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MINISTERIO DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL Carlos Gustavo Cano Juan Lucas Restrepo Ministro Viceministro
CORPOICA Luis Arango Nieto Tito Daz Jorge Cadena Salvador Rojas Director Ejecutivo Subdirector de Investigacin e Innovacin Subdirector de Desarrollo Tecnolgico Director Regional PRONATTA Luis E. Villegas Fredy Vargas Director Nacional Director UCR - Amazonia AUTORES Salvador Rojas Melva Alarcn Matilde Cipagauta Victoria E. Osorio Rafael Trujillo Eduardo Rivera Felipe Cadena Jairo Garca Carlos Julio Escobar Henry Solarte Ral Barahona Jos Mara Trchez Gladys Colorado
FOTOGRAFAS Y DIBUJOS Futuro Ambiental Salvador Rojas Carolina Echeverry Jos Daro Ule Melva Alarcn Jenny Gutirrez
ISBN: 958-8210-57-7 Corporacin Colombiana de Investigacin Agropecuaria, CORPOICA Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural Programa Nacional de Transferencia de Tecnologa Agropecuaria, Pronatta C.I. Macagual, Km. 20 va a Morelia A.A. 337 Telefax (098) 435 4453 Florencia, Caquet E-mail: Macagual@col1.telecom.com.co Edicin: marzo 2004 Tiraje: 1500 ejemplares PRODUCCIN EDITORIAL Diagramacin, armada, fotomecnica, impresin y encuadernacin www.produmedios.com Tel.: 288 5338 Bogot, DC - Colombia Impreso en Colombia Printed in Colombia
Presentacin
xisten algunos retos en el proceso de domesticacin de especies silvestres amaznicas como, por ejemplo, disminuir algunas barreras para lograr una exitosa propagacin, jar algunas caractersticas deseables de una planta en las generaciones futuras, obtener gran cantidad de material para suplir las demandas de nuevos cultivos, uniformizar las pocas, cantidades y calidades de produccin por planta, etc., muchas de estas dicultades se pueden superar parcial o totalmente con el uso de tcnicas de propagacin asexual o vegetativa. Por eso en esta publicacin se hace nfasis en la base terica que explica los requerimientos ambientales y el comportamiento de las plantas para que sea posible este tipo de reproduccin. Adems, incluye informacin sobre los fenmenos siolgicos que se dan en tres tipos de propagacin: estacas, injertos y acodos; menciona los tipos de injertos y acodos que se usan frecuentemente y las condiciones necesarias para una exitosa propagacin; se describen algunos procedimientos de campo y laboratorio y las ventajas y desventajas de estas tcnicas. Se hace adems una breve referencia de otras tcnicas de propagacin in vitro, que tienen posibilidades de aplicacin sobre especies amaznicas y nalmente se muestran algunos ejemplos de propagacin vegetativa con especies amaznicas como el camu camu, copoaz, boroj, uva caimarona y otras especies como rboles forrajeros y pimienta. Agradecemos a Pronatta por la conanciacin del proyecto Evaluacin agronmica del copoaz, boroj y uva caimarona, propagadas por mtodos sexual y vegetativo, el cual origin esta publicacin. En este documento se incluye una buena revisin de estas tcnicas, algunas descritas en el manual de entrenamiento del ICRAF Vegetative tree propagation in agroforestry, se incluyen tambin los resultados de Corpoica con los agricultores del Putumayo y Caquet, en el CRECED Putumayo y en el Centro de Investigacin Macagual, en los ltimos aos usando estas tcnicas y se reporta una experiencia de propagacin vegetativa de la Organizacin Futuro Ambiental del Putumayo con la pimienta. Esperamos que esta publicacin sirva para ayudar a entender el comportamiento de las plantas, para garantizar una mayor eciencia en el uso de estas formas de propagacin y as poder resolver algunos de los problemas mencionados de domesticacin de las especies amaznicas.
CONTENIDO
Pg. I. 1. CONCEPTOS BSICOS ......................................................................................................................................................... 7 GENERALIDADES PROPAGACIN ASEXUAL O VEGETATIVA ...................................................................................................7 1.1. Ventajas de la propagacin vegetativa .........................................................................................................................................................7 1.2. Desventajas..................................................................................................................................................................................................................8 CONDICIONES DE LA PLANTA DONADORA QUE INFLUYEN EN LA PROPAGACIN VEGETATIVA ........................................................................................................................................................................... 10 2.1. Tipo de tejido a propagar ................................................................................................................................................................................10 2.2. Regulacin hormonal ..........................................................................................................................................................................................10 2.3. Posicin y madurez del tejido........................................................................................................................................................................12 MTODOS DE PROPAGACIN ........................................................................................................................................................................ 14 3.1. Propagacin por estacas ...................................................................................................................................................................................14 3.2. Propagacin por injertos...................................................................................................................................................................................18 3.3. Propagacin por acodos ...................................................................................................................................................................................26 3.4. Otros tipos de propagacin vegetativa .................................................................................................................................................... 28 EL CULTIVO IN VITRO DE TEJIDOS VEGETALES ..................................................................................................................................... 31 4.1. Micropropagacin .................................................................................................................................................................................................31 4.2. Microinjerto in vitro...............................................................................................................................................................................................35 4.3. Cultivos de granos de polen y de vulos................................................................................................................................................ 36 4.4. Cultivo de vulos ..................................................................................................................................................................................................36 4.5. Cultivos de protoplastos...................................................................................................................................................................................36 EXPERIENCIAS DE PROPAGACIN VEGETATIVA CON ALGUNAS ESPECIES PROMISORIAS DE LA AMAZONIA ............................................................................................................... 38 Experiencias de injerto en camu camu (Myrciaria dubia H.B.K Mc Vaugh) bajo condiciones del Piedemonte de Caquet .....................................................................................................................................................................................38 Avance de resultados sobre injerto en uva caimarona (Pouroma cecropiifolia) bajo condiciones del Piedemonte de Caquet .....................................................................................................................................................................................39 Ensayos de propagacin de copoaz (Theobroma grandiorum) por estaca, injerto y acodo areo, en el municipio de Puerto Ass, departamento de Putumayo ............................................................................................... 40 Ensayos de propagacin de boroj (Borojoa patinoi) por estaca, injerto y acodo areo, en el municipio de Puerto Ass, departamento de Putumayo...................................................................................................................... 43 Propagacin por estaca de especies arbreas con potencial forrajero............................................................................................ 46 Propagacin vegetativa por vas clonales de la pimienta (Piper nigrum L.) ..................................................................................... 51 Propagacin de rizomas de huagra chondur (Cyperus prolixus Kunth) ............................................................................................. 52
2.
3.
4.
II. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.
BIBLIOGRAFA ............................................................................................................................................................................................................................55
Conceptos Bsicos y Experiencias con Especies Amaznicas
(la yuca, la caa), bulbos (la cebolla), tubrculos (papa) estolones (algunos pastos) y segmentos de rganos como tallos y hojas. La segunda es la propagacin por injertos donde segmentos de una planta se adhieren a otra receptiva ms resistente o de mejores caractersticas, por ejemplo en especies como caucho, cacao, ctricos, uva caimarona, boroj, se puede utilizar esta tcnica. La tercera es la propagacin in vitro, en la cual clulas o pequeas partes de tejidos u rganos son cultivados en condiciones controladas de laboratorio. La micropropagacin es un mtodo de propagacin vegetativa, que permiten la produccin a gran escala de plantas madres libres de agentes patgenos, incluyendo virus; este mtodo est siendo aplicado principalmente en cultivos de pltano, banano, ctricos, pia, plantas ornamentales, ores y algunas especies perennes o forestales de inters comercial como el eucalipto, palma de aceite, caucho, entre otras.
o sequa, etc). Estas caractersticas se pueden perder por el cruzamiento gentico en la propagacin sexual. Ser ms eciente cuando la reproduccin sexual no es el mtodo ms viable o ecaz. Propagar especies que sus semillas presentan problemas de germinacin o de almacenamiento o que son de ciclo reproductivo largo. Aprovechar las caractersticas genticas favorables de dos plantas en una sola planta. Manejar las diferentes fases del desarrollo de las plantas. Obtener plantaciones uniformes o la produccin de un determinado nmero de individuos con identidad gentica.
precoces y tardas en un solo rbol o la injertacin de una ramas polinizadoras en un rbol hembra. Manejo y control de las fases de desarrollo de la planta: Las plantas durante su ontogenia presentan diversas fases que pueden resumirse en etapa vegetativa y reproductiva, la primera asociada al crecimiento inicial y la segunda a la madurez. En plantas perennes despus de llegar a la primera etapa reproductiva, se alterna la condicin vegetativa y reproductiva, dependiente eso s de las condiciones ambientales. En general las plantas jvenes son vigorosas, tienen dominancia apical fuerte y se regeneran fcilmente por propagacin vegetativa. Las plantas maduras no son vigorosas, ramican fuertemente debido a la prdida de dominancia apical por la diferenciacin de los meristemos apicales en reproductivos (inorescencias y frutos) y no se regeneran fcilmente por la propagacin vegetativa. El grado de madurez tambin puede ser denido y mantenerse mediante la propagacin vegetativa de la planta madre. El mantener esta fase de desarrollo puede traer benecios econmicos, como en los rboles frutales, que al injertarlos con yemas provenientes de un rbol maduro, orecen poco despus de ser injertados o en los rboles maderables que conservan su vigor juvenil cuando se propagan por estacas provenientes de estructuras juveniles del rbol, o inducindole la juvenilidad mediante podas. Plantaciones uniformes: Cuando la variabilidad fenotpica de una especie tropical en campo es muy alta, a nivel comercial o con nes de experimentacin en agroforestera, se requiere tratar de uniformizar las plantaciones en crecimiento o a la fructicacin; el hacerlo con mtodos de cruzamiento requiere largos perodos de tiempo, por lo que la propagacin vegetativa de individuos (clones) con caractersticas deseables viene a ser una solucin.
Mantenimiento de genotipos superiores: La mayora de especies arbreas tropicales son de polinizacin abierta, lo cual signica que hay recombinacin de genes durante la reproduccin sexual, esta situacin puede repercutir en la siguiente generacin porque muchas caractersticas deseables no se expresaran; por tal razn, cuando se identica un individuo con caractersticas superiores, la informacin gentica puede ser jada en la prxima generacin mediante la propagacin vegetativa. Problemas de almacenamiento de semillas: Muchas especies de rboles tropicales producen semillas recalcitrantes que requieren procedimientos de manejo especial, a menudo complicados; otras producen escasos frutos, no los producen o simplemente no tienen semillas; de igual manera es comn en el trpico la condicin de embrin inmaduro de la semilla que limita la propagacin sexual de algunas especies; en estos casos, la propagacin vegetativa es una alternativa adecuada para la reproduccin de estas especies. Ciclo reproductivo corto: Aunque no es una norma general, la propagacin vegetativa puede acortar el ciclo vegetativo y acelerar la entrada del rbol o planta en la etapa reproductiva, esto es especialmente til cuando los productos deseados son ores, frutas o semillas. Combinacin de genotipos: La injertacin es un mtodo de propagacin vegetativa que permite combinar las caractersticas deseables de dos o ms plantas en una sola. Pueden unirse yemas de un rbol con caractersticas deseables de fruto con las de un rbol (patrn) con otras caractersticas deseables, como resistencia a nematodos, sequa, enfermedades, etc. Otra posibilidad es injertar ms de una yema en el mismo tallo, por ejemplo para ampliar el perodo de produccin por injerto de variedades
1.2. DESVENTAJAS
Una limitante de la propagacin vegetativa a tener en cuenta es la dispersin de enfermedades, especialmente bacteriales y virales. Una vez una planta se infecta con un virus a menudo a travs de los insectos chupadores como los dos o mediante el uso de herramientas, puede transmitirse rpidamente dentro del sistema de la planta. De tal manera que si se obtiene un esqueje (estaca, yema, etc.) ste tambin llevar consigo la enfermedad. En los
injertos la enfermedad presente en el patrn puede pasar a la yema injertada, como sucede en los ctricos donde enfermedades virales pueden afectar ambiciosos planes de propagacin vegetativa. Se han desarrollado varios mtodos sosticados eliminar estos patgenos de las plantas, como la termoterapia, quimioterapia y microinjerto de pice caulinares o las combinaciones de stos. Estos mtodos normalmente estn disponibles en los laboratorios de biotecnologa.
La estrechez gentica de las poblaciones propagadas vegetativamente suele convertirse en un problema, pues este tipo de reproduccin no permite la recombinacin gentica que favorece la evolucin y adaptacin de las especies. En caso de implementarse masivamente este mtodo, debe ser una norma, la bsqueda constante de clones elite con caractersticas deseables pero provenientes de diferentes ambientes, que permitan llevar a su vez la variabilidad gentica de sus sitios de origen.
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Capa generatriz libero leosa o cambium (llamado a veces asiento interno), produce hacia el exterior el lber o oema y hacia el interior madera o xilema secundario. Es necesario recordar que las monocotiledneas no poseen capas secundarias. Los meristemos adventicios: Son los meristemos neoformados a continuacin de una desdiferenciacin localizada. Esta desdiferenciacin puede ser natural e intervenir en un momento dado en el desarrollo de la planta o aparecer tras unas condiciones particulares; es el caso de estacas. Estos meristemos neoformados pueden ser de origen radical o caulinar. Cualquier programa de propagacin vegetativa debe considerar que tipo de tejidos meristemticos estn involucrados en el propgulo a multiplicar, en la planta donadora.
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Se considera la existencia de sustancias rizgenas llamadas rizocalinas pero como nunca han podido ser aisladas, parece que la rizognesis es la resultante de interacciones de diferentes sustancias poco especcas que actan en concierto con la auxina al nivel de la diferenciacin de las races. Es por ello que las auxinas y citoquininas son quizs las hormonas vegetales ms importantes y son las ms utilizadas en la propagacin vegetativa. Auxinas: Existen varios tipos de auxinas, algunas son naturales y otras sintticas, se conocen el cido indolactico (AIA), cido naftalactico (ANA), cido indolbutrico (AIB), 2,4,-D y 2,4,5-T. El cido indol-3actico o AIA es la ms conocida, es una hormona natural que se produce en los pices de los tallos, meristemos y hojas jvenes de yemas terminales, de all migra al resto de la planta en forma basiptala (de arriba para abajo) mediante un mecanismo activo, exhibiendo fuerte polaridad durante el transporte a travs de las clulas del oema y del parnquima presente en el xilema; durante su circulacin, la auxina reprime el desarrollo de brotes axilares laterales a lo largo del tallo, manteniendo de esta forma la dominancia apical. El movimiento de la auxina fuera de la lmina foliar hacia la base del pecolo parece tambin prevenir la abscisin. La funcin o modo de accin de las auxinas, se sita principalmente a nivel de las membranas celulares, donde se modican la permeabilidad de sta, llevando consigo tambin una modicacin del funcionamiento celular y activando su metabolismo, esto tiene efecto sobre la divisin y crecimiento celular, la atraccin de nutrientes y de otras sustancias al sitio de aplicacin, adems de las relaciones hdricas y fotosintticas de las estacas, entre otros aspectos. Hormonas sintticas pueden ser aplicadas para promover el desarrollo de races a travs de su accin directa o a travs de una accin antagnica en hormonas que inhiban las races. Cuando se propaga por estacas, el apropiado balance de las hormonas vegetales de las estacas afecta la cicatrizacin de las heridas, el desarrollo del primordio de la raz, el desarrollo de races iniciales, el crecimiento de races, el endurecimiento y posterior desarrollo de las races a de la estaca. En general es necesario adelantar algunos experimentos para determinar la concentracin apropiada de auxinas para especies que no se conozca. Un punto de partida puede ser el uso de (50 g de IBA, NAA, IAA o mezclas de IBA y NAA). Sin embargo hay que anotar que no todas las especies requieren auxinas para el enraizamiento.
Citoquininas: Se encuentran en forma natural y sinttica, las ms conocidas son: zeatina, kinetina y benzilaminopurina (BAP). Son producidas en las zonas de crecimiento, como los meristemos, en la punta de las races (zonas prximas del pice) y son transportadas va acroptala (de abajo hacia arriba), movindose a travs de la savia en los vasos correspondientes al xilema desde el pice de la raz hasta el tallo o brote, estimulando la divisin celular en tejidos no meristemticos. Las citoquininas paradjicamente, son inhibidoras de la rizognesis a fuertes dosis; sin embargo, su presencia es positiva porque actan en interaccin con las auxinas en el papel que ellas ejercen sobre la desdiferenciacin y sobre la divisin celular. As pues, es importante realizar un justo equilibrio auxinas/citoquininas >1. Este equilibrio existe naturalmente en la mayor parte de los vegetales. Es igualmente importante su efecto de romper la latencia en yemas axilares. Si los efectos de la auxina son evidentes sobre la rizognesis, es probable que la auxina no sea la nica causa y obrara como las citoquininas, en interaccin con otras sustancias. Los dems grupos hormonales son importantes por su efecto generalmente antagnico o coadyudante indirecto a las anteriores, es por ello, que nuevamente se debe recalcar en la importancia del balance hormonal, el cual estar asociado al estado de desarrollo al momento de seleccionar el material a propagar. cido abscsico (ABA): Es un inhibidor natural del crecimiento celular y la fotosntesis, por lo tanto tiene efectos contrarios a los de las hormonas de crecimiento (auxinas, giberelinas y citoquininas). El cido abscsico se encuentra en todas las partes de la planta, principalmente en la base del ovario, semillas y frutos jvenes y su sntesis ocurre en las yemas. Este cido ha sido propuesto como un regulador en respuestas siolgicas tan diversas como el letargo, abscisin de hojas y frutos y estrs hdrico. Entre las funciones de este cido se tienen: Promueve la latencia en yemas y semillas, inhibe la divisin celular, causa el cierre de los estomas, anula el efecto de las giberelinas, inhibe el crecimiento. Giberelinas: Se encuentran naturalmente en las plantas y existen varios tipos, siendo las ms comunes: GA1, GA3, GA4, GA7, GA9. Las giberelinas son sintetizadas en los primordios apicales de las hojas, en las puntas de las races y en semillas en desarrollo. No muestra el mismo transporte fuertemente polarizado como el observado para la auxina, aunque en algunas especies existe un movimiento basiptalo en el tallo. Adems de
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ser encontradas en el oema, las giberelinas tambin han sido aisladas de exudados del xilema, lo que sugiere un movimiento bidireccional de la molcula en la planta. Su principal funcin es incrementar la tasa de divisin celular (mitosis) estimulando la divisin y elongacin celular, lo que inuye en el incremento del crecimiento en los tallos, interrumpen el perodo de latencia de las semillas, hacindolas germinar y movilizando las reservas en azcares, inducen la brotacin de yemas, estimulan la sntesis de ARN mensajero y promueven la oracin y el desarrollo de los frutos. Etileno: Es un gas, un hidrocarburo no saturado muy diferente a otras hormonas vegetales naturales. El etileno es producido esencialmente por todas las partes vivas de las plantas superiores y su cantidad vara con el rgano y tejidos especcos y de acuerdo con el desarrollo y crecimiento de las mismas. A principios del siglo XX se observ que el etileno provoca respuestas tales como geotropismo y abscisin, sin embargo, slo hasta la dcada de 1960 se acept como una hormona vegetal. El efecto del etileno sobre las plantas y partes de stas vara ampliamente. Ha sido implicado en la maduracin, abscisin, senectud, dormancia, oracin y otras respuestas. Las funciones principales el etileno son: Promueve la maduracin de los frutos, promueve la senescencia (envejecimiento), cada de las hojas y geotropismo en las races.
2.3.1. Topofisis
Este es el efecto de la posicin original del propgulo en la planta donadora, reejndose en una respuesta en crecimiento plagiotrpico u ortotrpico. El crecimiento plagiotrpico de una planta se reere a la situacin en la cual el propgulo vegetativo no se desarrolla en forma de un rbol, sino que contina creciendo como una rama. Por el contrario el crecimiento ortotrpico se reere a que el propgalo se desarrolla en la forma erecta o normal del rbol. Las diferencias de crecimiento y desarrollo cuando ocurre el plagiotropismo son muy frustrantes, como resultado, las plantas que se originan no muestran el patrn de crecimiento deseado o la misma forma del rbol donante. El copoaz es una especie que presenta la condicin de plagiotropismo muy marcada en sus ramas, por ello al obtener yemas para injertacin, se debe tener muy en cuenta que stas no provengan de ramas plagiotrpicas.
2.3.2. Ciclofisis
Este es el efecto de la edad del propgulo en la planta, y se expresa como una condicin de juvenilidad o madurez en el crecimiento de la nueva planta. Una diferencia entre plantas y animales radica en la localizacin del crecimiento; aunque las plantas, como los animales, exhiben fase embrionario, juvenil, adolescente y adulto, hay una diferencia en la manera en que los animales y plantas crecen y envejecen. Cuando un animal joven crece, lo hacen todas las partes de su cuerpo, as todas las clulas de un cuerpo maduro son ms o menos iguales, por otro lado cuando las plantas crecen, sus clulas se dividen, desarrollan capas consecutivas en los meristemos que estn constituidos por clulas que se encuentran en continua divisin y que retienen esa capacidad de dividirse por mitosis, las clulas hijas van perdiendo ese rasgo a medida que se van diferenciando. As el desarrollo ocurre en el meristemo cuando los brotes crezcan y la persistencia de los meristemos signica que las plantas retienen durante toda su vida la capacidad de crecer. Esto se observa con ms claridad en un rbol donde paradjicamente, la base que cronolgicamente es la parte ms vieja pero en edad ontognica (formacin de la clula) es la menos madura, mientras que la corona que cronolgicamente es la parte ms joven,
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ontogenticamente es la ms madura. As las yemas laterales, son a menudo dormantes debido a la fuerte dominancia apical de la yemas en la punta o copa, pero estas clulas de las yemas laterales conservan latente el nivel ontognico de madurez que ellas tenan cuando se originaron, as una vez ellas empiezan a crecer, empiezan a desarrollar siguiendo los pasos de desarrollo ontognico.
Si se toman rebrotes de la parte baja de arboles cortados, ellos muestran caractersticas juveniles, como el vigor y el fcil enraizamiento y puede usarse como estacas; como resultado la nueva planta exhibe las mismas caractersticas juveniles, por lo tanto esta forma de propagacin se preere en especies maderables donde se desean vigor, capacidad de enraizamiento y se evite la ramicacin baja. Para desarrollar juvenilidad se han empleado con xito brotes de raz y brotes de yemas adventicias. Las estacas enraizadas obtenidas de injertos de rboles viejos responden como si fueran juveniles. Por el contrario si se toman rebrotes de la corona, los tejidos son siolgicamente ms maduros y tiene menor porcentaje de enraizamiento y originan menor nmero de races que el material siolgicamente juvenil, estas yemas son deseables por ejemplo en rboles frutales, en los cuales mediante injertacin se puede reducir el tiempo a la madurez de las nuevas plantas y la consecuente produccin temprana de frutos; como el enraizamiento de las yemas de estas estacas es difcil a partir del material maduro, el acodo o injerto son preferidos en la propagacin vegetativa de estos brotes.
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3. MTODOS DE PROPAGACIN
3.1. PROPAGACIN POR ESTACAS
a propagacin por estacas consiste en cortar brotes, ramas o races de la planta, las cuales se colocan en una cama enraizadora, con el n de lograr la emisin de races y brotacin de la parte area, hasta obtener una nueva planta. No todas las partes vegetativas de la planta arbrea sirven para estacas, las de fcil enraizamiento se obtienen de madera dura y las de difcil enraizamiento de madera tierna. Se dene como madera dura, aquellas ramas de uno o ms aos de edad y madera tierna las ramas menores de un ao de edad, que an se encuentran en proceso de crecimiento y plena actividad siolgica. Cuando se trate de madera dura, se deben obtener de aquellas ramas ms maduras que correspondan a zonas basales de las mismas, debido a que la garanta de su prendimiento es mayor. La emisin de races en plantas que no tienen esta facultad o que el brote de races es deciente, se puede inducir con el uso de productos hormonales. Origen de las races: Cualquiera que sea el tipo de estacas, el primer estado de la reconstitucin de una planta entera ser el nacimiento de un sistema radicular (salvo para los estaca de races); para las estacas que no posean yemas o tallos, la reconstitucin de un sistema areo intervendr en una segunda etapa. La rizognesis es pues, el conjunto de fenmenos que conducen a emisin de races. Hay que considerar diferentes aspectos en estrecha relacin con el tipo de estaca. En estacas de ramas, el mecanismo de la rizognesis est estrechamente ligado a la existencia del cambium, que juega un papel importante en el nacimiento de las races. Dos esquemas similares son posibles: Un islote de clulas meristemticas de tipo primario, se desarrolla directamente a partir del cambium y despus se organiza enseguida en un meristemo de tipo radical. En la base de la estaca y esencialmente a partir del cambium, una proliferacin celular intensa termina con la formacin de callo. En el interior de este callo, ciertas clulas evolucionan a clulas meristemticas de tipo primario y despus se organizan en meristemos de tipo radical.
1. Planta madre: Balance hormonal, estado energtico, minerales y tosanitario 2. Corte estaca: Contenido de agua, nmero de hojas, tratamientos externos (exgenos) 3. Cicatrizacin herida (formacin callo): Contenido de agua, induccin hormonal, control tosanitario 4. Diferenciacin 5. Primordio de raz: Contenido de agua, induccin hormonal, control tosanitario 6. Sistema vascular 7. Inicio emisin races: Contenido agua, control hormonal y tosanitario 8. Crecimiento radicular: Contenido agua, induccin hormonal, control minerales y tosanitario 9. Endurecimiento: Efecto fertilizantes, control hormonal y tosanitario 10. Crecimiento planta (nueva planta): Efecto fertilizante y control hormonal
Diferentes estados en el proceso de enraizamiento y factores que afectan a cada una de las etapas (Wiesman et al. ICRAF 2002)
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No hay una regla precisa para que una especie evolucione siguiendo uno u otro de estos esquemas, se puede simplemente precisar que el primer esquema se encuentra ms bien en las plantas herbceas, mientras que el segundo se ajusta a las plantas leosas. El proceso que determina con el nacimiento de las races merece algunas explicaciones ya que no es un fenmeno global, sino una sucesin de etapas estrechamente ligadas las unas a las otras. Actividad inicial: Inmediatamente despus del corte de la estaca, se observa en ciertas clulas, unas modicaciones, en particular la activacin de la biosntesis de ciertas molculas. Estas modicaciones estn particularmente marcadas a nivel de los cambiums y de los vasos conductores. Esta primera etapa, que no es directamente visible, es importante porque es el primer paso hacia el nacimiento de las races. Es de hecho, una activacin general poco especca y polarizada en la base de la estaca. Desdiferenciacin celular: Entre los tejidos activados, slo las capas generatrices y en menor grado, los tejidos vecinos, son el asiento de numerosas divisiones. Estas divisiones terminan con la formacin de un tejido cicatricial de importancia variable que puede, en las leosas y en conferas en general, evolucionar a callo. A nivel de capas generatrices o en el callo, la mitosis sucesiva da progresivamente clulas que tienen las caractersticas de los meristemos primarios. La edicacin de estos islotes es de hecho la etapa decisiva de la rizognesis. Reorganizacin: A partir de los islotes meristemticos, las clulas se van a diferenciar y dar lugar a un meristemo de raz, el cual entrar en crecimiento y despus de haber atravesado los tejidos vecinos, la raz neoformada se har visible.
Se recomienda espacios entre plantas un poco ms amplios que los convencionales. Separar diferentes clones y marcarlos claramente, para permitir que algunos clones crezcan hasta que expresen sus caractersticas como plantas maduras. Permitir que las plantas crezcan bajo sombra, por ejemplo, bajo rboles. Obtencin de estacas: Una vez cortadas las estacas se introducen en una bolsa de polietileno humedecida, para transportarlas hay que conservarlas bajo sombra sin presionar la bolsa. Si se estn llevando las estacas a larga distancia, hay que colocarlas en cajones en condiciones fras, pero asegurando que no estn directamente en contacto con elementos fros. En el vivero, hay que tener todos los equipos y herramientas listos para no sufrir demoras entre el corte y la propagacin, ya que la demora puede causar secamiento de las estacas. La obtencin de las ramas de la planta madre debe realizarse temprano en la maana o al nal de la tarde, antes de las 10 a.m. y despus de la 4 p.m., para evitar prdidas de agua durante las horas de mxima insolacin, esto conservar la transpiracin y se reducira el secamiento. Es conveniente que la poda de las ramas elegidas con crecimiento vertical, se realice a la altura del nudo 10 o menos como en el caso de los brotes obtenidos de tocones. Cuando no se distingan los nudos se deben tomar entre los 10 cm y 1 metro de altura, eso para garantizar un buen enraizamiento. Las hojas de las ramas de donde se obtendrn los cortes deben tener entre 8 y 10 cm de largo hay que reducir el rea foliar debido a que las hojas muy grandes favorecen la prdida de agua y las muy pequeas no producen sucientes carbohidratos, se puede reducir el rea foliar podando las hojas cuidadosamente antes de que las ramas sean separadas de la planta madre, as se reduce la prdida de agua cortando las hojas. Induccin del enraizamiento: No todas las plantas tienen la capacidad de enraizar espontneamente, por lo que a veces es necesario aplicar sustancias hormonales que provoquen la formacin de races. Para favorecer y acelerar la emisin de races, se usan productos hormonales reguladores de crecimiento, pudindose mezclar o usar simultneamente varios para aumentar el efecto de los mismos. Como se describi anteriormente se debe prestar mucha atencin a la dosicacin de estas sustancias. Las auxinas
Conceptos Bsicos y Experiencias con Especies Amaznicas
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localizada y pueden transformarse rpidamente en txicas, sin embargo, en un suelo o en un sustrato orgnico, los microorganismos degradan con bastante rapidez estos productos. Los mtodos de aplicacin varan segn la formulacin del producto comercial, generalmente viene para uso directo en polvo o para disolucin en agua. Para el segundo caso se pueden utilizar dos estrategias: remojo de la base de las estacas (de 2 a 3 cm) en soluciones de baja concentracin de la hormona por tiempos prolongados (de 4 a 12 horas) este mtodo es lento y poco exacto, difcil de realizar cuando el material es numeroso y algunas veces las hojas se marchitan durante el proceso, por ello se puede recurrir a soluciones con alta concentracin y tiempos de inmersin cortos (5 a 15 minutos); una variante con buenos resultados es el uso de alcohol etlico como solvente con tiempos cortos de inmersin (5 segundos), posteriormente, antes de colocarlas en el sustrato de propagacin, se somete la base de la estaca al aire fro para evaporar el alcohol. La mayora de las especies forestales enraizan adecuadamente con AIB, aunque se ha observado que para algunos clones la adicin de ANA resulta ms benca. Para las especies forestales tropicales se recomienda la inmersin de la base de las estacas en soluciones de AIB al 4% en alcohol etlico como solvente.
Propagadores y medios de enraizamiento: Un propagador es una construccin que evita la prdida de agua del medio que rodea a las estacas, su funcin es similar a la de un almcigo, pues ambos propician las condiciones ambientales adecuadas para la germinacin y establecimiento de las plntulas o para el enraizamiento de las estacas, segn sea el caso de que se trate. El rea, debe ser fresca y sombreada, la temperatura ptima se encuentra entre los 20 y 25C. Cuando las temperaturas son mayores de 30C la humedad relativa de la atmsfera o contenido de vapor de agua presente en el aire tendr que ser muy alto (ms de 90%) para impedir que las plantas pierdan demasiada agua y terminen marchitndose, al incrementarse su transpiracin. La sombra se puede producir con materiales de origen vegetal como hojas de palma, paja, ramas secas o con mallas plsticas especiales diseadas para ese propsito, es importante que el material utilizado transmita una luz que sea apropiada para activar la fotosntesis de las plantas. Independientemente del origen de la estaca, se deben sembrar en un buen sustrato o suelo, la mayora de especies tropicales requiere un medio ligero con buen drenaje y porosidad, lo que evita el encharcamiento o
sintticas utilizadas para el enraizamiento son mucho ms estables que la auxina natural, su accin est fuertemente
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excesos de agua que puedan causar la muerte de la estaca; igualmente, permite el fcil arranque de las plantas una vez hayan enraizado. Los siguientes sustratos son los ms adecuados: arena na de ro, gravilla na y vermiculita, para evitar problemas de plagas y enfermedades los sustratos deben ser lavados apropiadamente, si es posible esterilizados antes de usarlos y deben ser renovados una vez al ao. Si su capacidad de retencin de agua es baja se puede mejorar adicionando aserrn (no demasiado fresco), turba, vermiculita u otros materiales. En el caso de haber inicios de pudrimiento en las estacas ser necesario aplicar algn fungicida al medio de enraizamiento. Siembra de las estacas en el propagador: Las estacas ya preparadas se siembran rpidamente, los cortes deben colocarse a una profundidad de 2 a 3 cm, para asegurar que queden rmes es necesario compactar un poco el sustrato; cuando se utilizan estacas con varias hojas se debe evitar que las hojas inferiores queden en contacto con el medio de enraizamiento para evitar la pudricin. Las estacas de madera madura deben tener 30 cm de longitud, con 10 a 14 yemas. Al sembrar la estaca, se entierran tres yemas, para obtener la emisin de races en los respectivos nudos enterrados y de las yemas que no son enterradas, brotarn aquellas que presenten mayor vigor, que constituir la parte area de la nueva planta. Cuando se van a obtener las estacas, se deben seleccionar ramas jvenes que presenten crecimiento normal, no demasiados vigorosas ni muy dbiles, luego de eso se cortan las estacas de la parte media de estas ramas, las estacas deben tener una longitud de cinco a diez centmetros, y con tres a cuatro yemas dejando algunas hojas y eliminando aquellas hojas bajeras, que se encuentran en el rea a sembrar. Trasplante y acondicionamiento de las estacas: En varias especies propagadas vegetativamente se ha observado que el enraizamiento de las estacas se inicia despus de dos semanas, y est lo sucientemente desarrollado despus de 4 a 6 semanas (cuando las races miden de 1 a 2 cm). Las estacas que enraizan en tiempos ms largos son dbiles y no deben conservarse. El trasplante de las estacas tiene que hacerse inmediatamente despus de ser removidas del medio de enraizamiento. Al sacar las estacas de su medio hay que vericar que el sistema radical tenga tres races como mnimo y que su distribucin sea radial de lo contrario se pone en riesgo el vigor o una adecuada forma de crecimiento. El nuevo sustrato debe ser aireado y con buena fertilidad. Es
recomendable agregar tierra del sitio donde naturalmente crece la especie para as favorecer la inoculacin de la microora apropiada. Es necesario estabilizar los trasplantes adecuadamente, para lo cual los envases deben llenarse con el medio de crecimiento aproximadamente a la mitad de su capacidad, se coloca la estaca con la yema al ras del suelo y en su mayor parte dentro del medio del envase y se termina de llenar. Esto ayuda a que no queden espacios de aire en su base y a que las races no se daen, lo que asegura que stas queden bien distribuidas en el envase (sin curvaturas o enrollamientos). Cuando hay ms de una yema se recomienda eliminar algunas con el n de asegurar la formacin de plantas con un solo eje y favorecer que el eje se desarrolle en forma recta. Algunas estacas recin enraizadas se deshidratan al pasarlas directamente al medio externo, por lo que se recomienda dejar los envases unos das ms en el propagador, protegiendo a ste con plstico para evitar su contaminacin con el material de los envases. En el perodo en que las estacas se aclimatan a las condiciones ambientales que existen fuera del propagador es conveniente colocarlas primero en un ambiente sombreado y hmedo por dos o tres semanas y despus exponerlas paulatinamente a condiciones decrecientes de humedad y crecientes de luz y temperatura.
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Estado fisiolgico: Su importancia es grande, es la resultante de diversos componentes del metabolismo ms o menos inuenciados por factores exgenos. Se puede distinguir entre los principales factores que intervienen en la capacidad de producir races, la edad del tejido (estados de desarrollo), la regulacin hormonal, las condiciones de luz y temperatura de la planta madre y del ambiente de la estaca y el estado nutricional de la planta donante; en este caso el rea foliar de la planta madre inuye va fotosntesis en una adecuada reserva nutricional de la estaca pues la iniciacin de races requiere de metabolitos y nutrientes. En algunos casos la estaca tambin requiere de presencia de follaje para enraizar, pues sus reservas nutritivas no permiten la creacin de nuevas estructuras, por lo tanto para este caso, las estacas debern mantener cierto nmero de hojas. No se debe olvidar que tambin puede aumentar la transpiracin, para evitar muerte por desecamiento de la estaca, las condiciones ambientales del sitio de propagacin debern ser muy bien controladas. Aspectos fitosanitarios: El estado de salud de las plantas donantes y de las yemas tambin es importante. Hay que evitar colectar yemas de plantas enfermas, especialmente de bacterias, virus u hongos. Esto no solamente afecta el proceso de enraizamiento, sino que se puede expandir el problema cuando la yema se transplante al campo. En algunos casos, las yemas pueden ser tratadas con pesticidas o mojadas en una mezcla con esterilizante como hipoclorito (blanqueador).
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dividir en nuevas clulas que pueden diferenciar en los nuevos tejidos y rganos. El callo (el tejido); conjunto de clulas no diferenciadas formadas alrededor de una herida de la planta. En el injerto, este callo se formar alrededor de la herida en la unin de la copa y el patrn. De las clulas del callo se desarrolla, el nuevo tejido vascular que permitir a la copa y al patrn funcionar como una sola planta.
la planta as a una situacin de ligero estrs, induciendo prolca oracin. Experimentos anteriores que apoyan esta teora ya han demostrado que mediante el uso del autoinjerto (injertando un copa hacia su propio patrn), podra lograrse un aumento en la produccin de fruta (Hodgson y Cameron 1935). Es importante anotar que la copa tambin puede tener una inuencia en el patrn, estas inuencias son a menudo indeseables, como la infeccin de un patrn susceptible con un virus transmitido de la copa.
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de la misma especie. El injerto entre gneros de una familia raramente es exitoso. Injertos entre familias ha sido mostrado slo en casos experimentales aislados y principalmente con las plantas anuales en que no puede mostrar las incompatibilidades del injerto. Cualquiera de las especies dentro del gnero de los ctricos normalmente puede injertarse entre ellas sin problemas. En especies amaznicas como copoaz Theobroma grandiorum y cacao maraco Theobroma maraco, cedro con bilibil y boroj con huito, se han adelantado algunos ensayos sobre posibilidades de injerto entre especies sin obtener an resultados favorables.
es una insercin entre el patrn y la copa de un tercer tejido vegetal. Este interinjerto, proporciona un puente el cual todava permite expresar las caractersticas de copa y patrn. Este sistema es conocido en caucho como el triple injerto (patrn, tallo y copa) o doble injerto de copa, el cual ha sido utilizado con xito en Brasil (Moraes).
Incompatibilidad
La no anidad entre dos vegetales puede expresarse en: Falta de brote del injerto que supone la muerte del vegetal injertado, el dbil porcentaje de xito (menos del 75%) donde la aparicin del callo de cicatrizacin que supone el xito del injerto, pero sin el posterior desarrollo del mismo. La incompatibilidad se expresa como engrosamientos (abultamiento) en el sitio de injertacin, desigual crecimiento entre las partes, disminucin del vigor de la parte area, separacin de las partes (injerto y patrn) y en casos extremos muerte de la nueva planta. La incompatibilidad se puede presentar en diferentes estados de desarrollo o edad de la nueva planta formada durante el proceso de injertacin. Los sntomas de incompatibilidad no siempre aparecen inmediatamente, en algunos casos ellos pueden aparecer varias dcadas despus de que la unin fue formada; por ejemplo, cuando hay tormentas fuertes pueden romper el punto de la unin del injerto. Los sntomas de incompatibilidad ms comunes son: El fracaso para formar una exitosa unin del injerto. La defoliacin temprana de plantas caduco, declina el crecimiento vegetativo debido a la muerte descendente y en general a la mala salud de la planta. Muerte prematura de rboles mientras todava estn en el invernadero o despus de unos pocos aos. Las diferencias marcadas en proporcin de crecimiento o vigor entre el copa y patrn; el crecimiento excesivo arriba, o debajo de la unin del injerto. Las diferencias entre el copa y patrn en el inicio del crecimiento vegetativo despus de la dormancia o inactividad debido a sequedad o las temperaturas bajas. Aparte de la rotura, los casos aislados de los sntomas anteriores no son indicativos de incompatibilidades. A veces, las incompatibilidades del injerto pueden ser evitadas por el uso de un interinjerto mutuamente compatible que
Conceptos Bsicos y Experiencias con Especies Amaznicas
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Esquema de formacin del injerto, curacin de la herida y produccin del nuevo xilema, floema y cambio (Adaptado de Hartmann et al., 1997) temperaturas estn entre 15 y 30C pero para algunas plantas tropicales podra ser ms alto, por debajo de eso, la actividad metablica es demasiado baja para garantizar el crecimiento celular suciente; por encima puede haber muerte celular lo que conlleva al fracaso. La humedad alta y temperaturas que se requieren para el injerto exitoso tambin favorecen el crecimiento bacteriano y de hongos. Es por consiguiente indispensable el sumo cuidado y limpieza en la prctica del injerto. La actividad siolgica de la copa y el portainjerto o patrn puede tener una inuencia en el proceso curativo de la herida. Para muchas especies tropicales de hojas perennes muchas de las cuales orecen y fructican simultneamente, no es aconsejable hacerlo en perodo seco prolongado pues induce la dormancia de las yemas, el perodo del inicio de las lluvias puede ser el mejor momento para injertar. Adems de estos factores que afectan el xito del injerto, hay especies y diferencias entre clones. Algunas especies se propagan fcilmente injertando, aunque otras tienden a tener una proporcin de xito baja. Se supone que la razn puede ser la velocidad diferente y vigor de formacin del callo despus de la herida, o la habilidad de alinearse emparejando las formaciones celulares exactamente, en particular el retculo endoplasmtico de las dos partes del injerto (Kollmann, 1992). En especies que forman rpidamente el callo de la herida, las clulas recientemente formadas son protegidas del desecamiento y as sobreviven mejor que en plantas en que la formacin del callo es lenta y pobre. Las incompatibilidades del tejido tambin puede ser una causa del pobre xito del injerto.
Tipo de injerto Aproximacin. Unin sin separacin de dos tallos Ramas separadas Hendidura. Injerto de una rama sobre una incisin terminal o lateral de un tallo. Incrustacin. Injerto de un tallo sobre otro. Yemas. Injerto de una yema en la corteza de un tallo.
Aproximacin en placa. Pa terminal o lateral. Corona. Empalme o ingls. Ventana o parche. T o escudete.
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Injerto de aproximacin
Esta es una forma de injerto particularmente conveniente para las combinaciones difciles. Ambos, copa y patrn, siguen siendo plantas intactas hasta estar seguros que la unin del injerto funcion, as se permite a las dos plantas seguir usando su propios sistemas vasculares para la asimilacin y captacin de agua.
Se insertan una o dos pas en la hendidura, si son dos se coloca una en cada extremo de la hendidura. Las pas deben de colocarse con todo cuidado para que coincidan las capas de cambium del patrn y las pas. Una vez que se han colocado apropiadamente las pas, se cubre completamente la unin con cera de injertar, incluyendo las puntas de las pas.
Hendidura doble
Hendidura sencilla Injertos de corona No se debe hablar propiamente de un injerto de multiplicacin sino ms bien un sobreinjerto destinado
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a modicar una produccin existente. Se usa mucho en rboles de madera suave. Pasos para seguir: En el tocn del patrn se hace un corte vertical en la corteza hasta la madera, de 2.5 a 5 cm de largo. Se separa ligeramente la corteza de la madera. La pa se prepara, en un lado se hace un corte largo en bisel con un hombro y un corte ms pequeo en el lado opuesto. Las pas se insertan, empujndolas hacia abajo entre la corteza previamente despegada y la madera justamente debajo de cada corte. Luego la unin del injerto, se cubre completamente cubriendo el tocn injertado y las puntas de las pas.
Injerto simple Injerto empalme o ingls con lengeta Una versin ms segura de injerto es el injerto con lengeta. Esta tcnica es un poco ms lenta de realizar, pero presenta la ventaja de poder prescindir de ligadura ya que no hay peligro que ambos tejidos cortados se resbalen, ya que se mantienen bien encajados solos en el lugar. La pa y el patrn se preparan como anteriormente se describi en el injerto de empalme simple, pero en este caso los cortes en bisel no son planos, sino que tienen un corte adicional o una hendidura de algunos centmetros dejando para ello una lengeta en el tercio superior de cada uno de los biseles (copa y patrn). Las dos partes enseguida se encajan trabando las lengetas y haciendo corresponder los cambium. El mtodo requiere el material suave y se usa a menudo con plantas jvenes con poca lignicacin.
Injerto de corona Injerto empalme o ingls simple Utilizado muy corrientemente por su rapidez de ejecucin (de 90 a 120 injertos a la hora). Al patrn se le corta la parte terminal y despus se hace un corte en bisel plano (cuanto ms alargado este bisel, mayores sern las supercies en contacto y mayor ser el xito). Para la copa se prepara una pa, haciendo un corte a un solo lado en forma de bisel plano cuyas dimensiones sern parecidas a las del patrn, esta cua puede tener tres yemas. Uno y otro se colocan cara a cara haciendo coincidir las capas del cambium, cuidando que no se resbalen cuando se unan las dos piezas. Si la pa injertada es de un dimetro inferior al del patrn, conviene hacer coincidir muy bien los cambiums de los dos tejidos. El injerto as acoplado se une enseguida fuertemente, utilizndose frecuentemente una cinta de caucho. Una masilla en fro o una parana fundida protegern el punto de injerto. Dependiendo del vegetal injertado, slo ser protegido el punto de injerto o ser empapada en la parana hasta el cuello.
Injerto de yema
El mtodo de injerto en yema es utilizado en operaciones de propagacin en las que se maneja un gran nmero de plantas y en las que la rapidez y la baja mortalidad son esenciales, casi siempre se preere injertar de yema sobre patrones seleccionados. Por lo general, la prctica del injerto de yema se conna a las plantas jvenes o a las ramas ms delgadas de plantas grandes en las que las yemas puedan insertarse en ramas pequeas
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de desarrollo vigoroso que tienen de 0.5 a 2.5 cm de dimetro. El sobre injerto de rboles jvenes por medio de yemas tiene bastante xito. El injerto de yema puede producir una unin ms fuerte, especialmente durante los primeros aos, que la lograda con injerto de otro tipo, de modo que es menos probable que las ramas sean arrancadas por vientos fuertes. Con el injerto de yema se hace un uso ms econmico de la madera de pas que en los otros tipos de injerto, ya que cada yema es potencialmente capaz de producir una nueva planta de la variedad deseada. Esto puede ser de mucha importancia cuando la madera de propagacin es escasa. Adems las tcnicas del injerto de yema son bastantes sencillas y puede fcilmente ejecutarlas el acionado. Patrones para el injerto de yema: Para propagar mediante injerto de yema las diversas especies frutales, se usa una planta patrn, la cual deber tener las caractersticas deseadas de vigor, hbito de crecimiento y resistencia a las enfermedades y ser de fcil propagacin. Estas plantas patrones son plantas procedentes de semilla. poca para el injerto de yema: La mayora de los mtodos para injertar de yema se practican en las estaciones del ao en que la planta patrn se encuentra en crecimiento activo y en que las clulas cambiales estn en divisin activa, de modo que la corteza se separe fcilmente de la madera. Injerto de yema en T Es el mtodo ms comn de los mtodos de injerto de yema, su uso est delimitado generalmente a patrones que tienen de 0.5 a 2.5 cm de dimetro, con corteza que se separa fcilmente de la madera, si la corteza est tan adherida a la madera que se tenga que forzar para separarlas, la probabilidad de que prenda el injerto de yema es ms bien escasa. En general este mtodo adecuadamente realizado da buenos resultados. Las varetas de los injertos o copas se recogen poco tiempo antes del injerto. Inmediatamente deshojadas, son conservadas en un lugar fresco y hmedo (cmara fra) hasta el momento del injerto. En el momento del injerto, se realiza sobre el portainjerto o patrn un corte en la corteza en forma de T y despus se separa con la ayuda de una esptula. La yema se obtiene de la vareta con una porcin de corteza procurando no conservar parte leosa, ya que esto impedir el contacto entre los cambium y el xito del injerto sera menor.
Injerto en T La yema se inserta rpidamente bajo la corteza previamente levantada del patrn; se coloca en medio de la hendidura longitudinal y los rebordes cortados de la corteza son entonces suprimidos. La yema se protege de la desecacin y los tejidos se mantienen en contacto estrecho mediante una atadura con una banda de celofn hmedo que rodea en espirales regulares, la yema durante su desarrollo perforar, sin problemas, estas protecciones. En algunas regiones bastantes hmedas donde se teme menos un desecamiento, se utilizan tambin bandas de caucho. Algunos viveristas tienden a mantener bajo la yema, una porcin de pecolo, porque ste les permite vericar el funcionamiento del injerto; a las tres semanas o al mes, si el pecolo cae cuando se le toca, el injerto ha salido adelante, en el caso contrario, ha sido un fracaso. Este fenmeno se explica por la formacin de una sustancia de crecimiento natural por la planta: el cido abscsico que estimula la abscisin de las hojas; si esta sustancia es elaborada por la yema, es signo claro de que sta no est seca. Los injertos habrn pegado a partir del brote de la yema, si el injerto funciona, la yema va a poder desarrollarse. Injerto de yema en T invertida En lugares donde llueve mucho, el agua que se escurra en los tallos del patrn en ocasiones entra en el corte en T, remoja debajo de la corteza y ocasiona que se pudra el escudete, en esas condiciones, un corte en T invertida puede dar excelentes resultados, ya que se presta ms para que escurra el exceso del agua. Injerto de ventana o parche Este es un mtodo ampliamente usado para los rboles tropicales con corteza espesa, como el rbol de caucho. Puede usarse en plantas con 10 cm de dimetro. El injerto de parche requiere que la corteza, tanto del patrn como de la yema desprenda con facilidad. Con
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Injerto de ventana esta tcnica un pedazo o un parche rectangular de corteza se saca del patrn, normalmente con un cuchillo especial que tiene dos cuchillas paralelas separadas 2 a 3 cm, luego es extrado de la copa un parche o un pedazo de corteza que incluye una yema (del mismo tamao del rea que se saco del patrn); este parche es colocado en forma muy alineada en el espacio que qued en el patrn. Esta unin es protegida con cinta de injertar tapando todas las reas cortadas de la unin, pero dejando libre la yema.
3.2.5. Ventajas
Se utiliza para obtener un rbol de una procedencia mejorada al ser injertado como copa sobre un patrn de una variedad no mejorada como sucede en el caucho, o para obtener un rbol que combina las caractersticas buenas de una planta en la copa y otra planta en el patrn. A menudo, un cultivar deseable no posee una caracterstica que otro cultivar o procedencia pueden tener. Por ejemplo, algunos clones de ctricos son tolerantes o resistentes a la sequa, condiciones salinas o patgenos del suelo, pero no tienen la calidad de fruta. En algunas especies, sobre todo el ctrico, el patrn tambin tiene inuencia sobre la calidad de la fruta. Otra inuencia importante comercialmente del patrn es el vigor de la planta. El injerto de material mejorado de la copa hacia estos rboles establecidos pueden ser econmicamente beneciosos.
Para disminuir el tiempo a la madurez; injertar una copa madura en un patrn vigoroso joven tiene el mismo efecto y es a menudo ms exitoso que sembrar estacas maduras. El principio bsico detrs de este fenmeno es que un sistema de la raz fuerte ya est desarrollado y la energa de la planta puede utilizarse en la oracin y produccin de fruta. Por eso se utiliza el injerto para disminuir la cantidad de tiempo que un rbol necesita lograr la madurez (orecer y fructicar). Y para eliminar barreras de no fructicacin o poca fructicacin bajo un clima. Otra posibilidad, especialmente interesante para agricultores con parcelas muy pequeas, es el hecho que pudieran obtenerse variedades tempranas y tardas de un mismo rbol. En plantas dioicas, como la uva caimarona, Pouroma sp.; boroj, Borojoa patinoi; inchi, Caryodendrun orinocensis, que tienen ores machos y hembras en rboles separados, se presenta un problema para los productores, cuando hay rbol hembra en una proporcin desventajosa con respecto a los rboles machos. Un rbol macho improductivo puede cambiarse a un rbol hembra injertando la copa de una planta de la madre hembra en el tallo del patrn masculino. Igualmente si no hay bastantes polinizadores disponibles (e.g despus de que se tumbaron los rboles masculinos improductivos), una copa de un rbol masculino puede insertarse en la corona de un rbol hembra. En rboles de valor que han sufrido dao severo causado por animales o sequedad y que valen la pena salvar, se puede reparar el dao en ciertas partes de un rbol como races o tronco, utilizando los injertos de puente, los cuales pueden restablecer la circulacin de savia. Tambin se puede usar para renovar plantaciones de rboles ms viejos, injertando material joven de otro rbol, evitando as iniciar la siembra de nuevos huertos. El injerto se usa para descubrir enfermedades virales en algunas especies importantes comercialmente (por ejemplo ctricos), las enfermedades virales son serios problemas. Por eso si hay duda sobre si un rbol est enfermo, un brote prueba de esa planta puede insertarse en un indicador limpio, muy susceptible. Esta planta mostrar los sntomas y as se pueden prevenir la expansin del virus. Para adaptacin de materiales que tienen limitaciones de crecer en suelos cidos y calcreos, poco aireados, secos, salinos. Tambin para adaptar plantas a resistencia a fro y enfermedades del suelo. Para adaptar rboles a formas de cultivo, como capacidad de ramicacin, enanismo, para muchas especies de fruta, empequeeciendo los patrones se han desarrollado.
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3.2.6. Desventajas
Tiene algunas desventajas como: La disminucin de longevidad de rboles. El riesgo de transmisin de enfermedades virales, bacterianas por medio de instrumentos de injertacin o por el material utilizado. El incremento en los costos de produccin, ya que son mtodos ms costosos que las estacas.
anillo, para impedir al callo cerrar la herida, hay que cuidar de no hacer un dao excesivo al retoo al cortar la corteza ya que se puede interrumpir el suministro de agua, el suministro de nutrientes a la punta y tambin se aumenta el riesgo de rotura del retoo. Se pueden aplicar sustancias que promueven el enraizamiento como auxina en polvo, sola o mezclada con un fungicida si es necesario. Sustrato: Un adecuado sustrato enraizador debe ser ligero en el peso, poroso para permitir el suciente intercambio de oxgeno alrededor de la herida, pero con una capacidad de retencin de agua alta; el musgo, la bra de coco, el aserrn, la vermiculita o las mezclas de tierra con cualquiera de estos sustratos han demostrado ser convenientes. Un poco de tierra de debajo los rboles establecidos puede agregarse al sustrato para ayudar en el proceso de enraizamiento, sobre todo para especies que requieren el microsymbionts. Dos manojos de un adecuado sustrato enraizador se aplican alrededor de la herida. Este sustrato se sostiene adherido a la herida con un plstico y se envuelve en la lmina de aluminio para conservar la humedad y prevenir el excesivo calor. Para mejorar la proporcin de supervivencia del acodo enraizado, se podan o cortan completamente las races del retoo unos das antes del corte del acodo. A la cosecha, los acodos deben ponerse inmediatamente en un recipiente con el agua y entonces sembradas en condiciones de luz apropiada, y medio nutritivo, bajo la sombra, preferentemente bajo las condiciones hmedas. Las especies que normalmente se propagan por el acodo areo son Manguifera indica, Ficus spp., Citrus auriculiformis y Persea americana. Es un mtodo que es muy apropiado para los ambientes hmedos, pero con cuidado, tambin puede tener el xito en los climas ms secos. La humedad suciente es la llave al xito y las capas
3.3.1. Procedimiento
Pueden hacerse acodo casi con cualquier planta leosa y pueden ser un mtodo excelente para propagar nmeros pequeos de rboles individuales. Para ello se utilizan retoos relativamente jvenes, vigorosos y bastante leosos para resistir el tratamiento. Corte: El lugar donde se hace el anillo para el acodo debe tener una longitud entre 20 y 60 cm a partir de la punta de la rama, para evitar en el futuro retoos enraizados largos que pueden tener dicultades de establecimiento; en el rea seleccionada, se retira la corteza en un anillo completo de aproximadamente 1-5 cm, para provocar all una acumulacin de hormonas que promueven el enraizamiento, es importante quitar una buena rea de
Conceptos Bsicos y Experiencias con Especies Amaznicas
Acodo
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contacto con el suelo, razn por la cual su extremo o pice se arquea, momento en el cual se puede realizar el acodo de punta. El acodo de punta consiste en enterrar el extremo o pice de la rama joven en un agujero o zanja de cinco a diez centmetros (5 a 10 cm) de profundidad que se hace en el suelo que est en contacto con dicha rama. Aproximadamente al mes, de dicha punta emerge una pequea planta, vigorosa y fuerte originada del extremo o pice enterrado y en la base de la parte arqueada, se pueden observar un sistema radicular bien desarrollado. La nueva planta obtenida, se separa de la planta madre con un corte que se realiza entre 30 y 40 cm arriba del sistema radicular formado. Acodo subterrneo: Se realiza en aquellas especies que sus ramas son largas y exibles como frutales, ortiga, titonia y consiste en enterrar parte la rama, manteniendo su extremo libre; a la parte que se va a enterrar se le puede realizar incisiones y aplicar reguladores de crecimiento, con el n de estimular la emisin de races. En algunas ocasiones, una vez formada la nueva planta, para permitir la formacin de una planta vigorosa, no se separa de la planta madre, quien le aporta los nutrientes necesarios para su crecimiento y desarrollo. Esto se practica en el cultivo de vid o uva, para el reemplazo de plantas daadas o baja produccin. Acodo de cepa: Esta clase de propagacin, es empleado en la fruticultura para la obtencin de patrones para injertacin, por lo que se debe ser exigente en aspectos como material parental elite de excelente calidad y sanidad, suelo de adecuadas propiedades fsicas y qumicas, y adecuada aplicacin de la tcnica.
Acodo de cepa
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3.3.3. Ventajas
No hay prdidas de material vegetal por falta de prendimiento, ya que mientras no haya emisin de races el retoo no se separa de la planta. Como todos los mtodos de multiplicacin vegetativa, el acodo asegura una transmisin el de los caracteres de familia. Es muy utilizado hace ya algn tiempo, el acodo se reservaba para los vegetales leosos cuyo brote por estacas es arriesgado o para casos donde se necesitan pequeas cantidades. En nuestros das este mtodo est reservado a ciertos vegetales de adorno en sus lugares de origen (Ficus) as como a ciertas especies frutales, de modo mecanizado. Se pueden obviar incompatibilidades que se presentan con los injertos.
plantas hijas. La fresa es un ejemplo de las especies que comnmente presentan este tipo de propagacin. Ejemplos de estos son los pastos del gnero Brachiaria.
Rizomas
Se generan a partir del crecimiento horizontal de un tallo subterrneo, por lo general ms robusto que el que da origen a un estoln. Las viejas porciones se degradan y se separan en fragmentos que debern enraizar de manera independiente. Este tallo subterrneo presenta hojas escamosas en las axilas, donde se pueden generar yemas axilares, adems de presentar races adventicias. Una vez formado el vstago principal se da un crecimiento continuo. Cada estacin de crecimiento presenta un crecimiento simpodial por medio de la yema axilar o monopodial por medio de la yema terminal. El rizoma funciona como rgano de almacenamiento de reservas. De esta manera se propagan especies de importancia econmica, tales como el bamb, la caa de azcar, el pltano, as como algunos pastos.
3.3.4. Desventajas
Los inconvenientes del acodo, incumben a la dbil productividad de las plantas madres. La duracin del enraizamiento a veces demasiado larga. Hay una ocupacin signicativa del terreno demasiado en relacin con los rendimientos. Los tiempos de trabajo con frecuencia son muy importantes, hacen que los acodos tengan, en general, muchas dicultades para ser econmicamente competitivos, excepcin hecha de algunos casos particulares.
Tubrculos
Son estructuras gruesas, suculentas, que actan tambin como estructuras de reserva. Se forman en el extremo de tallos subterrneos delgados. Un ejemplo muy conocido lo constituye la papa, tambin la batata y el ame. Los tubrculos presentan en su supercie nudos con hojas escamosas, arreglados de manera espiral y cada uno de ellos consta de una o ms yemas pequeas. Cuando se inicia el crecimiento del vstago principal las races adventicias se desarrollan en la base del tubrculo y las yemas horizontales se alargan y producen tallos etiolados en forma de estolones. A partir de los tubrculos que han formado ramas horizontales se forman tubrculos nuevos. Los tubrculos y los rizomas son muy semejantes y en algunos casos es casi imposible distinguirlos. Sin embargo, una caracterstica distintiva de un rizoma verdadero es que presenta un grosor uniforme en toda su longitud, sobre la cual crecen races adventicias, las cuales no existen en los nudos de los tubrculos. Otra diferencia entre estas estructuras consiste en que el rizoma formar el vstago principal de la nueva planta, mientras que el tubrculo forma ramas laterales.
Brotes
Se denen como ramas o tallos que desarrollan races adventicias sin que sean independientes de la planta progenitora. Se desarrollan en las axilas de las hojas escamosas o de las yemas adventicias sobre las races. En
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la pia comestible los brotes se desarrollan en las axilas de las hojas inferiores que son cubiertas por el suelo.
con hojas engrosadas a manera de escamas que funcionan como rganos de reserva. Es posible que se produzca ms de un bulbo a partir de cada yema. En algunos casos se desarrollan masas de bulbos en el extremo del tallo cada uno de ellos llamados bulbillos, los cuales pueden ser dispersados lejos del bulbo parental. En el centro de los bulbos existe un meristemo vegetativo o un vstago oral. Por su consistencia existen dos tipos de bulbos: 1) los tunicados, que estn cubiertos por escamas secas y membranosas que protegen al bulbo y le dan una estructura ms o menos slida. A esta clase pertenecen la cebolla y el tulipn; 2) los no tunicados, que no presentan la cubierta seca y sus escamas estn separadas y unidas a la placa basal. Este tipo de bulbos se daa fcilmente por lo que deben ser manejados con cuidado.
Cormos
Se forman en las yemas de las axilas de las hojas de un tallo robusto y suculento que proporciona los nutrientes necesarios para la nueva estructura, la cual se desprender del progenitor y se desarrollar subterrneamente como un tallo corto, erecto y slido con nudos y entrenudos. Los cormos tienen forma de esferas aplanadas dorsoventralmente, como los del gladiolo y el azafrn. Estn envueltos en delgadas hojas escamosas que los protegen del dao fsico y de la prdida de agua, pero que no funcionan como estructuras de almacenamiento, a diferencia de las escamas de los bulbos. Cuando se desprenden las escamas marcan crculos alrededor del cormo. ste desarrolla races adventicias ventrales o basales. El pice del cormo es un vstago terminal que se desarrollar en las hojas y en un vstago oral terminado por una inorescencia y en cada uno de los nudos se producen las yemas axilares. El cormo se multiplica ramicndose simpdicamente, y si se corta un cormo, manteniendo una yema en cada seccin, cada uno de estos segmentos desarrollar un cormo nuevo.
Pseudobulbos
Esta estructura vegetativa se da en la familia de las orqudeas. Son crecimientos tuberosos del tallo completo o de parte de ste o de las ramas. En las axilas de las escamas de la base de los pseudobulbos se forman 1) vstagos nuevos o pseudobulbos en serie que conectan segmentos del tallo pseudobulbo y 2) produccin de nuevas plantas en el margen de la hoja, como en la planta millonaria.
Chupones
Son estructuras que se forman en las axilas de las hojas escamosas de los tallos subterrneos y de los rizomas, o de las yemas adventicias de las races. El chupn forma varios entrenudos cortos; despus de formar uno o ms nudos desarrolla races adventicias y puede formar una nueva planta. El pltano y el bamb forman chupones.
Cormelos
Sobre el extremo inferior del cormo se producen pequeas estructuras semejantes a los estolones conocidos como cormelos. La muerte del cormo parental permitir la separacin de los cormos hijos, los cuales pueden ser almacenados durante el invierno y plantados durante la temporada favorable para el crecimiento.
Bulbos
Se desarrollan sobre tallos cortos y engrosados, a partir de yemas axilares de hojas carnosas. De stas obtienen elementos de reserva, a diferencia de los cormos que las obtienen a partir del tallo, lo cual les permite producir rpidamente races adventicias. Se desarrollan subterrneamente en forma de tallos carnosos, cubiertos
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posible encontrarlo en las hojas de algunos helechos, que forman una especie de acodadura al entrar en contacto con el suelo; en otras especies, entre las que se encuentran las violetas africanas, se forman nuevos individuos a partir de las hojas que se desprenden y caen al suelo y que posteriormente desarrollan races adventicias.
liberadas de la planta progenitora. La produccin de yemas vegetativas en lugar de ores se conoce como prolicacin o falsa viviparidad. Los bulbilos son yemas axilares de consistencia carnosa que almacenan reservas. En algunas especies de cebolla los bulbilos se forman en lugar de las ores, mientras que en algunas especies de agave las inorescencias son reemplazadas por cientos de bulbilos. El nombre de estas estructuras de propagacin vegetativa se debe a que visualmente se parecen a los bulbos, pero su color es verde; cuando estn sobre la planta progenitora carecen de races adventicias, las cuales se desarrollan cuando los bulbilos son liberados.
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i bien las especies tropicales amaznicas (maderas, frutas, subproductos de uso industrial) son la opcin ms viable para el desarrollo regional, tambin es cierto que la investigacin dista mucho de las actuales demandas. Las especies de inters son de ciclo largo, es comn la estacionalidad de la produccin semilla sexual, su reproduccin es lenta y en el caso vegetativo es dicultosa, muchas presentan condiciones dioicas y en algunas especies de inters local como el pltano se presentan problemas serios de sanidad que impiden la oferta de material sano. Establecer programas clsicos de mejoramiento implicaran largos perodos de tiempo sin que se le d solucin de fondo a estos problemas. El cultivo de tejidos es una de las tcnicas prcticamente de dominio pblico y que frente a esta problemtica tendra costos relativamente bajos. El cultivo de tejidos es ampliamente utilizado para la produccin de plantas ornamentales y con enorme potencial en plantas tropicales como la yuca, la palma de aceite, el pltano, la papaya, etc. Y ltimamente pases como Brasil y Per vienen incursionando con maderables y especies nativas amaznicas de uso mltiple como copoaz, palo de rosa, camu camu, etc. El cultivo de tejidos consiste en aislar una porcin de la planta, a la cual se le llamar explante o propgulo, y proporcionarle articialmente en un laboratorio, las condiciones fsicas y qumicas que requiera, para que las clulas expresen su potencial intrnseco. Para ello se requiere ante todo de procedimientos de asepsia para mantenerlos libres de contaminacin microbiana. Los principios en los que se fundamenta la aplicabilidad de la tcnica son el de totipotencialidad y regulacin hormonal, que explican con mayor fundamento los modelos biolgicos de morfognesis in vitro. Hoy en da esta tcnica es de amplia aplicacin principalmente en la investigacin del proceso de diferenciacin celular. La aplicacin del concepto puede ser variable en trminos de capacidad y de complejidad, dependiendo de los objetivos que se persigan, es decir,
se puede establecer un laboratorio de cultivos para investigacin bsica (procesos bioqumicos y morfolgicos asociados a la diferenciacin celular), para investigacin aplicada y desarrollo de tecnologas (propagacin clonal y mejoramiento gentico) o para produccin comercial de material vegetativo de una especie en particular. Si bien los primeros son ms pequeos y se requiere de mayor especializacin en personal y equipos, los ltimos son de mayor tamao pero no requieren de equipos sosticados ni de personal altamente especializado. La aplicacin de los resultados de la experimentacin en cultivo de tejidos tiene su mayor expresin en la micropropagacin, entendindose sta como la multiplicacin masiva de un explante con potencial de diferenciarse en condiciones favorables (balance hormonal apropiado y ambiente fsicoqumico controlado) regenerando nuevos individuos similares al donante del explante. Sin embargo, tambin son ampliamente aplicados en procesos de mejoramiento gentico, obtencin de plantas madres libres de virus y patgenos y conservacin de germoplasma. CORPOICA en el C.I. Macagual ha hecho pruebas exploratorias en camu camu, chontaduro, caa y huagra chondur; a nivel de semiescalamiento con pltano.
4.1. MICROPROPAGACIN
La tcnica micropropagacin in vitro de plantas est siendo empleado ecientemente en muchos cultivos hortcolas ornamentales y recientemente en especies leosas. Cuando ya se tiene establecido el protocolo de laboratorio, sta presenta con relacin a los mtodos convencionales anteriormente expuestos importantes ventajas como: Incremento acelerado del nmero de plantas por cada genotipo, reduccin del tiempo de multiplicacin, produccin permanente de material (no hay estacionalidad), posibilidad de multiplicar grandes cantidades de plantas en una supercie reducida (en tiempos y costos econmicamente viables),
Conceptos Bsicos y Experiencias con Especies Amaznicas
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mayor control sobre la sanidad del material propagado, facilidad para el transporte del material, posibilidades de multiplicar con rapidez una variedad o ecotipo del cual se posea pocos individuos. Los costos iniciales cuando se emplean estas tcnicas son altos debido a la inversin en equipos, los precios de los reactivos y la utilizacin de personal calicado. Sin embargo, los incrementos en la eciencia por el gran nmero de plantas sanas que se pueden obtener a partir de un solo pice en un corto tiempo en una pequea rea, hacen que esta tcnica est siendo ampliamente empleada en plantas que con otras condiciones de propagacin presentan menos ventajas.
Embriognesis directa: Previa a la generacin de la plntula se requiere la formacin de un embrin de origen sexual que llegar a ser una planta completa, es el caso de explantes provenientes de granos de polen que forman un embrin haploide, o embriones diploides de semillas o tejido ovular. Organognesis indirecta: El explante genera la formacin de una masa indiferenciada de clulas llamada callo, a partir de ste se forman partes vegetativas diferenciadas como brotes o races, de las cuales se obtiene la plntula segn sea la especie y las hormonas utilizadas. Este es el caso principalmente del cultivo de protoplastos. Embriognesis indirecta: El explante genera la formacin de una masa indiferenciada de clulas llamada callo a partir de ste se forman embriones somticos, del cual se obtiene la plntula segn sea la especie y las hormonas utilizadas. Este es el caso de secciones de tallo, hoja o raz y protoplastos. Medio de cultivo: Conjunto de elementos abiticos (sicoqumicos) que integran la sustancia nutritiva de diversa consistencia (slida a lquida) que suministrara anclaje, nutricin y la estimulacin del desarrollo al explante, de hecho se agrupan en medios slidos semislidos y lquidos. Los elementos necesarios para la preparacin del medio pueden variar en las etapas que pasa el explante durante la micropropagacin y segn sea la tcnica que se va emplear, por esto existen diferentes frmulas y deben ser ajustadas segn las condiciones del laboratorio. La diferencia entre estas frmulas est en la cantidad y concentracin de los elementos que lo conforman. Comercialmente se consiguen ya elaborados: Murashige and Skoog (MS), Whites, Gamborgs, Schenk and Kilderbran, Nitzch, Orchid, etc. Todos estos medios son recomendados para usarse en una o varias especies con diferentes explantes. Un medio de cultivo en forma general est compuesto de: Sales minerales: Estas sales se encargaran de dar el soporte nutritivo de las plntulas. Las sales contienen macronutrientes (N, K, P, Ca, Mg, S,) y micronutrientes (Fe, Mn, Cu, Zn, Cu, Mo, B), que son requeridos por cualquier planta para su desarrollo normal, ejemplo MS. Fuentes de energa: Debido a que el explante no puede elaborar su propio alimento, en la preparacin del medio se emplea, como fuente de energa, principalmente la sacarosa. Se pueden emplear otras como, glucosa, fructosa, lactosa. Agentes solidificantes: Son sustancias que ayudan a crear un medio de soporte de los tejidos u rganos
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Organognesis que vamos a sembrar, estas sustancias reemplazan el suelo que es el sustrato natural, las ms empleadas son los agares. De hecho los medios de cultivo se agrupan en slidos (consistencia dura dada por el agar), semislidos (con menos densidad por menor concentracin del gelicante) y lquidos (no tienen agar). Este ltimo suministra constante y uniformemente contacto entre el medio y el explante y no hay peligro de acumulaciones txicas, es fcil de monitorear (submuestrear), forma pequeos agregados con los cuales es fcil trabajar, forma ms rpidamente callo y es bueno para la regeneracin de protoplastos. A nivel de escalamiento han sido modicados y son llamados sistemas de inmersin temporal o biorreactores. Vitaminas: Son compuestos que normalmente la planta necesita para completar su desarrollo, las vitaminas que ms incluyen en la preparacin de medios son: Thiamina, cido Nicotnico, Piroxidina. Aminocidos: Esta fuente de nitrgeno orgnico, pueden ser necesaria en el medio de cultivo. La Casena Hidrolizada, Glutamina, Asparagidina, Adenina, son empleadas a menudo en la preparacin del medio. Suplementos orgnicos: Estas complejas sustancias son fciles de obtener, pero la denicin de su concentracin es muy difcil debido a que se obtienen directamente de la naturaleza y las concentraciones de sus componentes no pueden ser alteradas. Entre estas sustancias se encuentran el jugo de tomate, de naranja, de zanahoria, el agua de coco, ampliamente utilizada por su valor nutritivo especialmente en el rescate de embriones. Antioxidantes: Para reducir la oxidacin de ciertos tejidos luego de su siembra en el medio se pueden emplear sustancias como carbn activado, o sisteina-HCl, ya sea tratando el explante o aplicndolo al medio. Acidos orgnicos: El TCA, citrato, malato, utilizados tambin en algunos casos para reducir la oxidacin producida por el tejido. Reguladores de crecimiento: La adicin de estas tohormonas al medio en diferentes proporciones, puede
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estimular o detener el crecimiento o diferenciacin de algunos rganos en la planta. Por eso con la utilizacin de estos, en diferentes concentraciones y la mezcla de varios, se puede manipular algunos procesos morfogenticos de la planta. Los principales reguladores de crecimiento son: - Auxinas, Naturales: AIA, Sintticas: 2,4-D, IBA, NAA, PCPA, Dicamba, Picloram. Estas auxinas tienen inuencia en la formacin de callo y la divisin celular. - Citoquininas: Zeatina (natural), Kinetina, IPA, BA (Sintticas). Estn relacionadas con la formacin primaria de los rganos y embriones y la divisin celular. - Giberelinas (GA3): Trabaja principalmente en la elongacin de las clulas - cido abscsico (ABA): Est relacionado con la inhibicin de la elongacin celular. Incubacin: Una vez el tejido ha sido colocado en el medio de cultivo y ste ha sido sellado y marcado, se almacena en una cmara de incubacin bajo condiciones controladas de luz y temperatura. Dependiendo del tejido u rgano cultivado, los requerimientos pueden cambiar, generalmente temperaturas entre 22 y 28C son adecuadas y perodos alternos de luz y oscuridad deben ser manejados, ejemplos de algunos tiempos de luz en almacenamientos: 24 horas en oscuridad y 24 horas bajo luz, 12:12 16:8.
material, se procede al corte y recoleccin del material, es importante utilizar un recipiente adecuado para transportarlo sin causarle dao y no dejar pasar mucho tiempo entre la recoleccin del material y el inicio del cultivo. Una vez este material se encuentre en el laboratorio, se limpia y lava cuidadosamente, luego se elimina parte del tejido externo y posteriormente se procede a la desinfeccin supercial, para ello se puede depositar el tejido que contiene el domo apical o el tejido en crecimiento y desarrollo en una solucin de agua ms un desinfectante hipoclorito de sodio (clorox), ethanol 95% u otros desinfectantes, la adicin de un adherente como tween-20 ayuda a que el desinfectante esterilice mejor a la supercie. Despus de la desinfeccin y bajo condiciones de total asepsia (bajo la cmara de ujo), se lava el tejido 3 veces en agua destilada esterilizada, por perodos de 5 minutos. Para la esterilizacin interna del tejido, se pueden adicionar al medio productos como fungicidas sistmicos y bactericidas como antibiticos esto ayuda a prevenir la presencia de agentes contaminantes. Cuando hay contaminacin, para la determinacin del agente contaminante (hongo, bacteria) se observa el patrn, la densidad del patgeno y el tiempo de ocurrencia de esta contaminacin. No hay una norma con relacin al tipo y concentracin de los desinfectantes y el tiempo de desinfeccin, pues estn determinados principalmente por el tipo de explante; en la prctica se establecen experimentalmente por ensayo y error. Excisin del explante: En esta parte del procedimiento el riesgo de contaminacin es alto, por eso se debe hacer todo dentro de la cmara de ujo, y toda la vidriera e instrumental que se va a utilizar deben haber sido previamente esterilizados en el autoclave o con etanol 95%. Despus que el tejido est lavado se puede colocar unos segundos sobre un papel ltro para que se seque un poco, luego empleando un microscopio de diseccin (estereoscopio), se procede al aislamiento del explante que deseamos cultivar (embrin, meristemo, etc.). - El instrumental (escalpelo, bistur, pinzas) se mantiene en un beaker que contiene 150 cc de etanol 80% y cada vez que se va a utilizar se calienta en la llama para secarle el exceso de etanol. - Se coloca el explante en un plato petri, bajo el estereoscopio y se comienza a eliminar el resto del tejido que est rodeando el meristemo. - Se remueve el meristemo apical (domo apical) de 2-5 mm de largo, ste es removido haciendo cortes al tejido que deseamos eliminar, una vez seleccionado el meristemo, ste se lleva al medio
Introduccin
Consiste en la acondicionamiento del explante para garantizar su supervivencia en condiciones de laboratorio. Es la fase ms importante desde el punto de vista asptico, pues se debe evitar al mximo problemas de contaminacin y de oxidacin que pueden causar la muerte del explante. Dependiendo del tejido sembrado esta etapa comprende a partir del explante la formacin inicial de callo o el crecimiento del meristemo. Preparacin del explante: Una vez seleccionada la planta y la parte de la planta que darn origen al
Conceptos Bsicos y Experiencias con Especies Amaznicas
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de cultivo, es recomendable destapar el recipiente (tubo o petri) cerca de la llama, para disminuir la posibilidad de contaminacin. - El xito de esta labor depende de la habilidad que tenga la persona para evitar contaminacin externa y evitar causar daos al tejido.
la formacin y desarrollo de races. Generalmente las citoquininas se reducen o desaparecen en esta etapa, hay especies en que se les suspende todo tipo de hormonas y se da la formacin de races. Al nal de esta etapa deber quedar formada completamente la vitroplanta.
Multiplicacin o proliferacin
Una vez el explante se ha adaptado a las condiciones del laboratorio, sin presentar ningn tipo de contaminacin endgena o exgena, se aprecie con vitalidad, buen color, buen crecimiento o proliferacin de callo, es pasado a un nuevo medio de cultivo, con adicin de algunas tohormonas cuyo balance generalmente favorece a las citoquininas, necesarias en el proceso de organognesis. A medida que el explante comienza a crecer y multiplicarse es subdividido y cada nuevo propgulo es cultivado individualmente en un nuevo medio de cultivo, una vez se multiplique y crezca, nuevamente es subdividido otra vez; esta parte se le llama subcultivo; el nmero de subdivisiones depende de la especie pero en general no se puede exagerar este proceso porque pueden haber efectos negativos en las vitroplntulas, por ejemplo pueden haber cambios genticos por la accin de las hormonas, en caso de pltano se pueden utilizar unas 5 a 7 subdivisiones. El cambio del explante a un nuevo medio de cultivo se hace en la misma forma que el proceso inicial. El nmero de veces que sea necesario hacerlo depende de las condiciones del tejido y sus requerimientos. Peridicamente se debe hacer cambio de medios de cultivo despus de cada divisin para suministrar constantemente condiciones nutricionales ptimas. La regeneracin del explante depende de muchos factores como el medio de cultivo, el ambiente de incubacin, el genotipo y el origen del explante. La tasa de multiplicacin es muy importante en trminos de eciencia (biolgica y econmica), es decir, el nmero de propgulos, la rapidez en el crecimiento del callo, en la formacin de embriones somticos o en brotes formados a partir del explante inicial, segn sea el caso.
Endurecimiento vitroplanta
aclimatacin
de
la
Debido a que las plantas formadas en condiciones in vitro, crecen bajo un ambiente controlado articialmente y en recipientes cuya humedad relativa es muy alta, se desarrollan muy dbiles y con hojas que carecen de cutcula, si son llevadas a su ambiente natural pueden deshidratarse fcilmente y morir, por lo tanto es muy importante que las vitroplantas no sufran stress por falta de agua o iluminacin directa del sol. Deben ser sometidas a un preacondicionamiento llamado endurecimiento. Al ser sacadas del contenedor o tubo de ensayo, deben ser limpiadas de todo vestigio del medio de cultivo con agua tibia y sumergidas en una solucin de un fungicida sistmico, pues pueden ser una fuente de contaminacin; se colocan en vasos o materas de 250 cc en una mezcla balanceada de suelo, arena y material inerte, estril y almacenadas en un invernadero bajo condiciones de humedad constante y baja radiacin solar (condiciones de cmara hmeda). Se requiere durante los tres primeros das de un ambiente cercano al 95% de humedad relativa y 40% de exposicin a la luz, la humedad relativa se va disminuyendo paulatinamente y la luz se va aumentando a medida que la plntula va creciendo y adaptndose al nuevo ambiente. Al cabo de unos siete das una vez endurecidas deben ser aclimatadas por lo que se transplantan a un nuevo sustrato con suelo, arena y materia orgnica en condiciones de vivero. El comportamiento de estas vitroplantas en el campo es reportado como muy uniforme en cuanto al crecimiento y produccin, sin embargo algunos autores reportan problemas de variaciones genticas (plantas enanas, con entrenudos cortos, variegadas, etc.) en plantas obtenidas por estos mtodos, principalmente por excesivas multiplicaciones o dosis altas de hormonas en el medio.
Enraizamiento
Esta etapa se da cuando se tiene los subcultivos necesarios para garantizar una cantidad determinada de plntulas in vitro o vitroplantas. Los explantes ya propagados se dejan crecer, formar hojas por un perodo de tiempo segn sea la especie y posteriormente son cambiados a un nuevo medio de cultivo en el cual cambiar el balance hormonal favorece a las auxinas, con el n de inducir
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Se injertan en condiciones aspticas los pices de la especie a regenerar sobre jvenes plntulas (decapitadas) de unos quince das, sin virus y cultivadas in vitro. Se ha tenido xito en citrus, prunus, camelia, malus, etc.
Principio
dominancia no intervienen y se expresan algunos caracteres hasta entonces enmascarados. Se llega por este simple hecho a descubrir nuevos cultivares (ejemplos sobre el arroz y la cebada). La jacin de una lnea pura homozigota es ms rpida que por va sexual (ganancia de tres a cinco aos). El anlisis gentico y el estudio del funcionamiento celular se simplican, lo que es muy interesante para los investigadores. Las investigaciones sobre los reconocimientos, marcado y transferencia de genes son igualmente mucho ms fciles, esta tcnica permite la creacin de plantas que no existen en el estado natural. Ejemplo de realizacin en el esprrago. El esprrago es una planta dioica, por va sexual clsica, se obtiene por cruce una descendencia que comprende 50% de plantas hembras. En la produccin de un campo de esprragos compuesto del 50% de plantas macho y del 50% de plantas hembras se ha observado que el 80% de la produccin era el fruto de las plantas macho. Por cultivo del polen se ha fabricado una planta denominada super macho que no existe en la naturaleza y que por cruce, da una descendencia del 100% macho. Lo que signica a efectos de produccin un fuerte aumento de sta.
Inters
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Origen del protoplasto: En teora es posible aislar protoplastos de cualquier tipo de planta, rgano o tejido, sin embargo las fuentes ms utilizadas son: meslo, clulas en suspensin, callos y pices de plntulas generadas in vitro. Tambin se han obtenido protoplastos del endospermo, la capa de aleurona, coleptilo, pices radiculares, ndulos de raz, tubrculos, ptalos y microsporas. Tras escaricacin del limbo, ste se corta en laminillas nas, a continuacin se sumerge en una solucin donde van a desarrollarse dos operaciones simultneas: Plasmosis: La clula se someter a una presin osmtica elevada mediante la adicin de azcares a la solucin. Esta operacin tiene por nalidad esencialmente el evitar el estallido de la clula tras desaparecer su pared esqueltica. Facilita igualmente la separacin de la clula de la pared al concentrar la clula sobre ella misma. Digestin de la pared celular: La degradacin de la pared pecto celulsica, se obtiene por el intermedio de enzimas que se deben determinar para cada especie. Las condiciones del medio para la realizacin de estas operaciones son: temperatura 22C, pH: 5.5, luz: 2.000 a 4.000 lux, duracin: 16 a 24 h. Los protoplastos obtenidos son lavados varias veces, luego centrifugados para eliminar todos los residuos vegetales. Tras dilucin, pueden repicarse en medio lquido agitado o sobre gelatina. El medio es un medio que posee los elementos clsicos del cultivo in vitro, con una alta concentracin en azcar, 10 al 12%. Tras dos o tres das reconstituyen su membrana celulsica. Pueden entrar entonces en divisin y evolucionar hacia una callognesis, luego a un embrin o un meristemo, no siendo obligado el paso por un callo en todas las especies. Condicin osmtica del medio de cultivo: Durante el aislamiento de protoplastos es necesario reemplazar el efecto de la pared ajustando la presin osmtica en la solucin enzimtica y posteriormente en el medio de cultivo. El paso del tejido a la solucin de plasmlisis genera stress que puede tener efecto en el metabolismo, en el crecimiento celular, en la induccin de cambios en la sntesis de hormonas, en la condensacin del ADN en el ncleo y en la reduccin de la sntesis de protenas, aunque los dos ltimos pueden ser reversibles. El potencial osmtico se estabiliza mediante la adicin de manitol, sorbitol, glucosa o sacarosa a la solucin enzimtica y al medio de cultivo; los hexitoles: manitol y sorbitol, no son metabolizados por las clulas. Los protoplastos tienden
a precipitar en soluciones osmticas de hexitoles y glucosa, pero otan en soluciones de sacarosa. La estabilidad, viabilidad y posterior crecimiento de los protoplastos estn ntimamente relacionados con el mantenimiento de apropiadas condiciones osmticas durante el aislamiento y cultivo. El ptimo potencial osmtico vara de acuerdo con la fuente de las clulas y el tejido empleado; en general un adecuado potencial osmtico puede ser logrado con soluciones de azcares de 0.3 a 0.7 M. Las fusiones celulares: Los protoplastos son capaces de fusionarse entre si gracias a la accin del PEG (polietilenglicol, del 15 al 30%). La fusin de dos clulas con 2N cromosomas lleva tericamente a la obtencin de una clula con 4N cromosomas. Los hbridos as obtenidos son hbridos vegetativos (no se utiliza la va sexual), tambin llamados hbridos somticos. Ejemplos: En 1972, una fusin entre dos protoplastos de Nicotiana glauca y Nicotiana langsdor ha originado un hbrido somtico semejante en todos los aspectos al hbrido sexual originado el mismo a partir de estas mismas especies. La fusin somtica entre la patata y el tomate nos da el pomate, hbrido que presenta caracteres intermediarios de los dos padres; planta extraordinaria de laboratorio, pero que no es importante comercialmente. Sin embargo, los xitos estn lejos de ser muy importantes y el nivel de fracasos es elevado pues la fusin de dos clulas somticas puede dar resultados muy variados: 1. Los ncleos y los citoplasmas se fusionan, pero desaparecen cromosoma. Se obtiene un hbrido somtico aneuploide estril. 2. Ncleos y citoplasmas se fusionan sin prdida de cromosomas: es el hbrido somtico con 4N cromosomas frtil. 3. Se fusionan los citoplasmas, pero no los ncleos, se obtiene entonces un hbrido somtico con el ncleo de los padres y un citoplasma hbrido. Se emplea en ocasiones el trmino cybrido para designar este hbrido somtico. 4. Todas las soluciones intermedias son posibles con fusiones parciales de los ncleos o de los citoplasmas. Aunque los xitos hortcolas son todava muy poco numerosos, esta tcnica abre perspectivas variadas y portadoras de esperanzas.
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Recoleccin de yemas
De una pequea plantacin en el Centro de Investigacin Macagual, con una edad aproximada de cuatro aos, se seleccionaron las yemas de la parte media de la copa de plantas precoces, que tuvieron produccin de frutos entre los 30 y 36 meses despus de la siembra en campo.
Introduccin
n el Centro de Investigaciones Macagual de CORPOICA desde el ao 2001, se han adelantado una serie de actividades de investigacin para conocer la respuesta, comportamiento y adaptacin del camu camu a la propagacin vegetativa a travs del injerto. La especie camu camu se encuentra poco domesticada y por lo tanto la planta franca o sin injertar cuando es cultivada, presenta alta variabilidad para iniciar la produccin de frutos (entre 3 y 7 aos) y alta variabilidad en su produccin de fruto, siendo necesario emplear tcnicas de propagacin vegetativa o clonacin, para jar caractersticas deseables como ms precocidad y mejores caractersticas silvoagronmicas, para garantizar una mayor uniformidad de las poblaciones, una de esas tcnicas es la injertacin tipo ventana, empleada en el presente trabajo.
Tcnica de injertacin
El mtodo de injertacin utilizado fue el denominado tipo ventana, donde la yema se extrajo con corteza suciente para su manipulacin. Al patrn se le hizo un corte de 2 cm de longitud por 1 cm de ancho y 0.5 cm de profundidad a una altura de 20 cm del cuello de la raz. La yema fue extrada con dimensiones similares, de tal manera que coincida con la ventana abierta en el patrn. Seguidamente la yema fue presionada lo suciente para que ocupara el lugar de la corteza extrada al patrn y recubierta con cinta plstica transparente, mantenindose entre 25 y 30 das y al cabo de ese tiempo se observ su prendimiento en la gran mayora de plntulas y se procedi a cortar y retirar la cinta. En las plntulas donde el prendimiento no fue total se dej la cinta ocho das ms, al cabo de los cuales se retir denitivamente. En las que persisti el no prendimiento fue necesario realizar una nueva injertacin. Los injertos se han efectuado desde junio 2001 a un total de 12.600 patrones.
Metodologa
Propagacin de patrones
Los patrones se propagaron en el vivero del Centro de Investigaciones Macagual de Corpoica en Florencia, por semillas provenientes de rodales naturales de la frontera Colombo Peruana en reas del ro Putumayo. Luego de
* Agrlogo M.Sc. Suelos y Nutricin de Plantas. Corpoica, CI Macagual ** Ingeniera Forestal. Corpoica, CI Macagual *** Auxiliares de Investigacin. Corpoica, CI Macagual
Resultados y discusin
Sobrevivencia
La fase de unin y cicatrizacin entre los puntos de contacto de la yema y el patrn tuvo un perodo de duracin de aproximadamente 30 hasta ms de 60
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das, tiempo en el cual se hicieron las observaciones para cuanticar la sobrevivencia, determinndose prendimientos del 80%.
La uva caimarona es una especie dioica que se encuentra poco domesticada y por lo tanto su cultivo tiene altas restricciones para la produccin de frutos, debido a que se presenta un mayor nmero de plantas masculinas, cuando se propaga por semilla sexual, hacindose necesario emplear tcnicas de propagacin vegetativa o clonacin como la injertacin de individuos, que busca jar caractersticas deseables como ms precocidad, poblaciones adecuadas de rboles productivos hembras, mejores caractersticas silvoagronmicas y para garantizar una mayor uniformidad de las poblaciones. Una de las tcnicas de injertacin empleadas en el presente trabajo fue el de tipo ventana.
Metodologa
Propagacin de patrones
Los patrones se propagaron en el vivero del Centro de Investigaciones Macagual de Corpoica en Florencia, por semillas provenientes de rboles en produccin de aproximadamente 8 aos de edad. Luego de una fase de vivero de aproximadamente un ao fueron trasplantados al jardn de injertacin donde se establecieron y cuando las plntulas alcanzaron alturas alrededor de un metro y dimetro entre 2 y 3.5 cm a una altura de 30 cm se fueron seleccionando para la prctica de injertacin.
Conclusiones
El empleo del injerto tipo ventana en patrones de camu camu en condiciones del Piedemonte Caquet, produjo prendimientos y sobrevivencia de las yemas del orden del 80%, considerndose por lo tanto como una tcnica promisoria para la propagacin vegetativa de la especie.
2. AVANCE DE RESULTADOS SOBRE INJERTO EN UVA CAIMARONA (Pouroma cecropiifolia) BAJO CONDICIONES DEL PIEDEMONTE DE CAQUET
*Carlos Julio Escobar **Victoria Eugenia Osorio ***Gladys Colorado, Eduardo Rivera
Introduccin
En el Centro de Investigaciones Macagual de CORPOICA desde el ao 2001, se han adelantado una serie de actividades de investigacin para conocer la respuesta, comportamiento y adaptacin de la uva caimarona a la propagacin vegetativa a travs del injerto.
* Agrlogo M.Sc. Suelos y Nutricin de Plantas. Corpoica, CI Macagual ** Ingeniera Forestal. Corpoica, CI Macagual *** Auxiliares de Investigacin. Corpoica, CI Macagual
Recoleccin de yemas
De una pequea plantacin en el Centro de Investigacin Macagual, con una edad aproximada de ocho aos se seleccionaron las yemas de la parte media de la copa de rboles francos que tuvieron produccin de frutos despus de los 3 aos de siembra en el campo.
Tcnica de injertacin
El mtodo de injertacin utilizado fue el denominado tipo ventana, donde la yema se extrajo con corteza
Conceptos Bsicos y Experiencias con Especies Amaznicas
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suciente para su manipulacin. Al patrn se le hizo un corte de 2 cm de longitud por 1 cm de ancho y 0.5 cm de profundidad a una altura de 20 cm del cuello de la raz. La yema fue extrada con dimensiones similares, de tal manera que coincida con la ventana abierta en el patrn. Seguidamente la yema fue presionada los suciente para que ocupara el lugar de la corteza extrada en el patrn, luego fue recubierta y amarrada con cinta plstica transparente mantenindose entre 25 y 30 das y al cabo de ese tiempo se observ prendimiento en una buena proporcin de plntulas, procedindose a recortar y retirar la cinta. En las plntulas donde el prendimiento no fue total, se dej la cinta ocho das ms, al cabo de los cuales se retir denitivamente. En las que persisti el no prendimiento fue necesario realizar una nueva injertacin. Los injertos se han efectuado desde septiembre de 2002 a un total de 500 patrones.
yemas utilizadas y por este motivo el tiempo de brotacin es mayor. Los brotes ms desarrollados han alcanzado un dimetro de 5 mm en la base del injerto.
Conclusiones
El empleo de injerto de tipo ventana en la uva caimarona en condiciones de Piedemonte de Caquet, produjo prendimiento y sobrevivencia de las yemas del orden del 50%, siendo necesario ajustar an ms la tcnica para tener un mayor prendimiento.
Resultados y discusin
Sobrevivencia
La fase de unin y cicatrizacin entre los puntos de contacto de la yema y el patrn tiene un perodo de duracin de aproximadamente 30 a 60 das, tiempo en el cual se hicieron las observaciones para cuanticar la sobrevivencia, determinndose prendimientos del 50%.
3. ENSAYOS DE PROPAGACIN DE COPOAZ (Theobroma grandiflorum) POR ESTACA, INJERTO Y ACODO AREO, EN EL MUNICIPIO DE PUERTO ASS, DEPARTAMENTO DE PUTUMAYO
*Melva Alarcn, Henry Solarte
Introduccin
Dentro del proyecto Evaluacin agronmica de copoaz (Theobroma grandiorum), boroj (Borojoa patinoi) y uva caimarona (Pouroma cecropiaefolia) propagadas por mtodos sexual y vegetativo, dentro de arreglos agroforestales en ncas de pequeos productores de los municipios de Puerto Ass y Puerto Caicedo nanciado por PRONATTA se adelantaron 3 ensayos de propagacin vegetativa en copoaz. El copoaz es un frutal amaznico considerado promisorio, por la importancia econmica que tiene su fruto, su pulpa por su delicioso sabor se puede comercializar fresca o transformar agroindustrialmente, la semilla se aprovecha en la fabricacin de chocolate y la cscara se utiliza como abono orgnico. Esta especie propagada sexualmente presenta variacin en los perodos de produccin y en la heterogeneidad, por el nmero de frutos por rbol y tamao de los mismos, para evitar estas desventajas y otras que se presentan en las plantaciones de este frutal, la propagacin vegetativa es la opcin para obtener rboles de copoaz de porte bajo, productivos en menor tiempo, resistentes o tolerantes a enfermedades y con frutos que posean mayor porcentaje de pulpa y menor porcentaje de cscara.
* Ingenieros Agrnomos, CORPOICA, Regional Amazonia, CRECED Putumayo
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La injertacin se llev a cabo en el mes de abril del ao 2001, en la nca El Porvenir, vereda Tres Bocanas, municipio de Puerto Ass, propiedad del seor Delfn Gonzlez, donde se construy un vivero para facilitar el cuidado y evaluacin de los injertos. De acuerdo con la literatura y mtodos de injertacin en frutales tropicales, con esta especie se ensayaron tres mtodos de injertacin: pa lateral, escudete y ventana; con 39 plantas por tratamiento, para un total de 117 plantas injertadas. Las plantas injertadas se colocaron en doble surco bajo polisombra, pasados 15 das de realizada la injertacin y en un proceso de prendimiento, se llev a cabo la poda de algunas hojas, para estimular el brote de las yemas. Luego de tres semanas se destaparon los injertos y se aplic Dhitane a una concentracin de 0.25% para prevenir la incidencia de enfermedades fungosas. Los parmetros de evaluacin fueron: prendimiento, sobrevivencia y brotacin. El prendimiento se evalu a las tres semanas de realizado el injerto, las dems variables se evaluaron cada 15 das. De acuerdo con los resultados del total de injertos de las 3 repeticiones, en prendimiento el mejor tratamiento fue el de ventana con 97.43% de prendimiento, seguido del de pa lateral con 89.74%, finalmente el escudete con un muy bajo prendimiento de slo 2.56%, en cuanto a sobrevivencia a partir de los que prendieron, sta fue mayor para pa lateral con 71.4 %, seguido de ventana con 33.3%, no hubo sobrevivencia en escudete. En brotacin de yemas se conserv la misma tendencia de la sobrevivencia. Es posible que las fallas en el injerto en escudete, se deban a la pubescencia presente en el tallo y en las ramas que no permiten un contacto adecuado entre el cambium del injerto y del patrn.
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Se realizaron prcticas culturales de manejo totcnico postinjerto como: descope del patrn, tutorado del injerto, riegos, control de malezas y enfermedades.
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4. ENSAYOS DE PROPAGACIN DE BOROJ (Borojoa patinoi) POR ESTACA, INJERTO Y ACODO AREO, EN EL MUNICIPIO DE PUERTO ASS, DEPARTAMENTO DE PUTUMAYO
*Melva Alarcn Rojas, Henry Solarte
Introduccin
Acodo de copoaz Dentro del proyecto Evaluacin agronmica de copoaz (Theobroma grandiorum), boroj (Borojoa patinoi) y uva caimarona (Pouroma cecropiaefolia) propagadas por mtodos sexual y vegetativo, dentro de arreglos agroforestales en ncas de pequeos productores de los municipios de Puerto Ass y Puerto Caicedo nanciado por PRONATTA se adelantaron 3 ensayos de propagacin vegetativa en copoaz. Teniendo en cuenta que el boroj es una especie dioica, la propagacin vegetativa se presenta como una alternativa, para solucionar el principal problema que es la obtencin de plantas hembras o productoras; debido a esto, se trabaj con tres mtodos de propagacin vegetativa (estaca, injerto y acodo).
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un corte o incisin transversal, de tres centmetros de longitud, en la parte inferior de la estaca e inmediatamente se sumergieron en una solucin azucarada del 0.3% durante 20 minutos para activar la emisin de races. Para la siembra de las estacas se construy una cama enraizadora de 3 m de longitud por 1 m de ancho y 0.2 m de profundidad, con un sustrato de 70% de arena y 30% de materia orgnica, las estacas se sembraron a una profundidad de 7-10 cm en tres posiciones diferentes (inclinadas, verticales y horizontales). El manejo tcnico efectuado en vivero fue mantener la humedad, mediante riego del sustrato y aspersiones nebulizadas de la parte area de la estaca con el n de evitar su muerte por deshidratacin. Los primeros rebrotes se presentaron a los 45 das despus de la
siembra; transcurridos 4 meses se transplantaron a bolsa los que presentaron emisin radicular y foliar. Despus de 3 meses se llevaron a sitio denitivo. Las estacas que se expusieron a una mayor luminosidad y temperatura se murieron ms fcilmente. Por lo tanto se recomienda buena humedad y controlar temperatura. El porcentaje de sobrevivencia es sobre el total de estacas sembradas. El porcentaje de enraizamiento se presenta mayor que el porcentaje de brotacin debido a que algunas estacas enraizaron pero no brotaron. Se observ que las estacas de dimetro > a 1.5 cm presentaron mejor sistema radicular y rea foliar.
Estaca de boroj
Conceptos Bsicos y Experiencias con Especies Amaznicas
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tambin se seleccionaron de rboles que presentaban buenas caractersticas fenolgicas. La injertacin se llev a cabo en el mes de abril del ao 2001, en la nca El Porvenir, vereda Tres Bocanas, municipio de Puerto Ass, propiedad del seor Delfn Gonzlez, donde se construy un vivero para facilitar el cuidado y evaluacin de estos injertos. De acuerdo con la literatura y mtodos de injertacin en frutales tropicales, con esta especie se ensayaron tres mtodos de injertacin: pa lateral, pa terminal y ventana; con 30 plantas por tratamiento, para un total de 90 plantas injertadas. Las plantas injertadas se colocaron en doble surco bajo polisombra transcurridos 15 das de realizada la injertacin
y en un proceso de prendimiento. Luego de tres semanas se destaparon los injertos. Los parmetros de evaluacin fueron: prendimiento, sobrevivencia y brotacin. El prendimiento se evalu a las tres semanas de realizado el injerto, las dems variables se evaluaron cada 15 das. De acuerdo con los resultados del total de injertos de las 3 repeticiones, en prendimiento el mejor tratamiento fue el de pa lateral con 83.3% de prendimiento, seguido del de pa terminal con 33.3%, nalmente el de ventana con 30%; en cuanto a sobrevivencia a partir de los que prendieron, sta fue mayor para pa terminal con 60%, seguido del de pa lateral con 48% y no hubo sobrevivencia en ventana. Se realizaron prcticas culturales de manejo totcnico posinjerto como: descope del patrn, tutorado del injerto, riegos, control de malezas y enfermedades.
zonas libres de nudos y yemas, a las heridas producidas se les aplic el estimulador en polvo comercial Hormonagro No. 1, esta zona se rode con tierra hmeda y mantillo tomado del pie del rbol y se procedi a cubrir con plstico negro. Para cada tratamiento se hicieron 20 acodos para un total de 60. Los parmetros de evaluacin fueron: formacin de callo, tiempo brotacin de races y nmero y longitud de races y se evaluaron mensualmente.
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A vivero se transplantaron a bolsa en total 26 acodos, de los cuales 12 corresponden al mtodo de acodo areo anillado, 12 del mtodo acodo areo anillado rayado y 2 del mtodo acodo areo rayado, lo que representa el 60% del total del mtodo acodo areo anillado, el 60% del mtodo acodo areo anillado rayado y 10% del mtodo rayado; obtenindose para cada mtodo de acodo areo una sobrevivencia en vivero del 100% de los que forman races.
La descripcin de brotacin de yemas, se refiere a aquellos acodos que se les hizo poda foliar al momento del transplante a bolsa, debido a que no a todos se les hizo dicha labor cultural, los 26 acodos se llevaron a sitio definitivo en cada una de las parcelas agroforestales establecidas durante la ejecucin del proyecto.
Una de las grandes preocupaciones de los productores, cuando deciden incorporar alguna especie arbrea en la nca, es la consecucin de semilla. Las principales especies arbreas con caractersticas forrajeras que se estn utilizando en diferentes formas de manejo silvopastoril para condiciones de la Amazonia y cuya propagacin es factible realizarla por estaca, dada la dicultad en la consecucin de semilla sexual son las siguientes: Erythrina fusca (cachimbo), Gliricidia sepium (matarratn), Clitoria fairchildiana (boho), Trichantera gigantea (nacedero).
Zoot. M.Sc. Investigador CORPOICA, Centro de Investigacin Macagual, Florencia, 2003 ** Administrador Agropecuario. Auxiliar de Investigacin. CI Macagual
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A pesar que las especies orecen durante los meses de mnima precipitacin (noviembre, diciembre y enero) y se adaptan muy bien a condiciones de trpico hmedo, tienen una alta exigencia de horas luz para producir semilla sexual. Dado que durante los dos a tres meses siguientes a la oracin, el nmero de horas de brillo solar slo alcanza un promedio de 4.5 horas/da (Garca y col., 2002), estas horas de luz no son sucientes para que las plantas fructiquen. Por lo tanto, una muy buena alternativa es manejar la propagacin por estaca. Para tratar de dar respuesta a algunos de los problemas planteados se adelant en el Centro de Investigaciones Macagual de CORPOICA, en Florencia Caquet, en condiciones de invernadero, de vivero y de campo en suelos de terraza y vega, una serie de ensayos entre 1996 y 2002, estos ensayos de evaluacin de estacas de especies con potencial forrajero para la alimentacin animal, se sembraron en pocas seca y lluviosa, a continuacin se describen algunos resultados de propagacin de estas especies arbreas forrajeras.
Se cortaron 120 estacas por especie con una longitud de 50 cm aproximadamente y con 3 a 3.5 cm de dimetro, con el objeto de evaluar la capacidad de rebrote, el nmero y longitud de rebrotes as como la capacidad de emitir races. El nmero promedio de nudos o yemas por estaca para cada una de las especies al momento de plantarlas fue el siguiente: nacedero de 3 a 4 yemas, matarratn 17 yemas, cachimbo 6 yemas y boho 12 yemas. A cada una de las estacas se le hizo una incisin en la parte inferior y se realiz el desprendimiento de 2 cm de la corteza, para ganar rea de encalladura (Bishop y col., 1992). Despus se les aplic un regulador de crecimiento de races denominado hormonagro para estimular la produccin de races. Luego de aplicado el enraizador se dej secar por 10 minutos y se sembraron verticalmente a una profundidad de 10 cm en bolsa de 2 kg, que contena sustrato de 50% de tierra, 25% de arena y 25% de abono orgnico. Las estacas no fueron tratadas con insecticidas y cicatrizantes. En las estacas de nacedero, matarratn y nacedero amaznico, hubo rebrote de yemas antes de los 30 das, en el boho las yemas comienzan a brotar entre los 60 a 90 das. En el Cuadro 1 se presentan los resultados del prendimiento de las estacas a los 120 das. Con relacin a los porcentajes de sobrevivencia a los 120, la especie boho fue la que present menor porcentaje, con un 69%. Las dems especies estuvieron en un rango de 80 a 82% estacas con rebrotes. En general el nmero de rebrotes por estaca en las diferentes especies vara entre 2.3 y 3.2 rebrotes en promedio a los cuatro meses de plantadas. El nmero promedio de races por estaca a los 120 das de plantadas presenta una mayor variacin. Las
Cuadro 1. Prendimiento de estacas, a los 120 das de plantadas, en el CI Macagual, CORPOICA Florencia, 1996
Especie Matarratn Boho Nacedero Cachimbo Sobrevivencia (%) 82 69 80 80 Rebrotes (No.) 2.7 + 0.76 3.2 + 0.51 2.6 + 0.53 2.3 + 0.46 Longitud de rebrotes (cm) 28.9 + 14 26.6 + 9.0 13.1 + 2.7 30.8 + 15 Races (No.) 18.5 + 14.5 16.1 + 6.1 40.6 + 30.6 11.8 + 8.0 Longitud de races (cm) 21.5 + 8.3 24.7 + 1.7 23.9 + 5.7 37.4 + 12
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especies con mayor nmero de races por estaca fueron para nacedero, con un promedio de 40.6 races, seguido de matarratn y boho cuyos promedios fueron de 18 y 16 races respectivamente. La especie con menor nmero de races fue cachimbo con 11.8 races por estaca en promedio. A su vez la longitud promedio de las races de cachimbo, boho y matarratn a los 120 das de plantadas estuvieron entre 26 a 30 cm, siendo de mayor longitud que las races de nacedero, cuyo promedio fue de 13 cm aproximadamente. Una caracterstica importante de las races de matarratn es que son muy frgiles y quebradizas. Esta situacin debe tenerse en cuenta para tratar con cuidado el material, en caso de ser necesario propagar estacas de matarratn para transplantar en campo. La propagacin de especies arbreas por medio de estacas cortas en bolsas, es conveniente realizarla para garantizar buen prendimiento de las mismas al establecerlas en campo, especialmente cuando el objetivo sea cosechar forraje. Sin embargo, en este ltimo caso, la cosecha del forraje debe manejarse en lo posible bajo corte, para impedir que puedan ser arrancadas por los animales durante el ramoneo directo, debido a que sus races adventicias no profundizan en el suelo. Igualmente, se sugiere que el primer corte de los rebrotes de la estaca, para estimular la salida de nuevos rebrotes, debe realizarse cuando tengan mnimo un metro y medio de longitud y a un metro de altura desde la raz del tallo para permitir la persistencia de la nueva planta.
Estacas largas de matarratn, como cerca viva Trichantera gigantea (nacedero), procedentes de las primeras ramas o ramas ms bajas de rboles de ms de 10 aos de sembrados, con el objeto de evaluar la capacidad de rebrote, el nmero y longitud de rebrotes. Las estacas se cortaron con una longitud entre 1.50 y 2.10 metros, con un dimetro entre 6 y 8 cm. El primer tratamiento de manejo de las estacas, consisti en cortar las estacas del rbol madre y dejarlas tendidas en reposo bajo sombra del rbol por 30 das antes de la siembra denitiva en campo (Jolin y Torquebiau, 1992). El segundo tratamiento consisti en realizar una incisin y desprendimiento de la corteza, en un rea de 2.5 cm por 10 cm de la parte inferior de la estaca, aplicando una sustancia hormonal (Hormonagro) para estimular la emisin de races y a continuacin, se sembraron las estacas a una profundidad de 20 cm, intercalada entre especies y distanciadas a dos metros entre estaca, a lo largo de las cercas de alambre preestablecidas. A todas las estacas se registr informacin de sobrevivencia, nmero, longitud de rebrotes y ubicacin de los rebrotes a la edad de 30, 60, 90 y 120 das despus de sembradas. La evaluacin de sobrevivencia de las estacas a los 30 das de plantadas, indic que en general las estacas no presentan mortalidad y se observa la emisin de los primeros rebrotes en las estacas de matarratn y cachimbo en ambos tratamientos. A los 60 das de plantadas, las estacas de matarratn y cachimbo de ambos tratamientos presentan un porcentaje de sobrevivencia del 90 al 95%, nacedero por el contrario, presenta un 77 y 0% de sobrevivencia en el tratamiento sin descanso y con descanso respectivamente. Las estacas de boho se registran vivas pero sin emisin
Ensayo 2. Siembra de estacas largas en campo con dos sistemas de manejo previo al establecimiento
En suelos de terraza del Centro de Investigacin Macagual, durante la poca lluviosa, se realiz la siembra y evaluacin de estacas largas, de cuatro especies arbreas con potencial forrajero, para ser utilizadas como cercas vivas, sobre linderos de cercas de potreros ya establecidas. La siembra de las estacas se realiz bajo dos tratamientos, consistentes en dos sistemas de manejo de las estacas previo al establecimiento directamente en el campo (sin pregerminacin en vivero). Se cortaron 72 estacas para cada tratamiento y para cada una de las siguientes especies: Erytrina fusca (cachimbo) Gliricidia sepium (matarratn), Clitoria fairchildiana (boho),
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de rebrotes. A los 90 das no se detectaron mayores cambios en los porcentajes de sobrevivencia. En el Cuadro 2 se presenta el porcentaje de sobrevivencia, nmero y longitud de rebrotes de estacas de las diferentes especies a los 120 das de sembradas. Con relacin a la de sobrevivencia de las estacas, el boho es el que presenta menor porcentaje de sobrevivencia, con 27 y 16% para las estacas con descanso y sin descanso respectivamente. Del mismo modo se determin, que las estacas de nacedero, no sobrevivieron al descanso previo de las mismas por 30 das antes de la siembra. Por el contrario las estacas de matarratn y cachimbo presentaron porcentajes de sobrevivencia por encima del 90%. Con relacin al nmero de rebrotes, las dos especies con mejor respuesta tanto en el tratamiento con descanso previo de las estacas antes de la siembra,
como el de siembra inmediata luego del corte han sido las estacas de cachimbo y matarratn (Cuadro 2). Especialmente las estacas de cachimbo, se comportan bien bajo un perodo de descanso de 30 das, previo a la siembra denitiva. El nmero de rebrotes en las estacas de cachimbo y matarratn con perodo de descanso fue de 17 y 12 respectivamente y el nmero de rebrotes en promedio para las mismas especies sin descanso fue de 14 y 11 respectivamente. El nacedero present un promedio de 3.5 rebrotes por estaca sembrada sin descanso, pues las estacas con descanso no sobrevivieron. El boho presenta un nmero reducido de rebrotes, con promedio de un rebrote por estaca tanto con descanso como sin descanso. Debido que es una especie tarda en emitir rebrotes se presenta una alta mortalidad de las estacas (Cipagauta, 2003).
Cuadro 2. Prendimiento de estaca largas establecidas en suelos de terraza del CI Macagual, a los 120 das de plantadas- CORPOICA Florencia, 1996
Sobrevivencia (%) Especie Matarratn Boho Nacedero Cachimbo Con descanso 95.0 27.7 0 92.7 Sin descanso 97.0 16.6 63.8 97.2 Rebrotes (No.) Con descanso 12.0 1.0 0 17.0 Sin descanso 11.0 1.0 3.5 14.7 Longitud de rebrotes (cm) Con descanso 9.8 2.6 14.8 Sin descanso 19.2 1.2 10.7 25
La mayor longitud de los rebrotes a los 120 das, fue para las estacas sin descanso de cachimbo y matarratn con promedio de 25 y 19 cm respectivamente. En estas mismas especies, las estacas con descanso previo antes de la siembra, presentaron una longitud promedio de rebrotes de 14 y 9.8 cm respectivamente. La menor longitud de los rebrotes a los 120 das de sembradas fue para las estacas de boho con promedios de 2.6 y 1.2 cm en el tratamiento con descanso y sin descanso respectivamente. La emisin de rebrotes en boho puede durar entre 90 a 120 das y generalmente ocurre en la parte inferior de la estaca, por lo tanto, se considera que no es conveniente utilizarla en forma de estaca larga para cerca viva, debido a que la parte superior de la estaca muere. El boho al igual que el
nacedero es conveniente sembrarlo en estacas cortas con el propsito de utilizar el forraje. La aparicin de los rebrotes en la longitud de la estaca, es importante tenerlo en cuenta, especialmente cuando el objetivo es establecer una cerca viva a partir de estacas largas, debido a que el ramoneo de los rebrotes por parte del ganado bovino puede causarle dao a la raz, cuando no estn bien ancladas, ocasionando mortalidad. Por tal motivo, es conveniente realizar un manejo de poda de los rebrotes, a las especies que emiten los rebrotes en toda la longitud de la estaca, para acelerar el desarrollo de los rebrotes ubicados en la parte superior. La aparicin de los rebrotes en la parte superior de la estaca, fue ms frecuente para matarratn (65%), en toda la longitud de la estaca para nacedero (66%) y cachimbo (54%) y boho en la parte baja (100%).
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Para el caso de boho, cuyas hojas son muy apetecidas por el ganado bovino, no es conveniente establecerla por estaca larga, debido a que generalmente emite los rebrotes en la parte inferior del tallo, con muerte de toda la parte superior de la estaca. Si se desea establecer una cerca viva con boho, es conveniente establecerla con plntulas a partir de
semilla sexual o por medio de estacas cortas, siempre y cuando se protejan del consumo del ganado con un segundo cerco de alambre de pa o cerca elctrica donde exista la posibilidad. En el Cuadro 3 se presentan algunos indicadores del desarrollo de estacas, con diferentes edades de muestreo.
un dimetro de 6 a 8 cm, el nmero de yemas o nudos por estaca fue de 2 a 4. Se hizo incisin a un solo lado en la parte inferior de las estacas y se aplic Hormonagro, la profundidad de siembra fue de 20 cm. Las estacas de nacedero se sacaron de tallos de plantas de ms de 6 metros de alto. Las estacas de boho se cortaron de ramas intermedias de rboles de ms de 10 aos de sembrados.
Prendimiento de estacas en campo a los 90 das de sembrados, sembradas en poca seca, CI Macagual, CORPOICA Florencia, 1999 - 2000
Especie Nacedero Boho Estacas (No.) 66 66 Prendimiento (No.) 54 6 (%) 82 9
Recomendaciones
Se recomienda que las estacas de las especies como nacedero, boho, matarratn y cachimbo para utilizacin de forraje, sean cortas (50 a 60 cm) y se siembren el mismo da, porque mientras ms tiempo se demore hay prdida del poder de enraizamiento y por lo tanto el prendimiento es ms bajo.
Conceptos Bsicos y Experiencias con Especies Amaznicas
Las estacas que se siembren en potrero deben ser protegidas con un segundo cerco, con alambre de pa o con cerca elctrica, para evitar que los bovinos las daen por el pisoteo o por el consumo de los rebrotes tiernos, que impiden el desarrollo de las plantas por estaca.
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vientos y con suciente agua, los soportes del plstico se pueden hacer con esterillas de guadua, colocndolas en forma de arco a 50 cm de altura. Posteriormente sobre ste se extiende el plstico, enterrando los bordes de ste para evitar que puedan ingresar insectos o corrientes de viento que produzcan la prdida de humedad. Existen varias clases de propagadores clonales: Camas altas: Consiste en construir cajones de 2 m de largo por 1 metro de ancho y colocarlos a un metro de altura, para disminuir la incidencia de plagas que puedan daar las estacas en proceso de enraizamiento. Propagador en tierra: Para su construccin se llenan bolsas de 1 libra y se colocan en eras de 1 m de ancho por 4 5 m de largo dependiendo de la cantidad de material disponible y de la cantidad de plstico que se posea. Los materiales, insumos y equipos utilizados para la construccin y manejo de plantas en los propagadores pueden ser: Plstico agroleno calibre 8 Polisombra al 80 70% de penumbra, esterillas de guadua, tierra - arena para el llenado de bolsas o del cajn, para el caso de propagador en bolsa, utilizar bolsas de 1 libra o de 1 kilo como mximo. Captam o Benlate y Furadn, bomba de espalda, tijeras podadoras.
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de la necesidad. Cuando los esquejes estn enraizados se levanta el plstico cuidando de que no penetre el agua lluvia sobre las plantas para evitar el riesgo de presencia de enfermedades.
morfoanatmicos de la planta prestando especial atencin a las caractersticas y dinmica de sus estructuras subterrneas. Figura 1.
Las estructuras subterrneas corresponden a rizomas, races y tallos bulbosos. stos poseen meristemos primarios y adventicios (brotes) de los cuales se pueden diferenciar races adventicias o un penacho de hojas basales, las cuales se van expandiendo y transformando en vainas que cubren fuertemente el tallo. El tallo bulboso da origen a uno, dos o tres brotes, a los 5 das de sembrados stos son evidentes y alcanzan una longitud de 0.5 a 1.5 cm, posteriormente este brote emerge del suelo y a los 10 das de sembrados alcanza una longitud de 10 cm, simultneamente se aprecia la formacin de las primeras races. Posteriormente, se incrementa el desarrollo de la parte area y se aprecia un aumento en el nmero de races, a los 34 das el brote puede alcanzar una altura entre 30 y 40 cm. Despus de aproximadamente 60 das se da inicio a la formacin de un nuevo tallo bulboso, caracterizado por el engrosamiento de la base del brote nivel del suelo (ver gura). Las races del tallo bulboso original se vuelven brosas y se van perdiendo y se da la formacin de nuevas races en forma abundante a partir de los entrenudos del nuevo tallo bulboso. Durante este proceso que se va repitiendo varias veces, normalmente se activan de dos a tres brotes por tallo bulboso inicial, lo que indica la presencia de cierta dormancia a nivel de los brotes laterales en los respectivos tallos bulbosos.
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Los rizomas se forman a partir de brotes laterales subterrneos. Cuando la competencia entre tallos bulbosos es muy alta, el brote se va alargando en busca de un espacio donde pueda emerger y formar un nuevo tallo bulboso, este brote subterrneo se va engrosando a medida que se desarrolla. Figura 2.
La productividad media por metro cuadrado fue de 5.874 gramos de biomasa subterrnea sin incluir races, lo que permite estimar una productividad cercana a las 60 toneladas por hectrea.
De igual manera se requiere llegar directamente al meristemo y ste se encuentra internamente aproximadamente a 0.5 cm del cuello de la parte area. Esto diculta llegar a l sin causar daos importantes. Se logr avanzar igualmente en la etapa de introduccin de material vegetal (explantes) a laboratorio para su propagacin in vitro. Para el efecto se realizaron ensayos para determinar la respuesta de frente a desinfectantes y antioxidantes convencionales. Aunque la respuesta no fue la mejor, se pudo determinar que sta es una buena opcin para la propagacin masiva de este material. Se requiere hacer algunos ajustes en el control de infecciones.
Con el n de determinar la productividad de material vegetal subterrneo en un perodo dado asociado a los perodos de desarrollo, se tomaron los datos a dos plantas y se promediaron los valores de nmero de estructuras reproductivas (tallos bulbosos y rizomas) por generacin y el peso correspondiente a cada generacin. Se instalaron lotes de propagacin utilizando rizomas. stos se cosecharon peridicamente y se resembraron para mantener un stock suciente para propagacin y como materia prima para uso medicinal.
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BIBLIOGRAFA
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Se termin de imprimir en el mes de marzo de 2004 en los talleres de www.produmedios.com Tel.: 288 5338. Bogot, DC - Colombia