Disponibil online la adresa www.proenvironment.

ro

ProEnvironment
ProEnvironment 3 (2010) 185 - 188

Articol bibliografic

Rolul Microorganismelor n Procesul de Remediere a Solurilor Poluate cu Hidrocarburi

DOBO Laura*, Carmen PUIA
Universitatea de tiine Agricole i Medicin Veterinar Cluj Napoca, Facultatea de Agricultur, Str. Mntur nr. 3 5, 400372 Cluj Napoca, Romania
Primit n data de 13 mai 2010; primit n forma final dup recenzie n 25 mai 2010; acceptat n 30 mai 2010 Disponibil online din 30 august 2010

Rezumat Capacitatea de a biodegrada hidrocarburile este larg rspndit n lumea microorganismelor, fiind ntlnit la: bacterii, fungi, levuri i alge. Astfel, hidrocarburile aromatice chiar i cele cu solubilitate redus cum sunt: antracenul, fenantrenul, pirenul, 1,2-benzopirenul i cristenul sunt descompuse microbiologic n sol, fiind folosite ca surs de carbon i energie necesare creterii microorganismelor.
Cuvinte cheie: hidrocarbur, bioremediere, microorganisme

1. Introducere Rolul microorganismelor const n geneza zcmintelor de iei precum i n biodegradarea microbiologic a reziduurilor de hidrocarburi [5] din diferite habitate (sol, ape, etc.). Microorganismele prezint o importan ecologic deosebit, prin faptul c ele pot fi folosite n depoluarea solurilor contaminate cu hidrocarburi. n acest sens s-a observat faptul c numeroase microorganisme au capacitatea de a utiliza hidrocarburile att n stare gazoas, ct i n stare lichid i solid din seriile alifatice, aromatice i asfaltice, pe care le folosesc ca surs de carbon i energie series and asphalt as carbon and energy source [20]. Procesul de remediere a solurilor poluate cu hidrocarburi prin procedee biologice este cunoscut sub denumirea de bioremediere. Bioremedierea se realizeaz prin intermediul microorganismelor indigene sau create n mod special i introduse n solul poluat [15].
* Autorul cruia i se va adresa corespondena. Tel.: 0264596384; Fax: 0264593792 e-mail: laura_d0b0s@yahoo.com

2. Elementele bioremediere

implicate

procesul

de

Unul dintre elementele implicate n procesul de bioremediere este agentul poluant, n cazul nostru solul poluat cu hidrocarburi. Acesta este biodegradat n urma activitii microbiene din sol. Viteza de biodegradare a poluanilor de ctre microorganisme este influenat de anumii factori, cum ar fi: nutrieni, tipul de sol, umiditate, temperatur, pH, tipul i metabolismul microorganismelor [15]. Nutrienii necesari pentru dezvoltarea celulelor sunt azotul, fosforul, potasiul, sulful, magneziul, calciul, manganul, fierul, zincul, cuprul i alte microelemente. Pentru ca activitatea biologic s decurg n condiii optime i pentru asigurarea necesarului de nutrieni trebuie ca raportul C : N : P s fie aproximativ 100:10:1 [15]. Dezvoltarea microorganismelor este influenat i de umiditate, domeniul optim fiind ntre 25 - 85%, ntruct apa asigur transportul nutrienilor, favorizeaz cataliza enzimatic i menine presiunea osmotic a celulelor [10]. Temperatura influeneaz activitatea microbian din sol. Viteza de biodegradare este sczut la temperaturi sczute, astfel nct n zonele 185

DOBO Laura i col./ProEnvironment 3 (2010) 185 - 188

cu climat rece procesul de bioremediere poate fi ineficient n perioadele reci ale anului dac bioremedierea nu se realizeaz ntr-o incint cu climat controlat. Ca regul general, temperaturile mici ntrzie viteza de volatilizare a hidrocarburilor cu greutate molecular mic, dintre care unele sunt toxice pentru microorganisme. De asemenea, n regiunile reci, vitezele de degradare sunt mult mai mici i, n consecin, mai puin adecvate ndeprtrii ieiului din mediu [20]. pH-ul solului influeneaz solubilitatea, respectiv disponibilitatea multor constituieni din sol afectnd activitatea biologic a microorganismelor. pH-ul trebuie s se situeze ntre valori optime cuprinse ntre 5,5 - 8,5 [10] Un alt element foarte important n biodegradarea hidrocarburilor este concentraia de oxigen, aceasta influennd activitatea microbian din sol. n funcie de coninutul n oxigen din sol, procesele de degradare pot fi de tipul aerob sau anaerob. Biodegradarea ieiului este deosebit de activ n aerobioz, fapt explicabil deoarece toate cile biochimice cunoscute funcioneaz cu participarea oxigenazelor i a oxigenului molecular [20]. Toti i col. (2003) l citeaz pe Z.O. Bell (1973) care a scos n eviden importana oxigenului necesar reaciilor de oxidare ale biodegradrii, stabilind c pentru oxidarea complet a unui mililitru de hidrocarbur sunt necesare 3 - 4 mg de oxigen [15]. Rodica Stnescu i col. (2006) recomand [16] concentraia rezidual a oxigenului mai mare de 1 mg/l n faza apoas, iar n faz gazoas s nu scad sub 2 - 4% (procente volumetrice). n urma procesului de biodegradare rezult CO2, H2O, precum i substane netoxice inofensive pentru mediu. 3. Avantajele i dezavantajele bioremedierii Cele mai importante avantaje ale bioremedierii sunt urmtoarele: 1. Bioremedierea, fiind un proces natural, este perceput ca un posibil proces de tratament asupra materialelor contaminate, cum ar fi solul poluat cu hidrocarburi. Microorganismele au capacitatea de a degrada un numr mare de contaminani, iar n urma activitii lor rezultatul rmas este inofensiv pentru mediu [17]. 2. Un alt avantaj al bioremedierii l constituie faptul c acest proces se poate realiza la faa locului, fr a cauza ntreruperi majore ale activitii [13].

3. Costurile de operare sunt mai mici dect n cazul altor procedee convenionale aplicate (splare, incinerare, desorbie termic). 4. Pentru a crete eficiena procesului de biodegradare se poate utiliza inocularea cu peroxid de hidrogen. 5. Se elimin problemele legate de depozitarea deeurilor [16]. Dintre dezavantajele bioremedierii amintim cteva: 1. Bioremedierea este limitat doar la compuii biodegradabili. 2. Exist anumite temeri n ceea ce privete produsele de biodegradare, acestea putnd fi mai toxice dect compusul de origine. 3. Este dificil de a extrapola [17] de la condiii de laborator la scar larg (cmp). 4. Bioremedierea nu decurge bine pe solurile argiloase, compacte, unde oxigenul sau nutrienii sunt dificil de introdus n zona de tratat [16]. 5. Procesul de bioremediere dureaz o perioad mult mai lung dect alte tratamente, cum ar fi excavarea, incinerarea solului. 4. Proprietile microorganismelor implicate n bioremedierea solurilor contaminate cu hidrocarburi Zarnea (1994) enumer principalele condiii pe care trebuie s le ndeplineasc microorganismele n procesele de biodegradare a ieiului [20]: a. s degradeze intens i rapid o gam ct mai mare de compui din petrol; b. s se reproduc rapid; c. s se multiplice i n medii naturale; d. s fie genetic stabile i s poate fi conservate i recultivate fr a suferi modificri eseniale; e. s nu produc efecte toxice i s nu fie patogene; f. s poat fi utilizate n asociere cu alte microorganisme active, pentru a asigura degradarea diferitelor tipuri de hidrocarburi. Acelai autor, n lucrarea sa, enumer posibilele efecte negative ale microorganismelor asupra hidrocarburilor petrolieri: a. alterarea ieiului brut din rezervoare asociat cu diminuarea densitii normale i cu alte modificri nedorite; b. decolorarea produilor de rafinare; c. scderea cifrei octanice a kerosenului i gazolinelor utilizate n aeronautic; d. apariia de mirosuri dezagreabile i modificarea proprietilor fizico-chimice ale uleiurilor minerale folosite ca lubrefiani sau ca ageni de rcire;

186

DOBO Laura i col./ProEnvironment 3 (2010) 185 - 188

e. producerea de amestecuri explozive n tancurile de stocare a kerosenului sau gazolinei, prin formarea unui amestec de metan i H2, rezultat din descompunerea kerosenului n contact cu apa. Microorganismele care particip n procesul de biodegradare a hidrocarburilor sunt: bacteriile, fungii, levurile, precum i algele. ns cele mai importante grupe sunt constituite din bacterii i fungi. Din cadrul bacteriilor cu preponderen sunt utilizate cele aerobe (Achromobacter sp., Acinetobacter sp., Actinomyces sp., Alcaligenes sp., Arthrobacter sp., Bacillus sp, Brevibacterium sp., Corynebacterium sp., Flavobacterium sp., Micrococcus sp., Mycobacterium sp., Nocardia sp., Pseudomonas sp., Spirillum sp., Serratia sp., Rhodococcus sp., Vibrio sp.), urmate de cele anaerobe (Geobacter metallireducens, Thauera aromatica, Desulfococcus multivorans, Clostridium sp., Desulfobacterium cetonicum). Fungii care au o importan deosebit n degradarea hidrocarburilor fac parte din urmtoarele genuri: Alternaria, Apergillus, Cephalosporium, Cladosporium, Fusarium, Graphium, Geotrichum, Mucor, Penicillium, Rhizopus, Trichoderma. 5. Specii de microorganisme identificate n degradarea anumitor hidrocarburi Genul Achromobacter a fost folosit cu succes n degradarea carbazolului [6], and phenanthrene degradation (Achromobacter xylosoxidans) [19]. Din cadrul genului Bacillus se remarc speciile: Bacillus firmus tulpina APIS272 este capabil s degradeze complet acenaftilena, antracen, i benzo [b] fluoranten i s reduc concentraiile de naftalin, dibenzo [a, h] antracen i indeno [1,2,3-c, d] piren [3]. Bacillus licheniformis - tulpina APIS473 este capabil s degradeze complet doar antracenul, n timp ce la restul hidrocarburilor doar reduce concentraia [3]. Bacillus subtilis - tulpina SBS526 degradeaz complet acenaftena, antracen i benzo [b] fluoranten i reduce concentraia de naftalin, indeno [1,2,3-c, d] piren (Reda Bayoumi, 2009), precum i toluenul [11]. Bacillus pumilus n urma experienelor s-a demonstrat a fi cel mai eficient n procesul de biodegradare a hidrocarburilor realiznd degradarea n procent de 86,94% [14]. Genul Brevibacterium izolat din solurile nigeriene a degradat 40% din hidrocarburi n timp de 12 zile [1].

Speciile de Mycobacterium care au capacitatea de a biodegrada hidrocarburile sunt M. lacticola, M. luteum, M. phlei, M. rubrum, iar ultimele trei specii enumerate degradeaz benzina, petrolul i parafina [5]. Din cadrul genului Pseudomonas se remarc: Pseudomonas alcaligenes - tulpina DAFS311 care degradeaz complet naftalina, benzo [b] fluoranten i indeno [1,2,3-c, d] piren i reduce concentraiile de antracen, benzo [a] antracen i benzo [g, h, i] perilen [3] i Pseudomonas putida [5] care are abilitatea de a degrada solveni organici, cum ar fi toluenul [11] sau naftalina [11, 12]. n cazul fungilor, Liliana Lemosi col. (2002), au obinut rezultate cu privire la capacitatea de biodegradare a hidrocarburilor, a unor tulpini din genurile Aspergillus, Penicillium, Paecilomyces i Fusarium [8]. Zheng and Obbard (2003) au reuit s identifice genul Penicillium, care a avut capacitatea de a degrada 90% fenantrenul i 75% acetnaftilena i fluorenul [21]. Walker and Cooney (1973) au scos n evidena capacitatea speciei Cladosporium resinae de a degrada hidrocarburile alifatice [18]. Genul Rhizopus cuprinde ciuperci filamentoase, care se gsesc n sol, fructe, legume i pine veche. Genul a fost izolat i studiat din punct de vedere al capacitii de biodegradare al hidrocarburilor, obinndu-se rezultate satisfctoare [2, 9, 4]. Biodegradarea se realizeaz n mai multe etape i nu este rezultatul unui singur organism specific, de obicei acioneaz sinergic mai multe tulpini de microorganisme. n acest sens, Geamn (2008) descrie fenomenul de sinergism dintre Nocardia i Pseudomonas, care n asociere sunt capabile s degradeze ciclohexanul: Nocardia prin utilizarea ciclohxanonului produce compui intermediari, care sunt preluai de Pseudomonas, Pseudomonas produce factori de cretere (cu preponderen biotin) necesari pentru creterea bacteriei Nocardia [5]. Kim i Lee (2007) au realizat cercetri cu privire la realizarea unui consoriu format din bacterii i fungi [7]. n urma experienelor s-a observat faptul c Penicillium i Rhodococcus s-au dovedit a fi foarte eficiente n degradarea hidrocarburilor aromate policiclice, n timp ce Rhodococcus alturi de Aspergillus terreus nu au avut relaii sinergice. 6. Concluzii Cunoaterea tulpinilor microbiene care pot fi folosite n procesul de remediere a solurilor contaminate cu hidrocarburi, este foarte important, 187

DOBO Laura i col./ProEnvironment 3 (2010) 185 - 188

deoarece prin aceast metod de depoluare se degradeaz complet sau parial poluanii, ducnd la formarea unor compui netoxici att pentru mediu, ct i pentru organismul uman.

[10] Paca Daniela, R.E. Paca, 2002, Ecologie i poluarea mediului ambient, Ed. U.T. Pres, Cluj-Napoca [11] Piskonen Reetta, Mari Nyyssnen, Merja Itvaara, 2008, Evaluating the biodegradation of aromatic hydrocarbons by monitoring of several functional genes, Biodegradation, 19, 883 895 [12] aek V., T. Cajthaml, M. Bhatt, 2003, Use of fungal technology in soil remediation: a case study, Water, Air, and Soil Pollution: Focus 3, 5 14 [13] Sasikumar C.S., Taniya Papinazath, 2003, Environmental management bioremediation of polluted environment, Proceedings of the Third International Conference on Environment and Health, Chennai, India, 465 469 [14] Singh C., J. Lin, 2008, Isolation and characterization of diesel oil degrading indigenous microrganisms in Kwazulu-Natal, South Africa, African Journal of Biotechnology, 7 (12), 1927 - 1932 [15] Stnescu Rodica, Liliana Bobiric, Oanamari Orbule, 2006, Remedierea solurilor contaminate, Ed. Agir, Bucureti [16] Toti M., M. Dumitru, Anca Rovena Voiculescu, M. Mihalache, G. Mihalache, Carolina Constantin, 2003, Metodologia de bioremediere a solurilor poluate cu iei cu ajutorul microorganismelor specifice selecionate din microflora autohton, Ed. GNP Minischool, Bucureti [17] Vidali M., 2001, Bioremediation. An overview., Pure Appl. Chem., 73 (7), 1163 1172 [18] Walker J.D., J.J. Cooney, 1973, Aliphatic hydrocarbons of Cladosporium resinae cultured on glucose, glutamic acid, and hydrocarbons, Applied Microbiology, vol. 26, no. 5, 705 708 [19] Wang J. Xu, H. Guo, S., 2007, Isolation and characteristics of a microbial consortium for effectively degrading phenanthrene, vol. 4, no.3, 68 75 [20] Zarnea G., 1994, Tratat de microbiologie general. Bazele teoretice ale ecologiei microorganismelor. Microorganismele i mediile lor naturale, Ed. Academiei Romne, Bucureti, 943 947 [21] Zheng Z., J.E. Obbard, 2003, Oxidation of polycyclic aromatic hydrocarbons by fungal isolates from an oil contaminated refinery soil, Environ Sci & Pollut Res, 10 (3), 173 - 176

Bibliografie
[1] Adebusoye A.S.,, .O. Matthew, I..O. Olukayode, A..D. Olakunle, S. Teniola, O. Olatope, 2007, Microbial degradation of petroleum hydrocarbons in a polluted tropical stream, World J Microbiol Biotechnol, 23, 1149 1159 [2] Adekunle A.A., O.A. Adebambo, 2007, Petroleum hydrocarbon utilization by fungi isolated from Detarium senegalense (J. F Gmelin) seeds, Journal of American Science, 3 (1), 69 - 76 [3] Bayoumi A.R., 2009, Bacterial bioremediation of polycyclic aromatic hydrocarbons in heavy oil contaminated soil, Journal of Applied Scienes Research, 5 (2), 197 211 [4] Benka-Coker M.O., J.A. Ekundayo, 1997, Applicability of evaluating the ability of microbes isolated from an oil spill site to degrade oil, Environmental Monitoring and Assessment, 45, 259 - 272 [5] Geamn I., 2008, Microbiologie, ediia a VII-a. Ed. Cris Book Universal, Bucureti [6] Guo W., D. Li, Y. Tao, P. Gao, J. Hu, 2008, Isolation and description of a stable carbazole-degrading microbial consortium consisting of Chryseobacterium sp. NCY and Achromobacter sp. NCW, Curr. Microbiol, 57, 251 257 [7] Kim J.D., C.G. Lee, 2007, Microbial degradation of polycyclic aromatic hydrocarbons in soil by bacteriumfungus co-cultures, Biotechnology and Bioprocess Engineering, 12, 410 - 416 [8] Lemos Solrzano Judith Liliana, Andrea C. Rizzo, Valria S. Millioli, Adriana Ururahy Soriano, Maria Inez de Moura Sarquis, R. Santos, 2002, Petroleum degradation by filamentous fungi, http//ipec.utulsa. edu/Ipec/conf2002/lemos_santos_7.pdf. [9] Okerentugba P.O., O.U. Ezeronye, 2003, Petroleum degrading potentials of single and mixed microbial cultures isolated from rivers and refinery effluent in Nigeria, African Journal of Biotechnology Vol. 2 (9), 288 292

188