Laboratorio de Gentica PRCTICA N4

1. Defina Cromatina: Es el material gentico organizado de la clula eucariota compuesto de ADN, histonas y protenas no histonicas, localizadas en un compartimento especializado, el ncleo.

Eucromatina: En interfase la mayora de la cromatina del nucleo se encuentra relativamente sin condesar a esta mayora se le denomina eucromatina la cual distribuida por todo el ncleo durante este periodo del ciclo celular. Los genes contenidos en la eucromatina se transcriben estn activos (se transcriben) y el DNA se replica como preparacin para la divisin. La mayora de la eucromatina parece presentarse en formas de fibras de 30nm organizadas en lazos que contienen aproximadamente de 50-100 kb de DNA. Alrededor del 10% de la eucromatina que contiene los genes que son transcritos activamente, se encuentran en un estado menos condensado con la formacin de fibras de 10 nm lo que permite la transcripcin . La estructura de la eucromatina cambia de manera dinmica, al menos en parte dependiendo de la necesidad de transcripcin. La eurocromatina se encuentra en el interior del nucleoplasma. Heterocromatina: es una estructura cromtica que no altera su nivel de condensacin o compactacin a lo largo del ciclo celular, permaneciendo condensadas durante la interfase y permaneciendo inactiva para la transcripcin y la expresin gnica, es por ello transcripcionalmente inactiva. Al contrario de la eucromatina, alrededor del 10% de la heterocromatina en un ncleo en interfase se encuentra en un estado muy condensado que recuerda a la cromatina de las clulas que llevan a cabo la mitosis. La heterocromatina contiene secuencias de DNA altamente repetidas, como aquellas presentes en los centrmeros y telmeros. La heterocromatina se localiza principalmente en la periferia del ncleo cerca de la envoltura nuclear. Cromatina positiva: cuando la cromatina sexual o corpsculo de barr se encuentra presente ,por lo tanto se afirma que se trata de una persona con sexo femenino Cromatina negativa: cuando falta la cromatina sexual por lo tanto se afirma que se trata de una persona con sexo masculino Clava o palillo de tambor: pequeo apndice en forma de palillo de tambor que se observa en el ncleo de algunos neutrfilos femeninos que representan el cromosoma X

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Heteropicnosis: Es la visualizacin de la cromatina previamente teida de forma irregular, a manera de grumos, en el ncleo. Es la coloracin que tiene la heterocromatina con respecto a la eucromatina. La heterocromatina puede aparecer ms densamente teida que la eucromatina (heteropicnosis positiva) o menos densamente teida que la eucromatina (heteropicnosis negativa). Isopicnosis: Estado caracterizado por una densidad uniforme que se observa al comparar cromosomas diferentes o regiones distintas de un cromosoma 2. Explique la hipoteisis de Mary Lyon Mary Lyon habla de la inactivacin al azar que ocurre en uno de los heterocromosomas X en clulas somticas de hembras de mamferos(cuerpo de bar). Ocurrira en etapas tempranas del desarrollo comorespuesta a una compensacin de dosis, dado que los machos slo presentan un heterocromosoma X. Se desconoce la base molecular de la inactivacin, pero involucra a una regin del cromosoma llamada XIC(Centro Inactivacin X) en el extremo proximal del brazo p. Determin 4 principios para la cromatina sexual: la cromatina sexual es genticamente inactiva, la inactivacin ocurre al azar, la inactivacin puede ser en el cromosoma paterno o materno la inactivacin ocurre en el da 16 del periodo embrionario.

3. Fundamento de coloracin en el mtodo de FEULGEN Y CARBOL FUCSINA Reaccin de Feulgen La reaccin de Feulgen depende de la presencia de desoxirribosa. En este mtodo, los cortes de tejido fijados se someten a una hidrlisis cida dbil con cido clorhdrico, y luego se tratan con el reactivo de Schiff. Esa hidrlisis es suficiente para extraer el ARN, que desaparece, pero no el ADN. El mecanismo de la reaccin tiene los siguientes pasos: 1) la hidrlisis cida extrae las purinas a nivel de la unin desoxirribosa-purina del ADN y de esta manera libera los grupos aldehdos de la desoxirribosa; 2) los grupos aldehdos libres reaccionan con el reactivo de Schiff. Cuando se aplica a la clula, la reaccin es positiva en el ncleo y negativa en el citoplasma. En el ncleo las masas de cromatina condensadas son particularmente positivas; el nucleolo es Feulgen-negativo. En condiciones estrictamente controladas, la intensidad de esta coloracin se correlaciona con la cantidad de ADN presente, y se puede determinar citoespectrofotomtricamente. La determinacin de la ploida celular por este mtodo es particularmente empleado en el estudio ciertos tumores humanos, especialmente como factor pronstico y condicionante de la terapia.

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CARBOL FUCSINA Las micobacterias debido a su alto contenido lipdico a nivel de pared celular, son relativamente impermeables a los colorantes. Por ello, el colorante carbol fucsina se aplica con calor de modo de ablandar y permeabilizar la pared celular. Por otra parte, el colorante en forma de vapor posee un mayor poder de penetracin y adems, el carbol fucsina tie los cidos miclicos propios de la pared celular de micobacterias. Al agregar la solucin decolorante (HCl-etanol), se produce un efecto de deshidratacin, lo cual cierra las vas de entrada, quedando el colorante al interior de las clulas. Finalmente al agregar azul de metileno, en fro, este no penetra al interior de las clulas. De este modo, las micobacterias se observan de color rojo, mientras que otros gneros bacterianos aparecen teidos de azul.

4. Cules son los factores que alteran la cantidad y el tamao normal del corpsculo de Barr? Existen alguna alteraciones genticas donde se encuentran presentes ms de 2 cromosomas sexuales en la mujer, por ejemplo, el sndrome de la super hembra donde la configuracin gentica es 47, XXX; en donde en lugar de encontrar un corpsculo se hayan 2. En hombres se puede observar el sndormde de klinefelter 47, XXY; en donde se encontrar un corpsculo. Todo esto se debe a una falla gentica debido a factores ambientales que afectaron en el momento de la fecundacin.