Universidad

Peruana
Cayetano Heredia
Facultad de Medicina Alberto
Hurtado

Curso: Farmacología del Sistema Orgánico

Seminario N°5: Farmacología de inmunoglobulinas antiveneno

animales

Alumnos:
Nataly Chirinos Montes

Débora Contreras Toledo

Luis Felipe Macha Quillama

Andrea Mendiola Yamasato

Juan Pablo Ramirez Ramirez

Ruben Ramirez Zegarra

Maria Isabel Rosas Pimentel

 I. INTRODUCCION

Objetivos

• Explicar el descubrimiento de las inmunoglobulinas antiveneno a lo largo del

tiempo.
• Analizar los procesos farmacológicos así como el mecanismo de acción de las
inmunoglobulinas antivenenos animales.
• Indicar la aplicación médica actual de las inmunglobulinas antivenenos.

Introducción

A finales del siglo XIX, Von Behring observó que los sueros de animales que habían
padecido difteria contenían sustancias que neutralizaban el efecto de la toxina diftérica. A
estas sustancias, se les denominó anticuerpos, por su capacidad para reconocer a las
toxinas bacterianas. En 1937 Tiselius descubre la electroforesis y aplica este nuevo
método al fraccionamiento de proteínas plasmáticas, identificando así los anticuerpos
como las proteínas del suero que se desplazan más lentamente. Esta fracción recibió el
nombre de g-globulina. Tiempo después mediante experimentación con niveles distintos
de globulinas se concluye que no todos los anticuerpos son gammaglobulinas, por lo que
Hebermans propone el término de inmunoglobulinas para designar a todas las sustancias
con capacidad de anticuerpo. Actualmente se conocen cinco tipos de inmunoglobulinas:
IgM, IgA, IgG, IgD e IgE.

En 1926 apareció en Durango la primera generación de antivenenos. Luego en 1940, se

logró la purificación de las inmunoglobulinas de los caballos, hoy continúa con los
faboterápicos que neutralizan el veneno sin efectos secundarios.
El estudio de antivenenos comenzó al producirse antídotos basados en sueros simples,
fundamentalmente de caballo. El procedimiento que se seguía era volver resistente al
animal inyectándole cierta cantidad de veneno. Así, al cabo de tres meses producía
anticuerpos en su sangre. En el pasado se pensaba que los antivenenos eran más
peligrosos que las sustancias tóxicas, porque esos antídotos causaban efectos
secundarios.
Para evitar la connotación negativa de antivenenos fue necesario crear el concepto de
faboterápicos que implica utilizar la fracción de inmunoglobulina purificada y digerida
enzimáticamente.
La efectividad del tratamiento antiveneno depende de la potencia del antiveneno y del
tiempo que pasa desde el momento del envenenamiento. El antiveneno ideal, debe
alcanzar adecuadamente lo diferentes tejidos en los cuales el veneno produce su efecto
tóxico y, una vez unido a la toxina, el complejo debe eliminarse rápidamente. Otro aspecto
importante es la diferencia en la seguridad de los antivenenos constituidos por un lado por
IgG completos, y por otra parte los antivenenos F(ab) y F(ab)2. Los eventos adversos
asociados con el uso de antivenenos se relacionan con su pureza y constitución.
Se usan Faboterapias como antídotos específicos en el envenenamiento por picadura de
escorpión, mordeduras de arañas y diferentes especies de serpientes. La Faboterapia
tiene una menor distribución y tiempo de eliminación, así como un mayor volumen de
distribución que las preparaciones de inmunoglobulina puras. Con las recientes técnicas
de purificación de F(ab)2, el riesgo de alergia, choque anafiláctico o enfermedad del suero
son reducidas.
Actualmente el Instituto de Biotecnología, Alacramyn, sigue en estudio para poder utilizar
los antivenenos en toda Latinoamérica, de manera que sean efectivos contra picaduras de
alacranes del sur del continente y ser exportado a todos sus países como Colombia,
donde ya se envían cantidades pequeñas de este producto, como cada año en África
medio millón de personas son mordidas por serpientes y sólo hay disponibles unas pocas
dosis de antídoto. Hace tres años la Organización Mundial de la Salud (OMS) hizo un
llamado a los productores de antivenenos para producir mayor cantidad de estos
antídotos.
 II. ESTRUCTURA Y CLASIFICACION

Estructura

Las inmunoglobulinas vienen a ser moléculas de origen glicoproteico, es decir están

compuestas por cadenas polipeptídicas agrupadas en una o varias unidades estructurales
básicas. Las inmunoglobulinas son producidas por el sistema inmune en respuesta a la
presencia de moléculas u organismos potencialmente dañinos como: virus, bacterias,
químicos, etc.

La principal función de las inmunoglobulinas es unirse a dicho organismo o compuesto

extraño identificados como foráneos, marcándolos para su destrucción. Las
inmunoglobulinas constituyen hasta un 20% de las proteínas sanguíneas y son producidas
por los linfocitos B, llamados así porque completan su desarrollo en la médula ósea (Bone
marrow).

La estructura de las inmunoglobulinas está dada por una unidad básica compuesta de dos
cadenas polipeptídicas globulares y dos cadenas livianas unidas entre sí por uniones tipo
puentes disulfuro. Ambas cadenas presentan una región constante y una región variable.

Las cadenas pesadas (H) debido a que tienen un peso molecular de 55.000 dalton se
encuentran organizadas en cuatro dominios llamados VH, CH1, CH2 y CH3 (C por
constante y V por variables). Las cadenas livianas (L), cuyo peso molecular es 25.000
dalton, se dividen en dos dominios, VL y CL. Los dominios variables de ambas cadenas
son los que interactúan con el antígeno, mientras que el extremo constante de la cadena
pesada es imprescindible para desencadenar procesos de suma importancia en la
defensa frente a agentes extraños.

En la FIGURA 1. que representa la estructura básica de la inmunoglobulina, en el dibujo

de la izquierda se muestran en rojo las cadenas pesadas y en verde las livianas. El
punteado en negro indica el enlace disulfuro. El dibujo de la derecha muestra en azul la
región constante y en rojo la región variable.

En la zona variable se puede encontrar una zona especializada, llamada zona

hipervariable, la cual está formada por 10 a 15 aminoácidos, conformando estos el
receptor idiotípico responsable de la unión con el epitopo (parte de la molécula que será
reconocida por un anticuerpo y a la cual se unirá) presente en el antígeno.

Algunas partes del anticuerpo tienen funciones únicas, como los extremos de la "Y", por
ejemplo, contienen el lugar que se une al antígeno y por tanto, reconoce elementos
extraños específicos. Esta región del anticuerpo se llama Fragmento de unión al antígeno
o región Fab. El papel que desempeña la base de la "Y" consiste en modular la actividad
de la célula inmunitaria. Esta región se llama Fragmento cristalizable o Fc y está
compuesta por dos o tres dominios constantes de ambas cadenas pesadas, dependiendo
de la clase del anticuerpo. Mediante la unión a proteínas específicas la región Fc se
asegura que cada anticuerpo genera una respuesta inmune apropiada para un anticuerpo
dado. La región Fc también se une a varios receptores celulares como el receptor del Fc y
otras moléculas del sistema inmunitario como las proteínas del complemento. (Figura 2)

Clasificación

Las clases de inmunoglobulinas están determinadas por los diferentes isotipos de las
cadenas pesadas.

• IgM

Los anticuerpos del tipo IgM son los de respuesta primaria en respuesta a un estímulo
antigénico. Caracterizada por poseer capacidad neutralizante, precipitante, aglutinante,
fijar complemento, activar la respuesta inmune, sin embargo no atraviesa activamente las
membranas biológicas. Esta última propiedad hace que esta inmunoglobulina ejerza su
acción normalmente en los espacios intravasculares.

• IgG

Es la más abundante en la sangre, es monomérica y principalmente es producida durante

respuestas secundarias a antígenos timodependientes. Sus principales funciones
biológicas incluyen fijación del complemento, unión a receptores para Fc en células
fagocíticas unión a receptores en células Natural Killer durante la cito toxicidad mediada
por anticuerpos (ADCC). Puede atravesar la barrera placentaria para brindar protección al
feto.

• IgA

Se encuentra en fluidos como lágrimas, saliva, mucosa de los tractos intestinal y

digestivo, en la lecha materna (Los niveles de todas las inmunoglobulinas, a excepción de
la IgG en recién nacidos son muy bajos, siendo por tanto de gran significación el hecho de
que la IgA se transfiera desde la madre al lactante a través de la secreción láctea) Está
formada por dos unidades básicas unidas por una pieza secretora sintetizada por las
células epiteliales de las mucosas. Esta pieza secretora es un polipéptido responsable del
trasporte de la IgA a través del epitelio. Además la protege de la acción de enzimas
proteolíticas presentes en las secreciones. Es sintetizada en grandes cantidades por
acúmulos linfoides y placas de Peyer del intestino.

• IgE

En muchos individuos alérgicos esta inmunoglobulina se presenta en grandes

cantidades. El estímulo para su síntesis puede proceder de una gran variedad de
antígenos, a los que en este caso se conocen como alergenos. Estos alergenos pueden
penetrar en el organismo a través de la piel o de las mucosas respiratoria, ocular, del
aparato digestivo, etc., así como por inyectables, como es el caso de la penicilina u otros
medicamentos.

La vida media de la IgE en sangre periférica es de 24-48 horas. No tiene capacidad de

atravesar la placenta, por lo tanto, las reacciones de hipersensibilidad inmediata no
pueden transferirse de manera pasiva de la madre al feto. Sin embargo, puede existir una
predisposición de tipo familiar a padecer enfermedades de naturaleza alérgica. Esta
predisposición parece estar relacionada con una tendencia a producir anticuerpos de tipo
IgE en la respuesta secundaria frente a antígenos, en lugar de IgG que sería la respuesta
normal en individuos no alérgicos.

• IgD

La concentración de esta inmunoglobulina en suero es muy baja. Es una inmunoglobulina

unida a membrana de los linfocitos B. Su presencia en conjunto con IgM confiere
inmunocompetencia a estos linfocitos. Está prácticamente ausente en el suero.
 III. MECANISMO DE ACCIÓN

La unión del antígeno con el anticuerpo o inmunoglobulina es muy semejante a la que se

establece entre la enzima y su substrato. Forman múltiples enlaces no covalentes, que
por sí solos son uniones débiles. La inmunoglobulina se une al antígeno en unos lugares
determinados conocidos como epítopos.

Los epítopos de un antígeno están formados por aminoácidos consecutivos en la

secuencia de la proteína, como las proteínas se encuentran normalmente dobladas entre
sí mismas según lo que se llama estructura terciaria, los anticuerpos generados contra
este tipo de epítopos solo reconocerán a la proteína desnaturalizada y por eso se les
llama epítopos lineales.

Las inmunoglobulinas se unen a los epítopos de los antígenos por sus sitios activos, que
son las cadenas pesadas y ligeras. Esta zona de unión se conoce con el nombre de
parátopo. (Ver FIGURA 3)

Tras la unión con el antígeno, la inmunoglobulina puede anular la acción del antígeno por
neutralización, precipitación o aglutinación. Estos fenómenos por sí solos no son
suficientes para la destrucción y eliminación de éstos. Para ello las inmunoglobulinas
requieren la colaboración de otros elementos tales como macrófagos, polimorfonucleares
o células NK. Se puede decir que las inmunoglobulinas, al detectar los antígenos y
producir la unión con ellos, actúan como transductores de la información generando la
destrucción de los antígenos por los macrófagos, polimorfonucleares o células NK.

Opsonización

Cuando se produce la unión entre antígeno e inmunoglobulina, se producen una serie de

cambios alostéricos en el extremo Fc de la inmunoglobulina que hacen que se una a
receptores que se encuentran en la membrana de macrófagos y polimorfonucleares. A
este fenómeno se llama opsonización. Al producirse esta unión los macrófagos se activan
iniciándose el fenómeno de fagocitosis y subsiguiente destrucción de los complejos
antígeno-anticuerpo por los procesos líticos intracelulares propios de la acción de las
enzimas contenidas en los lisosomas de éstas células.
Estos receptores pueden ser de distinta naturaleza, conociéndose en la actualidad 3:
(CD64), FcgRII (CD32) y FcgRIII (CD16). Además de los macrófagos, estos receptores se
encuentran en células como plaquetas, linfocitos B y NK. Cuando se produce la unión a
células NK, éstas se activan y lisan a las células portadoras del antígeno por un mecanismo
conocido como citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos. Algunos de estos
receptores se encuentran en mastocitos y basófilos, en estos se puede unir la
inmunoglobulina activándolos y produciendo algún proceso de hipersensibilidad que puede
ser grave. (Ver FIGURA 4.)

Lisis por complemento

Cuando la inmunoglobulina que se une a un antígeno es de las clases M o G, en sus

extremos Fc se producen ciertos cambios alostéricos gracias a los cuales éstas adquieren
la propiedad de fijar y activar uno de los componentes del complemento.. Las fracciones
activas del complemento poseen diferentes acciones de gran importancia en la defensa
del organismo, una de las cuales es la lisis celular. (Ver FIGURA 4.)

IV. APLICACIONES MÉDICAS

La aplicación médica de las inmunoglobulinas antivenenos, llamada seroterapia, es

similar al mecanismo de las vacunas, sólo que en vez de inducir la inmunidad en el
paciente directamente se induce en un animal huésped. Luego se extrae la sangre y se
prepara un suero, un antiveneno con las inmunoglobulinas producidas por el huésped.
La persona a la que se le es suministrado el suero es inmunizada pasivamente. Además
tampoco son utilizados a manera de prevención, tampoco pueden reparar daños ya
causados, se les debe administrar rápidamente después de ser expuesto a un veneno y
este se neutraliza, mas no revierten los daños.

Las inmunoglobulinas antivenenos son extraídas de la sangre de los animales huésped

junto con una serie de proteínas séricas innecesarias para el tratamiento. Esto causaba
reacciones alérgicas en los pacientes y una enfermedad conocida como la enfermedad
del suero.

Por ello se recurrió a fraccionar las inmunoglobulinas, separando las demás proteínas
séricas que causaban las reacciones adversas, sobretodo la albúmina, de las que
servían para neutralizar el veneno. Estas inmunoglobulinas altamente enriquecidas eran
utilizadas para la llamada seroterapia de segunda generación aún utilizada en la
actualidad que consiste en la administración de sueros antiofídicos.

Sin embargo, con nuevos estudios de enzimas proteolíticas sobre las inmunoglobulinas
se descubrió que se podía separar el fragmento de la inmunoglobulina responsable de la
función neutralizante del fragmento responsable de las funciones efectoras de los
anticuerpos.

La parte responsable de la función neutralizante eran los fragmentos de cadena pesada

que estaban unidos a las cadenas ligeras, dejando de lado al fragmento Fc, estos
fragmentos Fab actúan neutralizando la toxina de manera muy similar a las IgG
completas. Las inmunoglobulinas digeridas con pepsina, eran cortadas justo en la zona
de bisagra que separaba el fragmento Fc del llamado Fab2 (responsable de la función
neutralizante). (Ver FIGURA 5). Se utiliza Fab2 en lugar de Fab, debido a que el
segundo tiene un menor peso molecular y por ende un tiempo de vida media menor. La
forma de excreción de los complejos Fab2-veneno no está identificada aún, pero se cree
que el tejido reticuloendotelial están estrechamente involucrados.

El uso de estos fragmentos es llamado Faboterapia, o seroterapia de tercera generación

y es un nuevo método que está cambiando la antigua asociación de los sueros o
seroterapia a los efectos adversos.

Estos fragmentos tienen reducido tanto su tamaño como sus propiedades

inmunogénicas y antigénicas eliminando sus reacciones de hipersensibilidad. Además
tienen una mejor llegada al compartimiento extravascular por lo que son más eficientes
neutralizando componentes de los venenos que actúan fuera del sistema circulatorio.

Sin embargo, la faboterapia es relativamente reciente y la seroterapia de segunda

generación sigue siendo muy utilizada.

Se debe decir que ante el caso de cualquier envenenamiento se debe utilizar una terapia
específica para cada veneno, ya que cada suero solo funciona para los venenos
antígenamente relacionados. Si bien existen sueros monovalentes, que son válidos para
un tipo de veneno solamente, también existen los polivalentes que son útiles para varios
tipos. Un suero específico para un tipo de veneno puede ser eficaz neutralizando ciertos
aspectos de otro veneno, pero no va a ser tan eficiente como un suero que tenga las
propiedades neutralizantes de todos los efectos del veneno que ha afectado al paciente.

Muchos anticuerpos recombinantes son ya una realidad terapéutica para varios tipos de
neoplasias, leucemia, linfomas, enfermedades autoinmunes e infecciones virales y,
también, para ayudar a evitar rechazos en transplantes de órganos. Es posible preveer
que este tipo de enfoque va también a alcanzar el nicho de los antivenenos, en particular
el caso de los venenos de baja complejidad (aquéllos que sólo tienen uno o muy pocos
componentes tóxicos para mamíferos).

Un punto muy importante en el uso de inmunoglobulinas antivenenos es la prueba de

sensibilidad, esta prueba se realiza diluyendo 1 ml. de suero puro en 9 ml. de agua
destilada o solución fisiológica. De la dilución 1/10 se aplica 0,1 ml. por vía intradérmica,
en la cara anterior del antebrazo, y se espera la reacción.

Si a los 10-15 minutos la zona de aplicación no se enrojece, entonces el paciente es

negativo. Si la zona de aplicación se enrojece, entonces el paciente es positivo y hay
que desensibilizarlo para poder aplicar el suero sin el riesgo de que se presente un
shock anafiláctico.
 V. CONCLUSIONES

1. La primera generación de antivenenos apareció en 1926 y en 1940 se logró la

purificación de las inmunoglobulinas de los caballos. Actualmente se utiliza la
Faboterapia que neutraliza el veneno sin efectos secundarios, consiste en utilizar la
fracción de inmunoglobulina purificada y digerida enzimáticamente.

2. La función principal de las inmunoglobulinas es unirse a organismos extraños

identificados como foráneos, marcándolos para su destrucción. Las inmunoglobulinas
constituyen hasta un 20% de las proteínas sanguíneas y son producidas por los
linfocitos B.

3. Las inmunoglobulinas se unen al antígeno en lugares determinados conocidos como

epítopos, proceso conocido como opsonizacion; anulando la acción del antígeno pero
para ello requieren la colaboración de macrófagos, polimorfonucleares o células NK.

4. Las inmunoglobulinas antivenenos no revierten el daño ni lo preveen, sólo neutralizan

el veneno para evitar mayo daño.

5. En el uso de inmunoglobulinas antivenenos es importante la prueba de sensibilidad,

esta prueba se realiza diluyendo suero puro en agua destilada o solución fisiológica.
Esto para evitar el riesgo de que se presente un shock anafiláctico.
VI. ANEXOS
FIGURA 1. Estructura básica de inmunoglobulinas

FIGURA 2. Lugar de unión del antígeno

 FIGURA 3. CDR de la cadena ligera y su unión al epitopo

FIGURA 4. Opsonizacion y lisis

FIGURA 5. Proteólisis de una inmunoglobulina por pepsina

 VII. BIBLIOGRAFIA

• Hypatia – Revista de Divulgación Científico – Tecnología del Estado de Morelos. –

Quinta Generación de anti-venenos contra la picadura de alacrán. [Citado el: 29 de
marzo del 2009] Disponible en URL:
http://hypatia.morelos.gob.mx/index.php?option=com_content&task=view&id=383&Ite
mid=280

• ALAGON_ANTICUERPOS TERAPEUTICOS.pdf (application/pdf Objeto) [Citado el: 29

de marzo del 2009] Disponible en URL:
http://www.smb.org.mx/XXVICONGRESO/text/Resumen-
Invitados/ALAGON_ANTICUERPOS%20TERAPEUTICOS.pdf

• Sin título. [Citado el: 29 de marzo del 2009] Disponible en URL:

http://www.inmunologiaenlinea.com/index.php?option=com_content&task=view&id=26
&Itemid=30&limit=1&limitstart=0
• Seroterapia Antiofídica. [Citado el: 29 de marzo del 2009] Disponible en URL:
http://www.une.edu.ve/salud/mapanare/paginas/serotera.htm

• Instituto de Animales Venenosos – Eventos – Producción de antivenenos en Argentina

– Jornadas Internacionales de intoxicaciones por venenos animales- [Citado el: 29 de
marzo del 2009] Disponible en URL: http://www.iavsgo.gov.ar/jornadas/jornadas-
produccion-de-antivenenos-en-arg.html

• Instituto Clodomiro Picado – Suero Antiofídico. [Citado el: 29 de marzo del 2009]
Disponible en URL:
http://www.icp.ucr.ac.cr/index.php?option=com_content&task=view&id=23&Itemid=37

• ata12_2.pdf (application/pdf Objeto) [Citado el: 29 de marzo del 2009] Disponible en

URL: http://www.ataonline.org.ar/bibliotecavirtual/acta_toxicologica/ata12_2.pdf