Durante la realizacin de la prctica de acuerdo a los objetivos se busc realizar una cintica de crecimiento celular, atendiendo a los fundamentos

del cultivo de clula s; sin embargo esto no fue posible debido a que despus de la diseccin y extraccin d e las clulas del peritoneo del embrin de ratn pasadas las 48 horas se not a travs del microscopio invertido una contaminacin por una especie de lo que se sospecha es un hongo debido a su morfologa, por supuesto nos ocasiono la imposibilidad de rea lizar una cintica de crecimiento. No se apreci por supuesto una disgregacin celular debido a que en la primer observ acin de la muestra inmediatamente se hizo notar la contaminacin, se pueden observa r algunas clulas pero no una confluencia y una disgregacin como se apreci en el cul tivo de la prctica pasada. En el fundamento terico de la prctica nos describen que la disgregacin celular trata de una individualizacin de las clulas a partir de expl antes de tejidos debido a disociaciones o estmulos mecnicos1, fue agregada en form a gradual al cultivo una de las enzimas determinantes de la disgregacin celular p ara lograr una uniformidad y buena confluencia de las clulas una vez cultivadas, desde que se le agreg tripsina al medio de cultivo podemos apreciar por supuesto en la imagen la existencia de algunas clulas suspendidas en el medio pero no de f orma uniforme debido a la intrusin del Microorganismo contaminante, de esta maner a no podemos predecir o poder hablar al respecto de una correcta disgregacin hast a lo realizado en la prctica. Consideramos muy importante el manejo del cultivo c elular con tcnicas aspticas ms estrictas y eficaces donde la manipulacin de los cult ivos se d en la mayor esterilidad posible y as evitar estos impedimentos para los fines del cultivo celular. El cultivo tiene que estar siendo monitoreado constantemente al menos cada 24 ho ras para hacer recambios de medio y evitar que se daen los cultivos debido a la a ccin de la tripsina por ejemplo, por esta razn el cultivo deba de ser incubado un c ierto lmite de tiempo ya que al contener proteasas inespecficas como la Tripsina p ueden daar las protenas presentes en la membrana celular. El cultivo fue incubado a 37 C debido a sus caractersticas, ya que las reacciones bioqumicas realizadas den tro del mismo cultivo son ms eficientes a esta temperatura, adems de considerar qu e la estructura del tejido tambin ser determinante para una cintica de desarrollo y disgregacin celular. Uno de los motivos por los que ste microorganismo contamin muestro cultivo fue que en el mismo existen medios esenciales ricos en nutrientes como lo es el DMEM do nde lo que se sospecha es un hongo encontr las condiciones necesarias para crecer en la caja Petri incubada con todos los dems componentes, otro motivo es que man ejamos una asepsia poco eficiente durante la diseccin y extraccin de las clulas. Un cultivo una vez contaminado, deber ser desechado antes de incubar donde estn los dems, ya que, los hongos suelen adaptarse como huspedes en todo tipo de cultivos. En la imagen anexa se muestra la contaminacin por el microorganismo donde invadi g ran parte del medio en la caja Petri donde se observ al microscopio invertido la morfologa del mismo husped. Se estima que es un hongo filamentoso debido a su mor fologa celular donde se aprecian hifas e incluso algunas esporas. El manejo asptico de la muestra animal y de los materiales necesarios para la inc ubacin celular es muy importante para preservar el cultivo, durante la sesin de la boratorio tambin apreciamos que las campanas donde estbamos haciendo el cultivo es taban segn el profesor asociado trabajando al 10 % aproximadamente de su capacida d, es decir, no guardaban la asepsia requerida para un laboratorio de cultivos c elulares donde tambin probablemente se pudo haber contaminado nuestro medio. En la siguiente imagen se muestra el medio de cultivo con el microorganismo cont aminante: