Actividad antimicrobiana de plantas medicinales

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Aceptado para su publicacin el 18 de mayo de 2007

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Discusin y Conclusiones
S. aphylla, L. divaricata y L. cuneifolia son especies ampliamente distribuidas en regiones ridas y semiridas de la Argentina. Son utilizadas en medicina popular argentina como anti-inflamatorios, vulnerarios, antirreumticos y emenagogos. En trabajos previos se ha demostrado que el extracto acuoso de Larrea divaricata tiene actividad antiproliferativa (25-27) y antimicrobiana sobre bacterias gram positivas (28). Por otro lado, extractos alcohlicos de L. cuneifolia, y L. divaricata presentan actividad antifngica (29) y antibacteriana contra bacterias gram positivas (30). No existen antecedentes acerca de la composicin qumica ni sobre las potencialidades medicinales de S. aphylla. Los resultados obtenidos en este trabajo revelan una marcada actividad sobre bacterias gram negativas multirresistentes. Aunque los valores de CIM son altos comparados a los antibiticos comerciales, los resultados obtenidos resultan interesantes ya que se ensay el extracto total y no los compuestos puros (31). Los efectos antimicrobianos obtenidos son altamente reproducibles y los compuestos qumicos responsables parecen ser qumicamente estables ya que el efecto se mantiene en el tiempo. Por otro lado, se demostr que 20 g de compuestos fenlicos separados por TLC son suficientes para inhibir el crecimiento de P. aeruginosa y K. pneumoniae. Se estn realizando investigaciones para purificar los principios activos. AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen al Consejo de Investigacin de la Universidad Nacional de Tucumn, Argentina (CIUNT), Consejo Nacional de Investigaciones Cientficas y Tcnicas, Argentina (CONICET) y Agencia Nacional de Promocin Cientfica y Tecnolgica (ANPCyT) por el financiamiento de este trabajo de investigacin.

CORRESPONDENCIA
DRA. MARA INS ISLA Instituto de Estudios Vegetales. Facultad de Bioqumica, Qumica y Farmacia. Universidad Nacional de Tucumn. Ayacucho 471 4000 - SAN MIGUEL DE TUCUMN. ARGENTINA E-mail: misla@tucbbs.com.ar

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Tabla III. Actividad antibacteriana de extractos de plantas medicinales argentinas mediante mtodo de difusin en agar. Especie S. aphylla Cav E. cristagalli L. D. diacanthoides Less. L. cuneifolia Cav. L. divaricata Cav. P. americana (R. Br.) Baillon P. cynanchoides DC. P. dioica L. S. chilensis Meyer S. molle L. S. pinnata Lam. 1 ++ 0 0 +++ +++ 0 + 0 0 0 0 2 ++ 0 0 +++ +++ 0 0 0 + 0 0 3 ++ 0 0 +++ +++ 0 + 0 + 0 0 4 ++ 0 0 +++ +++ 0 + 0 + 0 0 5 ++ 0 0 +++ +++ 0 + 0 0 0 0 6 ++ 0 0 +++ +++ 0 + 0 + 0 0 7 ++ 0 0 +++ +++ 0 + 0 + 0 0 8 ++ 0 0 +++ +++ 0 + 0 + 0 0 9 ++ 0 0 +++ +++ 0 + 0 + 0 0

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1. E. coli, 2. K. pneumoniae, 3. P. mirabilis, 4. E. cloacae, 5. S. marcescens, 6. M. morganii, 7. A. baumannii, 8. P. aeruginosa, 9. S. maltophilia. La inhibicin se considera como 0, sin inhibicin; +, dr<1,00; ++ dr>1,00<1,50; +++ dr>1.50<2 , ++++ dr >2< 2,5 donde dr es el dimetro de la zona de inhibicin (cm) a la misma concentracin de compuestos fenlicos para todos los extractos de plantas medicinales (400 g/mL).

Tabla IV. CIM (g/mL). Efecto de extractos de plantas medicinales argentinas sobre el crecimiento de bacterias patgenas humanas aisladas de pacientes del Hospital de Clnicas Dr. Nicols Avellaneda as como cepas de referencia. Cepas n Senna aphylla CIM (g/mL) E. coli K. pneumoniae P. mirabilis E. cloacae S. marcescens M. morganii A. baumannii P. aeruginosa S. maltophilia E. coli ATCC 35218 E. coli ATCC 25922 P. aeruginosa ATCC 27853 12 7 6 9 2 2 2 4 3 1 1 1 150 55 150 55 50 25 100 25 150 50 50 25 50 25 100 25 50 12,5 150 0 100 5 100 5 15025 15025 5012,5 15050 15050 5025 5025 15050 2512,5 1500 1500 1500 15050 15050 5012,5 15050 10025 5025 5025 10025 2512,5 1500 1000 1000 300 100 ND 300 100 300 100 300 100 300 100 350 50 350 50 350 50 400 0 400 0 400 0 ND 400 200 400 200 400 50 ND 400 100 400 125 400 75 400 100 400 0 400 0 400 0 Larrea cuneifolia Larrea divaricata Pithecoctenium cynanchoides Solidago chilensis

n: nmero de cepas ensayadas. Los resultados de las determinaciones de CIM y CBM se expresaron como las medias desviacin estndar.

A concentraciones de 400 g/mL, L. divaricata, L. cuneifolia y S. aphylla mostraron actividad contra todas las cepas de bacterias gram negativas ensayadas mediante ensayos de difusin en agar. E. crista-galli, D. diacanthoides, P. dioica, P. cynanchoide, P. americana, S. molle, S. pinnata, y S. chilensis fueron activas contra algunas de las cepas ensayadas (Tabla III). Los dimetros de los halos de inhibicin de los extractos ms activos (L. divaricata, L. cuneifolia P. cynanchoides, S. chilensis y S. aphylla) estuvieron en el rango de 1,5 a 2,5 cm. L. divaricata, L. cuneifolia y S. aphylla presentaron valores de CIM 200 g/mL (Tabla IV). P. mirabilis, A. baumanni y S. maltophilia fueron las ms susceptibles, con valores de CIM entre 25 y 50 g/mL seguido por P. aeruginosa con valores de CIM de 50 a 100 g/mL.

P. cynanchoides result activo contra todas las bacterias analizadas con valores de CIM de 400 g/mL, excepto sobre K. pneumoniae, mientras que S. chilensis tuvo actividad contra todas las bacterias ensayadas (valores de CIM de 200 a 600 g/mL) excepto sobre E. coli y S. marcescens. En todos los casos, los valores de CBM fueron similares o dos veces superiores a los valores de CIM. Las bioautografas de contacto indicaron que los extractos totales de las tres especies ms activas presentan al menos dos compuestos qumicos con capacidad antibitica. Las bandas de inhibicin del crecimiento microbiano son coincidentes con los valores de Rf obtenidos en los ensayos fitoqumicos para los polifenoles (Fig. 1).

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Tabla II. Caracterizacin de las cepas bacterianas utilizadas para realizar los ensayos. LEV P. aeruginosa F305 F352 F353 F354 A. baumanii F355, F358 E. coli F306 F331 F333 F337 F346 F350 F301,394, 330. F335, 345. 348 E. cloacae F302 F307 F308 F309, 327, 328, F349 F326 F338 P. mirabilis F304 F319 F332 F342 F359 F361 K. pneumoniae F310 F325 F321, 363 F336, 364 F365 M. morganii F320 F347 S. marcenscens F313, 356 P. stuartii 343 S. maltophilia 351 357, 362 R R R S R S R R S S R R P/T4 S S S S R S R S S S R S IMI R S S S S S S S S S S S AXO NE NE NE NE NE R R R S R R R FOT NE NE NE NE NE R R R S R R R TAZ R R S S S S R S S R R R FUR NE NE NE NE NE R R R S R R R FEP S S S S S R R R S S R S AMI R R S S R S S S S S S S A/S2 NE NE NE NE R R R R S R R R MER S R R R S S S S S S S S

R S S R S S S R S R R S R S S S S R S S S R S

R S S R S S S S S S S S S S S S R S S S S R R

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S S S S S S S S S R S S S S S S S S S S S R R

R R R R S R R S S R R S R R R R R S S R R R R

S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S R R

LEV, levofloxacina; P/T4, piperazilina/tazobactan; IMI, imipenem; AXO, ceftriaxona; FOT, cefotaxima; TAZ, ceftacidima; FUR, cefuroxima; FEP, cefepima; AMI, amikacina, A/S2, ampicilina/sulbactam; MER, meropenem. R: resistente S: sensible. NE: no ensayado.

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Tabla I. Usos populares de las plantas medicinales estudiadas. Familia/Especies Nombre vulgar Parte usada Usos populares

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Anacardiaceae Schinus molle L. Bignoniaceae Pithecoctenium cynanchoides DC.

Molle

Antiinflamatorio, Diurtico, antisptico, cicatrizante, antirreumtico Antisptico Antirreumtico, antisptico Antisptico Insecticida, antisptico Antisptico, cicatrizante Cicatrizante Antisptico Antisptico, vermfugo Antiinflamatorio, antisptico, emenagogo, antirreumtico Antiinflamatorio, antisptico, emenagogo, antirreumtico

Sacha esponja

H PA PA PA R H PA PA PA PA

Asteraceae Solidago chilensis Meyen Vara de oro Dasyphyllum diacanthoides Less. Palo santo Schkuhria pinnata Lam. Kuntze ex Thell. Canchalagua Hydnoraceae Prosopanche americana (R. Br.) Baill. Fabaceae Erythrina crista-galli L. Senna aphylla Cav. Phytoccaceae Phytolacca dioica L. Zygophyllaceae Larrea cuneifolia Cav. Larrea divaricata Cav. Guaycur Ceibo Pichana Omb Jarilla, jarilla macho Jarilla, jarilla hembra

1A

1B

Fig. 1A - Bioautografa comparativa de L. divaricata y L. cuneifolia Lnea a: L. cuneifolia Lnea b: L. divaricata (20 g de compuestos fenlicos de cada extracto/placa) se separaron por TLC usando cloroformo/metanol (9:1) como eluyente. La placa se cubri con 2 mL de medio blando (0,6% BHI agar) que contena 105 CFU de Pseudomonas aeruginosa (F305). Posteriormente se incub la placa a 35 C durante 18 h y se revel con MTT. 1B Cromatografa en capa fina de L. cuneifolia revelada con NP observada al UV 365 nm.

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tiltiazol-2il)-2,5-difenil tetrazolio en 1 mL de tampn de fosfato de sodio 10 mM, pH 7, que contena NaCl 0,15 M. Se incubaron las placas a 35 C durante 1 h en la oscuridad. Se evalu la viabilidad celular mediante la reduccin de la sal de tetrazolio en azul de formazn observndose reas de inhibicin del crecimiento bacteriano de color amarillo sobre un fondo azul (24). DETERMINACIN DE LA CONCENTRACIN INHIBITORIA MNIMA (CIM) Y LA CONCENTRACIN BACTERICIDA MNIMA (CBM) Mtodo de macrodilucin seriada en agar Se realizaron diluciones en etanol 96 de cada extracto (volumen final de 1 mL). Se agregaron 9 mL de medio AMH llegando a una concentracin final de 25 a 1.000 g de compuestos fenlicos/mL. Se homogeniz la mezcla y se coloc en placas de Petri de 9 cm de dimetro. Cada placa fue inoculada con 2 L de suspensin bacteriana (105 UFC) e incubada aerbicamente durante 16-20 h a 35 C. Se incluy en cada tratamiento un control de crecimiento bacteriano y un control negativo de etanol 96. La concentracin inhibitoria mnima (CIM) del desarrollo bacteriano se consider como la mnima concentracin de extracto, en equivalentes de compuestos fenlicos, necesaria para inhibir el crecimiento bacteriano. Se determinaron los valores de CIM para levofloxacina, piperacilina/tazobactam, imipenem, meropenem, ceftriaxona, cefotaxima, ceftazdina, cefuroxima, cefepima, amikacina y ampicilina/sulbactam para bacterias gram negativas. Cada tratamiento fue realizado por triplicado. Los agentes antimicrobianos fueron de Sigma Chemical (EE.UU.) y Laboratorio Britania S.A. (Argentina). Mtodo de microdilucin seriada en medio lquido Por el mtodo de microdilucin en medio lquido se determinaron los valores de CIM y CBM de los fitocomplejos en estudio contra los organismos de prueba, siguiendo recomendaciones del CLSI 2006 (Clinical Laboratory Standards Institute) (23). Los extractos fueron transferidos a pocillos de policubetas estriles de modo de obtener una dilucin seriada al doble (25 a 1.000 g de compuestos fenlicos/mL). Cien L de cada suspensin bacteriana (5.105 UFC) se colocaron en cada uno de los pocillos. Se realizaron controles de esterilidad, viabilidad bacteriana, controles positivos con los agentes antimicrobianos comerciales y controles negativos. Las placas se incubaron aerbicamente a 35 C durante 16-20 h. Al trmino de la incubacin, el crecimiento bacteriano fue evaluado espectrofotomtricamente midiendo los valores de absorbancia a 625 nm mediante un lector de ELISA (BioRad).

La CIM se consider como la menor concentracin de extracto necesaria para inhibir el crecimiento a un nivel <0,05 a 625 nm (ningn crecimiento visible macroscpicamente). Para determinar los valores de CBM se tomaron 10 L de cada pocillo de la microplaca sin crecimiento visible y se transfirieron a placas que contenan 15 mL de MHA las que se incubaron 16-20 h a 35 C. La CBM se consider como la menor concentracin necesaria para producir la muerte del 99,9% de las bacterias. Los valores de CIM fueron determinados para levofloxacina, piperacilina/tazobactan, imipenem, meropenem, ceftriaxona, cefotaxima, ceftazidima, cefuroxima, cefepima, amikacina y ampicilina/sulbactan frente a bacterias gram negativas. Anlisis estadstico Los datos fueron analizados utilizando el programa estadstico SPSS 7.5 para Windows. Los resultados se expresaron como medias desviacin estndar.

Resultados
La Tabla I resume los datos etno-botnicos de las diez especies de plantas medicinales recolectadas en dos ambientes fitogeogrficos de Tucumn. Estas especies, en general, son utilizadas popularmente como antispticos y antiinflamatorios. Las especies vegetales fueron extradas con etanol 96. Los anlisis fitoqumicos revelaron que estas especies presentan un elevado contenido de compuestos fenlicos, principalmente flavonoides, y no contienen alcaloides. ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA Se utilizaron bacterias gram negativas multirresistentes aisladas de muestras de lquido cefalorraqudeo, lavado broncoalveolar, herida de sitio quirrgico, catteres, sangre y orina de pacientes del Hospital de Clnicas Dr. Nicols Avellaneda, Tucumn, Argentina. Las cepas aisladas incluyen K. pneumoniae, cefotaxima resistente (CIM igual o mayor a 124 g/mL); E. cloacae, E. coli, S. marcescens, cefotaxima resistente (CIM igual o mayor a 64 g/mL); P. aeruginosa y A. baumanii ceftazidima resistente (CIMs igual o mayor a 32 g/mL). Imipenem y meropenem fueron efectivos frente a enterobacterias cefotaxima resistentes (ms del 90% de los aislamientos fueron susceptibles). Por otro lado, meropenem (carbapenem) mostr una limitada actividad frente a cepas ceftazidima resistente (Tabla II). P. aeruginosa F 305 fueron resistentes a imipenen y sensible a meropenem.

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D.C.(IEV 1037), Schkuhria pinnata Lam.(IEV 1041), Solidago chilensis Meyer (IEV 1010) se recolectaron en Amaicha del Valle, Tucumn a 2.400 m.s.n.m. Fueron identificadas por personal especializado y los ejemplares herborizados se encuentran en el Instituto de Estudios Vegetales (IEV) de la Facultad de Bioqumica, Qumica y Farmacia de la Universidad Nacional de Tucumn. Se utilizaron las partes areas de estas plantas. PREPARACIN DE PREPARADOS FITOTERPICOS La droga seca y finamente dividida (1 g) se macer en 5 mL de alcohol 96 a temperatura ambiente (18 a 24 C) durante 7 das, con agitacin (40 ciclos/min). Se filtr y se conserv a 4 C hasta su uso (17). DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE COMPUESTOS FENLICOS TOTALES Y FLAVONOIDES TOTALES El contenido de compuestos fenlicos totales se determin por el mtodo de Folin-Ciocalteau (18). Los resultados se expresaron como equivalentes de cumarinas. El contenido de flavonoides totales se determin espectrofotomtricamente a 420 nm utilizando el mtodo de Woisky y Salatino (19). Los resultados se expresaron como equivalentes de quercetina. ANLISIS FITOQUMICO Los componentes de los diferentes extractos fueron separados por cromatografa en capa fina (CCF) en Silica gel 60 F-254 (0,2 mm, Merck). Se utiliz como solvente de corrida cloroformo: metanol (9:1). Se sembraron 20 g de compuestos fenlicos de cada uno de los extractos. Los componentes separados se visualizaron bajo luz ultravioleta (254 y 365 nm, Lmpara UV Modelo UV 5L-58 Mineralight Lamp) y se revelaron con tricloruro frrico 1%, reactivo de productos naturales (1% 2-aminoetil difenilborato, NP) (20) o cloruro de aluminio para compuestos fenlicos, hidrxido de potasio para cumarinas, reactivo de Dragendorff para alcaloides y anisaldehdo/cido sulfrico para esteroides y terpenos (21). MICROORGANISMOS Y MEDIOS DE CULTIVO Todas las cepas bacterianas se obtuvieron de aislamientos de pacientes del Hospital de Clnicas Dr. Nicols Avellaneda, San Miguel de Tucumn, (Tucumn, Argentina) durante 1999, a saber: Escherichia coli (n=12), Klebsiella pneumoniae (n=7), Proteus mirabilis (n=6), Enterobacter cloacae (n=9), Serratia marcescens (n=2), Morganella morganii (n=2), Acinetobacter bauman-

nii (n=2), Pseudomonas aeruginosa (n=4), Stenotrophomonas maltophilia (n=3). Se incluyeron en este estudio las siguientes cepas de referencia: Escherichia coli ATCC 35218, Escherichia coli ATCC 25922 y Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. IDENTIFICACIN, TIPIFICACIN Y CONSERVACIN DE LAS CEPAS BACTERIANAS AISLADAS La identificacin y tipificacin de las cepas bacterianas aisladas se realizaron conforme a perfiles bioqumicos y a las recomendaciones del Manual de Microbiologa Clnica (22). Todos los aislamientos fueron mantenidos en BHI (infusin cerebro corazn) que contena 30% (v/v) de glicerol y 0,6% de agar a 20 C. Las colonias aisladas se resuspendieron en caldo Mller Hinton adicionado de cationes divalentes (CAMHB). La turbidez de la suspensin se ajust a 0,5 de la escala de Mc Farland. Para llegar al inculo adecuado, en cada caso se emple como diluyente CAMHB. El nmero de colonias en CAMHB se estim usando la tcnica de dilucin seriada de acuerdo a recomendaciones del CLSI 2006 (Clinical Laboratory Standards Institute) (23). SUSCEPTIBILIDAD BACTERIANA EVALUADA POR EL MTODO DE DIFUSIN EN AGAR Tres mL de medio BHI que contena 0,6% de agar se inocularon con 30 L de cada suspensin bacteriana (105 bacterias/mL). Se distribuy sobre placas de Petri de 9 cm de dimetro con 10 mL de agar Mller Hinton (AMH). Se realizaron cuatro perforaciones con sacabocados de 5 mm de dimetro y se cargaron con cantidades crecientes de cada fitocomplejo (hasta 400 g de compuestos fenlicos). Se realizaron controles con antibiticos comerciales: imipenem, meropenem, cefotaxima, ceftazidina, vancomicina, oxacilina, ampicilina, gentamicina, penicilina. Las placas se incubaron aerbicamente a 35 C durante 16-20 horas. La actividad antibacteriana fue determinada como la media del dimetro de inhibicin producido alrededor de cada perforacin o disco. Todos los ensayos fueron realizados por triplicado. ENSAYOS BIOAUTOGRFCOS Se sembraron 20 g de compuestos fenlicos de cada uno de los extractos en placas de Slica gel 60 F-254 (0,2 mm, Merck). Se utiliz como fase mvil cloroformo: metanol, 9:1 v/v. Dos mililitros de infusin cerebrocorazn que contena 0.6% de agar inoculado con 105 unidades formadoras de colonias/mL (UFC/mL), de Pseudomonas aeruginosa (F305) se dispersaron sobre la placa de slica gel. Las placas se incubaron a 35 C durante 16-20 h. Transcurrido este tiempo las placas se rociaron con una solucin de MTT, 2,5 mg de 3-(4,5 dime-

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Zampini IC y col.

Summary
The present study was conducted to investigate antimicrobial activity of alcoholic extracts of Argentine medicinal plant species (Dasyphyllum diacanthoides, Erythrina cristagalli, Larrea cuneifolia, Larrea divaricata, Phytolacca dioica, Pithecoctenium cynanchoides, Prosopanche americana, Schinus molle, Schkuhria pinnata, Senna aphylla and Solidago chilensis) against multidrug resistant human pathogen gram negative bacteria isolated from a Hospital in Tucumn, Argentina. Inhibition of bacterial growth was investigated using disc diffusion, agar macrodilution and broth microdilution methods against multiresistant clinical isolates of nine different specie of gram negative bacteria: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Enterobacter cloacae, Serratia marcescens, Morganella morganii, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Stenotrophomonas maltophilia. A significant antimicrobial activity was found in three of the eleven plant species studied. Based on minimal inhibitory concentration (MIC) values, three plant species, L. divaricata, L. cuneifolia, and S. aphylla were the most potent ones with MIC values between 25-200 g/mL. Overall, P. mirabilis, M. morganii and P. aeruginosa isolates were the most susceptible to these extracts with MIC values of 25 to 50 g/mL. All extracts showed significant inhibitory activities on bacteria growth in a dose phenolic compound-dependent fashion. The minimal bactericidal concentration (MBC) values were identical to the MIC values or twofold higher than the corresponding MIC. Contact bioautography indicated that crude extracts possess several major antibacterial components. Phytochemical screening showed that the bioactive compounds correspond to polyphenols. Investigations are in progress to purify the bioactive principles. Keywords: Argentine medicinal plants * antimicrobial activity * antibiotic-multiresistant gram negative bacteria * phenolic compounds

Introduccin
Los principales problemas de resistencia detectados en Amrica latina lo producen las bacterias gram negativas, principalmente los bacilos no fermentadores como Pseudomonas sp. y Acinetobacter sp.(resistencia a carbapenem), Escherichia sp. y Klebsiella sp.(altas tasas de resistencia a -lactmicos y con produccin de -lactamasa de espectro extendido), Enterobacter sp. y otras enterobacterias como Serratia sp. y Citrobacter sp. (productoras de -lactamasas cromosmicas inducibles). Es importante resaltar que los grados de resistencia pueden variar mucho de un hospital a otro, de ciudad a ciudad y de una nacin a otra. Las realidades pueden ser completamente diferentes, de all, la importancia de regionalizar los estudios, analizando los efectos de potenciales antibiticos sobre patgenos aislados localmente. Las infecciones intrahospitalarias ms graves en Argentina son producidas por: bacilos gram negativos no fermentadores, enterobacterias multirresistentes y cocos gram positivos con sensibilidad disminuida a -lactmicos y/o glucopptidos (1). En general, la multirresistencia se ha desarrollado debido al uso indiscriminado de antibiticos comerciales comnmente utilizados para tratar las enfermedades infecciosas. Esta situacin, as como la aparicin de efectos indeseables de ciertos antibiticos, ha llevado a los cientficos a investigar nuevas

sustancias antimicrobianas a partir de plantas consideradas popularmente medicinales. Los ensayos realizados hasta este momento revelan que las plantas representan una potencial fuente de nuevos agentes antimicrobianos (2-13). Las plantas examinadas en este trabajo son utilizadas popularmente en Argentina como antispticos, antiinflamatorios y cicatrizantes (14-16). El propsito del presente trabajo fue investigar la actividad antimicrobiana de plantas utilizadas como medicinales en el norte argentino sobre microorganismos multirresistentes a antibiticos, obtenidos de aislamientos clnicos de un hospital de Tucumn.

Materiales y Mtodos
MATERIAL VEGETAL Las especies vegetales seleccionadas para este trabajo fueron: Schinus molle L.(IEV 1036), Senna aphylla Cav. (IEV 1021), Erythrina cristagalli L.(IEV 1028); Dasyphyllum diaconthoides Less (IEV 1024), Phytolacca dioica (L) Moq. (IEV 1022), Prosopanche americana (R.Br.) Baillon. (IEV 1044) que se recolectaron de la zona de Trancas, Tucumn a 700 metros sobre el nivel del mar (msnm), mientras que Larrea cuneifolia Cav. (IEV 1023), Larrea divaricata Cav. (IEV 1032), Pithecoctenium cynanchoides

Acta Bioqum Cln Latinoam 2007; 41 (3): 385-93

Microbiologa
Reconocimiento a la trayectoria de la Prof. Dra. Regina L. W. de Wikinski

Actividad antimicrobiana de plantas medicinales argentinas sobre bacterias antibitico-resistentes

Antimicrobial activity of Argentine medicinal plants on antibiotic-resistant bacteria
Iris Catiana Zampini1*, Norma Cudmani2**, Mara Ins Isla3*

1. Farmacutica, estudiante de doctorado de la Universidad Nacional de Tucumn. Becaria del CONICET. Auxiliar Docente de 1a Categora. 2. Bioqumica. Bacteriloga 3. Doctora en Bioqumica. Investigador del CONICET. Profesora Asociada. * Ctedra de Fitoqumica. Instituto de Estudios Vegetales Dr. Antonio R. Sampietro. Facultad de Bioqumica, Qumica y Farmacia. Universidad Nacional de Tucumn. ** Hospital de Clnicas Dr. Nicols Avellaneda. San Miguel de Tucumn - Tucumn. Argentina.

Resumen
El propsito del presente trabajo fue determinar la potencia antimicrobiana de extractos alcohlicos de plantas utilizadas popularmente en Argentina como antispticos y antiinflamatorios: Dasyphyllum diaconthoides, Erythrina cristagalli, Larrea cuneifolia, Larrea divaricata, Phytolacca dioica, Pithecoctenium cynanchoides, Prosopanche americana, Schinus molle, Schkuhria pinnata, Senna aphylla y Solidago chilensis. La inhibicin del crecimiento bacteriano se determin a travs de ensayos de difusin en agar, macrodilucin en medio slido y microdilucin en medio lquido frente a 47 aislamientos clnicos multirresistentes a antibiticos, obtenidos de pacientes de un hospital de Tucumn, Argentina: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Enterobacter cloacae, Serratia marcescens, Morganella morganii, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Stenotrophomonas maltophilia. De acuerdo con los valores de concentracin inhibitoria mnima (CIM), tres de las once especies ensayadas fueron las ms activas: L. divaricata, L. cuneifolia, y S. aphylla (CIM de 25 a 200 g/mL). P. mirabilis, A. baumanni y S. maltophilia fueron las cepas ms susceptibles con valores de CIM entre 25 y 50 g/mL seguido por P. aeruginosa con valores de CIM de 50 a 100 g/mL. Los valores de concentracin bactericida mnima (CBM) fueron semejantes o dos veces superiores a los valores de CIM. Mediante ensayos bioautogrficos se comprob que los extractos ms activos presentaban al menos dos principios antimicrobianos. Anlisis fitoqumicos indican que estos compuestos son de naturaleza fenlica. Los resultados obtenidos justificaran el uso de estos extractos para el tratamiento de infecciones bacterianas, especialmente aquellas de origen drmico. Palabras clave: plantas medicinales argentinas * actividad antimicrobiana * bacterias gram negativas multirresistentes a antibiticos * compuestos fenlicos

Acta Bioqumica Clnica Latinoamericana Incorporada al Chemical Abstract Service. Cdigo bibliogrfico: ABCLDL. ISSN 0325-2957

Acta Bioqum Cln Latinoam 2007; 41 (3): 385-93