Las Enzimas en Accin (Prctica No.

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Osmar Ivn Esparza Pin. Biologa General. 27 de Marzo de 2007.

Introduccin
Las enzimas son catalizadores biolgicos de naturaleza protenica. Los catalizadores son sustancias que aceleran la velocidad con que se efectan las reacciones qumicas. Todas las enzimas poseen una temperatura ptima en la que actan al 100% de su capacidad; en el caso de nuestras enzimas, esa temperatura es la corporal normal (36.5 37C). Con un cierto aumento de la temperatura del medio ocurre una aceleracin de la reaccin a consecuencia del aumento de la energa cintica de las molculas del sustrato. Pero, al mismo tiempo, incluso un aumento pequeo de la temperatura por encima de la ptima, debilita a los enlaces puente de hidrgeno que mantienen la conformacin de la molcula enzimtica, necesaria para su actividad cataltica. Este aumento de temperatura provoca, gradualmente, la desnaturalizacin de la enzima, que se acelera bruscamente a temperaturas que sobrepasan los 45- 50C. El nombre de enzima, que fue propuesto en 1867 por el fisilogo alemn Wilhelm Khne (1837-1900), deriva de la frase griega en zym, que significa 'en fermento'. En la actualidad los tipos de enzimas identificados son ms de 2.000. Cada tipo de enzima cataliza un tipo especfico de reaccin qumica. Por ello, se necesitan centenares de tipos de enzimas diferentes en el metabolismo de cualquier clase de clulas. La mayor parte de las enzimas catalizan la transferencia de electrones, tomos o grupos funcionales. La clasificacin de las enzimas se realiza de acuerdo con el tipo de reaccin de transferencia, el grupo dador y el grupo aceptor, y se reconocen 6 grupos principales: oxidorreductasas (transferencia de electrones), transferasas (transferencia de grupos), hidrolasas (reacciones de hidrlisis o transferencia de grupos funcionales al agua), liasas (adicin de grupos a dobles enlaces), isomerasas (transferencia de grupos en el interior de la molcula para originar formar isomricas) y ligasas (forman diversos enlaces acoplados a la ruptura de ATP). Algunas enzimas necesitan para su actividad un componente qumico adicional llamado cofactor, que puede ser inorgnico (diversos cationes metlicos) o molculas orgnicas complejas llamadas coenzimas. El conjunto de la protena activa junto con su coenzima se denomina holoenzima. Las enzimas se denominan aadiendo asa al nombre del sustrato con el cual reaccionan. La enzima que controla la descomposicin de la urea recibe el nombre de ureasa; aqullas que controlan la hidrlisis de protenas se denominan proteasas. Algunas enzimas como las proteasas tripsina y pepsina, conservan los nombres utilizados antes de que se adoptara esta nomenclatura. Como propuso el qumico sueco Jns Jakob Berzelius en 1823, las enzimas son catalizadores tpicos: son capaces de acelerar la velocidad de reaccin sin ser consumidas en el proceso.

Algunas enzimas, como la pepsina y la tripsina, que intervienen en la hidrlisis de muchos tipos de protenas, controlan muchas reacciones diferentes, mientras que otras como la ureasa, son muy especficas y slo pueden acelerar una reaccin. Otras liberan energa para la contraccin cardiaca y la expansin y contraccin de los pulmones. Muchas facilitan la conversin de azcar y alimentos en distintas sustancias que el organismo precisa para la construccin de tejidos, la reposicin de clulas sanguneas y la liberacin de energa qumica para mover los msculos. La especificidad entre el sustrato y la enzima se ha concebido como la relacin de una llave y su cerradura. La molcula del sustrato constituye la llave y la protena constituye la cerradura; en la superficie de la protena existe una zona especfica, denominada sitio activo o cataltico, a la cual se une la molcula del sustrato para experimentar la transformacin cataltica. Las enzimas son muy eficaces. Por ejemplo, unos 30 g de pepsina cristalina pura son capaces de digerir casi dos toneladas mtricas de clara de huevo en pocas horas. La cintica de las reacciones enzimticas difiere de las reacciones inorgnicas simples. Cada enzima es especfica de forma selectiva para la sustancia sobre la que causa la reaccin, y es ms eficaz a una temperatura determinada. Aunque un aumento de la temperatura puede acelerar una reaccin, las enzimas son inestables cuando se calientan. La actividad cataltica de una enzima est determinada sobre todo por su secuencia de aminocidos y por la estructura terciaria, es decir, la estructura de plegamiento tridimensional de la macromolcula. La fermentacin alcohlica y otros procesos industriales importantes dependen de la accin de enzimas, sintetizadas por las levaduras y bacterias empleadas en el proceso de produccin. Algunas enzimas se utilizan con fines mdicos. En ocasiones son tiles en el tratamiento de zonas de inflamacin local; la tripsina se emplea para eliminar sustancias extraas y tejido muerto de las heridas y quemaduras. Sin duda la fermentacin alcohlica es la reaccin enzimtica ms antigua conocida. Se crea que este fenmeno y otros similares eran reacciones espontneas hasta que en 1857 el qumico francs Louis Pasteur comprob que la fermentacin slo ocurre en presencia de clulas vivas. Sin embargo, el qumico alemn Eduard Buchner descubri en 1897 que un extracto de levadura libre de clulas puede producir fermentacin alcohlica. La antigua incgnita fue entonces resuelta; la levadura produce la enzima y sta lleva a cabo la fermentacin. Ya en 1783 el bilogo italiano Lazzaro Spallanzani haba observado que la carne poda ser digerida por jugos gstricos extrados de halcones. ste fue el primer experimento en el que se llev a cabo una reaccin vital fuera de los organismos vivos. Tras el descubrimiento de Buchner, los cientficos asumieron que, en general, las fermentaciones y las reacciones vitales eran producidas por enzimas. Sin embargo, todos los intentos de aislar e identificar su

naturaleza qumica fracasaron. Ms tarde, en 1926, el bioqumico estadounidense James B. Sumner consigui aislar y cristalizar la ureasa. Cuatro aos despus su colega John Howard Northrop aisl y cristaliz la pepsina y la tripsina. Northrop demostr tambin la naturaleza proteica de las enzimas. En los ltimos aos, la investigacin sobre la qumica enzimtica ha permitido aclarar algunas de las funciones vitales ms bsicas. La ribonucleasa, una enzima descubierta en 1938 por el bacterilogo estadounidense Ren Jules Dubos y aislada en 1946 por el qumico estadounidense Moses Kunitz, fue sintetizada por cientficos estadounidenses en 1969. La sntesis consiste en unir 124 molculas de aminocidos en una secuencia muy especfica para formar la macromolcula. Dicha sntesis permiti identificar aquellas reas de la molcula que son responsables de sus funciones qumicas, e hizo posible crear enzimas especializadas con propiedades de las que carecen las sustancias naturales. Este potencial se ha visto ampliado durante los ltimos aos por las tcnicas de ingeniera gentica que han hecho posible la produccin de algunas enzimas en grandes cantidades. El uso mdico de las enzimas est ilustrado por la investigacin sobre la L-asparaginasa, que se piensa es una herramienta importante para el tratamiento de la leucemia; se ha descubierto que las dextrinazas pueden prevenir la cada de los dientes, y que las alteraciones enzimticas estn ligadas a enfermedades como la fenilcetonuria, el albinismo, la diabetes, la anemia y otros trastornos sanguneos.

Objetivo: Se investigar la inactivacin por efecto del calor de la enzima amilasa salival
(pitalina).

Material: Gradilla, 2 tubos de ensayo, vaso de precipitados de 50 ml., mechero Bunsen, bao
mara a 37C, saliva diluida (se enjuaga la boca con 20 ml. de agua destilada y se deposita en un vaso de precipitados), sol. de almidn 1%, lugol.

Metodologa.
1. Numera dos tubos de ensayo, vierte en cada uno 3 ml. de saliva diluida (amilasa salival). 2. Hierve el tubo 2 por dos minutos. 3. En cada uno de los tubos de ensayo, vierte 4 ml. de solucin de almidn. Coloca ambos tubos en bao mara a 37C durante 10 minutos. 4. Al transcurrir el lapso mencionado, aade en cada tubo una gota de lugol.

Resultados

Tubo 1

Enzima Amilasa desnaturalizada Amilasa Activa

T Incubacin 2 min. 36C

Sustrato Almidn

Reactivo Lugol

Coloracin Azul

10 min. 36C

Almidn

Lugol

Rojo

Conclusiones
Vimos con claridad como un aumento de temperatura destruye las enzimas en un ambiente controlado, lo que nos da a entender que un ligero cambio en la temperatura corporal puede significar la destruccin de enzimas por lo que el organismo puede llegar a su muerte ya que no se puede vivir sin enzimas.

Observaciones
La velocidad con la que pueden ser destruidas unas pocas enzimas de nuestra saliva fue de unos dos minutos. Lo cual da a entender que una fiebre de mas de 39C puede llegar a ser mortal si no se trata de inmediato.

Cuestionario
1. Para qu se lleva a ebullicin el contenido del tubo 1 de la presente prctica? Para desnaturalizar la saliva de toda la posible amilasa que pueda contener. 2. Enlista las enzimas digestivas que se encuentran en: boca, estmago e intestino delgado:

Amilasa, Ptialina, Pepsina, Lipasa, Lactasa, Fosfatasa Alcalina, Tripsina, Enteropeptidasa, Aminopeptidasa. 3. Puedes explicar el por qu la fiebre puede ser muy daina para los seres humanos? Porque pueden llegar a eliminar nuestras enzimas ya que deben estar a una temperatura normal pero el funcionamiento normal, de lo contrario el metabolismo se descontrola y el humano no puede vivir sin enzimas. 4. Anota tus conclusiones acerca de los resultados de esta investigacin. Son demasiadas las enzimas que nuestro cuerpo tiene que son indispensables para vivir, sin ellas no existiramos.

Bibliografa
Parte de la introduccin y las respuestas al cuestionario fueron sacadas de la Microsoft Encarta 2007 Biblioteca Premium.