PRCTICA N3: MTODOS ESPECTROMTRICOS PARTE 1: ESPECTROSCOPIA EN LA REGIN INFRARROJA

1. OBJETIVOS: 1.1. GENERAL: Determinar las caractersticas del comportamiento en la regin infrarroja de una muestra de aspirina en capsulas y compararla con la que se encuentra en literatura. 1.2. ESPECFICOS: Identificar el diseo y funcionamiento del instrumento usado para la prctica. Describir las caractersticas de cada una de las bandas obtenidas en el infrarrojo. Identificar el compuesto en mencin y caracterizar cualitativamente una muestra patrn y una muestra problema de la sustancia. Discutir las diferencias en el comportamiento de una muestra cuando se usan distintos vehculos para su lectura. 2. METODOLOGA: 2.1. PREPARACIN DE LA MUESTRA:

Macerar 3 tabletas de aspirina (100mg) hasta obtener un polvo fino

Pesar aproximadamen te 300mg

Extraer con 10mL de etanol y filtrar (x3)

El filtrado se lleva a calentamiento para evaporar el solvente

2.2. TRATAMIENTO CON NUJOL:

Tomar una pequea cantidad de aspirina (patrn/muestra)

Adicionar 1-2 gotas de nujol

Incorporar el aceite formando una suspensin

Colocar la placa en el equipo y leer el espectro

Se aplica entre las placas de NaCl (previamente limpias)

2.3. TRATAMIENTO CON KBr: Mezclar en un mortero de gata con KBr (10 veces cantidad de aspirina) Comprimir en la prensa, a una presin de 10 toneladas por 5 minutos

Tomar una pequea cantidad de aspirina (patrn/muestra)

Poner la placa en el portamuestras y leer el espectro

Generar descompresin lenta para no quebrar la muestra

3. CARACTERSTICAS DE LOS EQUIPOS, INSTRUMENTOS Y MATERIALES: 3.1. EQUIPOS E INSTRUMENTOS: 3.1.1. EQUIPOS: Mattson ATI Genesis FTIR (Transformada de Fourier): Ancho de Banda: 1 cm Rango espectral: 6000-350nm. Componentes: Fuente, muestra, selector de onda, detector, amplificador, transformada de Fourier. Es un espectrmetro de infrarrojo medio con un compartimiento de la muestra de tamao completo y una placa base que es capaz de acomodar la mayora de los accesorios estndar de muestreo. Su funcionamiento se basa en el calentamiento elctrico hasta temperaturas de 1.500 K con una -1 radiacin estable entre 1 y 40 m (10.000-250 cm ) y una emisin del 75% respecto al cuerpo negro. Su fuente es de tipo globar, la cual consiste en una barra de carburo de silicio de 5cm de -1 longitud y 0,5cm de dimetro y posee una resolucin de 1cm . Software: Mattson's WinFIRST

a.

b.

c.

d.

Fig 1. . (a) y (d) Espectrofotmetro Genesis Series FTIR MATTSON (b) Prensa para la obtencin de pastillas de KBr, (c) Soporte desmontable usado para la lectura de la suspensin de Nujol.

3.1.2.

INSTRUMENTOS: Vasos de precipitado: 1 vaso de 25mL 1 vaso de 400mL

Embudo Mortero de porcelana Mortero de . (el del nujol) Mortero de gata

3.2. MATERIALES: 3.2.1. ETANOL AL 96% : Informacin sobre producto: Frmula emprica (segn Hill): C2H6O Frmula qumica: C2H5OH Nmero HS: 2207 10 00 Nmero CE: 200-578-6 Masa molar: 46.07 g/mol Nmero CAS: 64-17-5 Datos qumicos y fsicos: Temperatura de ignicin: 425 C Solubilidad en agua (20 C): soluble Punto de fusin: -117 C Densidad (20 C): 0.805 - 0.812 g/cm3 Valor de pH: 7.0 (10 g/l, H2O, 20 C) Punto de ebullicin: 78 C Presin de vapor: 59 hPa (20 C) Limite de explosin: 3.5 - 15 %(V) Temperatura de inflamabilidad: 17 C Absorcin de agua: 1000 g/kg Informacin de seguridad: Frase R: R 11. Fcilmente inflamable. Frase S: S 7-16. Mantngase el recipiente bien cerrado. Conservar alejado de toda llama o fuente de chispas - No fumar. Caractersticas de peligrosidad: Fcilmente inflamable 3.2.2. NUJOL
[2] [1]

Informacin sobre producto: Sinnimos: Parafina Lquida Nmero HS: 2710 19 85 Nmero CE: 232-384-2 Nmero CAS: 8012-95-1 Datos qumicos y fsicos: Solubilidad en agua (20 C): insoluble

Densidad: 0.860 g/cm3 (20 C) Punto de ebullicin: 300 - 500 C Presin de vapor: < - 0.01 Pa (20 C) Temperatura de inflamabilidad: 230 C 2 Viscosidad cinemtica: 42.5 mm /s (40 C) Informacin de seguridad: Clase de almacenamiento : 10 - 13 Otros liquidos y sustancias slidas WGK: WGK 1 contamina ligeramente el agua Disposicin de Residuos: 3. Los reactivos orgnicos lquidos relativamente no reactivos desde el punto de vista qumico se recogen en la categora A. Si contienen halgenos se les asigna la categora B. Residuos slidos: categora C. Datos toxicolgicos: LD 50 oral: DL50 rata > 5000 mg/kg LD 50 drmica: DL50 conejo > 3000 mg/kg 3.2.3. KBr
[3]

Informacin sobre producto: Frmula emprica (segn Hill): BrK Frmula qumico: KBr Nmero HS: 2827 51 00 Nmero CE: 231-830-3 Masa molar: 119.00 g/mol Nmero CAS: 7758-02-3 Datos qumicos y fsicos: Solubilidad en agua: 650 g/l (20 C) Punto de fusin: 730 C Densidad: 2.75 g/cm3 (20 C) 3 Densidad Aparente: 900 - 1000 kg/m Valor de pH: 5.5 - 8.5 (50 g/l, H2O, 20 C) Punto de ebullicin: 1435 C Presin de vapor: 1.3 hPa (795 C) Informacin de seguridad: WGK: WGK 1 contamina ligeramente el agua Disposicin de Residuos: 14 Sales inorgnicas: categora I. Soluciones neutras de estas sales: categora D; antes del vaciado controlar el valor del pH con tiras indicadoras universales de pH (art. 109535). Datos toxicolgicos: LD 50 oral: DL50 rata 3070 mg/kg 3.2.4. CIDO ACETILSALICLICO: Estructura Qumica:

 Frmula Qumica: C9H8O4 Pureza del Patrn: 99,9% [4] Solubilidad : Agua Etanol Cloroformo ter 1 parte de ASA en 300 partes de agua 1 parte de ASA en 7 partes de etanol 1 parte de ASA en 17 partes de cloroformo 1 parte de ASA en 20 partes de ter
[5]

Punto De Fusin : Aproximadamente 143 C (mtodo instantneo). [5] Apariencia : Blanco casi blando, polvo cristalino cristales incoloros [6] Indicaciones: Utilizada como analgsico, anti-inflamatorio, antipirtico y antitrombtico . LD50: Oral, mouse: LD50 = 250 mg/kg; Oral, rabbit: LD50 = 1010 mg/kg; Oral, rat: [7] LD50=200mg/kg . Incompatibilidades: Bases Fuertes, se hidroliza en presencia de mucho aire, se [7] descompone en agua caliente. Especificaciones: Las Tabletas de Aspirina contienen no menos de 90,0 por ciento y no ms de 110,0 por ciento de la cantidad declarada de aspirina. Las Tabletas de ms de 81 [8] mg no contienen edulcorantes u otros saborizantes . Datos de las tabletas: Laboratorio: Anglopharma Registro Sanitario INVIMA: 2005 M-0004989 Cantidad: 3 tabletas de 100mg c/u ESPECTROS DEL ASA
[9]

Fig.1. Espectro IR de la aspirina en Nujol

Fig.2. Espectro IR de la aspirina en KBr 4. RESULTADOS: 4.1. BACKGROUND: Tabla 1. Barrido IR del Nujol: NMERO DE ONDA (cm ) 2348,16 2348,16 1690,30 1529,39 1173,74 1173,74 662,07 Fig 4. Espectro Infrarrojo para el Nujol:
-1

% DE EMISIVIDAD 12,6261 12,6261 36,4551 37,5828 60,8984 60,8984 46,9264

4.2. BARRIDO IR PARA EL NUJOL: Tabla 2. Barrido IR del Nujol: NMERO DE ONDA (cm ) 2950,73 2926,37 2855,14 2726,35 2674,25 2359,61 2341,12 1462,59 1376,99 1304,59 721,78 Fig 5. Espectro Infrarrojo para el Nujol:
-1

% DE TRANSMITANCIA 0,8848 0,2204 0,9811 55,9988 58,7575 55,0304 59,0236 5,0129 14,6823 57,6761 47,0271

4.2.1.

BARRIDO IR PARA EL PATRN DE ASA EN NUJOL: Tabla 3. Barrido IR para el patrn de ASA en Nujol: NMERO DE ONDA (cm ) 2924,69 2853,74 2670,58 2586,35 2358,32 1753,25
-1

% DE TRANSMITANCIA 0,9964 3,2937 26,8107 28,6713 32,7042 23,9296

1685,40 1604,34 1457,45 1376,05 1304,45 1219,26 1186,11 1092,88 1011,82 915,55 839,68 754,61 703,79 665,43

19,5533 22,3402 8,0575 13,6853 18,1395 23,1925 17,5386 28,4116 29,1632 23,4140 31,0489 28,8187 28,7724 29,4122

Fig 6. Espectro Infrarrojo para el patrn de ASA en Nujol:

4.2.2.

BARRIDO IR PARA LA MUESTRA DE ASA EN NUJOL: Tabla 4. Barrido IR para la muestra de ASA en Nujol: NMERO DE ONDA (cm ) 3322,93 3159,67 2924,84 2853,62 2670,12 2361,72 1753,12 1686,12
-1

% DE TRANSMITANCIA 35,6815 32,5790 0,7688 2,7072 31,6958 37,6047 30,8198 28,2983

1605,36 1565,06 1507,03 1456,93 1376,14 1304,73 1220,51 1186,92 1093,87 1012,94 916,58 839,25 791,16 754,91 704,65 666,21

27,7106 35,5998 36,0416 8,7996 16,6813 24,5895 29,1937 26,1491 37,4294 37,6906 33,7378 39,8153 43,0082 38,6215 38,3731 37,6651

Fig 7. Espectro Infrarrojo para la muestra de ASA en Nujol:

4.3. BARRIDO IR PARA EL KBr: 4.3.1. BARRIDO IR PARA EL PATRN DE ASA EN KBr: Tabla 5. Barrido IR para el patrn de ASA en KBr: NMERO DE ONDA (cm ) 3503,18 3043,73 2920,86 2842,56 2684,05 2587,30 2536,77 2292,27 1754,42
-1

% DE TRANSMITANCIA 3,5696 1,2117 1,0989 1,1652 1,4578 1,5071 1,7276 4,2066 0,2801

1682,56 1605,51 1457,86 1419,12 1370,02 1305,77 1219,81 1187,70 1094,16 1012,70 916,84 839,88 803,31 754,98 704,08 665,92 598,37 541,88 514,62 421,94

0,1542 0,5044 0,2996 1,1327 1,1717 0,1812 0,4213 0,0949 1,4087 1,5829 0,5068 1,6118 1,7248 1,4703 1,4671 1,8515 2,3476 3,2706 3,2163 3,6597

Fig 8. Espectro Infrarrojo para el patrn de ASA en KBr:

4.3.2.

BARRIDO IR PARA LA MUESTRA DE ASA EN KBr: Tabla 6. Barrido IR para la muestra de ASA en KBr: NMERO DE ONDA (cm ) 2920,61 2685,29 2587,57 2546,35 2369,07 1753,73
-1

% DE TRANSMITANCIA 2,0957 3,0418 3,1331 3,2463 4,7974 1,0880

1692,46 1605,37 1575,19 1458,02 1419,06 1370,20 1306,12 1220,11 1187,39 1134,69 1094,01 1038,56 916,86 839,60 790,14 754,78 703,98 666,02 598,40 542,24 423,27

0,7650 1,5455 5,0497 1,3590 2,9350 3,1854 0,9578 1,6011 0,6647 3,5567 3,6003 5,3673 1,9134 3,9879 4,9979 3,6309 3,9047 4,7812 5,7156 7,4438 8,7330

Fig 9. Espectro Infrarrojo para la muestra de ASA en KBr:

5. ANLISIS DE RESULTADOS: La espectroscopia de infrarrojo es una herramienta bastante til para identificacin qumica y dilucidar algunas caractersticas esenciales de la estructura molecular. Esta regin abarca desde los 0,75m hasta los 1000m aproximadamente. En la zona del infrarrojo fundamental se puede obtener gran cantidad de informacin tanto cualitativa como cuantitativa sobre los grupos funcionales y la estructura -1 [10] molecular, se encuentra en un intervalo de 2,5m a 15m (4000 a 667 cm ) , por sta razn decidimos escoger dicha zona para realizar el anlisis de nuestra muestra de aspirina.

Para que una molcula pueda absorber la radiacin infrarroja deben cumplirse dos requisitos: 1. La radiacin debe tener la energa precisa para satisfacer los requerimientos energticos del material, y 2. Deben producirse interacciones entre la radiacin y la materia (experimentar cambio en el momento [10] dipolar) . En el caso del cido acetilsaliclico presenta las dos condiciones, por lo tanto, es posible observar los cambios vibracionales de la molcula. El espectro obtenido lo podemos dividir en dos -1 partes, la primera abarca la regin de frecuencias de grupo (4000 a 1250 cm aproximadamente), podemos observar la absorcin caracterstica de ciertos grupos de tomos y que son relativamente independientes de la composicin del resto de la molcula, adems se presentan la mayora de las -1 vibraciones de tensin, la otra regin es la de huella dactilar (1250-400 cm aproximadamente), que es la ms importante para identificar la molcula, ya que se presentan frecuencias de vibraciones que se [10] ven afectadas por la estructura molecular, es decir, que se analiza como un todo . El equipo utilizado en este caso es el Matsson FTIR, el cual es un espectrmetro de Transformada de Fourier. Este sistema se basa en una espectroscopia de dominio en el tiempo, es decir, que no se usan los datos de longitud de onda para la obtencin de datos, sino que se mide la potencia de radiacin mediante variacin en el tiempo. Mediante un instrumento llamado interfermetro de Michelson se obtiene un interferograma que ofrece una representacin de la intensidad radiante frente al tiempo. Mediante una serie de operaciones matemticas realizadas por mtodos computacionales llamadas de Transformada de Fourier es posible transformar esta informacin en una funcin que en lugar del tiempo, relacione la intensidad radiante con frecuencias especficas, hallando as bandas espectrales caractersticas para cada grupo funcional que compone la sustancia. Para obtener el interferograma se realiza un movimiento de un espejo mvil de ida y regreso y mediante un programa de software se gradan la velocidad y posicin de este, las cuales inciden en la resolucin obtenida. Para obtener un espectro satisfactorio es importante realizar primero un barrido o background (Figura 4) del equipo, es decir, de todas las interferencias que se puedan dar debido a sustancias como H2O, CO2 o al mismo solvente. Al realizar este barrido el equipo resta inmediatamente mediante el software y se obtiene un resultado ms preciso. Se deben tener en cuenta varias consideraciones al momento de preparar la muestra: 1) Para obtener la muestra a partir de las tabletas se hizo necesario realizar una extraccin del principio activo, puesto que las tabletas contienen una gran cantidad de excipientes y de otras sustancias que si no son excluidas tambin contribuyen a generar bandas en el espectro. Este proceso se realiz unas cuatro veces con etanol para asegurar una mxima extraccin del principio activo. 2) Se lleva nuevamente a reconcentracin mediante calentamiento, pero este calentamiento no debe ser excesivo, ya que puede generar una degradacin trmica de la sustancia. 3) Es importante que la muestra se encuentre en una concentracin alta, pues para que se conserve la ley de Lambert-Beer la delgada anchura en la celda se compensa con la amplia concentracin que tiene la muestra. 4) Es necesario escoger un solvente que no vaya a reaccionar con el ASA, pues generalmente se pueden generar hidrlisis, solvataciones, hidrataciones o incluso formacin de redes cristalinas que pueden interferir con la formacin de nuevos compuestos o con inconvenientes en el mtodo de extraccin. 5) Es tambin importante regular la humedad en el campo de trabajo ya que adems de interferir generando hidrlisis con la muestra, es inconveniente en cuanto a su uso en el equipo, pues la presencia de humedad es muy daina para las celdas utilizadas, las cuales se componen de de sales como KBr y KCl, que al contacto con agua reaccionan y se corroen fcilmente. 6) La limpieza de las celdas debe realizarse con un liquido voltil como el cloroformo que no interfiera en la absorcin de bandas ni que reaccione con la celda 7) Las celdas deben permanecer en el desecador cuando la cubeta no se encuentra en uso, para prevenir su interaccin con la humedad ambiental. La muestra y el patrn de acido acetilsaliclico se evaluaron mediante dos mtodos: la elaboracin de una suspensin en Nujol y la elaboracin de pastillas de KBr en estado slido. Los espectros obtenidos se pueden observar en los numerales 4.2 y 4.3. Al comparar los espectros realizados en los distintos medios de ambas sustancias se observa que son bastante similares. En el caso del espectro realizado en Nujol la muestra tiene en comn todos los valores a excepcin de una banda en 2586 (que presenta el patrn) y en la muestra bandas adicionales en 3323, 3160, 1565, -1 1507 y 791 cm . A continuacin se detallan los grupos funcionales y el tipo de vibraciones de las bandas encontradas, que son comunes para la muestra y el patrn:

Bandas Espectrales -1 (cm ) 2924 2854 2000 1753 1686 1605, 1457 1376 1220-1187 917 755 704

Caracterstica Estiramiento enlace O-H, la banda es estrecha Estiramiento enlace CH3, del metilo del ster (intensa) Sobretono caracterstico de los aromticos (no muy ntido) Estiramiento C=O de un ster Estiramiento C=O de un cido carboxlico Estiramiento C=C- del aromtico (dos o ms bandas) Deformacin simtrica del CH3 Estiramiento antisimtrico C-O-C- del ster (dos bandas intensas) Deformacin de C-OH (intensa) Flexiones fuera del plano para el benceno o-sustituido Flexin O-C=O del cido carboxlico

Para los espectros realizados en KBr la mayora de las bandas fueron comunes entre s, difieren en las -1 bandas adicionales que presenta el patrn de 3503, 3044, 2537, 2292,1682, 1012, 803 y 514cm y las -1 adicionales en la muestra de 2546, 2369, 1692, 1575, 1134, 1039 cm . A continuacin se detallan los grupos funcionales y las vibraciones que se pudieron observar en este medio (son comunes para el patrn y la muestra): Bandas Espectrales -1 (cm ) 2924 2843 1900 1754 1683 y 1692 1605, 1458 1370 1220-1187 917 755 704 598 542 580-422 Caracterstica Estiramiento enlace O-H, muy ancha la banda Estiramiento enlace CH3, del metilo del ster (intensa) Sobretono caracterstico de los aromticos Estiramiento C=O de un ster Estiramiento C=O de un cido carboxlico Estiramiento C=C- del aromtico (dos o ms bandas) Deformacin simtrica del CH3 Estiramiento antisimtrico C-O-C- del ster (dos bandas intensas) Deformacin de C-OH (intensa) Flexiones fuera del plano para el benceno o-sustituido Flexin de O-C=O del cido carboxlico (intensa) Flexin de O-C=O del ster (intensa) Flexin de C-C=O del cido carboxlico (intensa) Deformacin del anillo aromtico fuera del plano (dos bandas media-intensa)

Como se puede observar se presenta mayor cantidad de bandas caractersticas del cido acetilsaliclico comparado con la obtenida en literatura mediante el mtodo de preparacin de KBr, ya que esta sal -1 tiene poca absorcin en la regin del Infrarrojo (4000-400cm ) debido a su carcter inico y por lo tanto las interferencias con la molcula de inters son mnimas. Es importante tener en cuenta que la concentracin de muestra en las pastillas puede incidir en la intensidad radiante de la muestra, pues si se aade una alta o muy poca cantidad de muestra es probable que la intensidad sea muy alta o mnima en la lectura del espectro (Figura 10). Tambin, una presin excesiva sobre las pastillas o una pequea adicin de la mezcla de slidos para la preparacin de la pastilla puede generar que la pastilla se fragmente.

Fig. 10. Espectro IR para una pastilla de bromuro

[11]

En cuanto a la suspensin de Nujol, se puede observar que esta presenta absorcin entre 3000-2650 -1 -1 -1 -1 cm , 2300 cm , 1500-1300 cm y 700-400 cm ,(Figura 4) lo que explica que no aparezcan definidos -1 los picos entre el rango de 700-400 cm .Por ello, para la evaluacin de los grupos funcionales de un compuesto mediante este mtodo sera preferible realizarlo mediante el mtodo de pastillas de KBr, debido al apantallamiento que presenta el Nujol y que al ser un Hidrocarburo presenta tambin inestabilidad en cuanto a cambios en temperatura. Sin embargo, en la regin de la huella digital los resultados son prcticamente invariables en cualquiera de los dos mtodos para la muestra y el patrn. Por lo tanto la identificacin del compuesto se puede realizar en cualquiera de los dos medios. Si se comparan los espectros de la literatura se tienen bandas similares, aunque en algunos casos vare un poco la intensidad de las bandas. La comparacin de la muestra patrn con la muestra problema nos permite identificar la identidad de la muestra y la posible presencia de excipientes que pudieran interferir en el mtodo de extraccin. En vista de que la muestra y el patrn, presentan espectros similares y la regin de la huella digital prcticamente presenta los mismos valores (incluso bajo los distintos mtodos de preparacin) se puede decir que el proceso de extraccin fue realizado de una manera correcta, pues no existen bandas caractersticas que indiquen presencia de otros compuestos extraos, a menos que se encuentren dentro de las mismas longitudes de onda que incidan con el KBr o el Nujol. Se podra decir entonces que este espectro tiene un buen margen de comparabilidad y que si sera un mtodo adecuado para realizar la prctica de anlisis cualitativo de la muestra. 6. CONCLUSIONES: La espectroscopa de Infrarrojo para el caso de aspirina brinda un buen mtodo de identificacin del compuesto y de sus grupos funcionales que son tiles en cuanto a su elucidacin estructural. La comparacin entre la muestra patrn y la muestra en tabletas de aspirina, indica que el mtodo de extraccin del principio activo con etanol es indicado y correcto porque no se presentan interferencias visibles de excipientes u otros compuestos y que generen picos adicionales en los espectros. El mtodo preferible para la evaluacin de los grupos funcionales del compuesto sera el de la realizacin de las pastillas de KBr, puesto que este compuesto no presenta tantas interferencias en la regin de estudio como la preparacin de la suspensin de Nujol. Los dos mtodos de preparacin de muestra: suspensin de Nujol y pastillas de KBr son indicadas para la evaluacin de la huella digital de la muestra, ya que no se presentan -1 interferencias (a excepcin de la zona de los 700-400 cm ). Es importante tener en cuenta varios detalles para obtener espectros adecuados como la escogencia del solvente, el calentamiento de la muestra, la regulacin de la humedad del ambiente de trabajo y la limpieza y mantenimiento de las celdas. 7. BIBLIOGRAFA: 1. Merck-Chemicals. Etanol 96%. URL: http://www.merck-chemicals.com/colombia/etanol-96%25/MDA_CHEM159010/p_W.Sb.s1LthUAAAEWtOEfVhTl?WFSimpleSearch_NameOrID=etanol&BackButtonText=search+results.

Fecha de Consulta: 21 de Abril de 2012. Hora:1:30 pm 2. Merck-Chemicals. Parafina Lquida para espectroscopa Uvasol . URL: http://www.merckmillipore.com/colombia/chemicals/parafina/MDA_CHEM107161/p_Wmub.s1L3dcAAAEW8eEfVhTl?WFSimpleSearch_NameOrID=8012-951+&BackButtonText=search+results. Fecha de Consulta: 21 de Abril de 2012. Hora: 1:30 pm. 3. Merck-Chemicals. Potasio Bromuro para espectroscopa IR Uvasol . URL: http://www.merckmillipore.com/colombia/chemicals/potasio-bromuro/MDA_CHEM104907/p_Wmub.s1L3dcAAAEW8eEfVhTl?WFSimpleSearch_NameOrID=Potasio+bromuro+pa ra+espectroscopia+IR+Uvasol%C2%AE&BackButtonText=search+results. Fecha de Consulta: 21 de Abril de 2012. Hora: 1:30 pm.

4. British pharmaceutical codex. Eleventh Edition. Pharmaceutical Press. 1979. Pginas 63-64 5. British Pharmacopoeia Commission. British Pharmacopoeia. Crown. 2009. Pginas 44 6. Avogadro. Material Safety Data Sheet: Acetylsalicylic Acid 99%. URL: http://avogadro.chem.iastate.edu/MSDS/aspirin.htm. Fecha de Consulta: 21 de Abril de 2012. Hora:1:50 pm 7. Vademecum. cido Acetil-saliclico. URL: http://www.iqb.es/cbasicas/farma/farma04/a015.htm. Fecha de Consulta: 21 de Abril de 2012. Hora:1:50 pm 8. United States Pharmacopeial Convention.Farmacopea de los Estados Unidos de Amrica, USP 30 -NF 25. Council of Experts.2007. Pgina 144 6 9. S.Kinugasa, K.Tanabe y T. Tamura. Spectral Database for Organic Compounds SDBS. URL: http://riodb01.ibase.aist.go.jp/sdbs/cgi-bin/direct_frame_top.cgi. Fecha de Consulta: 18 de Abril de 2012. Hora:6:30 pm 10. E.D. Olsen. Mtodos pticos de Anlisis. Editorial Revert S. A. Barcelona, Espaa. 1986. Pginas 176-178. 11. Universidad de la Habana. Espectroscopa Infrarrojo. URL: http://www.fq.uh.cu/dpto/qf/docencia/pregrado/estruc_2/ir/descargas/1_ir_tecnica.pdf. Fecha de Consulta: 25 de Abril de 2012. Hora: 08:00 pm