Espectroscopa de absorcin atmica Introduccin La espectroscopa de absorcin atmica utiliza la absorcin de la luz para medir la concentracin de tomos en fase

gaseosa. Dado que las muestras se encuentran generalmente en estado lquido solido, los tomos o iones del analito deben de vaporizarse con una llama o en un horno de grafito. Los tomos absorben la luz visible o ultravioleta y relizan transiciones a niveles electnicos de mayor energa. La concentracin del anolito se determina por la cantidad de absorcin. Aplicando la ley de LambertBeer directamente en la espectroscopa Ley de Lambert Beer Es una relacin lineal entre la absorbancia y la concentracin de las especies en una muestra y se escribe de la forma siguiente: A= a(*b*c A, es la absorbancia medida a(, es la longitud de onda que depende del coeficiente de absorcin b, es la longitud de la muestra c, es la concentracin del analito Cuando se trabaja con concentraciones molares, la ley de BeerLambert puede escribirse como sigue c siendo el coeficiente de absorcin molar dependiente de la longitud de onda . La medida de absorcin directa en los espectros de absorcin atmica es dificil por las variaciones en la atomizacin en la matriz muestra, la inuniformidad en la concentracin del analito y la longitud entre los tomos de analito (path length). Las medidas de concentracin se determinan mediante una curva de trabajo despus de la calibracin del instrumento con una concentracin patrn conocida.

Las limitaciones en la linealidad de la ley de LambertBeer est limitada a factores qumicos e instrumentales, entre estas causas se incluye: desviaciones en coeficientes de absorbancia a altas concentraciones (>0.01M) debido a interacciones electrostticas en las molculas prximas dispersin en la luz debido a partculas en la muestra. fluorescencia o fosforescencia en la muestra. cambios en ndice de refraccin a concentraciones altas cambios en el equilibrio qumico en funcin de la concentracin. radiacin no monocromtica, si bien las radiaciones pueden minimizarse utilizando una parte relativamente plana del espectro de absorcin como mximo de la banda de absorcin luz directa La mayora de los instrumentos permiten leer directamente en unidades de concentracin . Esto se realiza mediante una transformacin electrnica de la seal de absorbancia. De esta forma se convierte la lectura de absorbancia en cualquier unidad de concentracin que se desee. Donde el calibrado no es lineal, el instrumento debe de corregir la curvatura . la forma ms simple de realizar la correccines mediante analoga electrnica . Primero se miden las soluciones patrn de ms baja y ms alta concentracin que llamamos L(baja) y H(alta) y se ajusta la lectura para valores de concentracin apropiados para estas dos muestras. Finalmente se mide la solucin muestra desconocida ,X. y su concentracin determinada corregida aparece en el lector digital. Mtodos de ajuste de curvas ms sofisticadas utilizan en instrumentos que tienen microprocesador electrnicos. Con estos deben medirse, como pocos, soluciones patrn. Las lecturas de concentracin con las absorbancias correspondientes son almacenadas en el microprocesador.. Estos valores se utilizan entonces para calcular la ecuacin de la curva de calibrado. Concentracin caracterstica y lmite de deteccin Para describir la forma de trabajo en un anlisis por absorcin atmica normalmente se dan dos valores, la CONCENTRACION CARACTERISTICA Y EL LIMITE DE DETECCION. A la CONCENTRACION CARACTERISTICA, tambin se le conoce como sensibilidad, se define como la concentracin analito en solucin que cuando se atomiza en el instrumento da lugar a una absorbancia de 0,0044, es decir, una absorcin del 1%. Para un analito en particular este valor depende de la lnea de resonancia utilizada, paso ptico y eficiencia del atomizador. La concentracin caracterstica es una unidad til, ya que permite el clculo de las concentraciones de las soluciones patrn. Estas son normalmente de 20 a 200 veces la concentracin caracterstica. 2

La concentracin caracterstica es una medida de la sensibilidad del mtodo de absorcin atmica para la determinacin de un metal en particular, utilizando una lnea de resonancia en concreto. Cuanto ms alta es la pendiente de la curva de calibrado, A/C, ms sensible es la determinacin, y ms baja es la concentracin caracterstica. La segunda cantidad utilizada es el lmite de deteccin,. Como la concentracin caracterstica, varia de elemento a elemento. El lmite de deteccin se define de esta forma: es la concentracin ms baja del elemento que puede detectarse con un nivel de probabilidad del 95%. Se determina estadsticamente Instrumentacin en la absorcion atmica Fuente de luz La fuente de luz utilizada es una lmpara de ctodo hueco del elemento que est siendo medido. Los lseres se utilizan tambin en instrumentos de investigacin. Dado que los lseres tienen la intensidad suficiente para excitar a los tomos a niveles de energa superiores, permiten tanto a la Absorcin Atmica como las medidas de fluorescencia atmica en un mismo instrumento. La desventaja es que solo se puede medir un elemento a la vez., por lo que no suele utilizarse para la rutina de absorcin atmica. Cuando se aplica potencia a una lmpara de ctodo hueco, la descarga produce el efecto llamadosputtering(arrancar tomos del ctodo). Como se muestra en la figura los tomos de gas se ionizan y aceleran hacia la superficie negativa del ctodo, donde la colisin produce una salida de los tomos del analito.Los tomos de analito chocan con tomos de gas con un exceso de energa, y se excitan . Los tomos excitados emiten fotones, h dando lugar al espectro caracterstico del elemento. 1. Desalojo 2.Excitacin 3. Emisin Ar+ M* M* M0 M0 Ar+ M0 PROCESOS EN LAMPARA DE CATODO HUECO Atomizador La espectroscopa de absorcin atmica requiere que los tomos del analito en fase de gas. Los iones tomos de la muestra deben de estar disueltos y vaporizados en una fuente de alta temperatura como una llama u horno de grafito. La llama de AA puede analizar solamente disoluciones, mientras que el horno de grafito de AA puede aceptar disoluciones, lodos y muestras slidas La llama de AA utiliza un quemador tipo slot para incrementar la longitud de paso a su travs y por lo tanto para incrementar la absorbancia total. Las disoluciones de muestra se aspiran junto con el flujo de gas en una cmara de nebulizacin y mezclado para formar pequeas gotas antes de entrar a la llama. La cmara u horno de grafito tiene alguna ventaja sobre la llama. Es mucho mejor un atomizador (eficiente) que una llama y puede aceptar cantidades muy pequeas de muestra. Tambin suministra un ambiente reductor para elementos fcilmente oxidables. Las muestras se colocan directamente en un horno de grafito y el horno se calienta elctricamente en varias etapas para secar la muestra, calcina la muestra orgnica y vaporiza los tomos de analito.

Separacin de luz y deteccin Los espectrmetros utilizan monocromadores y detectores para luz UV y visible. El propsito m,s importante del mono cromador es aislar la lnea de absorcin de la luz de fondo debida a las interferencias . Los tubos de fotomultiplicador son los detectores ms comunes utilizados en la espectroscopia de AA Metodo para determinar el Cr por espectrometria de Absorcin Atmica Metodo de determinacin de Cromo de forma directa El rango de aplicacin comprende concentraciones entre 0.1 a 10 mg/l de cromo. Este rango puede extenderse a concentraciones mayores de 10 mg/l por dilucin de la muestra. El cromo disuelto se determina aspirando una porcin de la muestra filtrada sin pretratamiento. El cromo insoluble se determina disolviendo la muestra en nitricoclorhdrico. Interferencias Hierro, niquel y cobalto a una concentracin de hasta 100g/l y magnesio hasta 30 mg/l interfiere disminuyendo la absorcin del Cromo. Estas interferencias se suprimen en disoluciones conteniendo 10000 mg/l de 8hidroxiquinolina. Las muestras ajustadas a esta concentracin no muestran interferencias desde 700 mg/l de hierro y 10mg/l de niquel y cobalto, o desde 1000mg/l de magnesio. Potasio por encima de 500mg/l incrementa la absorcin del cromo. Sodios, sulfatos, y cloruros (9000 mg/l) cada uno), calcio y magnesio(4000mg/l cada uno), nitrato (2000 mg/l), y cadmio, plomo, cobre y cinc,(10 mg/l cada uno) no interfiere. Aparatos y material Espectrometro de absorcin atmica utilizado a 357,9 nm Lmpara de cromo de ctodo hueco Oxidante: *Aire (si se le ha pasado por un filtro para eliminar agua, aceite y otras sustancias extraas) *Oxido Nitroso, grado mdico es satisfactorio *Combustible : acetileno Preparacin de reactivos Solucin de cromo reserva( 1ml = 1.0 mg de Cr). Disolver 2,828 g de dicromato potsico (K2Cr2O7) en 200 ml de agua y disolver hasta 1 l Solucin de cromo standard(( 1 ml= 0.1 mg de Cr): Disolver 100 ml de la disolucin reserva y 1 ml de HNO3 (densidad 1,42) hasta 1 ml con agua. Acido clorhdrico (densidad 1,19): Acido clorhdrico concentrado (HCL). Disolucin de 8hidroxiquinolina(100g/l): Disolver 50 g de 8hidroxiquinolina en 35 ml de HCl (densidad 1,19). Calentar la mezcla suavemente para facilitar la disolucin. Transferirlo a un recipiente de 500 ml de capacidad y llevarlo hasta este volumen. Acido ntrico (densidad 1,42): Acido ntrico concentrado (HNO3) Acido ntrico (1+499): Aadir un volumen de HNO3 (densidad 1.42) a 499 volmenes de agua. 4

Estandarizacin Preparar 100 ml de cada blanco y por lo menos 4 disoluciones patrn, conteniendo 1 ml de disolucin de 8 hidroxiquinolina (100g/l)10ml de patrn, para contener el rango de concentracin de cromo esperadaen las muestras a analizar, por dilucin de la disolucin patrn de cromo con HNO3 (1 +499). Preparar los patrones cada vez que se vaya a realizar un anlisis. Para determinar el cromo total recuperable(no disuelto) aadir 0,5 ml de HNO3 (densidad 1,42) y proceder a aadir HCl como se indica ms adelante. Para el cromo disuelto poceder como se indica a continuacin. Aspirar la muestra de blanco y registrar la absorbancia a 357.9 nm. Aspirar HNO3 (1+499) entre cada muestra. Preparar la curva analtica por ploteo de la absorbancia frente a la concentracin de cada muestra. Como alternativa puede leerse directamente la concentracin si el instrumento dispone de ello. Procedimiento Medir 100 ml de una muestra acidificada bien agitada en un recipiente de 125 ml. Aadir 5 ml de HCl( densidad 1,19) a cada muestra Calentar las muestras en un bao de vapor o en un plato caliente en una zona dotada de campana de ventilacin hasta que el volumen de la muestra se haya reducido a 1520 ml, asegurandose de que la muestra no hierve. Enfriar y filtrar las muestras a travs a travs de un filtro de textura fina, lavado con cido y exento de cenizas, en un recipiente de 100 ml. Lavar el filtro dos o tres veces con agua y llevarlo al volumen. Pipetear 10,0 ml de la muestra en un recipiente de 50 ml y aadir 1,0 ml de disolucin de 8 hidroxiquinilina. Aspirar cada muestra filtrada y acidificaday determinar la absorbancia o concentracin. Aspirar HNO3 (1+499) entre cada muestra. Calculo Calcular la concentracin de cromo en cada muestra, en miligramos por litroutilizando la curva analtica preparada. Alternativamente puede leerse directamente la concentracin, si el instrumento dispone de ello. Precisin La precisin de este mtodo (St) con el rango designado por 5 laboratorios, que incluye un total de nueve operadores analizando cada muestra en tres dias diferentes, vara linealmente con la concentracin de cromo, X, en miligramos por litro, siendo: Para muestras de agua St = 0.097X+0.10 Para otras matrices de agua seleccionadas St = 0.079X+0.019 5

Donde: St = precisin total, en mg/l, y X = concentracin de Cr en mg/l La precisin en anlisis unitarios no difiere significativamente de la precisin total. Bibliografa: Curso de Entrenamiento en Absorcin Atmica, llama y Generacin de Vapor : Manual de Teora. Perkin Elmer. SCIMEDIA. Encyclopedia of Analytical Instrumentation ASTM Vol

Cumplimiento de ley de Beer Desviaciones