1) Prctica 2 Bq I, determinacin del pKa de un cido dbil

Fundamentos de la Prctica
El azul de bromotimol es un cido debil del cual existen tres estados de ionizacin. La configuracin molecular de cada una de ellos permite que stos absorban ciertas longitudes de onda dentro del espectro visible lo cual da color a cada uno de ellos. Como dijimos el azul de bromotimol es un cido dbil por tanto dependiendo del pH del medio la forma predominante ser una u otra. La ley de Beer-Lambert relaciona la concentracin de sustancia que tenemos([s]) con su coeficiente de extincin molar (parmetro dependiente de la longitud de onda que absorbe la sustancia,), el paso ptico(d) y la absorbancia a esa longitud de onda(A) mediante la siguiente ecuacin: A=d[s] Por otro lado el pH, la concentracin de dos de los estados de ionizacin y el pK a estn relacionados mediante la ecuacin de Henderson-Hasselbalch la cual es: pH=pKa+logAHA ; siendo A la forma bsica y HA la forma cida del compuesto. Con lo cual midiendo la absorbancia podremos llegar mediante una serie de clculos a conocer el valor de pKade el azul de bromotimol.
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Procedimiento y Resultados experimentales

El procedimiento experimental consta de los siguientes pasos 1. 2. 3. 4. 5. Disponer 9 tubos de ensayo y pipetear 5 ml de tampn ajustado a diferentes pH en cada tubo. Pipetear 200 L de la solucin de azul de bromotimol en 8 de los tubos. Agitar los tubos. Calibrar el colormetro con la disolucin sin azul de bromotimol. Medir las absorbancias en todos los tubos a 430 y luego a 610 nm de longitud de onda, lavando bien la cubeta entre la primera serie y la siguiente.

Tubo
Clculos e Interpretacin de resultados
Al representar la absorbancia frente al pH obtenemos que el maximo a 430 nm es de 0,5 y el mnimo es de 0,1 nm y a 610 nm el maximo es 1,1 y el mnimo es 0. Normalizando los datos de la grfica 1 es decir haciendo 100((A430 -Amin 430)/(-Amx
430

pH 4 5 6 6,5 7 7,5 8 9 10

A430 0,500 0,480 0,460 0,408 0,312 0,202 0,150 0,120 0,110

A610 0,011 0,002 0,104 0,261 0,509 0,760 0,947 1,055 1,098

1 2 3 4 5 6 7 8 9

-Amin 430 ) y 100((A610 -Amin 610)/(-

Amx 610 -Amin 610) obtenemos el porcentaje de forma cida y bsica respectivamente, el cual

representamos en la grfica 2. Posteriormente mediante la ecuacin de Henderson-Hasselbalch reordenada representamos log A /HA frente al pH dado y tendremos una linea prcticamente recta a la cual se aade la lnea de tendencia. El punto de corte con el eje de abcisas ser el valor de pK a. Para nuestra pareja concreta el pKanos ha dado un valor de 7,13 con un valor de sem de 0,310 Preguntas: a) La curva debe pasar exactamente por el centro de todos los puntos experimentales?Hay puntos errneos? La curva no tiene por qu pasar por todos los puntos obtenidos ya que las mediciones realizadas contienen errores de diversa ndole como por ejemplo mala calibracin del espectrofotmetro, pequeas averas entre otros y obviamente habr puntos errneos, de hecho todos los puntos tienen error pero no todos tienen el mismo error. b)Por qu se ajusta una curva sigmoidal a los datos y no una lnea recta o cualquier otro tipo de curva? Cuando la concentracin de una de las formas es muy grande o muy pequea ( la otra sera muy grande o muy pequea) en suma la diferencia entre ambas especies es muy grande cuando ocurre eso al variar un poco el pH a penas cambia la absorbancia ( concentraciones de especies) sin embargo cuando A es media entonces la concentracion de una de las especies sera media y la otra por lo tanto tambin ser mediana por lo que sern parecidas si son parecidas lo que ocurre es que al variar mnimamente el pH las concentraciones de especies se disparan y cambian mucho por eso es una curva sigmoide. c)Por qu la curva de absorbancias medidas a 610 nm alcanza un mximo ms alto que las medidas a 430 nm? Porque a pH bsico (color azul, que est cercano a 610 nm) el coeficiente de extincin molar es mayor que a pH cido (430 nm). d)Por qu el intervalo de variacin A del mnimo al mximo es distinto en cada curva si representa el 100% de ABT en ambos casos? Porque el coeficiente de extincin molar del ABT es diferente segn la longitud de onda y como la absorbancia y el coeficiente de extincin molar son directamente proporcionales segn la ley de BeerLambert entonces a diferentes longitudes de onda habr diferente absorbancia. d) Ser el punto de corte entre ambas curvas el valor del pKa? S ya que a un mismo pH el valor de la absorbancia ser el mismo y por tanto segn la ley de BeerLambert la concentracin de ambas formas tambin ser la misma y por tanto el pKaser ese valor ya que es el valor de pH al cual las concentraciones de ambas especies inicas son iguales. a)Qu representan %A y %B?Con qu especies qumicas estn relacionada? Esos valores representan la cantidad porcentual de forma cida y forma bsica del ABT respectivamente por tanto si uno de ellos vale x el otro valdr 100-x.
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a)Por qu se ajusta una lnea recta y no otro tipo de curva? Porque si reordenamos la ecuacin de Henderson-Hasselbalch como log(A-/HA)=pH-pKa y representamos el primer miembro frente al pH la relacin entre ambas variables se ajustar a una recta de la forma y=mx+n. b)Por qu el valor de la abcisa en el origen es precisamente el valor del pK a del cido? Porque si en la ecuacin la abcisa vale 0 eso significa que 0=pH-pKa con lo cual pH=pKa.

2) PRCTICA 2. DETERMINACIN ESPECTROFOTOMTRICA DEL pKa DE UN CIDO DBIL

Objetivos

1.Visualizar las diferentes formas de ionizacin de un indicador de pH. 2.Manejar cuantitativamente la ecuacin de Henderson-Hasselbach
Fundamentos de la prctica

Los cidos dbiles se disocian en disolucin acuosa rindiendo hidrogeniones, H3O+, y un anin segn la reaccin reversible HA + H2OH3O+ + ASi las especies de esta reaccin estn coloreadas se podrn convertir de una forma a otra por el color de la disolucin; y de forma cuantitativa midiendo la absorbancia de la disolucin. El azul de bromotimol es un cido dbil ionizable que existe en varias formas coloreadas, permitiendo este tipo de experimentos. La intensidad del color de la sustancia depende de su grado de absorcin de la luz incidente, en el caso de disoluciones transparentes la medida de dicha intensidad de color es la absorbancia. La absorbancia de una disolucin de un soluto coloreado est relacionada con la concentracin del soluto, esta es la ley de Lambert-Beer: A= Ed[s] Donde d es el paso ptico de la disolucin y E es el coeficiente de extincin molar, que depende de la longitud de la onda d ela luz absorbida. El color de una disolucin de azul de bromotimol depender del pH; si sta pasa de pH 3 a pH 8 ir desapareciento la forma amarilla(absorbe luz a 1=430 nm) y se ir transformando en azul(absorbe luz a 2=610 nm)

Cuantitativamente la relacin entre estas especies en el equilibrio puede describirse por la ecuacin: Ka=[H3O+1][A-1]/[HA] y reordenando [H3O+1]=Ka[HA]/[A-1] Puesto que la [H3O+1] vara se suele emplear una medida logartmica, el pH. Tomando logartimos en ambos miembros de la ecuacin -log([H3O+1])= -log(Ka)-log([HA]/[A-1]) con lo que podemos describir: pH=pKa+ log([A-1]/[HA]) Esta ecuacin que describe el comportamiento en equilibrio de un cido (o base) dbil es la ecuacin de Henderson-Hasselbach.
Procedimiento y Resultados experimentales

Disponer de una gradilla con 9 tubos de ensayo y rotularlos segn la tabla adjunta. Pipetear en cada tubo 5 ml del tampn ajustado al pH indicado. A continuacin pipetear 200 l de la solucin de azul de bromotimol(ABT). Tubo Tampn,ml ABT,ml ----0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2

blanco 5 4 5 6 6,5 7 7,5 8 9 5 5 5 5 5 5 5 5

10 5 0,2 Agitar los tubos para mezclar bien y leer la absorbancia de los mismos frente al blanco.

Primero ajustar el colormetro a cero con el blanco a la longitud de onda de 430 nm(amarillo) y medir la absorbancia de todos los tubos a esa longitud de onda. Luego cambiar a 610 nm(azul), ajustar otra vez a cero con el blanco y leer otra vez todos los tubos.
As, obtenemos esta tabla: pH 3 4 5 6 6,5 7 7,5 8 9 10 11 A430 0,81 0,82 0,87 0,791 0,7 0,541 0,348 0,233 0,161 0,13 0,12 A610 -0,1 -0,04 -0,01 0,15 0,35 0,7 1,507 1,75 1,9 1,959 1,96

Identificacin de la Pareja

Grupo de Prcticas: A02 Pareja: P06 Nombre: Cristina Prez Alonso Nombre: Tatiana Bcares de Purgly
Grfica 1: Representar absorbancias frente al pH

Preguntas Grfica 1

a)

No, porque cualquier experimento est sujeto a posibles errores

b) Porque hemos calculado la grfica mediante la ecuacin de HendersonHasselbach Porque la base tiene una absorbancia mucho mayor a su longitud de c) onda (610 nm) que el acido a la suya (430 nm), es decir, el coeficiente de extincin molar de la base es mayor que el del cido d) e) Porque el coeficiente de extincin molar a 610 es mayor que a 430 S

Grfica 2: Representar %A y %B

Preguntas Grfica 2

a) %A representa la concentracin de acido y %B la concentracin de la base.

Grfica 3: Determinacin del pKa

Preguntas Grfica 3

a) Porque para determinar el pKa utilizamos la ecuacin de HendersonHasselbach. Si en ella despejamos el logaritmo de las concentraciones de cido y base obtenemos una lnea del tipo y=ax+b, donde a=1 y el corte en el eje de absisas ser el pKa.

b) Porque para hallar el pKa igualamos log[A-]/[AH] a 0 ya que el cociente entre ambas concentraciones es igual por lo tanto ser 1.

Determinacin del pKa

Con la ecuacin obtenida en la grfica 3: y = 0,5249x - 3,7169 obtenemos el pKa, despejando la 'x' e igualando la ecuacin a 0. 0,5249x 3,7169=0 x= 3,7169/0,5259 x=pKa=7,081