TTULO DA PRTICA: Separao de pigmentos hidrossolveis e lipossolveis de folhas avermelhadas

Objetivos 1. Observar a separao de pigmentos lipossolveis e hidrossolveis por meio de sua partio em solventes miscveis 2. Acompanhar as variaes das propriedades de alguns destes pigmentos em funo das variaes de pH do meio e de sua hidrlise parcial Material - Folhas avermelhadas de Tradescantia zebrina ou Coleus spp. - Almofariz e pistilo - Proveta de 50 ml - Tubos de ensaio - Funil de vidro - Funil de separao - Acetona 80% - ter de petrleo - Papel filtro ou algodo - Pipetas de 15 ml - NH4OH 0,1N - HCl 0,1 N - KOH 3 N Procedimento 1. Pique e triture cerca de 10 g (20 folhas) de Tradescantia zebrina ou Coleus spp. em um graal. 2. Adicione 15 ml de acetona 80% e triture at formar uma pasta homognea. Adicione mais 15 ml de acetona. 3. Filtre a pasta obtida atravs de algodo ou papel de filtro usando o funil de vidro e recolha o filtrado na proveta de 50 ml. 4. Passe a mistura obtida para um funil de separao e adicione ao filtrado igual volume de ter de petrleo. 5. Agite por rotao, aliviando regularmente a presso. Deixe o funil em repouso em um suporte. Se no houver separao ntida de duas camadas, junte 5 ml de gua destilada, agite novamente e deixe em repouso. 6. Retire cerca de 5 mL da camada inferior num tubo de ensaio e acrescente igual volume de gua. Observe o que acontece. 7. Retire cerca de 5 mL da camada superior num tubo de ensaio e acrescente igual volume de gua. Observe as diferenas em relao ao resultado anterior. 8. Adicione algumas gotas de HCl 0,1 N frao coletada da camada inferior e agite. Observe o que acontece. Agora, adicione a mesma quantidade de NH4OH 0,1N ao mesmo tubo e agite. Observe o que acontece. 9. frao da camada superior acrescente algumas gotas de KOH 3N, agite e observe o resultado. Explique os resultados. Questes 1. Que so acetona e ter de petrleo? Porque foram utilizados? 2. Represente a partio dos pigmentos lipo e hidrossolveis nas fases da mistura dos solventes. 3. Quais so estes pigmentos? Em que compartimentos celulares encontramos os pigmentos lipossolveis e hidrossolveis?

4. Porque se pode afirmar, com absoluta certeza, que os pigmentos hidrossolveis no participam da fotossntese? 5. Porque certos frutos ficam mais avermelhados quando expostos luz solar? 6. Se voc preparasse um extrato de ptalas de uma flor vermelha, qual o tipo de pigmento seria encontrado pelo processo de separao utilizado nesta prtica? O que aconteceria se voc alterasse o pH do extrato?