MTODOS DE INOCULACIN DE HONGOS Y BACTERIAS

Julin Padierna, Jair cerpa, Nicols Garca

INTRODUCCIN Los diferentes mecanismos y tcnicas de observacin y clasificacin de microorganismos, son de mucha importancia en la salud humana y en plantas, son tcnicas que con el pasar del tiempo ha tomado mayor fuerza, para obtener alguna medida para prevenir o inhibir el ataque de ciertos microorganismos, que son perjudiciales no solo para la salud sino tambin en el campo, causando grandes prdidas econmicas en las diversas plantaciones, en este trabajo se hablara de las diferentes tecinas y mtodos de observacin y clasificacin de microorganismos utilizadas en el laboratorio. Cuando se realiza el diagnstico de una enfermedad de origen bitico, especialmente aquellas no asociadas en sus sntomas a problemas ya conocidos o que corresponden a complejos patolgicos, es necesario determinar la patogenicidad de los microorganismos aislados o caracterizados previamente. Dentro del procedimiento de aplicacin de las pruebas de patogenicidad o postulados de Koch, la inoculacin es un factor determinante. Objetivos: Determinar la interaccin entre el hospedero y el mecanismo de penetracin de un agente patgeno. Observar cmo se facilita un proceso infeccioso si por heridas mecnicas (inoculacin) o por aspersin

METODOLOGIA 1. INOCULACIN DE HONGOS Se trabaj con un hongo que se determin ms adelante. Se tom un beaquer y se llen con agua destilada 100 ml y se le agrego con un asa cuidadosamente una porcin de un cultivo de hongo, se mesclo bien hasta que la muestra se homogeneizara, se vierte la solucin en dos beaquer de 50 ml cada uno y se aforan hasta 100 ml, se toma esta solucin y en dos manzanas, una que va a ser inoculada y otra esparcida superficialmente.

Manzana esparcida

manzana inoculada

A esta se la hizo un monitoreo cada 24 (acepto el sbado y domingo) A las 24H: Manzana esparcida: no present ninguna variacin. Manzana inoculada: no present ninguna variacin. 4 dia: Manzana inoculada: se comienza a observar un tejido necrtico por los bordes de las heridas de la inoculacin Manzana esparcida: se encontr un pequeo crecimiento de algunas estructuras fungosas. Dia 5: Manzana inoculada: tejido necrtico alrededor dela inoculacin con un hundimiento en el tegido Manzana esparcida: estructuras de crecimiento de hongos

Se le hizo un montaje al hongo conque trabajamos y se observ una estructura (ascospora)

2. INOCULACIN DE BACTERIAS -En la cmara de flujo laminar, se toma un medio con Agar nutritivo donde se purific un crecimiento bacterial. Se toman asadas del medio y se transfiere a un tubo de ensayo con agua destilada estril; la suspensin se agita y se afora a 20 ml con agua destilada estril. -Se toman hojas de tomate o aj sanas y se lavan suavemente con agua destilada estril. Cada estudiante toma dos hojas para inocular de dos maneras, en la cmara de aislamiento: (1) Una hoja de bistur se sumerge en la suspensin de bacterias y se pasa sobre la superficie de la hoja, haciendo heridas sin cortar completamente la hoja. Esta actividad se repite unas 4 veces. (2) A la otra hoja se le asperja la suspensin de bacterias en la superficie sin hacer heridas. -Las dos hojas se colocaron por separado dentro de cajas petri estriles, sobre papel filtro y con algodn humedecido con agua destilada estril; se sellan con vinipel, y se rotulan. Se llevan al cuarto de crecimiento, y se hacen observaciones cada 24 horas, detallando cambios en la apariencia de la hoja.

Datos de la bacterias: Dia 1 las dos nada El lunes la cortada presenta pudricin blanda La aspersida no presenta Martes la cortada una pudricin en las cortadas

No presentas Victor estos es para la conclucion Las bacterias no tienen medios de penetracin por lo tanto no pudieron entrar al interior de la manzana y los hogos si poseen medios de penetracion

RESULTADOS Y DISCUSION No se encontraron resultados en ninguno de los montajes esto puede ser causado por errores al momento de la preparacin y el procedimiento. En algunos casos ocurre que el hongo o bacteria obtenidos en el medio de cultivo no sea un patgeno corrientemente asociado con el hospedante en cuestin.

CONCLUSIN Los mtodos de inoculacin dependen de la naturaleza del agente causal y debe ser casi igual o lo mas similar posible a como se cree que ocurre la infeccin de manera natural. Sin embargo, ante alteraciones nuevas o desconocidas, el evaluar los mtodos de inoculacin constituye todo un trabajo de investigacin. BIBLIOGRAFIA Agrios, G. N. (2005). Plant pathology. 5th ed. Nueva York: Elsevier Academic Press.

FORBES, B., SAHM, D., WEISSFELD, A., 2009. Bailey & Scott: diagnostico microbiolgico. Editorial Mdica Panamericana. Pp 81. Buenos Aires, Argentina. ISBN 978-950-06-8243-5 GONZALEZ LUIS, 1976,. INTRODUCCIN A LA FITOPATOLOGA. INSTITUTO INTERAMERICANO DE CIENCIAS AGRCOLAS. San Jose Costa Rica. p 72