Hematopoyesis, aspectos fisiopatologicos factores hematopoyeticos Introduccin La sangre es tejido conectivo especializado, compuesto por plasma sanguneo y los

llamados elementos figurados o elementos formes, el segundo componente celular de la sangre: los glbulos rojos, los glbulos blancos y las plaquetas. En trminos mdicos se relaciona a la sangre como hemo o hemato, por el trmino del idioma griego haima que se utiliza para la sangre. La funcin principal de la sangre es proveer nutrientes (oxgeno, glucosa), elementos constituyentes del tejido y eliminar desperdicios (como dixido de carbono y cido lctico). La sangre tambin permite que clulas y distintas sustancias (aminocidos, lpidos, hormonas) sean transportados entre tejidos y rganos. Los problemas en la composicin de la sangre o problemas de circulacin, pueden acarrear una disfuncin del tejido. La sangre circula alrededor de los pulmones y el cuerpo a travs de los vasos sanguneos, fenmeno provocado por la accin de bombeo del corazn. Hematologa Es la rama de la medicina que estudia el proceso qumico y fisiolgico de la sangre y sus componentes, los llamados rganos hemopoyticos o hematopoyticos (mdula roja de los huesos, ganglios lnfticos, bazo, etc), as como las enfermedades sanguneas. La hematologa incluye el estudio de la etiologa, diagnstico, tratamiento, pronstico y prevencin de las enfermedades de la sangre. Los mdicos especialistas en este dominio son llamados hematlogos. Las enfermedades hematolgicas afectan la produccin de sangre y sus componentes, como los glbulos rojos, la hemoglobina, las protenas plasmticas, el mecanismo de coagulacin, etc.

Hematopoyesis Es un proceso de formacin sangunea y ms especficamente de clulas sanguneas que son todas ellas derivadas de stem cells. Las clulas madre que se encuentran en la mdula sea (clulas madre hematopoyticas) son las responsables de formar todas las clulas que circulan por la sangre. Las clulas sanguneas son degradadas por el bazo y los macrfagos en el hgado. Este ltimo, tambin elimina las protenas y los aminocidos (el hgado secreta muchas pequeas protenas en la orina). Los eritrocitos usualmente viven algo ms de 120 das antes de que sean sistemticamente reemplazados por nuevos eritrocitos creados en el proceso de hematopoyesis.

Clulas hematopoyeticas Stem cells, celula madre o pluripotencial

Celulas que poseen tres caractersticas principales Autoperpetuacion o autorrenovacion: capacidad de proliferacin. Diferenciacin o pluripotencialidad: capacidad de dar origen a multiples estirpes celulares. Identificabilidad: celulas que son totalmente iguales

clulas progenitoras Lo constituyen principalmente clulas con capacidad para diferenciarse hacia una nica lnea celular y un pequeo porcentaje de clulas con capacidad bipotencial, que darn lugar a las primeras clulas reconocibles de cada serie. Estas clulas

entran con frecuencia en mitosis, a diferencia del compartimento anterior. Funcionalmente se definen por su capacidad para formar colonias in vitro. La clula madre pluripotencial (CFC o CFU-ML) dar origen a las poblaciones linfocticas (CFU-L) y mieloides. Las clulas madre multipotentes mieloides se denominan CFU-GEMM (clula formadora de colonias granulocticas, eritroides, megacariocticas y monocticas). De ella proceden las diversas clulas madre comprometidas o unipotenciales. Compartimento de clulas precursoras La mayora de las clulas de la mdula sea son precursores comprometidos (eritroides, granulocticos, megacariocticos, etc.) que se caracterizan por su poca capacidad de autorrenovacin. Presentan la morfologa caracterstica de cada lnea hemopoytica. Todas estas clulas hallan en la mdula sea el microambiente adecuado para su desarrollo y la diferenciacin hacia clulas hematopoyticas maduras. Este microambiente lo constituyen clulas estromales de origen mesenquimal (clulas endoteliales, fibroblastos, adipocitos, osteoblastos) y clulas de origen no mesenquimal (macrfagos). Estas clulas producen la matriz extracelular y concentran localmente citoquinas hemopoyticas que pueden inhibir o inducir la proliferacin y diferenciacin de las clulas progenitoras . Cuando la mdula sea falla, la aparicin de manifestaciones clnicas depende de la velocidad con la que se produce la clu la final. As, lo primero en disminuir seran los granulocitos, aumentando la posibilidad de infecciones, despus disminuyen las plaquetas, dando lugar a hemorragias y por ltimo aparecera la anemia. Cuando existe una demanda perifrica excesiva de elementos sanguneos, el nivel de la hematopoyesis puede aumentar 2 a 8 veces.

Valoracin clnica de la eritropoyesis La produccin eritroide se puede alterar por defecto, dando lugar a las anemias, o por exceso y se originan las poliglobulias. Las manifestaciones clnicas son debidas a la hipoxia tisular por alteracin de la capacidad de transporte del oxgeno de la sangre, en el caso de la anemia, y por aumento de la viscosidad y volumen sanguneo, en el caso de la poliglobulia o policitemias. Manifestaciones clnicas (anomalias) Sndrome anmico Cansancio, astenia, palpitaciones, zumbido de odos, palidez cutaneomucosa, taquicardia, disnea de esfuerzo, crisis de angina, cardiomegalia, congestin pulmonar, ascitis y edema.

 Poliglobulia Aspecto abotargado, cefalea, mareo, acfenos, tinitus, alteraciones visuales (escotomas, visin doble o borrosa), hemorragias nasales y por lceras ppticas, sntomas vasculares perifricos de insuficiencia tanto arterial como venosa, trombosis en policitemias primarias, trombosis de las coronarias, insuficiencia cardaca congestiva, prurito y esplenomegalia. Datos de laboratorio Ph 7.4 hematocrito recien nacido: 44 - 56 a los 3 meses :32 - 44 al ao de edad: 36 - 41 entre 3y 5 :36 - 43 de los 5 a los 15 aos: 37 - 45 hombre adulto :40 -54 mujer adulta :37 47

acido urico hombres adultos: 4 y 8.5 mg/dl mujeres adultas: 2.5 a 7.5

nios pequeos: 2.5 a 5

hierro en sangre adulto hombre: 80 a 180 ug/dl adulto mujeres 60 a 160 nios menores de 1 ao 100 a 250 nios 50 a 120 ug/dl

Factores hematopoyeticos Las citoquinas son un grupo de protenas secretadas de bajo peso molecular (por lo general menos de 30 kDa). Se unen a receptores especficos de la membrana de las clulas donde van a ejercer su funcin, iniciando una cascada de transduccin intracelular de seal que altera el patrn de expresin gnica, de modo que esas clulas diana producen una determinada respuesta biolgica. Caractersticas - pleiotropa (mltiples efectos al actuar sobre diferentes clulas). - redundancia (varias citoquinas pueden ejercer el mismo efecto). - sinergismo (dos o ms citoquinas producen un efecto que se potencia mutuamente). - antagonismo (inhibicin o bloqueo mutuo de sus efectos). - de tipo autocrino

- de tipo paracrino - (en pocas ocasiones) de tipo endocrino.

Calsificacion Segn modo de accion Factores que actuan directamente Ejemplo: G-CFC, GM-CFC CFC-M e IL-3 Factores que necesitan de otros factorespara actuar Ejemplo: IL-1, STEEL e IL-6 Segn su estructura: Monomericos Glucoproteinas dimericas: GM-CSF, G-CSF, IL-2, IL3 Dimericos M-CFS Y FACTOR STEEL

2) Receptores de FCH
Estos se dividen en 2 grandes familias: a) Familia de receptores con actividad tirosin-cinasa: Como el M-CSF(su receptor es el producto del gen c-fins situado en el brazo largo del cromosoma 5) y SCF(su receptor es el producto del gen C-kit situado en el brazo largo del cromosoma 4) que son ligandos de proteinas que actan como receptores y poseen dominio citoplasmtico de actividad tirosincinasa. b) Superfamilia de receptores hematopoyticos: Incluye a las mayoria de los receptores para los FCH; eritropoyetina (EPO); IL-2; IL-3; IL-4; IL-6; IL-7; GM-CSF y GCSF. Los receptores de estas citocinas estn formadas por 2 o 3subunidades que son necesarias para que acten como receptores de alta afinidad. Receptores de factores de crecimiento hemopoyticos o CLASE I. Pertenecen a la familia de receptores alfa, beta y gamma. Se han reconocido en este grupo, las siguientes citocinas: IL 2, IL-3, IL-5, IL 6, IL 7, IL 9, IL 13, IL 15, GM-CSF (factor estimulante de colonias granulocitos-monocitos) y G-CSF ( Factor estimulador de colonias de Granulocitos). El receptor para el GM-CSF se expresa en los PMN como una clase nica de alta afinidad (Kd de 199 pM; entre 300 a 2800 receptores por clula). Los progenitores mieloides, eritrocitos, clulas dendrticas, megacariocitos, clulas plasmticas, ciertos linfocitos T, clulas endoteliales, eosinfilos, macrfagos, monocitos y clulas mieloides leucmicas expresan receptores, las dos ltimas de afinidad intermedia (Kd de 10 a 40 pM) y el resto de baja afinidad (Kd <2 pM). El receptor de la IL-2 consta de tres cadenas: alfa, beta y gamma.La expresin de las tres cadenas da lugar al receptor de IL-2 de alta afinidad;la expresin de las cadenas beta y gamma da lugar slo a un receptor de IL-2 de afinidad intermedia, la cadena alfa representa slo un receptor de afinidad baja.

Figura 1: Receptores de IL-3, IL-5, GM-CSF

Figura 2: Receptores de Clase I

Figura 3. Receptor para el GM-CSF y vas de transduccin de seales

Factores de crecimiento hemopoytico Como se sabe las citocinas tiene una gran actividad pleiotropica ejerciendo su actividad sobre mltiples clulas y tejidos y que no son especificamentede un solo tipo celular. Los factores que afectan a la produccin de hemates son la IL-3 (multiFEC), IL-9, IL-11, SF, IGF1, TPO y GM-CSF induciendo proliferacin de los progenitores primitivos eritroides. Otro factor que tambin puede influir es la angiotensina II. Estos factores inducen proliferacin eritroide en presencia de EPO que acta como factor pivote y previene la muerte celular programada (apoptosis) de la mayora de los progenitores eritroides. El SF (Steel factor) e IGF1 (Insulin-like Growth factor) pueden actuar como reguladores nicos de la eritropoyesis.

Fig. 4. Regulacin de la hematopoyesis en el microambiente medular. Proceso complejo donde las clulas del estroma producen citoquinas o factores estimulantes e inhibidores del crecimiento de los progenitores. Estas citoquinas van a estar reguladas por las propias clulas hematopoyticas. Las clulas del estroma producen los componentes de la matriz extracelular, donde se encuentran tambin otros ligandos de receptores superficiales, y las interacciones entre los progenitores, las clulas del estroma y los ligandos de la matriz extracelular influyen enormemente en el crecimiento y supervivencia de los progenitores.

Citocinas implicadas en el crecimiento y la diferenciacin hematopoytico Los FCH se dividirn en dos grupos: Citocinas que actan en estadios mas tempranos de la diferenciacin Citocinas que actan sobre progenitores mas diferenciados Comprenden un grupo amplio de citocinas que promueven el crecimiento y diferenciacin de las clulas sanguneas maduras a partir de clulas madre hematopoyticas. Son producidas por clulas del estroma de la mdula sea o por linfocitos maduros activados. Algunas de estas citocinas reciben el nombre genrico de factores estimuladores de la formacin de colonias (CSF) por su capacidad para estimular la formacin de colonias celulares en los cultivos de mdula sea . (Tabla 1). A continuacin describimos las ms relevantes: IL-3. Es producida mayoritariamente por los linfocitos T activados y tambin por mastocitos. Induce la proliferacin y diferenciacin de progenitores hematopoyticos tempranos de todas las series sanguneas, por lo que tambin es conocida como multi-CSF. Induce fundamentalmente la hematopoyesis en situaciones de stress que requieren una respuesta rpida, siendo menos claro su papel en la hematopoyesis constitutiva. IL-5. Es secretada en forma glicosilada por LT CD4+ activados del tipo Th2. Es esencial en la proliferacin y diferenciacin de las clulas precursoras de los eosinfilos, as como en el mantenimiento de la actividad de los eosinfilos maduros siendo la responsable de la eosinofilia en infecciones parasitarias. Sobre los linfocitos B acta incrementando su proliferacin y estimulando la produccin de IgA. IL-7. Es producida por clulas estromales de la mdula sea. Promueve la maduracin de progenitores pro- y pre-B hacia linfocitos B maduros en la mdula sea y de linfocitos T inmaduros en el timo fetal y adulto. Tambin acta como factor de crecimiento para linfocitos T y B.

IL-9. Es producida por linfocitos T activados. Tiene un amplio espectro de actividades no muy bien definidas entre las que se incluye la proliferacin de precursores eritroides. Al igual que la IL-7, tambin induce la proliferacin de LT y estimula la produccin de inmunoglobulinas en clulas B. IL-11. Es producida por fibroblastos del estroma de la mdula sea y otros tipos celulares. Estimula la megacariocitopoyesis y sinergiza con otras citocinas para estimular el crecimiento de otros precursores hemticos. Comparte algunas funciones con la IL-6, como la induccin de protenas de fase aguda en el hgado. Tambin se ha descrito su capacidad como estimuladora de la secrecin de inmunoglobulinas por clulas B en respuestas Tindependientes. GM-CSF. Es producido por linfocitos T activados y por otras clulas como fibroblastos, clulas endoteliales y monocitos. Es un polipptido con varios posibles lugares de glicosilacin. Induce la proliferacin de los progenitores de granulocitos y macrfagos, producindose en respuesta a estmulos especficos en situaciones que requieren una elevada produccin de stas clulas. Tambin puede actuar sobre granulocitos y macrfagos maduros. G-CSF. Es producido por fibroblastos, clulas endoteliales y monocitos en respuesta a estmulos especficos. Acta sobre los precursores hematopoyticos de los granulocitos y sobre los granulocitos maduros. La granulocitosis asociada a ciertas infecciones se debe a que el LPS de las paredes bacterianas es un potente inductor de la produccin de esta citocina. Se han descrito otras funciones de este factor, como la estimulacin de la fagocitosis y de la citotoxicidad mediada por Ac. M-CSF. Es producido por monocitos y macrfagos maduros activados y est implicado en el desarrollo de las clulas progenitoras de los macrfagos. Tambin se ha visto que facilita el desarrollo de la placenta, siendo producido por clulas del epitelio uterino en respuesta a los estrgenos.

TABLA 1: Citocinas implicadas en el desarrollo hematopoytico Citocina Efectos biolgicos principales Clula productora principal Estimula la proliferacin y diferenciacin de Linfocitos T activados mltiples lneas celulares : granuloctica, IL-3 eritroctica, megacarioctica, as como eosinfilos y mastocitos. Diferenciacin, proliferacin y activacin de Linfocitos Th2 activados IL-5 eosinfilos IL-7 Maduracin de linfocitos T y B Celulas estromales de la mdula sea IL-9 Proliferacin de precursors eritroides y de LT Linfocitos T activados IL-11 Megacariocitopoyesis Fibroblastos de la mdula sea Desarrollo y diferenciacin de : Linfocitos T activados GM-CSF granulocitos,monocitos,eosinfilos y basfilos Desarrollo y diferenciacin de granulocitos y Fibroblastos, clulas endoteliales y aumenta la actividad funcional de clulas monocitos maduras y junto con la IL3 aumenta G-CSF proliferacin de clulas multipotentes y puede inducir a la clula mas inmadura a entrar en ciclo celular. Desarrollo y diferenciacin de la lnea Monocitos y macrfagos M-CSF monocitomacrofgica. Acta en estadios mas tempranos de la Estroma, clulas endoteliales y diferenciacin hematopoytica. Monocito-macrfago SCF Puede estimular el desarrollo de colonias mieloides y eritroides en combinacin con otros factores: GM-CSF, G-CSF, IL-3 o EPO. Estimula la proliferacin y la diferenciacin Hgado, rin y msculo liso.En menor Trombopoyetina de las clulas progenitoras megacariocticas .proporcin en bazo y clulas tem. Aumnenta la produccin plaquetaria .

3) Factores inhibidores de la hematopoyesis

La hematopoyesis normal est controlada por un sistema dinmico integrado por fac- tores de estimulacin y de inhibicin. As como los factores estimuladores centran su accin en la proliferacin y diferenciacin de los progenitores, los inhibidores previenen la prdida de clulas madre y progenitores hematopoyticos impidiendo la mitosis celular (tabla 1). Los factores inhibitorios conocidos son: Factor transformador del crecimiento (TGF- ) Inhibe la expresin de factores de crecimiento y sus receptores (CFC-MK y tambin las CFC-GM ), induciendo la apoptosis y la expresin de genes inhibitorios de la mitosis. Se localiza en los grnulos alfa de las plaquetas. Factor de necrosis tumoral Estimula la granulopoyesis (potencia la accin proliferativa de la IL-3 y el FEC-GM) pero inhibe la eritropoyesis. Tetrapeptido SDKP Reduce la respuesta proliferativa inducida por los factores de crecimiento sobre las clulas cd34 mas inmaduras. Factor plaquetario 4 Factor localizado en los grnulos alfa plaquetarios inhibe la proliferacin de los progenitores megacariocitopoyeticos y tambin las otras lneas celulares. Interfern Suprime el crecimiento de progenitores celulares con linaje determinado y las LTCIC (clulas iniciadoras de cultivos a largo plazo que se corresponden con clulas stem primitivas) y parece ser un mediador de la anemia aplsica.

Protena inflamatoria del macrfago (MIP-1) Es un potente inhibidor de la proliferacin de clulas stem, pero estimula el creci- miento de progenitores maduros

Bibliografia http://db.doyma.es/cgibin/wdbcgi.exe/doyma/mrevista.go_fulltext_o_resumen? esadmin=si&pident=13017471 http://www.uco.es/grupos/inmunologia-molecular/inmunologia/tema09/etexto09.htm http://med.unne.edu.ar/catedras/bioquimicaanterior/citoquinas.htm#_Toc10263860 Abbas AK, Lichtman A. H. Inmunologa Celular y Molecular. Interamericana 2002.