Universidade Federal de Pelotas Instituto de Qumica e Geocincias Departamento de Bioqumica

Oxidaes Biolgicas e Introduo ao Metabolismo

Professora Ana Chaves

nucleotdeos

Introduo
Transporte: ATP fosforila protenas transportadoras forma de armazenamento de qumica nas clulas dos organismos vivos
Protena de membrana

Soluto

Soluto transportado

Trabalho mecnico: ATP fosforila protenas motoras

Protena motora

Protena movida

Trabalho qumico: o ATP fosforila reagentes-chave

Reagentes

Produto

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Introduo

O fluxo de energia na biosfera acoplado primariamente aos ciclos de carbono e do oxignio

Metabolismo C6H12O6 Clulas Fotoautotrficas Clulas Heterotrficas

- Professora Ana Chaves

H2O

oxidaes biolgicas

Introduo

CH Lip Prot ATP + H2O

Coenzimas (oxid) CO2 (H+ + e-) Coenzimas (H+ + e-) (red)

Oxidaes biolgicas

O2 + ADP + Pi

conjunto de reaes bioqumicas, em nvel celular, com o propsito de suprir as clulas com a necessria realizao do trabalho celular
- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Metabolismo e Energia conceitos bsicos

n Metabolismo Metabolismo
mudana todas as mudanas qumicas que convertem nutrientes em energia e nos compostos qumicos complexos das clulas Anabolismo Anabolismo Catabolismo Catabolismo

obteno obteno de de substncias substncias complexas complexas a a partir partir de de sustncias sustncias simples simples com com consumo consumo de de energia energia reaes reaes de de sntese sntese fotossntese fotossntese sntese sntese de de protenas protenas replicao replicao de de DNA DNA
- Professora Ana Chaves

molculas molculas complexas complexas so so degradadas degradadas originando originando molculas molculas mais mais simples simples processos processos degradativos degradativos geradores geradores de de energia energia

Gliclise Gliclise -oxidao -oxidao de de AGs AGs

Metabolismo e Energia conceitos bsicos

Metabolismo centenas de reaes enzimticas rotas metablicas seqencial

oxidaes biolgicas

Substratos

intermedirios

Produtos
Mapa das principais rotas metablicas em uma clula tpica

- Professora Ana Chaves

Metabolismo e Energia conceitos bsicos

oxidaes biolgicas

Por exemplo, a gliclise, a vai metablica atravs daqual ocorre liberao de energia

Mapa das principais rotas metablicas em uma clula tpica

- Professora Ana Chaves

Os organismos apresentam uma grande similaridade entre suas principais vias metablicas

Metabolismo e Energia conceitos bsicos

oxidaes biolgicas
Vitaminas, coenzimas e hormnios

Sntese e degradao de CH Sntese e degradao de Nucleotdeos

- Professora Ana Chaves

Gliclise Sntese e degradao de lipdeos Sntese e degradao de AAs

Ciclo de Krebs

Mapa das principais rotas metablicas em uma clula tpica

oxidaes biolgicas
Metabolismo e Energia conceitos bsicos
Os trs estgios do metabolismo As molculas nutrientes so hidrolisadas at suas unidades constituintes

As unidades constituintes so convertidas em formas facilmente oxidveis (principalmente AcetilCoA).

Acetil-CoA completamente oxidado para formar CO2 e H2O. Energia capturada quando a sntese de ATP acoplada Cadeia de Transporte de Eltrons.
- Professora Ana Chaves

Metabolismo

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

oxidaes biolgicas

Metabolismo e Energia conceitos bsicos

Reao Exoergnica

Energia livre, G

o energia energia livre livre

livre livre de de Gibbs Gibbs (G) (G) Variao Variao de de livre livre ( ( G) G)

Reagentes Quantidade energia liberada

Produtos

p Reaes Reaes
Endoergnicas Endoergnicas ( ( G>0) G>0) Exoergnicas Exoergnicas ( ( G<0) G<0)
Energia livre, G

Marcha da reao Reao Endoergnica Reagentes

Quantidade energia requerida Produtos

- Professora Ana Chaves

Marcha da reao

oxidaes biolgicas

Metabolismo e Energia conceitos bsicos

Exemplo mecnico Exemplo qumico Marcha da reao

o energia energia livre livre

livre livre de de Gibbs Gibbs (G) (G) Variao Variao de de livre livre ( ( G) G)

realizado para elevar o objeto

Perda de energia potencial

Endoergnica

Exoergnica

Endoergnicas Endoergnicas ( ( G>0) G>0) Exoergnicas Exoergnicas ( ( G<0) G<0)

- Professora Ana Chaves

Energia livre, G

p Reaes Reaes

oxidaes biolgicas

Metabolismo e Energia conceitos bsicos

Fosfoenolpiruvato

q Substncias Substncias

G de hidrlise( KJ.mol-1)

ricas ricas em em

Creatina 1,3-Bisfosfoglicerato Adenina Fosfocreatina

Compostos de alta energia Compostos de baixa energia Glicose 6 Glicerol-

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Metabolismo e Energia conceitos bsicos

q Substncias Substncias

ricas ricas em em

- Professora Ana Chaves

7,3 Kcal.mol-1

oxidaes biolgicas

Metabolismo e Energia conceitos bsicos

r Acoplamento Acoplamento metablico metablico e e energtico energtico

CH, Lipdeos, Protenas Polissacardeos, Lipdeos, Protenas, cidos Nuclicos

ANABOLISMO

CATABOLISMO

oxidativo exoergnico

redutivo endoergnico

CO2, H2O, NH3

Oses, AAs, AGs, BN

O ATP o elo qumico entre o catabolismo e o anabolismo

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Metabolismo e Energia conceitos bsicos

Molculas complexas (por exemplo dos alimentos) Macromolculas celulares

VIAS CATABLICAS

formas teis de energia

VIAS ANABLICAS

diversas molculas simples para biossnteses

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Reaes de xido-reduo

Oxidao e reduo so reaes concomitantes

agente oxidante agente redutor

Elemento doador Elemento aceptor

Par redox (tomos envolvidos na xi-reduo)

Sofre oxidao

Ganha O2 Perde ePerde H+

Sofre reduo

Perde O2 Ganha eGanha H+

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Reaes de xido-reduo
concomitantes agente oxidante agente redutor
Se oxida Ganha O2 Perde ePerde H Se reduz Perde O2 Ganha eGanha H

Reagentes CH4

Produtos Oxidao
2O2

CO2 Reduo

Energia

2 H2 O

Metano

Oxignio

Dixido de Carbono

gua

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Reaes de xido-reduo
concomitantes agente oxidante agente redutor
Se oxida Ganha O2 Perde ePerde H Se reduz Perde O2 Ganha eGanha H

forma reduzida da nicotinamida forma oxidada da nicotinamida Desidrogenase Reduo Oxidao

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Reaes de xido-reduo
concomitantes agente oxidante agente redutor
Se oxida Ganha O2 Perde ePerde H Se reduz Perde O2 Ganha eGanha H

Fe2+ (ferroso) reduzido

Fe3+ (frrico) oxidado

Glicose Gliclise

Glicose + O2 Glicose + H2

c. Glicnico (ox) Sorbitol (red)

2 Lactato Fermentao ltica

2 Piruvato Lactato desidrogenase

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Sentido das reaes de xido-reduo

xido-redues celulares

Substratos orgnicos oxidados em vrias etapas

CH Lip Prot

por compostos que se reduzem ao receberem eltrons do composto oxidado

Coenzimas (oxid) CO2 (H+ + e-) Coenzimas (H+ + e-) (red)

ATP + H2O

O2 + ADP + Pi

- Professora Ana Chaves

Sentido das reaes de xido-reduo

e- CR

O2
ordem dos aceptores

- Professora Ana Chaves

no aleatria

definida pelo potencial redox

oxidaes biolgicas

oxidaes biolgicas

Sentido das reaes de xido-reduo

Potencial redox

Fora eletromotriz que expressa a afinidade de um par redox por e-

Varia entre os compostos Pode ser determinada

Fluxo de e- :

< Pot Redox > Pot Redox

- Professora Ana Chaves

medida que os eltrons fluem de um sistema e- e+ perda de livre os eltrons tendem a se mover no sentido da < livre > potencial redox

Seqncia de intermedirios entre o S e o O2 CR

oxidaes biolgicas

Sentido das reaes de xido-reduo

Potenciais Redox Padro (E0) de alguns pares conjugados da CTE

OXIDANTE
NAD+ FMN FAD UQ Citocromo b (+3) Citocromo c1 (+3) Citocromo a (+3) Citocromo a3 (+3) O2 + 2 H+

REDUTOR
NADH + H+ FMNH2 FADH2 UQH2 Citocromo b (+2) Citocromo c1 (+2) Citocromo a (+2) Citocromo a3 (+2) H2O

E0 (V)
- 0,32 - 0,30 - 0,22 + 0,04 + 0,07 + 0,23 + 0,29 + 0,55 + 0,82

Por conveno, o elemento com tendncia mais forte em receber eltron possui valor de Eo positivo

- Professora Ana Chaves

Sentido das reaes de xido-reduo

os eltrons tendem a se mover no sentido da

< livre > potencial redox

Seqncia de intermedirios entre o S e o O2 CR

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria

Cadeia Respiratria = Cadeia de Transporte de Eltrons

via final comum atravs da qual todos os eltrons provenientes dos diferentes combustveis celulares (S) fluem para o O2 (oxidante e aceptor final de e-)

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Localizao sub-celular

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Localizao sub-celular

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Localizao sub-celular

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Localizao sub-celular

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Localizao sub-celular

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Localizao sub-celular

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Localizao sub-celular

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Componentes (natureza)

enzimas e um composto lipdico capacidade de aceitar e transferir eltrons organizadas na MMI na forma de complexos a) desidrogenases complexos enzimticos NAD, FMN e FAD centros Fe S

b) ubiquinona (CoQ)

Quinona lipossolvel longa cauda isoprenide

c) Citocromos

protenas transportadoras de eltrons HEME (coenzima) 3 classes (a, b e c) *diferena: cadeia polipeptdica espectro de absoro de luz

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Organizao seqencial na MMI

Complexo I - NADH Desidrogenase Fixos Complexo II - Succinato Desidrogenase Complexo III - Citocromo bc1 Complexo IV - Citocromo a-a3 (citocromo oxidase) Mveis Ubiquinona Citocromo c

FMN, Fe-S FAD, Fe-S, Cit b Cit b e c1 , Fe-S Cit a e a3 , Fe-S

Componentes transportadores de e-

26 5 10 6-13
N aprox de cadeias polip.

Espao Intermembranas Membrana Mitocondrial Interna

Succinato

Fumarato

Matriz Mitocondrial

Cadeia de Transporte de Eltrons

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Organizao seqencial na MMI

N A D H

FM N :Fe-S C O M P LE X OI

C oQ

C it b C 1e Fe-S C O M P LE X OIII

C it c

C it a-a3

1/2O 2 H 2O

C O M P LE X OIV

S U C C IN A TO

FA D :Fe-S

C O M P LE X OII

O SQ U A TR OC O M P LE X O SD AC A D E IAD ETR A N S P O R TED EE L TR O N S

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Componentes (natureza)

enzimas e um composto lipdico capacidade de aceitar e transferir eltrons organizadas na MMI na forma de complexos a) desidrogenases complexos enzimticos NAD, FMN e FAD centros Fe S

b) ubiquinona (CoQ)

Quinona lipossolvel longa cauda isoprenide

c) Citocromos

protenas transportadoras de eltrons HEME (coenzima) 3 classes (a, b e c) *diferena: cadeia polipeptdica espectro de absoro de luz

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Componentes (natureza)

Centros Fe S

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Componentes (natureza)

Ubiquinona (CoQ)

Ubiquinona (oxidada) (Q)

Semiquinona (QH)

Ubiquinol (reduzida) (QH2)

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Componentes (natureza)

Ferro protoporfirina IX Cit b

Heme C Cit c

Heme

Heme A - Professora Ana Chaves Cit a

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Substratos NAD e FAD dependentes

Substratos NAD Dependentes -cetoglutarato Piruvato Malato Isocitrato Glutamato FAD Dependentes Succinato Acil-CoA Glicerol P

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Reaes

Matriz
fumarato succinato Succinato desidrogenase FADH2 FAD

ATP
NADH NADH+ H+ DESIDROGENASE

ATP

ATP
2 H2 O 4H+ + O2

NAD+

Membrana interna FMN

Fe+3 - s FMNH2 Fe+2 - s

UQH2 UQ

Fe+3
Cit b

Fe+2
Cit c1

Fe+3
Cit c

Fe+2
Cit a

Fe+3
Cit a3

Fe+2

Fe+3

Fe+2

Fe+3

Fe+2

Espao intermembrana

2 H+

Amital Rotenona

2 H+

Antimicina A 2 H+
CN CO H2S

CADEIA RESPIRATRIA
- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Consideraes sobre a CR

energia liberada aos poucos

H2 O2 2H
Dos nutrientes via NADH
1/2

do contrrio

1/2

O2

oxidao dos S
Liberaao no controlada de energia trmica

2 H+ 2e-

Liberao controlada de energia para sntese de ATP

liberaria energia trmica de forma no controlada

CTE

2 e2 H+ H2 O
(a) Reao no controlada
1/2

O2

H2 O
(b) Respirao celular

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Consideraes sobre a CR

eltrons fluem no sentido do > Potencial Redox

o Por se tratar de oxi-redues

p Os eltrons que entram so ricos em energia

medida que vo sendo transferidos, perdem G ( livre) parte dessa (G) perdida em forma de calor
- Professora Ana Chaves

utilizada para sntese de ATP processo acoplado fosforilao oxidativa (MMI)

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Consideraes sobre a CR

potencial redox (volts)

Posies aproximadas dos componentes da CR na escala de potencial redox. A liberao de energia dirige a translocao de H+ em tres sitios na CR (Complexos I, III e IV)

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Cadeia Respiratria Consideraes sobre a CR

Substatos NAD dependentes 3 locais Substratos FAD dependentes

2 locais

Espao Intermembranas

onde a liberada suficiente para a produo de ATP

Membrana Mitocondrial Interna

Succinato

Fumarato

Matriz Mitocondrial

Cadeia de Transporte de Eltrons

- Professora Ana Chaves

Fosforilao Oxidativa

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

oxidaes biolgicas

Sntese de ATP

Fosforilao Fotossinttica

sntese de ATP dirigida pela solar (cloroplasto)

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Sntese de ATP
sntese de ATP obtida diretamente em reaes que utilizam como S compostos ricos em

Fosforilao em nvel de Substrato

1-3 bifosfoglicerato fosfoenolpiruvato Succinil- CoA

Piruvato quinase

Fosfoenolpiruvato

ADP

Piruvato ATP

ocorre fora da CR, independe de O2 e produz pequena quantidade de gliclise e CK

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Sntese de ATP
Fosforilao oxidativa sntese de ATP dirigida pela liberada pelo transporte de eltrons para o O2 na CR Teoria Quimiosmtica (Mitchel, 1960) MMI complexo V (ATP sintase)

2) isto resulta numa diferena de [H+], ou seja, gradiente de pH (qumico) e de cargas (eltrico), uma vez que a matriz se torna alcalina e o EI, cido; 3) a MMI impermevel aos H+, que devem passar de volta para a matriz pela ATP sintase; 4) a eletroqumica resultante dessa diferena pH e de carga a fora prton-motora que dirige a sntese de ATP; 5) a FPM impulsiona os H+ de volta matriz, a favor do gradiente, suprindo a necessria para a sntese de ATP a partir de ADP + Pi, catalisada pela ATP sintase.

- Professora Ana Chaves

1) a transferncia de eltrons ao longo da CR acompanhada por um bombeamento de H+ atravs da MMI em direo ao EI;

Fosforilao oxidativa acoplada CTE

exterior da mitocndria Membrana Mitocondrial Externa Transporte de eltrons

oxidaes biolgicas

Sntese de ATP

Espao intermembrana

ATP sintase

[H+]

Membrana Mitocondrial Interna Matriz Mitocondrial

[H+]

oO bombeamento de H causa uma a Os eltrons (carregados via NADH e nFADH ) oriundos de vias metablicas de carga e de pH entre o EI e a MM.
+

(gliclise, CK, -oxidao) alimentam os transportadores da MMI, os quais bombeiam prtons H+ para o EI

Este gradiente eletroqumico a fora prton-motriz para a sntese de ATP

- Professora Ana Chaves

prton-motriz impulsiona os H+ de volta pA fora MM, suprindo a E para a sntese de ATP, catalisada pelo complexo ATP sintase na MMI

oxidaes biolgicas

ATP sintase
ATP sintase o nome genrico dado a protenas que sintetizam ATP a partir de ADP e de fosfato inorgnico, utilizando para isso alguma forma de energia A seqncia da reao, coordenada pela presena do on magnsio, a seguinte: ADP + Pi ATP
- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

ATP sintase
Todas as enzimas so belas, mas a ATP sintase uma das mais belas, assim como uma das mais incomuns e importantes
Paul Boyer Esta frase de Boyer, a qual expressa sua admirao pela ATP sintase, se baseia nos fatos de que quase todas atividades celulares (como o metabolismo) que envolvem gasto de energia requerem ATP; a sntese de ATP a reao qumica mais ocorrente no mundo biolgico; ATP sintase a mais abundante protena na terra, tendo preservado mais de 60% de sua configurao da unidade ao longo da evoluo.
- Professora Ana Chaves
Fonte: www.wikipedia.org

oxidaes biolgicas

Inibidores e desacopladores da CR
Inibidores atuam em locais especficos e impedem o fluxo de eltrons no h sntese de ATP no h consumo de O2 no h produo de H2O rotenona, cianeto, malonato, oligomicina, antimicina A substncias lipoflicas, que atravessam a MMI carregando os H+ para a MM, desfazendo o gradiente eletroqumico em sua presena, permanece o transporte de eltrons, mas no a fosforilao oxidativa efeitos no h sntese de ATP o consumo de O2 livre perdida em forma de calor dinitrofenol
- Professora Ana Chaves

efeito exemplos Desacopladores

exemplo

oxidaes biolgicas

Inibidores da CR
rotenona

antimicina A

Cianeto ou CO

- Professora Ana Chaves

Ciclo de Krebs Ciclo do cido Ctrico

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

matriz mitocondrial

oxidaes biolgicas

Ciclo de Krebs
o centro do metabolismo energtico na maioria das clulas aerbicas srie de reaes enzimticas
- Professora Ana Chaves

oxidao de acetil-CoA com a liberao de CO2 Funes catablica anablica conservar na forma de coenzimas reduzidas (NADH E FADH2), visando a produo de para a clula (principal) intermedirios usados em reaes de sntese NAD, FAD, CoA

Principais coenzimas envolvidas

oxidaes biolgicas

Ciclo de Krebs
o centro do metabolismo energtico na maioria das clulas aerbicas srie de reaes enzimticas
- Professora Ana Chaves

oxidao de acetil- CoA com a liberao de CO2 Funes catablica anablica conservar na forma de coenzimas reduzidas (NADH E FADH2), visando a produo de para a clula (principal) intermedirios usados em reaes de sntese NAD, FAD, CoA

Principais coenzimas envolvidas

oxidaes biolgicas

Ciclo de Krebs

Clulas aerbicas utilizam uma roda gigante metablica:

- Professora Ana Chaves
Fonte: Ferns Whee, DelMar Fair Corbis/Richard Cummins

o Ciclo do cido Ctrico ou Ciclo de Krebs para gerar energia pela oxidao de acetil-CoA

oxidaes biolgicas

Ciclo de Krebs - Localizao sub-celular

Matriz mitocondrial

- Professora Ana Chaves

Ciclo de Krebs - Reaes

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Condensao Acetil-CoA

Oxidao

Sntese de IC E: aconitase Oxaloacetato Malato Citrato Ciclo de Krebs Isocitrato

Ciclo de Krebs - Reaes

E: Malato desidrogenase

Hidratao E: fumarase

Fumarato

-Cetoglutarato

Oxidao E: Succinato desidrogenase Succinato SuccinilCoA

Descarboxilao oxidativa E: Complexo -cetoglutarato desidrogenase

E: SuccinilCoA sintetase

Fosforilao em nvel de substrato

- Professora Ana Chaves

Descarboxilao oxidativa E: Isocitrato desidrogenase

oxidaes biolgicas

produo de ATP

Ciclo de Krebs - Concluses

Liberao de CO2

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Ciclo de Krebs - Animaes

Animao Animao sobre sobre Cadeia Cadeia Respiratria Respiratria e e CK CK

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

Ciclo de Krebs Funo anablica

- Professora Ana Chaves

oxidaes biolgicas

oxidaes biolgicas

Ciclo de Krebs Reaes anaplerticas

- Professora Ana Chaves