INTRODUCCION El estudio de los organismos vivos requiere de aparatos de precisin como lo es el microscopio, en el laboratorio de biologa empleamos dos tipos:

MICROSCOPIO COMPUESTO. El cual utiliza un juego de 2 lentes (ocular y objetivos) para ampliar la imagen, la cual se observa invertida. Las muestras apropiadas para su observacin sern aquellas que dejen pasar luz a travs de ellas, debern de ser monoculares. MICROSCOPIO ESTEREOSCOPICO O LUPA BINOCULAR. La visin se obtiene por reflexin de la l uz que incide sobre la muestra, posee un inversor que permite observar la imagen derecha. Su observacin es generalmente de conjunto, debido a su gran campo; por ejemplo: se puede observar una mosca completa, mientras que en microscopio compuesto, slo sera posible ver las alas y stas por ser muy transparentes. La visin estereoscpica o sensacin de relieve se obtiene cuando cada ojo recibe una imagen por separado captada por cada sistema ptico prcticamente cada ocular constituye un microscopio compues to independiente. Aunque las variaciones del microscopio son muy diversas, podemos considerar que bsicamente estn constituidos por 3 sistemas: a) Sistema mecnico; b) Sistema de iluminacin; c) Sistema ptico. a) SISTEMA MECANICO Base o pie. Soporta las dems estructuras del microscopio y contiene a la fuerza de luz. Brazo. Une a la base con el tubo ocular, contiene a los tornillos macromtricos y micromtricos, sirve de apoyo para trasladar el microscopio. Tornillo macromtrico. Proporciona avances rpidos en la platina, en el orden de centmetros. Tornillo micromtrico. Proporciona avances en la platina en orden de milmetros. Platina. Sirve para colocar las muestras a observar y contiene al condensador y al diafragma Carro de platina. Controla los desplazamientos del portaobjetos. Revlver. Contiene a las lentes oculares. (10X, 40X, 100X) b) SISTEMA DE ILUMINACION CONDENSADOR. Est situado por debajo de la platina de modo que puede subir o bajar, su funcin es concentrar y enfocar los rayos provenientes de la fuente luminosa situada en la base del microscopio a fin de iluminar el campo visual. Diafragma o iris. Se localiza en la parte inferior del condensador, una abertura regulable por medio de una placa lateral que va a controlar la cantidad de luz que saldr hacia el condensador. Fuente luminosa. Se localiza en el pie o base del microscopio, es generalmente una lmpara integrada a la base. c) SISTEMA OPTICO Lente objetivo. Aumenta la imagen de la muestra a observar; se presenta en diversos aumentos: Lupa (X), Seco dbil (10 X), Seco fuerte (40 X), e Inversin (100 X). NOTA: La palabra SECO para las lentes de 10 X y 40 X, se emplea porque para su utilizacin no se requiere colocar ninguna sustancia entre el lente y la preparacin.

La palabra INMERSION se emplea porque se debe sumergir la lente 100 X en aceite de inmersin, para poder observar con nitidez la muestra. Lente ocular. Amplia la imagen producida por el lente objetivo, est localizada en la parte superior del tubo del microscopio. NOTA: El smbolo X (por) que aparece despus del nmero de cada lente, significa que se deber multiplicar el aumento de la lente objetivo por el aumento de la lente ocular, para as obtener el aumento total alcanzado por el juego de lentes. REGLAS GENERALES PARA EL CUIDADO DEL MICROSCOPIO 1. Traslado. Se toma con la mano derecha el brazo del microscopio y con la mano izquierda la base. 2. El cordn se deber enrollar sobre si mismo , no alrededor del cuerpo del microscopio. 3. El microscopio se encender hasta que comience la observacin. 4. Ya encendido, no se apagar constantemente, sino hasta finalizar la observacin de todas las muestras que se indiquen en la prctica, mientras no se observe, se disminuir la intensidad luminosa. 5. Mientras permanezca encendido se evitar realizar cualquier movimiento brusco. 6. Se evitar manejarlo con las manos hmedas o mojadas. 7. Cuando no se est observando, deber eliminarse la lente ocular con el objeto de menor aumento. 8. El sistema ptico y de iluminacin nunca deber ser tocado con los dedos. 9. No se debern colocar los portaobjetos mojados sobre la platina. 10. Despus de usar el lente de inmersin se deber limpiar con un pao suave o con un papel higinico. 11. En las preparaciones en fresco siempre deber cubrirse con cubreobjetos. OBTENCION DE UN BUEN ENFOQUE: MICROSCOPIO COMPUESTO: l. Colocar el portaobjetos sobre la platina del microscopio. 2. Utilizar el objetivo de menor aumento. 3. Deslizar el tubo del microscopio por medio del tornillo macrom trico, observando lateralmente hasta que el objetivo quede cerca del portaobjetos. 4. Observar a travs de los oculares subiendo lentamente el tubo del microscopio hasta observar la preparacin enfocada, no debe bajarse el tubo del microscopio mientras se est observando, porque puede llegar a chocar el objetivo con el portaobjetos y ocasionar desperfectos. 5. Afinar la imagen moviendo lentamente el tornillo micromtrico. 6. Si se desea mayor aumento, girar el revolver al objeto adecuado.7. Si se utiliza el objeto de inmersin (100 X) colocar sobre la preparacin una gota de aceite de inmersin y baja el tubo del microscopio hasta que la lente del objetivo toque a la gota, observa y ajusta cuidadosamente despus de su uso limpiar el objetivo con un tejido suave (papel seda). MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES 1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posicin de observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda. 2. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo. 3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de ptica. 4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el microscopio. 5. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pauelos especiales para ptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasar

6. 7.

8. 9.

el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden daar las lentes y su sujecin. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macromtrico, micromtrico, platina, revlver y condensador). El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a la preparacin para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se est observando a travs del ocular. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn lquido, secarlo con un pao. Si se mancha de aceite, limpiarla con un pao humedecido en xilol. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la ses in prctica y, al acabar el curso, encargar a un tcnico un ajuste y revisin general de los mismos.

Problemas frecuentes en el manejo del microscopio Defectos de Iluminacin: a) Campo obscuro, sin imagen. Causas probables: l) Falta de luz. Correccin: Accione el interruptor, enchufe el cable, verifique si hay energa elctrica o si la lmpara esta quemada. 2) Objetivo fuera de lugar. Correccin: Gire el objetivo a su posicin de enfoque. b) Campo ovalado, iluminado parcialmente. Causa probable: Objetivo fuera de lugar. Correccin: Gire el objetivo a su posicin de enfoque. c) Imagen muy obscura. Causas probables: l) Diafragma cerrado. Correccin: Desplace la palanca lateral del diafragma. 2) Condensador muy bajo. Correccin: Accione el control que sube el condensador. 3) Condensador defectuoso. Correccin: Avise para que lo repare un tcnico. d) Imagen muy clara. Causas probables: l) Diafragma muy abierto. Correccin: Desplace la palanca lateral del diafragma. 2) Condensador muy alto. Correccin: Accione el control que baja el condensador. Defectos de Enfoque: a) Falta de imagen. Causas probables: l) Preparacin mal centrada. Correccin: Accione los controles del carro. 2) Preparacin mal enfocada. Correccin: Accione el mando macromtrico.b) Imagen borrosa. Causas probables: l) Preparacin mal enfocada. Correccin: Accione el mando micromtrico. 2) Preparacin al revs. Correccin: Coloque la preparacin hacia arriba. 3) Suciedad en la preparacin, ocular u objetivo. Correccin: Lmpielos. Imgenes extraas: a) Manchas o enturbiamientos irregulares, que se desplazan al mover la pr eparacin. Causa probable: Suciedad en el cubreobjetos. Correccin: Limpie la preparacin. b) Manchas o enturbiamientos irregulares que se desplazan al mover el ocular. Causa probable: Suciedades en el ocular. Correccin: Limpie la lente ocular. c) Manchas o enturbiamientos que desaparecen al cambiar el objetivo. Causa probable: objetivo sucio o con aceite. Correccin: Limpie el objetivo. d) Manchas o enturbiamientos que no se desplazan ni desaparecen al mover el ocular, objetivo o preparacin. Causa probable: Suciedad en la lente superior del condensador. Correccin: Limpie el condensador. e) Lneas finas brillantes. Causa probable: Rayaduras en las lentes o trizaduras en la preparacin. Correccin: De cuenta al profesor. f) Otras alteraciones de la imagen (espacios blancos, espacios finos y rectos, grumos intensamente tenidos, bandas obscuras, crculos con bordes obscuros, etc.). Causa probable: defectos en las preparaciones (retraccin del tejido, muescas en el cuchillo del micrtomo, fijador o colorante p recipitado, tejido plegado, burbujas de aire, etc.). Correccin: Examine un sector de la preparacin no alterado o solicite otra preparacin.