UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA

CAP 03 GENTICA MOLECULAR

(PARTE I)

Qual a constituio qumica e estrutura do gene material gentico?

Como ele funciona para produzir os fentipos que ns observamos?

Por que existem tantas diferenas entre os indivduos?

Por que a maioria desses conhecimentos foi obtido mediante pesquisas realizadas com bactrias e vrus?

- Ciclo reprodutivo muito curto; - Fcil manuseio em laboratrio de um grande nmero de descendentes;

- Menor complexidade e organizao do material

gentico. Genoma da E. coli
1350x Genoma humano

Natureza Qumica do Material Gentico 1 Questo: Qual a substncia que constitui o material gentico?
Substncia suficientemente complexa para ser capaz de codificar um grande nmero de informaes

Qual o local na clula que o material gentico se encontra?

Cromossomos Balbiani (1876)

Substncias suficientemente complexas:

DNA, RNA e as protenas

1912 DNA ocorria em quantidade mais constante entre as clulas do corpo de um indivduo

1928 Experimento de Griffith (Britnico) Streptococcus pneumoniae

1944 Experimento Avery, Mac Leod e McCarty

Bactrias R + polissacardeos de bactrias S Bactrias R + DNA de bactrias S Bactrias R + RNA de bactrias S

Colnias rugosas (R) Colnias Lisas (S) Colnias rugosas (R) Colnias rugosas (R) Colnias rugosas (R)

Bactrias R + protenas de bactrias S

DNase

Bactrias R + bactrias S mortas pelo calor

RNase

Colnias Lisas (S) Colnias Lisas (S)

Protease

32P

35S

Fago T2

E. coli Agitador

Agitador
Capa protica radioativa

1952 Experimento de Hershey-Chase

Capa protica no radioativa

Bactria infectada Bactria infectada radioativa no radioativa

Fagos filhos radioativa

Fagos filhos no radioativa

Experimento de Fraenckel-Conrat & Singer

TMV Protena

Degradao

TMV RNA

TMV HR Protena Degradao Vrus hbrido reconstitudo

no infectada vs infectada

HR

HR RNA

A prognie de vrus refletiu a fonte de RNA

TMV Prognie

TMV Leses

Folha infectada

Folha de fumo infectada

Composio Qumica e Estrutura dos cidos Nuclicos

Constituintes do cido Desoxirribonuclico (DNA) 1 - Desoxirribose

3 Bases Nitrogenadas Purinas

Pirimidinas

2 Grupo Fosfato

Adenina (A)

Timina (T)

Guanina (G)

Citosina (C)

Montagem do Nucleotdeo

Base

Fosfato

Base

Acar

Acar

Nucleosdeo

Nucleotdeo

NUCLEOTDEOS
cido Desoxiadenlico cido Desoxiguanlico

Adenina

Guanina

cido Desoxicitidlico

cido Desoxitimidlico

Citosina

Timina

ESTRUTURA MOLECULAR DO DNA

Watson e Crick (1953)

JAMES WATSON

FRANCIS CRICK

Erwin Chargaff Composio do DNA de vrios organismos

Porcentagem de Base no DNA Organismo A T G C Razo A:T G:C

Staphylococcus afermentams
Escherichia coli Yeast Caenorhabditis elegans Arabadopsis thaliana Drosophila melanogaster Honeybee Mus musculus Human

12,8
26,0 31,3 31,2 29,1 27,3 34,4 29,2 30,7

12,9
23,9 32,9 29,1 29,7 27,6 33,0 29,4 31,2

36,9
24,9 18,7 19,3 20,5 22,5 16,2 21,7 19,3

37,5
25,2 17,1 20,5 20,7 22,5 16,4 19,7 18,8

0,99
1,09 0,95 1,07 0,98 0,99 1,04 0,99 0,98

0,99
0,99 1,09 0,96 0,99 1,00 0,99 1,10 1,03

Erwin Chargaff

A quantidade de certas bases sempre ocorrida na proporo de 1 : 1, da seguinte forma: Adenina Timina Guanina Citosina

Difrao de Raios X do DNA

PIRIMIDINA + PIRIMIDINA:
DNA MUITO FINO

PURINA + PURINA :
DNA MUITO GROSSO

PURINA + PIRIMIDINA : ESPESSURA DO DNA COMPATVEL COM DIFRAO DE RAIOS X

ESTRUTURA MOLECULAR DO DNA Proposta por Watson e Crick (1953)

A molcula de DNA constituda por duas fitas enroladas para a direita, formando um hlice dupla

1 = 1 x 10-10m
20

Acar Fosfato

Par de Bases 34

3,4 20

Pareamento

Nucleotdeo

Ligaes fosfodister

Polaridade oposta das cadeias de acar-fosfato

Fitas antiparalelas

3,4

3 Pontes de H

5 2 pontes de H

Estabilidade da molcula pareamento exclusivo Fitas complementares A + T <> C + G 3 pontes de H

3,4

FITAS ANTIPARALELAS E COMPLEMENTARES

5
3

AG CATT GAT
T C G TAA C TA

3
5

SEQUNCIA DE BASES NITROGENADAS CODIFICAR UM GRANDE N DE INFORMAES GENTICAS

Nmero de pares de nucleotdeos por clula somtica de diferentes organismos

Organismo Homem Bovinos N pares de nucleotdeos 5,81 x 109 5,08 x 109

Aves
Carpa Lrio Milho Fumo

2,36 x 109
2,90 x 109 3,60 x 1011 1,36 x 1010 2,18 x 109

Drosophila melanogaster
Neurospora Carvo do milho Ustilago maydis Escherichia coli Bacterifago T2

3,40 x 108
8,60 x 107 3,8 x 108 4,30 x 106 2,00 x 105

COMPUTADOR

VERSUS

SISTEMA BIOLGICO

Sistema binrio 0e1 2n

Sistema quaternrio 4 bases nitrogenadas 4n

O sistema biolgico processa o quadrado das

informaes do computador 4n = (2n) 2

Constituintes do RNA

1 - Ribose

3 Bases Nitrogenadas Purinas

Pirimidinas

2 Grupo Fosfato

Adenina (A)

Uracila (U)

Guanina (G)

Citosina (C)

Montagem do Nucleotdeo

Tipos de RNA
mRNA RNA mensageiro Tamanho muito varivel: algumas centenas at milhares de nucleotdeos Muito instvel, isto , se degrada rapidamente rRNA RNA ribossmico Alto peso molecular, isto , molculas muito grandes Muito estvel, isto , no se degrada com facilidade

tRNA RNA transportador

Estrutura secundria

Estrutura terciria

Stio de ligao do aminocido TC loop Ligao do aminocido

DHU loop Ala anticdon

Ala anticdon

anticdon