Actividad antibacteriana, de 11 de aceites esenciales contra Bacillus cereus tyndallized en caldo de zanahoria Resumen La actividad antibacteriana de 11 aceites esenciales

de plantas aromticas en contra de la cepa INRA L2104 los alimentos de los patgenos Bacillus cereus crecido en el caldo de zanahoria a los 16 aos se ha estudiado JC. La cantidad necesaria de los aceites esenciales de nuez moscada, menta, clavo, organo, canela, sasafrs, salvia, tomillo o el romero para producir 14-1110% con la ampliacin de la fase de retraso determinado. Total inhibicin del crecimiento de las esporas bacterianas, se observ a algunos de los agentes antimicrobianos ensayados. La adicin Al 5 de aceite esencial de canela por cada 100 ml de caldo en combinacin con las temperaturas de refrigeracin de V 8 JC producido condiciones necesarias para inhibir el crecimiento de B. cereus, por lo menos 60 das en un modelo, los alimentos refrigerados mnimamente procesados producto, hecho con zanahorias y tyndallized. Esto es especialmente importante teniendo en cuenta que el psicrtrofas enterotoxigenic cepa de B. cereus INRA TZ415 pudo crecer en este sustrato a bajas temperaturas en ausencia de cualquier aceite esencial. Adems, el estudio de las caractersticas sensoriales del producto final sugiere que el uso de aceite esencial de canela puede ser considerarse como una alternativa a los conservantes de alimentos''tradicional''. D 2002 Elsevier Science BV Todos los derechos reservados. 1. Introduccin El creciente inters en la sustitucin de los tradicionales''cin de conservacin de alimentos'', y tanto los antimicrobianos antioxidantes, por naturales ha fomentado la investigacin sobre vegetales, las fuentes y la seleccin de materiales vegetales con el fin de identificar nuevos compuestos. Se ha conocido desde la antigedad que las especias y sus los aceites esenciales tienen diferentes grados de antimicrobianos actividad (Shelef, 1983; Zaika, 1988; Beuchat y Golden, 1989; y Deibel Ting, 1992; Juven et al. 1994; Tassou et al., 1995; Chang, 1995; Sivropoulou et al., 1996; Chaibi et al., 1997; Wan et al., 1998; Lachowicz et al., 1998). Los principales antibiticos componentes de las especias y sus aceites esenciales son, por ejemplo, eugenol en el clavo, allicin en ajo, cinnamic aldehdo eugenol y en la canela, el carvacrol y el timol en organo y tomillo, vainilla y vainillina en frijoles. La actividad antimicrobiana de aceites esenciales componentes de los alimentos contra los patgenos, incluidos los hongos productores de micotoxinas, tambin ha sido probado (Bullerman et al., 1977, Kim et al., 1995, Thompson, 1996; Ultee et al., 1998, 2000). Ms recientemente, la planta extractos se han desarrollado y propuesto para su uso en alimentos como antioxidantes naturales (Frankel et al., 1996; Curvelier et al., 1996; Basaga et al., 1997) y / o antimicrobianos (Huhtanen, 1980; Ginesta-Peris et al. 1994; y GmezAlmonte Holt, 1995; y Delaquis Mazza, 1995; Shin-Park, 1999; Del Campo et al. 2000; Hsieh, 2000; Hsieh et al., 2001). Zanahoria (Daucus carota L. var. Sativa) ofrecen diversas opciones de produccin y transformacin, de plomo cin a la diversidad de alta calidad refrigerados mnimamente procesado (PGR) a los productos que sean atractivos para los consumidores debido a su originalidad y la facilidad con la que se utilizan. Por este motivo, hay diversos productos que van desde manojos de zanahorias envuelto en celofn a todos los tipos de plstico envuelto presentaciones: pelado, cortado en dados, en rodajas, ondulado cortado, auto - putrefaccin palos, etc, as como jugo de zanahoria y la zanahoria pur. Bacillus cereus es una formadora de esporas de patgenos a menudo asociada con las enfermedades causadas por alimentos toxinas. Est presente en listos para comer a base de vegetales alimentos (King et al., 1991; y Kautter Harmon, 1991; Nguyen-El y Carlin, 1994; Kaneko et al., 1999; Carlin et al., 2000; Del Torre et al., 2001; y Valero al., 2002a). Psicrotrfas enterotoxigenic cepas Se han aislado de refrigerados mnimamente pro - procesado de alimentos ampliado durabilidad (RMPFEDs) sobre la base de hortalizas. Estas cepas pueden crecer a temperaturas de refrigeracin en la zanahoria y calabacn caldos, cocidos y pur de zanahoria (Valero et al., 2000, En prensa (b)). El primer objetivo de este estudio fue determinar la actividad antibacteriana de varios aceites esenciales en contra de la B. cereus cepa INRA L2104 crecido en caldo de zanahoria a 16 JC. Es bien sabido que la de actividad antibacteriana vara segn el patgeno cepa, y puede verse influida por la temperatura de almacenamiento de los alimentos. Por lo tanto, lo esencial aceite de canela, el medio ms eficaz de acuerdo con la experimento anterior, se prueba en contra de la L2104 cepa INRA y los otros tres B. cereus ms de las cepas de la gama de temperaturas de 5o-16o JC. Desde que el uso de conservantes de origen natural pueden alterar el sabor de los alimentos debido a los sabores asociados, la caractersticas sensoriales de zanahoria caldo de completarse con aceite esencial de canela tambin fueron analizados. 2. Materiales y mtodos 2.1. Cepas bacterianas

Cepas de B. cereus INRA TZ415 y el INRA L2104, aislados de RMPFEDs que contienen las verduras, se proporcionada por el Dr. Frdric Carlin, Institut National de la Recherche Agronomique, Centro de Investigaciones d'Avignon-Station de Technologie des Produits Veg - taux, Domaine de Saint-Paul-sitio Agroparc, Avignon, Francia. Son enterotoxigenic cepas productoras toxina diarreica. Cepa INRA TZ415 es capaz de crecer a 5 y 8 de JC en el caldo de zanahoria, mientras que la cepa INRA L2104 no crece a estas temperaturas (Valero et al. 2000). La EPSO-15CA-y la EPSO 25TO cepas pertenecen a nuestra propia coleccin de B. cereus y se aisladas de muestras de las zanahorias (CC) y los tomates (A), respectivamente. La esporulacin y el almacenamiento de las diferentes cepas se llevaron a cabo siguiendo exactamente el procedimiento descritos por nosotros en un documento anterior (Valero et al. 2000). Todas las cepas se caracterizaron y la idenficado por la API 50CH/20E fenotpica sistema usando APILAB Plus de software, junto con otros pruebas de motilidad, oxidasa y actividad anaerbica crecimiento (Valero et al., 2002a). 2.2. Preparacin del caldo de la zanahoria Las zanahorias de la variedad Nantesa fueron comprados en una supermercado local. 500 g de muestras fueron lavadas, pelados, pur con 850 ml de agua destilada utilizando un Tecator homogeneizador de 1094, y se filtra a travs de un malla de nylon de 0,5 mm de dimetro. Acuoso extracto obtenido se dispensan en 100 ml de volumen en frascos estriles y se calienta a 80 JC por 1 h para las tres das consecutivos. Se almacena a temperatura ambiente entre los tratamientos trmicos. Este tratamiento trmico fraccionado cin o tyndallization siempre un buen nivel de descontaminacin (0-1 ufc ml A 1 fondo de microla flora en el resto de caldo de zanahoria) para la inoculacin mientras que los estudios no daar la calidad de la final producto. Propagacin de enchapado en B. cereus polimixina - Manitol-Yema de huevo rojo fenol-Agar (PMYPA) medio selectivo y en placa de agar (PCA) se utilizados para la deteccin de B. cereus y de contar los aerobios mesfilos totales a 30 de JC (Valero et al., A Prensa (b)). 2.3. Aceites esenciales Todos los aceites esenciales utilizados en este estudio fueron obtenidos a partir de Iberchem (Alcantarilla, Murcia, Espaa) y Destilera Mun ~ oz Glvez (Murcia). Que pro - producir y vender comercialmente los aceites esenciales y sus purificado componentes. Las concentraciones de los 11 esen - probado aceites esenciales se enumeran en la Tabla 1 . Iban del Al 5 de 400 por 100 ml de caldo en funcin de la zanahoria el aceite esencial analizarse. 2.4. Inoculacin de zanahoria sustrato Los caldos fueron equilibrados en la noche a la maana las temperaturas de incubacin adecuadas: 5, 8, 12 y 16 JC. Para la inoculacin, las suspensiones de esporas fueron inicial diluido con agua destilada para dar un recuento de esporas 10 4 esporas ml A 1 Cada caldo fue inoculado con 1 ml seleccionado de la cepa de dilucin para dar una concentracin final tracin de 10 2 ufc ml A 1 Los caldos fueron incubados en refrigerados incubadoras sin agitacin. La temperatura ATURALEZA se registr y se mantuvo dentro de F 1 de la JC temperatura deseada. 2.5. Curvas de crecimiento La actividad antibacteriana de diversos tipos y las concentraciones de aceites esenciales fue probado contra B. cereus INRA L2104 cepa en caldo de zanahoria a los 16 JC. Las muestras (1 ml) fueron retirados antes de agitado caldo de culturas en intervalos de tiempo adecuados. Con este fin, una cabeza de muestreo se utiliz (Suther tierra et al., 1996). Las diluciones se hicieron, si es necesario, peptona en agua, y B. cereus se cuenta por form el PCA con tres placas de propagacin (Valero et al., 2000, en prensa (b)). Se obtuvieron curvas de crecimiento y equipado con la funcin de Baranyi et al. (1993). Para cada aceite esencial de la prueba en este experimento, un particular, la concentracin se ha elegido de acuerdo con la aumento relativo de la fase de retraso observado. La influen Al docente, de 5 de aceite esencial de canela en polvo por 100 ml de caldo de zanahoria en el crecimiento de las distintas B. cereus ms de las cepas de la gama de temperaturas de JC se 5o-16o investigado. Dos reproducir las curvas de crecimiento en cada condicin se realizaron; culturas se mantuvieron durante al menos 60 das si el crecimiento bacteriano no se detect. Antes de la inoculacin y despus de haber finalizado el crecimiento, 5-10 ml alcuotas fueron tomadas y el pH fue probada. 2.6. Modelado de curvas de crecimiento Curvas de crecimiento fueron equipados con la funcin de Baranyi et al. (1993) utilizando Programa 2 de McClure y al. (1993) para calcular los principales parmetros de crecimiento, es decir, la tasa de crecimiento especfico (l),

tiempo de retraso (k) y registro 10 mxima densidad de poblacin (c). El programa tambin calcula la bondad del ajuste (R 2 ) Para cada uno de crecimiento realiz curva. Para cada combinacin de condiciones, la bacteriana se basa en nmeros de esta manera como funcin del tiempo. Slo las curvas de crecimiento de por lo menos 10 puntos de datos se utilizaron para modelar, como lo sugiere los autores. 2.7. Anlisis sensorial -Sensoriales efectos derivados de la adicin de canela es - cin de petrleo con el caldo de zanahoria fueron evaluados por sensoriales pedido (rango de clasificacin) de las muestras segn la Norma UNE Espan ~ ola 87 023 (Octubre de 1995) producido por el Comit Tcnico AEN / CTN 87 Anlisis Sensorial (Asociacin Espa - n ~ ola de Normalizacin y Certificacin, 1997). Esto mtodo permite apreciar las diferencias entre las diversas muestras, basado en la intencin de sidad de un determinado atributo, caracterstica o mundial impresin. Las muestras se presentan en forma aleatoria codificada 20-ml. Las diferentes muestras de cada serie se presentaron idntica a lo establecido por la norma. En las muestras haba un intenso gusto, slo Tabla 1 Aceites esenciales y sus concentraciones ensayadas La concentracin de aceites esenciales (Al/100 ml) cuatro muestras de cada serie se utilizaron. La concentracin de estas cuatro muestras se deteminada a partir de las concentraciones en el elegido anteriores ensayos de actividad antimicrobiana. La evacin fue realizada por un panel de 15 jueces elegidos por su experiencia en el anlisis sensorial de esen aceites esenciales y especias. Preparado respuesta formas se utilizaron segn lo especificado por la citada Norma. Las pruebas se llevaron a cabo en un entorno conforme a la caractersticas indicadas por la norma UNE Norma UNE 87 004: 1979. Cuando existe un orden natural, como fue el caso en nuestro estudio, la norma recomienda, entre los numerosas pruebas descritas en la literatura para la anlisis estadstico de los resultados, la pgina de prueba para evaluar el efecto de una determinada caracterstica en la sensorial pedido. Esta prueba se basa en la adicin de los rankings. 3. Resultados 3.1. El crecimiento de B. cereus en caldo de zanahoria durante el rango de temperatura de 5o-16o j C Para este estudio, cuatro de las cepas de B. cereus se utilizaron: psicrtrofas cepa INRA TZ415, mesfilas cepa L2104 INRA, y las cepas y la EPSO-15CA-EPSO 25TO cuya temperatura mnima de crecimiento fue desconocido. Los datos experimentales se ajustaron utilizando el Baranyi modelo, lo que da un muy buen ajuste en todos los casos. Los periodos de latencia y especficos derivados de las tasas de crecimiento las curvas de la modelo puede verse en el Cuadro 2 . Aunque todas las cepas son capaces de crecimiento en caldo de zanahoria a los 12 JC, las cepas y el INRA TZ415 INRA L2104 creci ms rpidamente que las cepas EPSO-15CA-25TO y de la EPSO. Por lo tanto, teniendo el desfase estimado para la fase psicrtrofas cepa INRA TZ415 como un punto de referencia, el desfase perodo se increment en aproximadamente 34 y 41 h para la EPSO y de la EPSO-15CA-25TO cepas, respectivamente mente. Al 16 de JC, la estimacin de las fases para el retraso diferentes cepas se estrecha notablemente. La EPSO - 25TO cepa, sin embargo, una vez ms tuvo un largo perodo de demora. En bajas temperaturas, slo el INRA psicrtrofas TZ415 cepa fue capaz de crecer. La estimacin de retraso fase a las 5 de JC fue inferior a 8 das, mientras que cuando temperatura de incubacin fue de 8 JC, la fase de retraso aproximadamente 5 das. El pH se midi antes de la inoculacin (pH 6,2) y al final de las curvas de crecimiento. No se observaron cambios en el pH se han observado, con el pH despus de crecimiento 5.9-6.0. 3.2. Influencia de los diversos aceites esenciales en el crecimiento de B. cereus en caldo de zanahoria Con el fin de evaluar la actividad antibacteriana de algunos aceites esenciales de las especias, las mediciones fueron tomadas en diferentes intervalos de tiempo de la creciente B. cereus INRA L2104 incubados en 16 poblaciones de JC en zanahoria caldo que contiene diferentes tipos y cantidades de petrleo. En los niveles bajos de concentracin, el modelo de crecimiento curvas muestra claramente la estrecha ajuste de la experimentacin datos a una ecuacin sigmoide (Baranyi et al., 1993). Cuadro 3 muestra los principales parmetros de crecimiento derivados de la equipados curvas de crecimiento que mostraron un cierto grado de demora o inhibicin en el crecimiento bacteriano. En concentraciones ms altas, algunos productos mostraron absoluta o de una inhibicin del crecimiento considerablemente prolongado en comparacin con el perodo de demora el retraso estimado fase sin los productos. Los aceites esenciales de pimienta y el negro hoja de laurel no tiene efecto antibacteriano no importa lo que la nivel de concentracin es analizarse. Cuadro 2 Parmetros de crecimiento de B. cereus cepas se incubaron en tyndallized caldo de zanahoria (pH 6,2) a las temperaturas indicadas Cepa Temperatura (JC) Tiempo de retraso (h) Mximo de crecimiento especfico tasa (h A 1 Parmetros fueron equipados con el modelo de Baranyi et al. (1993). Los datos mostrados son el promedio de dos reproducir las curvas de crecimiento. un No

el crecimiento dentro de los 60 das. Uso de la cintica de crecimiento de B. cereus INRA L2104 esporas incubadas en caldo de zanahoria a los 16 aos como JC un punto de referencia (Tabla 2) , Se puede hacer una anlisis comparativo de los parmetros de crecimiento se muestra en el cuadro 3, y hacer algunas observaciones interesantes vaciones. Cuando Al 5 de aceite esencial de canela se aadirse a la del sustrato vegetal por cada 100 ml de caldo, hubo un 14% respecto de la extensin de retraso fase, mientras que cuando Al 35 de aceite esencial de salvia o Se ha aadido el romero, la ampliacin aument a 21 25%. Con la misma cantidad de aceite esencial de clavo, la fase de retraso se prolong por 52%, lo que implica un retraso de aproximadamente 6 horas antes de bacterias multiplicacin comienza. Cuando Al 40 de aceite esencial de Al 50 de sasafrs o de aceite esencial de menta se aadieron, el retraso se increment en un 22% y 31%, respectivamente mente. La fase de retraso se prolong por 63%, o 7 horas, con 100 Al aceite esencial de nuez moscada. Un moderado incremento de 285%, o 32 h, en el desfase fase se alcanza cuando Al 25 de aceite esencial de Se ha aadido el tomillo. Aceite esencial de organo (25 Al) producido una relativa extensin de la fase de retraso 1110%, es decir, 126 horas (5 das) ya en la fase lag. Por ltimo, la adicin de aceite esencial de tomillo en una proporcin de 35 Al/100 ml de la prolongada fase de retraso por 4.955% (552 h o 23 das antes de crecimiento bacteriano se detect). fig. 1 muestra los datos experimentales y el modelo curvas de crecimiento obtenidas para las diferentes concentraciones prueba de los aceites esenciales de tomillo y nuez moscada. El mencionados efectos se puede ver claramente en la fig. 1 . Se observ que, una vez que el crecimiento y la multiplica - cin de las bacterias se haban iniciado, la presencia de estos aceites esenciales en las concentraciones ensayadas tiene prcticamente camente ningn efecto sobre la tasa de crecimiento. La inhibicin del crecimiento de B. cereus esporas se logr Al aadiendo 100 de aceite esencial de clavo, organo o sasafrs, o del 25 al aceite esencial de canela a cada 100 ml de caldo de zanahoria. En estos casos, se imposibles de detectar cualquier crecimiento de 60 das despus de inocu - cin. El uso de aceite esencial de clavo, organo y sasafrs Al/100 ml en el 50 no era totalmente inhib - itory para B. cereus, pero en cada uno de los casos, se no se detect crecimiento de 231, 833 y 546 horas despus la inoculacin, respectivamente. Con 10 ml de Al/100 esen - aceite esencial de canela, los datos obtenidos no se posible deducir una absoluta inhibicin del crecimiento, aunque este efecto se sugiere por la cuenta obtenido despus de 160 h. Cuadro 3 Parmetros de crecimiento de B. cereus INRA L2104 cepa incubadas a 16 JC en 100 ml de caldo de zanahoria tyndallized que contiene uno de los principales aceites indic Esencial Parmetros fueron equipados con el modelo de Baranyi et al. (1993). Los datos mostrados son el promedio de dos reproducir las curvas de crecimiento. Fig. 1. Efecto de la (a), nuez moscada ( * : 50 Al, 5: 75 Al D: Al 100) y (b) tomillo ( * : 0 Al; 5: Al 25 D: 35 Al) los aceites esenciales en el crecimiento de B. cereus INRA L2104 cepa en 100 ml de caldo de zanahoria despus de 7 y 25 das Al 16 de JC. Los datos experimentales y equipado obtenidos mediante las curvas de crecimiento la funcin de Baranyi et al. (1993). 3.3. Influencia del aceite esencial de canela sobre el crecimiento de B. cereus en caldo de zanahoria sobre la gama de temperaturas de 5o-16ta j C Se realizaron curvas de crecimiento a 5, 8, 12 y 16 JC con el fin de analizar el efecto combinado de la adicin de aceite esencial de canela y refrigerados temperamento Atures (obstculo tecnologa) sobre el crecimiento de B. cereus incubadas en caldo de zanahoria. Estas temperaturas incluan Las temperaturas recomendadas para los alimentos PGR preservacin cin, as como las temperaturas que se consideran poco o moderadamente inapropiado (Comisin Consultiva en Asuntos la seguridad microbiolgica de los alimentos, Reino Unido, 1992; Federacin Europea de Alimentos refrigerados, 1996). El previamente elegido concentracin de aceite esencial de canela se utilizaba, debido a su capacidad para prolongar la retraso de la fase B. cereus INRA L2104 esporas incubados zanahoria en el caldo en un 16 por JC el 15%. Los parmetros derivados de la curvas de crecimiento con el modelo de Baranyi et al. (1993) se muestran en la Tabla 4 , Donde tambin puede verse que el ajuste de las curvas es excelente en todos los casos. Los cuadros 2 y 4 muestran el anlisis comparativo de los parmetros de crecimiento para cada una de las cepas y analizarse las condiciones de crecimiento que permite extraer algunas conclusiones importantes desde el punto de vista de la PGR alimentos. Al 12 de JC, un genio ATURALEZA ligeramente fuera de la directiva las condiciones de recomendado para la preservacin de este tipo de alimentos, ninguno de las cuatro cepas, incluidas las psicrtrofas INRA TZ415 cepa, present ningn crecimiento. Al 16 de JC, todos los B. cereus cepas estudiadas fueron capaces de crecer, pero con retrasos considerables. El grado de retraso en relacin observado depende de la cepa empleada. En general, las cepas mesfilas haba desfase fases que se entre 12% y un 42% ms, mientras que para el psychro trficos INRA TZ415 cepa, este periodo aument en un 42% o 3,5 h. 3.4. Organolpticas efectos derivados del uso de aceite esencial de canela

Las evaluaciones sobre la respuesta de cada uno de los los jueces en la prueba sensorial T se resumen en el poder 5. Teniendo en cuenta que L = 391 es menor que 394, el valor crtico de la pgina de la prueba que corresponde al nmero de muestras (4), el nmero de jueces (15), y el nivel de significacin elegido, la hiptesis de que existe cero hay diferencias entre las muestras a una = 0,05 (95% probabilidad) no puede ser descartado en favor de la hiptesis alternativa de que existe un cierto orden entre ellos. Aunque el aceite esencial de canela Cuadro 4 Parmetros de crecimiento de B. cereus cepas cultivadas en 100 ml tyndallized caldo de zanahoria contiene 5 Al aceite esencial de canela sobre el rango de temperatura indicado Cepa Temperatura (JC) Tiempo de retraso (h) Mximo de crecimiento especfico tasa (h Cepas de B. cereus INRA L2104, EPSO-15CA-y la EPSO se 25TO nonpsychrotrophic incapaz de crecer en el caldo de zanahoria en el 5 y el 8 de JC. Parmetros fueron equipados con el modelo de Baranyi et al. (1993). Los datos mostrados son el promedio de dos reproducir las curvas de crecimiento. un No el crecimiento dentro de los 60 das. Cuadro 5 Anlisis sensorial de las muestras que contienen zanahoria caldo de canela aceite esencial JuezConcentracin [muestra] 5 ml Al/100 [A] 10 ml Al/100 [B] 15 ml Al/100 [C] 20 ml Al/100 [D] Pgina de prueba: L = 22 + 62 + 123 + 184 = 391 <394; importancia: a = 0,05 (95%). tiene un fuerte olor y sabor, las caractersticas organolpticas y, sobre todo, el olor, el sabor de las caractersticas de caldo de zanahoria parece que cualquier mscara percibe diferencias entre los muestras. 4. Discusin Los productos naturales y, por supuesto, compuestos derivados de las plantas pueden tener aplicaciones en el control de los agentes patgenos en los alimentos (Davidson, 1997; Bowles y Juneja, 1998). El reto es aislar, purificar, estabilizar e incorporar a los antimicrobianos naturales alimentos sin que ello afecte sensorial, nutricional y caractersticas de seguridad (Beuchat y Golden, 1989). Esto tiene que ser logrado sin mucho aumento de la produccin, transformacin y comercializacin costes En este documento, se da una descripcin sobre los efectos de la la adicin de diversos aceites esenciales a caldo de zanahoria (usado como un sustrato de crecimiento) en el crecimiento de los alimentos patgeno B. cereus. Entre todos los aceites esenciales aceite de canela es el ms eficaz, seguida de el aceite esencial de organo y tomillo. El siguiente ms eficaces los aceites esenciales son los de clavo, salvia, romero y sasafrs. Recientemente, Oxy'less, una rosamary extracto producido por Naturex (Avignon, Francia), ha sido probado como conservante en pasteurizada calabacn caldo. Natural de las bacterias aerobias mesfilas sustrato vegetal fueron inhibidos por el 0,5% de la extracto de romero (Del Campo et al., 2000) . Es difcil realizar una comparacin detallada con los resultados obtenidos por otros autores en este tipo de estudio. Entre los problemas, vale la pena mencionar los que se plantean desde el material vegetal utilizado, en trminos de su naturaleza (especias, extracto o aceite esencial), origen (pas de origen, altitud a la que crece, temporada de cosecha), el proceso de produccin, el nivel de pureza y conservacin, todo lo cual ayudar a determinar la presencia de concentraciones variables de los antimicrobianos en el producto final. Por otro lado, muchas pruebas se han llevado a cabo en medios de cultivo sintticos, con dilucin o difusin en un medio slido, utilizando discos impregnados de agentes antimicrobianos (Ginesta Peris - et al., 1994, Kim et al., 1995; Hsieh et al., 2001). En sustratos de alimentos, ha habido muy pocos estudios de la actividad antimicrobiana de aceites esenciales y especias extractos o sus componentes (Ultee et al., 2000; Del Campo et al., 2000; Hsieh et al., 2001; y Ultee Smid, 2001). Actividad antimicrobiana a menudo ha sido calculado contra uno o muy pocos microorganismos especficos organismos, en lugar de un gran nmero de microorganismosismos (Del Campo et al., 2000; Hsieh et al., 2001). No puede haber un olor, sabor negativo efecto inherente en el uso de aceites esenciales o sus componentes que han mostrado una clara actividad antimicrobiana en pruebas de laboratorio. Aunque esta influencia es sabido, no ha sido evaluado en un grado suficiente. Una solucin para el problema mencionado puede ser el uso de diferentes combinaciones de los alimentos sistemas (Leistner, 1999) que dara a los beneficios de cada uno de ellos al mismo tiempo apreciable reducir la cantidad de antibiticos necesarios. Para esta razn, la aplicacin de tratamiento de calor moderado tos y / o la preservacin de los alimentos en fro, refrigerados temperaturas pueden desempear un papel clave. Por utilizando este mtodo, una estable y, a partir de una microbiolog - punto de vista poltico, la seguridad de los alimentos puede producirse sin la prdida en la calidad sensorial. En este estudio, la adicin de 5 Al aceite esencial de canela a 100 ml de caldo de zanahoria, inoculadas con B. cereus esporas, y se preservaron a JC temperaturas de 8 o menos, hizo posible inhiben su germinacin y crecimiento de al menos 60 das en un modelo PGR comida hecha con zanahorias y sometido a tratamiento trmico moderado. El anlisis sensorial relacionada con el uso de la canela aceite esencial como agente antimicrobiano en tyndallized caldo de zanahoria mostr un efecto de enmascaramiento y provoc olfatogusto reacciones en los miembros del panel como no est mal''''o''A m me gust mucho''. No obstante, se seal que el anlisis sensorial se llevaron a cabo en la sala la temperatura, aunque en estas condiciones la intensidad de los estmulos y la sensibilidad de la percepcin los rganos de los sentidos tienen que ser mayor que a baja

temperatura Atures. Esto es especialmente importante para un RMP producto comercial, como el jugo de zanahoria que se consume fro.