Prof.

Aurico Sousa Fonseca Ctedra de Microbiologa e Inmunologa Departamento de Patologa Veterinaria FCV-UCV

BACTERIAS ANAEROBIAS NO ESPORULADAS

ANAEROBIOS

ESPORULADOS

NO ESPORULADOS

GRAMPOSITIVOS

GRAMPOSITIVOS

GRAMNEGATIVOS

BACILOS

CLOSTRIDIUM

COCOS

BACILOS

BACILOS

PEPTOSTREPTOCOCCUS INDOLICUS

ACTINOMYCES SPP EUBACTERIUM SPP PROPIONIBACTERIUM SPP

DICHELOBACTER (BACTEROIDES) FUSOBACTERIUM

BACTERIAS GRAM-NEGATIVAS ANAERBICAS PATGENAS NO FORMADORAS DE ESPORAS

Muchas causan infecciones oportunistas mixtas, a menudo en asociacin con anaerobios facultativos.
Las interacciones sinrgicas son comunes.

Especies de Fusobacterium y especies de bacterias antes conocidas como Bacteroides conforman ms del 50% de los microorganismos anaerobios aislados.
Cambios taxonmicos a los miembros del gnero Bacteroides

CONSIDERACIONES, TAXONOMIA Y ANTECEDENTES HISTORICOS DEL GNERO Fusobacterium

Familia Fusobacteriaceae:
Gnero Fusobacterium con 13 especies

Knorr (1923) propuso el Gnero. Las especies de este gnero estn presentes como microflora normal oral, gastrointestinal y genitourinaria del hombre y de los animales. Se hallan en infecciones purulentas, necrticas y ulcerativas junto a otras bacterias anaerobias, microaerfilas o aerobias.
Ej: F. necrophorum, Dichelobacter nodosus, Arcanobacterium pyogenes

ESPECIES PATGENAS DEL GNERO Fusobacterium Fusobacterium necrophorum

HUESPED ENFERMEDAD Difteria ternero (focos necrtico en Bovinos laringe, trquea y cavidad bucal) Abscesos hepticos, Metritis, Celulitis y Mastitis
Ovinos

Abscesos podales Dermatitis interdigital contagiosa Enteritis necrtica Abscesos en hgado

Cerdos

Conejos

Necrobacilosis de labios y boca

ESPECIES PATGENAS DEL GNERO Fusobacterium Fusobacterium nucleatum

HUESPED ENFERMEDAD

Algunas Infecciones en heridas y en el especies Tracto respiratorio superior y animales en cavidad pleural. y hombre

Fusobacterium russii
HUESPED ENFERMEDAD

Gatos y hombre

Infecciones supurativas en tejido blando (gato) y abscesos perianales en el hombre.

HBITAT NATURAL
Encontradas a menudo en las membranas mucosas de las vas digestivas de los animales y el hombre. Se excretan en las heces Pueden sobrevivir por perodos cortos en el medio ambiente. Dichelobacter nodosus, sobrevive menos de 4 das en el barro
Patgeno primario de los tejidos epidrmicos de la regin de la pezua de los rumiantes.

PROCEDIMIENTOS DIAGNSTICOS
Muestras obtenidas por muestreo directo de descargas o lesiones, y por puncin. Deben ser procesadas inmediatamente despus de su recoleccin. Se pueden emplear kits y medios de transporte comerciales disponibles para los especmenes
Ncleo de muestra de tejido de ms de 2 cm3, mantiene un microambiente anaerbico.

Son adecuadas para el cultivo anaerbico las muestras lquidas en una jeringa, si el aire se expulsa de la misma y la aguja se mantiene conectada.

INCUBACIN Y CULTIVO
Se utilizan para la incubacin de cultivos Jarras anaerbicas
El Agar sangre para el aislamiento de anaerobios debe ser complementado con:
5 a 10% de eritrocitos de rumiantes Extracto de levadura Vitamina K Hemina
Atmsfera libre de oxgeno, con hidrgeno y 10% de C02, a 37 C hasta 7 das.

Medios selectivos pueden ser preparados adicionando agentes antimicrobianos apropiados.

INCUBACIN Y CULTIVO
Los medios de cultivo deben ser previamente reducidos
Almacenamiento en ambiente anaerobio durante al menos 6 horas pre-inoculacin.

Los medios lquidos son tiles para los sub-cultivos, pero no son adecuados para el aislamiento primario
Caldo de carne cocida o el medio tioglicolato suplementado con vitamina K y hemina,.

INCUBACIN Y CULTIVO
Se requieren medios selectivos especiales para el aislamiento de Dichelobacler nodosus
Pezua podrida en rumiantes (Skerman, 1989).

En algunas formulaciones de medios se agrega polvo de pezua ovina para promover un mayor crecimiento.

DIFERENCIACIN DE LAS BACTERIAS GRAM-NEGATIVAS ANAERBICAS PATGENAS NO FORMADORAS DE ESPORAS

Se diferencian sobre la base de:

Morfologa de las bacterias Aspecto colonial Pruebas de sensibilidad antibitica Produccin de cidos grasos

MORFOLOGA MICROSCOPICA
Dichelobacter nodosus
Bacilos gruesos, rectos o ligeramente curvos, hasta a 6 m de largo y abultado en uno o ambos extremos.

Azul de metileno

Gram

Fusobacterium necrophorum
Forma filamentosas largas, de irregular tincin, sin ramificaciones

Gram

CARACTERSTICAS DE CULTIVO

Las colonias de bacterias Gramnegativos anaerobios no esporuladas suelen tener un olor ftido o podrido
Debido a la produccin de cidos grasos voltiles

 Dichelobacter nodosus
Aspecto colonial variable (Stewart et al., 1986).

ASPECTO COLONIAL
Cepas virulentas de pezua podrida ovina tienen una zona central oscura, una zona plida medio granular y una irregular propagacin de la periferia con una apariencia de vidrio.

Fusobacterium necrophorum
Las colonias son de color gris, redondas y brillantes. Algunas cepas son hemolticas.

PRUEBAS DE IDENTIFICACIN DE ESPECIES

Se utilizan de manera ms precisa para la identificacin de las especies:

Las pruebas de sensibilidad antibitica Pruebas bioqumicas Cromatografa de gas lquido
Ac. actico, Ac. propinico,, Ac. Isobutrico, Ac. Butrico y Ac. isovalerinico.

Pruebas bioqumicas Fusobacterium

ESQUEMA DE CLASIFICACION DE LAS BACTERIAS ANAEROBIAS ESTRICTAS DE IMPORTANCIA EN MEDICINA VETERINARIA, BASADA EN LA PRODUCCIN O NO PRODUCCIN DE ACIDOS GRASOS VOLTILES.
BACILOS GRAMNEGATIVOS Dichelobacter Fusobacterium Bacteroides (A), (P), (IB), (B), (IV), (L), (S) B, (P), (A), (V), (L), (S) (A), (P), (IB), (B), (IV), (L), (S)

A: cido actico, P:cido propinico; IB: cido isobutrico; B: cido butrico; IV: cido isovalrico; V: cido valrico, L: cido lctico; S: cido succnico; ( ): puede estar presente.

 Mtodos para la deteccin de cepas virulentas de Dichelobacter nodusus incluyen:

Zimograma Electrofortico: para determinar los patrones de isoenzimas proteoltica ELISA: utilizando anticuerpos monoclonales. PCR: Tcnicas de Reaccin en Cadena de Polimerasa

FACTORES DE VIRULENCIA Fusobacterium Endotoxina - fraccin txica Lpido A (Accin necrotica). Exotoxina con accin leucocitoltica (Leucotoxina) y sinrgica con otras bacterias Enzimas: Lipasas, Desoxirribonucleasas Hemolisinas

PATOGNESIS Y LA PATOGENICIDAD
Suelen ejercer efectos patgenos cuando las barreras anatmicas fallan lo que permite invasin de los tejidos subyacentes. Se replican slo ante potenciales de reduccin bajos o negativos. La mayora producen superxido dismutasa
Les permite sobrevivir en los tejidos oxigenados hasta que el potencial de reduccin (Eh) alcanza niveles que favorecen su crecimiento.

PATOGNESIS Y LA PATOGENICIDAD
El tejido traumatizado y necrtico seguido de la multiplicacin de bacterias anaerobias facultativas pueden reducir los niveles de Eh a un rango adecuado para la proliferacin de organismos anaerobios no formadora de esporas. La mayora de las infecciones que involucran a estos microorganismos son mixtas. Dos o ms especies de bacterias, que interactan de manera sinrgica pueden producir lesiones que los organismos individuales no podran.

Interaccin sinrgica de Fusobacteriun necrophorum con Arcanobacterium pyogenes y con Dichelobacter nodosus en el desarrollo y progresin de lesiones podales en rumiantes
Fusobacterium necrophorum
Leucotoxina Facilita supervivencia De A. pyogenes Factor de Crecimiento Factor de Crecimiento Tejidos daados facilitan invasion por D. nodosus

Arcanobacterium pyogenes

Dichelobacter nodosus

BIOTIPOS DE F. necrophorum
Se reconocen tres biotipos de F. necrophorum
Biotipo A:
Designado F. necrophorum subespecie necrophorum Tiene mayor actividad hemoltica y es ms virulento que el biotipo B,

Biotipo B:
F. necrophorum subespecie funduliforme.

Biotipo C:
Reclasificadas como F. pseudonecrophorum Parece ser no patgenas.

Dichelobacter nodosus
Caractersticas de Dichelobacter nodosus que se correlacionan con su capacidad de daar tejidos incluyen:
Produccin de proteasas termoestables y elastasas Presencia de actividad agaroltica (sobre agar) basado en medios que contienen pezua en polvo.

DIFTERIA DEL TERNERO

Faringitis o laringitis necrtica en terneros menores de 3 meses de edad. F. necrophorum penetra a travs de abrasiones en la mucosa de la faringe o la laringe
Por ingestin de alimentos gruesos.

Los signos clnicos incluyen:

Fiebre, depresin, anorexia, salivacin excesiva, dificultad respiratoria y mal olor de la boca. Terneros no tratados desarrollan neumona necrotizante fatal.

Suele ser eficaz el tratamiento con sulfamidas o tetraciclinas potenciadas al principio del curso de la enfermedad.

ABSCESO HEPTICO BOVINA

Formacin de abscesos hepticos secundarios a ruminitis frecuencia en animales de engorde. Alimentacin con raciones ricas en carbohidratos y la consiguiente fermentacin intraruminal rpida puede conducir al desarrollo de las lceras. Fusobacterium necrophorum, junto con otros anaerobios y Arcanobacterium pyogenes invaden el tejidos, y las embolia ocasionales que llegan al hgado a travs de la vena porta inician la formacin de abscesos. Lesiones suelen ser detectados en la lnea de matanza. Tcnicas de manejo en corrales para reducir la incidencia de rumenitis. Clortetraciclina en alimentacin durante el acabado reduce prevalencia de absceso heptico.

LA RINITIS NECRTICA DE LOS CERDOS

Condicin espordica, que afecta principalmente a los cerdos jvenes Supuracin y necrosis del hocico como resultado de la infeccin por F. necrophorum, a menudo en asociacin con otros anaerobios. Penetracin a travs de abrasiones en la mucosa nasal. Sntomas incluyen hinchazn de la cara, estornudos y nariz con descarga mal oliente. Infeccin crnica: deformacin permanente de los huesos de la cara y de las fosas nasales ("Nariz de toro).

PODODERMATITIS EQUINA O PUDRICIN DEL PIE

Necrosis de los cascos del caballo Falta de higiene, condiciones de humedad y la falta de limpieza regular de los cascos. La infeccin por F. necrophorum, (secundaria al dao del casco), resulta de una respuesta inflamatoria localizada. Secrecin con mal olor en el surco cerca de la ranilla. Tratamiento:
Regeneracin de la ranilla, proporcionando establos limpios y secos, atencin regular de los cascos y ejercicio.

PUNTO NEGRO DE LOS PEZONES DE LA ESPECIE BOVINA

Punto negro o viruela negra del orificio del pezn y el esfnter de las vacas lecheras rea localizada de necrosis con la formacin de costras negro debido a la invasin por Fusobacterium necrophorum. Contribuye a la estenosis del esfnter y predispone a la mastitis.