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MICROSCOPIA ELECTRNICA
AISLAMIENTO VIH
PRUEBAS DE TAMIZAJE
Deteccin de anticuerpo ELISA, deteccin de Ag p24, aglutinacin y Dot Blot
LISIS CELULAR
PURIFICACIN DE PROTEINAS
INCONVENIENTE: Antgenos con protenas del sistema celular donde fue cultivado, reacciones inespecficas Pruebas confirmatorias
Subtipos
Sensibilidad (%) Especificidad (%) Periodo de ventana (semanas) Valor predictivo positivo al 1% de prevalencia (%) Valor predictivo negativo al 1% de prevalencia (%)
9698
>99.5
> 99.5
> 99.5
ELISA
Persisten resultados falsos negativos por: ventana diagnostica, fase de seroconversion, variabilidad gentica, seroconvertidos atpicos, respuesta retrasada o ausente. Falsos positivos reaccin cruzada con anticuerpos auto-reactivos (Ac anti-mitocondriales, Ac anti-nucleares). Artritis reumatoidea, LES y otras enf. Autoinmunes infecciones recientes Falla renal, fibrosis quistica, enfermedad heptica Multparas, multitransfundidos Receptores de algunas vacunas
PRUEBAS CONFIRMATORIAS
Objetivo es descartar falsos positivos Mayor especificidad Menor sensibilidad Falsos negativos en estadios tempranos
WESTERN BLOT
PRUEBAS CONFIRMATORIAS
PRUEBAS CONFIRMATORIAS
LIA
Tpico
Combinado
PRUEBAS CONFIRMATORIAS
INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA (IFI) Prueba alternativa (OMS), Europa Lneas celulares de monocitos infectados Sensibilidad similar a la del WB, depende de experiencia del evaluador, reactividad cruzada con el VIH-2 RADIOINMUNOPRECIPITACION (RIPA): Laboratorios con experiencia y habilidad de propagar el VIH-1 en cultivos celulares en presencia de aminocidos radiomarcados Lisis y reaccin de protenas virales, para que ocurra unin AgAc si la muestra presenta Ac anti-VIH, Mayor sensibilidad y especificidad que el WB, Utilizado para esclarecer los resultados indeterminados del WB.
CD4 T Cells/mm3
900 800
Clinical latency
Opportunistic diseases
700 600
Constitutional symptoms
1.2 1 2 5 6 7 8 9 10 0 11
12
Weeks
Years
Anticuerpo
Conjugado
Enzima
Sustrato Producto
CULTIVO VIRAL
Especfica, Co-cultivo de mononucleares previamente activados Monitorean con Ag p24, transcriptasa reversa, deteccin de cidos nucleicos virales o por la observacin de sincitios (fusin de al menos dos clulas). Laboriosa, lenta, experiencia. Determina poblaciones latentes y activas
GENOTIPIFICACIN
Tamizaje inicial con ELISA anti-VIH-1 y VIH-2 Reactivo Repetir prueba de tamizaje en duplicado No reactivo Doblemente No reactivo Al menos un duplicado reactivo Realizar prueba suplementaria de anticuerpos antiVIH-1: Western blot o inmunofluorescencia
Indeterminada
No reactiva
Considerar: fase de seroconversin al VIH-1 o infeccin por VIH-2 o reactividad inespecfica** Repetir en > 1 mes o hacer prueba de deteccin directa (PCR, RT-PCR, Ag-p24***)
Solicitar muestra fresca de sangre en EDTA (> 7 mL) para determinar carga viral. Considerar repetir prueba de tamizaje*
Sin evidencia de infeccin por VIH-1. (repetir en 2 meses si hubo exposicin reciente)
Pruebas rpidas
Dot blot
Negativa
Positiva
Pruebas rpidas
OraQuick VIH-1/2
Inmunocromatografa
Pruebas rpidas
Salas de emergencia, Situaciones pre-quirrgicas, Partos de madres con estado de infeccin-VIH desconocido, estudios epidemiolgicos, Programas de prevencin de ETS Accidentes ocupacionales
RESUMEN
Monitoreo ms simple de las cargas virales y de los niveles de CD4 Pases en desarrollo Ningn mtodo es perfecto Seleccin cuidadosa de las pruebas y saber sus limitaciones