad. Encefalopatia Transmisible Del Vison Esta enfermedad es causada por un agente que induce enfermedad clnica y lesiones neurolgicas de la materia gris del encfalo, similares a los scrapie. Tienen tambin un periodo largo de incubacin en el visn infectado de manera natural, posiblemente por va oral. La encefalopatia transmisible del visn representa probablemente una capa del agente del scrapie de la oveja, adquirida cuando los visiones salvajes o de los criaderos se han alimentado de los cadveres de ovejas infectadas. Encefalopatia Espongiforme Bovina Conocida a menudo como enfermedad de " las vacas locas". En los aos 1986 los doctores Gerald A. H. Wells y Jhon W. Wiles del laboratorio veterinario central en Weybridge, Inglaterra descubrieron la enfermedad cuando empez a afectar a las vacas en Gran Bretaa ( Reino Unido ). La fuente de la epidemia naciente de esta enfermedad se relaciono pronto con el suplemento protenico hechos a base de carne y huesos de ovejas muertas infectadas que le servan como alimento para el ganado vacuno. Segn Bradley haba demostrado la existencia de este agente infeccioso en el extremo posterior del intestino delgado del bovino al que se le haba suministrado el agente BSE. En tiempos atrs

se haba credo que esta enfermedad podra ser transmitida de ganado vacuno a hombre, transmisin que no se propago por la barrera de especie que existe entre el humano y el bovino. Aunque existan 2 agentes de BSE en losproductos habitualmente consumidos por el hombre: el msculo esqueltico y la leche de la vaca por la cual no se ha logrado demostrar la infeccin de este animal al hombre. Diarrea Cronica (Alpes Y Ciervos) Causa de transmision de enfermedades por priones. Segn como acten su origen los casos de enfermedades por priones pueden agruparse en tres clases:

Espordicos o dispersos. Hereditarios o familiares. Infecciosas.

La transmisibilidad de scrapie y la BSE en animales y el Kuru y la CID en humanos esta perfectamente establecida. Sin embargo, existen grandes diferencias entre la transmisibilidad obtenida en el laboratorio y la real. As, los casos verificados de transmisin horizontal son excepcionales. La transmisin de los agentes infecciosos de una especie a otra generalmente viene acompaada por una prolongacin del periodo de incubacin respecto de la transmisin de la enfermedad dentro de la misma especie. El scrapie se considero durante mucho tiempo una enfermedad hereditaria convencional , hasta que en 1938. J. Cuille y P.L. Challe demostraron que se trataba de una enfermedad transmisible, al lograr el desarrollar la enfermedad en cabras inoculadas con extractos procedentes de ovejas afectadas. Hoy la posibilidad de transmisin vertical y horizontal (por infestacin de placentas contaminadas), cuentan con firmes apoyos, tras lograrse infectar experimentalmente por va oral a abejas, cabras y ratones. En ratones parece haber evidencias de un control gentico de la duracin del periodo de incubacin y la distribucin anatmica de las lesiones. Como scrapie, TME se ha transmitido experimentalmente por va oral, pero la transmisin materno-fetal aun no ha sido demostrada. En cuanto a la epidemia de BSE, su origen alimentario se demostr en 1988 . La infeccin masiva de las vacas fue debida al consumo, por parte del ganado, de harina de huesos y carne de animales contaminados por el agente de scrapie. Mas de 130,000 vacas han muerto de BSE en el Reino Unido. Recientemente, R. Bradley ha demostrado la existencia del agente infeccioso en el extremo del intestino delgado de bovinos a los que se habia suministrado oralmente BSE. En lo que se refiere a la transmisin de madre a feto aun no se ha demostrado formalmente pero es lgico creer que se puede transmitir. con la epidemia BSE en el Reino, muchas personas se preocuparon ante la, posibilidad de contraer CJD a travs del consumo de carne contaminada. Actualmente aun no hay evidencias de que el hombre sea susceptible al agente infeccioso de BSE, pero si no hay casos demostrados de otros animales (como cerdos y gatos) que han desarrollado encefalopatas espongiformes tras haber consumido carne infectada. El argumento experimental que origino la polmica fue el descubrimiento de lesiones similares a un macaco infectado por BSE y los pacientes muertos de CJD. Sin embargo la barrera de especie hace poco probable la transmisin entre bovinos y humanos, ya que entre ambas las PrP difieren en mas de 30 de las 254 posiciones. los agentes de BSE se han encontrado de dos productos habitualmente consumidos por el hombre : el msculo esqueltico y

la leche (sobre los linfocitos) de vaca. Aunque no se ha podido demostrar la posibilidad de transferencia de encefalopatas espongiformes de vacas a personas, tampoco hay evidencias que garanticen lo contrario. Los investigadores esperan que BSE desaparezca con el cese del aporte de carne infectada a la dieta del ganado, tal como ocurri en el caso del Kuru era transmitida de forma epidmica a travs del canibalismo ritual llevado a cabo por la tribu de los Fore para venerar a la muerte. Su incidencia ha ido disminuyendo desde 1950 con la desaparicin del canibalismo en Nueva Guinea. Las formas familiares representan menos del 10% de los casos conocidos de encefalopatas subagudas espongiformes transmisibles en humanos. Sin embargo estas formas de comportamiento gentico son tambin transmisibles horizontalmente. Las formas espordicas de las ESET humanas comprenden a la mayora de los casos de CJD y algunos casos de GSS. En los pacientes de estas formas espordicas no se han hallado mutaciones a nivel del gen PRP. Durante dcadas, la CJD fue considerada como una enfermedad degenerativa del SNC de etiologa desconocida. Fue C. Gajdusek quien en 1986 demostr que la CJD es transmisible, mediante su transferencia a chimpancs a partir de tejidos humanos. El 90% de los casos de CJD son espordicos y alrededor de un 10% familiares. Unicamente cabe destacar los brotes de CJD que se produjeron en Francia a raz de tratamientos con hormonas del crecimiento procedente de individuos muertos por CJD. Tambin se ha descrito transmisin horizontal de CJD en casos de trasplantes de corneas de donadores con CJD, la enfermedad se manifest 18 meses despus del transplante. La distincin entre CJD, GSS y FFI se ha complicado al descubrirse que la CJD familiar, GSS y FFI son enfermedades autosomicas dominantes debidas a mutaciones a nivel del gen PRP. En un principio se penso que cada mutacin especifica estara asociada con un cuadro cliniconeuropatologico determinado, sin embargo se han hallado gran numero de excepciones a dicha regla. Por ejemplo, la mayora de los pacientes con una mutacin en el codon 102 de PRP presentan ataxia y placas amiloides de PrP y se les suele diagnosticar GSS, sin embargo alguno de los pacientes presentan la demencia caracterstica de la CJD. GSS ha sido transferido a primates y roedores por inoculacin intracerebral y a hmster por insercin del gen anormal PRP ( cromosoma 20 ) en el genoma del animal. Posibles diagnosticos tratamiento y control. En Enfermedades Humanas Kuru..- Las pruebas de laboratorio no aportan datos reveladores. El diagnostico se establece a partir de los cambios espongiformes caractersticos, las placas amiloides y la proliferacin astrocistica en el tejido cerebral. No existe tratamiento para la enfermedad . Actualmente no hay curacin, pero por lo menos esta enfermedad Kuru parece casi se haya evadido. (EJD) .- En diagnostico el LCR, aunque puede contener el agente causal. La TAC cerebral es en general normal pueden mostrar atrofia cerebral o cerebelosa. La RNM demuestra atrofia cortical sin cambios en la sustancia blanca. LA EEG demuestra una desorganizacion de trazados local o generalizada. La (EJD) en todo paciente con demencia rpida progresiva que aparece en la edad media de la vida, acompaada de convulsiones mioclonicas. Si bien no hay prueba diagnosticas especificas, es posible confirmar el diagnostico con el hallazgo de los cambios vacuolares espongiformes tpicos y de la proliferacin astrocitica en el tejido cerebral. En el cerebro afectado se han encontrado placas de protenas amiloides.

En cuanto a su prevencin hay que tener sumo cuidado en la manipulacin de lquidos y otros materiales procedentes de los pacientes en los que se sospecha la enfermedad ( EJD ). Para su control es posible inactivarlo por autoclave durante 1 hora 15 kg / cm 2 , en lugar de 20 minutos, o al empleo de una solucin de hipoclorito al 5 % o de hidrxido sdico 1.0. M.M. los instrumentos deben ser desinfectados por previa esterilizacin. La piel contaminada puede desinfectarse mediante su exposicin a hidrxido de sodio al 4% durante 5 10 min. seguido de un lavado interno con agua. El tratamiento es especifico y sintomtico. ALZHEIMER.- El LCR son normales los cambios inespecificos . El diagnostico definitivo se da por biopsia cerebral de la cual existe tratamiento especifico. En resumen no existe deteccin viral en los tejidos mediante estudio al microscopio electrnico, deteccin antigenica o sonda de cido nucleico. Tambin no existen pruebas serologicas de deteccin de los antgenos vrales. De ah que el diagnostico se efecte en la clnica deba confirmarse por el estudio patolgico del cerebro. Enfermedades en animales. Se procede de igual manera que en las enfermedades humanas por biopsia cerebral y se va a tenerque evitar comer carnes que provengan del ganado vacuno , bovino, caprino infectados, al igual que tambin tenemos que erradicar la fuente epidmica naciente que es un suplemento proteico que se les da al ganado el mismo que esta hecho a base de harina de pescado y huesos de ovejas muertas. Tambin es prescindible la erradicacin de vacas contaminadas con la enfermedad como ocurri en el Reino Unido, mediante el sacrificio de 130 mil cabezas de ganado vacuno. 20. Tratamiento y control Metodos De Inactivacion

Autoclave 121 C Hiperclorito 0.5 5.0 % Fenol 90% Eter Acetona. Permanganato potasico 0.002 M. Urea 6 M. 2- cloroetanol. Cloroformo.

CONCULSIONES 1. Como lo expresa el dasarrollo queda claro que es el reclutamiento la forma en la cual los priones se propagan y que es un sistema muy diferentes a lo de otros seres patgenos, la diferencia queda marcada por una diferencia en la forma de las proteinas .Esto para nosotros es importante a nivel de estudio en biologa celular ya que se refiere directamente a configuraciones proteicas como lo son alfa hlice y beta hoja plegada y nos demuestra lo importante y crucial que son las formas que adquieren los aminoacidos. 2. A medida que nuestro conocimiento avanza podremos entender los fenmenos bsicos que engloban enfermedades mortales como lo son las encefalopatias espongiformes (mal de las vacas locas) e ir formandonos una idea de lo que vendra en un futuro proximo con los cimientos que nos entrega la biologa celular. 3. Entonces debido a la investigacin biblogrfica y al estudio correspondiente los principales objetivos se han cumplido a cabalidad de manera ptima.

COMENTARIOS 1. Las mutaciones en la protena PrP, que dan lugar a enfermedades neurodegenerativas letales, actan reorganizando las propiedades de la superficie de su estructura. Estas alteraciones eliminan los sitios de unin a inhibidores que impiden su transformacin en priones, que son su forma infecciosa, y crean otros nuevos en un lugar diferente de la protena. De esta forma cambian sus redes sociales y su manera de relacionarse con el entorno, lo que puede ser usado con fines teraputicos. Esta es una de las conclusiones de una investigacin en la que ha participado el Consejo Superior de Investigaciones Cientficas (CSIC) y que ha sido publicada en el ltimo nmero de la revista PLoS ONE. 2. Las enfermedades de Creutzfeldt-Jakob, Gerstmann-Straussler-Scheinker, o el Insomnio familiar letal, son enfermedades neurodegenerativas letales de manifestacin tarda que se caracterizan por la aparicin de formas infecciosas de la protena PrP o priones. En las variantes genticas de estas enfermedades la formacin del prion se debe a la presencia de una mutacin, explica la investigadora del CSIC Mara Gasset, del Instituto de Qumica-Fsica Rocasolano. 3. El equipo de investigadores que ha desarrollado el trabajo ha estudiado las propiedades de la protena en su estado nativo, con y sin mutaciones, y ha analizado los efectos comunes que provocan 10 mutaciones patognicas. Los resultados obtenidos podran suponer un paso ms en el camino hacia el desarrollo de posibles tratamientos para retrasar la aparicin de los sntomas de estas enfermedades, destaca Gasse

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