PRACTICA N.

1: LOS MECANISMOS DEL MOVIMIENTO

INTRODUCCIN Los msculos son los rganos donde se origina la fuerza necesaria para el movimiento o la tensin, participando en gran cantidad de procesos en el organismo. Su accin permite: el desplazamiento del individuo en el espacio; la circulacin de lquidos corporales como la sangre y la linfa, el transporte de los alimentos a travs del tracto digestivo, erizar pelos en mamferos y plumas de aves, etc. Intervienen tambin en la generacin de calor para la termorregulacin; en el mecanismo de la visin, al permitir el enfoque mediante la deformacin del cristalino y regular la entrada de la luz por la contraccin del iris, entre otras funciones. A pesar de la diversidad de funciones realizadas por los msculos, existen solo tres tipos estructurales de msculos: estriados o esquelticos, cardiaco y lisos; los cuales presentan diferencias entre s en el funcionamiento y en el control neuronal. En la presente experiencia nos ocuparemos del msculo estriado, el cual forma parte importante del sistema esqueltico y en su mayora obedecen al control voluntario. Es posible estudiar algunas de sus propiedades fisiolgicas utilizando como ejemplo al msculo gastrocnemius del sapo; debido a su facilidad para ser extrado, a que es posible mantenerlo fuera del cuerpo sin grandes prdidas de sus funciones y porque sus respuestas son adecuadas para el registro con sistemas sencillos de laboratorio. Los registros se realizarn mediante el uso del quimgrafo. Este equipo fue diseado por Carl Ludwing en 1847 para el registro de mltiples fenmenos fisiolgicos, como por ejemplo: la contraccin muscular, la actividad cardiaca y respiratoria, etc. El carcter distintivo de un quimgrafo es su tambor metlico, montando sobre un eje de rotacin, que es impulsado por un motor con fuente de corriente alterna y provisto de engranajes que le permiten distintas velocidades de rotacin. El tambor se debe cubrir con un papel adecuado, en el cual se inscriben los registros mediante el uso de la pajuela de la palanca inscriptora (Fig. 1 y 2). OBJETIVOS 1.2.3.4.5.Reconocer la existencia de un umbral en la intensidad del estimulo elctrico necesario para producir una respuesta por parte del msculo esqueltico. Determinar el efecto de la duracin del estimulo sobre la intensidad mnima necesaria para producir una respuesta por parte del msculo. Caracterizar el tipo de respuesta del msculo a los estmulos elctricos. Reconocer las etapas de la contraccin muscular. Determinar el efecto de la aplicacin de una serie de estmulos subumbrales en forma rpida.

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Reconocer las caractersticas de una contraccin tetnica como consecuencia de la aplicacin de estmulos supraumbrales en sucesin rpida. Determinar el efecto de los iones de sodio, potasio, y calcio en la contraccin muscular. Reconocer el efecto de la temperatura sobre la contraccin muscular. Determinar el efecto de la carga sobre la contraccin muscular y estimar la carga que permite realizar el trabajo mximo.

EXPERIMENTO N 1: Respuesta del msculo ante estmulos de distinta intensidad. 1.Para poder calcular el tiempo de cada evento registrado en el papel del quimgrafo es necesario conocer la velocidad de giro del aparato. Para ello, coloque el tambor ya ahumado (Fig. 1) y apoye sobre este la pajuela del magneto (Fig. 2). Haga girar el quimgrafo, y cuando se encuentre en movimiento haga un pulso con el magneto cada 10 seg. exactos durante 40 o 50 seg., de tal manera de tener 3 o 4 marcas. Escriba sobre el papel, al lado de las marcas realizadas por el magneto, una identificacin que le permita reconocerlas. Despus de terminado el laboratorio, y desmontado el papel del quimgrafo, mida la longitud (L) entre cada dos marcas consecutivas y calcule el promedio. Para conocer el tiempo de un evento registrado en el quimgrafo, se multiplica la longitud horizontal de ese evento por el valor 10/L Desmedule y descerebre el sapo de acuerdo a la tcnica que el instructor le indicar (Anexo 1). Asle el msculo gastrocnemius del sapo (Anexo 2) y mntelo en el quimgrafo (Fig. 3a y 3b). Mantenga el msculo siempre hmedo con solucin Ringer. Coloque las pajuelas de registro del msculo y del magneto sobre el papel y haga una marca en el punto de apoyo de cada pajuela. Coloque la duracin del estimulo en 5 mseg. Aplique un estimulo simple de 0.1volt, apoyando los dos electrodos sobre el msculo, y observe si se produce una respuesta. Si no se produce respuesta, aumente la intensidad y estimule nuevamente. Repita la operacin hasta que consiga un voltaje que logre producir una respuesta en el msculo que pueda registrarse en el papel. Marque sobre el papel la intensidad del estmulo al lado del registro del magneto. Una vez determinado el voltaje umbral, haga girar el tambor del quimgrafo y estimule con un voltaje un poco mayor. Realice 3 o 4 registros de la contraccin en el papel. Recuerde siempre anotar sobre el papel una identificacin del experimento al lado del registro realizado. Tenga cuidado de no estimular con un voltaje elevado y/o prolongado ya que podra daar el msculo.

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EXPERIMENTO N 2: Suma de estmulos Sub-umbrales 1.2.3.Coloque la duracin del estmulo en 5 mseg. Utilizando un voltaje ligeramente inferior al umbral y haciendo girar el tambor del quimgrafo para registrar las respuestas, aplique una serie de pulsos elctricos a una tasa de 0.5 pulsos por seg. cada 15 seg. Repita lo anterior aplicando los pulsos elctricos a una tasa de 1.2 y 5 pulsos por seg.

EXPERIMENTO N 3: Efecto de la temperatura sobre la contraccin muscular 1.2.3.Registre tres contracciones ante un estmulo simple supraumbral. Bae el msculo con una solucin Ringer caliente (5 C por encima de la temperatura ambiente) durante 1 min. y registre en el quimgrafo 3 o 4 respuestas ante un estmulo simple supraumbral. Repita lo anterior con una solucin Ringer fra (10 C por debajo de la temperatura normal).

EXPERIMENTO N 4: Papel de los Iones Na y K en la contraccin muscular 1.2.Registre 3 contracciones ante un estimulo simple supraumbral. Registre en el quimgrafo 3 o 4 respuestas del msculo ante un estmulo supraumbral mientras se baa al msculo con una solucin de NaCl concentrada. Aplique la solucin con una pipeta Pasteur de manera continua antes, durante y despus de la aplicacin del estimulo elctrico. Lave con abundante Ringer, para eliminar los residuos del la solucin de NaCl en la superficie del msculo. Repita el paso 2 utilizando una solucin de KCl al 4%.

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EXPERIMENTO N 5: Efecto de la duracin del estimulo sobre la intensidad umbral del estimulo (Requiere la utilizacin del estimulador elctrico con el control de duracin del estmulo) 1.2.Gire el botn de duracin del estimulo hasta 0.1 mseg. y el botn de intensidad del estimulo hasta 0.1 Volt. Registre en el quimgrafo la respuesta del msculo simple. Si el msculo no responde al estmulo, aumente la intensidad del estimulo hasta 0.2 Volt. y aplique un estmulo manteniendo la duracin en 0.1 mseg. Repita el paso anterior aumentando la intensidad en 0.1 Volt cada vez, hasta que se produzca una respuesta del msculo. Registre la intensidad a la cual observ la respuesta. Repita el procedimiento anterior, pero cada vez con una duracin del estmulo de 0.5, 1.0, 5.5, y 50 mseg.

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EXPERIMENTO N 6: Trabajo mecnico realizado por el msculo. Efecto del estiramiento del msculo sobre el trabajo realizado. 1.2.3.4.5.6.Coloque el tornillo de carga tarda hacia arriba, con lo cual se impide el estiramiento del msculo al aplicarle una carga (Fig. 4) Agregue un porta pesos previamente pesado a la barra inscriptora que se encuentra sujeta al msculo y aplique un estmulo supraumbral registrando 3 o 4 contracciones. Coloque un peso de 5 g al porta pesos. Aplique nuevamente un estmulo de intensidad supraumbral y registre las contracciones. Repita lo anterior con pesos sucesivos de 10, 20, 30,40 g, etc. hasta que la contraccin del msculo no produzca desplazamiento de la barra inscriptora. Coloque el tornillo de carga tarda hacia abajo, de modo que permita el estiramiento del msculo al aplcarle la carga. Repita los pasos 2, 3, y 4.

EXPERIMENTO N 7: Contraccin tetnica y Fatiga 1.Mientras registra en el quimgrafo, aplique estmulos supraumbrales a una tasa de 2 pulso por seg., hasta alcanzar la contraccin tetnica y la posterior fatiga.

ACTIVIDADES QUE DEBE INCLUIR EN EL INFORME 1.2.3.Reporte la intensidad del estmulo necesario para producir una contraccin en el msculo completo (Considere cual es el efecto de estiramiento del tejido elstico, sobre el acortamiento del msculo completo). Mediante una grfica, describa y explique la relacin que existe entre la duracin del estmulo elctrico y la intensidad umbral de ese estmulo. Explique el significado del tipo de respuesta todo o nada. Es una propiedad de las fibras musculares o del msculo completo? Es el msculo capaz de dar respuestas distintas ante estmulos de diferente intensidad o duracin? Explique. Sobre el papel de registro del quimgrafo. Mida la longitud promedio del desplazamiento horizontal de diferentes etapas de la contraccin del msculo. Utilice esas medidas para calcular los tiempos de cada una de esas etapas de la contraccin (refraccin, contraccin, relajacin). Mida la longitud promedio del desplazamiento vertical de la pajuela del registro. Reporte en una tabla los valores crudos registrados, los promedios, desviaciones y tamao de la muestra de cada uno de los parmetros antes indicados, Relacione cada una de las etapas de la contraccin observadas por Ud., con los fenmenos microestructurales en las miofibrillas, segn el modelo de puentes cruzados. Realice un esquema que represente un registro de una contraccin del msculo del quimgrafo y muestre en el mismo las diferentes etapas de una contraccin simple. Explique por que ocurre la suma de estmulos sub-umbrales realizados en sucesin rpida. Explique las razones por las cuales ocurre la tetanizacin en las fibras musculares. Compare la longitud mxima del acortamiento del msculo durante una contraccin tetnica con la observada en una contraccin aislada. Explique Por qu el acortamiento del msculo es mayor durante una contraccin tetnica? (Efecto escalera). Explique Por qu ocurre la fatiga de la fibra muscular? Represente en un grfico la relacin entre el acortamiento del msculo y el tiempo desde la aplicacin del estmulo (Distancia Vertical vs. Tiempo) para cada una de las temperaturas del Ringer. Explique la causa de esta relacin. Explique el papel que juegan cada uno de los Iones (sodio, potasio y calcio) en las diferentes etapas de la contraccin y especule acerca de la manera en la cual cambios en la concentracin extracelular de estos iones, como la efectuada en nuestra experiencia, afecta a la contraccin muscular. Proponga un diagrama sencillo en el cual relacione las concentraciones relativas (las entradas y salidas) de los Iones Na+, K+, y Ca++ a ambos lados de la membrana de la miofibrillas, el potencial elctrico de esa membrana y las fases de la contraccin muscular. Con los datos obtenidos en el experimento 6, calcule el valor de T= L*C, donde L es la longitud del acortamiento (mm). C es la carga (g) y T es proporcional al trabajo realizado por el msculo. Represente en un grfico la relacin entre los valores de L y de T con los de C en la experiencia con

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carga tarda y con carga previa (puede colocarlos en una misma grfica o en grficas separadas). Estime en la grfica, la carga que maximiza el trabajo realizado por el msculo y exprese esa carga como un porcentaje de la carga mxima que el msculo es capaz de levantar. Explique las razones estructurales que determinan las formas de esas 2 grficas. Explique porque el valor de T es proporcional al trabajo mecnico y no constituye una medida directa del trabajo mecnico realizado por el msculo. Si es posible, explique como podra Usted estimar el trabajo mecnico realizado utilizando exactamente el mismo sistema de medicin. Recorte y reporte todos los registros obtenidos sobre el papel del quimgrafo con un ttulo que explique cada registro. Titule cada una de las actividades anteriores con los objetivos especficos indicados en la pagina 1 de esta gua.

MATERIALES QUE DEBE TRAER EL ESTUDIANTE -Papel Lustrillo amarillo (2 pliegos por equipo) -Tirro -Laca para el Cabello (un pote por equipo) -Lamina de acetato (1 por equipo) -Algodn -Hilo de coser -Plastilina (1 barra por equipo) -Sapo (Bufo marinus, uno por equipo) -Toallas Industriales (un paquete por equipo) -Equipo de diseccin: Tijeras punta fina, un par de pinzas (una gruesa y otra fina de relojero), una aguja de diseccin en buen estado, un escalpelo y una regla. MATERIALES Y EQUIPOS SUMINISTRADOS POR EL PERSONAL DOCENTE -Solucin Salina (Ringer) para el anfibio -NaCl concentrado -Beakers de 30 ml. (para cada solucin y Ringer) -KCl al 4% -Maleta para el quimgrafo (1 por equipo) -Estimuladores (1 por equipo) -Benceno -Quimgrafos (1 por equipo) -Mangueras para ahumador -Tester -Cpsulas de Petri (2 por equipo) -Porta pilas (1 por equipo) -Tablas de diseccin (1 por equipo) -Termmetros -Pipetas Pasteur cuello corto y peritas (2 por equipo) -Pilas 6V (4 por equipo) -Pipetas Pasteur con punta redondeada y curva (2 por equipo) -Fosforos

PREPARACIN DE SOLUCIONES FISIOLGICAS Solucion Ringer Sapo (1 Litro) NaCl KCl CaCl2 NaHCO3 Agua 6.5gr 0.14gr 0.12gr 0.2gr 1000ml

Solucion Ringer Mamifero (1 Litro) NaCl KCl CaCl2 NaHCO3 Glucosa Agua 9.00gr 0.42gr 0.24gr 0.20gr 1.00gr 1000ml

IV. REACTIVOS INDISPENSABLES DEL LABORATORIO MgCl2 KCl NaHCO3 Benceno Uretano Cristalino (Etil Carbarnato) Eter Cctel de Centello NaCl CaCl2 Glucosa Adrenalina(1mg) Bicarbonato de potasio Radiac