El estatuto del embrin humano en el contexto de la fecundacin in vitro

La forma de plantear las cuestiones cientficas est cambiando radicalmente en la actualidad. Pero la naturaleza propiamente dicha de la ciencia no ha cambiado, ni puede hacerlo realmente. Esto es especialmente evidente en el campo de la biomedicina.

Por Natalia Lpez Moratalla. Catedrtica de Bioqumica

La forma de plantear las cuestiones cientficas est cambiando radicalmente en la actualidad. Pero la naturaleza propiamente dicha de la ciencia no ha cambiado, ni puede hacerlo realmente. Esto es especialmente evidente en el campo de la biomedicina. La imagen humanitaria, propia de la investigacin que lucha por salvar vidas humanes, por curar la enfermedad y para paliar el dolor, a la que se apela no es coherente con los medio que se pretende emplear, y se emplean en ciertos casos para conseguirlo. Es una contradiccin con el fin declarado de curar enfermedades de unos, emplear a otros; o incluso llamar a la vida slo para ser utilizados como material biolgico. La naturaleza de la ciencia no cambia; lo que debatimos, y sobre lo que deliberamos, es cambiar la valoracin de la vida de unos a conveniencia de otros. En nombre de la ciencia se trata de imponer a nuestras sociedades una actitud hacia la vida misma incompatible con los valores de toda sociedad democrtica. Pero esa actitud no encuentra apoyo en la ciencia rigurosa. 1. Tiene el mismo estatuto un embrin in vitro que un embrin in tero? Desde el punto de vista biolgico la vida humana comienza tras la fecundacin con la aparicin de una realidad celular con fenotipo cigoto. La fecundacin no es un instante, sino un proceso que dura horas y slo tras la constitucin del cigoto, al final del proceso de fusin de los gametos, se establece la identidad gentica del nuevo individuo. Sea como fuere la forma y el modo como ha llegado a la vida, cada cigoto vivo es un ser humano con el carcter personal propio y especfico de todos los individuos de la especie humana. El ciclo vital tras la concepcin tiene un comienzo y un final definidos. Y a lo largo de su existencia cada uno requiere, de diferente manera y con intensidad diferente, la interaccin con el medio en que se desarrolla. El que a un embrin in vitro no se le destine (temporal o definitiva) a su implantacin en el seno materno, no significa que su valor o status sea diferente al embrin en tero: o es un embrin humano o no lo ser nunca. Slo significa que sus progenitores -dueos no quieren, o no pueden permitirle que anide. La visin de que la fuerza del status moral de una entidad depende de en qu espacio se le coloque, y por cuanto tiempo est fuera de su sitio propio es algo que carece de justificacin biolgica y ontolgica. El concepto de embrin no implantable no corresponde a una situacin natural sino que est creada por la manipulacin artificial del proceso de transmisin de la vida. Dos cuestionen incitan la duda, o ms bien el debate, acerca de si un embrin in vitro tiene o no la misma realidad que un embrin in tero. 1.1. Se puede fcticamente detener la vida En primer termino, la prctica de las tcnicas de reproduccin humana -en muchos casos abusiva en exceso- ha convertido el fruto de la generacin humana (los embriones precoces) en poco ms que una propiedad de los donantes de gametos. El consenso entre el deseo de los padres y la voluntad de satisfaccin de tal deseo por parte del equipo biomdico prevalece sobre los serios deberes que la existencia de ese embrin impone al hombre y a la

mujer de quienes procede. Han dado vida a un hijo que exige proteccin y que por tanto requiere ser depositado en su mbito natural materno para proseguir la gestacin. Todo embrin de hecho no obtiene su derecho a existir de la comn acogida de sus progenitores, de la aceptacin de una mujer, o de una determinacin legal, sino de su condicin de ser humano. La implantacin diferida en el tiempo se ha hecho posible por las tcnicas de cultivo y crioconservacin a largo plazo de los embriones preimplantarios; con ello se percibe muy diluida la responsabilidad natural de los padres con el embrin y se da una progresiva despersonalizacin en la relacin paternidad-filiacin. Una anidacin o un embarazo diferido -incluso hasta su conversin en sobrante- turba y trastoca aun ms la transmisin de la vida hasta el punto de llegar a considerar al hijo una propiedad disponible. Disponible y abandonable. La legislacin admite la crioconservacin de embriones (y determina una duracin mxima) para evitar los intrincados problemas jurdicos que podran surgir en torno a esos hijos cuya vida se ha detenido por la congelacin en espera de un futuro bastante incierto. Aunque se trata de una realidad que lleva aos producindose de hecho no es necesariamente inevitable. La existencia de embriones producidos en exceso y de embriones crioconservados, es una situacin irresponsable que debe necesariamente acabar y resolverse de una vez para siempre como situacin excepcional. 1.2. La posibilidad fctica de producir embriones en exceso La segunda cuestin es derivada de la mentalidad surgida de la practica de la fecundacin in vitro. Es la pretensin de justificar la fecundacin de ms de un vulo para disponer de la una mayor nmero de embriones preimplantatorios, bien para aumentar la eficacia procreativa con las menores molestias posibles, o bien para permitir la seleccin de aquellos embriones considerados los ptimos por su estado de previsible salud, o por mera eleccin del sexo. Pero la lgica del escoger es muy exigente: la posibilidad de escoger lo ptimo est en relacin directa al numero producido. Aparecen as los adjetivos de embriones subptimos, inviables, sobrantes, no implantables, crioconservados. Trminos todos ellos que no modifican la realidad humana de los embriones, pero que de forma imperceptible y gradual suaviza la carga eugensica de esta prctica. El proceso gradual de cambio en la forma de plantear las cuestiones biomdicas es obvio. Al inicio se pretendi justificar la necesidad de una alta produccin para poder implantar varios embriones al mismo tiempo, y facilitar as la supervivencia de alguno de ellos, aumentando la escasa eficacia de la prctica de la FIV. Esta medida ha sido contestada por los clnicos dado que los posibles embarazos mltiples no slo son un peligro para la madre sino que han resultado un dficit para los nios que nacen prematuros. El aborto selectivo de algunos de ellos (conocida con el eufemismo de reduccin embrionaria) no resuelve el segundo problema. A su vez el tratamiento para inducir multiovulacin se desaconseja cientficamente[1]: los embriones producidos por fecundacin de la aproximada docena de vulos obtenidos tras multiovulacin son defectuosos, por su procedencia de vulos menos maduros que los que se forman en un ciclo natural, en cuanto a su desarrollo y capacidad de anidacin. Si a su vez se seleccionan los mejores de entre ellos es obvio que los sobrantes que se congelan son precisamente los ms dbiles y a los que ms les afecta el proceso de congelacindescongelacin. La sospecha de la mayor debilidad que presentan estos embriones una de las causas para que aquellos donables y donados por padres biolgicos no sean fcilmente acogidos por otras parejas, y que tras el tiempo que permita la ley, pasen a disposicin del centro biosanitario para acabar siendo potencial material biolgico para investigacin. Ms an, la misma probabilidad de ser defectuosos elimina estos embriones para un uso teraputico; es decir cuando la investigacin aplicada logre dominar las clulas madre embrionarias que proceden de ellos, ser necesario producir nuevos embriones para obtener esas clulas de padres biolgicos frtiles y donantes de vulos maduros. Posteriormente se impuso el diagnostico preimplantatorio a fin de asegurar que slo fueran gestados aquellos embriones que no presentaran taras heredables. El deseo de un hijo se transform en exigencia de un hijo sano. La existencia de algunas enfermedades ligadas al sexo abri el campo a la eleccin del mismo y de ah a la oferta de seleccin de sexo que satisfaga el deseo legitimo pero no crucial de los padre a elegir el sexo de su hijo (siempre que no sea un sistema de discriminacin). Los centros de reproduccin humana asistida

recomiendan hacerlo por la tcnica de la seleccin de los espermios, portadores de cromosoma X o de cromosoma Y. Consideran desproporcionada la seleccin de los embriones del sexo deseado con abandono del resto, pero podra aceptarse -afirman- si las parejas donasen a otras los embriones del sexo no deseado para la reproduccin. 1.3. La supuesta potestad de disponer del destino de los embriones En esta cultura de la produccin tcnica, van unidas una dbil, o al menos temporal, oposicin a crear expresamente embriones para investigacin con la aceptacin a experimentar con los sobrantes de los programas de fecundacin in vitro. Tales embriones sobrantes, con un largo periodo de crioconservacin y de hecho no implantables (por no ser acogidos en tero) estn condenados a morir, tal vez de forma lenta por la congelacin pero inexorablemente: son vidasdetenidas que no van a ser reanimadas tras la descongelacin y transferidas al tero de una mujer. Para justificar la investigacin con embriones, ahora los sobrantes y ms adelante a la carta, se despoja a los embriones preimplantatorios de valor ontolgico, o se convierte el problema en un magnfico caso de que el fin justifica los medios. Los investigadores podrn as ver en el embrin humano no como una entidad con valor intrnseco, sino dotado de posibilidades para los intereses y objetivos y utilidades cientficocomerciales. Y con ese enfoque, o error, de partida en la consideracin del valor del embrin humano, los investigadores han abdicado del rigor de la investigacin cientfica y puesto en evidencia las paradojas internas del argumento de la necesidad para el progreso cientfico. - cmo garantizar que van a obtener respuesta vlida, conocimiento verdadero, a las preguntas que se consideran tan cruciales como para justificar el sacrificio de vidas humanas incipientes? - cmo encontrar la justificacin mdica de las tcnicas de FIV si es evide nte la creacin de una presin cientfico-mdico-comercial para introducirlas al servicio de nuevos deseos que permitan colmar los derechos reproductivos? - cmo apelar al imperativo cientfico del progreso si no se investiga ni las causas, ni los procedimientos para paliar la infertilidad? - cmo justificar el mantener en la legalidad una investigacin directa con embriones humanos, en el contexto de la reproduccin asistida, sin el requisito mnimo y esencial de una previa investigacin con animales? Han pasado demasiados aos desde que la FIV se introdujo como solucin de emergencia de una creciente falta de fertilidad. La solucin de emergencia ha creado problemas ms graves para la vida del embrin y de los nacidos de los que ha solucionado[2]. Ms an, ha creado la falsa expectativa de que toda persona en cualquier situacin puede reclamar un hijo en base a un ambiguoderecho reproductivo. Parece obvio que necesitamos asumir la evidencia de que la realidad humana en desarrollo es humana, y abandonar la insistencia en adscribir valor moral a lo humano en funcin de su contexto y de valores externos adjudicados por otras personas. Al rehuir la perspectiva del carcter personal de la realidad humana embrionaria se pasa necesariamente al imperativo moral de la compasin a las parejas sin hijos y de ah al imperativo moral de la compasin a los enfermos que nos obliga a la investigacin destructiva y consumidora de embriones. Es ms, se presenta la gravedad de ciertas enfermedades para dar carcter de urgencia a tales investigaciones por no haber otras soluciones o al menos ser soluciones lentas: nica o al menos la mejor solucin se ha hecho en estos aos dogma inamovible de la medicina regenerativa. 2. La realidad embrin humano en los primeros seis das tras la fecundacin. Dos caractersticas del embrin precoz han llevado a algunos a pensar que la vida humana en los primeros das de desarrollo antes de la implantacin, sera insuficiente para que se pueda asumir que posee el carcter personal propio de todo individuo de la especie humana. Una de esas peculiaridades se refiere a la capacidad natural de gemelacin monocigtica: la fisin o divisin espontneamente de un embrin antes de la anidacin. Para algunos supondra indefinicin o carencia de organizacin individual. La argumentacin se basa en

que mientras exista posibilidad de gemelacin, la identidad del ser humano no est determinada, y de ah que no se pueda decir que exista ningn individuo en concreto. Carecera de una de las propiedades esenciales de un individuo: la unicidad o el ser nico. Una segunda propiedad esencial para ser un individuo es la unidad: ser una realidad distinguible de toda otra realidad. Pues bien, la posibilidad de formacin de quimeras a partir de cigotos humanos se ha considerado tambin como manifestacin de carencia de individualidad. La indefinicin del embrin preimplantatorio respecto a ambas propiedades ha hecho dudar acerca de que pudiera existir alguien, un sujeto, ya que la identidad del ser que nacer al final an no est determinada. Una tercera peculiaridad es la viabilidad natural del embrin preimplantatorio, dada la frecuencia, supuestamente excesiva, de perdidas espontaneas de embriones precoces. Y en ultimo lugar, y ms recientemente, se aade la carencia de una autonoma en su relacin con la madre que le gesta. En este punto est jugando un papel importante la tendencia a considerar que slo tienen derechos los individuos autnomos capaces de sentir y pensar que repite la ideologa de la autonoma total del ser humano. Analizaremos estos aspectos estableciendo a su vez la comparacin de las similitudes y diferencias entre el embrin concebido y el creado y cultivado in vitro. 2.1. En los seres vivos cada nivel de desarrollo es ms que suma de los elementos de partida. En biologa, el concepto de individuo no remite a la imposibilidad de divisin, sino a la idea de organizacin de la estructura. El que un embrin puede acabar en gemelos o en quimera no significa que no sea individuo, o que no desarrolle como individuo. Cada ser vivo es un individuo cuando es un organismo, es decir, una unidad integrada por estructuras y funciones, sea cual sea su nivel de complejidad. En los ltimos aos se han alcanzado nuevos paradigmas biolgicos del desarrollo hacia la complejidad orgnica, con sus leyes propias: un material de partida que tiene la peculiar propiedad de poseer informacin gentica, la informacin posicional en el espacio embrionario orgnico, la emergencia de informacin con el desarrollo mismo por interaccin medio-genes y la continua autoreferencia del individuo, en sus diversas etapas vitales, a la identidad conferida fundamentalmente por la informacin gentica heredada de sus progenitores. El desarrollo no depende slo de los genes, sino de una compleja interaccin entre genes, citoplasma, informacin posicional de las clulas, entorno materno, etc. La embriognesis no es el desarrollo mecnico del programa del genoma: tienen un papel importante los factores espaciales y temporales, as como las fluctuaciones al azar de la concentracin de las seales moleculares que aparecen con el desarrollo. Ahora bien el ser humano, el individuo concreto, es inseparable de su desarrollo: en cada fase el fenotipo que adquiere, cambiante con el tiempo de desarrollo y maduracin, hace referencia intrnseca e inseparable a la informacin gentica con la que se constituy a partir de los materiales heredados de sus progenitores. Esta autorreferencia aporta la conexin del embrin preimplantatorio con el trmino de la embriognesis, el feto, y del feto con el termino del desarrollo fetal, el nacido y as sucesivamente. Es realidad humana, individuo de la especie, persona desde que es cigoto porque posee toda la informacin del sistema respecto al trmino: posee la capacidad de un desarrollo orgnico Para la mayora, el embrin humano tiene un valor alto, superior al de un cultivo de tejidos humanos somticos, debido a que tiene identidad humana y un elevado potencial de convertirse en persona y merece, por ello, una proteccin que trasciende la que aplicamos a animales. La cuestin que debe ser justificada es -si no fuera persona por el simple hecho de ser individuo de nuestra especie-, qu estatuto asignarle, y en qu fase de su desarrollo y en razn de que cobrara los derechos inherentes a la persona. No podemos distinguir entre seres humanos y personas. Podemos distinguir diferentes fenotipos o diferentes fases en el desarrollo humano, pero no crear estadios con diferente nivel de realidad ontolgica. Una vez que comienza el desarrollo de un ser humano,

establecer una frontera para comenzar a su proteccin implica una decisin arbitraria. 2.2. Vida y muerte del embrin preimplantatorio La definicin de vida y la constatacin de la muerte de un embrin preimplantatorio in vitro, al igual que la de un embrin en tero, o de un nacido, o de un adulto, obviamente requieren el mismo criterio: la existencia o constatacin de perdida, respectivamente, de la funcin vital unitaria como organismo. La vida como organismo individual es un proceso unitario e integrado. Cada clula es parte del todo en cuanto se est dando esa funcin vital de crecimiento diferencial organizado, en el espacio corporal y en el tiempo, que tuvo su arranque en la activacin mutua de los gametos en la fecundacin que origin la clula con fenotipo cigoto. Esta clula polarizada es ms que la suma de los gametos: es un nuevo individuo que inicia un ciclo vital con desarroll, maduracin, etc. En cada una de las etapas iniciales de la existencia, cada embrin requiere un medio y unas interacciones especficas muy precisas para desarrollarse en un proceso de desarrollo embrionario, que es continuo en el tiempo y ordenado en el espacio. Sin esas condiciones imprescindibles el embrin muere, al perder la funcin vital que hasta entonces posea: el crecimiento y diferenciacin celular segn el lugar que ocupa cada una de ellas en el diseo corporal que se traza con la fecundacin del vulo por el espermio. Actualmente, el criterio de constatacin de la muerte de una persona es la cesacin total e irreversible de toda actividad enceflica[3], como manifestacin de la perdida de la vida como organismo. De igual manera, el mismo criterio que define la realidad muerte del embrin es la que define su carcter de individuo desde la concepcin. En efecto, la polarizacin del cigoto y el establecimiento de los ejes del embrin, como detallaremos despus, demuestran sin lugar a dudas la organizacin del embrin desde el da uno de su existencia como unidad vital. Desde el punto de vista de la biologa del embrin se puede afirmar claramente la distincin entre la muerte del embrin y la permanencia con vida de algunas de sus clulas, de forma semejante a como se distingue entre muerte del individuo y rganos funcionando (por ejemplo, el corazn latiendo) despus. El individuo humano embrin de varios das est vivo, y existe, o est muerto. Las clulas que componen la masa celular interna darn lugar a todos los rganos y tejidos siempre y cuando estn formando parte de la unidad orgnica viva que es esa persona, y slo entonces. El concepto de muerte clnica del embrin preimplantatorio crioconservado tiene la particularidad de que su existencia est detenida en el tiempo por la congelacin: es decir est parado su proceso vital de desarrollo o funcin de crecimiento orgnico. Mientras permanezca en ese estado no es posible constatar si ha muerto o no puesto que justamente el proceso vital est detenido. Si el proceso de desarrollo se ha parado por la congelacin requerir para recomenzar, y continuar viviendo, que ese embrin sea descongelado y reanimado. Por ello se puede afirmar, que detenida la vida por congelacin cesa de inmediato la funcin vital si tras la descongelacin el embrin no tiene las condiciones requeridas para reiniciar y posteriormente continuar el proceso vital de desarrollo. La descongelacin de un embrin vivo crioconservado que se realizase sin las condiciones y el medio de cultivo adecuado para poder reanimarle muere con la descongelacin: no hay en l actividad vital, no hay proceso funcional de desarrollo unitario. Sus clulas (que pueden ser funcionales como tales clulas pero no como individuo), pueden tomarse si van a ser donadas para investigacin, sin necesidad de delimitar un periodo de tiempo despus de la constatacin de que la muerte ha acaecido. De forma anloga a como la deteccin de actividad cerebral (muerte enceflica) permite constatar si ha acaecido ya, o no, la muerte del individuo, la perdida irreversible de la funcin vital propia de crecimiento diferencial (est en situacin de imposibilidad fctica de reanudar o reiniciar el proceso de desarrollo orgnico) es signo indicativo, es signo, de que la muerte del embrin ha acaecido. Slo el cadver de embrin, como el cadver del nacido, puede donarse para transplante o para investigacin. Ciertamente las clulas del embrin muerto no estarn en situacin exactamente igual que si est vivo, como los rganos de un hombre muerto empiezan a deteriorarse en el tiempo que media la muerte y el transplante. Pero no usar como material biolgico un embrin humano vivo es el mnimo que deberamos exigirnos. Esto no es una cuestin de matiz y tampoco es una precisin hipcrita: investigar con embriones vivos,

aunque el destino ms probable sea morir al habrseles negado la gestacin, es una cosa y otra muy diferente usar las clulas procedentes de embriones que han muerto. Hay un hecho especfico de la vida incipiente que se presenta ms adelante: el carcter totipotencial de conjuntos especficos de sus clulas, que en tanto separadas del organismo o cadver del que formaban parte, separadas de la unidad orgnica, tienen capacidad de iniciar un nuevo ciclo vital y dar lugar a un nuevo ser. Ahora bien, una clula del embrin humano de dos, o de cuatro, u ocho clulas, o de la masa interna del embrin blastocisto no tiene carcter totipotencial; en tanto est formando parte del embrin la totipotencialidad es del embrin en desarrollo. Slo sacada de l, y manipulada artificialmente, podra dar lugar (y por ahora slo tericamente) a la formacin de un nuevo ser (uno o varios): gemelos artificiales. La posibilidad de producir artificialmente un nuevo embrin sacndolas y manipulndolas no implica que cada una de ellas sean en s un embrin potencial dentro de otro embrin vivo o cadver. Slo serian capaces de reiniciar un nuevo desarrollo, como gemelo artificial del primer embrin, en unas condiciones muy concretas de colocacin en una envoltura similar a una zona pelcida de vulo, medios especiales de cultivo, etc. , o insercin en otro blastocisto para dar una quimera. En tales casos se habra producido artificialmente un gemelo, o una quimera, a partir del material biolgico del embrin cadver donante. Ha habido un proceso de produccin in vitro de un nuevo embrin por gemelacin artificial, o por fusin celular. Pero esa posible manipulacin de produccin de un nuevo ser no implica indefinicin de la situacin de viva o muerte del embrin preimplantatorio. 3. El fenotipo cigoto e inicio del nuevo ciclo vital El conocimiento de la primera divisin del cigoto, que ocurre dentro del primer da tras el inicio de la fecundacin, ha permitido conocer que los ejes cabeza-cola y dorso-ventral presentes en el blastocito estaban incoados desde el momento de la concepcin. El cigoto se establece como clula polarizada y por ello su primera divisin se realiza de forma meridional con el plano fijado por el polo heredado del vulo y el punto de entrada del espermio. En efecto se ha podido demostrar la existencia de un polo en el huevo fecundado ya que el segundo corpsculo polar permanece adherido a la superficie del embrin en una posicin establecida que determina un polo del cigoto. Zernicka-Goetz sospech que el acto mismo de la fecundacin era la clave para que se fijara un segundo polo, y efectivamente encontr que se trataba del punto por donde haba penetrado el esperma. En la mayora de los casos, la posicin marcada coincida aproximadamente con el ecuador de la primera divisin celular, indicando que el punto de ingreso del esperma determina el plano por donde se divide la clula la primera vez. En experimentos posteriores marcaron las dos primeras clulas de diferente color, usando tinturas disueltas en aceite de oliva y rastrearon sus descendientes en el blastocito. Una clula generalmente da origen a la regin de la masa celular interna y la otra a la regin destinada principalmente a formar la placenta y otros tejidos de apoyo. La conclusin de Zernicka-Goetz es que la primer divisin del huevo influye en el destino de cada clula y por ltimo, en todos los tejidos del cuerpo. En efecto, la organizacin del embrin est creada antes de la implantacin[4]. Esto supone un cambio profundo en nuestra idea del embrin. Hace unos pocos aos, como comenta en Nature Helen Pearson[5], nadie se hubiera atrevido a afirmar que slo 24 horas despus de la fusin de los gametos existe ya un mapa de destinos en el cigoto. Hoy, sin embargo, es difcil dejar a un lado esa afirmacin. Esta primera divisin da lugar a la aparicin de los dos blastmeros desiguales y con destino diferente en el embrin: el que lleva el punto de entrada del espermio se divide antes que el otro y lo hace adems ecuatorialmente. Estas dos clulas del embrin, que es asimtrico y de tres clulas, darn origen a la masa interna del blastocisto. El otro blastmero inicial se divide a continuacin, constituyndose el embrin de cuatro clulas, y su progenie dar origen al trofoblasto[6]. Del primero de los dos blastmeros en que se divide el cigoto se originan las clulas que van a colocarse en el interior de la morula, tras la etapa de compactacin. Los blastmeros no slo son desiguales entre s, sino que adems lo son respecto al cigoto del que proceden: poseen en su membrana componentes mediante los que interaccionan especificamente constituyendo una unidad orgnica bicelular. La interaccin clula-clula activa los caminos de sealizacin intracelulares modificando el estado del

genoma: informan a cada de las clulas de su identidad como parte de un todo bicelular[7]. La autoorganizacin asimtrica se mantiene a lo largo del desarrollo preimplantatorio implicando interacciones especficas intercelulares[8], y con ello expresin de genes diferentes en las clulas en funcin de la posicin que ocupan en el embrin temprano[9]. Por tanto, el embrin temprano no es sin ms un tejido homogneo e indiferenciado: pueden distinguirse por marcadores que adems sealan el destino que seguirn. Adems de las molculas que interconectan las membranas de modo especfico en las diferentes etapas, cada una de las clula del embrin temprano posee una historia espacial y temporal como clulas diferentes de un nico organismo. Es un crecimiento acompaado de diferenciacin: y ese crecimiento orgnico es la funcin vital unitaria que hace de ese conjunto celular un organismo. Tras las divisiones celulares alcanza el estado de 16 clulas y las clulas del exterior, justamente por su situacin externa, expresan una protena clave que las determina a ser trofoblasto, por estar implicada en al formacin del epitelio funcional. Esta protena citocortical, denominada ezrina, es un componente del citoesqueleto y juega un papel importante en la formacin y estabilizacin del polo de las microvellosidades. El polo apical de la microvellosidad es el factor de asimetra mantenido durante las mitosis; la polaridad es restablecida solo en la clulas hijas que se llevan todo a parte suficiente del polo de la clula inicial, cigoto[10]. Una primera consecuencia que se puede sacar de esta informacin es que el cigoto tiene carcter individual, y adems posee la informacin suficiente respecto al trmino, pues posee una propiedad nica: en la primera divisin origina dos clulas (blastmeros) con fenotipo diferente al suyo (diferentes entre s, e incluso, en algunas especies al menos, con diferente destino en el proceso ontognico), que las constituye en una unidad orgnica al interaccionar especficamente. Por el contrario, una clula sin el fenotipo propio del cigoto origina al dividirse dos clulas que pueden seguir creciendo, con o sin interacciones entre ellas, de las que no emerge informacin para autoconstituirse, en una conformacin del todo, con realidad propia. La existencia de un patrn morfolgico en las primeras etapas del embrin humano pone en en duda si ciertas tcnicas de reproduccin asistida[11] podran afectar los delicados procesos de establecimiento de los ejes corporales, como es el caso de la ICSI. Con la inyeccin intracitoplsmica de un espermio el punto de entrada del espermio se pierde como segundo polo del cigoto. Aunque es probable que la flexibilidad de los embriones humanos sea suficiente para compensar estas manipulaciones, lo cierto es que los nacidos por ISCI tienen ms riesgo de defectos cromosmicos. Dos cigotos de una sola fecundacin No conocemos el mecanismo de la gemelacin in vivo a partir de una nica fecundacin. Sin embargo, se dio por supuesto como nico mecanismo la separacin de algunas clulas, que se reagrupan de nuevo para dar una nueva unidad de multiplicacin celular, con lo que se generaran dos embriones, que anidaran por separado y originaran dos hermanos gemelos monocigticos. Segn esa visin, la gemelacin espontnea se debera a la falta de organizacin unitaria del embrin en su estado preimplantatorio. Pero tambin se ha aducido que la posibilidad de divisin no tendra que indicar necesariamente que el embrin carezca de carcter individual; podra suponer sencillamente que una parte de l, por estar en el inicio de la emisin del mensaje, constituyera una nueva unidad de emisin. La fecundacin misma puede verse como originaria de la organizacin individualizada del embrin en la etapa de cigoto. As, el patrn estructural del blastocisto no se establece si la fecundacin no se inici por el camino correcto: as, no lo alcanzan los partenogenontes producidos por una activacin del vulo maduro, ni el embrin derivado de un cigoto al que se le ha quitado el citoplasma cortical de la zona de entrada del espermio[12]. Hay que aadir adems que el control del tiempo de la primera y segunda divisin del cigoto tiene mecanismos muy precisos[13]. La primera divisin celular de un cigoto tiene dos relojes moleculares, algo que marca claramente su diferencia de la simple divisin simple de otra clula en dos; son mecanismos mediados por iones, especialmente el calcio[14]. Estos datos permiten plantear un nuevo escenario a la gemelacin natural a partir de una nica fecundacin: un adelanto en el tiempo de la primera divisin respecto a la organizacin

celular que permite alcanzar el fenotipo cigoto polarizado cuando est terminando el proceso de fecundacin. Es decir, una ligera irregularidad en la difusin del ion calcio alterara la sincronizacin de dos procesos habitualmente sincronizados: divisin celular y organizacin intracelular polarizada que culminan con la adquisicin del fenotipo cigoto. De esta forma, si la clula, producto de la fusin de los gametos, se dividiera antes de haberse polarizado plenamente, las dos clulas resultantes no son dos blastmeros desiguales que constituyen un embrin bicelular; por el contrario, son dos clulas iguales derivadas de la clula hbrida, producto de la fusin de los gametos, y capaces de dar lugar a dos cigotos idnticos. Esto es, una sola fecundacin dara dos cigotos que se desarrollan independientemente, bajo la misma cubierta (la zona pelcida del oocito fecundado), y que sern hermanos gemelos. La gemelaridad por aparicin de dos cigotos al completarse la fecundacin puede entenderse como una irregularidad natural causada por una ligera modificacin del flujo de calcio desde la zona de entrada del espermio al vulo. Tal irregularidad podra ser inducida por factores maternos; precisamente las diversas situaciones en que se da un incremento de la frecuencia de gemelaridad, existe una reduccin de los niveles de calcio en la madre en el tiempo de la fecundacin[15]. En este caso esa irregularidad natural sera provocada por el estado materno. Y en cualquier caso no desdice en absoluto de la individualidad del embrin. Fusin embrionaria y unidad Obviamente dos gemelos, procedentes de una nica fecundacin, o de dos independientes, que se gestan al unsono pueden dar lugar a un intercambio de clulas (incluso a travs de la madre) o a la implantacin precoz de clulas pluripotentes de uno de ellos (posiblemente tras su muerte) en el otro en fase temprana. Es ms, el mecanismo de de fusin es ms sencillo que el de fisin en el estrecho margen de espacio de la zona pelcida; slo as se pueden explicar las quimeras naturales, e incluso las quimeras con hermafroditismo, que se deben a la fusin embrionaria de clulas de un hermano de diferente sexo y procedente de la fecundacin de dos vulos diferente[16]. Aunque no hay datos que muestren la fisin de embrin antes de la implantacin se tiene evidencia de que ocurren fusiones[17]. Gemelacin artificial Se entiende con este trmino de gemelacin artificial la separacin de blastmeros provenientes de embriones pre-implantatorios de 2 a 8 ms clulas y el alojamiento de dichos blastmeros en una cubierta proveniente de otro vulo, o en una cubierta artificial. Los embriones originados as sern idnticos entre s, tanto en genes nucleares, como en genes mitocondriales pero no idnticos a sus progenitores; no son pues clones sino gemelos. Este procedimiento se ha utilizado con fines experimentales, para comprender la capacidad de desarrollo de blastmeros aislados[18], y con fines prcticos como una forma de incremento la produccin de embriones de animales domsticos de inters comercial[19]; los resultados muestran una muy baja eficacia por una considerable perdida de embriones por la manipulacin. Se conoce un solo intento de emplear esta metodologa, de forma experimental, en humanos usando embriones poliploides no viables[20]. Este sistema artificial de obtencin de gemelos no consiste en una simple particin de un individuo en mitades, o cuartos. La existencia de ejes que organizan las clulas derivadas de la multiplicacin del cigoto no permite referirse a mitades o cuartos (como si se tratara de una realidad biolgica simtrica y homognea) sino a partes. Esto implica que an en el embrin de dos clulas la separacin de una de ellas y su transferencia a otra zona pelcida no supone en s la desaparicin del embrin original, al modo de lo que ocurre en la divisin celular de una bacteria para desaparecer y dar paso a dos bacterias hijas, ninguna de las cuales mantiene la identidad de la primera. Por el contrario un blastomero (o un conjunto de varios) sacados de un embrin precoz y cultivados en condiciones adecuadas pueden reprogramar su organizacin celular a un nuevo sistema unitario; el embrin donante de parte de sus clulas puede reprogramar su desarrollo recuperando con flexibilidad las clulas perdidas manteniendo su configuracin. Al embrin bicelular le ocurrira lo mismo puesto que los dos primeros blastmeros son diferentes entre si, no puede hablarse de una particin con desaparicin del primero sino de una regeneracin celular de cada uno de los blastmeros aislados artificialmente. Se plantea la posibilidad de originar varios embriones humanos por gemelacin artificial de no nico para aumentar la eficacia de las prcticas de reproduccin humana asistida y para

la obtencin de ms embriones sobrantes de estas prcticas a fin de obtener material biolgico (clulas madre embrionarias) para investigacin. La inseguridad acerca de si se obtendran gemelos, o por el contrario se perdera el de partida existente, hace poco probable la prctica de esta tcnica. 4. El fenotipo blastocisto El embrin humano alcanza hacia el quinto da de desarrollo la etapa de blatocisto; estadio en el que aparecen ya establecidos dos tejidos diferentes. Las clulas situadas hacia el exterior y polarizadas se configuran como tejido extraembrionario, el trofoblasto o cubierta que le permitir el intercambio con el exterior de materia, energa y seales moleculares para su crecimiento armnico y funcionar adems como la primera barrera de defensa en la vida en simbiosis con la madre, que iniciara con la etapa de anidacin. Las clulas del interior se aglutinan constituyendo la masa interna celular de las que derivan los diferentes tejidos. Esta primera diferenciacin a dos linajes celulares diferentes iniciada en la constitucin del cigoto, se compromete definitivamente en el embrin de ocho clulas con la compactacin. La diferencia de interacciones entre las clulas que ocupan el interior y las del exterior permite que reciban seales diferentes y se diferencien tanto en morfologa, como en composicin inica del citoplasma y composicin de la membrana. El trofoblasto no es slo un tejido "extraembrionario" que dar lugar a la placenta, necesaria e imprescindible para la comunicacin con la madre en la gestacin. Es un componente del sistema inmunitario innato con un papel esencial en la defensa frente a infecciones bacterianas durante la vida intrauterina[21]; para organizar la respuesta immunitaria en la interfase tero-placenta tiene lugar un "dialogo molecular" materno-filial en el que los factores, liberados por clulas del sistema inmunitario de la madre presentes en las trompas, se unen a receptores especficos del trofoblasto del embrin y activan dichas clulas. Al trmino de la anidacin las clulas de la masa interna se han organizado como disco embrionario bilaminar[22] y la siguiente etapa, conocida como gastrulacin transforma, con una segunda diferenciacin celular, el disco embrionario en trilaminar. Las tecnologas de reproduccin in vitro han mostrado que la viabilidad del embrin en la tapa preimplantatoria es dependiente del aporte de los factores moleculares; factores que en el proceso natural la madre aporta al embrin a su paso por las trompas. La falta de eficacia de esta tcnicas tiene en ello una explicacin obvia: ni los gametos estn en la situacin biolgica optima para interaccionar y fecundarse y con el embrin fuera de su sitio natural ni l ni la madre intercambian las seales imprescindibles para el desarrollo al paso por las trompas y su posterior anidacin facilitada por las molculas con reconocimiento especfico madre-hijo. Gemelacin monocigtica por fisin del embrin preimplantatorio La gemelacin que se origina por una fisin del embrin deriva de decisiones moleculares que tienen lugar no ms tarde del da ocho del desarrollo embrionario[23]. La causa de la gemelacin por escisin es un retraso en el desarrollo temporal que refleja una parada bioqumica, y por tanto un enlentecimiento de la vida embrionaria precoz. Se asocia a niveles bajos de calcio en la madre por diversos factores como el bloqueo de los canales de calcio, lactancia (que comporta hipocalcemia), y es mucho ms frecuente en casos de induccin de la ovulacin y cuando la fecundacin y cultivo del embrin se ha hecho in vitro. En tal situacin un debilitamiento de la fuerza de los enlaces intercelulares en el embrin podra provocar su; la concentracin de calcio en el blastocisto libre in vitro es significativamente ms baja que cuando tras su transferencia a la madre interacciona con el endometrio[24]. Tambin se ha visto que la gemelacin monocigtica es ms frecuente en hembras[25], precisamente por el enlentecimiento del desarrollo precoz que conlleva la menor velocidad de replicacin de dos cromosomas X respecto a un cromosoma X y otro Y. As pues la gemelacin por escisin, cuando ocurre, no supone falta de organizacin intrnseca del embrin sino factores externos que le retrasan el contacto con el endometrio materno. El mantenimiento del embrin en un medio pobre en calcio puede originar debilitamiento de los enlaces intercelulares y en el momento de la implantacin deshacerse la polarizacin axial, por lo que las clulas podran organizarse en dos ejes de crecimiento.

Esto se ha podido comprobar en estudios de cultivo in vitro de blastocistos murinos desprovistos de la zona pelcida; de cada cien, uno origina gemelos por separacin en dos unidades de la masa celular interna al iniciarse el cono de implantacin en la zona opuesta al polo embrinico[26]. De hecho la unin del trofoectodermo del polo embrionario se une al endometrio a travs de integrinas especficas que son dependientes de calcio[27]; y requiere una total sincrona con una ventana de tiempo en que la implantacin puede ser correcta[28]. Es decir la gemelacin llamada homocigotica puede ser debida a que una sola fecundacin acabe en dos cigotos, excepcin que viene potenciada por la situacin de bajo calcio materno. La otra posibilidad de gemelacin homocigotica es debida una escisin de la masa interna del embrin por formarse dos polos de implantacin. Est es ms frecuente en la prctica de la FIV que en la generacin natural debido a la situacin precaria del embrin en desarrollo y sin sincronizacin materna. 4.Viabilidad intrnseca del embrin preimplantatorio in vivo e in vitro: mortalidad embrionaria. La posibilidad de seleccionar embriones vivos ptimos y dejar crioconservados y poder posteriormente llevar a cabo investigaciones con los subptimos requiere definir desde el punto de vista biolgico los criterios acerca de la viabilidad del embrin vivo in vitro. La definicin (basada en criterios morfolgicos o genticos) tiene un carcter negativo: se trata de definir qu condiciones observables de los embriones in vitro pueden asociarse a su no viabilidad posterior; es decir qu criterios permiten predecir las probabilidades de no continuar el desarrollo despus de su anidacin. El mismo concepto de viabilidad hace referencia tambin a los defectos cromosmicos o del desarrollo embrionario que no permiten que llegue a termino y nazca o lo haga con tales carencias y malformaciones que no sobreviva en un margen de tiempo tras la separacin de la madre. En el contexto de este trabajo nos vamos a referir a la diferencia de viabilidad intrnseca del embrin preimplantatorio in tero e in vitro. Esto es, la viabilidad y mortalidad asociada a la forma en que han sido concebidos. El nmero tan elevado de prdidas de embriones con la practica de la FIV se intenta justificar con la afirmacin de que la prdida de embriones es un hecho transitorio ligado a las actuales imperfecciones de las tcnicas, pero que mejoraran con el tiempo. Sin embargo no slo no ha sido as sino que la realidad muestra algo muy distinto: el supuesto mejoramiento de las tcnicas ha conducido a que sobran embriones que no son implantados y que permaneces crioconservados. Es decir se fecundan muchos aunque sean de peor calid ad, se eligen y el resto se rechaza. La argumentacin justificadora de estas perdidas vuelve la mirada a los datos con que se intent apoyar la idea de un estado pre-embrionario: cmo es posible que la naturaleza conduzca a una elevadsima muerte de embriones antes de su implantacin en el tero materno? Puesto que no tiene explicacin lgica habra -se afirma- que conceder que esa etapa por baja viabilidad es incompatible con un ser personal (sera algo as como un derroche injustificado de almas). Por tanto, el embrin preimplantatorio in vivo (y como consecuencia y con ms razn in vitro) carece de consistencia para predicar de l el carcter personal propio de un individuo de la especie. La cuestin tiene un error de partida: la supuesta elevada perdida de embriones precoces en su fase inicial. Los datos acerca de la mortalidad embrionaria muestran que el porcentaje de embriones que detienen su desarrollo entre las etapas de cigoto y blastocisto es ms elevada cuando la generacin e inicio del desarrollo tiene lugar in vitro[29] que in vivo. Lgico si se tienen en cuenta que la situacin biolgica primordial es esencial ya para el desarrollo temprano del embrin. Un estudio publicado en 1954 mostr que hasta un 30% de los embriones tienen interrumpido su desarrollo antes del estadio de blastocisto[30]. Este dato no ha sido confirmado con posterioridad; as en un estudio de 2002 se discute an si los niveles en orina de la hormona HCG es un biomarcador fiable de la no-concepcin, concepcin y perdida del embrin temprano[31] . Por otra parte ese marcador biolgico puede estar igualmente elevado tanto si se ha producido una verdadera fecundacin o no la ha habido. Y adems, la

causa mayor de prdidas durante la gestacin humana son las anormalidades cromosmicas. La proporcin de gestaciones de embriones con anormalidad cromosmica decrece a lo largo del tiempo de gestacin[32]; lo cual indica que la mortalidad embrionaria ms que constituir un signo de que el embrin preimplantatorio no es un individuo de la especie humana por carecer de suficiente consistencia, es una clara muestra de un sistema de seleccin natural.

Diversos anlisis han estudiado la mortalidad de los embriones producidos in vitro[33]. Y varias causas podran explicar esta detencin del desarrollo: la misma infertilidad de los progenitores[34], defectos intrnsecos del oocito[35] y sobre todo las anormalidades cromosmicas. El anlisis cromosmico de embriones humanos generados y cultivados in vitro ha puesto de manifiesto que hasta un 40% de ellos