LABORATRIO SO LUIZ

Procedimento Operacional Padro DOSAGEM DO COLESTEROL

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COLESTEROL
1. NOME E SINONMIAS Colesterol Colesterol Total CT Col 2. FUNDAMENTO Os steres do colesterol so hidrolisados pela colesterol esterase (CHE) formando colesterol livre que aps oxidao pela colesterol oxidase (CHOD) forma perxido de hidrognio. Este, reagindo com o fenol e 4-aminoantipirina, atravs de copulao oxidativa catalisada pela peroxidase (POD), produz uma quinonimina de cor vermelha. A absorbncia do complexo formado, medida em 500 nm, diretamente proporcional concentrao de colesterol da amostra. CHE steres do colesterol Colesterol cidos graxos

CHOD Colesterol O Colest - 4 - en - ona H O 2 2 2

POD 2H 2O2 Fenol 4 Aminoantip irina 4H 2O quinonei min a

3. APLICAO E SIGNIFICADO CLNICO A dosagem do colesterol no sangue, juntamente com a de triglicrides e de colesterol HDL, empregada principalmente na avaliao de risco de doena arterial coronariana e no monitoramento de pacientes com hipotireiodismo, diabticos e obesos. O colesterol o principal esterol do organismo, estando presente em todas as clulas como um componente estrutural das membranas e das lipoprotenas (HDL, VLDL e principalmente, LDL). tambm o precursor na formao dos hormnios esteroides pelas gnadas e crtex adrenal. Cerca de 70 a 75% do colesterol plasmtico encontra-se na forma de ester e 25 a 30% existe como colesterol livre. Alm do colesterol absorvido a cada dia pelo tubo gastrintestinal, que denominado colesterol exgeno, grande quantidade, designada como colesterol endgeno, formada nas clulas corporais. A aterosclerose caracteriza-se pelo acmulo de lpides dentro e ao redor das clulas na ntima das artrias e est associada com a proliferao celular e fibrosa provocando o estreitamento do lmen do vaso. O desenvolvimento da aterosclerose est ativa em todos os indivduos e permanece sem qualquer manifestao por dcadas. Subitamente pode-se manifestar por dor torcica, infarto agudo do miocrdio ou morte sbita. Estudos populacionais longitudinais como os de Tecumset, Albany, Framinghan, Evans, Chicago, Oslo entre outros, e tambm dados epidemiolgicos e estudos experimentais em animais, demonstraram uma correo positiva entre os nveis do colesterol, mais precisamente do colesterol LDL e o risco de doena arterial coronariana (DAC). Ao mesmo tempo, foi evidenciado que os nveis de colesterol HDL, so inversamente proporcionais ao risco de DAC. Valores aumentados de colesterol so encontrados na nefrose, hipotireoidismo, doenas colestticas do fgado e nas hiperlipoproteinemias dos tipos Iia, Iib e III. Nveis diminudos so encontrados no hipertireoidismo, doenas consuntivas e desnutrio crnica. O nvel de colesterol srico, juntamente com a hipertenso e o fumo, constituem fatores de risco de aterosclerose e doena arterial coronariana. 4. AMOSTRA Preparo do Paciente: A amostra de sangue deve ser colhida aps um jejum de 12 horas para evitar a interferncia da lipemia ps-prandial que geralmente est presente em amostras obtidas sem jejum. Amostras utilizadas: Soro. Estabilidade e armazenamento da amostra: O analito estvel por 7 dias a 2-8 C. Volume mnimo utilizado para anlise: 1 ml Critrios para rejeio da amostra: No utilizar amostras fortemente hemolisadas. Tratamento e pr-tratamento da amostra: Centrifugar a amostra colhida em tubo seco a 3.000 rpm por 5 minutos. 5. MATERIAL REQUERIDO E EQUIPAMENTOS

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Centrfuga; Tubos e Micropipetas; Banho - Maria; Mltiplo Marcador de Tempo; Bioplus 200F.

6. REAGENTE UTILIZADO COLESTEROL PP - GOLD ANALISA DIAGNSTICA LTDA Componentes do kit: Padro 200 mg/dL e Reagente de Cor. Estabilidade: Os reagentes so estveis at o vencimento da data de validade impressa no rtulo do produto e na caixa quando conservados em temperatura entre 2-8C bem vedados. 7. PROCEDIMENTO Procedimento Manual 1- Identificar os tubos de ensaio como "Branco" (C/B), "Padro" (C/P) e "Teste" (C/Nmero da amostra do paciente, EX: C/1) 2- Proceder a pipetagem conforme tabela abaixo: Tubos Branco Padro Teste Reagente de Cor 1000 L 1000 L 1000 L Padro (1) 10 L Amostra 10 L 3- Misturar bem e incubar os tubos por 10 minutos em banho-maria a 37C. 4- Selecionar no aparelho Bioplus 200F a programao 10 referente ao Colesterol. 5- Calibrar o aparelho Bioplus 200F com gua destilada ou deionizada. 6- Fazer a leitura do tubo Branco. 7- Fazer a leitura do tubo Padro. 8- Ler as concentraes de Colesterol dos tubos Teste. 9- Passar o resultado para a ficha de resultados do paciente. Obs: A cor estvel por 60 minutos. 8. CLCULOS DO RESULTADO O equipamento j emite a concentrao na unidade programada mg/dL. 9. CONTROLE DA QUALIDADE Controle Interno Calibrao peridica de micropipetas e equipamentos utilizados, controle de temperatura da geladeira para armazenamento dos kits. Observar a validade dos kits. Observar os sinais de deteriorao dos reagentes como presena de partculas e turbidez, no utilizar o reagente de cor quando sua absorbncia medida contra gua for igual ou maior que 0,300. Utilizao de soro controle patolgico nas anlises realizadas no primeiro dia til de cada ms. 10. VALORES DE REFERNCIA Os valores de referncia so determinadas a partir de dados epidemiolgicos, calculados estatisticamente, que relacionam os nveis do colesterol com a prevalncia de doena arterial coronariana (DAC). 1-Adultos
Colesterol Total Valor desejvel: <200 mg/dL Valor limtrofe: 200 a 239 mg/dL Valor Elevado: 240 mg/dL ---------------Colesterol HDL Valor desejvel: 60 mg/dL Valor baixo: <40 mg/dL -----------------------------------Colesterol LDL Valor desejvel: < 130 mg/dL Valor limtrofe: 130 a 159 mg/dL Valor elevado: 160 a 189 mg/dL Valor muito elevado: 190 mg/dL

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2-Crianas e adolescentes
Colesterol Total Valor desejvel: < 170 mg/dL Valor limtrofe: 170 a 199 mg/dL Valor elevado: 200 mg/dL Colesterol HDL Valor desejvel: > 40 mg/dL Valor baixo: <35mg/dL Colesterol LDL Valor desejvel: < 110 mg/dL Valor limtrofe: 100 a 129 mg/dL Valor elevado: 130 mg/dL

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11. LINEARIDADE A reao linear at 500 mg/dL. Para valor acima de 500 mg/dL, diluir a amostra com NaCl 0,9%, realizar nova dosagem e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluio empregado. 12. INTERFERENTES Influncias Pr-Analticas Nveis elevados de ascorbato (vitamina C) produzem interferncias negativas por competio com o cromgeno na reao da peroxidase. Se houver suspeita da presena de cido ascrbico, deixar o soro em repouso durante 90 minutos antes de iniciar a dosagem para no obter resultados falsamente diminudos. Interferncias Analticas. O fluoreto de sdio atua como inibidor da uricase. Logo, a utilizao de plasma fluoretado leva obteno de resultados falsamente diminudos. Valores de bilirrubina at 5 mg/dL e hemoglobina at 100 mg/dL no produzem interferncias significativas. Amostras turvas levam obteno de resultados falsamente elevados. 13. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 1- Alain CA, Poon LS, Cahn CSG, Richmond W, Fu PC. Clin Chem 1974;20:470. a 2- Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fundamento de Qumica Clnica, 4 Ed - Guanabara Koogan; 1998. 3- Fredriickson DS, Levy RJ, Lee RS. New Engl J Med 1967; 276:24, 94, 148, 215, 276. 4- Good NE, Winger GD, Winter W, Connoly TN, Izawa S, Singh RMM. Biochemistry 1966;5:467. 5- Inmetro - Boas Prticas de Laboratrio Clnico e Listas de Verificao para Avaliao, Qualimark Editora, Rio de Janeiro, 1997. 6- Meiattini F, et al. Clin Chem 1978; 24:2161-2165. 7- Rifai N, Warnick GR, Dominiczak MH. Handbook of lipoprotein testing. AACC Press, Washington, 1997: 75-97. 8- Svensson L, et al. Scand J Clin Lab Invest 1982; 42:99-105. 9- Westgard JO, Barry PL, Hunt MR. Clin. Chem. 1981; 27: 493-501. 10- COLESTEROL-PP, Instrues de Uso, Gold Analisa Diagnstica. Nome Samuel Martins Delgado Neto Samuel Martins Delgado Neto Samuel Martins Delgado Neto Assinatura Data 24/03/2013 24/03/2013 24/03/2013 ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___

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