Universidade Estadual Paulista Jlio de Mesquita Filho Campus Experimental do Litoral Paulista Unidade So Vicente

CONTAMINAO POR METAIS (Cd, Cu, Pb, Cr, Mn e Hg) E AVALIAO DO IMPACTO GENOTXICO EM Ucides cordatus (LINNAEUS, 1763) (BRACHYURA, UCIDIDAE), EM DOIS MANGUEZAIS DO ESTADO DE SO PAULO

Pablo Pena Gandara e Silva

So Vicente SP 2011

Universidade Estadual Paulista Jlio de Mesquita Filho Campus Experimental do Litoral Paulista Unidade So Vicente

CONTAMINAO POR METAIS (Cd, Cu, Pb, Cr, Mn e Hg) E AVALIAO DO IMPACTO GENOTXICO EM Ucides cordatus (LINNAEUS, 1763) (BRACHYURA, UCIDIDAE), EM DOIS MANGUEZAIS DO ESTADO DE SO PAULO

Pablo Pena Gandara e Silva

Orientador: Prof. Dr. Marcelo Antonio Amaro Pinheiro Co-orientador: Prof. Dr. Alaor Aparecido Almeida

Trabalho

de

Concluso

de

Curso

apresentado ao Campus do Litoral Paulista UNESP, como parte dos requisitos para a obteno do ttulo de Bacharel em Cincias Biolgicas, com Habilitao Costeiro. em Gerenciamento

So Vicente SP 2011
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Silva, Pablo Pena Gandara e Contaminao por metais (Cd, Cu, Pb, Cr, Mn e Hg) e avaliao do impacto genotxico em Ucides cordatus (Linnaeus, 1763) ( Brachyura, Ucididae), em dois manguezais do Estado de So Paulo. / Pablo Pena Gandara e Silva, So Vicente, 2011. xiv, 62 p. Trabalho de concluso (Bacharelado - Cincias Biolgicas) - Universidade Estadual Paulista, Campus Experimental do Litoral Paulista. Orientador: Marcelo Antonio Amaro Pinheiro Co-orientador: Alaor Aparecido Almeida 1. Ecotoxicologia 2. Caranguejo-u 3. Manguezais CDD 574.5222 Palavras-chaves: Manguezal, Metais, Microncleo, Rhizophora mangle, Ucides cordatus.

Aos meus pais e avs, que sempre incentivaram os meus estudos.

A nossa maior glria no reside no fato de nunca cairmos, mas sim em levantarmos sempre depois de cada queda. Confcio

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AGRADECIMENTOS Ao Prof. Dr. Marcelo Antonio Amaro Pinheiro por sua orientao, dedicao e competncia. Agradeo por ter acreditado que eu seria capaz de realizar esse trabalho e nunca ter desistido, mesmo quando tudo parecia no dar certo. Agradeo tambm pela disponibilidade, ensinamentos e oportunidades de trabalho. Aos meus pais, Jos Paulo (In Memoriam) e Rosa, por terem investido no meu futuro e por saberem que a melhor coisa que poderiam me deixar seria a educao. Aos meus avs, Nicanor e Maria, e minha irm Thas que tiveram pacincia para me ensinar quando era pequeno e pelos valores transmitidos, que no se aprendem numa sala de aula. Aos professores e funcionrios da UNESP - Campus Experimental do Litoral Paulista (CLP), que contriburam para a minha formao. FAPESP, pelo incentivo pesquisa e por ter acreditado em meu potencial para concluir o Projeto de Iniciao Cientfica (Bolsa IC - FAPESP Proc. # 2010/05129-3), valendo lembrar que ela permitiu a realizao de dois Trabalhos de Concluso de Curso (TCC), sendo um deles j defendido anteriormente, relacionado ao ttulo de Bacharel em Cincias Biolgicas Habilitao em Biologia Marinha. Os recursos financeiros dessa fundao tambm foram indispensveis ao pagamento das despesas durante as coletas de campo e anlises laboratoriais, os quais foram direcionados ao meu orientador atravs do Projeto U III (Auxlio Pesquisa - FAPESP Proc. # 2009/14725-1), do qual este TCC tambm integrante. As coletas em campo tambm s foram possveis devido existncia da camionete Toyota Hylux e de vrios equipamentos obtidos por meu orientador em auxlios individuais pesquisa com recursos da FAPESP: Projeto Arenaeus (Proc. # 1995/09495-2); Projeto U I (FAPESP Proc. # 1998/06055-0); e Projeto U II (Proc. # 2002/05614-2).

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Aos meus queridos amigos que sempre estiveram comigo, tanto nas festas, jogos de futebol, dias na praia e churrascos, como tambm nas horas de dificuldades, em que mais precisei de apoio. So nas horas difceis que descobrimos os verdadeiros amigos... aqueles que levaremos pelo resto da vida. Tenham certeza que sem vocs este trabalho no estaria concludo. Aos colegas do Grupo de Pesquisa em Biologia de Crustceos (CRUSTA), pelo auxlio em coletas, no processamento de amostras, na parte estatstica e na ajuda de qualquer dvida que me surgiu para finalizao desse trabalho. Obrigado pelo auxlio e grande fora que me passaram.

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SUMRIO Pg LISTA DE FIGURAS............................................................................. LISTA DE TABELAS............................................................................ RESUMO.............................................................................................. VII IX XI

ABSTRACT........................................................................................... XII 1. INTRODUO.................................................................................. 1

1.1. A IMPORTNCIA DO MANGUEZAL................................................... 1.2. DEGRADAO DOS SISTEMAS ESTUARINOS DA BAIXADA SANTISTA................................................................................................ 1.3. CARACTERSTICAS DO SEDIMENTO DE MANGUEZAL QUANTO A RETENO DE METAIS PESADOS............................................................. 1.4. CARACTERSTICAS DOS METAIS EM ESTUDO.................................. 1.4.1. CDMIO (Cd) .......................................................................... 1.4.2. CHUMBO (Pb........................................................................... 1.4.3. COBRE (Cu) ........................................................................... 1.4.4. CROMO (Cr)............................................................................. 1.4.5. MANGANS (Mn) .................................................................... 1.4.6. MERCRIO (Hg) ...................................................................... 1.5. Ucides cordatus............................................................................. 1.6 - UTILIZAO DE BIOINDICADORES........................................................... 1.7. MICRONCLEO................................................................................

1 3 6 7 7 8 9 10 11 12 13 15 17 19 20 20 21 22 23 24 25 25 28

2. OBJETIVOS...................................................................................... 3. MATERIAIS & MTODOS................................................................

3.1. REA DE ESTUDO....................................................................................... 3.2. COLETA DAS AMOSTRAS DE CARANGUEJOS......................................... 3.3. COLETA DAS AMOSTRAS DE FOLHAS............................................. 3.4. COLETA DAS AMOSTRAS DE GUA E SEDIMENTO........................... 3.5. MICRONCLEO.............................................................................. 3.6. ANLISE DOS DADOS.................................................................... 3.7. COMPARAO COM VALORES DE REFERNCIA..............................

4. RESULTADOS.................................................................................. 28
4.1. COBRE..........................................................................................

4.2. CHUMBO....................................................................................... 4.3. CDMIO........................................................................................ 4.4. MANGANS................................................................................... 4.5. CROMO......................................................................................... 4.6. MERCRIO.................................................................................... 4.7. MICRONCLEO..............................................................................

30 31 32 35 36 38 40 40 42 44 45 45 46 47 48 50

5. DISCUSSO.....................................................................................
5.1. COBRE........................................................................................... 5.2. CHUMBO....................................................................................... 5.3. CDMIO........................................................................................ 5.4. MANGANS................................................................................... 5.5. CROMO......................................................................................... 5.6. MERCRIO.................................................................................... 5.7. MICRONCLEO.............................................................................. 5.8. COMPARAO ENTRE AS REAS...................................................

6. CONCLUSES.................................................................................

8. BIBLIOGRAFIA................................................................................. 51

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LISTA DE FIGURAS FIGURA 1 Localizao das subreas de amostragem nos manguezais dos municpios de Cubato e Bertioga, no Estado de So Paulo, Brasil (modificado de GoogleEarth).......................................................................

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FIGURA 2 Grfico de caixas referentes quantificao do cobre (g/g) em cada compartimento abitico/biticos (A, folha verde; B, sedimento; C, musculatura de U. cordatus; e D, hepatopncreas de U. cordatus), nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP). Onde: linha horizontal em negrito (interior da caixa) = mediana; caixa = quartis a 25 e 75%; e linhas verticais a partir da caixa = amplitude de variao da concentrao. Em todos os compartimentos analisados houve diferena estatstica entre as medianas das reas em estudo 28 (p<0,05).......................................................................................................... FIGURA 3 Grfico de caixas referentes quantificao do chumbo (g/g) no sedimento, nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP). Onde: linha horizontal em negrito (interior da caixa) = mediana; caixa = quartis a 25 e 75%; e linhas verticais a partir da caixa = amplitude de variao da concentrao. Nos compartimentos analisados houve diferena estatstica entre as medianas das reas em estudo 31 (p<0,05).......................................................................................................... FIGURA 4 Grfico de caixas referentes quantificao do cdmio (g/g) em cada compartimento abitico/biticos (A, folha verde; B, folha senescente), nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP). Onde: linha horizontal em negrito (interior da caixa) = mediana; caixa = quartis a 25 e 75%; e linhas verticais a partir da caixa = amplitude de variao da concentrao. Em todos os compartimentos analisados houve diferena estatstica entre as medianas das reas em estudo (p<0,05).......................................................................................................... 32 FIGURA 5 Grfico de caixas referentes quantificao do mangans (g/g) em cada compartimento abitico/biticos (A, gua; B, folha verde; C, folha senescente; D, musculatura de U. cordatus; e E, hepatopncreas de U. cordatus), nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP). Onde: linha horizontal em negrito (interior da caixa) = mediana; caixa = quartis a 25 e 75%; e linhas verticais a partir da caixa = amplitude de variao da concentrao. Em todos os compartimentos analisados houve diferena estatstica entre as medianas das reas em estudo (p<0,05).......................................................................................................... 34 FIGURA 6 Grfico de caixas referentes quantificao do cromo (g/g) em cada compartimento abitico/biticos (A, sedimento; B, musculatura de U. cordatus; e C, hepatopncreas de U. cordatus), nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP). Onde: linha horizontal em negrito (interior da caixa) = mediana; caixa = quartis a 25 e 75%; e linhas verticais a partir da caixa = amplitude de variao da concentrao. Em todos os compartimentos analisados houve diferena estatstica entre as medianas das reas em 36 estudo............................................................................................................
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FIGURA 7 Grfico de caixas referentes quantificao do mercrio (ng/g) no hepatopncreas de U. cordatus, nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP). Onde: linha horizontal em negrito (interior da caixa) = mediana; caixa = quartis a 25 e 75%; e linhas verticais a partir da caixa = amplitude de variao da concentrao. No compartimentos analisado houve diferena estatstica entre as medianas das reas em estudo (p<0,05).......................................................................................................... FIGURA 8 Grfico de caixas referentes as Frequncia de clulas micronucleadas em 1000 clulas analisadas da hemolinfa de U. cordatus (n=10) nas duas reas de manguezal em estudo (Bertioga e Cubato, SP), representados pela mediana (linha horizontal em negrito), quartis (caixa) e amplitude de variao (linhas verticais). Foi constatada diferena significativa entre as medianas (p<0,05).......................................................

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LISTA DE TABELAS

TABELA 1 Coordenadas geogrficas das subreas de manguezal nos dois municpios (reas) no Estado de So Paulo, onde foram obtidas as amostras para anlise.................................................................................. 20 TABELA 2 Valores de referncia (g/g) para os metais no sedimento (Environment Canada, 1999), mximos permissveis (mg/L) na gua (Resoluo CONAMA n 357/05) e em alimentos (g/g) para consumo humano (Portaria ANVISA n 685/98)......................................................... 27 TABELA 3 Concentraes de cobre (g/g) para cada compartimento abitico/biticos nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP), ) e de erro compreendendo os valores mnimos, mximos, mdios ( padro da mdia (EP), acompanhado do teste estatstico das medianas (D, Kolmogorov-Smirnov; p, nvel de significncia estatstica; negrito, significncia estatstica)............................................................................... 28 TABELA 4 Concentraes de chumbo (g/g) para cada compartimento abitico/biticos nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP), ) e de erro compreendendo os valores mnimos, mximos, mdios ( padro da mdia (EP), acompanhado do teste estatstico das medianas (D, Kolmogorov-Smirnov; p, nvel de significncia estatstica; negrito, significncia estatstica)............................................................................... TABELA 5 Concentraes de cdmio (g/g) para cada compartimento abitico/biticos nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP), ) e de erro compreendendo os valores mnimos, mximos, mdios ( padro da mdia (EP), acompanhado do teste estatstico das medianas (D, Kolmogorov-Smirnov; p, nvel de significncia estatstica; negrito, significncia estatstica)............................................................................... TABELA 6 Concentraes de mangans (g/g) para cada compartimento abitico/biticos nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP), compreendendo os valores mnimos, mximos, mdios ) e de erro padro da mdia (EP), acompanhado do teste estatstico ( das medianas (D, Kolmogorov-Smirnov; p, nvel de significncia estatstica; negrito, significncia estatstica)................................................ TABELA 7 Concentraes de cromo (g/g) para cada compartimento abitico/biticos nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP), ) e de erro compreendendo os valores mnimos, mximos, mdios ( padro da mdia (EP), acompanhado do teste estatstico das medianas (D, Kolmogorov-Smirnov; p, nvel de significncia estatstica; negrito, significncia estatstica)...............................................................................

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TABELA 8 Concentraes de mercrio (ng/g) para cada compartimento abitico/biticos nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP), compreendendo os valores mnimos, mximos, mdios ) e de erro padro da mdia (EP), acompanhado do teste estatstico ( das medianas (D, Kolmogorov-Smirnov; p, nvel de significncia estatstica; negrito, significncia estatstica)................................................ TABELA 9 Frequncia de clulas micronucleadas/1.000 clulas analisadas, na hemolinfa do caranguejo U. cordatus (n=10/rea) nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP), compreendendo os valores mnimos, mximos, mdios (x), de desvio padro (s) e coeficiente de variao (CV), bem como o teste comparativo entre as medianas (D, Kolmogorov-Smirnov; p, nvel de significncia estatstica; negrito, significncia estatstica)...............................................................................

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RESUMO O manguezal um ecossistema costeiro de grande importncia devido a sua extrema produtividade, por conferir proteo linha de costa, ser relevante reproduo de vrias espcies animais e possibilitar fonte de alimento/ subsistncia s comunidades litorneas. Esse ecossistema tem sido exposto intensa degradao por atividades antrpicas, que tm gerado poluentes danosos ao ambiente e sua biota. Entre os principais poluentes figuram os metais, que so txicos aos organismos quando suas concentraes ultrapassam aquelas naturais do ambiente, acumulando-se nos diferentes compartimentos do manguezal, sejam eles abiticos (gua e sedimento) como biticos (plantas e animais). Ucides cordatus um macrocrustceo bentnico, endmico de manguezais, que tem sua dieta constituda principalmente por folhas do mangue-vermelho (Rhizophora mangle), sendo estes dois organismos potenciais bioacumuladores de metais. O presente estudo visa avaliar a contaminao por seis metais (Cd, Cu, Cr, Mn, Pb, e Hg) em duas reas de manguezal do Estado de So Paulo (Cubato, com conhecido histrico de contaminao; e Bertioga, com maior preservao ambiental), comparando seu nvel de poluio com a quantificao da genotoxicidade do caranguejo-u, bem como possveis problemas sade ao homem pelo consumo da carne desse crustceo. As amostras de gua, sedimento, folhas de R. mangle (verdes e senescentes) e tecidos de U. cordatus (musculatura e hepatopncreas) foram coletadas em trs subreas para cada municpio, sendo encaminhadas CEATOX / UNESP Botucatu para a quantificao dos metais por espectrofotometria de absoro atmica. As concentraes dos metais em peso seco foram submetidas ao teste no paramtrico de Kolmogorov-Smirnov, a 5% de significncia estatstica, com confronto entre as medianas dos compartimentos abitico/biticos dos dois manguezais. Os resultados obtidos foram comparados com os valores estabelecidos pela legislao brasileira para a qualidade da gua (CONAMA n 354/05), consumo da carne do caranguejo (ANVISA n 685/98) e sedimento (Legislao Canadense). No sedimento do manguezal em Cubato os valores de cdmio e mercrio foram superiores ao TEL, enquanto em Bertioga somente Cd apresentou valores superiores a este parmetro. As amostras de gua em
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Bertioga apresentaram concentraes de cobre superiores ao mximo permitido pela legislao, enquanto que no se recomenda o consumo da carne do caranguejo dos dois municpios estudados, em funo da elevada concentrao de cobre na musculatura de U. cordatus (Bertioga) e de cromo (Cubato). A rea de manguezal em Cubato apresentou concentrao de metais superior a Bertioga para a maioria dos compartimentos estudados. No entanto, o cobre e mercrio foram registrados em maiores concentraes nos tecidos de U. cordatus, sugerindo diferenas fisiolgicas entre os caranguejos de reas com distinto nvel de poluentes. Diferenas significativas tambm foram observadas na frequncia de clulas micronucleadas, que foi superior em Cubato, embora Bertioga tambm apresente frequncia acima da normalidade. Os manguezais de Cubato apresentaram maior contaminao por metais do que os de Bertioga, embora o nvel de contaminao deste ltimo municpio tambm seja expressiva, requerendo a implantao de programas para minimizar/cessar a emisso pelas principais fontes poluentes, bem como de polticas pblicas voltadas recuperao ambiental da regio.

Palavras-chave: Manguezal, Metais, Microncleo, Rhizophora mangle, Ucides cordatus.

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ABSTRACT Mangrove is a high importance coastal ecosystem because of its extreme productivity, their role in the protection to the coastline and reproduction of many species and source of food / maintenance to coastal communities. This ecosystem has been exposed to strong degradation by human activities, which have generated pollutants to the environment and biota. Among the main pollutants, metals are toxic to organisms when their concentrations exceed those of the natural environment, and accumulate in different compartments, either abiotic (water and sediment) and biotic (plants and animals). Ucides cordatus is a benthic crustacean, endemic to mangroves, and his diet consists primarily of leaves of red mangrove (Rhizophora mangle), and both species are potential bio-accumulators of metals. This study aims to evaluate the contamination of six metals (Cd, Cu, Cr, Mn, Pb, and Hg) in two mangrove areas of the State of So Paulo (Cubato, known about his contamination and Bertioga, as more environmental protection ), comparing their pollution levels with the quantification of genotoxicity of the U. cordatus and health problems to humans by consumption of meat from the crustacean. Samples of water, sediment, leaves of R. mangle (green and senescent) and tissues of U. cordatus (muscle and hepatopancreas) were collected in three sub-areas for each area. Samples were transported to CEATOX / UNESP Botucatu for the quantification of metal by Atomic Absorption Spectrophotometry. The metal concentrations in dry weight were submitted to nonparametric KolmogorovSmirnov test (5% statistical significance), with confrontation between the medians of the compartments abiotic / biotic of two mangroves. The results were compared with the values established by Brazilian legislation for water quality (CONAMA n 354/05), consumption of crab meat (ANVISA n. 685/98) and sediment (Canadian legislation). The Cubato mangrove sediment values of cadmium and mercury were above the TEL, while in Bertioga only Cd showed higher values for this parameter. Copper concentrations of Water samples from Bertioga was higher than the maximum allowed by law. Not recommended consumption of crab meat from both areas, because of the high concentration of copper (Bertioga) and Chromium (Cubato) in muscles of U cordatus. The mangrove area in Cubato showed metals concentrations high
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than for most Bertioga compartments studied. However, copper and mercury were reported high concentrations in the tissues of U. cordatus, suggesting physiological differences between crabs from areas with different levels of pollutants. Significant differences were also observed in the frequency of micronuclei cells, which higher in Cubato, but also presents in Bertioga frequency above the norm. Cubato mangroves is higher metal contamination than Bertioga, although the level of contamination of Bertioga also is was significant, requiring the implementation of programs to minimize / stop the emission of sources pollution, as well as public politics to environmental recovery in the region.

Key words: Mangrove, Micronuclei, Heavy Metal, Rhizophora mangle, Ucides cordatus.

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1. INTRODUO 1.1 - A IMPORTNCIA DO MANGUEZAL O manguezal um importante ecossistema de transio entre o ambiente marinho e terrestre, encontrado em reas abrigadas de regies tropicais e subtropicais, propiciando condies de alimentao, proteo e reproduo para diversas espcies animais (PINHEIRO et al., 2008). tambm considerado um ambiente de alta produtividade, com papel importante na transformao da matria orgnica em nutrientes, que podem permanecer neste local ou serem transportados para outros ecossistemas costeiros adjacentes (SCHAEFFER-NOVELLI, 1995; TWILLEY et al., 1997). Os manguezais so ambientes midos tropicais ou subtropicais, influenciados pelo regime das chuvas e mars, estando localizados em reas potencialmente inundveis, com presena de espcies terrestres, dulccolas e marinhas (SPALDING et al., 2010). As mars possuem a capacidade de alterar caractersticas desse ambiente costeiro em funo de seu ciclo, com particular variao da salinidade de suas guas, propiciando condio de estresse para diversas espcies animais e vegetais morfofisiologicamente tolerantes. Nos manguezais brasileiros encontramos trs gneros de rvores halfitas (Rhizophora, Avicennia e Laguncularia), que no Estado de So Paulo so representadas por trs espcies: Rhizophora mangle Linnaeus (manguevermelho), Avicennia schaueriana Stapf & Leechman (mangue-preto) e Laguncularia racemosa Gaertn (mangue-branco). Entre as adaptaes verificadas nestas espcies esto: a habilidade de extrair gua doce da gua do mar, rgos especiais que que propiciam a a excreo respirao, do sal, razes pneumatforos/lenticelas aperfeioam

escora/adventcias que sustentam a rvore em substratos movedios e propgulos flutuantes (SCHAEFFER-NOVELLI & CINTRN, 1986). Uma adaptao importante nas plantas de manguezal a capacidade que apresentam em regular os sais, existindo aquelas que tm a capacidade de serem tolerantes ao sal (sal-tolerantes), enquanto outras conseguem excluir os sais (sal-excludentes), o que influencia sua capacidade de regulao de nutrientes e contaminantes (SILVA, 2010; SPALDING et al., 2010).
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Os manguezais tambm so de relevante papel socioeconmico, pois diversas comunidades utilizam seus recursos naturais para sua sobrevivncia (SPALDING et al., 2010). Dentre os recursos de manguezais que tm sido explorados destacam-se o uso de sua vegetao como lenha, na construo de moradias, utenslios de pesca, embarcaes, acessrios, armadilhas, cercados, medicamentos e corantes, enquanto sua fauna apreciada como alimento humano e fonte de renda para muitas famlias (COSTA-NETO & GORDIANO LIMA, 2000; JORGE et al., 2002; ALVES & NISHIDA, 2003; BEZERRA-SOUTO, 2007). O manguezal um ecossistema costeiro tambm considerado berrio para diversas espcies animais, sejam elas endmicas ou de ambientes adjacentes, que para ali migram ou permanecem em parte ou todo o ciclo de suas vidas (ROBERTSON & DUKE, 1987). Entre estes animais figuram mamferos, aves, rpteis, peixes, moluscos e crustceos, com destaque para os caranguejos, seja por sua abundncia (WOLFF et al., 2000), ciclagem de nutrientes (WOLFRATH, 1992) e aerao/bioturbao do solo (RIDD, 1996; KRISTENSEN, 2008). O manguezal tambm um ecossistema importante em relao dinmica do ciclo de carbono, sequestrando este qumico da atmosfera e armazenando-o nas rvores e seu sedimento (SPALDING et al., 2010). Estudos econmicos mostram a valorao dos manguezais, favorecendo a proteo desse ecossistema com foco nas mudanas climticas globais, particularmente no sequestro do carbono em taxas superiores a outros ecossistemas (SPALDING et al., 2010). Outro benefcio dos manguezais fornecer proteo linha da costa contra a eroso, evitar o assoreamento do leito estuarino e funcionar como importante barreira biogeoqumica exportao de metais (SILVA et al., 1990; SOARES, 1997), que podem ser retidos no sedimento ou nos tecidos vegetais das rvores. Nos manguezais as principais fontes de contaminao por metais so provenientes de rejeitos de minas e resduos industriais. As rvores de manguezal so relativamente imunes aos efeitos txicos dos metais, embora
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isso no ocorra com a fauna, que se apresenta vulnervel por estresse fisiolgico, com reduo do sucesso reprodutivo (HOGARTH, 2007). Como os manguezais possuem valor econmico e social, os efeitos negativos da degradao desse ecossistema afeta a sociedade humana em vrios nveis, desde a contaminao de alimentos, diminuio da proteo da linha de costa, perda do estoque de combustveis, bem como da renda/emprego para muitas famlias (SPALDING et al., 2010).

1.2 - DEGRADAO DOS SISTEMAS ESTUARINOS DA BAIXADA SANTISTA As principais cidades mundiais esto localizadas prximas aos sistemas estuarinos, o que se deve elevada fertilidade de suas terras pelo aporte de matria orgnica, facilidades na implantao de atividades antrpicas (p. ex., polos industriais, reas porturias, marinas, etc.) e por constiturem importante via de acesso ao interior do continente (MIRANDA et al., 2002). O sistema produtivo utiliza matria-prima dos ecossistemas costeiros, gerando, em seu processamento, rejeitos e efluentes que causam danos, muitas vezes irreversveis (GOULART & CALLISTO, 2003). Alm da poluio gerada pelo setor industrial, a elevada concentrao demogrfica contribui para o estabelecimento de favelas em reas de proteo (p. ex., margem de rios e manguezais), com danos diretos aos ecossistemas aquticos. Entre eles destaca-se o descarte inadequado de poluentes lquidos (p. ex., esgoto no tratado) e slidos (p. ex., lixo), potencializando a veiculao de inmeras doenas. Fatores como a desinformao dos moradores, falta de recursos e pssima condio de vida so as principais causas dessa degradao (GOULART & CALLISTO, op. cit.). A Regio Metropolitana da Baixada Santista (RMBS), composta por nove municpios (Bertioga, Cubato, Guaruj, Itanham, Mongagu, Perube, Praia Grande, Santos e So Vicente), est localizada no Litoral Centro-Sul do Estado de So Paulo. Esta importante regio detm elevado grau de degradao ambiental, particularmente os municpios de Cubato, Santos e
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So Vicente, devido ao maior tempo de ocupao humana e dos impactos dela decorrentes (PINHEIRO et al., 2008). Cubato possui um expressivo Polo Industrial, principalmente nas reas da Siderurgia e Petroqumica, possuindo, tambm, proximidade do Complexo Porturio de Santos. O crescimento histrico de Santos se irradiou de forma rpida para Cubato, onde hoje se concentram indstrias, das quais 30 so consideradas poluidoras. Em consequncia dessa industrializao, esta regio foi marcada, na dcada de 70, por uma expressiva emisso de poluentes para os ambientes costeiros, levando a CETESB a intensificar seu programa de monitoramento ambiental na dcada de 80 (PINHEIRO et al., 2008). A cidade de Cubato sofre com a disperso de poluentes atmosfricos, j que os ventos em direo ao continente so bloqueados pela Serra do Mar, o que traz graves consequncias ambientais e de sade pblica (SO PAULO, 2010). Prova disso o sedimento de Cubato, que traz importante testemunho dessa contaminao e degradao ambiental. Observa-se, ainda, a gesto inadequada das atividades industriais e porturias, alm do elevado crescimento populacional, que somados falta de infraestrutura de saneamento ambiental, tm aumento os nveis de poluio pelo descarte inadequado de resduos nos sistemas hdricos (PERINA, 2006). A cidade de Santos est localizada no mesmo complexo estuarino de Cubato. Trata-se da principal cidade do litoral paulista, cujo crescimento sempre esteve intimamente relacionado ao desenvolvimento do Porto de Santos, que o maior da Amrica Latina. Devido ao intenso trnsito de grandes navios, seu canal constantemente dragado, atividade que revolve os sedimentos de fundo, resuspendendo detritos, metais e diversos produtos qumicos ali sedimentados, o que altera sobremaneira a qualidade da gua. Alm disso, as guas de canais porturios so alvo potencial de vazamentos de leo ou outros produtos qumicos de navios que ali trafegam/atracam diariamente, trazendo efeitos diretos aos manguezais (SO PAULO, 2010). O Municpio de Bertioga, tambm pertencente RMBS, esta localizado no Litoral Centro-Sul do Estado de So Paulo, com localizao prxima Metrpole de So Paulo e das cidades de Santos e Cubato. Trata-se do
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municpio da RMBS que apresenta o maior grau de preservao ambiental, com manuteno das condies naturais e poucas intervenes antrpicas (CETESB, 2001; EICHLER et al., 2006). Existem poucos trabalhos na literatura que tratam da contaminao por metais nos manguezais de Bertioga, com alguns versando sobre a regio do Canal de Bertioga, que se encontra relativamente bem estudado quanto a alguns poluentes (HARARI & CAMARGO, 1998; CETESB, 2001; ABESSA, 2002; EICHLER et al., 2006; SARTORETTO et al., 2011). O Canal de Bertioga se conecta ao Oceano Atlntico a nordeste da Barra de Bertioga e a sudoeste do Esturio de Santos (EICHLER et al., 2006). Neste canal encontramos o Largo do Candinho (2354'33,50"S e 4613'26,55"W), que uma regio de maior afastamento entre as margens (at 1.000 m), funcionando como um divisor de guas dos esturios de Santos e Bertioga. Este largo apresenta uma elevada taxa de deposio de sedimentos, principalmente aqueles mais finos, que favorecem maior acumulao de poluentes, entre os quais figuram metais oriundos do Sistema Estuarino de Santos, contaminados pelas indstrias de Cubato (CETESB, 2001). O Canal de Bertioga tambm sofre impacto de atividades antrpicas, como o lanamento de esgotos e a contaminao por combustveis, devido ao elevado trfego de embarcaes e presena de marinas, alm do aumento da urbanizao (SARTORETTO et al., 2011). Como ocorre em outras reas de Bertioga, a regio do Rio Itapanha, pertencente Bacia da Baixada Santista (UGRHI-7), detm poucos estudos sobre seu grau contaminao por metais. Nessa regio os manguezais so marginais, com os municpios montante representados por uma populao predominante rural e o adensamento humano em Bertioga associado preservao parcial do ambiente (MENDES, 2010). Segundo o relatrio da CETESB (2006), 34% do esgoto da populao de Bertioga captado, sendo direcionado principalmente ao Rio Itapanha.

1.3 - CARACTERSTICAS DO SEDIMENTO DE MANGUEZAL QUANTO A RETENO DE METAIS Os metais ligam-se matria orgnica do sedimento em diferentes graus de afinidade, ocorrendo em maiores concentraes naqueles com granulometria mais fina, particularmente os mais argilosos (< 63 m), compreendendo a frao mais usada em estudos de contaminao por etes poluentes (SOARES et al., 1999). A capacidade de ligao dos metais com a matria orgnica ocorre na seguinte ordem hierrquica: Cu>Zn>Pb>Cr>Ni>Cd (SOARES et al., 1999). O pH tambm um fator que influencia a mobilidade ou precipitao de metais no ambiente (LUIZ-SILVA et al., 2002). Em valores alcalinos favorece a precipitao dos metais, enquanto em meios cidos aumenta sua mobilidade e possibilidade de transporte para outros locais. O manguezal um ambiente de guas alcalinas que promove a precipitao da matria orgnica, que se associa ao sedimento, sendo tambm, portanto, importante reservatrio de metais. No entanto, em funo da grande variao de alguns parmetros fsicoqumicos neste ecossistema (p. ex., pH, salinidade e potencial redox), pode ocorrer a liberao de metais do sedimento para o meio aqutico, tornando-os disponveis aos animais, conferindo ao sedimento fonte potencial de poluio (SOARES et al., 1999; SIQUEIRA et al., 2005). Alm da matria orgnica, o sedimento dos manguezais rico em sulfetos, que quando oxidados por efeito das mars, mobilizam metais e os tornam biodisponveis (CLARK et al., 1998). A concentrao de metais tende a ser maior prximo fonte poluidora, enquanto o sedimento acumula maiores concentraes de metais do que a gua ao redor. Assim, como os sedimentos possuem capacidade de acumular mesmo que reduzidas concentraes de metais, a matriz ideal para estudos sobre estes poluentes, mesmo quando na gua eles se encontram em nveis extremamente baixos ou indetectveis (LUIZ-SILVA et al., 2002; MARANHO, 2006). Um problema observado na Regio Metropolitana da Baixada Santista so as constantes dragagens necessrias aos principais canais estuarinos destinados locomoo de navios, por resuspenderem metais e outros
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poluentes

que

encontravam

depositados

no

sedimento,

tornando-os

disponveis na coluna da gua e serem incorporados pela biota.

1.4 CARACTERSTICAS DOS METAIS EM ESTUDO

1.4.1 CDMIO (Cd) Entre as principais vias de entrada de cdmio ao ambiente destacam-se a queima de combustveis fsseis, efluentes industriais e drenagem de minas. Este metal vem sendo amplamente utilizado na produo de pigmentos, equipamentos eletrnicos, lubrificantes, acessrios fotogrficos, galvanoplastia, soldas, baterias, fertilizantes, etc.(SILVA, 1996; TOMAZELLI, 2003; DEFEW et al., 2005; ONOFRE et al., 2007; BURATINI & BRANDELLI, 2008). Da produo total de Cd, 75% so destinados indstria de baterias, por ser muito resistente corroso (FASSETT, 1975; STEPHAN, 2007). O cdmio um elemento raro na natureza, geralmente sendo encontrado combinado ao zinco, devido sua similaridade geoqumica (FASSETT, 1975; BARCELLOS, 1995). Para as plantas este metal se revela como um importante micronutriente, embora seja txico aos animais, sendo, portanto, classificado como um elemento no essencial. No ambiente aqutico o cdmio encontra-se na forma catinica bivalente (Cd2+), embora em reas estuarinas tambm possa ser encontrado como complexos de cloreto de cdmio, precipitados de carbonato ou hidrxidos (EPA 2001). A especiao do Cd atribuda a fatores como pH, eH, matria orgnica, etc., sendo sua forma inica dissolvida a mais disponvel para acmulo pelos organismos aquticos. A precipitao de Cd, como ocorre com a maioria dos metais, favorecida em meios mais alcalinos e em funo da disponibilidade de sulfetos. A regio estuarina de Cubato possui nveis de Cd capazes de acarretar efeitos adversos ao ecossistema, representando um risco potencial sade da populao local (STEPHAN, 2007). Este metal tem efeito extremamente prejudicial em humanos, podendo gerar danos sseos, como os ocorridos em
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japoneses que ingeriram Cd (doena Itai-Itai segundo FASSETT, 1975 e TOMAZELLI, 2003), alm de disfuno renal, hipertenso e mesmo o cncer (SILVA, 1996).

1.4.2 CHUMBO (Pb) O chumbo um elemento no essencial ao metabolismo dos animais, sendo empregado pelo homem em vrias indstrias (tintas, baterias, tubulaes) ou como aditivo de derivados do petrleo. Este qumico geralmente frequente em sua forma inorgnica (Pb2+), sendo que sua forma orgnica (Pb4+) ou metilada (p. ex., tetralquilchumbo) apresentam rpida absoro celular por serem lipoflicos, promovendo sua bioacumulao nos animais (WHO, 1989; BURATINI & BRANDELLI, 2008). De acordo com estes autores, os organismos aquticos e terrestres podem assimilar e acumular Pb segundo o tempo de exposio a este metal, embora no existam evidncias de sua biomagnificao ao longo da teia trfica, ou seja, suas maiores concentraes no esto associadas a maior posio de um animal na teia trfica. Nos ecossistemas aquticos praticamente todo chumbo se encontra associado ao sedimento, existindo apenas uma pequena frao dissolvida em gua (WHO, 1989). O acmulo de Pb no sedimento ocorre em funo de sua baixa solubilidade e tendncia precipitao, particularmente na elevao da matria orgnica e partculas muito finas, como as argilosas (BUSCHLE et al., 2010), tornando-se menos biodisponvel na gua. Assim, fatores abiticos como a temperatura, salinidade, pH e contedo de cidos hmicos/flvicos podem influenciar a acumulao de Pb na gua ou no sedimento. O Pb no apresenta grande disperso no ambiente, ocorrendo em maiores concentraes prximo sua fonte de descarga, diminuindo sua distncia dispersora tanto no ambiente quanto nos animais (WHO, 1989). Nas plantas o chumbo tende a se acumular nas paredes celulares, principalmente nas razes, apresentando baixa translocao para outros tecidos vegetais, ocorrendo, por isso, em concentraes nfimas na parte area da planta do que nos tecidos radiculares (ANDRADE et al., 2008).
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A sensibilidade das populaes de invertebrados quanto contaminao de chumbo diferente entre reas contaminadas e no-contaminadas. Animais de reas contaminadas mostraram ser mais tolerantes ao chumbo do que reas no poludas (WHO, 1989). Nos animais a distribuio do chumbo esta ligada ao metabolismo de Ca, se acumulando principalmente em tecidos calcificados. Assim, nos moluscos a concentrao de chumbo maior na concha do que em seus tecidos (EISLER, 2010).

1.4.3 COBRE (Cu) O cobre encontrado no ambiente principalmente em sua forma catinica bivalente (Cu2+), tambm podendo ocorrer em outras trs formas (Cu0, Cu1+ e Cu3+), como tambm em composio organometlica. Entre suas principais caractersticas est sua elevada condutividade eltrica e resistncia corroso, possibilitando seu uso para fins diversos (WHO, 1998). Trata-se de um qumico encontrado naturalmente no ambiente (p. ex., em reas com conhecida atividade vulcnica, com presena de organismos em decomposio ou submetidas a incndios florestais), aumentando-se sua concentrao em funo de determinadas atividades antrpicas (p. ex., minerao deste metal, usinas eltricas, incineradores municipais, esgoto e utilizao agrcola) (GUILHERME et al., 2005). Da produo do cobre, 65% so destinados manufatura de fios, cabos eltricos e demais aplicaes eletrnicas, como tambm na fabricao de utenslios usados na culinria, sistemas de distribuio de gua (principalmente em encanamentos), fertilizantes e tintas anti-incrustantes. Seu uso como inibidor/controlador do crescimento de algas em ambientes aquticos tambm tem sido considerado eficaz (WHO, 1998). Trata-se de um elemento essencial aos organismos vivos, constituindo um grande nmero de protenas, cuja deficincia ou elevada concentrao podem gerar efeitos deletrios, particularmente sobre a estrutura e funo do DNA, de membranas e das protenas (BARCELOS, 2008). Pelo menos 12 protenas utilizam o cobre em sua estrutura, sendo essencial fisiologia de
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alguns animais, como a maioria dos crustceos e moluscos, fazendo parte da composio do pigmento respiratrio da hemolinfa (hemocianina), responsvel pelo transporte de gases (EISLER, 2010). O mesmo ocorre com as plantas, onde o cobre participa da composio de vrias enzimas (WHO, 1998), sendo importante mencionar que muitos organismos so capazes de regular a concentrao desse metal em suas estruturas (EISLER, 2010). O cobre amplamente distribudo na gua, com pequena parte dele na forma Cu2+ e sua maior concentrao adsorvida em partculas em suspenso ou formando complexos com outros ligantes qumicos (SODR, 2005). Grande parte do cobre adsorvido se deposita na regio superficial do solo, enquanto os animais tendem a apresentar diferentes fatores de acumulao, sendo mais concentrado prximo s fontes de exposio.

1.4.4 CROMO (Cr) O cromo elemento essencial fisiologia de animais, enquanto nos vegetais no conhecido nenhum efeito biolgico. empregado na galvanoplastia e produo de pigmentos, com sua liberao ao ambiente ocorrendo por queima de combustveis fsseis, incinerao de resduos ou de sua extrao como minrio (WHO, 1988). Os sedimentos em geral apresentam baixa concentrao de Cr, com pouca concentrao sendo disponibilizada s plantas. Na gua, por sua vez, o cromo encontrado em sua forma trivalente ou hexavalente, sendo oriundo de atividades antropognicas, por disperso atmosfrica, quando se precipita e promove a contaminao dos corpos dgua (SCHIRMER et al., 2009). O cromo pode ocorrer em sua forma elementar (Cr0) como em formato bi, tri ou hexavalente (Cr2+, Cr3+ e Cr6+, respectivamente). As formas tri e hexavalente so as mais comuns, apresentando caractersticas muito distintas, pois a trivalente essencial ao homem (p. ex., metabolismo da glicose) e encontrada naturalmente no ambiente, enquanto a forma hexavalente txica, altamente mvel/instvel e causa danos genticos e mesmo cncer em humanos (WHO, 1988; BOUROTTE et al., 2009). A forma hexavalente surge
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das atividades humanas, ocorrendo seu predomnio quando em condies alcalinas, enquanto a forma trivalente predomina em ambientes de maior acidez (BOUROTTE et al., 2009). No ambiente o Cr ocorre em sua forma elementar ou trivalente, no sendo comuns valores elevados de contaminao natural, geralmente sendo resultantes de atividades industriais e esgotos domsticos, como verificado no sedimento e biota de alguns manguezais do sudeste do Brasil (CORRAJUNIOR et al., 2005; GONALVES et al., 2007; BOUROTTE et al., 2009). No entanto, de modo geral, so poucos os casos de grandes acidentes ambientais causados por este metal (SCHIRMER et al., 2009).

1.4.5 MANGANS (Mn) O mangans um dos elementos mais abundantes da crosta terrestre (p. ex., em solos, guas, rochas e materiais biolgicos), sendo essencial aos animais e plantas. A principal fonte deste qumico para o homem so os alimentos, se concentrando em tecidos ricos em mitocndrias, sendo primordial formao do tecido conjuntivo/sseo, metabolismo de carboidratos/lipdeos, desenvolvimento embrionrio do ouvido interno, entre outros (WHO, 1981). NASCIMENTO (2007) menciona que 90% da produo de Mn so direcionados produo do ao, que a principal fonte de contaminao ambiental. No entanto, a contaminao tambm pode ocorrer pela minerao ou produo/uso de fertilizantes/fungicidas, pois o Mn no ocorre como metal livre no ambiente, mas associado a outros qumicos (p. ex., xido de sulfeto, carboidratos, silicatos ou combinado a minerais como o ferro) (WHO, 1981). A atmosfera apresenta reduzidos nveis naturais de Mn, enquanto na gua ele se encontra na forma solvel e suspensa (derivado de solos e rochas) e no mar ocorre como dixido de mangans (MnO2), elevando sua mobilizao em pH mais cidos (NASCIMENTO, 2007). No solo o acumulo de Mn diminui da superfcie em relao ao subsolo, sendo absorvido pelas plantas na forma bivalente e eliminado pelo decaimento das folhas, quando novamente incorporado ao solo. A disponibilidade de Mn tambm est relacionada maior
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atividade microbiana no solo, promovida por reduo do pH e/ou aerao do solo, que favorece a formao de Mn2+ e aumenta sua solubilidade e disponibilidade s plantas (WHO, 1981).

1.4.6 MERCRIO (Hg) O mercrio encontrado naturalmente no ambiente por atividade vulcnica ou volatilizao de concentraes presentes no sedimento, oceanos e rios (CNARIO, 2000). A contaminao dos ambientes por atividades antrpicas tem ocorrido pelo uso deste metal na extrao do ouro, em funo de seu descarte inapropriado, bem como por atividades industriais, lanamento de esgoto e queima de combustveis fsseis (SIQUEIRA et al., 2005; LACERDA & MALM, 2008). Na Regio Metropolitana da Baixada Santista (RMBS) existem duas principais fontes de Hg, ambas antropognicas. Assim, o mercrio na Baa de Santos pode ocorrer por liberao de esgoto via emissrio submarino (SIQUEIRA et al., 2005) ou ser oriundo de efluentes industriais despejados principalmente no Rio Cubato, que recebe quase todos os efluentes industriais do municpio de mesmo nome, sendo, portanto, a principal fonte de entrada de mercrio neste esturio (LUIZ-SILVA et al., 2002). Segundo relatrio da CETESB (1989), at 1977 a Carbocloro S/A despejava no Rio Cubato o mercrio, um dos resduos da fabricao de cloro-soda, sem qualquer tratamento. Outras fontes deste metal a siderrgica COSIPA, a Dow Qumica e os terminais de carga do Porto de Santos (CETESB, 2001). Outra forma de contaminao da gua por Hg a lixiviao de depsitos de rejeitos slidos urbanos, como o caso do Lixo da Alemoa, que ocorria margem superior do Esturio de Santos, que pode ser fonte poluente de mercrio nesse esturio (SIQUEIRA et al., 2005). Ao contrrio de outros metais, grande parte do mercrio encontrada no meio aquoso, com apenas uma frao reduzida ocorrendo no sedimento. Quando na gua o mercrio encontra-se em sua forma catinica bivalente (Hg2+), podendo se ligar a matria orgnica e acumular no sedimento, reao
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favorecida em valores de pH bsicos (LAVRADO, 2003; MARINS et al., 2004; SIQUEIRA et al., 2005 ). A forma Hg0 voltil e bastante estvel temperatura ambiente, podendo ser transportados pela atmosfera para reas distantes daquela de origem (LAVRADO, 2003; LACERDA & MALM, 2008). O metilmercrio (CH3Hg+) a forma mais txica do mercrio, possuindo propriedade cancergena e teratognica (WHO, 1989), por possuir solubilidade lipdica e atravessar as membranas celulares, inibindo, assim, a sntese proteica. Os animais tem acesso a essa forma por metilao do Hg2+ presente na gua, sendo ento absorvido (LAVRADO, 2003; LACERDA & MALM, 2008) podendo sofrer biomagnificao no nvel trfico mais elevado (LACERDA & MALM, 2008). A metilao do mercrio ocorre principalmente em condies anxicas (ou subxicas), por intermdio de intensa atividade microbiana (LAVRADO, 2003; LACERDA & MALM, 2008). De acordo com LACERDA & MALM (2008), o mercrio particulado tende a sedimentar, diferentemente de sua forma dissolvida, que permanece mais biodisponvel na coluna dgua, em especial na presena de elevados teores de matria orgnica, quando so mais prejudiciais aos organismos. Entre 1953 e 1960 houve uma grande contaminao por mercrio no Japo, causando a conhecida doena de Minamata, o que despertou preocupao com o descarte desse metal ao meio ambiente, bem como sua bioacumulao e biomagnificao nas redes trficas (LAVRADO, 2003). Prova disso o retardo fsico-motor em seres humanos pelo consumo de peixe contaminado por este metal (DOREA et al., 2010).

1.5 Ucides cordatus Ucides cordatus (Linnaeus, 1763), conhecido popularmente como caranguejo-u, um macrocrustceo endmico de manguezais, realizando todo o seu ciclo de vida neste ambiente. extremamente apreciado como alimento humano, possuindo valor comercial crescente, o que se deve ao seu porte avantajado e grande abundncia (OLIVEIRA, 2006).

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BRANCO (1993) observou uma maior atividade do caranguejo-u em temperaturas superiores a 15C e mortalidades elevadas a partir de 10C, restringindo sua distribuio para regies de maior temperatura. Alm disso, este autor evidenciou o comportamento territorial desta espcie (apenas um exemplar/galeria) e uma maior atividade alimentar nas mars vazantes, quando procura por folhas, frutos e sementes das rvores de manguezal disponveis sobre o sedimento (serrapilheira). Segundo CHRISTOFOLETTI (2005), as folhas e propgulos constituem os principais itens da dieta natural dessa espcie, tendo ressaltado que a quantidade disponvel sobre o sedimento, bem como a diferena nutricional das folhas das principais espcies arbreas de manguezal (R. mangle, A. schaueriana e L. racemosa), contribuem para seu crescimento e engorda. Este mesmo autor verificou que existe uma grande interao entre os estgios de maturao foliar e o quantitativo de macro e micronutrientes, o que objeto de seleo pelo caranguejo ao forragear. Alm disso, verificou que as quantidades de N, P e K so maiores nas folhas jovens (brotos) do que nas senescentes, bem como que o valor nutricional das folhas segue a seguinte ordem hierrquica: A. schaueriana > R. mangle > L. racemosa. As folhas de R. mangle apresentaram aumento de Ca com a maturao foliar, ocorrendo o mesmo para A. schaueriana em relao ao Mg (CHRISTOFOLETTI, 2005), que so nutrientes indispensveis ao enrijecimento do exoesqueleto logo aps a muda de U. cordatus, especialmente nos manguezais onde so escassos. Trabalhos realizados por este autor em campo no mostraram preferncia alimentar do caranguejo-u pelos diferentes estgios de maturao foliar, embora rejeite as senescentes em laboratrio por seus elevados teores de polifenis (tanino). De acordo com as estimativas de PINHEIRO et al. (2005), o tamanho comercial de U. cordatus (80mm de largura cefalotorcica) atingido somente aps cerca de 10 anos de idade, o que se deve ao pobre contedo nutricional das folhas senescentes, seu principal item alimentar. Segundo estes autores, por se tratar de uma espcie de crescimento lento e elevada longevidade, favorece estimativas confiveis em anlises de acmulo de metais, sendo, portanto, a mais indicada em biomonitoramentos de manguezais e esturios.
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O caranguejo-u possui ntima relao com bosques de R. mangle, onde so registrados indivduos de maior porte, mas em menor densidade, quando comparados queles de bosques com predomnio de L. racemosa de menor inundao, onde a densidade extremamente elevada, mas composta por animais de menor porte (PINHEIRO & HATTORI, 2006). Segundo o Cdigo Florestal Brasileiro (Lei n 4.771/1965), os manguezais so considerados reas de Preservao Permanente (APPs), com importncia ecolgica patente sobre o ciclo de vida de vrias espcies animais. O caranguejo-u figura entre estas espcies, sendo explorada comercialmente em vrias regies do Brasil, especialmente no norte e nordeste, onde j se observa a reduo de seus estoques e do tamanho capturado (ARAJO & CALADO, 2008; SILVA, 2008). Esta espcie consta do Anexo II da Instruo Normativa n 5, de 21 de maio de 2004 (BRASIL, 2004), juntamente com o caranguejo guaiam (Cardisoma guanhumi), o siri-azul (Callinectes sapidus) e outras espcies de invertebrados e peixes sobreexplotados ou ameaados de sobre-explotao. Em funo disso, foram realizadas vrias reunies pelo MMA, representado pelo IBAMA e especialistas convidados, com a finalidade de elaborao de uma proposta nacional de manejo dessas trs espcies, com a definio de aspectos biolgicopesqueiros, ecolgicos, econmicos e legais (DIAS-NETO, 2011; PINHEIRO & RODRIGUES, no prelo), com vistas sustentabilidade de seus estoques pesqueiros.

1.6 - UTILIZAO DE BIOINDICADORES A concentrao de metais pode ter origem natural, em decorrncia de sua presena no sedimento, sempre em reduzidas concentraes. No entanto, as atividades antrpicas tm promovido aumento dessas concentraes, que podem alcanar nveis txicos de contaminao, muitas vezes letais aos seus organismos. Muitos metais so essenciais vida, ocorrendo na natureza em concentraes que asseguram a manuteno/sobrevivncia das espcies
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residentes. Outros, no entanto, no possuem qualquer funo conhecida ao ciclo biolgico dos organismos, sendo txicos quando extrapolam as concentraes normais encontradas (TAVARES & CARVALHO, 1992). De acordo com estes autores, os metais podem reagir com ligantes difusores, macromolculas e ligantes das membranas celulares, propiciando sua bioacumulao, biomagnificao na teia alimentar, distrbios nos processos metablicos e permanncia no ambiente. A bioacumulao e biomagnificao so responsveis por transformar as concentraes metlicas normais em txicas (TAVARES & CARVALHO, op. cit.), promovendo alteraes na comunidade bentnica e reduo na densidade total, riqueza e diversidade biolgica (ABESSA, 2002). A contaminao em ambientes aquticos pode ser avaliada pelo uso de animais bioindicadores, pois muitas vezes a simples anlise de parmetros fsico-qumicos no suficiente para descrever a qualidade dos corpos hdricos (BAPTISTA, 2008). Segundo RAINBOW (1995), para a melhor avaliao da contaminao por metais os organismos bioindicadores devem absorver os contaminantes incorporada metlicos na forma Neste dissolvida, sentido, dissolvida/suspensa segundo CALLISTO e & aos sedimentos.

GONALVES (2002), os macroinvertebrados bentnicos tm sido utilizados com sucesso como bioindicadores sensveis poluio e outras mudanas ambientais, pois figuram na manuteno dos processos relacionados matria orgnica, tm o ciclo de vida mais longo, so abundantes e de amostragem facilitada. A poluio, seja de origem domstica, industrial ou naval, causa danos sade da populao, aos seres vivos e ao ecossistema como um todo, trazendo prejuzos econmicos de vrias magnitudes (JORGE et al., 2002). Assim, a anlise conjunta dos elementos estruturais de um manguezal possibilita conhecer seu estado de conservao, sendo cada vez mais usual a realizao de estudos que relacionam os efeitos peculiares ao manguezal e a toxicidade de seus organismos bentnicos (PERINA, 2006). O caranguejo Ucides cordatus , portanto, um animal adequado para avaliar a contaminao por metais em ecossistemas de manguezal (JESUS et
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al., 2003; SILVA, 2010). Seu uso como bom bioindicador confirmado por sua baixa mobilidade, que repercute com confiabilidade os nveis de contaminao que a rea em estudo est sujeita. Esta espcie possui capacidade de absoro de metais por diferentes vias, seja por dissoluo na gua, absoro pelo sedimento ou ingesto das folhas como fonte de alimento (SILVA, 2010).

1.7 - MICRONCLEO O estudo de clulas micronucleadas amplamente utilizado na avaliao do impacto genotxico causado por substncias xenobiticas ao organismo (SCARPATO et al., 1990; FOSSI et al., 2000; TOLEDO, 2007; NUDI et al., 2010). Quando submetido concentraes significativas de poluentes, os organismos podem gerar microncleos por excluso de cromossomos inteiros (aneuploidia) ou fragmentos de cromatina (clastogenicidade) durante a diviso celular, resultando em estruturas citoplasmticas com cromatina rodeadas por membrana, sem a existncia de qualquer ligao ao ncleo celular (STOPPER & MLLER, 1997). A avaliao de clulas micronucleadas uma tcnica simples, rpida e de fcil execuo, podendo ser empregada na avaliao do efeito genotxico de poluentes, como realizada com o caranguejo-u (TOLEDO, 2007; NUDI et al., 2010). O microncleo formado durante a diviso celular, independentemente de quando ocorreu o dano ao DNA (STOPPER & MLLER, 1997). Os metais so qumicos que podem gerar microncleos, que podem se tornar genotxicos e carcinognicos (YADAV & TRIVEDI, 2009), principalmente pela incluso de um gene supressor de tumores no microncleo e sua posterior perda como clula transformada. No entanto, caso ocorra morte da clula micronucleada, o microncleo seja reintegrado ao ncleo ou se estas estruturas nucleares estejam acessveis para transcrio, o microncleo no desempenhar um papel carcinognico (STOPPER & MLLER, 1997). Alm disso, muitas vezes o microncleo pode desempenhar importante papel na eliminao de danos genticos (STOPPER & MLLER, 1997).
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Alguns animais podem apresentar elevada frequncia de clulas micronucleadas, o que pode ser resultante da contaminao pontual ou reao individual de um organismo (NUDI et al., 2010). Por outro lado, a exposio prolongada de um animal em ambientes poludos pode promover a reduo dessa frequncia, que mesmo assim ser superior quelas oriundas de reas no contaminadas (SCARPATO et al., 1990). TOLEDO (2007) utilizou o teste de microncleo para avaliar o efeito genotxico em Ucides cordatus em reas de manguezal com diferente impacto antrpico, mostrando a eficcia dessa metodologia na quantificao do dano gentico causado por tais impactos. Avaliaes do estado de conservao de reas de manguezal so ainda incipientes na literatura, o que seria importante para a melhoria de polticas pblicas e mitigao/supresso de possveis fontes poluentes e da contaminao ambiental delas resultantes.

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2 OBJETIVOS O presente estudo (Bolsa IC FAPESP, Proc. # 2010/05129-3) parte integrante do Projeto U III (Auxlio Pesquisa FAPESP, Proc. # 2009/14725-1), este ltimo com pretenso de avaliar a biologia da conservao do caranguejo-u (Ucides cordatus) em 18 subreas de manguezal, compreendendo seis municpios do Estado de So Paulo. Neste sentido, o presente estudo visa avaliar: (1) a contaminao por seis metais (Cu, Cd, Cr, Hg, Mn e Pb) em manguezais de dois municpios do Estado de So Paulo (Cubato e Bertioga); (2) verificar se essa possvel contaminao esta sendo incorporada biota local, com a flora representada pelo mangue-vermelho (Rhizophora mangle Linnaeus) e a fauna pelo caranguejo-u [Ucides cordatus (Linnaeus, 1763)]; (3) analisar a possvel existncia de riscos sade pblica, considerando o contato do homem com as guas e sedimento destes manguezais, bem como uso da carne de U. cordatus como item alimentar humano nessa regio; e (4) quantificar possveis danos genticos em exemplares do caranguejo-u nas reas de manguezal em estudo, com base na tcnica do microncleo.

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3 MATERIAIS & MTODOS

3.1 REA DE ESTUDO As coletas foram realizadas nos municpios de Cubato e Bertioga, pertencentes Regio Metropolitana da Baixada Santista (RMBS), no Litoral Centro-Sul do Estado de So Paulo, Brasil. Em cada municpio (rea) foram selecionadas trs subreas (Tabela 1 e Figura 1), que serviram como rplicas de dados, possibilitando assim maior confiabilidade e representatividade aos dados obtidos.
Tabela 1 Coordenadas geogrficas das subreas de manguezal nos dois municpios (reas) no Estado de So Paulo, onde foram obtidas as amostras para anlise.

rea Cubato

Bertioga

Subrea CUB 1 CUB 2 CUB 3 BET 1 BET 2 BET 3

Coordenadas 2353'2,40"S - 4621'55,60"W 2354'2,40"S - 4622'56,90"W 2355'7,15"S - 4623'6,16"W 2351'19,97"S - 46 9'9,96"W 2350'30,10"S - 46 9'1,03"W 2349'2,48"S - 46 8'37,77"W

Figura 1 - Localizao das subreas de amostragem nos manguezais dos municpios de Cubato e Bertioga, no Estado de So Paulo, Brasil (modificado de GoogleEarth).

As subreas selecionadas apresentavam bosques de manguezal com predomnio arbreo de Rhizophora mangle (> 52%). A coleta das amostras foi realizada durante abril/2011, sendo que somente a coleta das amostras de

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tecidos de U. cordatus de Cubato ocorreram em agosto/2010, conforme descrito nos tpicos subsequentes. Os municpios de Cubato e Bertioga detm elevado grau de degradao ambiental, particularmente Cubato, devido ao seu antigo histrico de ocupao, proximidade do Complexo Porturio de Santos e por possuir expressivo Polo Industrial. Apesar de sua proximidade de Cubato, o Municpio de Bertioga ainda guarda certo grau de preservao, embora j existam indcios de algumas fontes poluentes locais ou mesmo decorrentes desse municpio vizinho.

3.2 - COLETA DAS AMOSTRAS DE CARANGUEJO Em mar baixa foram coletados exemplares machos de Ucides cordatus em estgio de intermuda (PINHEIRO & FISCARELLI, 2001), utilizando duas tcnicas distintas: 1) braceamento, que consiste na captura direta dos animais pelo catador com a introduo do brao diretamente nas galerias; ou 2) redinha, que uma armadilha confeccionada artesanalmente pelos catadores de caranguejo, utilizando fios de sacos de rfia (nylon), que so atados entre dois ramos retirados das rvores no local. Maiores informaes sobre a captura desta espcie podem ser obtidas em PINHEIRO & FISCARELLI (op. cit.). Em cada rea foram capturados 10 exemplares de U. cordatus, com tamanho (LC, largura cefalotorcica) variando entre 50 e 90 mm, que foram devidamente individualizados em sacos plsticos e depositados em caixa trmica com gelo picado, para transporte at o Laboratrio de Biologia de Crustceos (LBC) da UNESP/CLP. Em laboratrio os espcimes foram cuidadosamente lavados/escovados para a retirada da lama e dispostos sobre uma bancada para a biometria e demais procedimentos. O peso seco de cada animal foi registrado em balana digital (0,01g), cada um dos quais foi dissecado com o uso de tesoura e pina para a retirada de amostras de duas estruturas corpreas (musculatura do quelpodo e hepatopncreas). As amostras de tecidos foram colocadas em frascos plsticos do tipo Eppendorf (2mL), previamente descontaminados (soluo de HNO3 10%, soluo de Extran cido 10% e enxge final com gua deionizada), que foram
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congelados e transportados em caixas trmicas com gelo picado at o Centro de Assistncia Toxicolgica (CEATOX), do IB/UNESP Botucatu, para qualiquantificao dos seis metais pesados (Cd, Cr, Cu, Mn, Pb e Hg). Cada amostra foi submetida ao mtodo de mineralizao por via mida com cido ntrico (HNO3 65%), segundo BASSET et al. (1981), com uso do forno de micro-ondas Provecto Analtica (DGT-100 Plus) e interpretao por programa especfico para solo/sedimento e outros materiais. As anlises foram otimizadas pelo uso de lmpadas de ctodo oco (LCO), especficas para cada elemento metlico, com leitura por espectrofotometria de absoro atmica (ATHANASOPOULOS, 1993). A concentrao de Cd, Cr, Cu, Mn e Pb nos tecidos foi expressa em g/g de peso seco, enquanto para Hg a unidade de medida foi em ng/g de peso seco. A coleta dos exemplares de Ucides cordatus para Bertioga ocorreu apenas no ms de abril/2011, enquanto os dados para Cubato foram obtidos da monografia de SILVA (2010), coletadas em agosto/2010, seguindo os mesmos procedimentos descritos anteriormente.

3.3 - COLETA DAS AMOSTRAS DE FOLHAS As amostras de folhas de R. mangle (verdes do terceiro ramo e senescentes pr-abciso) compreenderam cerca de 20 folhas para cada estgio foliar, sendo obtidas com o auxlio de tesouras de poda e mantidas em sacos plsticos devidamente etiquetados at chegarem ao laboratrio. Em laboratrio, as folhas de cada estgio foliar foram devidamente lavadas, conforme segue: 1) gua corrente; 2) gua com detergente neutro a 5%; 3) gua corrente (segunda lavagem); 4) soluo de gua destilada saturada com HCl; e 5) gua destilada em abundncia. Posteriormente, as folhas foram secas com panos limpos, mantidas sob refrigerao (no mximo por 48h), desidratadas em estufa de ventilao forada (60C por 72h) e submetidas moagem em um moinho de facas. O p resultante de cada estgio foliar ( 20g) foi disposto em frascos plsticos previamente descontaminados e devidamente etiquetados, at serem transportados ao
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CEATOX (IB/UNESP Botucatu). Neste laboratrio as amostras foram submetidas aos mesmos procedimentos j citados anteriormente para as estruturas corpreas de U. cordatus, com a concentrao de metais expressa nas mesmas unidades de medida.

3.4 - COLETA DAS AMOSTRAS DE GUA E SEDIMENTO Em cada subrea foram coletadas amostras de gua e sedimento (n=3/cada), para a quali-quantificao dos seis metais. Em cada subrea as amostras de gua foram coletadas do interior de galerias de U. cordatus, estabelecidas ao acaso, sendo obtidas por suco com mangueira de silicone e transferidas para frascos plsticos descontaminados (250mL). O sedimento, por sua vez, foi amostrado em trs pontos/subrea (15, 30 e 45m da margem), manualmente (luvas nitrlicas) ou com uso de esptula plstica descartvel, e depositados em frascos plsticos (500mL), tambm previamente descontaminados. As amostras foram identificadas por etiquetas tanto na face externa quanto interna dos frascos, sendo transportadas at o laboratrio em caixas trmicas com gelo picado. As amostras de sedimento passaram por peneiras plsticas (malhas de 0,5 mm), para a retirada das razes ou outros materiais que poderiam trazer alterao na concentrao de metais no sedimento. As amostras foram mantidas em refrigerador at serem transportadas at serem transportados ao CEATOX (IB/UNESP Botucatu), onde foram processadas conforme os procedimentos j citados anteriormente para outras amostras.

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3.5 - MICRONCLEO A quantificao das clulas micronucleadas/1.000 analisadas em U. cordatus, para os manguezais de Cubato (SP) foi oriunda de anlise dos dados brutos obtidos por TOLEDO (2007), os quais foram confrontados aos de Bertioga (SP), conforme mencionado a seguir. Aps a coleta em Bertioga (SP), os exemplares de U. cordatus foram transportados at o laboratrio em caixas plsticas com gua do local de captura ( 3 cm). Em laboratrio os animais foram transferidos para aqurios e cada um deles submetidos a puno de hemolinfa (1mL), na junta de articulao localizada na face interna entre o mero e carpo do quelpodo maior, com auxlio de uma seringa de 1 mL munida de agulha 21 gauge (0,8 x 40mm), sem uso de soluo anticoagulante. A hemolinfa de cada espcime foi rapidamente gotejada em duas lminas de miscroscopia, com imediata realizao de esfregao com outra lmina, resultando em uma camada fina e homognea de clulas (JUNQUEIRA & JUNQUEIRA, 1983). Cada lmina foi imediatamente transferida para uma caixa mida/escura e ali mantidas por 20 minutos, visando o assentamento celular. Em seguida, as lminas foram submetidas fixadas com Soluo Carnoy (Metanol e cido Actico na proporo 3:1) e secas ao ar, com cada um destes procedimentos durando 20 minutos. As lminas foram coradas em Soluo Giemsa 2%, tambm por 20 minutos, com o excesso retirado por lavagem das lminas em gua destilada em pisseta. Aps secagem ao ar, cada lmina recebeu lamnula com Entellan, para posterior observao do esfregao em microscopia ptica. O nmero de clulas micronucleadas (CMN)/1.000 analisadas foi quantificado para cada animal sob um aumento de 1.000x em microscpio tico comum acoplado a um sistema de anlise de imagens por computador (AxioVision v. 4.8 Zeiss). As clulas micronucleadas foram identificadas pela confirmao da estrutura micronuclear, que segundo COUNTRYMAN & HEDDLE (1976) possuem tamanho <1/3 do ncleo celular, separao completa dessa estrutura, colorao similar (ou mais clara) que o ncleo, alm de descartar da contabilizao as clulas com mais de trs microncleos. Segundo esta tcnica, considera-se uma resposta significativa do contaminante
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quando a frequncia de clulas micronucleadas (CMN) no organismo avaliado >4 CMN/1.000 analisadas (SCARPATO et al., 1990; FOSSI et al., 2000; NUDI et al., 2010).

3.6 - ANLISE DOS DADOS Os dados foram plotados em planilhas eletrnicas e submetidos a testes estatsticos especficos, disponveis em SOKAL & ROLF (1995) e ZAR (1999), calculados com o auxlio do pacote R v. 2.14.0 (IHAKA & GENTLEMAN, 1996). Os resultados foram apresentados sob a forma de tabelas e/ou grficos de caixa (boxplots), anteriormente avaliados quanto normalidade (teste W Shapiro-Wilk). Para os boxplots a linha no interior da caixa representou a mediana, os limites da caixa representam os quartis (inferior, 25%; e superior, 75%), as linhas que partem da caixa indicam a amplitude de variao dos dados obtidos e os pontos (crculos) que extrapolam tais limites representam outliers (THE R DEVELOPMENT CORE TEAM, 2002). No caso de negativa normalidade dos dados, houve a necessidade de represent-los por medianas, com a aplicao do teste no paramtrico de Kolmogorov-Smirnov (teste D), com o uso do Programa R v. 2.14.0 (IHAKA E GENTLEMAN, 1996). Assim, em cada caso, os dados de concentraes de cada metal por compartimento abitico/bitico foi confrontado entre as reas de manguezal (Cubato e Bertioga), o mesmo sendo efetuado para a frequncia de clulas micronucleadas. Para cada caso o nvel de significncia estatstica foi estabelecido em 5%.

3.7 - COMPARAO COM OS VALORES DE REFERNCIA Como a legislao ambiental brasileira no apresenta critrios de qualidade para os sedimentos (CETESB, 2001), so empregados nas avaliaes dois valores-guia estabelecidos pela Agncia Ambiental Canadense (ENVIRONMENT CANADA, 1999), a saber: TEL (Threshold Effect Level), que corresponde concentrao abaixo da qual no so esperados efeitos
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adversos aos organismos aquticos; e PEL (Probable Effect Level), que corresponde concentrao acima da qual so esperados provveis efeitos biolgicos adversos. Os valores entre TEL e PEL podem gerar possveis efeitos adversos, sendo importante destacar que a Agncia Ambiental Canadense no possui valores-guia para o mangans (ENVIRONMENT CANADA, 1999). Para a qualidade da gua os valores-guia so citados na Resoluo CONAMA (Conselho Nacional do Meio Ambiente) n 357/05. De acordo com essa legislao, as guas do Municpio de Bertioga so pertencentes Classe 2, por seu uso em atividades pesqueiras, enquanto as guas do Municpio de Cubato so de Classe 3, devido a serem usadas para a navegao e harmonia paisagstica. importante mencionar que tal resoluo no dispe sobre os valores-guia para o mangans, nem tampouco menciona valores-guia para a gua salobra da Classe 3. Desde meados da dcada de 60, o Brasil vem regulamentado a concentrao mxima para metais em alimentos, que so citados no Decreto n 55.871, publicado em 27/03/1965. Esses limites foram reafirmados para a maioria dos metais atravs de tratados internacionais (p. ex., Mercosul/GMC 102-94) e rgos nacionais (p. ex., Portaria ANVISA n 685, publicada em 27/8/1998). Nestas legislaes a concentrao de metais expressa em g/g (= ppm = mg/Kg), no existindo legislao brasileira disponvel para o mangans. A Tabela 2 apresenta os valores-guia para o sedimento

(ENVIRONMENT CANADA, 1999) e gua salobra - Classes 2 e 3 (CONAMA n 357/05), bem como as concentraes mximas de metais permissveis para alimentos de consumo humano (ANVISA n 685/98). As concentraes se encontram em g/g (= ppm = mg/Kg = mg/L).

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Tabela 2 - Valores de referncia (g/g) para os metais no sedimento (Environment Canada, 1999), mximos permissveis (mg/L) na gua (Resoluo CONAMA n 357/05) e em alimentos (g/g) para consumo humano (Portaria ANVISA n 685/98).
Metal Cobre Chumbo Cdmio Mangans Cromo Mercrio
a

Sedimento TEL PEL 18,7 108,0 30,2 112,0 0,7 4,2 * * 52,3 160,0 130,0 700,0

gua Salobra Classe 2 Classe 3 0,0078 * 0,21 * 0,04 * * * 1,1 * 1,8 *

ANVISA 30,0 2,0 1,0 * 0,1 0,5

* No existem valores estabelecidos para TEL e PEL ; a Concentraes no sedimento em ng/g, e na gua salobra em g/L.

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4 - RESULTADOS
4.1 - COBRE

O cobre apresentou diferenas significativas de concentrao entre as reas de manguezal, sendo mais elevada em Cubato para o sedimento e folhas verdes, enquanto em Bertioga houve maior concentrao apenas nos tecidos de U. cordatus, com valores extremamente elevados (Tabela 3 e Figura 2). A concentrao de Cu na gua e folhas senescentes no diferiu significativamente entre as reas de manguezal avaliadas. Na Figura 2 esto representadas as diferenas de concentrao de cobre entre as duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato), para cada um dos compartimentos abitico/biticos em que foram verificadas diferenas estatsticas significativas (p<0,05). Para a concentrao de cobre nas guas, a mdia dos valores em Bertioga foi superior ao valor estabelecido pela Resoluo CONAMA n 357/05. No entanto, essa resoluo no dispe das concentraes para a qualidade das guas de Cubato (Classe 3), impossibilitando a definio do grau de contaminao por metais em suas guas (Tabela 3). Os valores mdios das concentraes de cobre nos sedimentos de Bertioga e Cubato (Tabela 3) estiveram abaixo dos valores de TEL e PEL. Em Bertioga a carne de Ucides cordatus apresentou concentraes de cobre 14 vezes superior ao mximo estabelecido pela ANVISA para o consumo humano, enquanto em Cubato os valores obtidos para este metal foram permissveis (Tabela 3).

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Tabela 3 Concentraes de cobre (g/g) para cada compartimento abitico/biticos nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP), compreendendo os valores mnimos, mximos, ) e de erro padro da mdia (EP), acompanhado do teste estatstico das medianas mdios ( (D, Kolmogorov-Smirnov; p, nvel de significncia estatstica; negrito, significncia estatstica).

COBRE
Compartimento Abitico/Bitico gua Sedimento Folha Verde (R. mangle ) Folha Senescente (R. mangle) Hepatopncreas (U. cordatus ) Musculatura (U. cordatus ) rea Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Mn. <0,02 <0,02 1,980 3,879 0,987 1,472 0,567 0,856 275,900 4,400 252,200 3,850 Mx. 0,046 0,024 4,137 7,674 2,579 3,177 2,526 1,210 1314,000 8,740 783,900 6,380 x EP 0,012 0,005 0,013 0,003 3,028 0,243 5,763 0,437 1,447 0,216 2,125 0,225 1,103 0,192 0,991 0,046 817,1 125,082 6,415 0,519 434,2 53,483 5,272 0,255 Mediana 0,012 0,011 3,203 5,613 1,031 1,868 0,974 0,923 790,500 6,425 377,500 5,295 D 0,222 0,889 0,667 0,333 1,000 1,000 p 0,979 0,001 0,034 0,730 0,000 0,011

Figura 2 - Grfico de caixas referentes quantificao do cobre (g/g) em cada compartimento abitico/biticos (A, folha verde; B, sedimento; C, musculatura de U. cordatus; e D, hepatopncreas de U. cordatus), nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP). Onde: linha horizontal em negrito (interior da caixa) = mediana; caixa = quartis a 25 e 75%; e linhas verticais a partir da caixa = amplitude de variao da concentrao. Em todos os compartimentos analisados houve diferena estatstica entre as medianas das reas em estudo (p<0,05).

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4.2 - CHUMBO Entre todos os compartimentos abitico/biticos analisados, somente os tecidos de U. cordatus apresentaram concentraes abaixo de limite de deteco do espectrofotmetro (p<0,05 g/g). Nos demais, as maiores concentraes mdias ocorreram segundo o padro hierrquico Sedimento>Folhas>gua, sendo somente verificada diferena entre as reas em relao concentrao de Pb no sedimento, que foi maior para Cubato (Tabela 4 e Figura 3). Em relao qualidade das guas quanto a concentrao de Pb, a mdia obtida para Bertioga foi inferior ao estabelecido pela Resoluo CONAMA n 357/05, enquanto para Cubato no houve possibilidade de definio do grau de contaminao das guas por Pb pela inexistncia de definio do valor de referncia para as guas de Classe 3 (Tabela 4). Para os sedimentos das duas reas de manguezal as concentraes de Pb estiveram abaixo dos valores-guia de TEL e PEL, tambm no havendo contaminao da carne de U. cordatus para este metal em Cubato e Bertioga.

Tabela 4 - Concentraes de chumbo (g/g) para cada compartimento abitico/biticos nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP), compreendendo os valores mnimos, ) e de erro padro da mdia (EP), acompanhado do teste estatstico das mximos, mdios ( medianas (D, Kolmogorov-Smirnov; p, nvel de significncia estatstica; negrito, significncia estatstica).

CHUMBO
Compartimento Abitico/Bitico gua Sedimento Folha Verde (R. mangle ) Folha Senescente (R. mangle ) Hepatopncreas (U. cordatus ) Musculatura (U. cordatus ) rea Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Mn. 0,081 0,145 3,452 6,847 1,509 1,159 1,584 1,283 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 Mx. 0,194 0,209 7,769 12,340 2,702 2,510 2,004 2,456 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 x EP 0,166 0,013 0,179 0,008 6,143 0,478 9,741 0,643 1,997 0,134 1,857 0,149 1,788 0,060 1,952 0,146 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 Mediana 0,188 0,176 6,667 9,297 2,025 1,745 1,790 2,003 0,000 0,000 0,000 0,000 D 0,333 0,889 0,222 0,444 0,000 0,000 p 0,699 0,001 0,990 0,352 1,000 1,000

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Figura 3 - Grfico de caixas referentes quantificao do chumbo (g/g) no sedimento, nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP). Onde: linha horizontal em negrito (interior da caixa) = mediana; caixa = quartis a 25 e 75%; e linhas verticais a partir da caixa = amplitude de variao da concentrao. Nos compartimentos analisados houve diferena estatstica entre as medianas das reas em estudo (p<0,05).

4.3 CDMIO A concentrao de Cd nos compartimentos abitico/biticos foi maior no sedimento, seguido pelas folhas de R. mangle, tecidos de U. cordatus e gua, esta ltima com valores abaixo do limite de deteco do equipamento (< 0,01 g/g) (Tabela 5). A concentrao de cdmio foi superior nas folhas de Cubato quando relacionadas s de Bertioga, independente do estgio avaliado, enquanto para os demais compartimentos no houve diferena na concentrao entre as reas de manguezal (Figura 4). Em Bertioga a concentrao de cdmio na gua esteve abaixo do valor estabelecido pela Resoluo CONAMA n 357/05, fato que no pde ser confirmado para Cubato, onde no existe definio nesta legislao para a qualidade as guas de Classe 3) (Tabela 5). Para as duas reas de manguezal o cdmio no sedimento esteve acima dos valores-guia de TEL e abaixo dos valores de PEL, enquanto na musculatura ele apresentou valores abaixo daqueles permitidos pela ANVISA.
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Tabela 5 - Concentraes de cdmio (g/g) para cada compartimento abitico/biticos nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP), compreendendo os valores mnimos, ) e de erro padro da mdia (EP), acompanhado do teste estatstico das mximos, mdios ( medianas (D, Kolmogorov-Smirnov; p, nvel de significncia estatstica; negrito, significncia estatstica).

CDMIO
Compartimento Abitico/Bitico gua Sedimento Folha Verde (R. mangle ) Folha Senescente (R. mangle ) Hepatopncreas (U. cordatus ) Musculatura (U. cordatus ) rea Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Mn. <0,01 <0,01 0,660 0,766 <0,01 0,145 <0,01 0,129 0,070 0,075 0,072 0,030 Mx. <0,01 <0,01 0,888 0,980 0,118 0,239 0,161 0,303 0,123 0,275 0,153 0,140 x EP <0,01 <0,01 0,777 0,026 0,881 0,027 0,085 0,012 0,215 0,010 0,117 0,016 0,231 0,017 0,101 0,006 0,150 0,022 0,105 0,007 0,089 0,009 Mediana 0,000 0,000 0,800 0,887 0,094 0,222 0,127 0,225 0,104 0,133 0,104 0,095 D 0,000 0,556 1,000 0,889 0,500 0,400 p 1,000 0,124 0,041 0,002 0,164 0,401

Figura 4 - Grfico de caixas referentes quantificao do cdmio (g/g) em cada compartimento abitico/biticos (A, folha verde; B, folha senescente), nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP). Onde: linha horizontal em negrito (interior da caixa) = mediana; caixa = quartis a 25 e 75%; e linhas verticais a partir da caixa = amplitude de variao da concentrao. Em todos os compartimentos analisados houve diferena estatstica entre as medianas das reas em estudo (p<0,05).

4.4 - MANGANS Este metal das esteve duas presente reas em todos com os compartimentos de dois

abitico/biticos

avaliadas,

exceo

compartimentos de manguezal da Bertioga (gua e musculatura de U. cordatus), onde as concentraes estiveram abaixo do limite de deteco do equipamento (< 0,02 g/g) (Tabela 6 e Figura 5). Os manguezais de Cubato apresentaram concentraes de Mn significativamente maiores que as de
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Bertioga, exceto para o sedimento, onde estas concentraes foram similares entre essas reas. Para as concentraes de mangans na gua salobra, no sedimento e carne do caranguejo, no existem valores-guia estabelecidos pelas agncias brasileiras e pela Agncia Ambiental Canadense, impossibilitando um diagnstico da contaminao dessas reas por este metal.

Tabela 6 - Concentraes de mangans (g/g) para cada compartimento abitico/biticos nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP), compreendendo os valores mnimos, ) e de erro padro da mdia (EP), acompanhado do teste estatstico das mximos, mdios ( medianas (D, Kolmogorov-Smirnov; p, nvel de significncia estatstica; negrito, significncia estatstica).

MANGANS
Compartimento Abitico/Bitico gua Sedimento Folha Verde (R. mangle ) Folha Senescente (R. mangle ) Hepatopncreas (U. cordatus ) Musculatura (U. cordatus ) rea Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Mn. < 0,02 0,002 0,099 0,242 0,831 1,251 0,836 1,746 0,915 2,740 < 0,02 0,955 Mx. < 0,02 0,004 0,995 1,383 1,374 2,483 1,444 2,448 2,578 18,320 < 0,02 7,940 x EP < 0,02 0,002 0,000 0,416 0,116 0,718 0,118 1,151 0,076 1,878 0,170 1,133 0,079 2,016 0,087 1,682 0,155 8,290 1,624 < 0,02 4,684 0,824 Mediana 0,000 0,003 0,243 0,716 1,263 2,039 1,064 1,907 1,724 7,240 0,000 4,020 D 1,000 0,444 0,667 1,000 1,000 1,000 P 0,000 0,352 0,034 0,041 0,000 0,011

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Figura 5 - Grfico de caixas referentes quantificao do mangans (g/g) em cada compartimento abitico/biticos (A, gua; B, folha verde; C, folha senescente; D, musculatura de U. cordatus; e E, hepatopncreas de U. cordatus), nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP). Onde: linha horizontal em negrito (interior da caixa) = mediana; caixa = quartis a 25 e 75%; e linhas verticais a partir da caixa = amplitude de variao da concentrao. Em todos os compartimentos analisados houve diferena estatstica entre as medianas das reas em estudo (p<0,05).

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4.5 - CROMO As concentraes de Cr estiverem abaixo do nvel de deteco do equipamento (< 0,05 g/g) nas duas reas de manguezal (Cubato e Bertioga), em trs compartimentos abitico/biticos (gua, folha verde e folha senescente). No sedimento e tecidos do caranguejo-u, as concentraes deste metal foram significativamente maiores em Cubato do que Bertioga (Tabela 7 e Figura 6). A concentrao de cromo nas guas em Bertioga esteve abaixo do valor estabelecido pela Resoluo CONAMA n 357/05, enquanto para as guas de Cubato no houve possibilidade de anlise por inexistncia de valores guia estabelecidos para este metal em guas Classe 3. Os valores mdios das concentraes de Cr no sedimento tambm estiveram abaixo dos valores-guia (TEL e PEL), para as duas reas de manguezal em anlise, o mesmo ocorrendo para a musculatura da carne, que apresentou concentraes de cromo abaixo dos valores de referncia estabelecidos pela ANVISA.

Tabela 7 - Concentraes de cromo (g/g) para cada compartimento abitico/biticos nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP), compreendendo os valores mnimos, mximos, ) e de erro padro da mdia (EP), acompanhado do teste estatstico das medianas mdios ( (D, Kolmogorov-Smirnov; p, nvel de significncia estatstica; negrito, significncia estatstica).

CROMO
Compartimento Abitico/Bitico gua Sedimento Folha Verde (R. mangle ) Folha Senescente (R. mangle ) Hepatopncreas (U. cordatus ) Musculatura (U. cordatus ) rea Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Mn. < 0,05 < 0,05 3,222 7,026 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 Mx. < 0,05 < 0,05 7,458 10,260 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 1,790 < 0,05 0,565 x EP < 0,05 < 0,05 6,138 0,440 7,995 0,399 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 0,415 0,070 < 0,05 0,227 0,173 Mediana 0,000 0,000 6,318 7,448 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,213 0,000 0,153 D 0,000 0,667 0,000 0,000 0,800 0,800 p 1,000 0,037 1,000 1,000 0,003 0,003

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Figura 6 - Grfico de caixas referentes quantificao do cromo (g/g) em cada compartimento abitico/biticos (A, sedimento; B, musculatura de U. cordatus; e C, hepatopncreas de U. cordatus), nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP). Onde: linha horizontal em negrito (interior da caixa) = mediana; caixa = quartis a 25 e 75%; e linhas verticais a partir da caixa = amplitude de variao da concentrao. Em todos os compartimentos analisados houve diferena estatstica entre as medianas das reas em estudo (p<0,05).

4.6 - MERCRIO Este metal somente esteve acumulado no sedimento (nas duas reas de manguezal) e no hepatopncreas dos caranguejos de Bertioga, enquanto nos demais compartimentos abitico/biticos as concentraes estiveram abaixo dos valores mnimos detectveis pelo equipamento (< 0,001 ng/g). No sedimento as concentraes de Hg foram extremamente elevadas, variando de 82,03 a 199,2 ng/g, tendo ocorrido similaridade estatstica entre as concentraes registradas nas duas reas em estudo. No hepatopncreas dos caranguejos de Bertioga, por outro lado, a mdia de concentrao de mercrio
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foram 4,5 vezes inferior do sedimento desta mesma rea (Tabela 8 e Figura 7). Em Bertioga a concentrao de Hg nas guas foi inferior ao estabelecido pela Resoluo CONAMA n 357/05, sendo que a de Cubato no pde ser avaliada neste sentido por inexistncia de valor-guia estabelecido para as guas Classe 3. Para Bertioga a concentrao de mercrio no sedimento esteve abaixo dos valores guia (TEL e PEL), enquanto para Cubato sua concentrao esteve acima do TEL e abaixo do PEL. As concentraes de mercrio estiveram abaixo do valor estabelecido pela ANVISA.

Tabela 8 - Concentraes de mercrio (ng/g) para cada compartimento abitico/biticos nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP), compreendendo os valores mnimos, ) e de erro padro da mdia (EP), acompanhado do teste estatstico das mximos, mdios ( medianas (D, Kolmogorov-Smirnov; p, nvel de significncia estatstica; negrito, significncia estatstica).

MERCRIO
Compartimento Abitico/Bitico gua Sedimento Folha Verde (R. mangle ) Folha Senescente (R. mangle ) Hepatopncreas (U. cordatus ) Musculatura (U. cordatus ) rea Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Bertioga Cubato Mn. < 0,001 < 0,001 82,030 124,700 < 0,001 < 0,001 < 0,001 < 0,001 6,900 < 0,001 < 0,001 < 0,001 Mx. < 0,001 < 0,001 153,200 199,200 < 0,001 < 0,001 < 0,001 < 0,001 42,800 < 0,001 < 0,001 < 0,001 x EP < 0,001 < 0,001 120,70 8,289 166,1 9,639 < 0,001 < 0,001 < 0,001 < 0,001 27,48 4,026 < 0,001 < 0,001 < 0,001 Mediana 0,000 0,000 128,100 178,000 0,000 0,000 0,000 0,000 30,450 0,000 0,000 0,000 D 0,000 0,555 0,000 0,000 1,000 0,000 p 1,000 0,126 1,000 1,000 0,000 1,000

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Figura 7 - Grfico de caixas referentes quantificao do mercrio (ng/g) no hepatopncreas de U. cordatus, nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP). Onde: linha horizontal em negrito (interior da caixa) = mediana; caixa = quartis a 25 e 75%; e linhas verticais a partir da caixa = amplitude de variao da concentrao. No compartimentos analisado houve diferena estatstica entre as medianas das reas em estudo (p<0,05).

4.7 - MICRONCLEO Os caranguejos de Cubato apresentaram hemolinfa com a frequncia de clulas micronucleadas (CMN)/1.000 analisadas cerca de 3 vezes superior aos da Bertioga, com diferena estatstica entre as medianas (Tabela 9 e Figura 8).

Tabela 9 - Frequncia de clulas micronucleadas/1.000 clulas analisadas, na hemolinfa do caranguejo U. cordatus (n=10/rea) nas duas reas de manguezal (Bertioga e Cubato, SP), compreendendo os valores mnimos, mximos, mdios (x), de desvio padro (s) e coeficiente de variao (CV), bem como o teste comparativo entre as medianas (D, Kolmogorov-Smirnov; p, nvel de significncia estatstica; negrito, significncia estatstica).

MICRONCLEO
rea Bertioga Cubato Mn. 2 7 Mx. 18 26 x CV (% ) Mediana s 5,65 4,44 78,6 4,5 15,6 5,31 34,0 14,5 D 0,9 p 0,001

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Figura 8 - Grfico de caixas referentes as Frequncia de clulas micronucleadas em 1000 clulas analisadas da hemolinfa de U. cordatus (n=10) nas duas reas de manguezal em estudo (Bertioga e Cubato, SP), representados pela mediana (linha horizontal em negrito), quartis (caixa) e amplitude de variao (linhas verticais). Foi constatada diferena significativa entre as medianas (p<0,05).

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5 DISCUSSO

5.1 - COBRE As concentraes de cobre foram maiores nas amostras de sedimento e folhas verdes de Cubato em relao Bertioga. Trata-se de um elemento metlico que ocorre naturalmente no ambiente, embora tenha sua concentrao aumentada por atividades antrpicas (GUILHERME et al., 2005). Cubato sofre h tempos pela degradao ambiental, apesar da intensificao do monitoramento da emisso de poluentes industriais pelos rgos ambientais, o que se deve ao seu elevado crescimento populacional humano aliado falta de infraestrutura/saneamento bsico, que ainda so fontes agravantes de contaminao nesse municpio paulista. Alm disso, Cubato tambm se destaca por possuir uma rea urbana/industrial superior a de Bertioga, gerando impactos que tambm se reflete na contaminao por metais, que mais intensa prxima s fontes poluentes, em particular junto ao sedimento deste municpio. O cobre um metal essencial, utilizado pela vegetao na sntese da clorofila e de outras enzimas importantes ao seu metabolismo. Assim, tem sua principal via de entrada nas razes (inclusive de R. mangle), ali apresentando seus nveis mais elevados de concentrao, similares aos do sedimento e maiores do que aqueles presentes nas folhas (SILVA et al., 1990). Na regio de Cubato as concentraes de Cu no sedimento foram superiores s de Bertioga, o que implicaria em maiores concentraes desse metal nas folhas verdes desse municpio, em funo da elevada mobilidade desse metal das razes para as folhas. No entanto, parte desse metal utilizada no metabolismo da planta, ocorrendo, portanto, em concentraes menores nas folhas do que em suas razes (MACFARLANE et al., 2007). Para as folhas senescentes no foram observadas diferenas estatsticas significativas entre as reas, o que se deve ao processo de translocao do cobre para outras regies da planta antes da absciso foliar, resultando em concentraes mais baixas (SILVA, 2010).

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Nas duas reas de manguezal as concentraes de Cu no sedimento estiveram abaixo dos valores-guia (TEL e PEL), indicando que no so esperados efeitos adversos desse metal sobre os organismos que interagem com este compartimento abitico. No entanto, a concentrao de Cu na gua esteve acima do nvel recomendado pela Resoluo CONAMA n 357/05, para Bertioga segundo a destinao do uso de suas guas, podendo trazer efeito prejudicial aos organismos. O cobre tambm elemento essencial fisiologia de U. cordatus, sendo parte integrante da hemolinfa como pigmento respiratrio (hemocianina), responsvel pelo transporte de gases neste crustceo decpodo. Apesar disso, RAINBOW (1997) menciona que concentraes excedentes so direcionadas para reas de sacrifcio (p. ex., hepatopancreas), onde ficam armazenadas temporria ou permanentemente, limitando sua ao para regies vitais. Os caranguejos de Bertioga apresentaram maiores concentraes de cobre, tanto na musculatura como no hepatopncreas, quando comparados aos de Cubato o que contrasta dos resultados obtidos (maior acumulo para Cubato, exceto para a gua e folhas senescentes que no apresentaram diferena significativa entre as reas). A entrada de metais nos caranguejos pode ocorrer pelo contato com a gua atravs de estruturas permeveis, como as brnquias, como tambm pela ingesto/absoro de alimento/sedimento contaminado (RAINBOW, 1997; AHEARN et al., 2004). Para Bertioga a concentrao de cobre na gua esteve acima do limite permitido pela Resoluo CONAMA n 357/05, embora este compartimento ambiental represente menor valor de menor magnitude em relao aos demais compartimentos de manguezal estudados. As concentraes de cobre no sedimento e folhas, por exemplo, foi muito mais representativa do que na gua, sendo significativamente maiores em Cubato, embora no repercutindo em maiores concentraes nas estruturas do caranguejo para este municpio, mas em valores entre 82 a 128 vezes maiores para Bertioga. Tal fato implica em um possvel maior efeito do cobre por absoro via branquial do que por via alimentar.

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Segundo HARRIS & SANTOS (2000) mudanas adaptativas j foram relatadas por exposio contnua de Ucides cordatus a contaminantes, com diferenas em alguns parmetros fisiolgicos em populaes oriundas de reas contaminadas em relao quelas de menor contaminao ou no contaminadas. No entanto, HEBEL (1997) afirma sobre a necessidade de registrar vrios parmetros biolgicos para que se possa concluir sobre o efeito de um contaminante sobre o organismo, bem como permitir inferncias s respostas geradas a qumicos e outros estressores. Especula-se, tambm, que os caranguejos de Cubato possam apresentar uma maior adaptao fisiolgica frente os de Bertioga, apresentando absoro e detoxificao diferencial aos metais. No entanto, tais conjecturas somente poderiam ser confirmadas com testes fisiolgicos de exemplares provenientes de cada rea, como tambm da dosagem das metalotionenas, que poderiam fornecer informao especfica para a contaminao por metais. O caranguejo-u, por ser utilizado na alimentao de seres humanos, tem em sua carne (musculatura) uma das principais fontes de protena para algumas famlias em reas litorneas (ALVES & NISHIDA, 2003; BEZERRASOUTO, 2007; COSTA-NETO & GORDIANO LIMA, 2000; JORGE et al., 2002). Os resultados obtidos evidenciam que os caranguejos provenientes de Bertioga, apresentam carne imprpria ao consumo humano, com valores 14 vezes superiores ao mximo permitido pela ANVISA. Entre os sintomas para a ingesto da carne com elevadas concentraes de cobre esto a queimao epigstrica, naseas, vmitos e diarria, alm de leses no trato gastrointestinal e induo de anemia hemoltica. O efeito crnico raramente reportado, exceto para portadores do Mal de Wilson (doena congnita que provoca acmulo de Cu no fgado, crebro e rins), resultando em anemia hemoltica, anormalidades neurolgicas e opacidade das crneas (SARGENTELLI et al., 1990).

5.2 - CHUMBO As concentraes de Pb no sedimento foram significativamente maiores em Cubato do que em Bertioga, embora tenham sido inferiores aos valores42

guia (TEL e PEL) e, portanto, no sendo esperados efeitos adversos desse metal sobre a biota. O histrico de ocupao e industrializao em Cubato interferiu de maneira mais relevante no ambiente, gerando, consequentemente, uma maior degradao e poluio. O chumbo no apresenta grande disperso ambiental, com sua concentrao tendendo a ficar prxima fonte de descarga e diminuir com a distncia dela, tanto no ambiente quanto nos animais (WHO, 1989). Tais dados corroboram as maiores concentraes desse metal no sedimento de Cubato, com valores muito reduzidos nos demais compartimentos amostrados (gua, folhas e estruturas do caranguejo), que pode implicar em sucesso na supresso das emisses deste poluente, ocorrido a partir da dcada de 80, quando foram implantados programas especficos (PINHEIRO et al., 2008). Segundo MELO et al. (2011), nos rios contaminados por Pb oriundo de minerao, as concentraes desse metal no sedimento alcanaram valores de 471 g/g, enquanto na gua os valores estiveram acima de 10 g/L, que so muito superiores aos registrados no presente estudo para Cubato e Bertioga, tambm superando os valores estabelecidos pela agncia ambiental canadense e legislao brasileira, respectivamente. O chumbo um elemento no essencial biota. Como constatado por SILVA (2010), Cubato apresentou reduzidas concentraes de chumbo, o que repercutiu em concentraes igualmente reduzidas na musculatura de U. cordatus, abaixo dos valores recomendados para consumo humano. A sensibilidade dos invertebrados contaminao por chumbo difere em funo do nvel de contaminao de uma rea, com os animais de reas contaminadas sendo mais tolerantes quando comparados aos de reas no poludas (WHO, 1989). Desta forma, mesmo com um pequeno aumento das concentraes de Pb em Cubato, estes animais apresentaram uma detoxificao mais eficaz em relao aos de Bertioga. Alm disso, existe uma associao de Pb com Ca, com este metal se acumulando preferencialmente em tecidos calcificados nos crustceos, com diminuio das concentraes na musculatura e hepatopncreas (EISLER, 2010), o que no presente estudo pode

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estar sendo indicado pelos valores abaixo do nvel de deteco nestas estruturas.

5.3 - CDMIO As concentraes de Cd foram de 4 a 7 vezes maiores no sedimento do que nos demais compartimentos abitico/biticos analisados, embora tenham sido mais elevados para Cubato apenas nas amostras de folhas de R. mangle. Trata-se de um micronutriente essencial s plantas, por ser utilizado em reduzida concentrao em alguns processos metablicos. As concentraes no sedimento estiveram acima dos valores-guia para TEL e abaixo de PEL, indicando que podem gerar possveis efeitos adversos aos animais, enquanto na gua as concentraes de Cd foram inferiores ao estabelecido pela Resoluo CONAMA n 357/05. STEPHAN (2007) j observou na regio estuarina de Cubato nveis de Cd com possibilidade de acarretar efeitos adversos ao ecossistema e risco de sade populao local. Especula-se que devido ao maior tempo de exposio a este contaminante, as plantas de manguezal estejam evidenciando tal histrico de contaminao para Cubato, com absoro deste contaminante do sedimento atravs das razes e translocao de certa quantidade s folhas. ABESSA (2002) mostrou em seus estudos que os nveis de Cd nos sedimentos de Cubato ultrapassavam os de TEL, constituindo a rea mais contaminada do esturio por fontes industriais e difusas (lixo e esgoto), se estendendo em direo ao Canal de Bertioga. Essas concentraes elevadas so preocupantes, pois o cdmio pode promover modificao fisiolgica do metabolismo de animais invertebrados (CARR et al. 1985). No entanto, o consumo da carne do caranguejo-u dessas reas no acarretar efeito sade humana, pois sua concentrao na musculatura esteve abaixo daquela estabelecida pela ANVISA.

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5.4 - MANGANS As concentraes de Mn nos compartimentos amostrados mostraram-se superiores em Cubato para todos os compartimentos abitico/biticos, exceto para o sedimento, que no diferiu significativamente entre as reas de manguezal analisadas. De modo geral, o mangans um dos elementos mais abundantes da crosta terrestre (WHO, 1981; NASCIMENTO, 2007), sendo essencial aos animais e plantas. Apesar disso, este metal tambm pode ser resultante de atividades antrpicas vindas de fontes poluentes como lixes, indstrias e refinarias (CETESB, 2002, 2003 e 2004), mais evidentes em Cubato do que Bertioga, explicando os resultados obtidos. Apesar disso, no foi possvel avaliar o nvel de contaminao de mangans no sedimento e gua das reas com base em valores-guia (PEL e TEL), pois eles no so estabelecidos pela legislao vigente. Neste sentido, foi impossvel mencionar se essa contaminao interferir na biota, em funo de sua propriedade essencial vida e abundncia expressiva na crosta terrestre, conforme j citado anteriormente.

5.5 - CROMO Na rea de manguezal de Cubato as maiores concentraes de Cr ocorreram no sedimento, seguida pelos tecidos de U. cordatus, enquanto nos demais compartimentos abitico/biticos elas no diferiram significativamente. Segundo alguns autores (CORRA-JUNIOR et al., 2005; GONALVES et al., 2007; BOUROTTE et al., 2009) o registro do cromo em manguezais do sudeste brasileiro ocorre devido, particularmente, s atividades industriais e esgoto domstico O cromo no um micronutriente vegetal e, por isso, no essencial fisiologia vegetal. Com isso, suas concentraes encontram-se abaixo do limite de deteco no tecido foliar, podendo ocorrer o inverso em tecidos perenes (FRUEHAUF, 2005). As reduzidas concentraes deste metal nos tecidos do caranguejo podem ser decorrentes dos reduzidos teores em seu alimento, que
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consiste principalmente das folhas da serrapilheira de manguezal, com o sedimento constituindo reduzido percentual de ingesto nesta espcie (CHRISTOFOLETTI, 2005). Segundo SCHIRMER et al. (2009), em reas industriais o cromo geralmente metal integrante nas emisses poluentes atmosfricas, sendo outra via de contaminao, alm do sedimento. Os resultados obtidos evidenciam que o caranguejo-u de Cubato est imprprio para o consumo humano, pois grande parte dos exemplares amostrados apresentou teores de cromo acima do limite mximo estabelecido pela ANVISA. Segundo SILVA & PEDROZO (2001), o principal efeito do consumo de Cr por humanos so complicaes hepticas e renais.

5.6 - MERCRIO Cubato apresentou valores de Hg no sedimento acima dos valores-guia de TEL e abaixo de PEL, podendo gerar possveis efeitos adversos biota. Eram esperados valores mais elevados deste metal para Cubato, em funo de seu expressivo Polo Industrial, mas esta diferena no foi confirmada significativamente para o sedimento. Os demais compartimentos apresentaram concentrao de Cr abaixo do limite de deteco (<0,001 g/g), exceto no hepatopncreas dos caranguejos capturados em Bertioga. Na Regio da Baixada Santista existem duas principais fontes de entrada de mercrio, ambas antropognicas. O mercrio entra na Baa de Santos em decorrncia do esgoto pelo emissrio submarino (SIQUEIRA et al., 2005) ou por efluentes industrias despejados principalmente no Rio Cubato, que indicado como a principal fonte de entrada desse metal nesse sistema estuarino (LUIZ-SILVA et al., 2002). Outras fontes de mercrio so a Siderrgica COSIPA, a Carbocloro S/A, a Dow Qumica e os terminais de carga do Porto de Santos (CETESB, 2001). O mercrio tambm pode chegar ao ambiente aqutico por lixiviao de depsitos de rejeitos slidos urbanos, muitos dos quais ainda dispostos de maneira pouco eficiente no que tange a segurana ao meio ambiente.

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Como j mencionado para o cobre, especula-se que existam diferenas fisiolgicas entre os exemplares de U. cordatus provenientes dos manguezais de Bertioga e Cubato, provavelmente devidos aos nveis e histricos distintos de contaminao desses dois municpios. O registro de Hg apenas no hepatopncreas dos caranguejos de Bertioga pode indicar que ali estejam absorvendo e detoxificando maiores concentraes de mercrio, vindo a se acumular no principal rgo que serve a esta funo (SILVA, 2010). As reduzidas concentraes de Hg na carne dos caranguejos de Cubato e Bertioga no so impeditivas ao seu consumo humano, quando comparado com os limites da ANVISA.

5.7 - MICRONCLEO Os manguezais de Cubato apresentaram maiores concentraes de metais (particularmente Cu, Pb e Cr), alm do conhecido histrico de outros xenobiticos prejudiciais aos organismos. No teste do microncleo quantificado o nmero de clulas micronucleadas (CMN)/1.000 analisadas, oferecendo importante resposta do organismo ao conjunto de contaminantes aos quais est sujeito, sendo considerados normais valores quando <4 CMN/1.000 (SCARPATO et al., 1990; FOSSI et al., 2000; NUDI et al., 2010). Nas duas reas de manguezal as frequncias obtidas foram superiores ao normal, sendo mais evidente para Cubato do que Bertioga, com 4 e 1,5 vezes maior que o normal, respectivamente. Com exceo do Cr para Cubato, em geral as concentraes de metais em tecidos de U. cordatus foram muito reduzidas, especulando-se que possivelmente outras substncias xenobiticas estejam gerando a elevada taxa de microncleos verificada para os manguezais dessa rea. Alm disso, importante ressaltar que os manguezais de Bertioga tambm apresentaram frequncia de microncleos acima do normal, embora bem abaixo de Cubato, onde foram registradas elevadas concentraes de Cu (musculatura e hepatopncreas) e Hg (hepatopncreas) podendo ser essa a causa do elevado

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nmero de microncleos. No entanto, a influncia de outros xenobiticos nos resultados obtidos no pode ser descartada.

5.8 - COMPARAO ENTRE AS REAS As maiores concentraes de metais ocorreram em grande parte dos compartimentos abitico/biticos de Cubato, quando comparados com Bertioga, com exceo do cobre e mercrio, que ocorreram em maiores concentraes em um ou mais tecidos do caranguejo-u. Conforme ABSESSA (2002), o Canal de Bertioga que liga os manguezais de Cubato aos de Bertioga, possui elevada contaminao por metais, grande parte dos quais se deposita no Largo do Candinho, neste mesmo canal. No entanto, especula-se que por tal acesso as concentraes de metais se reduzam de Cubato para Bertioga, seja via hdrica ou atmosfrica, em funo dos 30 km de distncia entre estas reas, j que grande parte depositada em locais de menor competncia hdrica. Era esperado que as concentraes de metais em Cubato fossem maiores, devido ao seu plo industrial, atividades porturias e fontes difusas provenientes de lixes e esgotos. J Bertioga era esperada que fosse uma rea com menor grau de contaminao, com valores dos metais no sedimento abaixo de TEL visto que a principal fonte de contaminao seria proveniente do despejo de esgoto j que a rea considerada com um grau mais elevado de preservao, mas no foi o observado, para o cdmio, foi observado valores acima de TEL e valores muito elevados de cobre nos tecidos de U. cordatus, sendo assim necessrios maiores estudos para identificar as fontes de contaminao da rea e a dinmica e estrutura de seus manguezais, que podem interferir na contaminao da rea. Alm da contaminao acima de TEL para o cdmio, para Cubato o mercrio tambm apresentou valores acima de TEL, como observado por ABESSA (2002) Cubato apresenta altos valores de mercrio no sedimento.

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Como esperado, Cubato apresentou seus manguezais com uma maior contaminao para os metais amostrados e pela contagem de clulas micronucleadas nos U. cordatus ter sido muito elevada pode-se concluir que algum contaminante, podendo ser algum dos metais ou outros tipos de contaminantes que devem existir na rea, estejam gerando danos nos caranguejos U. cordatus.

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6 CONCLUSES

A maior parte das matrizes abitico/biticas avaliadas para Cubato apresentou maiores concentraes de metais; Cubato apresentou para Cd e Hg concentraes >TEL, enquanto isso ocorreu apenas para Cd em Bertioga; Em Bertioga a concentrao de Cu nas guas apresentou valores acima do permitido pela legislao, enquanto para Cubato no foi possvel uma anlise neste sentido pela ausncia da definio de concentraes mximas permitidas para os metais em suas guas;

Os exemplares de U. cordatus de Bertioga apresentaram elevadas concentraes de Cu (carne e hepatopncreas) e Hg (hepatopncreas), bem superiores s de Cubato, possivelmente por fisiologia diferencial em resposta ao nvel de poluio, com Cubato > Bertioga;

Os contaminantes em Cubato promovero maiores danos genticos s populaes de U. cordatus nos manguezais dessa rea do que naqueles de Bertioga, embora ambas apresentem frequncias desses danos acima do normal;

A dosagem de metalotionenas dos exemplares estudados viria a esclarecer se os metais so os principais responsveis por suas alteraes fisiolgicas, bem como corroborar os dados obtidos para o teste de microncleos frente os contaminantes analisados;

O consumo da carne de U. cordatus no recomendvel nas duas reas em funo das elevadas concentraes de Cr (Cubato) e Cu (Bertioga);

Existe a necessidade de monitoramentos mais frequentes da qualidade das guas, sedimentos e da biota dos manguezais paulistas, bem como o estabelecimento de programas de despoluio e outras polticas pblicas mais efetivas recuperao desses ecossistemas costeiros em toda a Regio Metropolitana da Baixada Santista, em especial em Cubato e Bertioga.

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