DETERMINACIN DE VITAMINA C EN FRUTAS Y VERDURAS OBJETIVOS General Identificar el contenido de vitamina C en frutas y verduras, de forma cuantitativa.

. Especficos Conocer mediante la coloracin en las muestras analizadas la presencia de vitamina C. Identificar mediante de una curva de calibracin, la concentracin de la Vitamina, en patrn y fruta examinada.

INTRODUCCION Se presenta en este informe, conceptos involucrados sobre la Vitamina C, datos y resultados encaminados a encontrar concentraciones de esta vitamina presentes en una fruta y verdura de eleccin. Se debe reconocer que la presencia de esta vitamina es requerida para un cierto nmero de reacciones metablicas en todos los animales y plantas y es creada internamente por casi todos los organismos, siendo los humanos una notable excepcin. Se evidencia un completo manejo de la informacin recopilada en la prctica, relacionado a continuacin.

MARCO TEORICO Vitamina C La vitamina C es una de las vitaminas que intervienen en el funcionamiento del sistema inmunitario, como lo hacen la vitamina A y

la tiamina, es muy importante como vitamina antioxidante, lo que de una u otra manera protege a nuestro organismo de radicales libres u otras sustancias txicas, y al ser hidrosoluble, el exceso es fcilmente eliminado en la orina. Estructura de la vitamina C cido Ascrbico

Una gran mayora de animales y plantas son capaces de sintetizar vitamina C, a travs de una secuencia de pasos enzimticos (Dglucuronato, L-gulonato, L-gulonolactona, 2-ceto-L-gulonolactona y Lascorbato), los cuales convierten la glucosa en vitamina C. Los seres humanos no poseen la capacidad enzimtica de producir vitamina C. La causa de este fenmeno es que la enzima del proceso de sntesis, la L-gulonolactona oxidasa esta ausente debido a que el gen para esta enzima (Pseudogene GULO) es defectuoso. La vitamina C puede absorberse como cido ascrbico y como cido dehidroascorbico a nivel de mucosa bucal, estmago y yeyuno (intestino delgado), luego es transportada va vena porta hacia el hgado para luego ser conducida a los tejidos que la requieran. Se excreta por va renal (en la orina), bajo la forma de cido oxlico principalmente, por heces se elimina solo la vitamina no absorbida. Funcin biolgica de la vitamina C En humanos, la vitamina C es un potente antioxidante, actuando para disminuir el estrs oxidativo; un substrato para la ascorbato-peroxidasa, (4) as como un cofactor enzimtico para la biosntesis de importantes bioqumicos. Ayuda al desarrollo de dientes y encas, huesos, cartlagos, a la absorcin del hierro, al crecimiento y reparacin del tejido conectivo normal (piel ms suave, por la unin de las clulas que necesitan esta vitamina para unirse), a la produccin de colgeno (actuando como cofactor en la hidroxilacin de los aminocidos lisina y prolina), metabolizacin de grasas, la cicatrizacin de heridas. DIAGRAMA DE FLUJO
2

C6H8O6

Ingreso al laboratorio Bata, guantes, tapabocas

Qumicos

Manipulacin de implementos

Fsicos Tubos de ensayo, pipetas, probetas.

Almidn, lugol, nitrito de sodio, etanol, acido oxlico

Preparacin de solucin patrn, a travs de Tableta de vitamina C.

Tubos de ensayo con almidn- lugol y muestra vegetal.

Obtencin de extractos problema

Soluciones frescas de acido ascrbico y de nitrito de sodio

Preparacin de soluciones, de acuerdo a la tabla de cuantificacin

Desecho a los recipientes correspondientes.

Espectrofotmetro y lectura de absorbancias

Clculos y Entrega de elementos.

implemento y del TABLA DE RESULTADOS sitio de trabajo.

Limpieza de cada

Salida

2. Forma Cuantitativa Materiales empleados durante la prctica:

Tubos de ensayo Pipetas de 5 y 10 mL Espectrofotmetro Mecheros Probetas de 100 mL 2-nitroanilina 0.16% en actico-HCI

Nitrito de sodio 0,08% en H2O Etanol 96% mallas Acido oxlico 0.15% Solucin de vitamina C, 0.2 mg/mI.

Fruta y Verdura a analizar: Naranja y Tomate

Foto N. 01 1ra Parte Extraccin: Fruta/Verdu ra Naranja Tomate Volumen 1 mL 1 mL Tabla N. 1 Peso Beaker 34.098g 34.2450 g +

Adicin de cido oxlico al 0,15%: Fruta/Verdu ra Naranja (D1) Tomate (D2) Volumen Totales de Acido 4 mL 5 mL 4 mL 5 mL Tabla N. 2

Foto N. 02 Exhibe coloracin: No Obtencin de: Tubos D1 (Fruta) y D2 (Verdura). 2da Parte Preparaciones:

Tabla N. 3

Foto N. 03 Lecturas de Absorbancias: (Long Onda 540 nm)

Foto N. 04 Tubo B 1 2 3 4 5 6 D1 D2 Absorbancia 0 0.121 0.205 0.308 0.283 0.364 0.503 0.258 0.452 Tabla N. 4a Concentracin 0 0.02 0.04 0.08 0.12 0.16 0.2 4b

Clculo de la concentracin del patrn [] = 0.2 mg/mL * VolenTubo [] = 0.2 mg/mL * (0.1mL ; 0.2mL ; 0.4mL ; 0.6mL ; 0.8mL ; 1mL) [] = (0.02mg; 0.04mg; 0.08mg; 0.12mg; 0.16mg; 0.2mg) x mL Respectivamente. Curva de calibracin:
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Abs orbancia vs concentracin

0,6 0,5 Abs orbancia (A) 0,4 0,3 0,2 0,1 0 0 0,05 0,1 0,1 5 0,2 0,25 Concentracin [mg/mL]

3ra Parte Expresin de resultados 1. Calcular el contenido de vitamina C en la fruta y verdura correspondiente expresndolo como mg/100 g de fruta o verdura o como mg/100 ml de jugo. Finalmente compararlo con el valor reportado en la bibliografa.

Clculo de la concentracin de Fruta/Verdura:

Expresin como mg/100 ml de jugo. Naranja Peso muestra = 1,5708g. 0.086mg (x Vitamina C). mL de Tomate Peso muestra = 1,7178g. 0.185mg (x Vitamina C). mL de

0.086mg * 100mL = 8,6 mg/mL Segn teora: Naranja: 50mg/Ml

0.185mg * 100mL = 18,5 mg/mL Segn teora: Tomate: 26,6mg/mL

ANLISIS Y CONFRONTACIN DE RESULTADOS La vitamina C es la ms sensible de las vitaminas, es lbil en presencia de humedad y oxgeno, pH, agentes oxidantes, temperatura y presencia de iones metlicos especialmente cobre y hierro, es soluble en agua, y se pierde fcilmente en procesos hmedos. La vitamina C se encuentra de dos formas, como acido ascrbico y acido dehidroascorbico, se utiliza el mtodo de la transformacin del acido ascrbico, este mtodo es el de Mohr, ya que utiliza la 2nitroanilina, y es esta la que muestra un mximo de absorcin a 540nm. La tcnica de anlisis, espectrofotometra, es un mtodo muy aceptable, y nos permite determinar con un buen grado de exactitud las absorbancias en las muestras preparadas, as trabajar con curva de calibracin para calcular concentraciones de la naranja y el tomate. Por otro lado, se sabe que las enzimas de numerosas plantas transforman la glucosa en vitamina C. Los ctricos son los frutos que concentran una mayor cantidad de esta sustancia. La naranja contiene 60 mg por cada 100 mL, mientras que el tomate apenas concentra 26 mg y la manzana, 8 mg. Frente a esto y segn los resultados obtenidos, las muestras de naranja y tomate analizadas, no llegan a ser semejantes a la bibliografa encontrada, la razn es que las muestras tomada de 1 mililitro no fue trascendente y se extrajeron de frutos verdes, es decir no maduras, (poco contenido) y a pesar que el acido oxlico tratara de resaltar el contenido de vitamina C, no fue suficiente. Tambin se puede afirmar que la manipulacin de las muestras no fue la ms adecuada, sobretodo en el momento del filtrado.
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Tras llevado el procedimiento se analiza que as las muestras no fueran las mas aptas para el procedimiento, si presentan contenido de vitamina C y se demuestra que es posible determinar dicho contenido, espectofotomtricamente y no con mtodos volumtricos convencionales como la valoracin con disolucin de Yodo, o como el azul de metileno. Por ultimo, la naranja es fuente natural de vitamina C, el tomate no tanto, pero en ambos su contenido depende de la especie, rea geogrfica en las que son cultivados, las condiciones de almacenamiento una vez recogidos y del estado de maduracin. DESARROLLO DE CUESTIONARIOS 1. Compare el mtodo que utilizo con otro mtodo de determinacin de la misma vitamina. El cido ascrbico o vitamina C (C 6H8O6) se puede determinar por medio de una titulacin yodomtrica. La vitamina C es un agente reductor suave que reacciona rpidamente con el in triyoduro, en este mtodo se genera un exceso conocido de in triyoduro (I3-) por reaccin de yodato con yoduro, se deja reaccionar y luego el exceso de I3- se titula por retroceso con una solucin de tiosulfato. El mtodo se basa en las siguientes reacciones: 8I- + IO3- + 6H+ C6H8O6 + I3- + H2O + 3I cido ascrbico deshidroascrbico I3- + 2(S2O3)-2 Tiosulfatotetrationato 3I3- + 3H2O C6H8O7 + 2H+ Acido 3I- + (S4O6)-2
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La diferencia se basa fundamentalmente en los reactivos usados, el mtodo es similar ya que se determina la presencia de Vitamina C por medio de titulacin. 2. Qu ocurrira si no se decolora por completo la solucin de 2-nitroanilina al adicionar nitrito de sodio? Si no se decolora por completo la solucin de 2nitroanilina al adicionar nitrito de sodio significa que no se oxido, ya que el nitrito de sodio es altamente oxidante. 3. Cual es la funcin del Hidrxido de Sodio en la determinacin de la Vitamina C? La vitamina C es el cido ascrbico y el hidrxido de sodio una base, por tanto este acta como titulante de la vitamina C. Esta clase de titulacin se denomina Acidimetra la cual es una determinacin de la concentracin de un cido empleando una base fuerte de concentracin conocida como sustancia valorante, como el NaOH que fue el reactivo que usamos en nuestra practica. 4. Cmo se afectara la determinacin si la muestra ha sido tratada previamente con calor? La vitamina C se oxida rpidamente y por tanto requiere de cuidados al momento de exponerla al aire, calor y agua. Por tanto cuanto menos calor se aplique, menor ser la prdida de contenido. 5. Cmo se encuentra la vitamina C generalmente en los materiales vegetales? La vitamina C se en vegetales se encuentra mediante una enzima que segn una reaccin de
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oxidacin puede estar catalizada por el enzima ascorbato oxidasa, abundante en algunos vegetales, y se produce tambin como reaccin lateral en las oxidaciones catalizadas por perxidasas o polifenoloxidasas. Consecuentemente, la ruptura de la compartimentalizacin acelera mucho la destruccin del cido ascrbico, ya que tambin facilita el acceso al oxgeno. La ascorbato oxidasa es un enzima relativamente termoestable, y tambin poco sensible a cambios en el pH. Tiene un peso molecular de alrededor de 140.000, con restos glucdicos unidos a la cadena polipeptdica. Cada molcula contiene ocho tomos de cobre, distribuidos en tres tipos, que difieren en su comportamiento espectroscpico. De ellos, solamente uno del llamado tipo 1", otro del tipo2" y dos del tipo 3" se encuentran en el centro activo del enzima, asociados a restos de histidina 6. Cite seis alimentos (verduras, frutas, leguminosas, tubrculos) ricos en vitamina C. Guayaba, coliflor, zanahoria, uva, apio, mandarina, kiwi.

CONCLUSIONES El reconocimiento de frutas y verduras que concentran una mayor cantidad de vitamina C presente en las muestras vegetales analizadas, y representa notablemente el provecho de la prctica realizada. Puede evidenciarse en los datos y graficas obtenidos, que tras realizar un manejo correcto de las muestras, de lecturas espectofotomtricas y curva de calibracin,
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determinadas concentraciones de vitamina en ciertas cantidades de vegetal, tras efectuado el procedimiento y el manejo de informacin, se concluye que los objetivos formulados han sido alcanzados.

REFERENCIAS http://www.consumer.es/seguridadalimentaria/ciencia-ytecnologia/2009/10/12/188461.php http://docencia.udea.edu.co/cen/tecnicaslabq uimico/02practicas/practica21.htm

http://html.rincondelvago.com http://es.wikipedia.org

Cibergrafa, tomada el 18 y 20 de Marzo de 2012.

ANEXOS

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O OH HO
5 4 3

O
2

HO

OH
5 4 3

C C C C C CH2

O
2

O O

HO

OH

H HO

c id o d e h id r o a s c r b ic o
A. Formas Biolgicamente activas de la Vitamina C Fuente: Reportada en Referencias

c id o d ic e to g

B. Contenido de Vitamina C de distintas frutas expresado en mg/mL de sustancia comestible Fuente: Reportada en Referencias

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