OBJETIVOS

Los integrantes del curso deben conocer y familiarizarse con cada uno de los equipos e instrumentos del laboratorio Obtener un conocimiento ms detallado sobre el funcionamiento de los equipos de laboratorio Identificar qu equipo se debe usar para cada compuesto. Encontrar la importancia y forma de aplicacin en nuestra vida profesional lo aprendido en clase.

MATERIALES
Conservador Autoclave Incubadora Horno incubadora Cabina para cultivos Horno pequeo Bao Mara Cmara anaerobiosis Medios de cultivo Materiales de vidrio Cristal violeta Contador de colonias Balanza analtica

Kevin Salazar Aliaga | Laboratorio de Microbiologa

MARCO TEORICO
El laboratorio es un lugar dotado de los medios necesarios para realizar investigaciones, experimentos, prcticas y trabajos de carcter cientfico, tecnolgico o tcnico; est equipado con instrumentos de medida o equipos con que se realizan experimentos, investigaciones o prcticas diversas, segn la rama de la ciencia a la que se dedique. Tambin puede ser un aula o dependencia de cualquier centro docente, acondicionada para el desarrollo de clases prcticas y otros trabajos relacionados con la enseanza. Para ello es necesario estudiar de una manera adecuada la forma de funcionamiento de los equipos como tambin de los materiales que tengamos a disposicin. Ahora haremos mencin a los materiales de laboratorio y equipos que con frecuencia se encuentran en un laboratorio de Microbiologa.

Materiales del laboratorio de microbiologa:

Vasos de precipitado. Pueden ser de dos formas: altos o bajos. Sin graduar o graduados y nos dan un volumen aproximado (los vasos al tener mucha anchura nunca dan volmenes precisos). Se pueden calentar (pero no directamente a la llama) con ayuda de una rejilla.

Desecador. Recipiente de vidrio que se utiliza para evitar que los solutos tomen humedad ambiental. En (2), donde hay una placa, se coloca el soluto y en (1) un deshidratante.
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Embudo de vidrio. Se emplea para trasvasar lquidos o disoluciones de un recipiente a otro y tambin para filtrar, en este caso se coloca un filtro de papel cnico o plegado.

Buchner y Kitasato. El Buchner es un embudo de porcelana, tiene una placa filtrante de agujeros grandes por lo que se necesita colocar un papel de filtro circular, que acople perfectamente, para su uso. Se emplea para filtrar a presin reducida. Su uso va unido al Kitasato, recipiente de vidrio con rama lateral para conectar con la bomba de vaco (normalmente, una trompa de agua).

Cristalizador. Puede ser de forma baja o alta. Es un recipiente de vidrio donde al aadir una disolucin se intenta que, en la mejores condiciones, el soluto cristalice.

Vidrio de reloj. Lmina de vidrio cncavoconvexa que se emplea para pesar los slidos y como recipiente para recoger un precipitado slido de cualquier experiencia que se introducir en un desecador o bien en una estufa.

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Filtro plegado. Se elabora con papel de filtro, sirve para filtrar, se coloca sobre el embudo de vidrio y el lquido atraviesa el papel por accin de la gravedad; el de pliegues presenta mayor superficie de contacto con la suspensin.

Embudos de decantacin. Son de vidrio. Pueden ser cnicos o cilndricos. Con llave de vidrio o de tefln. Se utilizan para separar lquidos, inmiscibles, de diferente densidad.

Tubos de ensayo. Recipiente de vidrio, de volumen variable, normalmente pequeo. Sirven para hacer pequeos ensayos en el laboratorio. Se pueden calentar, con cuidado, directamente a la llama. Se deben colocar en la gradilla y limpiarlos una vez usados, se colocan invertidos para que escurran. Si por algn experimento se quiere mantener el lquido, se utilizan con tapn de rosca.

Probeta. Recipiente de vidrio para medir volmenes, su precisin es bastante aceptable, aunque por debajo de la pipeta. Las hay de capacidades muy diferentes: 10, 25, 50 y 100 ml.

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Pipetas. Recipientes de vidrio para medir volmenes, son de gran precisin. Las hay de capacidades muy diferentes: 0'1, 1'0, 2'0, 5'0, 10'0.............. ml (las ms precisas miden I). En cuanto a la forma de medir el volumen, podemos distinguir entre: graduadas: sirven para poder medir cualquier volumen inferior al de su mxima capacidad; de enrase (slo sirven para medir el volumen que se indica en la pipeta): a su vez pueden ser simples o dobles. La capacidad que se indica en una pipeta de enrase simple comprende desde el enrase marcado en el estrechamiento

superior hasta el extremo inferior. En una pipeta de enrase doble, la capacidad queda enmarcada entre las dos seales. Si el lquido no ofrece peligrosidad, colocando la boca en la parte superior de la pipeta, se succiona y se hace subir el lquido un poco por encima del enrase. La pipeta se cierra con el dedo ndice. Al vaciar la pipeta se debe hacer lentamente para evitar que quede lquido pegado a las paredes. La ltima gota no es necesario recogerla porque ya viene aforada para que quede sin caer (salvo que se indique lo contrario en la propia pipeta).

Aspirador de cremallera. Se utiliza acoplando este material a la pipeta, para succionar lquidos peligrosos. Se acopla la pipeta en la parte inferior, al mover la rueda, subiendo la cremallera, sube el lquido. Para vaciar: a) lentamente, moviendo la rueda en sentido contrario. b) rpidamente, presionando el soporte lateral.
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Buretas. Material de vidrio para medir volmenes Se con toda emplea,

precisin.

especialmente, para valoraciones. La llave sirve para regular el lquido de salida. Manejo: 1) se llena con la ayuda de un embudo. 2) los lquidos han de estar a la temperatura ambiente. 3) el enrase debe

hacerse con la bureta llena (aunque tambin se puede enrasar a

cualquier divisin), tomando como indicador la parte baja del menisco. 4) la zona que hay entre la llave y la boca de salida debe quedar completamente llena de lquido. Pueden ser: a) rectas. b) con depsito. c) de sobremesa con enrase automtico.

Matraz Aforado. Material de vidrio para medir volmenes con gran precisin. Existen de

capacidades muy variadas: 5, 10, 25, 50, 100, 250, 500, 1.000 mI. Slo mide el volumen que se indica en el matraz. No se puede calentar ni echar lquidos calientes. El enrase debe hacerse con exactitud, procurando que sea la parte baja del menisco del lquido la que quede a ras de la seal de aforo. Se emplea en la preparacin de disoluciones.
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Frascos lavadores.

Recipientes en

general de

plstico

(tambin

pueden ser de vidrio), con tapn y un tubo fino y doblado, que se emplea
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para contener agua destilada o desionizada. Se emplea para dar el ltimo enjuague al material de vidrio despus de lavado, y en la preparacin de disoluciones. Estos frascos nunca deben contener otro tipo de lquidos. El frasco slo se abre para rellenarlo.

Frasco Normalmente disoluciones

cuentagotas se utilizan

con para

tetina. contener se

recin

preparadas,

acompaan de cuentagotas para poder facilitar las reacciones de tipo cualitativo.

Mortero con mano o mazo. Pueden ser de vidrio, gata o porcelana. Se utilizan para triturar slidos hasta

volverlos polvo, tambin para triturar vegetales, aadir un disolvente

adecuado y posteriormente extraer los pigmentos, etc.

Gradilla. Material de madera o metal

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(aluminio), con taladros en los cuales se introducen los tubos de ensayo.

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Escobilla y escobilln. Material fabricado con mechn de pelo natural, segn el dimetro se utilizan para lavar: tubos de ensayo, buretas, vasos de precipitado, erlenmeyer, etc.

Erlenmeyer. Matraz de vidrio donde se pueden agitar disoluciones, calentarlas

(usando rejillas), etc. Las graduaciones sirven para tener un volumen aproximado. En una valoracin es el recipiente sobre el cual se vaca la bureta.

Matraz. Instrumento de laboratorio que se utiliza, sobre todo, para contener y medir lquidos. Es un recipiente de vidrio de forma esfrica cilndrico. o troncocnica con un cuello
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Cpsulas o Placas Petri: Cajas cilndricas, se emplean como recipientes de medios de cultivo para el cultivo y aislamiento de

microorganismos. Las ms usadas son las de 10, 15 20 mm x 100 mm.

Placas Brewer: Para el cultivo y aislamiento de microorganismos anaerbicos. Son idnticas a las anteriores, con excepcin de las tapas que adems de ser ms pesadas estn adaptadas para crear anaerobiosis.

Equipos de laboratorio de microbiologa

Potencimetro: Miden el pH de los medios de cultivo y de las solucione buffer. Constituido de un par de electrodos sensible a concentraciones de hidrogeniones, conectados a un potencimetro que indique las mediciones, Los potencimetros emplean un electrodo de vidrio, unido a un electrodo de calomel como estndar.

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Centrfugas: Se utiliza en la separacin de slidos suspendidos en lquidos. Hay centrfugas de tamao y velocidades variables, la velocidad, se mide en revoluciones por minuto, La velocidad a la cual sedimentaran las partculas en un lquido dependen de varios factores:

Tamao de la partcula. El peso de la partcula. La viscosidad del lquido. La fuerza gravitacional.

Ultra centrifugacin; para obtener alteraciones elevadas (mayor o igual a 100 000 g), pueden ser: Ultra centrifugacin analtica: para determinacin de caractersticas fsicas de protenas o de cido nucleicos. Ultra centrifugacin preparativa: permite la separacin de organelas (mitocondrias, etc.), la separacin se debe efectuar en gradiente de densidad.

Incubadoras y Hornos: Los hornos son capaces de mantener t mas de 100c y las incubadoras menos de 100 c .Los hornos no tienen salida de aire, las incubadoras si.
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Baos de agua Tambin llamados BAO MARIA tienen salida de aire presentan un termostato que regula la temperatura del agua presenta un piso para colocar los materiales que se desea.

Refrigeradoras y congeladoras Son incubadoras de temperatura fra menor de cero grados y los frigideres de dos a siete grados.

Filtracin: Sirve para separar materiales lquidos de slidos un ejemplo los FITROS DE MEMBRANA.

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Espectrofotmetro:

Se

puede

observar los colores de los alimentos con una intensidad que el aparto brinda.

Autoclave:

Funciona

por

las

presiones que se dar a una mayor temperatura logrando su

esterilizacin como por ejemplo las conservas.

Horno Pasteur Es como una mufla que tiene tres paredes y la cubierta es de asbesto sirve para la esterilizacin por el calor seco.

Estufas de aire caliente Al igual que el anterior es utilizado en la esterilizacin por el calor seco. Tienen solo dos paredes y son de forma cbica.

Aparato de arnolo koch Es un tipo de esterilizador con calor hmedo de forma cilndrica.

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PROCEDIMIENTO
Luego de conformar los grupos de trabajo se prosigui a detallar las normas de laboratorio, concluyendo con ello se habl sobre los equipos y materiales que encontramos en l de una manera no muy detallada pues ese era nuestro trabajo. Para observar los equipos comenzamos detallando el modo de trabajar con el Autoclave el cual es el siguiente: 1. Abrir el Autoclave, el cual nos permitir estilizar nuestros materiales usados. 2. Colocar los materiales a esterilizar 3. Cerrar la tapa, ajustando todas las llaves de una manera muy fuerte. 4. Prender y esperar que se caliente 5. Girar la llave que est encima de la tapa poco a poco, hasta que caliente hasta 98C y ah cerrar la llave. 6. Llave cerrada hasta 121C y controlar 15 o 30 de acuerdo a lo que pidan 7. Apagar la autoclave e ir abriendo la llave poco a poco. 8. Abrir con cuidado pues el vapor an sigue.

Luego de esto pasamos a observar los materiales en el siguiente orden:

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