Gua # 1.

Laboratorio Microscopa
Objetivos: . Identificar en un microscopio ptico sus partes y funciones de cada una de ellas . Conocer y definir las Propiedades de las lentes de un microscopio ptico . Adquirir habilidad en el manejo, uso y cuidado del microscopio ptico Contenidos: . Partes de un microscopio ptico . Propiedades de las lentes . Normas de uso y cuidado del microscopio I.- INTRODUCION El holands Antonie van Leeuwenhoek (1632-1723), perfeccion el microscopio usando lentes pequeas, potentes, de calidad, y su artefacto era de menor tamao. Alrededor del 1676 logr observar la cantidad de microorganismos que contena el agua estancada. Tambin descubri los espermatozoides del semen humano; y ms adelante, en 1683, las bacterias. Durante las siguientes dcadas los microscopios fueron creciendo en precisin y complejidad y fueron la base de numerosos adelantos cientficos El ser humano posee el sentido de la vista desarrollado. Sin embargo, no se pueden ver a simple vista cosas que midan menos de una dcima de milmetro. Y muchos de los avances en qumica, biologa y medicina no se hubieran logrado si antes no se hubiera inventado el microscopio. Hay diversas clases de microscopio, como el microscopio simple o lupa, el microscopio ptico, el microscopio de luz ultravioleta, el microscopio electrnico, el microscopio de contraste de fases, el microscopio de polarizacin y otros El microscopio compuesto es el principal instrumento que se utiliza en las observaciones de estructuras celulares y de tipos de clulas II.- PARTES DE UN MICROSCOPIO: Las partes del microscopio son: Sistema Mecnico, Sistema ptico y Sistema de Iluminacin 1.- Sistema mecnico SOPORTE: Mantiene la parte ptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo.

PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin. CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular. REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos. TORNILLOS DE ENFOQUE: Macromtrico que aproxima el enfoque y micromtrico que consigue el enfoque correcto

2.-Sistema ptico La parte ptica es la ms importante y delicada del microscopio. Esta formada por las lentes, objetivos y ocular OCULAR: Lente situada en el extremo superior del tubo cerca del ojo del observador. Est destinado a recoger la imagen dada por el objetivo, de la que origina una imagen aumentada, virtual y derecha Existen microscopios que llevan dos oculares y se denominan BINOCULARES, en estos el examen se realiza en forma ms descansada OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin, en la parte inferior del tubo, montados sobre una pieza metlica que se atornilla al revlver. Estas lentes son convergentes y forman una imagen aumentada, real e invertida del objeto examinado, segn la manera de utilizarse se distingue los objetivos:

-A SECO: En que una capa de aire se interpone entre la lente frontal del objetivo y el preparado. -DE INMERSIN: En que una capa de lquido transparente con un ndice de refraccin superior al aire y en lo posible igual al, vidrio se interpone entre el objeto y la lente frontal del objetivo. El aceite de cedro es el ms utilizado. * ndice de refraccin: Las ondas luminosas transmitidas en el vaco viajan a una velocidad fija. Si atraviesan un medio tal como el aire, agua o vidrio, disminuye su velocidad. Cada medio transmite la luz a una velocidad caracterstica INDICE DE REFRACCIN : VELOCIDAD DE LA LUZ EN EL VACO VELOCIDAD EN EL MEDIO TRANSMISOR La velocidad de la luz en el aire es casi igual a su velocidad en el vaco, y para muchos clculos se usa un I.R de 1.00 (el verdadero valor del ndice de refraccin del aire es 1,00029). El vidrio, con un ndice de refraccin de 1,5, transmite la luz ms lentamente

3.-Sistema de Iluminacin ste est constituido por. CONDENSADOR: es un sistema de lentes que tiene por objeto concentrar la luz en el plano de la preparacin, para obtener una mejor iluminacin de ella DIAFRAGMA IRIS: Sistema de laminillas metlicas que gradan la cantidad de luz que se utiliza en la observacin. FUENTE LUMINOSA: corresponde al manantial de luz que se dirigen al preparado

III.-PROPIEDADES DE LAS LENTES Poder de definicin: Es la capacidad del microscopio de dar imgenes ntidas de contornos precisos. Reside en la correccin de las aberraciones propias de las lentes. Poder de Penetracin: cualidad de las lentes que permite averiguar hasta que lmite podemos reconocer detalles de estructuras situadas en diferentes niveles de la preparacin. Es decir, si en un mismo punto de enfoque es posible ver ntidamente dos o ms estructuras situadas en distintos planos en la preparacin. Esta capacidad vara en forma inversa con el aumento de la lente. Este poder se presta para medir el espesor de la preparacin. Poder de aumento: Al igual que para el microscopio simple es la razn existente entre el tamao de la imagen que el microscopio produce y el tamao del objeto observado. Pero como el microscopio compuesto tiene dos sistemas pticos, capaces cada uno de agrandar la imagen, el aumento total es igual al producto del aumento dado por el ocular y el objetivo Poder de resolucin: Es la capacidad de dar imgenes bien definidas de puntos que se encuentran situados muy cerca el uno del otro. Se entiende por lmite de resolucin L.R la distancia mnima que puede existir entre puntos para que puedan ser definidos como tales. Mientras mayor sea el poder de resolucin (capacidad) menor es el lmite de resolucin (distancia lmite). Ejemplo si dos puntos distan 1 cm uno del otro y yo los veo como un solo punto borroso, tendr menor poder de resolucin que alguien que los distingue por separado perfectamente a una distancia de 0,5 cm entre s.

Este poder no guarda relacin alguna con el poder de aumento de las lentes, si no que depende principalmente de la apertura numrica de la lente

IV MANEJO DEL MICROSCOPIO PTICO 1. Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente. Si el microscopio se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera estar en esas condiciones. 2. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas. 3. Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparacin es de bacterias. 4. Para realizar el enfoque: a.- Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparacin pudindose daar alguno de ellos o ambos. b.- Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparacin con el macromtrico y, cuando se observe algo ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque fino. c.- Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. d.-Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la imagen, enfocar con el objetivo anterior y repetir la operacin desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparacin y por ello es fcil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersin si se observa una preparacin que ya se enfoc con el objetivo de inmersin. 5. Empleo del objetivo de inmersin: a.- Bajar totalmente la platina. b.- Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habr que echar el aceite.

c.- Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino entre ste y el de x40. d.- Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz. e.- Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de inmersin. f.- Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la. a la lente. g. Enfocar cuidadosamente con el micromtrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersin y la preparacin es mnima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande. h.- Una vez se haya puesto aceite de inmersin sobre la preparacin, ya no se puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se manchara de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir la operacin desde el paso 3. i.- Una vez finalizada la observacin de la preparacin se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento girando el revlver. En este momento ya se puede retirar la preparacin de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersin en posicin de observacin. j.-Limpiar el objetivo de inmersin con cuidado empleando un papel especial para ptica. Comprobar tambin que el objetivo 40x est perfectamente limpio V MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES 1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posicin de observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda. 2. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo. 3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de ptica. 4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el microscopio. 5. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pauelos especiales para ptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasar el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el

aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden daar las lentes y su sujecin. 6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macromtrico, micromtrico, platina, revlver y condensador). 7. El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a la preparacin para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se est observando a travs del ocular. 8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn lquido, secarlo con un pao. Si se mancha de aceite, limpiarla con un pao humedecido en xilol. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesin prctica y, al acabar el curso, encargar a un tcnico un ajuste y revisin general de los mismos