UNAD QUIMICA ANALITICA ING.TECNOLOGIA AMBIENTAL DENIFFE RODRIGUEZ HOTS Unidad 4. Mtodos espectrofotomtricos Actividad 3.

Obtencin del espectro de absorcin de la clorofila

1.-Grafiquen los datos, utilizando Excel o papel milimtrico. 2.-Localicen en la grfica la longitud de onda de mxima absorbencia, y respondan: .- A qu longitud de onda corresponde? .- De acuerdo a la longitud de onda, que color del espectro absorbe mejor? 3.-Interpreten qu importancia tiene la obtencin de espectro de absorcin de la clorofila dentro de tu preparacin acadmica.

El espectro de absorcin de la clorofila fue determinado a partir de hojas de espinaca, las cuales se trabajaron de la siguiente manera: 1. 50 gramos de hojas fueron finamente cortados y maceradas en un mortero, hasta la obtencin de una pasta. 2. Posteriormente se adicionaron 50 ml de acetona y la mezcla fue transferida a un tubo de propileno, el cual se cubri con papel aluminio para evitar la exposicin a la luz, y por ende la descomposicin de la clorofila. 3. Se agit la mezcla durante dos minutos, para extraer la mayor parte de la clorofila. 4. La mezcla fue centrifugada a 12C a 3000 rpm (revoluciones por minuto) durante 15 minutos. 5. El sobrenadante fue transferido a otro tubo, el cual fue cubierto y sellado rpidamente con papel aluminio, para proteger la muestra de la exposicin a la luz y evitar la evaporacin del disolvente. 6. La absorcin de la clorofilas espectrofotmetro Milton Roy Spectronic 20D. a, fueron determinadas en un

7. El extracto fue colocado en 30 diferentes cubetas (tubos de vidrio especiales para el espectrofotmetro), las cuales fueron cubiertas y selladas con papel aluminio. 8. Las muestras fueron ledas en un rango de 400 a 700 nm, variando la longitud en 10 unidades, cambiando la cubeta en cada medida y utilizando como blanco acetona. 9. Es importante mencionar que cada vez que se variaba la longitud de onda, el aparato era calibrado a cero de absorbencia, utilizando el blanco. 10. Los valores de absorbencia obtenidos se muestran en la tabla 1.

TABLA 1. ABSORBANCIAS DE CLOROFILA DIFERENTES LONGITUDES DE ONDA Longitud de onda (nm) 400 410 420 430 440 450 460 470 480 490 500 510 520 540 550 560 570 580 590 600 610 620 630 640 650 660 670 680 690 700

DE

ESPINACA

Absorbancia 0.72 0.75 0.85 0.91 0.86 0.65 0.6 0.55 0.38 0.27 0.11 0.05 0.04 0.04 0.04 0.05 0.07 0.09 0.11 0.11 0.12 0.13 0.15 0.16 0.22 0.32 0.28 0.13 0.04 0.01

.- A qu longitud de onda corresponde? R=corresponde a 430nm con una absorbancia de 0.91

.- De acuerdo a la longitud de onda, que color del espectro absorbe mejor?

R=creo que es el color violeta ya que se encuentra dentro de un rando de 380 a 450

3.-Interpreten qu importancia tiene la obtencin de espectro absorcin de la clorofila dentro de tu preparacin acadmica.

de

la clorofila es importante en diferentes aspectos relacionados con el equilibrio del medio ambiente, y por consiguiente de gran importancia su estudio en nuestra preparacin acadmica, ya que, la clorofila es importante en la planta pues sin ella no se lleva a cabo la fotosntesis, , existen tres tipos de clorofila, pero lo ms importante no es eso, sino que estas se utilizan para la sntesis de glucosa a partir de CO2 y tambin H2O adems da como resultado la liberacin de O2, es importante para las clulas vegetales porque son auttrofas, que fabrican su propio alimento, es decir, si no existiera la clorofila tampoco existieran las plantas, bueno pasando a la importancia en el medio ambiente y por consiguiente en nuestra licenciatura, es porque las plantas constituyen el primer nivel trfico, el primer nivel de la cadena energtica de los ecosistemas, son los productores, a partir de ellos se alimentan otros animales y de estos otros animales, quiere decir, que son la base de la cadena alimenticia la bisfera es el conjunto de biomas, los biomas conjunto de ecosistemas, aqu est la relacin sino existe clorofila, no existen productores, (plantas), sino existen plantas, no hay transferencia energtica en los ecosistemas y por lo tanto no habra bisfera. La fotosntesis es lograda gracias a la clorofila, este pigmento verde se encuentra en las plantas y puede considerrsele como un complejo sistema captador de luz son pequeos sistemas convertidores de energa! Todos

dependemos de ellos, Por qu? La fotosntesis tiene 4 etapas: absorcin de luz; transporte de electrones que conducen a la formacin de O2, a la reduccin de NADP a NADPH y a la generacin de fuerza portnmotriz; sntesis de ATP y conversin de CO2 en carbohidratos (que se suele llamar fijacin del carbono). Existen muchsimos organismos que dependen del oxgeno producido por este proceso, as como todo el ciclo de la vida en la Tierra depende de la fijacin del carbono, pues aunque algunos organismos no se alimenten de plantas, se alimentan de de otros que s lo hacen.

REFERENCIAS .Clorofila y pigmentos de absorcin, en lnea disponible en:

http://almez.pntic.mec.es/~jrem0000/dpbg/Fotosintesis/clorofila_y_pigment os_accesorios.html