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28/09/2011
SUMRIO
INTRODUO CARACTERSTICA E ARQUITETURA DOS BIOFILMES FORMAO DE BIOFILME COMUNICAO INTERCELULAR (QUORUM SENSING) BIOFILME NA INDUSTRIA DE ALIMENTOS SANITIZANTES AVALIAO DE BIOFILME CONTROLE E PREVENO DE BIOFILMES CONSIDERAES FINAIS
Introduo Por muito tempo foi considerado que as bactrias viviam de forma isolada.
No entanto, observou-se que ocorre associao, e nas ltimas dcadas tambm uma comunicao entre as bactrias.
Esse tipo de comportamento comunitrio permite a formao de uma estrutura multicelular complexa denominada BIOFILME
(FUQUA et al., 1996).
A definio exata do que seja biofilme ainda no consensual nos meios acadmicos e h vrias definies descritas na literatura
Definio :
Biofilmes microrganismos,
Biofilmes formados sobre ou dentro de aparatos mdicos constituem uma sria ameaa sade pblica.
Implante
Fonte: Xavier,2005
Introduo
Introduo
A ocorrncia de biofilmes ganha cada vez mais destaque nas discusses focadas em qualidade e segurana de alimentos.
Estas estruturas, uma vez constitudas, agem como ponto de contaminao constante, liberando clulas de microrganismos patognicos e deteriorantes, podendo comprometer, assim, a qualidade microbiolgica de matrias-primas, insumos e alimentos processados.
Trocadores de calor: aumento da resistncia do fluxo e da taxa de transferncia de calor. Membranas de filtrao: reduz o fluxo atravs da membrana, entupimento. Biocorroso de materiais, como o ao inoxidvel.
Caractersticas e arquitetura dos biofilmes As clulas aderidas so designadas por ssseis, enquanto aquelas livres e dispersas so denominadas por planctnicas. Um biofilme corresponde a uma comunidade de clulas ssseis aderidas a um substrato, embebidas em uma matriz de polmeros extracelulares, na qual existem diferenciados fentipos, metabolismo, fisiologia e transcrio gentica.
Clulas planctnicas
ssseis
Superfcie
So complexas comunidades mono ou multiespcies (indstria de alimentos), ancoradas a uma superfcie, sendo estas embebidas em uma matriz constituda, basicamente por exopolissacardeo (EPS).
Exopolissacardeos
A matriz de polmeros extracelulares (EPS) de natureza polissacardea ou proteica, expe-se exteriormente membrana externa das clulas Gram negativas e ao peptdeoglicano das Gram positivas, sintetizado pr polimerases, constituindo-se em uma estrutura complexa bem hidratada
Um dos grandes responsveis por conferir proteo aos sanitizantes so os EPS, que agem como barreira fsica impedindo que sanitizantes cheguem a seus stios de ao como, por exemplo, a membrana de gram-negativos. Em alguns casos o EPS capaz de sequestrar ctions, metais e toxinas, conferindo tambm proteo contra radiaes UV, alteraes de pH, choques osmticos e dessecao.
SANITIZANTES
ANTIBITICOS
As clulas em biofilme so de 500 at 1000 vezes mais resistentes quando comparadas s clulas planctnicas.
So percebidas muitas alteraes fenotpicas, principalmente nos aparatos de motilidade, no tamanho da clula e no metabolismo, decorrentes da restrio de nutrientes e de oxignio em algumas fases, da variao na taxa de reproduo e em toda a regulao gnica.
Biofilmes so as nicas estruturas microbianas que permitem a coexistncia de organismos aerbios e anaerbios estritos a distncias de poucas centenas de micrmetros um do outro.
So compostos por microcanais internos, teis na distribuio de nutrientes e gua, no escoamento de metablitos, alguns potencialmente patognicos ao homem, nas enzimas alginatoliases e as proteases, necessrias ao destacamento de clulas do biofilme e na distribuio de molculas sinalizadoras de quorum sensing (Hall-Stoodley et al, 2004)
Como etapas importantes para sua formao so descritas as bioadeses iniciais, passando os microrganismos de seu estilo de vida planctnico ao sssil, a formao de microcolnias, a maturao do biofilme e o destacamento de clulas, retornando ao seu estilo de vida planctnico.
Etapas que uma nova espcie bacteriana realiza, durante sua incorporao em um biofilme (Adaptado de Watnick & Kolter, J. Bacteriol., 182:26752679, 2000)
Estudo microscpico da formao de um biofilme por V. cholerae (Adaptado de Watnick & Kolter, J. Bacteriol., 182:26752679, 2000)
(Xavier, 2002)
COMUNICAO INTERCELULAR
Uma vez que o biofilme constitudo de agregados de clulas e a formao de sua estrutura tridimendisional um processo dinmico que envolve uma srie de eventos moleculares coordenados, ele representa um ambiente propcio para a comunicao clula-clula, ou quorum sensing (QS)
Motilidade
Esporulao
Produo de antibiticos
Promotor DNA
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Nas indstrias de alimentos devido diversidade da produo, das matrias primas e dos produtos, pode ocorrer a formao de biofilmes com composio heterognea e com comportamentos os mais variados.
Em biofilme composto por multi-espcies, fato mais comum na natureza, os produtos metablicos de um microrganismo podem servir para o crescimento da outra espcie e a adeso de uma espcie pode prover substncias ligantes que permitem a adeso de outras. Todavia, a competio por nutrientes e o acmulo de produtos txicos gerados podem limitar a diversidade microbiana em um biofilme.
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Formao em qualquer tipo de superfcie: ao-inoxidvel, borracha, nylon, alumnio, teflon, etc.
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A adeso bacteriana depende das propriedades fsico-qumicas do material do substrato e da superfcie da clula.
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Sanitizantes
Um biofilme microbiano presente numa superfcie com resduos oriundos do alimento impede um efetiva penetrao do sanitizante para eliminar microrganismos. O sanitizante reage inicialmente com: resduos de protenas, gordura, carboidratos e minerais. Ao final, pouca atividade do sanitizante resta para agir sobre os microrganismos no biofilme. Sabe-se que, quando o biofilme tratado corretamente com detergente antes do uso dos sanitizantes, os microrganismos geralmente so eliminados. No entanto, procedimentos de higienizao incorretos no removem nem inativam ao microrganismos aderidos
EFICINCIA DO SANITIZANTE
Depende dos microrganismos envolvidos, das condies da aderncia e desenvolvimento e caractersticas do biofilme.
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Atualmente, vrios mtodos so usados na deteco e monitoramento da carga microbiana de superfcies envolvidas na produo de alimentos.
As tcnicas de microscopia eletrnica apresentam alto poder de resoluo e comprimento de onda muito curto (0,5 A) de feixe de eltrons, permitindo observar as amostras em aumentos maiores quando comparado com a microscopia ptica comum
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Preveno
Controle/ Preveno
O melhor caminho para controlar os biofilmes baseia-se na preveno de seu desenvolvimento
A estratgia nmero um de controle a prtica de adequados procedimentos de higiene industrial, com finalidade de remover resduos e clulas de micro-organismos de superfcies, impedindo o inicio de todo o processo.
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Preveno
O tipo do material usado nos equipamentos deve ser de fcil limpeza e resistncia a corroso.
difcil erradicar um biofilme utilizando um nico tipo de tratamento ou um nico desinfetante ou detergente.
Os equipamentos devem ser desmontveis facilmente para a limpeza ou que possam ser limpos sem ter que desmonta-los
Preveno
Boas Prticas de Fabricao (BPF) Sistema de Anlises de Perigos e Pontos Crticos de Controle (APPCC) So ferramentas eficazes para garantir a produo de alimentos seguros, simplificando as aes de segurana dos alimentos, indicando operaes crticas e chaves do processo e oferecendo formas eficientes para control-las e monitor-las. Possibilitando, portanto, tambm prevenir a formao de biofilmes.
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Referncias
ANDRADE, N. J.; PINTO, C. L. O.; LIMA, J. C. Adeso e formao de biofilmes microbianos. In: ANDRADE, N. J. Higiene na Indstria de Alimentos - Avaliao e controle da adeso e formao de biofilmes bacterianos. So Paulo (SP): Varela. 410p, 2008.
COSTERTON, J.W.; LEWANDOWSKI, Z.; CALDWELL, D.E.; KORBER, D.R.; LAPPIN-SOCOTT, H.M. Microbial Biofilms. Ann. Rev. Microbiol, v. 49.p.711-745, 1995.
SHI,X.;ZHU. X. Biofilm formation and food safety in food industries. Trends in Food Science and Technology. doi:10.1016/j.tifs.2009.01.054,2009
WATNICK, P.; KOLTER, R. Minireview Biofilm, city of microbes. Journal of Bacteriology, v.182, p. 2675-2679, 2000.
XAVIER,J.B., PICIOREANU,C., ALMEIDA,J.S., VAN LOOSDRECHT, M.C.M. Monitorizao e modelao da estrutura de biofilme. Boletim de Biotecnologia, 2005.
Muito Obrigada!!!
lesper@id.uff.br
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