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BIOETANOL”
Por:
Rómulo Aycachi Inga
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ÍNDICE
3
1. INTRODUCCIÓN:....................................................................................................................8
2. JUSTIFICACIÓN E IMPORTANCIA:.................................................................................10
3. GENERALIDADES SOBRE EL BIOETANOL:...................................................................11
3.1 Qué es el Bioetanol................................................................................................ .......................11
3.2 Características del Bioetanol....................................................................................... ................11
3.3 Usos del Bioetanol.................................................................................................. ......................12
3.4 El Bioetanol como Biocombustible:....................................................................... .....................12
3.4.1 ¿Qué es un Biocombustible?.....................................................................................................................12
3.4.2 ¿Qué tipos de Biocombustibles existen?..................................................................................................13
3.4.3 Historia e importancia...............................................................................................................................14
3.4.4 Bioetanol como combustible vehicular.....................................................................................................15
3.4.4.1 Bioetanol como combustible único:..................................................................................................16
3.4.4.2 Mezcla directa de Bioetanol y gasolina:...........................................................................................16
3.4.4.3 El Bioetanol como aditivo de las gasolinas: ETBE..........................................................................17
3.4.4.4 Como aditivo que mejora la ignición de motores diesel:..................................................................18
3.4.5 Ventajas y desventajas...............................................................................................................................19
3.5 Barreras en el uso del Bioetanol:..................................................................... ...........................20
3.6 El Bioetanol y su impacto ambiental........................................................................................... 21
3.7 El Perú como productor de Biocombustibles:.................................................................... ........22
4. PRODUCCIÓN DE BIOETANOL:........................................................................................25
4.1 Proceso General:...................................................................................................... ....................25
4.1.1 Materias primas utilizadas........................................................................................................................26
4.1.1.1 Jugos azucarados:..............................................................................................................................28
4.1.1.2 Melazas “A”:.....................................................................................................................................30
4.1.1.3 Melazas “C”:.....................................................................................................................................30
4.1.1.4 Cereales:............................................................................................................................................32
4.1.1.5 Tubérculos:........................................................................................................................................34
4.1.1.6 Sustratos celulósicos:........................................................................................................................35
4.1.2 Microorganismos utilizados en la producción de Bioetanol.....................................................................37
4.1.2.1 Zymomonas mobilis..........................................................................................................................37
4.1.2.1.1 Historia y ecología:...................................................................................................................37
4.1.2.1.2 Aislamiento, identificación y cultivo:.......................................................................................38
4.1.2.1.3 Metabolismo:.............................................................................................................................39
4.1.2.1.4 Influencia del oxígeno e inhibición por el etanol:.....................................................................40
4.1.2.1.5 Aplicaciones industriales:..........................................................................................................41
4.1.2.2 Saccharomyces cerevisiae.................................................................................................................41
4.1.2.2.1 Características generales: .........................................................................................................42
4.1.2.2.2 Reproducción:...........................................................................................................................44
4.1.2.2.3 Metabolismo:.............................................................................................................................45
4.1.2.2.4 Requerimientos nutricionales....................................................................................................45
4.1.2.2.5 Requerimientos físico – químicos:............................................................................................46
4.1.2.2.6 Aplicaciones industriales:..........................................................................................................46
4.1.3 Bioquímica en la producción de Bioetanol...............................................................................................47
4.1.3.1 Generalidades:...................................................................................................................................47
4.1.3.2 Rutas bioquímicas utilizadas:............................................................................................................48
4.1.3.3 Balance energético en la fermentación alcohólica:...........................................................................51
4.1.3.4 Efecto Pasteur y efecto Crabtree:......................................................................................................53
4.2 Procesos de Producción Industrial de Bioetanol:...................................................................... .54
4.2.1 Bioetanol a partir de Maíz:.......................................................................................................................57
4.2.1.1 Acondicionamiento de la materia prima:..........................................................................................57
4.2.1.2 Conversión enzimática del almidón en azúcar:.................................................................................59
4.2.1.3 Fermentación:....................................................................................................................................60
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DEDICATORIA:
¡Hoy tengo un sueño! Sueño que algún día los valles serán cumbres, y
las colinas y montañas serán llanos, los sitios más escarpados serán
nivelados y los torcidos serán enderezados, y la gloria de Dios será
revelada, y se unirá todo el género humano.
(Martin Luther King, 1963)
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AGRADECIMIENTOS:
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1. INTRODUCCIÓN:
De un tiempo a esta parte, el agotamiento progresivo de la energía fósil (llámese
petróleo y sus derivados, gas natural y carbón mineral), ha generado una necesidad en
continuo aumento de buscar nuevas fuentes de energía. Esto se debe en gran medida
a que la población mundial va creciendo año a año, y por tanto, también hay un
crecimiento per capita en la demanda energética. También, el crecimiento explosivo en
la necesidad de energía por parte de las industrias (por un incremento dramático de la
industrialización en muchos países en desarrollo) y el parque automotor mundial, han
puesto en apuros a las reservas mundiales de combustibles fósiles, agravando la
llamada crisis energética, ya que éstas dependen casi en su totalidad de las limitadas
reservas naturales de éstos combustibles, sobre todo el petróleo, lo que ha generado
en los últimos años un aumento exagerado en su precio por galón (de $ 1.80/barril en
1970 a $ 139,12/barril el 6 de junio de 2008) y por ende una peligrosa dependencia
económica hacia los países productores de éstos (OPEP) (Smith, 2006; Camps et. al.
2002; Bu’lock y Kristiansen, 1991). Otro problema que acarrea el uso de los
combustibles fósiles es la formación de los llamados “gases de efecto invernadero”, en
estos casos el CO y el CO2 generados por la combustión propia de los motores de los
automóviles y de las industrias que las utilizan. Esto ha generado que en la
Conferencia de Kyoto (celebrada en 1997 y que entró en vigor el 16 de febrero de
2005) se llegue a un acuerdo para reducir las emisiones de estos gases (sobre todo del
CO2) en el periodo 2008 – 2012 en un 5,2% respecto a los niveles de 1990 (García y
García, 2006; Camps et. al. 2002; Martínez, 2008; Núñez y García, 2006).
Las potencias mundiales han iniciado desde hace varios años la búsqueda de
nuevas fuentes de energía (energía hídrica, energía eólica, energía solar y geotérmica,
el estudio de las celdas de energía a base de hidrógeno, la energía nuclear), pero aún
no han podido encontrar un sustituto ideal al petróleo y sus derivados (Camps et. al.
2002; García y García, 2006). Actualmente hay una creciente valoración por los
sistemas de energía biológica, por ser, sobre todo, desarrollados de fuentes renovables
y limpias para el ambiente en general, entre ellos destacan en gran medida los
llamados Biocombustibles (Martínez, 2008; Núñez y García, 2006; Sánchez y Castro,
1997).
Los “Biocombustibles” (también conocidos como Biocarburantes), se presentan
como un gran candidato para solucionar el problema energético ya que se generan a
partir de fuentes biológicas y renovables, lo que le da un gran potencial de desarrollo
por ser una energía limpia y de obtención relativamente fácil, siendo por estos motivos
la tecnología que más se ha desarrollo en los últimos años (García y García, 2006;
Martínez, 2008). Dentro de los Biocombustibles encontramos dos tipos: el Biodiesel
(desarrollado a partir de aceites vegetales) y el Bioetanol (desarrollado a partir de la
fermentación alcohólica de azúcares). En el presente trabajo trataremos sobre los
procesos de producción de este segundo tipo de Biocombustible.
Una de las grandes ventajas que presenta el Bioetanol es que se puede utilizar
para su producción casi cualquier tipo de biomasa (residuos de bosques, de la
agricultura, domésticos e industriales), siempre y cuando sea propenso al proceso de
fermentación. Esto hace que el Bioetanol adquiera una consideración económicamente
más atractiva, ya que sus fuentes de materia prima son abundantes, renovables, y
relativamente baratas y fáciles de conseguir. Actualmente países como Brasil y EE. UU.
están apostando fuerte por la producción de este tipo de biocombustible. En el 2006
estos países produjeron juntos aproximadamente el 70% de la producción mundial de
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Bioetanol y para el 2007 EE. UU. produjo 6,498.6 millones de galones seguido por
Brasil, que produjo 5,019.2 millones (Wikipedia, 2008; Núñez y García, 2009; Camps
et. al. 2002).
Aún con todas las ventajas aparentes que presenta la producción de Bioetanol, en
estos últimos años se ha generado una polémica sobre las desventajas y problemas
que éstas pueden acarrear. Dentro de éstas, la que más se cierne sobre el futuro del
Bioetanol es la del “problema alimentario”, ya que el uso de cultivos agrícolas como el
maíz, el trigo, la cebada y otros cereales para la producción de Bioetanol ha generado
un problema alimentario en ciernes, ya que hace que estos productos escaseen y por
tanto se genere la subida de sus precios, y esto, por un efecto en cadena, hace que se
incrementen los productos generados a base de ellos (pan, cereales y otros). Un caso
similar sucede con la caña de azúcar. Todo esto ha generado una gran polémica sobre
cual sería la materia prima ideal para la producción de este “Petróleo verde”. Por
demás está decir que la materia prima a usar no debería entrar en competencia con las
fuentes de alimento de la población, ya que los que más sufrirían con la subida y la
escasez de estos alimentos básicos en post de una mayor producción de energía,
serían los más pobres. Las materias primas a utilizar deberían ser materiales de
desecho, por ejemplo los desechos industriales (melaza de caña, suero de leche) y los
residuos celulósicos y lignolíticos (bagazo, pulpa, cortezas, paja, virutas y otros)
provenientes de los desechos agrícolas y forestales respectivamente y hasta se podría
aprovechar en último caso los residuos sólidos urbanos, siempre y cuando sean
propensos a la fermentación (Núñez y García, 2006; Ochoa y Miranda, 2006;
Wikipedia, 2008).
Como se ve, muchas son las perspectivas y oportunidades con que cuenta el
desarrollo de los Biocombustibles a nivel mundial. En el Perú, según informe de
CONVEAGRO (al 16 de septiembre del 2008), existen los mismos problemas y las
mismas expectativas planteados a nivel mundial. La costas de Lambayeque y La
Libertad son potenciales productores a gran escala de Bioetanol a base de caña de
azúcar (aprox. 40 mil Ha. disponibles), mientras que en la selva las regiones de Ucayali
y San Martín tienen a disposición aprox. 120 mil Ha. para el mismo fin, lo que auguraría
una prospera industria de producción de este Biocombustible para uso interno y hasta
para exportación.
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2. JUSTIFICACIÓN E IMPORTANCIA:
El Bioetanol, que no es otra cosa que el etanol producido de manera biológica por
la fermentación alcohólica de azúcares simples, es en la actualidad un fuerte candidato
para sustituir a los combustibles fósiles, sobre todo el petróleo. Sus claras ventajas con
respecto a los combustibles fósiles saltan a la luz: son energías limpias, renovables,
presentan una combustión más completa y con menores residuos en general, tienen
una amplia variedad de sustratos (agrícolas, lignolíticos, celulolíticos) y a la larga
generarían una gran cantidad de puestos de trabajo en el campesinado. Además, en la
actualidad es el Biocombustible con mayor producción mundial, siendo los líderes en
este rubro EE. UU. (36% de la producción mundial), seguida de cerca por Brasil (33.3%
de la producción mundial). Puede utilizarse puro (alcohol hidratado) o mezclado con
gasolina hasta en un 20% (entonces recibe el nombre de gasohol), siendo su
rendimiento igual al de la gasolina pura. Es mayor su importancia ecológica ya que
ayudaría en gran medida a disminuir las emisiones de gases de efecto invernadero
(CO y CO2) además de disminuir indirectamente las emisiones de gases que contienen
plomo y azufre al ambiente. Con todo eso el Bioetanol se proyecta como el combustible
del futuro, ya que cuenta con un favorable desarrollo en nuestro país. Existen
aproximadamente 40 mil Ha. en la costa y 120 mil Ha. en la selva que podrían ser
utilizadas en la producción de caña de azúcar, materia prima para la producción de
Bioetanol, lo cual daría al Perú, una fuente energética propia, barata y renovable, que
empujaría al progreso de nuestra nación.
El desarrollo de la tecnología de los Biocombustibles (y en este caso del Bioetanol)
busca, además de solucionar el problema energético actual, disminuir de manera
sustancial la dependencia económica que tienen la mayoría de los países hacia los
productores de petróleo (OPEP), ya que su producción a gran escala produciría de
manera interna la energía necesaria para el desarrollo tanto industrial, automotriz y de
uso social, lo cual liberaría gran parte de la economía destinada a la importación de
energía, pudiendo ser ésta utilizada para otros fines. Además, generaría nuevos
puestos de trabajo, tanto a lo largo de los centros de cultivo y las plantas de
producción. La utilización de Bioetanol también produciría un gran impacto sobre el
problema del cambio climático y el calentamiento global, ya que ésta es una fuente
energética limpia y renovable, que ayudaría a reducir la emisión de los gases de efecto
invernadero.
La sustitución del Bioetanol por la gasolina es, en la actualidad, un problema
económico antes que técnico. Para revertir esto, se busca la ayuda de la Biotecnología
para desarrollar microorganismos mejorados genéticamente que puedan utilizar una
variedad más amplia de sustratos. Esto nos ayudaría a revertir el efecto negativo que
representa en la actualidad la producción de Bioetanol a base de productos agrícolas
como el trigo, maíz, azúcar, que encarecen estas materias primas y las fuentes de
alimentos de la población. La potencial utilización de diferentes tipos de sustratos, más
baratos y más abundantes (paja, madera, hojas, virutas, papel) ayudarán en un futuro a
abaratar los costos de producción y a difundir más su uso (Coello, 2008; Salinas y
Santillana, 1992).
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3. GENERALIDADES SOBRE EL BIOETANOL:
3.1 Qué es el Bioetanol.
El Bioetanol es un alcohol elaborado a partir de fuentes biológicas y por
tanto renovables, que sigue un mecanismo bioquímico similar al que se lleva
a cabo en la producción de bebidas alcohólicas:
Hidrólisis Fermentación
Almidón Azúcar Etanol
Enzimas
C6H12O6 2CH3CH2OH(I) + 2CO2(g) + H2O(I)
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Este alcohol es miscible (mezclable) con agua y con la mayor parte de los
disolventes orgánicos. Las disoluciones alcohólicas de sustancias no volátiles
se denominan tinturas. Si la disolución es volátil recibe el nombre de
“espíritu”.
Como producto biológico, el Bioetanol se caracteriza por provenir de una
fuente biológica: biomasa, cultivos agrícolas (maíz, caña de azúcar, sorgo,
etc.), desechos forestales; a partir de la fermentación alcohólica producida
por diferentes microorganismos (Wikipedia, 2008; Parés y Juárez, 1997;
Ricardo, 2008).
3.3 Usos del Bioetanol.
El Bioetanol, además de usarse con fines culinarios (bebidas
alcohólicas), también se utiliza ampliamente en muchos sectores industriales
y en el sector farmacéutico, como principio activo o excipiente de algunos
medicamentos y cosméticos (es el caso del alcohol antiséptico 70º GL y en
la elaboración de ambientadores, perfumes, lacas, celuloides y explosivos).
Es un buen disolvente, y puede utilizarse como anticongelante (en
radiadores de automóviles). Debido a su bajo punto de congelación, ha sido
utilizado como fluido en termómetros para medir las temperaturas inferiores
al punto de congelación del mercurio (-40º C).
También es usado en la obtención de derivados químicos: la oxidación del
etanol produce etanal que a su vez se oxida a ácido etanoico. Al
deshidratarse, el etanol forma dietiléter. Otros productos derivados del etanol
son el butadieno, utilizado en la fabricación de caucho sintético, y el
cloroetano, un anestésico local.
El uso más importante dado actualmente al Bioetanol es como
Biocombustible para uso tanto industrial como doméstico. Es utilizado en la
industria automovilística mezclado con gasolina, dando lugar al alconafta,
gasohol y otras mezclas que entre otras cosas busca bajar la necesidad
hacia los derivados de petróleo. También se usa en mezclas con la gasolina
en concentraciones del 5 ó el 10%, E5 y E10 respectivamente, que no
requieren modificaciones en los motores actuales. Otra alternativa para su
uso es en forma de aditivo de la gasolina como etil-terbutil éter (ETBE)
(Ricardo, 2008; Wikipedia, 2008; García y García, 2006).
12
Biocombustible (Sánchez y Castro, 1997; Camps et. al. 2002;
Wikipedia, 2008).
13
Metiléster
Gaseosos Biogás de origen muy diverso
14
unido las políticas de mejoras medioambientales, principalmente en lo
relativo a emisiones gaseosas. El creciente interés que han generado
en los últimos años los problemas derivados del cambio climático,
producido por las emisiones de gases de “efecto invernadero”, ha
hecho que se busquen combustibles más respetuosos con el medio
ambiente. Al igual que en el caso del Biodiesel, la combustión del
Bioetanol produce el mismo CO2 que absorbió la planta durante su
crecimiento, si se exceptúa el emitido debido a la actividad energética
necesaria en el proceso de su producción, por lo que algunos autores
dicen que el balance es cero, en cuanto a las emisiones de CO2.
El Perú no ha sido ajeno a los esfuerzos tendientes a introducir el
empleo del Bioetanol como combustible. Así, Petroperú desde 1977 ha
realizado estudios al respecto. En los años ’70 diversas Tesis en
Universidades Nacionales abordaron diversos aspectos de esta
problemática. En 1985 los diarios dieron cuenta del proyecto privado
Central Neshuya S. A. para desarrollar en Pucallpa un complejo agro –
industrial energético para la producción de gasohol a partir de la caña
de azúcar. A mediados de los años ’80 diversas cooperativas
azucareras y empresas privadas evaluaron la posibilidad del empleo
de alcohol anhidro como combustible automotor. En 1985 se
contempló, a nivel oficial, la posibilidad de implantar un Programa
Nacional de Alcohol Carburante en el Perú. En 1992 una cooperativa
del norte del Perú estaba completando la instalación de una destilería
para producir alcohol etílico anhidro (Bioetanol).
Con la sola excepción de la destilería en el norte, ninguna de las
propuestas llegó a plasmarse y la caída de los precios del petróleo, a
finales de los ’80 desactivó nuevamente el interés por el alcohol
combustible (Salinas y Santillana, 1992; Sánchez y Castro, 1997;
Ochoa y Miranda, 2006; García y García, 2006).
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vehículos “Flex”. Estos automóviles disponen de un sensor que
detecta la relación etanol/gasolina y en función de la mezcla ajustan
la carburación del motor. La utilización del etanol modifica la mezcla
de aire y combustible tratando de mantener la potencia y el consumo
del automóvil en un valor óptimo (García y García, 2006).
El resurgimiento del Bioetanol como combustible se produjo en
mayo de 2003, cuando la Volkswagen montó una línea de producción
para automóviles de combustible flexible, resultando en el Gol 1.6
"Total Flex". Dos meses después la Chevrolet ofreció en el mercado el
Corsa 1.8 "Flexpower", utilizando un motor desarrollado en consorcio
con la Fiat llamado "PowerTrain". Para 2005, los fabricantes que
producen vehículos "flex" incluyen las automotrices Chevrolet, Fiat,
Ford, Peugeot, Renault ,Volkswagen, Honda, Mitsubishi, Toyota y
Citröen (Cortés, 2008).
16
Sin embargo, si se ajusta el motor aumentando la relación de
compresión, y adaptando la carburación a la nueva relación
estequiométrica, se consigue una mayor potencia y par motor
(9% con una mezcla del 20% de alcohol), mejora el rendimiento
térmico y reduce el consumo (7% con respecto a lo que se
obtendría solo con gasolina) y una combustión más perfecta, con
menor índice de carbonización y emisión de gases
contaminantes (reducción de CO y HC a medida que aumenta el
porcentaje de alcohol en la mezcla).
Brasil es el país que más ha experimentado con la mezcla de
alcohol y gasolina, aumentado su proporción hasta un valor del
25%, como se ve en la siguiente progresión:
- 1977 4.5%
- 1979 15%
- 1981 20%
- 1985 22%
- 1998 25%
- Desde el año 2002 entre el 20 y el 25%
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El ETBE presenta dos grandes ventajas sobre el Bioetanol:
su menor afinidad con el agua y una presión de vapor más
adecuada que el alcohol, además de no requerir modificaciones
en los motores actuales. Por estas razones su uso se está
imponiendo en Europa, prevaleciendo sobre la mezcla con la
gasolina. En España, por ejemplo, todo el Bioetanol dedicado a la
automoción es convertido a ETBE.
El ETBE se obtiene por reacción catalítica de isobuteno y
etanol, en una proporción de 1:0,8, resultando un compuesto con
unas cualidades superiores al MTBE y los alcoholes.
A continuación se relacionan algunas de sus ventajas:
- Baja solubilidad en el agua, menor que el MTBE.
- Menor contenido de oxígeno (15,7%) que el MTBE (18,2%),
por lo que no se necesita modificar el carburador.
- Menor RVP (Reid vapor presure) (0,27 bar) que el MTBE
(0,54 bar) y el etanol (1,22 bar).
- Reducción en la emisión de monóxido de carbono (CO) e
hidrocarburos inquemados.
- Menor poder corrosivo que los alcoholes.
- Mayor poder calorífico.
- Mayor resistencia a la “separación de fase” que el MTBE.
- Mayor rendimiento de fabricación que el MTBE, a partir de
isobuteno.
El ETBE es un buen sustituto del MTBE, que se puede producir
en las plantas donde actualmente se produce el MTBE. En
España y en Francia se está usando en mezclas de hasta un
15% del volumen de gasolina (ETBE15). Además el MTBE es un
producto nocivo y que está comenzando a prohibirse en algunas
zonas, como puede ser el caso del Estado de California, en
EE.UU. (García y García, 2006; Vásquez y Dacosta, 2006;
Salinas y Santillana, 1992).
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comercializa actualmente. ABRD (Abengoa Bioenergy R&D) está
trabajando para eliminar las principales barreras técnicas y
reguladoras para su comercialización. Estas barreras incluyen:
- Bajo punto de inflamación y volatilidad en el tanque.
- Posible inestabilidad de la micro-emulsión que evite que el
etanol y el diesel se separen a bajas temperaturas.
- Carencia de los datos de pruebas reales para obtener la
garantía del fabricante (OEM).
- Un proceso costoso y largo para conseguir su registro, de
acuerdo con las normas sobre emisiones y la salud.
Biocombustibles*
Ventajas Desventajas
- No incrementa los niveles de CO2 - El costo de producción de los
en la atmósfera, con lo que se Biocombustibles casi dobla al del
reduce el peligro del efecto de la gasolina o gasóleo (sin
invernadero. aplicar impuestos). Por ello, no son
- Proporciona una fuente de energía competitivos sin ayudas públicas.
reciclable y, por lo tanto, - Se necesitan grandes espacios de
inagotable. cultivo, dado que el total de la
- Revitalizan las economías rurales, plantación sólo se consigue un 7%
y generan empleo al favorecer la de combustible. Por ejemplo, en
puesta en marcha de un nuevo España habría que cultivar un
sector en el ámbito agrícola. tercio de todo el territorio para
- Se podrían reducir los excedentes abastecer sólo su demanda interna
agrícolas que se han registrado en de combustible.
las últimas décadas. - Potenciación de monocultivos
- Se mejora el aprovechamiento de intensivos, con el consiguiente uso
tierras con poco valor agrícola y de pesticidas y herbicidas.
que, en ocasiones, se abandonan - El combustible precisa de una
por la escasa rentabilidad de los transformación previa compleja.
cultivos tradicionales. Además, en los bioalcoholes, la
- Se mejora la competitividad al no destilación provoca, respecto a la
tener que importar fuentes de gasolina o al gasóleo, una mayor
energía tradicionales. emisión en CO2.
- Su uso se limita a un tipo de motor
de bajo rendimiento y poca
potencia.
*Adaptado de Núñez y García, 2006.
Alcoholes*
Ventajas Desventajas
- Mejores prestaciones globales. - Mayor consumo, debido al menor
- Incremento del par y valor poder calorífico.
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energético por unidad de volumen - Emisión de aldehídos, y posible
de mezcla. contenido en ácido sulfúrico.
- Combustión más completa, y - Problemas de almacenamiento,
menores residuos en general. sobre todo con el metanol.
- Aumentaría el número de puestos
de trabajo en el campo.
- Mejor distribución de la riqueza.
*Adaptado de Camps et. al. 2002 y Smith, 2006.
• Presión de vapor:
Aunque el Bioetanol tiene una relativamente baja presión de vapor,
cuando se utiliza como aditivo de la gasolina su presión de vapor
efectiva es muy alta, llegando a un valor RVP (Reid Vapor Presure) de
18 psi (124 KPa), lo cual representa una desventaja para su uso.
Cuando el Bioetanol se añade a una gasolina formulada
adecuadamente, los hidrocarburos con bajo punto de ebullición, como
butanos o incluso pentanos, deben ser reducidos para cumplir con las
especificaciones de presión de vapor.
Valores bajos de presión de vapor reducen las emisiones debidas a
la evaporación, en los procesos de llenado de los tanques y
almacenamiento del combustible. Debido a estos beneficios
ambientales es de esperar que las especificaciones de este parámetro
sigan manteniéndose bajas. En algunos casos, para cumplir
especificaciones, es necesario eliminar también el pentano. Esto
supone un encarecimiento del proceso de producción de mezclas de
etanol y gasolina, por lo que las compañías consideran impracticable
reducir más la presión de vapor (García y García, 2006).
20
3.6 El Bioetanol y su impacto ambiental.
El uso de Biocombustibles como el Bioetanol tiene impactos
ambientales negativos y positivos. Los impactos negativos hacen que,
a pesar de ser una energía renovable, no sea considerado por
muchos expertos como una energía no contaminante y, en
consecuencia, tampoco una energía verde.
Una de las causas es que, pese a que en las primeras producciones
de Biocombustibles sólo se utilizaban los restos de otras actividades
agrícolas, con su generalización y fomento en los países
desarrollados, muchos países subdesarrollados, especialmente del
sureste asiático, están destruyendo sus espacios naturales,
incluyendo selvas y bosques, para crear plantaciones para
Biocombustibles. La consecuencia de esto es justo la contraria de lo
que se desea conseguir con los Biocombustibles: los bosques y selvas
limpian más el aire de lo que lo hacen los cultivos que se ponen en su
lugar.
Algunas fuentes afirman que el balance neto de emisiones de
dióxido de carbono (CO2) por el uso de Biocombustibles es nulo
debido a que la planta, mediante fotosíntesis, captura durante su
crecimiento el CO2 que será emitido en la combustión del
Biocombustible. Sin embargo, muchas operaciones realizadas para la
producción de Biocombustibles, como el uso de maquinaria agrícola,
la fertilización o el transporte de productos y materias primas,
actualmente utilizan combustibles fósiles y, en consecuencia, el
balance neto de emisiones de CO2 es positivo.
Otras de las causas del impacto ambiental son las debidas a la
utilización de fertilizantes y agua necesarios para los cultivos; el
transporte de la biomasa; el procesado del combustible y la
distribución del Biocombustible hasta el consumidor. Varios tipos de
fertilizantes tienden a degradar los suelos al acidificarlos. El consumo
de agua para el cultivo supone disminuir los volúmenes de las
reservas y los caudales de los cauces de agua dulce.
Algunos procesos de producción de Biocombustible son más
eficientes que otros en cuanto al consumo de recursos y a la
contaminación ambiental. Por ejemplo, el cultivo de la caña de azúcar
requiere el uso de menos fertilizantes que el cultivo del maíz, por lo
que el ciclo de vida del Bioetanol de caña de azúcar supone una
mayor reducción de emisiones de gases de efecto invernadero
respecto al ciclo de vida de combustibles fósiles con más efectividad
que el ciclo del Bioetanol derivado del maíz. Sin embargo, aplicando
las técnicas agrícolas y las estrategias de procesamiento apropiadas,
los Biocombustibles pueden ofrecer ahorros en las emisiones de al
menos el 50% comparando con combustibles fósiles como el gasóleo
o la gasolina.
El uso de Biocombustibles de origen vegetal produce menos
emisiones nocivas de azufre por unidad de energía que el uso de
productos derivados del petróleo. Debido al uso de fertilizantes
21
nitrogenados, en determinadas condiciones el uso de Biocombustibles
de origen vegetal puede producir más emisiones de óxidos de
nitrógeno que el uso de productos derivados del petróleo.
Una solución real pero aún no disponible es la utilización de
residuos agroindustriales ricos en hemicelulosas. De esta forma no se
utilizarían áreas de cultivos nuevas ni utilización de alimento para la
producción de Biocombustibles. Un ejemplo de esto es la utilización
de coseta de remolacha, paja de trigo, coronta de maíz ó cortezas de
árboles. La hidrólisis de estos compuestos es más compleja que la
utilización de almidón para la obtención de azúcares libres
fermentables, por lo tanto, requiere de una mayor cantidad de energía
inicial para procesar los compuestos antes de la fermentación, sin
embargo, el costo de producción es casi nulo al considerar que se
trata de residuos. La única tecnología eficiente y limpia es la utilización
de enzimas hemicelulolíticas. Existen tres puntos claves que se deben
solucionar o perfeccionar antes de aplicar esta tecnología: (1) Se
deben encontrar enzimas más estables y eficientes, (2) Métodos
menos destructivos de inmovilización de enzimas para su utilización
industrial y (3) Microorganismos capaces de fermentar eficientemente
monosacáridos derivados de las hemicelulosas (xilosa y arabinosa
principalmente) (Sánchez y Castro, 1997; Martínez, 2008; Wikipedia,
2008; Coello, 2008; Camps et. al. 2002, García, et. al. 1993).
22
Biocombustibles están siendo promovidos como una alternativa limpia y
renovable.
El Perú no es ajeno a estos esfuerzos, ya que tanto el estado como el
sector privado están haciendo todo lo posible para investigar e informar
sobre todo lo concerniente a este tema. En un esfuerzo del gobierno por
normar este tema, el 2007 se aprobó la reglamentación que establece una
mezcla obligatoria del 2% de Biodiesel con Diesel 2 para el 2009 y del 5%
para el 2011. Además se estableció una mezcla obligatoria del 7,8% de
etanol en gasolina a partir del año 2011.
La naciente industria de los Biocombustibles en el Perú ha despertado el
interés de varios inversionistas y capitales privados; pero el desarrollo de los
mismo es en sí un tema complejo ya que implica tanto factores económicos,
agrícolas, energéticos, productivos, sociales y ambientales.
Las áreas disponibles en el Perú para la siembra de cultivos energéticos
son de aprox. 470 mil ha: 50 mil ha para Bioetanol en la costa, 100 mil ha
para Biodiesel en la sierra, y en la selva 200 mil ha para Biodiesel de palma
aceitera y 120 ha para etanol de caña de azúcar. Estos espacios están
empezando a ser utilizados, p. ej. para el 2008 se había anunciado la
siembra de 50 mil ha de canola para Biocombustibles, desarrollado por el
programa Sierra Exportadora.
Con todo esto, existen diferentes dificultades que impiden un amplio
desarrollo de las tecnologías que permitirían su implementación y de políticas
que las regulen. Esto se debe a los miedos que puedan traer los posibles
impactos negativos que pueda conllevar su utilización. Entre estos, los
riesgos para la seguridad alimentaria nacional por la subida de precio de los
alimentos. El Banco Mundial indica que el 75% del incremento de los precios
de los alimentos ha sido causado por la producción de Biocombustibles. Esto
también afecta al Perú; en cuanto a la producción de Biodiesel, la
vulnerabilidad es baja ya que el aceite usado para su producción (el de
palma) es poco usado para consumo humano, siendo el Perú dependiente
del aceite de soya importado para satisfacer las necesidades de grasas
comestibles. En cuanto a la producción de Bioetanol, el uso de la caña de
azúcar como materia prima sí sería un problema ya que es una fuente
importante de energía alimentaria aquí y en toda la región latinoamericana,
por tanto, todos los países de la región son vulnerables a incremento de
precios o disminución de la disponibilidad del azúcar. Otro de los problemas
de la caña de azúcar en la costa es que utiliza una gran cantidad de agua y
ese es un recurso escaso de la zona. Existen proyectos para producir
Biodiesel en la costa a partir de Jatropha (piñón blanco), pero el problema se
centra en que entraría en competencia con tierras de cultivo para otros
alimentos y el agua para riego.
Otro problema que se cierne sobre la producción de Biocombustibles en
el Perú es referente a la amenaza sobre la Biodiversidad. En la selva los
cultivos energéticos ejercen una presión sobre los bosques y la
biodiversidad. La selva cuenta con más de 60 millones de ha de bosques
primarios de los cuales 10 millones ya han sido deforestados y de éstos, el
80% están abandonados. El desarrollo de cultivos energéticos en la selva
debe apuntar al uso de esas hectáreas de bosques abandonados para no
destruir más bosques primarios. Casos similares de deforestación y
23
atentados contra la biodiversidad a favor de la producción de
Biocombustibles se han visto en Malasia, Indonesia, Colombia y Brasil.
En el Perú, el negocio de los Biocombustibles recién comienza y hay una
gran incertidumbre respecto a los impactos que esta industria pueda tener en
el país; además hay una gran desinformación respecto al tema, sobre todo
en el público general, lo que genera una polarización de ideas.
Para cumplir con la demanda interna de Biocombustibles y cumplir con el
cronograma de mezclas para el 2009 y 2011, en lo que respecta a Bioetanol,
el Perú no requiere más de 10 mil ha de tierras de cultivo; y en cuanto a
Biodiesel, se necesitaría alrededor de 80 mil ha, pero hasta el momento hay
menos de 20 mil ha sembradas, entonces para cumplir con la demanda se
necesitaría “exportar” la materia prima, pero el Ministerio de Energía y Minas
está en contra de esta posibilidad y espera que para el 2009 ya esté
disponible esta cantidad de cultivo para Biodiesel.
El Perú tiene para el 2011 el objetivo de dividir su matriz energética en 3
fuentes: petróleo (33%), gas natural (34%) y energías renovables (33%).
Para cumplir con lo referente a las “energías renovables”, el estado está
entregando conseciones de tierras en los bosques amazónicos y en la costa
para promover la producción de caña de azúcar, pero no para satisfacer el
mercado nacional. El Perú no requiere, en términos cuantitativos un
incremento significativo en la producción de Biocombustibles, porque su
matriz energética está más apuntada al tema del gas natural y no tanto al
tema de los Biocombustibles, por lo que la producción de éstos está ahora
más centrado a la exportación y mientras el precio del petróleo siga
incrementándose, este rubro aparecerá como una interesante fuente de
ganancias.
En el marco de la implementación del tratado de libre comercio con los
Estados Unidos, se creó el Ministerio del Ambiente y su ministro, el
prestigioso ecólogo Antonio Brack, ha establecido tres condiciones para la
producción de Biocombustibles en el Perú:
- Que no se talen bosques primarios.
- Que no se utilicen tierras para la producción de alimentos.
- Que se utilice riego tecnificado.
24
4. PRODUCCIÓN DE BIOETANOL:
Hidratos de carbono
Azúcares (Etanol + Agua) + CO2
(complejos) Hidrólisisácida o Fermentación
enzimática
Destilación
Etanol Agua
25
Dependiendo del tipo y composición de la biomasa, previo al proceso de
hidrólisis, será necesario someterla a algún tratamiento que facilite la
fermentación. Normalmente, el que necesita es una reducción del tamaño de
las partículas, con el objetivo de disponer de una mayor superficie expuesta
al proceso de fermentación.
Como ya se ha mencionado, los microorganismos que controlan la
fermentación de los azúcares necesitan unas condiciones de operación muy
determinadas, entre ellas destacan:
- Temperatura: entre 27 y 32 ºC
- pH: entre 4 y 5
- Concentración de azúcares: inferior a 22% en peso
- Concentración de etanol: inferior a 14 – 16% en peso
26
- Otras fuentes diversas (polisacáridos residuales de la extracción
del aceite de nueces, etc.).
27
municipales
Desechos de
Harina de trigo producción de la Suero de leche
ganadería intensiva
Trigo molido Glucosa
Maíz molido Desechos de sulfito
Raíces de almidón:
Yuca
Papa
*Adaptado de Smith, 2006
28
Con la trituración tradicional de la caña de azúcar o los
métodos de difusión de la remolacha, se necesita la adición de
“agua de absorción” para la extracción eficiente. Generalmente la
caña producirá entonces su propio peso de jugo mezclado, que
contiene típicamente 12,5% w/v de azúcares fermentables
expresados como monosacáridos-hexosas, de forma que sin
evaporación, el nivel máximo de etanol después de la
fermentación es solamente de 6% w/v.
Las condiciones de fermentación establecen el diseño y los
parámetros de operación del conjunto de la destilería y existe
poca flexibilidad. Una destilería convencional de caña de azúcar
que produce 60 a 70 litros de etanol por tonelada de caña es
necesariamente una instalación sencilla, basada en métodos
tradicionales, que utiliza grandes cantidades de vapor para la
recuperación del etanol, gran número de vasijas fermentadoras y
que libera un gran volumen de efluente contaminante.
En la fabricación del azúcar, los líquidos azucarados crudos
se clarifican antes de su evaporación hasta un jarabe
concentrado para su subsiguiente cristalización y la recuperación
del azúcar. Normalmente se añade cal, elevando el pH del jugo
desde 5,0 - 5,7 hasta 7,0 o superior. El tratamiento por calor con
coagulación elimina la fibra y los coloides en suspensión.
Elevando el pH, se detiene la inversión de la sacarosa durante el
proceso posterior. Las impurezas en el jugo de azúcar que pasan
la clarificación, junto con las sales cálcicas, permanecen como
residuo en las melazas finales.
Para la producción de alcohol por fermentación, sin
embargo, el proceso de adición de cal es una etapa negativa, ya
que:
- Las condiciones de pH óptimo para la fermentación son de
4,5 a 5,0, más cercanas a las del pH del jugo original.
- Las sales cálcicas originarán una severa incrustación en
los cambiadores de calor y en el equipo de destilación.
- La adición de cal elimina los compuestos de nitrógeno y
los fosfatos del jugo, que son nutrientes para la levadura.
- La inversión de la sacarosa es beneficiosa.
29
*Análisis en base húmeda
Composición de la caña de azúcar
30
50-55%. Los residuos no fermentables se concentran en las
melazas y causan problemas en las operaciones de la destilería;
en particular el calcio suspendido y las sales inorgánicas, los
coloides, fibras, gomas, ácidos orgánicos y los residuos de tierra.
Por consiguiente, para diluir para conseguir un sustrato adecuado
para la fermentación, los sólidos en suspensión deberían ser
eliminados hasta un nivel razonable y el crecimiento de las
bacterias debería reducirse.
Componentes Peso %
Sacarosa 35.0
Otros azúcares reductores 19.0
Otra materia orgánica 14.0
Cenizas inorgánicas 12.0
Sólidos totales 80.0
Sólidos en suspensión 8.0% v/v
31
Calcio 0,74%
Magnesio 0,35%
Contenido de minerales
Fósforo 0,08%
Potasio 3,67%
Glicina 0,10%
Leucina 0,01%
Contenido de aa. Lisina 0,01%
Treonina 0,06%
Valina 0,02%
Colina 600 ppm
Niacina 48,86 ppm
Ácido pantoténico 42,90 ppm
Contenido de vitaminas
Piridoxina 44 ppm
Riboflavina 4,40 ppm
Tiamina 0,88 ppm
*Adaptado de Fajardo y Sarmiento, 2007.
4.1.1.4 Cereales:
En base a peso seco el maíz, el sorgo y otros granos
contienen alrededor de 60-75% w/w de almidón hidrolizable a
hexosas con un significativo aumento de peso
(estequiométricamente la relación de almidón a hexosas es de
9:10) y constituyen una fuente de alto rendimiento en etanol.
La mayor parte de los almidones de cereales contienen una
mezcla de α-amilosa (20-30%) y amilopeptina (70-80%). La
primera es un polímero lineal soluble en agua, mientras que la
segunda es un polímero ramificado insoluble en agua. La
sacarificación de la amilasa es mucho más rápida que la de la
amilopeptina, pero puesto que la amilopeptina predomina, la
conversión global de azúcares fermentables está gobernada por
una segunda degradación.
Originalmente los cereales fueron hidrolizados por catálisis
ácida. Las conversiones eran incompletas y el requerimiento de
altas temperaturas durante un extenso periodo de tiempo
conducía a la formación de productos laterales indeseados. Los
problemas de viscosidad entorpecían el proceso; frecuentemente
la pasta calentada contenía también “dextrinas límite”, que
requieren un tiempo largo de fermentación para su catabolismo
por las levaduras. Los almidones gelatinizados eran propensos a
“retrogradación” al enfriarse, cuando las moléculas de almidón se
reagregaban formando pequeños cristales insolubles,
acompañado de aumento en la viscosidad de la papilla.
Hoy, la mayor parte de los procesos de conversión utilizan
una fase de calentamiento, ayudada por la adición de enzimas
para la conversión completa. A veces se practica la hidrólisis
ácida seguida por la conversión enzimática pero la tendencia
presente es apoyarse directamente en la hidrólisis enzimática
que se lleva a cabo en dos etapas.
32
Cuando la sacarificación no es completa antes de la
fermentación, el tiempo de residencia durante la fermentación se
extenderá hasta alcanzar concentraciones finales razonables de
etanol; las fermentaciones en las que están presentes las
“dextrinas límite”, requerirán varios días hasta estar completadas.
En condiciones diluidas para adaptarse a los niveles de
fermentación, el volumen de las vasijas se convierte en un factor
importante de los costes.
Cuando el etanol se pueda separar a medida que se forma,
la rápida velocidad de fermentación puede ser mantenida
continuamente, con una mejora correspondiente en la cinética de
la sacarificación enzimática. Cuando se elimina el etanol y el
reciclaje del sustrato consumido puede ser llevado a cabo sin
destrucción térmica de la glucoamilasa, puede llegar a producirse
una alta concentración de enzima para la misma dosis
enzimática.
33
4.1.1.5 Tubérculos:
La cosecha de raíces de las zonas templadas tiene poca o
ninguna aplicación en la producción de alcohol industrial a causa
de su mayor valor de usos, bien establecidos, como alimento. Sin
embargo, este no es caso con la cosecha de las raíces de la
yuca (también conocida como mandioca) que es ampliamente
cultivada en la mayor parte de las zonas tropicales. Puesto que
es fácil de crecer, resistente a pestes y a sequías, y puede
aclimatarse a suelos pobre de nutrientes fertilizantes, proporciona
un alimento básico pero con un contenido de proteína muy bajo.
Los intentos de incrementar su valor nutritivo han tenido poco
éxito y continúa siendo una cosecha problemática,
particularmente con variedades amargas que contienen
cianógenos lo que requiere su inmersión inicial en agua para que
sea comestible.
Sin embargo, comparada con la caña de azúcar, la yuca
tiene un potencial de producir hasta 2 ½ veces la cantidad de
alcohol por tonelada de cosecha recogida y es mucho más barata
de crecer. De nuevo esto debe ser equilibrado frente a dos
factores principales adversos. La producción de las cosechas
tradicionales por área cosechada es baja y se necesitan fuentes
de energía exógena para su procesamiento.
Sin embargo, se han desarrollado rápidamente mejoras
agrícolas en la producción de la yuca desde un nivel de
agricultura de pueblo y existen actualmente variedades que
producen cosechas de 30-40 toneladas/ha con adecuadas
porciones leñosas por encima del suelo para atender a las
necesidades de energía.
El almidón de yuca es diferente del almidón de cereal.
Aunque el contenido de amilasa es similar, entre el 17 y el 30%,
las amilopeptinas tienen una longitud de cadena mucho más
corta que la encontrada en los cereales, lo que simplifica la
preparación de las pastas y la degradación enzimática.
34
Proteína cruda (N x 6,25) = 1.06%
HCN = 575 p.p.m.
(en base a peso seco)
La pulpa usada es normalmente menor que el residuo de la
hidrólisis de los granos y su reducido contenido en proteína le da
menos valor como pienso animal. En empresas para la
producción de Bioetanol a gran escala, estos residuos serán de
mayor utilidad prensados hasta un grado de humedad razonable,
y utilizados como combustible sólido, similar al bagazo.
Para aumentar el radio de operación y superar las
variaciones estacionales de suministro, la desecación al aire, en
los trópicos, de las raíces tuberosas durante dos días, reduce su
humedad hasta un 15% manteniendo alrededor del 70% de
sustancias fermentables. Las rodajas o la harina pueden ser
almacenadas con una vida media estable, requieren menos
volumen de almacenamiento junto con manejo más fácil y
teniendo una pérdida de humedad de alrededor del 55% tienen
unos costes de transporte reducidos.
35
la celulosa parece más problemático, pero existe un considerable
interés, unido a la posibilidad de la conversión directa de la
celulosa adecuadamente pretratada a etanol u otros compuestos
volátiles de fermentación, utilizando cultivos mixtos
seleccionados de bacterias celulolíticas y fermentadoras, tales
como especies de Clostridium, algunas de las cuales, para mayor
utilidad son termófilas. Sin embargo, ninguno de estos progresos
ha producido todavía impacto en la producción práctica de
Bioetanol (Masera et. al. 2006; Bu’lok y Kristiansen, 1991).
36
4.1.2 Microorganismos utilizados en la producción de Bioetanol.
Entre los microorganismos utilizados para la producción de etanol,
por medios fermentativos, tenemos a los siguientes:
Bacterias Levaduras
- Zymomonas mobilis - Saccharomyces cerevisiae
- Clostridium acetobutilycum - Pichia stipitis
- Klebsiella oxytoca - Pachysolen tannophilus
- Escherichia coli - Candida shehate
37
la turbidez y modificación del aroma y sabor en la sidra;
fue en 1937 cuando Shimwell lo aisló por primera vez de
la cerveza.
- Actualmente Zymomonas es considerado un
contaminante serio en la industria cervecera, pues son
favorecidos por la anaerobiosis y la presencia de
azúcares simples.
- En la cerveza provoca turbidez importante y un olor a
manzana que podría ser debido a la presencia de
acetaldehído e hidrógeno sulfurado.
- En 1928, Lindner descubrió que la fermentación del
Hidromiel que conducía a la bebida alcohólica “pulque”
era provocada por una bacteria a la que el denominó
Thermobacterium mobile, la que más tarde sería
conocida como Z. mobilis Subsp. mobilis. Este
investigador sugirió que esta bacteria intervenía
únicamente en las regiones tropicales.
- En 1941, Roelofsen fu el primero en aislar Z. mobilis a
partir del vino de palma. Aquí se puede apreciar que está
bien adaptada a un medio en el cual existen cantidades
importantes de sacarosa, glucosa, fructosa, aminoácidos
y factores de crecimiento.
- Zymomonas también a sido aislado a partir de jugos de
caña de azúcar fermentada y a partir de miel
envejeciendo y ocasionalmente a partir de frutas.
38
un medio estándar a un pH entre 4,1 – 5,2 si éste
contiene 5% (v/v) de etanol o rojo neutro (0,1% p/v).
- El pantoteno y la biotina son indispensables para el
crecimiento celular.
- En aerobiosis hay poco o ningún crecimiento en medio
sólido estándar y hay ausencia de crecimiento en agar
nutritivo.
- El crecimiento de las células es sensible frente a discos
que llevan 500 µg de sulfafurazol ó 30 µg de novobiocina
ó 10 µg de ácido fusídico.
4.1.2.1.3 Metabolismo:
- Zymomonas sólo fermenta la glucosa, la fructosa y la
sacarosa, por tanto presenta la particularidad de no
asimilar prácticamente ninguna otra fuente de carbono,
aunque se ha reportado que pueden metabolizar la
rafinosa.
- Para la fermentación de la glucosa utilizan la vía de
Entner – Doudoroff.
- La fermentación de estas dos hexosas se acompaña de
una producción de gas importante y de una acidificación
del medio.
- La mayoría de las cepas produce entre 1 y 1,6 moles de
etanol por mol de glucosa o de fructosa metabolizado.
- Por cada mol de sustrato consumido, se producen se
producen dos moles de NADH, éstas se producen a nivel
de la etanol deshidrogenasa y una parte menor a nivel
de la lactato deshidrogenasa.
- El rendimiento de ATP es de uno por un mol de hexosa
degradada.
- Zymomonas no posee sistema de transporte como la
fosfoenol piruvato, glucosa fosfotransferasa, ni sistema
de permeasa, sino más bien un sistema por difusión
facilitada.
39
- Presentan un sistema de transporte para la glucosa y
fructosa que se asocia a una velocidad de difusión
elevada y una afinidad baja, esto la limita a vivir en un
hábitat limitado a entornos con altas concentraciones de
azúcar.
Vía lineal de Entner-Doudoroff en Z. mobilis. Abreviaturas: frk, frustocinasa; pgi, glucosa-6- fosfato
isomerasa; glk, glucocinasa; zwf, glucosa-6-fosfato deshidrogenasa; pl., 6-fosfogluconolactonasa; pdc,
piruvato descarboxilasa; adhA, alcohol deshidrogenasa I, adhB, alcohol deshidrogenasa II.
40
superiores a 13% (p/v). Esto en parte es debido a sus
enzimas glucocinasa y fructocinasa no están sometidas
a una inhibición por etanol, además presenta
modificaciones a nivel de su membrana celular y
presenta una adaptación a altas concentraciones de
etanol. Esto se traduce en una disminución de la relación
lípido/proteína y en una modificación de la composición
en fosfolípidos, o sea, la excepcional resistencia al etanol
de esta bacteria sería debido a que practica un cierto
rearreglo a nivel de membrana, del contenido de
fosfolípidos hopanoides y proteínas (Leveau y Bouix,
2000).
41
niveles de subproductos, es osmotolerante, capaz de utilizar altas
concentraciones de azúcares, presenta alta viabilidad celular
para el reciclado y características de floculación y sedimentación
para su procesamiento posterior.
Junto con otras levaduras ha jugado un papel muy
importante en la historia de la humanidad, ya que ha sido
utilizada por el hombre desde hace milenios sin saberlo, en
particular en la fabricación de bebidas alcohólicas (vino, cerveza)
y de pan. El papel de las levaduras en la fermentación alcohólica
no se puso en evidencia hasta los trabajos de Pasteur entre los
años de 1866 – 1876. Hoy se utilizan en diferentes tipos de
fermentación y también como fuente de vitaminas y proteínas en
la alimentación humana y animal. Por último, el buen
conocimiento de la biología molecular de estas levaduras y las
técnicas de Ingeniería Genética han permitido utilizarlas para la
producción de proteínas animales y humanas como el cuajo, la
hormona de crecimiento humana o la vacuna contra la hepatitis
B.
Reino : Fungi
División : Amastogomycota
Clase : Ascomycetes
Subclase : Hemiascomycetidae
Orden : Endomycetales
Familia : Saccharomycetaceae
Subfamilia : Saccharomycetaidae
Género : Saccharomyces
Especie : S. cerevisiae
Características Levaduras
Dimensiones (micras) 4–8
Tiempo de duplicación (horas) 1–3
pH (rango óptimo) 4,5 – 5,5
Nitrógeno (%) 7,5 – 8,5
Proteína (%) 35 – 45
Ácidos Nucleicos (%) 6 – 12
42
Carbohidratos (%) 30 – 45
43
- Fermentan glucosa, galactosa, sacarosa, maltosa y
rafinosa.
- Su aireación óptima es de 0,6 a 0,9 vvm.
- En presencia de oxígeno las cepas pueden metabolizar
sustratos como glicerol, etanol y lactato.
- En cuanto a su composición química, contienen un 75%
de agua y un 25% de materia seca aproximadamente. La
composición de la materia seca es la siguiente:
Porcentaje
Componentes
(%)
Ceniza 7
Carbohidratos 43
Proteína 48
Grasa 2
4.1.2.2.2 Reproducción:
- S. cerevisiae se divide por gemación y puede tener una
reproducción asexual cuando se encuentra en su forma
haploide y de manera sexual cuando, a partir de un
cigoto, se forma un asca que contiene cuatro ascosporas
haploides (característica de especie).
- El apareamiento sexual de las levaduras sólo puede
ocurrir entre células haploides de distinto sexo. Se
definen por tanto dos tipos sexuales: a y α (alfa). La
determinación sexual se debe a la diferencia en un único
locus, conocido como MAT que gobierna el
comportamiento sexual entre células haploides y
diploides.
- En la división por gemación las células hijas son de
tamaño inferior al de las células madre.
44
4.1.2.2.3 Metabolismo:
- S. cerevisiae realiza fermentación alcohólica, en la cual
el etanol es formado a partir de la D-glucosa; éste azúcar
es convertido en piruvato por la vía de Embden Meyerhof
Parnas (glucólisis).
- El piruvato producido durante la glucólisis es
descarboxilado a acetaldehído por la piruvato
descarboxilasa, después el acetaldehído es reducido a
etanol por la alcohol deshidrogenasa.
45
- El carbono sirve como fuente de energía y como material
constitutivo de la masa celular. El nitrógeno se encuentra
en la célula formando parte esencial de las proteínas,
aminoácidos y ácidos nucleicos; el fósforo se encuentra
en los ácidos nucleicos, en la lecitina y en diversos
compuestos fosforilados que participan activamente en
los procesos de degradación oxidativa y de intercambio
energético (ATP, ADP, AMP, NADP).
46
4.1.3 Bioquímica en la producción de Bioetanol.
4.1.3.1 Generalidades:
Se considera que las levaduras son los microorganismos más
vinculados al progreso y bienestar humano. Esto ha sido debido
principalmente a su capacidad de convertir eficientemente
azúcares, como los que se encuentran en el mosto de uva,
frutas, cebada y otros cereales y leche, en alcohol y CO 2. Se ha
dicho que la levadura es la “planta” más antigua que ha sido
cultivada. Se sabe que la fabricación del pan y la cerveza ya se
practicaban en Tebas durante la XI dinastía, 2000 años antes de
Cristo.
S. cerevisiae y algunas especies próximas han sido muy
utilizadas tanto en microbiología industrial (bebidas fermentadas,
pan, y, ocasionalmente, glicerina y grasa) como en todo el
desarrollo de la Bioquímica. A esto último ha contribuido la
facilidad de disponer de levaduras de pan o de cerveza
prácticamente puras y en unas condiciones excepcionalmente
favorables de mantenimiento y cultivo. Probablemente el primero
que vio una levadura fue A. van Leewenhoek en 1680. En el siglo
XVIII, Linneo, el creador de la sistemática moderna, se interesó
por la fermentación alcohólica, pero hubo que esperar hasta
mediados del siglo XIX para obtener los primeros avances
importantes en el conocimiento de la fisiología y bioquímica de
las levaduras. En 1987, los hermanos Büchner obtuvieron el
primer extracto de levadura, con el que pudieron fermentar la
glucosa sin la presencia de células; por este motivo esta fecha se
considera como la del nacimiento de la Bioquímica.
Cagniard-La tour demostró en 1837 que la levadura se
multiplica durante la fermentación alcohólica y fue quien primero
le atribuyó una naturaleza vegetal. Schwann la llamó “zuckerpilz”
(hongo del azúcar), de lo que se deriva el nombre de
Saccharomyces dado más tarde por Kutzing.
El proceso químico de la fermentación fue establecido por
Gay-Lussac a principios del siglo XIX:
47
forma de vida anaerobia en la que el suministro energético se
deriva de la degradación parcial de la materia orgánica.
Es bueno recordar que el nombre “fermentación” es muy
antiguo y significa ebullición a temperatura ambiente. También es
interesante señalar que el nombre de fermento es sinónimo de
levadura y, en menor grado, de microbio.
Como ya se dijo, el microorganismo más utilizado para la
producción de etanol a través de procesos fermentativos es S.
cerevisiae. Las características de estas cepas son un poco
diferentes a las cepas utilizadas para la elaboración de los vinos
y alcoholes alimentarios:
- Las cepas deben ser genéticamente estables y tener las
mismas prestaciones en un gran número de
fermentaciones.
- Deben de ser capaces de fermentar el medio lo más
rápidamente posible y producir etanol con un rendimiento
próximo al rendimiento teórico.
- Deben producir lo menos posible otros compuestos ya que
provoca un descenso del rendimiento en etanol y complica
la destilación (p. ej. compuestos volátiles).
- Deben ser poco exigentes en factores de crecimiento para
limitar las adiciones de vitaminas a los medios industriales.
- Para los procesos con reciclado de levaduras, deben
tolerar una presión osmótica elevada debida a las sales.
- Para los procesos con reciclado de las levaduras, deben
conservar una buena viabilidad al final de la fermentación
y por lo tanto presentar una buena tolerancia al etanol.
- El carácter de flocular debe ser deseado.
48
- En la etapa final al acetaldehído se reduce a etanol y el
potencial de reducción es proporcionado por el NADH + H+,
en una reacción catalizada por la enzima alcohol
deshidrogenada.
49
Fructosa 1-6 di P
Aldolasa
Gluc ólisis
3. Dihidroxiacetona
P- reductasa
4. Glicerol
1 - fosfatasa
Fermentaci ón
alcoh ólica
1. Piruvato
2. OL deshi- descarboxilasa
drogenasa
50
Enzimas:
1= glucoquinasa
2= glucosa 6 P-deshidrogenasa
3= 6 P-gluconolactonasa
4= 6 P-gluconato deshidratasa
5= 2-ceto 3-desoxi 6 P-gluconato
aldolasa
6= gliceraldehído P-deshidrogenasa
7= P-glicerato quinasa
8= P-glicerato mutasa
9= enolasa
10= piruvato quinasa
11= piruvato decarboxilasa
51
suficiente energía para los organismos anaeróbicos. La energía
libre de Gibbs (entalpía libre) de la reacción de fermentación etílica
muestra un valor de ΔG de -234.6 KJ mol-1 (en un entrono de pH =
7); este valor negativo de la energía libre de Gibbs indica que
desde un punto de vista termodinámico la fermentación etílica es
un proceso químico espontáneo.
Entonces, teniendo la siguiente ecuación general:
C 6H 12O6 + 2Pi + 2 ADP 2CH 3-CH 2OH + 2CO2 + 2 ATP + 25.5 kcal
Azúc ar - H exos a Et anol Anh. c ar b ónic o
180g 92g 88g Rx exerg ón ic a
Peso
Producto
%
Etanol 48.4
Anh. carbónico 46.6
Glicerol 3.3
Ac. succínico 0.5
Materia celular 1.2
TOTAL 100.0
52
4.1.3.4 Efecto Pasteur y efecto Crabtree:
En el desarrollo de la fermentación alcohólica se pueden
observar dos efectos muy importantes que influyen y pueden
afectar todo el proceso. Estos son el efecto Pasteur y el efecto
Crabtree.
El Efecto Pasteur se refiere a la inhibición de la
fermentación por el oxígeno (respiración). Esto se debe a que S.
cerevisiae puede metabolizar los azúcares tanto en aerobiosis
como en anaerobiosis y al permitir la respiración un mejor
rendimiento celular, para un mismo rendimiento celular se consume
menos azúcar en aerobiosis que en anaerobiosis, dicho de otro
modo, la aerobiosis conlleva a una disminución del consumo de
azúcar y por ende a una disminución de la fermentación.
El efecto Crabtree o mejor conocido como “efecto glucosa”
se refiere a que, cuando la concentración de azúcar en el medio es
elevada, S. cerevisiae sólo metaboliza los azúcares por vía
fermentativa; incluso en presencia de oxígeno, la respiración es
imposible.
Entonces, para un proceso de fermentación, se debería
aprovechar las propiedades del efecto Crabtree (elevadas
concentraciones de azúcar en el medio que favorezcan la
fermentación) y evitar en lo posible el efecto Pasteur (que induce la
respiración en detrimento de la fermentación).
53
4.2 Procesos de Producción Industrial de Bioetanol:
De manera industrial, existen tres principales caminos para producir
etanol a partir de materia prima biológica; todos ellos incluyen una fase de
fermentación por levaduras, seguida de una posterior destilación mediante la
aplicación de calor. La duración de cada sistema es distinta, así como la
producción de etanol y su coste, dependiendo del elemento inicial, que
puede ser un producto azucarado, almidón o material celulósico.
El método más sencillo es el que usa un producto azucarado, como
puede ser caña de azúcar o sorgo dulce. Como el rendimiento del cultivo es
alto, es también el que produce mayor cantidad de alcohol por unidad de
superficie, aunque esto no es completamente cierto en el caso de la caña,
pues habría que tener en cuenta que este cultivo utiliza el suelo los doce
meses del año. El cultivo se trata por medios mecánicos para extraer el
mosto azucarado. En caña y sorgo basta con un simple molido. Luego, el
jugo azucarado fermenta en un tanque hasta convertirse en alcohol de bajo
grado, que contiene demasiada agua para poder usarse como combustible.
La última parte es la más costosa. Para usar en mezclas, el alcohol debe ser
totalmente anhidro. Cuando se usa solo, puede contener hasta 10% de agua
o incluso más, dependiendo del tipo de motor. Esto encarece su uso en la
mezcla con gasolina, llamada gasohol, por lo que se puede pensar en la
extracción de etanol a partir de almidón o de celulosa. Las fases de
fermentación y destilación para éstos son idénticas a la utilizada en la caña.
Cuando se trata de productos que contienen almidón (grano o tubérculo),
se necesita un camino más largo. Antes de la fermentación, el almidón deber
ser convertido en azúcar, para lo que se requiere un tratamiento enzimático
en un tanque especial.
Los residuos de biomasa contienen mezclas complejas de carbohidratos,
llamados celulosa, hemicelulosa y lignina. Para obtener los azúcares de la
biomasa, ésta es tratada con ácidos o enzimas que facilitan su obtención. La
celulosa y hemicelulosa son hidrolizadas por enzimas o diluidas por ácidos
para obtener sacarosa, que es entonces fermentada. Tres son los métodos
principales para extraer estos azúcares: la hidrólisis con ácidos
concentrados, la hidrólisis con ácidos diluidos y la hidrólisis enzimática.
Materias primas
(melazas, jugo de azúcar, almidón, celulosa, etc.)
Licuefacción
Glucoamilasa
CO2
Fermentación
CO2
+
Biomasa
Destilación
Etanol al 96%
Etanol absoluto
55
levaduras decae, acompañada de la liberación de calor que se manifiesta por
un aumento de la Tº hasta los 40 ºC. Finalmente, se produce un descenso
asintótico de la formación de etanol, acompañado de un crecimiento
insignificante de las levaduras en la fase final (48 a 72 h). El etanol mezclado
con el CO2 procedente de la fermentación se recupera mediante un proceso
de lavado. El tiempo de fermentación puede acortarse a 36 a 48 h utilizando
una Tº más elevada y aumentando la siembre de levaduras. Como se
considera imposible conseguir unas condiciones asépticas mediante la
completa esterilización de un volumen tan alto de mezcla de fermentación,
normalmente la fermentación en discontinuo se realiza sin alcanzar la
esterilización completa del medio ni del equipo. En ocasiones, ocurre alguna
contaminación por bacterias ácido-lácticas, reduciendo el rendimiento en
etanol hasta un 20%. Esta contaminación es más frecuente cuando se utiliza
una tolva de sedimentación, ya que se acumulan los microorganismos
contaminantes y terminan por aclimatarse a las condiciones de fermentación.
Recientemente se ha desarrollado un proceso continuo en el que la
mezcla sustrato entra en el fermentador a la misma velocidad que la salida
de la mezcla ya fermentada, y en la que parte de la levadura de la cosecha
se recupera y vuelve al tanque. Este método es más rápido (8 a 18 h)
dependiendo de la Tº y del contenido de azúcares de la mezcla, porque el
cultivo de levadura está continuamente en un estado fisiológico activo, y
además porque se puede mantener un control más estricto de la Tº y del pH.
Existen tres tipos de procesos continuos: el reactor continuo agitado
convencional (CSTR), el CSTR acoplado a un reciclador de células, y el
reactor de células inmovilizadas. Los dos últimos suponen mejoras sobre el
sistema CSTR convencional porque el empleo de altas densidades celulares
aceleran la fermentación (Byong, 2000).
Los países pioneros es estos rubros son Brasil y Estados Unidos. El
etanol puede usarse solo o mezclado con gasolina, dependiendo de su
pureza; así, cuando está puro (99,5%), se puede mezclar, sin apenas
modificaciones en el motor; si impuro (95 – 96%), se utiliza en solitario, si
bien es preciso realizar modificaciones de cierta importancia.
Ahora, para empezar a usarlo en gran escala sería necesario que s diera
una rara combinación de altos precios del petróleo a la vez que una caída de
los precios de la materia prima empleada para la obtención del bioalcohol.
Por otra parte parece evidente que ésta utilización de etanol a gran escala
iría en perjuicio de los suelos, ya que la expansión de estos cultivos
provocaría un aumento de la erosión en general. Por éste y otros motivos, al
principio, se pensaba que el etanol proveniente del suelo a través de los
cultivos llegaría a utilizarse sólo como un aditivo, y no como un combustible.
Por ejemplo, en Estados Unidos, la caña de azúcar y el sorgo, representan
un potencial bastante escaso, de modo que las posibles fuentes de etanol
tendrían que ser principalmente el almidón de los cereales o de otros cultivos
como la papa.
En todo caso, la realidad es que cualquier paso dado en el sentido de
ahorrar petróleo a base de mezclar sus derivados con otro tipo de
combustible como los alcoholes, requiere subsidios para ser
económicamente rentable.
56
Diferenciación de procesos de producción de Bioetanol
57
Proceso de molido húmedo
58
Proceso de molido seco
α - amilasa
2n C6H10O5 + n H2O n C12H22O11
(almidón) (maltosa)
- Sacarificación:
glucoamilasa
C12H22O11 + H2O 2 C6H12O6
(maltosa) (glucosa)
glucoamilasa
C12H22O11 + H2O 2 C6H12O6 + 2 C6H12O6
(sacarosa) (glucosa) (fructosa)
59
Para la hidrólisis del almidón se usan bacterias
termorresistentes porque el proceso se lleva a cabo a altas
temperaturas (99 – 110 ºC)
4.2.1.3 Fermentación:
La levadura se añade a la mezcla para convertir los
monosacáridos en etanol (8 – 12%) y CO2. Se añaden 450 g de
levadura por cada 1 000 L de mezcla. Del proceso, p = 48 a 72
bar y t = 29 – 35 ºC.
Para la producción de Bioetanol a partir de maíz se pueden
utilizar tres tipos de fermentación:
- La discontinua (o batch, que se caracteriza por ser un
cultivo cerrado que contiene una cantidad inicial de
sustrato y el producto deseado se recupera al final de la
fermentación);
- La continua (en la que hay un equilibrio entre el volumen
del medio añadido y el que fluye transformado por la
acción microbiana, por lo que el volumen en el reactor se
mantiene constante) y
- Por medios enzimáticos.
4.2.1.4 Destilación:
Terminado el proceso de fermentación, hay que separar el
etanol producido del agua acompañante en el biorreactor, para
esto se recurre a la destilación. Existen tres métodos de
destilación utilizados para separar el etanol de maíz formado: por
agotamiento, por purificación y por rectificación.
Después de esto se tiene un etanol que puede ser utilizado
para cualquier proceso de los antes mencionados, este presenta
una pureza del 95 a 96%, siendo lo demás agua. Por procesos
químicos, se puede obtener un etanol anhidro, o sea, que una
cantidad mínima de agua (etanol al 99,5%), este puede utilizarse
puro y sin cambios en casi cualquier motor de combustión
interna.
60
- Este país produjo en el año 2005 un poco más de 300
millones de toneladas de maíz, de las cuales dedicaron a la
producción de Bioetanol, aprox. 39 millones de toneladas.
- Además tiene 74 plantas que producen Bioetanol de maíz y
existen otras 15 en construcción.
- En Europa, Japón y China se consumen 4500 millones de litro
de etanol.
- En el viejo continente planean utilizar en 2010 un 5,75% de
este combustible mezclado con nafta.
- Se espera que para el 2012, aprox. 70 millones de toneladas
de maíz sean necesarias para producir 28 mil millones de
litros de Bioetanol.
61
Acondicionamiento de la materia prima Proceso general de producción
62
producen: 472 Kg de pulpa húmeda (que al secarse puede utilizarse
como alimento para el ganado), 17Kg de pectina y 2,9 Kg de lignina.
En Europa la remolacha, junto con el trigo, representan las
materias primas principales para la producción de Bioetanol. Francia
es uno de los países que más ha desarrollado tecnología para obtener
Bioetanol de remolacha, después de establecido el Protocolo de
Kyoto. Tienen sistemas para producir en la misma planta, etanol de
remolacha durante otoño y de trigo el resto del año y próximamente se
pondrá en marcha en Francia una planta de 2,6 millones de hectolitros
(Hl.) de Bioetanol y otra de 3 millones de Hl.
Al producir etanol por fermentación se obtienen 0,2 L etanol/Kg de
remolacha, siendo la relación energía entregada/energía utilizada =
2,92. Además presenta una producción media de 55 T/ha, lo que
equivale a unos 50 Hl./ha, pero con la desventaja de la disponibilidad
de sólo 60 días al año.
63
Para la producción de Bioetanol a base de caña se puede utilizar el
judo azucarado (para la cual la caña es “molida” para extraer dicho
jugo) y también se puede usar los residuos de la industria azucarera
(las melazas).
DISCONTINUO
CAÑ
CAÑA DE AZÚ
AZÚCAR FERMENTACIÓN CONTINUO
ENZIMÁ
ENZIMÁTICAS
LIMPIEZA, CORTADO
AGOTAMIENTO
DESMENUZADO DESTILACIÓN PURIFICACIÓ
PURIFICACIÓN
RECTIFICACIÓ
RECTIFICACI ÓN
TRAPICHES
DESHIDRATACIÓ
DESHIDRATACIÓN
ADICIÓ
ADICI ÓN INVERTASA ETBE, MEZCLA DIRECTA
BAGAZO
ALMACENAMIENTO
FERMENTACIÓ
FERMENTACI ÓN INTERMEDIO
64
económico, ya que origina una pérdida del espacio de
fermentación y un aumento de los gastos de obtención de la
misma cantidad de alcohol en la destilación posterior. El
valor más corriente para la fermentación es de 12%.
- Sustancias nutritivas: Aunque las melazas contienen
generalmente la mayor parte de las sustancias nutritivas
necesarias para la fermentación, para suplir la posible
deficiencia de fósforo o nitrógeno puede añadirse fosfatos o
sulfato amónico.
- pH del mosto: La fermentación continúa satisfactoriamente
cuando el pH del mosto ha sido ajustado entre 4 y 4,5. Este
pH favorece a la levadura y es lo suficientemente bajo para
inhibir el desarrollo de muchos tipos de bacterias.
Comúnmente se inocula la mayor parte del mosto con un
iniciador que representa del 4 – 6% de su volumen, aunque
en ciertas circunstancias puede oscilar del 2 – 25%.
- Tensión del oxígeno: Aunque la reacción fermentativa no
requiere oxígeno, en los primeros momentos es necesaria
una gran parte de este gas para la producción de las células
de levadura en condiciones óptimas. Durante la
fermentación se desprende CO2 y se establecen pronto las
condiciones anaerobias.
- Temperatura: Se inocula el mosto a una Tº de 15 a 25 ºC,
generalmente de 20 a 25 ºC, dependiendo de cierto modo
de la temperatura exterior. Durante la fermentación aumenta
la Tº del mosto. El empleo de serpentines de refrigeración o
bien de chorros de agua sobre las paredes exteriores del
depósito ayuda a mantener una Tº adecuada. A una Tº de
30 ºC el alcohol se evapora rápidamente y aumenta el
desarrollo bacteriano.
- Tiempo requerido para la fermentación: La fermentación es
comúnmente completada sobre las 50 h o menos,
dependiendo de la Tº, concentración de azúcar y otros
factores.
- Destilación: Se utiliza la destilación por agotamiento
(separación de los sólidos del mosto, corrientemente
llamada vinazas y obtención de una corriente más
concentrada de etanol), purificación (separación de las
impurezas más volátiles, corriente conocida como
“cabezas”) o rectificación (separación de una parte del agua
para enriquecer el etanol hasta un 90% en peso).
- Rendimiento: La producción de etanol a partir de las
melazas de caña suelen alcanzar un 90% del valor teórico,
referido al contenido en azúcares fermentables.
- Tratamiento final: El alcohol etílico de 95% en volumen
puede ser nuevamente purificado, deshidratado o
65
desnaturalizado. Así se tienen en el mercado alcohol etílico
de 95% con desnaturalizante o sin él; alcohol de 96%
químicamente puro, alcohol absoluto USP y alcohol etílico
anhidro desnaturalizado.
66
divide la molécula de celulosa por la acción de la molécula de
agua. Las complejas estructuras de la celulosa (celulosa,
hemicelulosa y lignina) son divididas en diferentes procesos para
conseguir una solución azucarada, y eliminar productos de
descomposición de los azucares que pueden inhibir o, al menos,
dificultar el proceso de fermentación. Principalmente se realizan
procesos de hidrólisis de ácidos concentrados y bajas
temperaturas, de ácidos diluidos y altas temperaturas y
enzimáticos.
Hidrólisis con ácidos concentrados
En este proceso se añade entre 70-77% de ácido sulfúrico a
la biomasa, que ha sido secada previamente hasta obtener
una humedad menor del 10%. La proporción de ácido es de
1:25 por cada parte de biomasa y se mantiene a una
temperatura controlada de 50ºC. Entonces se añade agua,
para diluir el ácido a un 20-30% de la mezcla, aumentando su
temperatura hasta los 100ºC. El gel producido en este
proceso es prensado para obtener la mezcla de acido y
azúcar, que finalmente son separados. Este es un proceso del
que se obtiene rendimientos muy elevados pero a un coste
igualmente muy elevado, por lo que industrialmente no se
realiza.
Hidrólisis con ácidos diluidos.
Es uno de los procesos de hidrólisis más antiguos, simples y
eficientes para la producción del alcohol. El primer paso es
mezclar una proporción de 0,7% de ácido sulfúrico con la
hemicelulosa presente en la biomasa, para que se hidrolice a
190ºC. La segunda parte consiste en optimizar el rendimiento
de la reacción con la parte de la celulosa más resistente, para
ello se usa un 0,4% de ácido sulfúrico a 215ºC. Finalmente los
líquidos hidrolizados son neutralizados y recuperados,
normalmente mediante percolación.
Hidrólisis enzimática
Consiste en “romper” (hidrolizar) la celulosa por la adición de
determinadas enzimas. La celulosa es degradada por las
celulasas a azúcares, que pueden ser fermentados por
levaduras o bacterias para producir etanol.
En síntesis, el proceso consiste en descomponer la celulosa y la
hemicelulosa del residuo en azúcares sencillos y transformarlos
en etanol por fermentación. En primer lugar se lleva a cabo un
pretratamiento del residuo cuyo objetivo es alcanzar los mejores
resultados en las etapas siguientes (hidrólisis y fermentación).
Desde el punto de vista económico, esta etapa es crítica, puesto
que gran parte del coste total del proceso estaría en esta primera
etapa.
67
Como resultado del pretratamiento se obtiene una disolución de
azúcares provenientes de la ruptura de la hemicelulosa y un
residuo sólido (constituido principalmente por la celulosa del
residuo original).
La hidrólisis enzimática presenta ventajas frente a la hidrólisis
química, como menores costes de equipamiento (debido a que
se realiza a presión atmosférica y a temperatura próxima a la
ambiental), mayores rendimientos y no necesita utilizar agentes
químicos.
MATE
MATERI A CELULÓ
ELULÓSI CA MATERI A LI GNOCELULÓ
LÓSICA
SICA
PREHI DRÓ
RÓLI SI S ÁCI DA Lignina
HI DRÓ
RÓLI SI S ENZI MÁTI CA
ENZ FERMENTACI ÓN
FERMENTA
FERMENTACI ÓN
ENTA
68
4.3 Perspectivas futuras en la producción de Bioetanol:
En lo referente a la producción de Bioetanol de manera industrial, los
mayores esfuerzos de la Ingeniería Genética se han enfocado e la
ampliación de las capacidades de los microorganismos involucrados en la
utilización de sustratos más baratos y disponibles.
Con respecto a S. cerevisiae, se han obtenido cepas modificadas para la
producción de etanol a partir de lactosa, xilosa y almidón.
La obtención de cepas capaces de fermentar la lactosa permitirán la
utilización del suero de leche para la producción eficiente de alcohol; ya que
existen plantas productoras de etanol a partir de él mediante el empleo de
levaduras del género Kluyveromyces, no obstante los rendimientos en estos
casos son menores dada la baja tolerancia al alcohol de estas especies.
También se ha clonado en S. cerevisiae el gene de la β-galactosidasa
(enzima que hidroliza intracelularmente la lactosa en sus monosacáridos
galactosa y glucosa) en Escherichia coli, en este caso sin una permeasa que
permita la introducción del sustrato.
La xilosa es también un material abundante que puede ser un sustrato
conveniente para la producción de etanol; sin embargo, son muy pocas las
levaduras capaces de fermentarlas. La reacción clave en la asimilación de
esta pentosa es su transformación a xilulosa; esto se lleva a cabo en las
levaduras capaces de asimilar este azúcar, como Pachysolen tannophilus, a
través de la formación de xilitol como intermediario en una reacción
catalizada por dos enzimas que requieren cofactores. La transformación de
xilosa a xilulosa en bacterias ocurre en un solo paso catalizado por la enzima
xilosa isomerasa. Los genes de E. coli y Bacillus subtilis que codifican para la
xilosa isomerasa han sido clonados e insertados en levaduras de las
especies S. cerevisiae y Schizosaccharomyces pombe. En el 2009,
científicos alemanes obtuvieron levaduras genéticamente modificadas
capaces de convertir xilosa en etanol. Este desarrollo es fundamental para la
producción de biocombustibles a partir de materiales celulósicos. Para la
producción de etanol, la biomasa vegetal debe primero ser pretratada para
formar una mezcla de azúcares simples (monosacáridos). El grupo del
Instituto de Biociencias Moleculares de la Universidad de Frankfurt logró
incorporar en la levadura el gen de la enzima xilosa isomerasa de la bacteria
Clostridium phytofermentans en S. cerevisiae. Fabricando esta enzima, ahora
la levadura puede aprovechar también la xilosa, mejorando el rendimiento del
proceso de producción de etanol a partir de fuentes celulósicas. El trabajo fue
publicado en la revista Applied and Environmental Microbiology (Argenbio,
2009).
Probablemente el mayor esfuerzo se ha enfocado a la producción de
etanol a partir de almidón con S. cerevisiae. Existen levaduras amilolíticas
naturales como Saccharomycopsis diastalicus (que actualmente se considera
una variante de S. cerevisiae), S. fibuligera y Schwanniomyces sp.; pero, la
primera produce glucoamilasa que sólo es capaz de hidrolizar los enlaces α-
1,4 del almidón y, por tanto, realizar una degradación limitada del
polisacárido, mientras que las últimas son poco tolerantes al etanol y por ello
poco eficientes en su producción. Las amilasas de diferentes fuentes se han
69
clonado en diferentes en diversas cepas de S. cerevisiae; éstas incluyen α-
amilasas de trigo, de cebada, de ratón y de S. fibuligera, y glucoamilasas de
S. fibuligera, S. diastaticus y hongos del género Aspergillus.
Z. mobilis, también esta siendo modificada para mejor su rango de
azúcares fermentables. Con el fin de producir etanol a partir de lactosa
presente en suero de leche, los genes de β-galactosidasa y permeasa de E.
coli han sido clonados, a través de vectores adecuados, a cepas de Z.
mobilis. También se ha tratado de introducir plásmidos con el operón Lac de
E. coli para la utilización Z. mobilis, aunque son resultados modestos.
También se ha explorado la posibilidad de que Z. mobilis produzca etanol a
partir de xilosa, clonando los genes de Xanthomonas necesarios para el
catabolismo de esta pentosa (García et. al. 1993).
Los biocombustibles transgénicos fueron el tema estrella en la revista
científica Nature Reviews Genetics (Volumen IX de junio de 2008). En un
interesante artículo, se planteaban las posibilidades de la ingeniería genética
en plantas para la producción de Biocombustibles, en particular para la
producción de etanol a partir de cultivo de plantas lignocelulósicas. En última
instancia lo que se necesita para la producción de etanol son azúcares, y el
artículo planteaba la posibilidad real de utilizar la manipulación genética para
obtener variedades vegetales con una mayor cantidad de polisacáridos
(azúcares) y características que permitan una mejor rotura de la lignina,
celulosa y hemicelulosa de las plantas para acabar produciendo el etanol. En
el artículo se plantea que el futuro de la producción de etanol está en el
material celulósico complementado con el etanol a partir de grano, pero hay
varios inconvenientes, entre ellos:
- La producción de celulasas (enzimas que sean capaces de romper la
celulosa para utilizarla) se lleva a cabo en caros biorreactores
microbiológicos
- Los costes del pretratamiento del material lignocelulósico para eliminar
la lignina (primera capa de protección vegetal) y poder acceder a la
celulosa interior (Biocarburante, 2008).
70
Como se ve, el futuro en la producción del Bioetanol es promisorio y muy
interesante y en los próximos años los avances en la Ingeniería Genética y
Biotecnología de seguro darán como resultado una producción fermentativa
con materiales más baratos y microorganismos más eficientes.
71
5. CONCLUSIONES:
72
6. RECOMENDACIONES:
- Incentivar el desarrollo de mayor investigación referente a la búsqueda de
nuevas materias primas, al mejoramiento y optimización de las ya existentes
- Desarrollar investigación referente al mejoramiento genético de los
microorganismos fermentadores utilizados actualmente, para lograr la
optimización de los procesos fermentativos; y buscar nuevos y mejores
microorganismos fermentadores.
- Buscar nuevas maneras de optimizar la producción de Bioetanol a partir de caña
de azúcar, ya que, al ser un cultivo de elevada producción por hectárea, se
presenta como una materia prima con un elevado potencial de utilización.
- Conciliar las desventajas que presenta la producción industrial del Bioetanol,
tanto en el aspecto alimentario como en el aspecto medioambiental, ya que lo
deseable es que una energía renovable y limpia dañe lo menos posible en su
proceso de producción.
- Promover el desarrollo de políticas y lineamientos que conduzcan a un mejor
aprovechamiento de los Biocombustibles de acuerdo a nuestra realidad
nacional.
- Promover el desarrollo de cultivos energéticos en el área rural, cuidando de que
estos cultivos no compitan de manera indiscriminada con los cultivos
alimentarios. La sierra podría ser una zona excelente para el desarrollo de
dichos cultivos, ya que generaría nuevas fuentes de trabajo y utilizaría zonas de
cultivo abandonadas o mal empleadas.
- Informar a la población sobre las ventajas y desventajas de la utilización de los
Biocombustibles. Esto ayudará a tomar conciencia y a dar mayor apoyo a su
desarrollo y utilización.
- Promover en la comunidad universitaria la investigación referente a la búsqueda
de nuevas energías renovables y otros temas relacionados.
73
7. REFERENCIAS:
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de 2009 en http://es.wikipedia.org/wiki/Etanol_(combustible)
76
8. GLOSARIO:
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- Canola: También conocida como colza, raps o nabicol (Brassica napus). Es una
planta de la familia de las Brassicaceae con flores de color amarillo brillante,
cultivada en todo el mundo para producir forraje, aceite vegetal para consumo
humano y Biodiesel.
- Carbón mineral: Sustancia fósil, dura, butinosa y térrea, de color oscuro o casi
negro, que resulta de la descomposición lenta de la materia leñosa, y arde con
menos facilidad, pero da más calor que el carbón vegetal.
- Catalasa: Es una enzima que se encuentra en organismos vivos y cataliza la
descomposición del peróxido de hidrógeno (H2O2) en oxígeno y agua.
- Celulosa: Polisacárido complejo, compuesto exclusivamente de glucosa, es
pues, un homopolisacárido (compuesto por un solo tipo de monosacárido). Es
rígido, insoluble en agua y contiene desde varios cientos hasta miles de
unidades de β-glucosa. Es la biomolécula orgánica más abundante ya que forma
la mayor parte de la biomasa terrestre.
- Cepa: En microbiología y genética, una cepa es una variante genotípica de una
especie o, incluso, de un taxón inferior, usualmente propagada clonalmente,
debido al interés en la conservación de sus cualidades definitorias. Conjunto de
microorganismos que derivan de progenitores bien definidos, poseen una
dotación genética similar y conserva ciertas características que mantienen
durante varias generaciones.
- CO: Monóxido de carbono.
- CO2: Dióxido de carbono.
- Colonia: Grupo de individuos de la misma especie que viven en estado de
asociación. En micología, el término designa al conjunto de hifas que crecen a
partir de un solo punto y forman un talo redondeado o globoso.
- Conferencia de Kyoto: o Protocolo de Kyoto. Reunión, en diciembre de 1997, de
representantes de los países de la Convención Marco de las Naciones Unidas
sobre el cambio climático, creada en el seno de la Cumbre de la Tierra,
celebrada en Río de Janeiro en 1992. Establece que los países desarrollados
deben reducir sus emisiones de gases causantes del efecto invernadero en un
5,2% para el año 2012 respecto a las emisiones del año 1990. Sin embargo,
este protocolo debe de ser ratificado por al menos 55 países desarrollados
cuyas emisiones de gases de efecto invernadero sumen entre sí el 55% del
total.
- CONVEAGRO: Convención Nacional del Agro Peruano.
- Diploide: Son las células que tienen un número doble de cromosomas (2n), a
diferencia de un gameto, es decir, poseen dos series de cromosomas.
- Efecto invernadero: Término que se aplica al papel que desempeña la atmósfera
en el calentamiento de la superficie terrestre. Elevación de la temperatura de la
atmósfera próxima a la corteza terrestre, por la dificultad de la disipación de la
radiación calorífica debido a la presencia de una capa de óxidos de carbono
procedentes de las combustiones industriales.
- Energía biológica: Se refiere a la energía renovable, también llamada energía
alternativa o blanda. Este término engloba a una serie de fuentes energéticas
que en teoría no se agotarían con el paso del tiempo.
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- Enzima: Es una sustancia proteínica que producen las células vivas y que actúa
como catalizador en los procesos del metabolismo. Es específica para cada
reacción o grupo de reacciones.
- ETBE: Etil terbutil éter, aditivo de la gasolina, que mejora el número de octano y
puede sustituir al MTBE.
- Fuentes renovables: Son fuentes biológicas productoras de materia prima y
energía que en teoría no se agotarían con el paso del tiempo.
- Gas natural: Combustible procedente de las formaciones geológicas y
compuesto principalmente por metano (CH4). Inodoro en su estado natural,
proviene de la descomposición de compuestos orgánicos.
- Gases de efecto invernadero: Son gases contaminantes emitidos en gran
medida por la actividad industrial humana; entre estos gases tenemos el dióxido
de carbono, el monóxido de carbono, el metano, el óxido nitroso, los
clorofluorocarbonados (CFC) y el ozono. Estos gases están relacionados con el
calentamiento global.
- Gemación: Forma de reproducción asexuada de las levaduras (Ascomycotina).
En el proceso el citoplasma de la célula madre empuja la membrana celular
hacia fuera para dar lugar a un brote o yema que luego se separará para dar
una célula hija.
- Haploide: Es aquella célula que contiene un solo juego de cromosomas o la
mitad (n = haploide) del número de cromosomas en células diploides (2n =
diploide).
- Hidrólisis: Es la descomposición de compuestos orgánicos por la interacción del
agua. Descomposición química de un compuesto por acción del agua en
productos más simples.
- Hidromiel: Es una bebida alcohólica fermentada a base de miel y agua.
- Hopanoides: Son compuestos pentacíclicos similares a los esteroles, cuya
función principal es mejorar la fluidez de la membrana plasmática en los
procariotas.
- Indol: Es un compuesto orgánico heterocíclico, con estructura bicíclica que
consiste en un anillo de seis miembros (benceno) unido a otro de cinco
miembros (pirrol). Es usado para identificación bioquímica de diversos
microorganismos.
- Invertasa: Enzima que cataliza la hidrólisis de la sacarosa a glucosa y fructosa,
frecuentemente a esta reacción se denomina “inversión”. La invertasa se puede
obtener de las propias células de levadura.
- Lignina: Es un péptido presente en las paredes celulares de organismos del
Reino Plantae y también en Dinophytas. Proviene del latín lignum, que significa
madera; así que las plantas que tienen gran cantidad de lignina se les denomina
leñosas. Es el polímero natural más complejo en relación a su estructura y
heterogeneidad.
- Melaza: Es un producto líquido espeso derivado de la caña de azúcar y en
menor medida de la remolacha azucarera, obtenido del residuos restante en las
cubas de extracción de los azúcares.
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- Metabolismo: Es el conjunto de reacciones y procesos físico-químicos que
ocurren en una célula. Estos complejos procesos interrelacionados son la base
de la vida a nivel molecular y permiten las diversas actividades de las células:
crecer, reproducirse, mantener sus estructuras, responder a estímulos, etc.
- Metanol: Alcohol cuya molécula tiene un átomo de carbono. Es un líquido
incoloro, semejante en su olor y otras propiedades al alcohol etílico. Es tóxico.
- Mezcla azeotrópica: o azeótropo; es la mezcla de temperatura de ebullición de
máxima o de mínima.
- Mol: Unidad de sustancia empleada en el sistema Internacional de Unidades,
definida como la cantidad de sustancia de un sistema que contiene tantos entes
elementales como átomos hay en 0,012 Kg del nucleído carbono-12, o como la
cantidad de una sustancia cuyo peso en gramos equivale a su número atómico.
- Mosto: En particular se lo conoce así al zumo o jugo obtenido del estrujado de la
uva, que será luego utilizado para el proceso de fermentación. En términos
generales sería cualquier jugo, zumo de frutas o cualquier otra elemento
extraído en estado acuoso que luego será usado para la fermentación y
producción de etanol.
- MTBE: Metil terbutil éter, aditivo de la gasolina, que mejora el número de octano.
Se obtiene a partir del petróleo.
- NADH: Es la Dinucleótido de Nicotinamida Adenina Reducida (por la presencia
del H+). Es una coenzima que contiene la vitamina B3 y cuya función principal es
el intercambio de electrones e hidrogeniones en la producción de energía de
todas las células.
- Octanaje: También llamado número de octano. Es la capacidad antidetonante de
una gasolina; propiedad que asegura la estabilidad al encendido de la gasolina
hasta el momento en que salta la chispa. Una gasolina con un octanaje menor al
requerido por el motor, no soporta las condiciones de presión y temperatura de
la cámara, autoinflamándose antes de la aparición de la chispa de la bujía.
- OPEP: Organización de Países Exportadores de Petróleo, organización
internacional que se ocupa de coordinar las políticas relativas al petróleo
programadas por sus países miembros. Fundada en 1960, constituida por los
sgtes. países: Arabia Saudita, Argelia, Emiratos Árabes Unidos, Indonesia, Irak,
Irán, Kuwait, Libia, Nigeria, Qatar y Venezuela.
- Oxidasa: Es una enzima que cataliza una reacción de oxidación/reducción
envolviendo oxígeno molecular (O2) como aceptor de electrones. En estas
reacciones el oxígeno se reduce a agua o a peróxido de hidrógeno. Las
oxidasas son una subclase de las oxidorreductasas.
- Petróleo: Líquido oleoso bituminoso de origen natural compuestos por diferentes
sustancias. También recibe el nombre de petróleo crudo, crudo petrolífero o
simplemente “crudo”. Se encuentra en grandes cantidades bajo la superficie
terrestre y se utiliza como combustible y materia prima para la industria química.
- Piñón: Arbusto del género Jatropha, oriunda del oeste de Sudamérica,
actualmente distribuida hasta México por el norte y Bolivia por el sur. Es un
arbusto perenne fácilmente de propagar mediante sus tallos maduros o sus
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semillas. Sus tallos pueden ser utilizados para obtener pulpa para papel, de su
semillas se puede obtener un aceite de uso industria.
- Pulque: Es una bebida alcohólica que se fabrica a partir del jugo fermentado del
maguey, especialmente del maguey pulquero (Agave salmiana). Es una bebida
tradicional mexicana.
- Recombinante: Célula u organismo que resulta de la recombinación de genes en
la molécula de ADN, independientemente de si se ha producido de forma natural
o por medios artificiales.
- Sacarosa: Componente principal del azúcar de mesa, es un disacárido formado
por una molécula de glucosa y otra de fructosa. Su nombre químico es alfa-D-
glucopiranosil (1->2)-beta-D-fructofuranósido y su fórmula química es: C12H22O11.
- YP/S: Coeficiente de rendimiento de producto.
- YX/S: Coeficiente de rendimiento celular (biomasa).
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9. ANEXOS:
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Tipo de transformación para obtener un Biocombustible a partir
de Biomasa*
Transformación Proceso Biocombustible
Física Fragmentación Leñas y astillas
Fragmentación
Física y química (a
Secado Pelets y briquetas
veces)
Compactación
Carbón vegetal y
Fragmentación
briquetas de carbón
Carbonización
vegetal
Fragmentación
Diferentes procesos Líquido piroleñoso
químicos
Fragmentación
Hidrólisis ácida o Líquido de hidrólisis
Hidrólisis básica
Físico-químico
Alcoholización Bioetanol
Fragmentación
Procesos físicos y/o
Aceite biológico
químicos de
obtención de aceite
Fragmentación
Obtención de aceite Metiléster
Esterificación
Gasificación Biogás
Tomado de Ca mps et. al. 2002
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b
1. Considerado económica y técnica me nte adecuado
2. La viabilidad económica y técnica dependen de las condiciones particulares y los
usos finales
3. Considerado económica y técnica mente inadecuado
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Esquema de un quimiostato. 1. biorreactor; 2. reservorio de medio de cultivo; SN: sonda de
nivel; O2: electrodo de medición de oxígeno disuelto; pH:electrodo de medición de pH; T:
termómetro.
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Materia agrícola
Azúcar Maíz
(insumo agrícola)
Producción total de Millones de galones
5.019,2 6.498,6
etanol (2007) líquidos EUA
Total de tierras
355 270(1) Millones de ha
cultivables
Área total plantada
Millones de ha (% total
del cultivo para 3,6 (1%) 10 (3,7%)
arable)
producir etanol
Productividad por ha
6.800 – 8.000 3.800 – 4.000 L etanol/ha producidos
plantada
Relación de la energía
Balance energético obtenida del
8,3 a 10,2 veces 1,3 a 1,6 veces
(producto/insumos) etanol/energía gastada en
su producción
Reducción emisiones % de emisiones evitadas
gases de efecto 86 – 90%(2) 10 – 30%(2) al sustituir gasolina, sin
invernadero cambios en uso del suelo
Tiempo de restitución
Escenarios con cambios
del carbono por uso 17 años(3) 93 años(3)
en el uso del suelo
de tierras nuevas
Gasolineras con
etanol disponible en 33.000 (100%) 873(0,5%)
el país
Participación de % del total de gasolineras
mercado del consumo 50%(4) 4% existentes en el país.
de etanol EUA tiene 170.000
% de consumo total en
Costo de producción base volumétrica. Abril
0,83 1,14
(USD/galón) 2008 para brasil y año
2006 para EUA
2006/2007 para Brasil
Subsidio agrícola (en
0 0,51/galón (22 ¢/L), 2004 para EUA
USD)
(35 ¢/L)
Brasil no importa etanol,
Aranceles de
0 0,54/galón EUA si importa, la
importación (en USD)
mayoría de Brasil
*Adaptado de Wikipedia, 2008.
Notas: (1) Sólo EUA contiguo, excluyendo Alaska. (2) Supone que no hay cambios en el uso del suelo. (3)
Supone cambios en los usos del suelo con el cultivo de caña de azúcar en el cerrado brasileño y del maíz en la
pradera central estadounidense. (4) al incluir los vehículos de motor diesel, el uso de etanol en el sector vial
fue cercano al 18% en 2006.
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Ejemplo de un complejo Agroindustrial para la producción de energía a base de caña de azúcar.
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