HISTORIA DE LA MICROBIOLOGA

1 Concepto de Microbiologa
Microbiologa es el estudio de los organismos microscpicos, deriva de 3 palabras griegas: micros (pequeo) bios (vida) y logos (ciencia) que conjuntamente significan el estudio de la vida microscpica. Para mucha gente la palabra microorganismos le trae a la mente un grupo de pequeos criaturas que no se encuadran en ninguna de las categoras de la pregunta clsicas: es animal , vegetal o mineral ? Los microorganismos son diminutos seres vivos que individualmente son demasiado pequeos como para verlos a simple vista . En este grupo se incluyen las bacterias, hongos (levaduras y hongos filamentosos) virus, protozoos y algas microscpicas. Normalmente tendemos asociar estos pequeos organismos con infecciones enfermedades como el SIDA o deterioro de alimentos. Sin embargo la mayora de los microorganismos contribuyen de una forma crucial en el bienestar de la tierra ayudando a mantener el equilibrio de los organismos vivos y productos qumicos en nuestro medio ambiente: Los microorganismos de agua dulce y salada son la base de la cadena alimentaria en ocanos, lagos y ros. Los microorganismos del suelo destruyen los productos de desecho e incorporan el gas nitrgeno del aire en compuestos orgnicos as como reciclan los productos qumicos en el suelo agua y aire: ciertas bacterias y algas juegan un papel importante en la fotosntesis ,que es un proceso que genera nutrientes y oxgeno a partir de luz solar y CO2 siendo un proceso crtico para el mantenimiento de la vida sobre la tierra : los hombres y algunos animales dependen de las bacterias que habitan en sus intestinos para realizar la digestin y sntesis de algunas vitaminas como son la K y algunos de complejo B . Los microorganismos tambin tienen aplicaciones industriales ya que se utilizan en la sntesis de productos qumicos como son acetona, cidos orgnicos, enzimas, alcohol y muchos medicamentos.

El proceso de produccin de acetona y butanol por bacterias fue descubierto en 1914 por Chaim Welzmann, un polaco que trabajaba en Inglaterra para Winston Churchill. Cuando estallo la primera guerra mundial en agosto de ese ao, la produccin de acetona era esencial en el proceso de fabricacin de las municiones, por lo que el descubrimiento de Weizmann jugo un papel determinante en el desarrollo de la guerra. Despus de la guerra, rehus todos los honores que le propuso el gobierno britnico. Sin embargo, utilizo su influencia para que el gobierno britnico ayudara a establecer el estado judo en Palestina. En 1949, Weizmann fue elegido el primer presidente de Israel. La industria alimentara tambin usa microorganismos en la produccin de vinagre, bebidas alcohlica, aceituna, mantequilla, queso, yogurt y pan. Adems, las bacterias y otros microorganismos ahora pueden ser manipulados para producir sustancias que ellos normalmente so sintetizan. A travs de esta tcnica, llamada ingeniera gentica, las bacterias pueden producir importantes sustancias teraputicas como insulina, hormona de crecimiento humana e interfern. Actualmente sabemos que los microorganismos se encuentran en todas partes, pero hace poco, antes de la invencin del microscpico, los microorganismos eran desconocidos para los cientficos. Miles de personas moran en las epidemias cuyas causas no se conocan. El deterioro de los alimentos no se poda controlar siempre y muchas familias enteras moran debido a que no existan vacunas y antibiticos disponibles para combatir las infecciones. Nosotros podemos hacernos una idea de cmo se han desarrollado nuestros actuales conceptos de microbiologa repasando los acontecimientos histricos que han cambiado nuestras vidas. La microbiologa es una ciencia biolgica que estudia la estructura, fisiologa, gentica ecologa y las aplicaciones socioeconmicas de los microorganismos. Es decir, de aquellos seres vivientes comprendidos en los reinos Fung (hongos), Protista y Monera (bacterias), incluyendo a los virus y a otros organismos moleculares. La microbiologa utiliza tcnicas como la esterilizacin, el empleo de medios de cultivo, el anlisis molecular y bioqumica, para el aislamiento y crecimiento de los microorganismos.

1.2 Desarrollo histrico de la microbiologa

Como otras ciencias, la microbiologa actual ha seguido tambin un desarrollo histrico, que por razones didcticas aqu se ha dividido en seis periodos. PHILOSOPHICAL TRANSACTIONS OF THE ROYAL SOCIETY, su primer articul sobre observaciones microscpicas y la primera persona en describir los microorganismos en detalle, a los cuales denomino animculos.

embargo, estas observaciones no condujeron a ninguna investigacin acerca de las posibles actividades de los microorganismos, ni como agentes de fermentaciones ni de enfermedades infecciosas ya que el desarrollo de la qumica ya de la medicina era demasiada primitivo.

Leeuwenhoek examin el agua de lluvia, de mar, de ri, saliva y otras materias. Sin

B. PERIODO DE LA OBSERVACIN (1676-1867)

Despus que las publicaciones de Leewenhoek demostraron la existencia de los microorganismos fue necesario, sin embargo, esperar cerca de 200 aos para que la microbiologa tenga un avance rpido. Esto fue debido principalmente al predominio en aquella poca de la Teora de la Generacin espontnea. Este fue un periodo de duro enfrentamiento filosfico entre los diversos cientficos que termino con tal Teora. Hombres como Francesco Redi (1626 1698) Lzaro Spallanzani (17291799), Jhon Tyndall (1820-1893) y. principalmente, Louis Pasteur (1822-1895), dieron la victoria e impulsaron vigorosamente a la microbiologa. La idea de la generacin espontnea se remonta a la cultura griega, los cuales crean que las ranas y gusanos crecan espontneamente a partir del lodo, incluso existan recetas: llenando una tinaja con trapos y colocndola en un sitio apartado durante semanas al final crecan ratones a partir de trapos. En el siglo XVII el italiano Francesco Redi demostr en 1668 que los gusanos encontrados en la carne podrida eran las larvas que provenan de los huevos que previamente haban depositado en la carne las moscas y no el producto de la generacin espontnea. Sin embargo una cosa eran huevos de moscas y otra los microorganismos que solo se podan ver, con la ayuda del microscpico. En 1745 Jhon Needham hirvi trozos de carne para destruir los organismos preexistentes y los coloco en un recipiente abierto. Al cabo de un tiempo observo colonias de microorganismos sobre la superficie y concluyo que se generaban espontneamente a partir de la carne. En 1769, Lzaro Spallanzani repiti el experimento pero tapando los recipientes, no apareciendo las colonias, lo que contradeca la teora de la generacin espontnea. Pero Needham argumento que el aire era esencial para la vida incluida la generacin espontnea de microorganismos y este aire haba sido excluido en los experimentos de Spallazani. Unos 100 aos despus en 1836 Franz Schuize pas el aire a travs de unas soluciones cidas fuertes hacia el interior de un recipiente con carne hervida. Al ao siguiente Theodor Schwann paso el aire a travs de tubos calientes. Los microorganismos no aparecan en ninguna caso ya que los microorganismos presentes en el aire haban sido aniquilados. Sin embargo los que apoyaban la generacin espontnea comentaban que el cido y el calor alteraban el aire de tal manera que impeda la generacin espontnea de los microorganismos.

El experimento ms contundente de Pasteur y que derrumbo la teora de la generacin espontnea, fue el de los frascos con cuello de cisnes (frascos de Pasteur).

Los frascos de Pasteur eran matraces cuya boca estaba estirada mediante calor hasta constituirse en un tubo delgado y curvado , manteniendo el extremo abierto ; los frascos contenan una infusin de materiales putrescibles y eran sometidos a calor hasta ebullicin de tal manera que se eliminaban los microorganismos iniciales y , aunque el aire poda penetrar al interior del frasco ,las partculas de polvo con los microorganismos del ambiente se quedaban en las paredes curvadas del cuello , permaneciendo la infusin estril durante periodos muy largos de tiempo (algunos frascos fueron sellados por Pasteur fue no solo el brazo sino tambin la voz , y finalmente el smbolo de la ciencia triunfante .Junto con Pasteur , Tyndall y Appert (quien gan un concurso patrocinado por Napolen para desarrollar un mtodo de conservacin de alimentos enlatados , necesario para sus largos periodos de guerra ) contribuyen al establecimiento de la esterilizacin (pasterizacin, tindalizacin y apertizacin, respectivamente ) como una de las tcnicas fundamentales para la microbiologa .

POSTULADOS DE KOCH:
1. El organismo causal debe encontrase siempre en los animales, hombre, plantas que padecen la enfermedad y no debe encontrarse en los individuos sanos. 2. El organismo casual debe ser cultivado en cultivo puro a partir del individuo enfermo. 3. Tal cultivo puro, cuando se inocula a individuos susceptibles debe dar lugar a los sntomas caractersticas de la enfermedad. 4. El organismo causal debe ser re aislado de los individuos experimentales y cultivado nuevamente en el laboratorio despus de lo cual debe an ser similar al organismo inicial.

En 1833 Christiam Gram desarrollo empricamente el mtodo de tincin diferencial para bacteria que permite diferenciar dos tipos bsicos de bacterias debido a su capacidad de retener (positivas) o (negativas) el colorante bsico cristal violeta (la diferencia entre los dos tipos bsicos de bacterias se debe a la composicin y estructura de la pared celular). Con las principales tcnicas microbiolgicas ya desarrolladas se identificaron los microbios causantes de las principales, y aun presentes, enfermedades .Algunos llaman a este periodo como el de los cazadores de microbios.

D. PERIODO DE LA FISIOLOGA MICROBIANA (1910-1940)

Con la facilidad para el aislamiento de microorganismos y su cultivo en forma pura, se pudo iniciar el estudio de su comportamiento fisiolgico. Esto fue iniciado por Pasteur con sus estudios sobre fermentacin alcohlica y fermentacin lctica en la fabricacin de vino y la cerveza y la torcedura de ambas bebidas. Ms tarde, S. Winogradski (1856-1953), M.W.Bejijerinck (1851-1933) relacionaron el metabolismo microbiano con las transformaciones biogeoqumicas en el suelo y agua y, en base a las particularidades metablicas microbianas, desarrollan la tcnica de cultivo por enriquecimiento. Otros como A. J. Kluyver y C.B. Van Niel estudiaron el metabolismo bacteriano y la fotosntesis bacteriana respectivamente. El cultivo por enriquecimiento consiste en aumentar deliberadamente la poblacin de un determinado grupo microbiano de una muestra mediante la provisin de condiciones particulares a tal grupo; con la poblacin particular aumentada puede aislarse el microorganismo utilizando las otras tcnicas de cultivo. Por ejemplo para aislar una bacteria litrotofa que sea capaz de utilizar amonio , se prepara un medio de cultivo que contenga NH4 como nica fuente de energa y despus de inoculario con suelo , agua u otra muestra , se le incuba en oscuridad. La caracterstica de Pasteur de convertir sus formulaciones tericas en soluciones tiles a los problemas de humanidad (No hay tales cosas como ciencia pura y ciencia aplicada hay solamente ciencia y las aplicaciones de la ciencia), ha sido una de las fisiolgicas de los microorganismos ha sido empleada, por ejemplo, en la produccin econmica de muchas sustancias. La produccin de levadura de cerveza en grandes tanques aireados file posible desde los finales del siglo 19. En plena Primera Guerra Mundial, Chain Weisman (a la postre primer presidente de Israel) salvo a los Aliados de la escasez de explosivos para sus municiones, al llevar a gran escala la produccin de acetona a partir de granos amilceos mediante fermentacin con Clostridium

acetobutyricum.

En 1923 se puso en operacin exitosa la primera planta mundial de cido ctrico por Pfizer, que utilizaba la fermentacin de la sacarosa por Asperigillus Nger).

UNIVERSIDAD LAICA ELOY ALFARO DE MANABI.

FACULTAD DE CIENCIAS MDICAS

MICROBIOLOGA.

NOMBRE:
PALMA DELGADO KAREN NOEMI

CURSO:
TERCER SEMESTRE D

Catedrtico:
Lic. Fernando Cedeo

E. EL PERIODO DE LA GENTICA MICROBIANA (1941-1970)

A inicios de la dcada de los 40 no estaba plenamente confirmada la participacin de los cidos nucleicos como los agente fundamentales en la transmisin hereditaria de los organismos vivientes. Si bien los trabajos de Mendel haban dado origen a la gentica, no se incluia a los microorganismos y, en todo caso, era un misterio su comportamiento gentico. Fueron G, W. Beadie y E.L Tatum quienes en 1941, probaron la relacin entre los genes y las enzimas l encontrar mutantes auxotroficos (incapaces de sintetizar un metabolismo y, entonces, dependientes del suministro extenso de este) del hongo Neurospora. En 1943, Max Delbruck y Salvatore Luria encontraron mutaciones espontneas en bacterias. Un ao ms tarde, O.T. Avery, C.M. Macleed y M. Mccarty probaron contundentemente que el DNA era la molcula hereditaria y que las bacterias podan transferir genes mediante la transformacin, J.Lederberg y E.L. Tatum (1946) demostraron que algunas bacterias tambin podan transferir genes mediante contacto clula (conjugacin). En 1952, F.H.C.

Crick, J.D. Watson y W.Wilkins propusieron el modelo estructural del DNA.

En este periodo, tambin, se inicia la utilizacin de los nuevos conceptos de la gentica de microorganismo para lograr mejorar las caractersticas culturales e incrementar las capacidades metablicas de los microorganismos utilizados en la produccin industrial. Se considera que el uso de la Mutagenesis con estos propsitos es casi inmediato al hallazgo de mutantes de Neurospora. La Mutagenesis con estos propsitos es casi inmediata al hallazgo de mutantes Neurospora. La Mutagenesis es aun utilizada en los programas de mejoramiento gentico de microorganismo de uso industrial El periodo anterior fue sin duda muy rico en descubrimiento gentico y molecular los cuales continan actualmente. Sin embargo, en 1973 se publico un artculo en el que se demostraba la factibilidad de introducir y expresar genes forneos en bacterias. Particularmente el gen de la somatostaina, una hormona de mamferos, pudo ser expresado en Escherichia coli. Esto dio lugar al resurgimiento y modernizacin de la Biotecnologa, es decir, de la aplicacin de ingeniera de los procesos biolgicos desarrollados por clulas microbianas, vegetales o animales, por sus componentes o partes, con la finalidad de obtener bienes y servicios. Actualmente se produce en forma industrial varias protenas humanas, animales y vegetales empleado microorganismo. La formacin de industrias biotecnolgicas ya ha causado una nueva Revolucin industrial, cuyo mximo nivel e podra alcanzar recin en las primeras dcadas del prximo siglo.

RAMAS DE LA MICROBIOLOGA
La microbiologa se divide en 4 ramas para el estudio de los diferentes agentes microbianos causantes de las patologas infecciosas: La Parasitologa es una rama de la Biologa que se ocupa del conocimiento de los parsitos, es decir, de todos los seres vivos, sean microscpicos o no, cuya supervivencia depende de una estrecha asociacin con otros seres vivos. En este sentido, constituye una rama de la Ecologa. Sin embargo, en sentido estricto la Parasitologa se ocupa del estudio de protozoos, helmintos y artrpodos y estar formada por diferentes su disciplinas dependientes de tipos morfolgicos, fisiolgicos, funcionales y taxonmicos: Protozoologa, Helmintologa y Artropodologa La Micologa (del griego , hongo, y -, tratado, estudio) ciencia que se dedica al estudio de los hongos. Es una de las ramas de la ciencia ms extensas con y diversificadas avances

significativos en la investigacin y desarrollo tecnolgico.

La Bacteriologa es la rama de la Biologa que estudia la morfologa, ecologa, gentica y bioqumica de las bacterias as como otros muchos aspectos relacionados con ellas. Es de gran importancia para el hombre por sus implicaciones mdicas, alimentarias y tecnolgicas.

La Virologa es el estudio de virus y virus como agentes: clasificacin y evolucin, su estructura, sus formas de infectar y explotar las clulas para la reproduccin del virus, las enfermedades que causan, las tcnicas para aislar y la cultura de ellos y su uso en la investigacin y terapia.

EL MICROSCOPIO
El vocablo griego, microscopio, proviene de micro: (significa de tamao pequeo) y acopio (observar). Su funcin es agrandar una imagen. El microscopio es un instrumento que ayuda al bilogo en su tarea de un modo fundamental, y ha posibilitado el desarrollo cietfico. Su invencin se debe presumiblemente a un holands, Zacharias Jansen, de dudosa reputacin, moral y cientfica, siendo la poca de su creacin, los albores del siglo XVII. En 1674, Antn Van Leewenhoeck, se preocup de perfeccionar el invento.

El microscopio electrnico es mucho ms preciso que el ptico, que fue el primero en inventarse, pues permite diferenciar detalladamente la estructura de bacterias y virus, que son invisibles al microscopio ptico, por su nfimo tamao. El microscopio ptico funciona por refraccin (cambio de velocidad y direccin de ondas al pasar de un medio a otro) provocado por contar con una lente (microscopio simple o lupa) o algunas lentes (microscopio compuesto). Las partes que conforman un microscopio ptico compuesto son: un sistema ptimo, formado por una lente ocular, que se ubica cerca del ojo de la persona que va a observar la imagen, y un objetivo, que es una lente ubicada cerca del objeto observable. El objetivo ampla la visin del objeto, y el lente ocular, ampla la imagen del objetivo. Los rayos lumnicos son enviados al condensador por el foco, y el condensador, que es otra lente los concentra sobre el objeto. Tambin posee un sistema mecnico, para fijar y permitir el funcionamiento del aparato. El microscopio electrnico, fue creado en 1931, donde los electrones fueron los encargados de reemplazar la luz, y a los campos magnticos les correspondi sustituir a la lentes, siendo al principio de transmisin, crendose el microscopio electrnico de barrido, en 1942. Permite ampliar la imagen hasta 200.000 veces su tamao original. La mecnica cuntica posibilit en 1981, crear el microscopio con efecto tnel, de precisin an mayor.

PARTES DEL MICROSCOPIO

1.1 Parte mecnica.
La parte mecnica del microscopio comprende el pie, el tubo, el revlver, el asa, la platina, el carro y el tornillo micromtrico. Estos elementos sostienen la parte ptica y de iluminacin; adems, permiten los desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.

El pie y soporte: contiene la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de y o bien es rectangular. La columna o brazo: llamada tambin asa, es una pieza en forma de C, unida a la base por su parte inferior mediante una bisagra, permitiendo la inclinacin del tubo para mejorar la captacin de luz cuando se utilizan los espejos. Sostiene el tubo en su porcin superior y por el extremo inferior se adapta al pie. El tubo: tiene forma cilndrica. El tubo se encuentra en la parte superior de la columna mediante un sistema de cremalleras, las cuales permiten que el tubo se mueva mediante los tornillos. El tornillo macromtrico o macroscpico: girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del microscopio, deslizndose en sentido vertical gracias a un mecanismo de cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rpido de la preparacin. El tornillo micromtrico o microscopico: mediante el ajuste fino con movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y ntido de la preparacin. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm, que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos. La platina: es una pieza metlica plana en la que se coloca la preparacin u objeto que se va a observar. Presenta un orificio, en el eje ptico del tubo, que permite el paso de los rayos luminosos a la preparacin. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmvil; en otros casos puede ser giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares. Las pinzas: son dos piezas metlicas que sirven para sujetar la preparacin. Se encuentran en la platina. El revlver: es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan los objetivos. Al girar el revlver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posicin de trabajo, lo que se nota por el ruido de un pin que lo fija.

1.2 Sistema ptico.

Es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de lentes que lo componen. Est formado por el ocular y los objetivos. El objetivo proyecta una imagen de la muestra que el ocular luego ampla.

El ocular: se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se debe a la cercana de la pieza con el ojo del observador. Tiene como funcin aumentar la imagen formada por el objetivo. Los oculares son intercambiables y sus poderes de aumento van desde 5X hasta 20X. Existen oculares especiales de potencias mayores a 20X y otros que poseen una escala micromtrica; estos ltimos tienen la finalidad de medir el tamao del objeto observado. Los objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revlver y producen el aumento de las imgenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se hallan cerca de la preparacin que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de inmersin. o Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la preparacin. En la cara externa llevan una serie de ndices que indican el aumento que producen, la abertura numrica y otros datos. As, por ejemplo, si un objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es planacromtico, su aumento 40 y su apertura numrica 0,65, calculada para una longitud de tubo de 160 mm. El nmero de objetivos vara con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos ms frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X. o El objetivo de inmersin est compuesto por un complicado sistema de lentes. Para observar a travs de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el objetivo y la preparacin, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 100X y se distingue por uno o dos crculos o anillos de color negro que rodea su extremo inferior.

1.2 Sistema de iluminacin.

Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la preparacin u objeto que se va a observar en el microscopio de la manera adecuada. Comprende los siguientes elementos:

Fuente de iluminacin: se trata clsicamente de una lmpara incandescente de tungsteno sobrevoltada; en versiones ms modernas con leds. Por delante de ella se sita un condensador (una lente convergente) e, idealmente, un diafragma de campo, que permite controlar el dimetro de la parte de la preparacin que queda iluminada, para evitar que exceda el campo de observacin produciendo luces parsitas. El espejo: necesario si la fuente de iluminacin no est construida dentro del microscopio y ya alineada con el sistema ptico, como suele ocurrir en los microscopios modernos. Suele tener dos caras: una cncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las direcciones. La cara cncava se emplea de preferencia con iluminacin artificial, y la plana, para natural (luz solar). Los modelos ms modernos no poseen espejos sino una lmpara que cumple la misma funcin que el espejo. Diafragma: est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparacin, formando un cono de luz con el mismo ngulo que el del campo del objetivo. El condensador se sita debajo de la platina y su lente superior es generalmente planoconvexa, quedando la cara superior plana en contacto con la preparacin cuando se usan objetivos de gran abertura (los de mayor ampliacin); existen condensadores de inmersin, que piden que se llene con aceite el espacio entre esa lente superior y la preparacin. La abertura numrica mxima del condensador debe ser al menos igual que la del objetivo empleado, o no se lograr aprovechar todo su poder separador. El condensador puede deslizarse verticalmente sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo, bajndose para su uso con objetivos de poca potencia. Condensador: el condensador est provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura para ajustarla a la del objetivo. Puede emplearse, de manera irregular, para aumentar el contraste, lo que se hace cerrndolo ms de lo que conviene si se quiere aprovechar la resolucin del sistema ptico.

MATERIALES.

MATRAZ
El matraz es un instrumento de laboratorio el cual se usa como recipiente de cristal donde se mezclan las soluciones qumicas, generalmente de forma esfrica y con un cuello recto y estrecho, que se usa para contener lquidos; se usa en los laboratorios.

Tipos de Matraz:
1) Matraz aforado: se emplea para medir con exactitud un volumen determinado de lquido. La marca de graduacin rodea todo el cuello de vidrio, por lo cual es fcil determinar con precisin cundo el lquido llega hasta la marca. Su principal utilidad es preparar disoluciones de concentracin conocida y exacta. 2) Matraz de Erlenmeyer: es un frasco transparente de forma cnica con una abertura en el extremo angosto, generalmente prolongado con un cuello cilndrico, suele incluir algunas marcas. Por su forma es til para realizar mezclas por agitacin y para la evaporacin controlada de lquidos; adems, su abertura estrecha permite la utilizacin de tapones. El matraz de Erlenmeyer no se suele utilizar para la medicin de lquidos ya que sus medidas son imprecisas. 3) Matraz Florentino o Baln de Destilacin: Es un frasco de vidrio, de cuello largo y cuerpo esfrico. Est diseado para calentamiento uniforme, y se

produce con distintos grosores de vidrio para diferentes usos. Est hecho generalmente de vidrio borosilicatado. La mayor ventaja del matraz por encima de otros materiales de vidrio es que su base redondeada permite agitar o re-mover fcilmente su contenido. Sin embargo, esta misma caracterstica tambin lo hace ms susceptible a voltearse y derramarse. 4. Matraz de Kitasato: Este matraz tambin se podra definir como un matraz de Erlenmeyer con un tubo de desprendimiento lateral. Sirve para realizar ensayos de destilacin, recoleccin de gases en cuba hidroneumtica (desplazamiento de volmenes), filtraciones al vaco de sustancias pastosas y slidas de tamao muy pequeo. Estn hechos con vidrio grueso, con el propsito que resistan cambios bruscos de presin.

TUBOS DE ENSAYO.
El tubo de ensayo es uno de los principales instrumentos de laboratorio ya que este se usa en cualquier procedimiento, como la preparacin de soluciones o la toma de muestras que luego sern depositadas en este. PORTAOBJETOS. El portaobjetos es una lmina rectangular de vidrio muy delgada, donde se colocan objetos de pequeo tamao o preparaciones de baja escala, las cuales pueden ser analizadas con mayor profundidad en un microscopio.

MECHERO DE ALCOHOL.
Es una fuente de calor, de baja intensidad, que funciona con alcohol etlico. Como un accesorio de seguridad se utiliza una pieza que en caso de accidente,

cubre la entrada de oxgeno, de manera que el fuego se sofoca. Se utiliza en laboratorio para hacer combustin.

FIOLA.
La fiolas tambin llamados "matraces aforados "son recipientes de vidrio de cuello muy largo y angosto, en el cual tienen una marca que seala un volumen exacto a una temperatura determinada que est grabada en el mismo recipiente y generalmente es 20c. Se emplean en operaciones de anlisis qumico cuantitativo, para preparar soluciones de concentraciones definidas.

ALCOHOL ANTISPTICO. PAPEL DE EMBALAJE. CAJA PETRI. La placa de Petri,cpsula de Petri o Caja de Petri, es un recipiente redondo, de cristal o plstico, con una cubierta de la misma forma que la placa, pero algo ms grande de dimetro, para que se pueda colocar encima y cerrar el recipiente, aunque no de forma hermtica. Es parte de la coleccin conocida como material de vidrio. Tiene uso de microbiologa.

AGITADOR.
El agitador es un instrumento de laboratorio, el cual consiste en una varilla normalmente de vidrio, se usa en el laboratorio para mezclar o revolver algunas sustancias qumicas.

PROBETA.

La probeta es un instrumento de laboratorio volumtrico, este se usa para medir volmenes considerables y para depositar lquidos. Partes de la probeta La probeta est formado por un tubo generalmente transparente de unos centmetros de dimetro y tiene una graduacin (una serie de marcas grabadas) desde 0 ml (hasta el mximo de la probeta) indicando distintos volmenes. En la parte inferior est cerrado y posee una base que sirve de apoyo, mientras que la superior est abierta (permite introducir el lquido a medir) y suele tener un pico (permite verter el lquido medido). Generalmente miden volmenes de 25 50 ml, pero existen probetas de distintos tamaos; incluso algunas que pueden medir un volumen hasta de 2000 ml.

PIPETA.
Las pipetas permiten la transferencia de un volumen generalmente no mayor a 20 ml de un recipiente a otro de exacta. Este permite medir alcuotas de lquido con bastante precisin. Suelen ser de vidrio. Est formado por transparente que termina en una de sus puntas de forma volmenes. un tubo cnica, forma

y tiene una graduacin (una serie de marcas grabadas) indicando distintos

GRADILLA.
Una gradilla es una herramienta que forma parte del material de laboratorio y su utilizacin es para

ESTERILIZADOR.
Los hornos de aire caliente, tambin llamados hornos de calor seco, son dispositivos elctricos utilizados para esterilizacin que forman parte del equipamiento de laboratorio. El horno utiliza calor seco para esterilizar los objetos que se introducen en l. En general, pueden funcionar con temperaturas comprendidas entre 50 y 300 C (de 122 a 572 F).

CENTRFUGA.
La centrfuga es un instrumento de laboratorio que ha sido diseada para utilizar la fuerza centrfuga que se genera en los movimientos de rotacin, con el fin de separar los elementos constituyentes de una mezcla. Existe una amplia diversidad de centrfugas para poder atender necesidades especficas de la industria y la investigacin. La centrfuga se ha diseado para utilizar la fuerza centrfuga para separar slidos suspendidos en un medio lquido por sedimentacin o para separar lquidos de diversa densidad. Los movimientos rotacionales permiten generar fuerzas mucho ms grandes que la gravedad, en periodos controlados de tiempo. En el laboratorio las centrfugas se usan generalmente en procesos como la separacin por sedimentacin de los componentes slidos de los lquidos biolgicos y, en particular, en la separacin de los componentes de la sangre: glbulos rojos, glbulos blancos, plasma y plaquetas, entre otros, y para la realizacin de mltiples pruebas y tratamientos.

CMARA DE SIEMBRA. INCUBADORA.

En microbiologa una incubadora es un equipo cerrado que permite controlar la temperatura, humedad y otras condiciones necesarias para el desarrollo de un cultivo microbiolgico.

Las incubadoras ms simples son cmaras aisladas con temperatura ajustable que tpicamente va de 60 a 65 C, aunque pueden alcanzar temperaturas mayores, generalmente hasta 100 C. La mayora de los equipos incluye un temporizador programable, para realizar ciclos de temperaturas variables al igual que de los otros factores ambientales. Otra capacidad de las incubadoras de este tipo es controlar la velocidad de vibracin, medida en revoluciones por minuto.

BALANZA.
La balanza es un instrumento de laboratorio que mide la masa de un cuerpo o sustancia qumica, utilizando como medio de comparacin la fuerza de la gravedad que acta sobre el cuerpo.La balanza se utiliza para medir la masa de un cuerpo o sustancia o tambin el peso de los mismos, dado que entre masa y peso existe una relacin bien definida. En el laboratorio se utiliza la balanza para efectuar actividades de control de calidad con dispositivos como las pipetas, para preparar mezclas de componentes en proporciones predefinidas y para determinar densidades o pesos especficos.

JARRA DE GAS PAK.

El Frasco o Jarra de Gas Pak se utiliza para crear la atmsfera para microorganismos anaerobios en medio slido. Su tamao es similar al de un termo.

 Entrar al laboratorio en forma ordenada, dejar las carteras, libros y otros objetos personales en el lugar que se les indique para tal fin. Llevar puesta la bata de laboratorio en todo momento. La misma debe permanecer completamente cerrada. Limpiar y desinfectar las superficies de trabajo, antes de comenzar y al finalizar la sesin prctica. Lavar las manos con agua y jabn antes de realizar las actividades programadas, antes de salir del laboratorio y siempre despus de manejar materiales que se sabe o se sospecha que son contaminantes. Trabajar cerca del mesn, adoptando una buena postura y estando fsicamente cmodo. Llevar un calzado apropiado, preferiblemente cerrado y de suela antideslizante en las reas de laboratorio. Evitar llevar en al laboratorio accesorios que podran ser fuente de contaminacin (por ejemplo joyas). Recoger el cabello largo.

 Evitar desplazamientos innecesarios, movimientos bruscos. Hablar slo lo indis-pensable. No comer, beber, fumar, almacenar comida, objetos persona-les o utensilios, aplicarse cosmticos ni ponerse o quitarse lentes de contacto en ningn rea del laboratorio. Conocer el manejo de todos los equipos y reactivos a emplear antes de iniciar las actividades indicadas en la prctica. Si us-ted tiene alguna duda, dirjase al profesor. Mantener el rea de trabajo ordenada, libre de libros, cuadernos u objetos personales, exceptuando aquellos equipos y materiales necesarios para la realizacin del trabajo prctico. Tener cuidado con el alcohol cuando manipule el mechero. Nunca debe

dejar ste desatendido. Regresar los reactivos y equipos empleados (microscopio, mechero, etc.), limpios y de manera ordenada a su respectivo lugar una vez finalizada la actividad. Reporte cualquier dao de los mismos al profesor. Colocar los materiales de vidrio contaminados en los recipientes dispuestos para tal fin, por ejemplo: las pipetas en los pipeteros, tubos y placas de Petri en las ollas de desecho, etc. No usar ningn reactivo que no est debidamente identificado, verificar las etiquetas de los mismos y estar seguro de cmo emplearlo. No devolver sustancias a sus envases originales. Emplear la propipeta al medir lquidos. Est rigurosamente prohibido pipetear con la boca. De igual manera las pipe-tas tendrn tapones de algodn para reducir la contaminacin de estos dispositivos de pipeteo.

MEDIOS DE CULTIVO.
Un medio de cultivo consta de un gel o una solucin que cuenta con los nutrientes necesarios para permitir, en condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento de virus, microorganismos, clulas, tejidos vegetales o incluso pequeas plantas. Segn lo que se quiera hacer crecer, el medio requerir unas u otras condiciones. Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes de ser preparados; ya preparados pueden encontrarse en estado slido, semislido o lquido. El objetivo ltimo del cultivo es variado: antibiograma, identificacin, multiplicacin.

ALCOHOLES.
En qumica se denomina alcohol (del rabe al-kul , o al-ghawl , "el espritu", "toda sustancia pulverizada", "lquido destilado") a aquellos compuestos qumicos orgnicos que contienen un grupo hidroxilo (-OH) en sustitucin de un tomo de hidrgeno enlazado de forma covalente a un tomo de carbono. Si contienen varios grupos hidroxilos se denominan polialcoholes. Los alcoholes pueden ser primarios, secundarios o terciarios, en funcin del nmero de tomos de hidrgeno sustituidos en el tomo de carbono al que se encuentran enlazado el grupo hidroxilo. Los alcoholes tienen una gran gama de usos en la industria y en la ciencia como disolventes y combustibles. El etanol y el metanol pueden hacerse combustionar de una manera ms limpia que la gasolina o el gasoil. Por su baja toxicidad y disponibilidad para disolver sustancias no polares, el etanol es utilizado frecuentemente como disolvente en frmacos, perfumes y en esencias vitales como la vainilla. Los alcoholes sirven frecuentemente como verstiles intermediarios en la sntesis orgnica.

FENOLES.
El fenol en forma pura es un slido cristalino de color blanco-incoloro a temperatura ambiente. Su frmula qumica es C6H5OH, y tiene un punto de fusin de 43 C y un punto de ebullicin de 182 C. El fenol es un alcohol, debido a que el grupo funcional de los alcoholes es R-OH, y en el caso del fenol es Ar-OH. El fenol es conocido tambin como cido fnico o cido carblico, cuya Ka es de 1,3 10-10. Puede sintetizarse mediante la oxidacin parcial del benceno. Industrialmente se obtiene mediante oxidacin de cumeno (isopropil benceno) a hidroperxido de cumeno, que posteriormente, en presencia de un cido, se escinde en fenol y acetona, que se separan por destilacin. El fenol es una sustancia manufacturada. El producto comercial es un lquido. Tiene un olor repugnantemente dulce y alquitranado. Se puede detectar el sabor y el olor del fenol a niveles ms bajos que los asociados con efectos nocivos. El fenol se evapora ms lentamente que el agua y una pequea cantidad puede formar una solucin con agua. El fenol se inflama fcilmente, es corrosivo y sus gases son explosivos en contacto con la llama. El fenol se usa principalmente en la produccin de resinas fenlicas. Tambin se usa en la manufactura de nylon y otras fibras sintticas. El fenol es muy utilizado en la industria qumica, farmacutica y clnica como un potente fungicida, bactericida, sanitizante, antisptico y desinfectante, tambin para producir agroqumicos, bisfenol A (materia prima para producir resinas epoxi y policarbonatos), en el proceso de fabricacin de cido acetilsaliclico (aspirina) y en preparaciones mdicas como enjuagues bucales y pastillas para el dolor de garganta.

Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han preparado ms de 10.000 medios de cultivo diferentes. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presin de oxgeno adecuadas, as como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante. La mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes complejos similares en composicin a los lquidos orgnicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusin de extractos de carne y Peptona a la que se aadirn otros ingredientes. El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparacin de medios de cultivo. Se lica completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en l. La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que bastantes bacterias provocan su licuacin. En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentacin de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se aaden para promover el crecimiento de los microorganismos menos resistentes.

Tambin se aaden colorantes que actan como indicadores para detectar, por ejemplo, la formacin de cido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en pH bsico y amarillo en pH cido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor ya que impide el crecimiento de la mayoria de las bacterias Gram-positivas).

CONDICIONES GENERALES MICROORGANISMOS

PARA

EL

CULTIVO

DE

El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos casos, son ajenos por completo al propio medio. 1- DISPONIBILIDAD DE NUTRIENTES ADECUADOS Un medio de cultivo adecuado para la investigacin microbiolgica ha de contener, como mnimo, carbono, nitrgeno, azufre, fsforo y sales inorgnicas. En muchos casos sern necesarias ciertas vitaminas y otras sustancia inductoras del crecimiento. Siempre han de estar presentes las sustancias adecuadas para ejercer de donantes o captadores de electrones para las reacciones qumicas que tengan lugar. Todas estas sustancias se suministraban originalmente en forma de infusiones de carne, extractos de carne o extractos de levadura. Sin embargo, la preparacin de estas sustancias para su aplicacin a los medios de cultivo provocaban la prdida de los factores nutritivos lbiles. Actualmente, la forma ms extendida de aportar estas sustancias a los medios es utilizar peptona que, adems, representa una fuente fcilmente asequible de nitrgeno y carbn ya que la mayora de los microorganismos, que no suelen utilizar directamente las protenas naturales, tienen capacidad de atacar los aminocidos y otros compuestos ms simples de nitrgeno presentes en la peptona. Ciertas bacterias tienen necesidades nutritivas especficas por lo que se aade a muchos medios sustancias como suero, sangre, lquido asctico, etc. Igualmente pueden ser necesarios ciertos carbohidratos y sales minerales

como las de calcio, magnesio, manganeso, sodio o potasio y sustancias promotoras del crecimiento, generalmente de naturaleza vitamnica. Muy a menudo se aaden al medio de cultivo ciertos colorantes, bien como indicadores de ciertas actividades metablicas o bien por sus capacidades de ejercer de inhibidores selectivos de ciertos microorganismos.

2- CONSISTENCIA ADECUADA DEL MEDIO

Partiendo de un medio lquido podemos modificar su consistencia aadiendo productos como albmina, gelatina o agar, con lo que obtendramos medios en estado semislido o slido. Los medios solidificados con gelatina tienen el gran inconveniente de que muchos microorganismos no se desarrollan adecuadamente a temperaturas inferiores al punto de fusin de este solidificante y de que otros tienen la capacidad de licuarla. Actualmente los medios slidos son de uso universal, por su versatilidad y comodidad, pero hay tambin gran cantidad de medios lquidos cuyo uso est ampliamente extendido en el laboratorio.

3- PRESENCIA (O AUSENCIA) DE OXGENO Y OTROS GASES

Gran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmsfera con tensin de oxgeno normal. Algunas pueden obtener el oxgeno directamente de variados sustratos. Pero los microorganismos anaerobios estrictos slo se desarrollarn adecuadamente en una atmsfera sin oxgeno ambiental. En un punto intermedio, los microorganismos microaerfilos crecen mejor en condiciones atmosfricas parcialmente anaerobias (tensin de oxgeno muy reducida), mientras los anaerobios facultativos tienen un metabolismo capaz de adaptarse a cualquiera de las citadas condiciones.

4- CONDICIONES ADECUADAS DE HUMEDAD

Un nivel mnimo de humedad, tanto en el medio como en la atmsfera, es imprescindible para un buen desarrollo de las clulas vegetativas microbianas en los cultivos. Hay que prever el mantenimiento de estas condiciones mnimas en las estufas de cultivo a 35-37C proporcionando una fuente adecuada de

agua que mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar as que se deseque el medio.

5- LUZ AMBIENTAL
La mayora de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que en presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes como sera el caso de los microorganismos fotosintticos.

6- Ph
La concentracin de iones hidrgeno es muy importante para el crecimiento de los microorganismos. La mayora de ellos se desarrollan mejor en medios con un pH neutro, aunque los hay que requieren medios ms o menos cidos. No se debe olvidar que la presencia de cidos o bases en cantidades que no impiden el crecimiento bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o incluso alterar sus procesos metablicos normales.

7- TEMPERATURA
Los microorganismos mesfilos crecen de forma ptima a temperaturas entre 15 y 43C. Otros como los psicrfilos crecen a 0C y los temfilos a 80C o incluso a temperaturas superiores (hipertemfilos). En lneas generales, los patgenos humanos crecen en rangos de temperatura mucho ms cortos, alrededor de 37C, y los saproftos tienen rangos ms amplios.

8- ESTERILIDAD DEL MEDIO

Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estriles para evitar la aparicin de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de los especimenes inoculados en dichos medios. El sistema clsico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que utiliza vapor de agua a presin como agente esterilizante) TIPOS BSICOS DE MEDIOS DE CULTIVO

Lquidos. Semislidos. Slidos. ATENDIENDO A SU UTILIDAD PRCTICA: Medios para aislamientos primarios: Para usos generales: no selectivos, para cultivo de una amplia variedad de organismos difciles de hacer crecer. A menudo estn enriquecidos con materiales como: sangre, suero, Hemoglobina, FX, FV, glutamina, u otros factores accesorios para el crecimiento de las bacterias (Agar Sangre, Schaeadler, etc) Selectivos: (pueden ser de moderada o de alta selectividad) se aaden sustancias que inhiban el crecimiento de ciertos grupos de bacterias, permitiendo a la vez el crecimiento de otras. Variando las sustancia aadidas, se vara el tipo y grado de selectividad (Mac Conkey, Kanamicina-Vancomicina). Enriquecidos: ralentizan/suprimen el crecimiento de la flora competitiva normal potenciando el cultivo y crecimiento deseado (Selenito, medio con Vitamina K). Para Aislamientos Especializados: formulaciones nutritivas especiales que satisfacen requerimientos de grupos especficos de bacterias, ayudando a su identificacin (Lowenstein). Medios para identificacin: Diferenciales: formulaciones especiales en las que se estudian las peculiaridades fisiolgicas (nutricin y respiracin sobre todo) especficas de las bacterias. Seleccionando los medios adecuados se puede llegar a la identificacin de casi cualquier bacteria (Oxidacin-Fermentacin).

Qu es un Cultivo Microbiolgico?
Un cultivo es la forma en la que se hacen crecer los microorganismos (colonias) en una superficie solida (agar) o en medio lquido (caldo) e incluso en clulas (lnea celular) y es utilizado como el mtodo principal para poder estudiar a los agentes causales de enfermedades, y saber si se trata de bacterias, hongos, virus, parsitos o algas.

Utilidad.
En el manejo de enfermedades infecciosas, es necesario saber con certeza cul es el microorganismo que est causando la enfermedad, pues ello nos permite tratarlo y eliminarlo de forma ms rpida y efectiva, sin dao para el paciente; adems, permite conocer el pronstico o la posible evolucin de la infeccin y establecer su eliminacin. Adems permite detectar bacterias u hongos que aunque no estn produciendo directamente enfermedad en el sitio donde se encuentran (colonizacin), puedan causar dao futuro (infeccin oportunista por estado de portador) o empeorar otras patologas (p.ej. asma, urticaria, roscea, prurigo, acn, prpura trombocitopnica idioptica, anemia por deficiencia de hierro, entre otras patologas).

Con el estudio mdico microbiolgico del cultivo se logra aislar e identificar al agente causal de la infeccin (corroborar el diagnstico clnico) y poder practicarle las pruebas de susceptibilidad a los antimicrobianos (antibiograma), para saber a ciencia cierta como los antibiticos afectan al microorganismo que est produciendo la enfermedad, y as optimizar el tratamiento de las infecciones.