TRANSFORMACIN DEL AZUFRE (NAYI)

EL Azufre es bien abundante en la corteza terrestre. Se encuentra como: azufre elemental, sulfuros minerales, sulfatos, H2S en el gas natural y como azufre orgnico en aceites combustibles y carbn (Hill y Petrucci, 1996). El ciclo biogeoqumico del azufre parece ser uno bastante complejo si tomamos en consideracin los diferentes estados de oxidacin que puede presentar dicho elemento y el hecho de que algunas transformaciones del azufre proceden tanto por vas biticas como abiticas. IMPORTANCIA BIOLOGICA DEL AZUFRE Los compuestos biolgicos en donde se involucra el azufre son diversos en tipo y complejidad; van desde molculas pequeas a medianas (muchas de ellas con olores y sabores caractersticos), hasta protenas y

otros polmeros. Se sabe que aproximadamente un 40% de las enzimas (entre ellas ferredoxinas, nitrogenasas, etc.) dependen para su actividad cataltica de la presencia de grupos sulfidrilo (SH). Dichos grupos SH proporcionan sitios de unin para metales txicos o fisiolgicamente importantes, se relacionan con la destoxificacin de drogas diversas y se ven involucrados en numerosas reacciones redox debido a su relativa facilidad de oxidacin. Tambin se sabe que la estructura terciaria y cuaternaria de muchas protenas es resultado de la presencia de puentes disulfuro (-S-S-) formados por la oxidacin de grupos SH de la cistena, un aminocido azufrado que, junto con la metionina, es factor clave en determinar el valor nutricional de las plantas (Huxtable, 1986) as como elemento central en el metabolismo del azufre en todos los organismos. Productos tan importantes como los antibiticos -lactmicos (penicilinas, cefalosporinas y cefamicinas) poseen un tomo de azufre derivado de la cistena. El compuesto azufrado conocido como SAM (Sadenosil-l-metionina) es el agente metilante ms importante conocido en todos los organismos; las reacciones de trans metilacin mediadas por SAM son clave en la regulacin de la expresin gnica y de la actividad de diversas enzimas as como en la produccin de antibiticos. Tabla 1: Estados de oxidacin del azufre. # OXI.* COMPUESTO -1 FeS2 (pirita**) H2S (sulfuro de hidrgeno) FeS (sulfuro ferroso) -2 R-SH (azufre orgnico) Amino cidos cistena, cistina, metionina vitaminas biotina, tiamina, cido lipoico H3C-S-CH3 (dimetil sulfuro) 0 Azufre elemental (S) Thiosulfato (S2O32-) +2 Thiocianato (SCN-) +2.5 Tetrathionato (S4O62-) Sulfito (SO32-) +4 Dixido de azufre (SO2) Sulfato (SO42-) +6 Trixido de azufre (SO3) Los compuestos con nmero de oxidacin: -2, 0 y +6 son los que se encuentran en cantidades significativas en la naturaleza.

Etapas del ciclo del azufre

Reduccin de SO4= (ANDRES) La reduccin de sulfato a sulfuro de hidrgeno requiere de la inversin de 8 electrones. SO4= + 8e- + H H2S + 2H2O + 2OH 2O Dicho proceso ocurre en varias etapas, dada la relativamente alta estabilidad de la molcula de SO4=. Al describir los eventos bioqumicos que se producen en la reduccin de sulfato es importante hacer una distincin entre la reduccin asimilativa y la reduccin disimilativa del sulfato (Figura 4). Reduccin asimilativa de sulfato La reduccin asimilativa del sulfato es el proceso mediante el cual una gran variedad de organismos vivos (incluyendo plantas superiores, algas, hongos y la mayora de los procariotas) utilizan sulfato como fuente de azufre para la biosntesis de compuestos organosulfurados (amino cidos [metionina, cisteina], vitaminas [biotina], coenzimos [coenzimo-A], [dimetilsulfuro]). Cabe sealar, que los organismos arriba mencionados pueden utilizar tambin metionina y cisteina como fuente de azufre. La fuente de azufre para los animales proviene mayormente

de los compuestos organosulfurados que consumen en su dieta (especialmente metionina). La metionina que ingieren los animales suple el azufre utilizado en la sntesis de cisteina. A partir de la cisteina se sintetizan otros organosulfurados. Serina + H2S Cisteina + H2O Para la incorporacin del sulfato a molculas orgnicas es necesario reducir el tomo de azufre del sulfato, ya que en los organismos vivos el azufre se encuentra casi exclusivamente en forma reducida [grupos sulfidrilo (-SH) o puentes disulfuro (-S-S-) De esta forma, la primera fase en la reduccin asimilativa de sulfato conlleva la reduccin del sulfato a sulfuro de hidrgeno. La reduccin del sulfato a sulfuro de hidrgeno requiere de la activacin del sulfato a expensas de ATP. La sulfurilasa de ATP (sulfato adenililtransferasa, Figura 4) cataliza la adicin del in sulfato a un grupo fosfato del ATP, formndose el fosfosulfato de adenosina (APS) y liberndose una molcula de pirofosfato (PPi). En procariotas, la activacin del sulfato conlleva una segunda fosforilacin a expensas de ATP, formndose la molcula de fosfoadenosina-5-fosfosulfato (PAPS). Esta ltima es reducida a sulfito (SO3=) a expensas del coenzimo NADPH. El sulfito es reducido posteriormente a sulfuro de hidrgeno (H2S), nuevamente, a expensas del coenzimo reducido NADPH. Reduccin disimilativa de sulfato La reduccin disimilativa de sulfato representa un patrn de respiracin anaerobia. Consiste en la habilidad de un selecto grupo de microorganismos procariotas para utilizar sulfato como aceptador final en cadenas de transporte de electrones que generan energa. Dicho grupo lo componen bacterias anaerobias estrictas conocidas como bacterias reductoras de sulfato. Estas se han dividido en dos grupos fisiolgicos: bacterias oxidantes de acetato y las bacterias no-oxidantes de acetato (Tabla 3). La reduccin disimilativa de SO4= requiere, al igual que la reduccin asimilativa, de la activacin del sulfato a expensas de ATP. No obstante, dicha activacin se produce en una sla etapa, generndose la molcula adenosina-5-fosfosulfato (APS). Dicha molcula es reducida a sulfito (SO3=) a expensas de hidrgeno molecular (H2). La reduccin de APS a sulfito y la reduccin de este ltimo a sulfuro de hidrgeno (H2S) es catalizada por la enzima reductasa de APS. Dicho esquema nos permite ilustrar los dos modos nutricionales que operan en las bacterias reductoras de sulfato. Por un lado tenemos bacterias reductoras de sulfato que crecen autotrficamente por quimiolitototrofa. Dichas bacterias crecen a expensas de CO2, (fuente de carbono), H2, (fuente de electrones) y SO4= (aceptador de

electrones). Del otro lado, tenemos que la mayora de las bacterias reductoras de SO4= son quimiorganotroficas. Estas utilizan compuestos orgnicos como fuente de carbono y fuente de electrones y utilizan el SO4= como aceptador de electrones. La fuente principal de sulfuros en ecosistemas marinos es la reduccin disimilativa de sulfatos, dada la alta concentracin de sulfatos que prevalece en dichos ambientes. Dicha reaccin ocurre de forma extensa en lugares donde encontramos altas concentraciones materia orgnica oxidable. En muchos sedimentos marinos la razn de reduccin de sulfato esta limitada por los niveles de carbono disponible. Dicha razn puede incrementarse significativamente con la adicin de materia orgnica. Este sealamiento es importante al momento de evaluar el impacto ambiental de las descargas de materia orgnica (aguas de alcantarillado, efluentes ricos en desperdicios orgnicos) en ambientes marinos. Dado que el H2S es una substancia de alta toxicidad para muchos organismos, su formacin representa una amenaza potencial para estos. HS- + 2H2O + 2CO2 SO4 = + 2(CH2O) + H+ Reduccin disimilativa de azufre elemental (S) Las bacterias reductoras de azufre se caracterizan por su capacidad para reducir el azufre elemental a sulfuro, y por su incapacidad para reducir sulfato hasta sulfuro. Varios gneros de arqueobacterias y eubacterias quimioorganotrficas demuestran la capacidad de oxidar sustratos orgnicos (principalmente pptidos pequeos, glucosa y almidn) anaerbicamente, utilizando S 0 como aceptador final de electrones. En arqueobacterias este proceso de respiracin anaerobia se observa mayormente en los gneros Thermococcus y Thermoproteus, y en menor grado en los gneros Desulfurococcus, Thermofilum y Pyrococcus.2S Sustrato orgnico + S H2S + CO2CO2 Otro grupo de arquebacterias quimiolitotrficas demuestran la capacidad de crecer autotrficamente a expensas de CO2, H2 y S 0. Este grupo lo integran arqueobacterias de los gneros Acidians, Pyrodictium y Thermoproteus. En el grupo de las eubacterias, la respiracin anaerobia de S0 es llevada a cabo por bacterias pertenecientes a los gneros: Desulfuromonas, Desulfurella y Campylobacter. Oxidacin anaerobia de H2S, S y SO3= por fototrofos (DIANIS) La mayora de las bacterias fotosintticas verdes y prpuras son capaces de oxidar compuestos sulfurados reducidos a sulfato, bajo condiciones anaerobias. Los donantes de electrones ms comunes en las bacterias fototrficas antes mencionadas son el sulfuro de hidrgeno (H2S) y el tiosulfato (SO3=).

El azufre elemental (S0) se forma frecuentemente durante la oxidacin del sulfuro de hidrgeno o el tiosulfato. Este se puede acumular en el interior de la clula (ej. Chromatium ) o puede ser depositado fuera de la clula, adherido a su superficie externa (ej. bacterias fotosintticas verdes). El S0 almacenado en forma de glbulos intracelulares o depsitos extracelulares representa una fuente de electrones de rpido acceso para la clula fotosnttica. Oxidacin aerobia de H2S, S y SO3= por quimiolitotrofos Existe un grupo de procariotas quimiolitototrficos capaces de crecer a expensas de sulfuro de hidrgeno, azufre elemental o tiosulfato como donantes de electrones. Dicho grupo se identifica como las bacterias de azufre incoloras. El trmino incoloras es empleado para diferenciar dicho grupo de las bacterias fotosintticas pigmentadas (bacterias fotosintticas verdes y prpuras). El grupo de bacterias de azufre incoloras esta integrado por los siguientes gneros: Thiobacillus, Thiosphaera, Thiomicrospira, Thermothrix, Beggiatoa y Sulfolobus. Aunque se han reportado otros gneros con la capacidad para oxidar azufre, slo los seis gneros antes mencionados se han podido cultivar de forma consistente. Thiobacillus* algunas especies pueden crecer T. thioparus H2S, sulfuros, S0, S2O3= como quimioorganotrofos T. denitrificans** H2S, S0, S2O3= T. neapolitanus S0, S2O3= T. thiooxidans S0 T. ferrooxidans S0, sulfuros, Fe2+ T. novellus S2O3= T. intermedius S2O3= Beggiatoa H2S, S2O3= quimiolitotrofo filamentoso/pero no puede crecer autotrficamente Thiothrix H2S quimiolitotrofo filamentoso Thiomicrospira*** S2O3=, H2S quimiolitotrofos obligados Thiosphaera H2S, S2O3=, H2 puede crecer tambin como quimiorganotrofo Thermothrix** H2S, S2O3=, SO3- habita en manantiales termales ricos en azufre, puede crecer tambin como quimioorganotrofo Sulfolobus H2S, S0 arquebacteria termoflica Acidianus S0 arquebacteria termoflica El producto final de la oxidacin del azufre en la mayora de los casos es SO4=. En varias de las bacterias de azufre incoloras (con la excepcin del gnero Thiobacillus) la oxidacin del H2S se produce por etapas, siendo la primera etapa la oxidacin de sulfato a azufre elemental

Algunas de estas bacterias almacenan el azufre elemental en forma de grnulos intracelulares (ej. Beggiatoa). Dichos depsitos representan una reserva de energa cuando el suministro de H2S es limitado. Estas bacterias obtienen entonces energa de la oxidacin del S 0 a SO4=. En aquellas situaciones donde el azufre elemental esta disponible mediante fuentes exgenas, el organismo crece adherido a partculas de azufre, dada la alta insolubilidad del azufre elemental. Tal es el caso de Sulfolobus acidocaldarius, una arqueobacteria que puede crecer adherida a cristales de azufre elemental. Al adherirse a los cristales de azufre el organismo puede solubilizar e incorporar los tomos de azufre que utiliza como fuente de energa. En el caso de las bacterias del gnero Thiobacillus la oxidacin de sulfuros, particularmente H2S, no produce azufre elemental como producto intermediario. No obstante, estos microorganismos generan S 0 cuando oxidan tiosulfato. El azufre elemental que se produce de la oxidacin de tiosulfato puede ser oxidado posteriormente cuando el sumistro de tiosulfato sea escaso. Si la fuente de tiosulfato es escasa, la bacteria no acumula S0. Esto implica que bajo condiciones limitantes de tiosulfato, el azufre elemental se oxida tan pronto es producido. Es conveniente sealar que en las reacciones de oxidacin de azufre descritas anteriormente, uno de los productos generados es H+. Por lo tanto, una de los resultados de la oxidacin de compuestos de azufre, por bacterias de azufre incoloras, es la acidificacin del medio. El cido que generan estas bacterias es cido sulfrico (H2SO4). Dentro del grupo de las bacterias de azufre incoloras se han identificado dos subgrupos a base de la capacidad que exhiben algunas especies para vivir en ambientes con un pH cido, mientras otras especies viven en ambientes con un pH neutral. Muchas de las especies bacterianas que viven en ambientes acdicos tambin exhiben la capacidad para crecer como quimiolitotrofos, utilizando el in ferroso como donante de electrones. Algunas bacterias quimiolitotrofas que oxidan azufre requieren de materia orgnica como fuente de carbono. Estas bacterias se conocen como mixotrofas; utilizan H2S como fuente de energa y un compuesto orgnico como fuente de carbono (carecen de un las enzimas del Ciclo de Calvin). A este grupo pertenecen las bacterias del gnero Beggiatoa. Estas bacterias estn ampliamente distribuidas en sedimentos marinos y en sedimentos de agua dulce. En el caso particular de Beggiatoa , Joshi and Hollis (1977) han sealado que la planta de arroz y quizs otras plantas que crecen parcialmente sumergidas se protegen del efecto txico del sulfuro de hidrgeno a travs de una asociacin mutualista con bacterias de dicho gnero. Bacterias del gnero Beggiatoa en la rizosfera de la planta de arroz evitaran la intoxicacin de la planta con el sulfuro de hidrgeno que prolifera en dichos ambientes, recibiendo a cambio fotosintetatos liberados por la raz de la planta

Oxidacin anaerobia de H2S, S y SO3= por quimiolitotrofos Un grupo reducido de bacterias quimiotitotrficas que oxidan azufre pueden utilizar nitratos (NO3-) como aceptador final de electrones, en lo que constituye un proceso de respiracin anaerobia. Este patrn metablico ha sido observado en bacterias de los gneros Thiomicrospira y Thermothrix. Desulfurilacin La putrefaccin de materia orgnica conteniendo azufre y su posterior desulfurilacin genera sulfuros (HS-). De hecho, la descomposicin de compuestos organosulfurados representa una fuente significativa de sulfuros en ecosistemas de agua dulce. Muchas bacterias descomponedoras pueden liberar H2S de la oxidacin de amino cidos que contienen azufre. En zonas anxicas de ambientes marinos, los sulfuros se originan mayormente de la reduccin disimilativa de sulfato (respiracin anaerobia) y no de la desulfurilacin, dada su alta concentracin de sulfatos.