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Manual de Bioseguridad para Toma y Transporte de Muestras

PROGRAMA AMPLIADO DE INMUNIZACION

Movilizados por el Derecho a la Salud y la Vida


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A LIC C

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IO

Serie: Documentos Tcnico - Normativos


LA PAZ - BOLIVIA 2008

Autoridades:

Dr. Walter Selum Rivero Ministro de Salud y Deportes Dr. Juan Alberto Nogales Rocabado Viceministro de Salud Dr. Nelson Ticona Viceministro de Medicina Tradicional e Interculturalidad a.i. Dn Milton Melgar Soruco Viceministro de Promocin de la Salud y Deportes Dr. Roberto Tardo Lara Director General de la Salud

INDICE
Pg. Presentacin ................................................................................................................................................ 7 Introduccin ................................................................................................................................................. 8 Objetivos del manual ................................................................................................................................ 9 Captulo I: Bioseguridad para la Toma de Muestras .............................................................. 11 I.1. Normas Generales de Bioseguridad .......................................................................... 13 I.2. Medidas De Bioseguridad Para La Obtencin De Muestras ......................... 14 Captulo II: Procedimientos para la obtencin de muestras ............................................... 17 II.1. Meningitis tuberculosa ..................................................................................................... 19 II.2. Poliomielitis - Parlisis Flcida Aguda ........................................................................ 19 II.3. Difteria ...................................................................................................................................... 25 II.4. Tos ferina ................................................................................................................................ 26 II.5. Ttanos y Parotiditis ........................................................................................................ 28 II.6. Sarampin y Rubola ........................................................................................................ 28 II.7. Sndrome de Rubola Congnita - SRC .................................................................... 35 II.8. Fiebre Amarilla ..................................................................................................................... 36 II.9. Infecciones invasivas causadas por Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae .................................................................................................. 38 II.10. Rotavirus ................................................................................................................................. 42 Captulo III: Envo y Transporte de muestras .............................................................................. 45 III.1. Transporte De Muestras En Condiciones De Bioseguridad .......................... 47 a) Sustancias Infecciosas ............................................................................................. 47 b) Cultivos ............................................................................................................................. 48 c) Especimenes de Diagnstico .................................................................................. 48 d) Productos Biolgicos .................................................................................................. 48 e) Microorganismos y organismos genticamente modificados ............... 49 f) Desechos Clnicos ....................................................................................................... 49 III.2. Envo de Muestras .............................................................................................................. 49 III.2.1. Embalaje ........................................................................................................................... 49 a) El Recipiente Primario ............................................................................................... 50 b) El Recipiente Secundario .......................................................................................... 50 c) Envoltura Exterior o de Envo .................................................................................. 51

III.2.2. Envos Con Hielo O Hielo Seco (Dixido De Carbono Slido) ................... 54 III.3. Marcado y etiquetado del Embalaje ........................................................................... 55 III.2.1. Marcado ........................................................................................................................... 55 III.2.2. Etiquetado ........................................................................................................................ 55 III.4. Transporte .............................................................................................................................. 58 a) Transporte Interno ...................................................................................................... 58 b) Transporte por Carretera o Superficie ............................................................. 58 c) Transporte por Correo/Areo ............................................................................. 59 III.4.1. Planificacin del Transporte ................................................................................... 60 a) Remitente o Expedidor .............................................................................................. 60 b) Transportador u Operador ...................................................................................... 60 c) Destinatario ..................................................................................................................... 61 III.5. Recepcin y Apertura ........................................................................................................ 61 Anexos .............................................................................................................................................. 63

Presentacin
El rol del laboratorio en la epidemiologa moderna es cada vez ms importante. Los desafos que los pases se han trazado para interrumpir la circulacin o la erradicacin de enfermedades, obliga a la adopcin de medidas cada vez mas seguras que permitan garantizar que las muestras lleguen a los laboratorios en forma adecuada y oportuna. Por otra parte, se han establecido medidas que tienen por objetivo proteger al pesonal de salud y al personal encargado del transporte de las miamas. Cuanda mejor calidad tengan las muestras al ingresar al laboratorio, mejores resultados se obtendrn y por tanto, mejores decisiones sern tomadas. El objetivo del presente manual es el de proporcionar al personal de salud, los procedimientos mediante los cuales las muestras de laboratorio puedan ser obtenidas y transportadas en condiciones de alta seguridad, bajo normas aplicadas por los pases a nivel internacional. El presente manual est enfocado en las actividades del Programa Ampliado de Inmunizacin (PAI), por lo que se espera que el personal de salud del pas, adopte este manual como una herramienta til de trabajo, de apoyo a la vigilancia epidemiolgica de las enfermedades objeto del PAI. La Paz, 2008

Dr. Walter Selum Ministro de Salud y Deportes

INTRODUCCIN
El presente documento, responde a la necesidad de garantizar la implementacin de normas de bioseguridad en el manejo de muestras clnicas, contribuyendo a evitar la exposicin innecesaria a riesgos del personal de salud y de la poblacin general. Si bien son normas para la obtencin de muestras necesarias para el diagnstico laboratorial de enfermedades inmunoprevenibles, pueden aplicarse a otras de la misma naturaleza. 8 Aunque existen regulaciones internacionales descritas de bioseguridad, las normas establecidas en este manual se adecuan a las posibilidades que tienen nuestros centros de salud de manera que el material biolgico sea obtenido y transportado en forma segura y expedita. En nuestro pas lo ideal sera desarrollar una excelente coordinacin de trabajo entre los grupos involucrados, es decir remitentes, compaas de transporte y destinatarios para tener un mejor envo y transporte de muestras.

DOCUMENTOS TECNICO - NORMATIVOS

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MANUAL DE BIOSEGURIDAD PARA TOMA Y TRANSPORTE DE MUESTRAS

OBJETIVO DEL MANUAL


Difundir normas de bioseguridad que permitan la obtencin de muestras de buena calidad para garantizar el correcto diagnstico laboratorial de enfermedades inmunoprevenibles y minimizar la exposicin a riesgos innecesarios del personal de salud y la poblacin. Proporcionar elementos tcnicos que garanticen la adecuada recoleccin, transporte y envo de muestras clnicas.

I
BIOSEGURIDAD PARA LA RECOLECCIN DE MUESTRAS

I.1.

NORMAS GENERALES DE BIOSEGURIDAD

El Hospital, Centro de Salud deben tener designado un oficial de bioseguridad cuya funcin ser controlar que se escriban, publiquen y se cumplan las normas de bioseguridad en cada una de las dependencias. De manera que si existe el incumplimiento a las normas u ocurre algn accidente el responsable puede tomar las medidas pertinentes. A continuacin se describirn consideraciones generales que pueden hacer menos riesgos el trabajo del personal de salud: Se aconseja a los trabajadores en salud no tomar riesgos innecesarios; el descuido, la negligencia y las prcticas poco seguras pueden causar daos serios, no slo as mismos sino a los que estn a su alrededor o a los pacientes. Cada empleado debe ser instruido acerca de la ubicacin y la operacin de cada uno de los equipos de seguridad y las instalaciones tales como extinguidotes, duchas y lavamanos los cuales deben ser de fcil acceso para el personal de salud. El equipamiento de proteccin personal (guantes quirrgicos, mandil o guardapolvos, barbijos) debe utilizarse cuando sea indicado. Los guardapolvos deben usarse cerrados (abotonados) en todo momento y quitrselos cuando se abandone el laboratorio, consultorio o centro de vacunacin. No se debe ingresar a los comedores de los hospitales o centros de salud con los mandiles o guardapolvos puestos. Los hbitos y arreglos personales se deben tener muy en cuenta. El cabello largo debe estar atado, de modo que no interfiera con los reactivos, equipos o procedimientos a realizar. Est prohibido fumar en los laboratorios as como comer o almacenar alimentos o bebidas. Se debe designar un refrigerador especfico para almacenar la comida de los trabajadores. El personal de salud con enfermedades de la piel, infecciones respiratorias agudas y otras enfermedades contagiosas debe evitar el contacto con los pacientes.

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MANUAL DE BIOSEGURIDAD PARA TOMA Y TRANSPORTE DE MUESTRAS

I.2.

MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD PARA LA OBTENCIN DE MUESTRAS

Una de las funciones del PAI como parte de la vigilancia epidemiolgica es la recoleccin de muestras de aquellas enfermedades inmunoprevenibles como ser sangre, heces, hisopado nasofarngeo as como tambin orina y tejido heptico, para procedimientos con fines de diagnstico. Adems para que esta muestra obtenida sea de buena calidad se deben considerar las normas de bioseguridad referidos a un conjunto de conceptos y reglamentos de conducta que deben tomar los trabajadores en salud para protegerse y proteger a la comunidad de todo riesgo biolgico, fsico o qumico al que pueda estar expuesto. Antes de proceder a la toma de muestra es necesario proporcionar a la familia y paciente una informacin lo ms completa posible; as se tendr la disposicin o colaboracin del paciente para proporcionar la muestra. Debido a riesgos a los que se expone el personal de salud en la recoleccin de muestras, es importante responder a normas de bioseguridad durante la realizacin de este procedimiento, especialmente si se trata de muestra de sangre ya que pueden ocurrir accidentes durante la extraccin como pinchazos, cortes provocados por las agujas y otros objetos punzo cortantes. Aunque el uso de guantes no evita los pinchazos o cortes causados por agujas u otros instrumentos punzo cortantes como vidrio o plstico roto; es necesario la utilizacin de los mismos para realizar cualquier procedimiento de laboratorio ya que reducen en un 50% el riesgo de infeccin del personal con material biolgico. Es importante recordar que el empleo de guantes tiene por objeto no sustituir una buena tcnica de trabajo, sino complementar unas prcticas apropiadas de control de infecciones. Adems se debe tomar en cuenta que cualquier muestra clnica que se maneje es considerada como infecciosa por lo tanto se debe usar guantes y manipular la muestra con las mismas precauciones que si se fueran a procesar especmenes especialmente etiquetados como un agente de alto riesgo.

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DOCUMENTOS TECNICO - NORMATIVOS

Se debe tener el cuidado de no tocarse los ojos, nariz, mucosas o piel; tampoco se debe abrir o cerrar puertas y grifos, contestar el telfono o manejar papelera mientras se est utilizando los guantes. No se debe transitar por el rea libre de laboratorio ni abandonar el lugar de trabajo con los guantes puestos. En el caso de que los guantes hayan sido contaminados, desechar inmediatamente en contenedores especiales para material infeccioso. (ver figura) Evitar que las manos del personal que va realizar la toma de muestra tenga cortes, abrasiones u otras lesiones cutneas, por que esto permite la penetracin de agentes biolgicos. En el caso de existir cualquier tipo de lesin, debern ser protegidas con gasa y tela adhesiva o ser previamente curadas para luego realizar la labor con la proteccin obligatoria de los guantes. El personal de salud que realice la recoleccin y envo de muestras debe trabajar utilizando ropa protectora (guardapolvo o mandil de manga larga); protegido de tal manera que no tenga riesgo de algn tipo de contaminacin. Lavarse las manos con agua y jabn antes de empezar e inmediatamente despus de haber terminado el trabajo. Si se produce algn accidente como pinchazos con agujas contaminadas con muestras, proceder a exsanguinacin como se observa en la Fig. 1 y posteriormente proceder al lavado como se observa en la Fig. 2. Fig. 2

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Fig. 1

Fig. 3

Toda contaminacin de las manos y en caso de contaminacin de otra parte del cuerpo con sangre o muestras biolgicas debe ser comunicado al jefe inmediato, al servicio mdico y/o comit de bioseguridad y se registrar en el cuaderno de registro destinado para ese fin. En el caso de utilizacin de jeringas para la extraccin de muestras biolgicas; con sistemas tradicionales de jeringa y aguja, estas deben ser desechables. Una vez utilizada la jeringa, no tapar nunca la aguja ni desacoplarla de la jeringa ya que al separarla aumenta el riesgo de infeccin. Desechar la jeringa y aguja en un recipiente de plstico rgido imperforable preferiblemente de color rojo debidamente etiquetado con el logo de material infeccioso e indicar que se trata de material cortopunzante. Este recipiente debe contener desinfectante (hipoclorito de sodio al 1%), como se observa en la Fig.3. Si se utilizan agujas de sistemas de vaco, es fundamental su eliminacin en el contenedor mencionado anteriormente, sin tocar la aguja ni taparla.

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II
PROCEDIMIENTOS PARA LA RECOLECCIN DE MUESTRAS

II.1. Meningitis tuberculosa


La muestra adecuada para realizar el diagnstico de meningitis tuberculosa es el Lquido Cefalorraqudeo (LCR), donde la toma de muestra debe ser realizada por un mdico ya que es un procedimiento muy delicado y doloroso para el paciente, que requiere de condiciones estriles. El mdico debe pedir a la persona acostarse sobre uno de sus lados, con las rodillas dobladas hasta tocar su abdomen, adems de mantener la cabeza inclinada con la barbilla pegada al trax, de manera que tenga la espalda arqueada. Debe realizar la asepsia correspondiente de la piel; se aconseja limpiar primero con alcohol yodado al 2% y posteriormente con alcohol desinfectante. Luego inyectar anestsico local usualmente se aplica entre la 3ra y 4ta vrtebra lumbar. Posteriormente se realiza la insercin de una aguja espinal delgada, la cual tras cruzar los msculos de la espalda, perfora las meninges y permite la recoleccin de LCR. Una vez retirada la aguja se realiza nuevamente la asepcia de la espalda del paciente, se coloca una banda adhesiva y se le solicita que permanezca acostada por espacio de 6 a 8 horas. La muestra se debe enviar inmediatamente al laboratorio.

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II.2. Poliomielitis Parlisis Flcida Aguda


El laboratorio desempea una funcin crtica en la vigilancia, ya que la erradicacin se centra en la eliminacin misma del Poliovirus salvaje y no slo en la enfermedad clnica. El cultivo del virus en muestras de heces es el mtodo ms sensible y eficaz para descartar la transmisin del Poliovirus salvaje. Es imposible asegurar si un paciente acudir a la consulta de seguimiento, por lo cual debe obtenerse informacin clnica y muestras en la primera consulta. A fin de garantizar que las muestras de heces se sometan a anlisis sin demora, y para resolver cualquier otro problema, debe haber buena comunicacin y coordinacin entre el epidemilogo y el virlogo. Es necesario analizar todas las muestras disponibles de todos los casos probables y sus contactos.

A. Tipo de Muestra. Heces. El virus generalmente se detecta en las heces dentro de un perodo de 72 horas a seis semanas despus de la infeccin; la deteccin es ms probable dentro de las dos primeras semanas. Lquido cefalorraqudeo (LCR). Es improbable que se detecte el virus; por lo tanto, no se recomienda obtener muestras. Sangre. Es improbable que se detecte el virus y con las pruebas serolgicas actuales no se puede distinguir entre las cepas salvajes del virus y las de la vacuna. Se sabe por experiencia que, en los casos de poliomielitis, con frecuencia puede ser engaosa la interpretacin de los datos serolgicos. Por lo tanto, no se recomienda obtener muestras de sangre. Si un caso probable muere, se puede realizar un diagnstico definitivo de poliomielitis o rechazarlo con un examen de la mdula espinal. Es importante que un patlogo competente y con experiencia realice el examen y que se enve una muestra directamente a un laboratorio de referencia, a fin de que se intente cultivar el Poliovirus. B. Obtencin de Muestras.
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Explicamos la tcnica de toma y envo de muestra de heces como parte de la vigilancia de la Poliomielitis, donde un caso de Parlisis Flcida Aguda (PFA) es considerado caso sospechoso de Poliomielitis. Para casos de Parlisis Flcida Aguda obtener una muestra adecuada de heces, es decir, tomar dentro de los primeros 15 das despus del inicio de la parlisis. La obtencin de la muestra de heces debe realizarla personal de salud debidamente capacitado.

Preparacin del material necesario


Tener dispuesto el siguiente material: Frascos de plsticos limpios y secos con tapa hermtica a rosca. Esptula de madera limpia y seca.

Un par de guantes. Bolsa de plstico para desperdicios. Termo o conservadores con paquetes fros o hielo. Chata o cubeta grande. Bolgrafo. Cinta adhesiva o Parfilm Fichas epidemiolgicas

Procedimiento
Realizar el lavado minucioso de las manos. Explicar al paciente (o un familiar responsable) el procedimiento y como debe colaborar. No se requiere un rgimen alimenticio previo.
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Cuando el paciente sienta deseos de defecar debe colocarse la chata o ayudar a hacerlo (evitando que se mezclen las heces con la orina). Retire la chata o el recipiente y con la ayuda de la esptula, tome una parte de las heces y deposite en el frasco destinado a este objeto. Tomar 8 gramos de la muestra (el tamao de un dedo pulgar si es densa, si es lquida una cuchara). Cerrar hermticamente el frasco, identificar con el nombre, el cdigo del caso, la fecha de toma y procedencia de la muestra. Enviar inmediatamente los frascos con las muestras bien empaquetadas en un termo o conservador con refrigerantes. Depositar la esptula usada en la bolsa o recipiente de desperdicio destinada para este efecto, para luego desechar en los residuos infecciosos. Cerciorarse que el frasco este bien tapado y de que est rotulado, adjuntar copia de la ficha epidemiolgica (envuelta en nylon) y colocarla a un lado del paquete segn instruccin de envo.

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Mantener los frascos con las heces en un refrigerador a una temperatura de 2 a 8 C. No enviar las muestras los fines de semana o das previos a feriados. Informar a la persona a la cual se hace el envo, la va, da y hora de llegada para su seguimiento y recepcin. El personal local debe enviar las muestras a las Gerencias de Red y esta a SEDES, de donde deben ser enviadas a la ciudad de La Paz al PAI Nivel Central. Las muestras se procesan en el laboratorio de referencia que es el Laboratorio MALBRAN en Buenos Aires - Argentina.

Precauciones
22 El personal de salud debe estar adecuadamente adiestrado para la obtencin de la muestra. Revisar si la ficha epidemiolgica esta completamente llena con los datos correctos.
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Caso de PFA que ha fallecido


Deben obtenerse muestras del contenido intestinal o de heces casi formadas; tambin pueden obtenerse muestras de tejidos (bulbo raqudeo, mdula espinal) y de suero, lo ms pronto posible despus del fallecimiento. Con estas muestras se deben hacer cultivos, la prueba de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) y un anlisis histopatolgico. Asimismo es necesario obtener un segmento del nervio de la extremidad afectada. Si se examina el caso despus de 14 das del inicio de la parlisis y es clnicamente compatible con poliomielitis, se necesitarn estudios especiales adems del anlisis de las dos muestras de heces del caso. Estos estudios podran incluir encuestas comunitarias para obtener muestras de 50 a 100 contactos, as como de vecinos del caso que tengan menos de cinco aos y que no hayan sido vacunados dentro de los 30 das precedentes.

Se deben recoger 8 gramos como mnimo de muestra (equivalentes al volumen de un pulgar) directamente en el recipiente en que se enviarn al laboratorio. No se recomiendan los hisopos rectales, aunque se pueden usar tubos rectales en estudios especiales. Muestras para la deteccin de Poliovirus
HECES CUANDO OBTENERSE DEBEN Cuanto antes durante el curso de la enfermedad; una muestra. Use un recipiente limpio y vaco para recoger 8 g de heces (aproximadamente del tamao de un pulgar). MATERIAL PARA LA AUTOPSIA (TEJIDO Y CONTENIDO DE LOS INTESTINOS Dentro de las 24 horas siguientes a la defuncin. Evite contaminar el tejido nervioso con el contenido de los intestinos. Los tejidos deben extraerse con instrumentos esterilizados y colocarse en recipientes separados esterilizados. Use instrumentos y recipientes separados para distintos tipos de tejido. Mantenga las muestras refrigeradas desde el momento de su obtencin. Etiquete todas las muestras indicando claramente el nombre del caso o del contacto, el nmero de caso, la fecha de obtencin y la fecha de inicio de la parlisis. Envelas envueltas en una bolsa de plstico bien cerrada, dentro de un termo o de una caja refrigerada con hielo. Use hielo seco si es posible. Coloque los formularios apropiados para el laboratorio, informndole cundo llegarn las muestras. Aislamiento del virus. El aislamiento de poliovirus del tejido del sistema nervioso central confirma la infeccin por poliovirus.

TECNICA DE OBTEN-CION

ETIQUETADO

Etiquete la muestra, indicando claramente el nombre del caso o del contacto, el nmero de caso, la fecha de obtencin y la fecha de inicio de la parlisis. Envelas envueltas en una bolsa de plstico bien cerrada, dentro de un termo o de una caja refrigerada con hielo. Use hielo seco si es posible. Coloque los formularios apropiados para el laboratorio, informndole cundo llegarn las muestras. Aislamiento y caracterizacin del virus. Si se asla un poliovirus, debe describirse como salvaje o de una cepa utilizada para la vacuna. La ausencia del virus no excluye la posibilidad de que se trate de poliomielitis.

ENVIO DE LAS MUESTRAS

TIPO DE EXAMEN INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS

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ALMACENAMIENTO

Si es posible, refrigere la muestra en seguida despus de su obtencin.

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Almacenamiento y Transporte
Las muestras de heces deben mantenerse refrigeradas, a fin de que se mantengan en buenas condiciones y de que puedan realizarse pruebas confiables. La mejor manera de mantenerlas refrigeradas es con hielo seco; de no contar con ste, se recomienda utilizar paquetes de hielo. El hielo seco requiere un manejo especial, por lo que, las cajas deben estar cerradas hermticamente. El encargado del envo debe verificar que la muestra y el hielo sean suficientes. Adems, deber avisar al destinatario por telfono y por fax, y cerciorarse de que se incluyan los formularios apropiados en el envo. Al recibir las muestras, el destinatario deber informar al remitente la fecha, la hora y el estado en que llegan. De ser posible, esta verificacin habr de hacerse en las 48 horas siguientes, a fin de tomar las medidas necesarias en caso de requerirse ms muestras. 24 Si se utiliza un servicio de mensajera o bien se entregan personalmente las muestras, es necesario informar al portador sobre el contenido del paquete, darle instrucciones sobre su manejo especial y hacer nfasis en la importancia de que entregue las muestras directa e inmediatamente. El servicio de mensajera deber avisar al remitente cuando haya efectuado la entrega. Todas las muestras debern portar la siguiente informacin: Fecha de recoleccin Nmero del caso Jurisdiccin sanitaria Hospital / consultorio Informacin clnica clave Antecedentes de vacunacin fecha de la ltima dosis de VOP. Si el recipiente es adecuado para las muestras Tipo de muestras Si la muestra es suficiente (8g) Si haba hielo cuando lleg la muestra Identificacin correcta en el paquete.

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II.3. Difteria
Se debe obtener muestras de hisopado farngeo para el respectivo cultivo, asimismo se debe recolectar la pseudomembrana. Tener dispuesto el siguiente material: Hisopos estriles Medio de transporte o medio de cultivo (agar sangre con cistena) Baja lenguas Tubo estril (para recoleccin de la membrana) Etiquetas y bolgrafos Papel Parafilm

Procedimiento para Hisopado Farngeo


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Para la recoleccin de muestras de los exudados faringo-amigdalinos se necesita una buena fuente de luz, un hisopo mejor si es de Dacrn o que contenga alginato de calcio. Se coloca el cuello del paciente en hiperextensin y se debe tener una buena fuente luz para el procedimiento. Se le solicita al paciente que abra bien la boca, saque la lengua y emita un ah. La lengua se baja suavemente con una esptula para lengua (bajalenguas) y se gua un hisopo por encima de sta hacia la faringe posterior. Con el hisopo se recolecta la mucosa detrs de la vula y entre los pilares amigdalinos realizando un movimiento suave de barrido de atrs hacia delante. Tener el cuidado de no tocar la lengua u otro lugar de la cavidad bucal, para evitar la contaminacin de la muestra. Una vez tomada la muestra sembrar en el medio de cultivo slido, de lo contrario colocar el hisopo en el medio de transporte.

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Enviar la muestra al Laboratorio de Referencia. Si se observa la presencia de una pseudomembrana, se tomar material debajo de esta y si es posible debe ser retirada con mucho cuidado, si no es posible con el hisopo ayudarse con una pinza. La pseudomembrana o una porcin de esta debe depositarse en un tubo limpio y estril para luego remitir al Laboratorio de Referencia.

II.4. Tos Ferina


La toma de muestra para el diagnstico de la tos ferina debe ser tomada nicamente a los nios que presentan un cuadro clnico compatible: fiebre, tos paroxstica o emetizante y con menos de 5 das de haber iniciado los sntomas. 26 Es importante que la muestra para el aislamiento de Bordetella se tome 7 das despus de iniciado los sntomas (ltimos das del estado catarral y comienzo de la etapa paroxstica). Para el diagnstico en pacientes hospitalizados se debe tomar aspirado nasofarngeo con sonda estril. Si se va a realizar el estudio de contactos o trabajo de campo se debe tomar frontis nasofarngeo con hisopo flexible. Tener dispuesto el siguiente material: Hisopos flexibles estriles. Medio de transporte Regan Lowe. Etiquetas y bolgrafos Papel Parafilm Portaobjetos Ficha epidemiolgica

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Procedimiento a) Aspirado Nasofarngeo


Este procedimiento debe ser realizado por el personal mdico entrenado. Para realizar el cultivo, colocar 5 gotas del aspirado sobre la superficie del medio Regan Lowe. Para realizar la prueba de Inmunofluorescencia Directa (IFD) hacer dos extendidos delgados en el centro de dos portaobjetos (un extendido por cada portaobjeto) y enviar el aspirado restante en un tubo estril.

b) Frotis Nasofarngeo
El espcimen debe ser tomado de tal manera que evite la contaminacin con la flora nasal y oral. La nasofaringe es alcanzada insertando un pequeo y delgado hisopo flexible a travs de la nariz (Fig. 4) El hisopo se gua hacia atrs y hacia arriba hasta encontrar resistencia lo cual indica que se ha llegado a la nasofaringe. Si mientras se introduce el hisopo se encuentra con alguna resistencia, se debe recolectar la muestra de la otra fosa nasal; una vez alcanzada la nasofaringe dejar unos 30 a 60 segundos para que los microorganismos lleguen a ser absorbidos por el hisopo. Retirar suavemente el hisopo y depositar la muestra junto con el hisopo en el medio de Regan Lowe. Para la prueba de Inmunofluorescencia Directa (IFD) recolectar la muestra de la nasofaringe con otro hisopo y realizar dos extendidos delgados en el centro de cada portaobjetos; dejarlos secar y fijar con etanol al 95% (alcohol puro). Marcar los tubos y los portaobjetos y remitirlos inmediatamente junto con la ficha epidemiolgica del caso, al Laboratorio de Referencia. 27
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Fig. 4

II.5. Ttanos y Parotiditis


En el caso de estas enfermedades infecciosas no es necesaria la toma de muestra ya que si bien existen mtodos para el diagnstico de las mismas, el PAI realiza la confirmacin del caso clnicamente a travs de mdico, as como por la epidemiologa.

II.6. Sarampin y Rubola


Para casos sospechosos de Sarampin y Rubola, al primer contacto se debe recolectar una muestra adecuada de sangre e hisopado farngeo. Una muestra adecuada de sangre, debe tener 5 mL., esta muestra debe ser tomada durante los primeros 28 das despus del inicio del exantema (erupcin). Con esta muestra el laboratorio realiza la deteccin de IgM en suero. Para el aislamiento viral de Sarampin o Rubola se debe realizar el hisopado farngeo o nasofarngeo el cual debe tomarse al primer contacto, caso contrario en los primeros tres das despus de la erupcin cutnea y no ms de cinco das despus de la aparicin de la erupcin. a) Muestra de Sangre
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La obtencin de la muestra de sangre debe realizar personal de salud debidamente capacitado. Para la extraccin de una muestra de sangre se debe tener dispuesto el siguiente material: Jeringa descartable de 5 mL. Torunda de algodn con al 70% y/o alcohol yodado al 2% Torniquete Ligadura Tubos Vacutainer o tubo estril con su respectiva identificacin. (Cdigo, nombre, tipo de muestra y fecha de toma). Tubo estril descartable de 2 mL para recoleccin de suero. Cinta adhesiva para identificar

Bolgrafo Fichas epidemiolgicas

Procedimiento
El personal de salud que realice la toma de muestra debe realizar el lavado minucioso de sus manos, utilizar guantes y mandil. Colocar sobre la mesa la jeringa ya lista para ser utilizada junto a la torunda con alcohol, torniquete y el tubo previamente identificado. Una vez que el paciente est cmodo, pedirle que descubra su brazo, buscar el lugar donde se realizar la puncin. El lugar ideal de obtencin de muestra de sangre es en las venas que se encuentran en la flexura del codo. En caso de que el paciente sea nio o nia pedir al familiar que lo sostenga con firmeza. Realizar la asepsia de la zona elegida con la torunda realizando movimientos circulares de adentro hacia fuera y cuidando de no volver a pasar por la parte ya limpiada. Aplicar el torniquete. Fijar la piel con los dedos ndice y pulgar. Agarrar la jeringa de manera que el mbolo se apoye en la palma de la mano, asegurarse que el bisel de la aguja est hacia arriba, introducir la aguja en la vena seleccionada. Aspirar lentamente el mbolo para realizar la extraccin de la muestra sangunea sin aflojar el torniquete (Fig. 5). Retirar el torniquete y posteriormente retirar suavemente la aguja, colocando otra torunda de algodn sobre el lugar de puncin. Para evitar fuga de la sangre presione, sin dar masaje. 29
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Un sistema moderno para la obtencin de las muestras puede utilizar un sistema de tubos al vaco para mayor seguridad y comodidad, tanto del personal que realiza la extraccin, como del que procesa la muestra (sistema vacutainer).

Fig. 5

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Una vez extrada la muestra (sangre) vaciar el contenido de la jeringa en el tubo estril sin anticoagulante, en el momento del vaciado se debe tener el cuidado de hacerlo por las paredes del tubo para evitar la hemlisis de la muestra, al mismo tiempo se debe cuidar el no derramar el fluido. Para prevenir cualquier contaminacin se sugiere limpiar la parte externa del tubo con hipoclorito de sodio diluido al 0.5%. Posteriormente desechar sin quitar la aguja de la jeringa y ms bien depositar en la caja de bioseguridad destinada para este efecto (Fig.6).

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Los tubos deben estar bien identificados con los datos del paciente; dejar a temperatura ambiente hasta que se forme el cogulo, o en el caso de que se cuente con una centrfuga, separar el suero mediante el procedimiento de centrifugacin. En caso de centrifugar la muestra se debe utilizar tubos con tapn de goma hermticamente sellados y si es posible asegurados con tela adhesiva. Una vez finalizada la centrifugacin dejar reposar unos minutos antes de abrir la centrfuga para dejar sedimentar aerosoles generados durante la centrifugacin. Trasladar el suero a otro tubo estril, tambin identificado y mantener en refrigeracin (entre +2 C a +8 C) hasta su envo al nivel correspondiente dentro de las 24 hrs. siguientes a la toma. Para trasladar el suero a otro tubo estril se debe utilizar pipetas Pasteur o goteros estriles, teniendo el cuidado de utilizar una pipeta o gotero para cada muestra.

Tapar bien los tubos, y sellar con tela adhesiva o Parafilm, asegurarse de que estn rotulados con la correspondiente etiqueta. La muestra debe enviarse con una copia de la ficha epidemiolgica.

Fig. 6

No enviar las muestras los fines de semana o das previos a feriados. Informar a la persona a la cual se hace el envo, la va, da y hora de llegada para su seguimiento y recepcin.
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El nivel local debe enviar las muestras al nivel superior correspondiente, con las mismas precauciones. El envo al laboratorio es exclusivo de los niveles regionales. Revisar que la ficha epidemiolgica est completamente llena con los datos correctos.

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Precauciones
En caso de que el centro de salud cuente con centrfuga y si existe algn tipo de accidente por rotura de tubos dentro del equipo, el operador debe estar obligatoriamente vestido con la bata de proteccin. Cerciorarse que se produjo el accidente y desinfectar la rea circundate externa a la centrifuga con papel absorbente empapado en lavandina diluida al 1%, dejar actuar 20 minutos. Desinfectar el rea interna de la centrfuga que recibi salpicaduras con papel absorbente empapado con lavandina diluida al 1 % y dejar actuar 20 minutos.

Retirar con una pinza los trozos de vidrio que se encuentran dentro de los tacos (soportes de tubos) de la centrfuga y depositar en un recipiente con lavandina diluida al 1% y dejar actuar 20 minutos y colocarlos en recipiente de material corto-punzante.

b) Especimenes de las vas respiratorias


Tener dispuesto el siguiente material: Hisopos estriles Medio de transporte viral (MTV) que contiene PBS estril o solucin isotnica apropiada como PBS de Hank, etc, con antibiticos agregados (penicilina, 100 UI ug / mL y 2% de suero bovino fetal o 0,5% de gelatina). Este medio se lo obtiene a travs del epidemilogo departamental o el Jefe del PAI departamental, quien debe solicitar al PAI Nacional. 32 Baja lenguas Criotubos Etiquetas y bolgrafos
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Envases de poli estireno para embalaje Cinta adhesiva o Parafilm Formularios o Fichas epidemiolgicas

Procedimiento
Antes de realizar la toma de muestra tomar en cuenta lo siguiente: Tomar la muestra al primer contacto con el caso o dentro de los 5 das del inicio de la erupcin No debe haber secrecin purulenta nasal ni farngea Toda muestra debe venir acompaada de su FICHA correspondiente

1) Muestra Farngea
El paciente debe estar sentado frente a una fuente luminosa Solicitar al paciente que abra la boca y saque la lengua, mantener la lengua del paciente apartada con depresor lingual o baja lengua, solicitar al paciente que emita el sonido ah. Frotar enrgicamente con el hisopo estril las dos amgdalas y la pared posterior de la faringe o cualquier otra zona inflamada, teniendo cuidado de no tocar la lengua ni la mucosa bucal. Una vez tomada la muestra introducir el hisopo en el tubo con el medio de transporte viral (MTV), cerrar hermticamente, identificar (colocar el nombre del paciente y la fecha de toma de muestra). Enviar inmediatamente la muestra refrigerada entre 2 C y 4o C. 33
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En el caso de que la muestra no sea enviada inmediatamente guardar la muestra a la temperatura de 4 C a 8 C por incluso 4 das hasta que pueda almacenarse en un congelador de -70 C a -40 C.

2) Muestra Nasofarngea
Insertar el hisopo en las fosas nasales, aproximadamente una pulgada en los adultos y un poco menos en nios (Fig 7). Mantener inmvil el hisopo por unos 30 segundos dentro de la fosa nasal. Retirar el hisopo suavemente presionando con movimientos rotatorios Las muestras de ambas fosas nasales se obtienen con el mismo hisopo Introducir el hisopo dentro del medio de transporte viral (MTV), cerrar hermticamente. Enviar al laboratorio de forma refrigerada de 2 C a 4oC

E s t o s procedimientos son adecuados para el aislamiento viral. El transporte es inmediato en cadena fro (en un plazo de 4 dis); si no se puede enviar en este periodo de tiempo, y hay una demora que no Fig. 7 es conveniente, congelar las muestras a -40 C o -70 C y enviar con hielo seco. 34

Se introduce con cuidado un hisopo

c) Muestra de orina
Se debe tomar 10 a 50 mL de orina y refrigerarse entre 4 C a 8 C hasta que pueda centrifugarse.

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Idealmente las muestras de orina deben estar fras para ser centrifugadas. La orina debe centrifugarse el mismo da en que se tom la muestra, a 1500 rpm (revoluciones por minuto) durante 5 minutos. El sedimento obtenido debe suspenderse de inmediato en 0,5 a 2 mL de medio de transporte viral (MTV). En situaciones excepcionales, la orina centrifugada y los especimenes nasofarngeos/farngeos pueden refrigerarse de 4 C a 8 C por inclusive cuatro das hasta que pueda almacenarse en un congelador de -70 C a -40 C. La muestra debe ser enviada cuanto antes a un laboratorio equipado con congelador de -70 C a -40 C. Debido al riesgo de daar los virus, las muestras nunca deben mantenerse a -20 C. Las muestras preparadas para su envo al Laboratorio de Referencia, deben ser despachadas en termos con paquetes fros.

Las muestras que hayan estado congeladas entre -70 C a -40 C, deben ser despachadas al Laboratorio de Referencia con hielo seco. Si no es posible la centrifugacin de la orina, puede ser despachada de inmediato al Laboratorio de Referencia en termos con paquetes fros. La muestra podra an ser viable para el aislamiento viral si llega al Laboratorio de Referencia hasta cinco das despus de la toma de muestra.

II.7. Sndrome de la rubola congnita - SRC


El diagnstico clnico de rubola congnita es a veces difcil, por lo que cuando existe un caso sospechoso se debe realizar el anlisis de laboratorio mediante la toma de muestra de sangre, hisopado nasofarngeo o hisopado farngeo (ver acpite de sarampin). La muestra de sangre debe ser tomada: Al momento del nacimiento cuando hay sospecha de SRC, para lo cual es necesario recolectar la muestra de sangre del cordn. Al momento del nacimiento si la madre tuvo rubola o se sospecha que la tuvo para lo cual tambin es necesario recolectar la muestra del cordn umbilical. Al momento de sospechar SRC en todo nio menor de un ao. La muestra de sangre a partir de la cual se obtiene el suero respectivo se podr detectar fcilmente la presencia de IgM especfica de la rubola en los primeros seis meses de vida del nio, y en una porcin decreciente de casos hasta en el primer ao de edad. Su presencia suele indicar una infeccin prenatal, ms que postnatal. Si se detecta la persistencia de IgG especfica de la rubola despus de los 6 meses de vida del nio puede indicar tanto una infeccin prenatal como postnatal (edad a la que por lo general la IgG de origen materno ha desaparecido). Para confirmar y sobretodo diferenciar el virus salvaje del virus vacunal se puede realizar el aislamiento del virus a travs del cultivo para lo cual es necesario recolectar la muestra de hisopado farngeo o nasofarngeo en el primer mes de vida del nio. Tambin se puede aislar el virus a partir de muestras de orina, lquido cefalorraqudeo y ms raramente a partir de tejidos obtenidos en biopsias, autopsias o intervenciones quirrgicas.

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II.8. Fiebre amarilla


La muestra adecuada para el diagnstico de esta enfermedad viral es sangre a partir de la cual se separa el suero para realizar dos tipos de pruebas: Aislamiento viral y Serologa. Para obtener la muestra de sangre se debe seguir el mismo procedimiento que se mencion anteriormente (ver en el acpite de sarampin).

a) Aislamiento viral
Esta tcnica permite el aislamiento del virus de la Fiebre Amarilla mediante la inoculacin de la muestra en ratones lactantes o en cultivo celular. Debido a las condiciones de toma de muestra, procesamiento inmediato y el alto costo de este proceso se limita a casos especiales. 36 Muestra: Deben obtenerse durante los primeros cinco das del inicio de la fiebre. Metodologa: Recolectar 5 a 10 ml de sangre mediante puncin venosa y con materiales estriles, vacutainer en jeringa. Cuando se toma en jeringa, el contenido debe vaciarse inmediatamente a un tubo estril. Colocar lo ms rpido posible en hielo o en refrigeracin (4C) Identificar con el nombre completo, procedencia y fecha de toma de muestra. Separar el suero en condiciones aspticas dentro de las 24 horas. Enviar lo antes posible al laboratorio en cadena de fri con la ficha epidemiolgica llenada de forma adecuada.

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b) Serologa
Para efectuar el diagnstico mediante la tcnica de MAC - ELISA de captura de IgM especfica, la muestra debe ser tomada a partir del sptimo da del inicio de los sntomas. Esta muestra de sangre/suero tomada en la fase aguda se utilizar en las prueba empleadas para medir la seroconversin (inhibicin de la hemaglutinacin y neutralizacin).

Cuando sea necesaria una segunda muestra para verificar la seroconversin esta deber ser recolectada a partir del decimocuarto da del inicio de los sntomas. Usualmente se deben tomar dos muestras pareadas de suero: La primera, de la fase aguda, se extrae durante los primeros 5 das de la enfermedad. La segunda durante la etapa de convalecencia, despus de 2 a 3 semanas despus de obtener la primera muestra. Tambin se puede trabajar con muestra nica tomada durante la fase tarda despus de 7 das. Para lograr el mximo rendimiento del suero:
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Se toma 5 a 10 ml de sangre mediante puncin venosa en vacutainer o en jeringa. Cuando se toma en jeringa, vaciar inmediatamente a un tubo estril. Centrifugar a 1000 rpm por 10 minutos Despus de la centrifugacin la sangre se separa en los glbulos rojos y el suero; el suero se debe recolectar en un tubo de vidrio (tubo de laboratorio), este tubo bien cerrado (tapado) se mantiene en cadena de fri hasta su derivacin a nivel superior o laboratorio. Identificar el tubo con nombre completo del caso sospechoso, la procedencia del mismo y la fecha de toma de muestra. La muestra debe ser enviada al Laboratorio de Referencia siempre con la ficha epidemiolgica correctamente llenada y en cadena de fro.

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Reaccin en Cadena de la Polimerasa (PCR)


Esta tcnica permite la deteccin del material gentico del virus y puede efectuarse incluso si este se encuentra inactivo, lo que no sucede cuando se hace aislamiento viral. La toma de muestra, almacenamiento y trasporte: lo mismo que para aislamiento viral.

c) Muestra histopatolgica
En caso de muerte de una persona presuntamente afectada de fiebre amarilla, se debe realizar la viscerotoma heptica. Preferentemente la muestra de hgado se debe obtener dentro de las primeras 8 horas que siguen a la muerte. Cuanto ms tarda es la obtencin de la muestra, mayor es la posibilidad de que se produzca autolisis en el material, dificultando la interpretacin de los resultados. 38 La muestra de hgado obtenida debe tener por lo menos 1 centmetro cbico de tamao y debe mantenerse en formalina al 10% en un volumen de lquido 10 veces superior al del tamao de la muestra obtenida. Esta muestra se debe mantener a temperatura ambiente. NUNCA DEBER SER CONGELADA.
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II.9. Infecciones invasivas causadas por Streptococcus pneumoniae y

Haemophilus influenzae
Las muestras a ser recolectadas son: Sangre para hemocultivo Lquido Cefalorraqudeo Lquido Pleural Muestra de odo medio (Timpanocentesis) Otros lquidos estriles Secreciones purulentas de cavidades estriles

Estas muestras sern recolectadas antes de empezar el tratamiento con antibiticos para tener un cultivo y diagnstico bacteriolgico fidedigno es decir evitando tener resultados falsos negativos.

A. LIQUIDO PLEURAL
La obtencin de esta muestra la realiza el mdico con equipo y material estril, dentro un rea asptica. Desinfecte el rea anatmica con tintura de yodo al 2% o alcohol al 70%. Obtenga la muestra va aspiracin con aguja percutnea o ciruga. Realice la recoleccin de la muestra en dos o ms frascos estriles, de acuerdo a las pruebas que se requiera tomando en cuenta que debe existir siempre un frasco para estudio microbiolgico. Si la muestra no ser enviada inmediatamente al laboratorio por razones de distancia, se puede enviar la muestra inoculada en un frasco para hemocultivos. (slo si es pertinente).
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Rotular los frascos con los datos correspondientes del paciente y enviar inmediatamente al laboratorio. No refrigerar las muestras No enviar las muestras en hisopos ni jeringas.

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B. SANGRE PARA HEMOCULTIVO.


La muestra ser obtenida por el personal del servicio de laboratorio u otro personal de salud entrenado, antes de la administracin hospitalaria de antibiticos. El cultivo de sangre se realiza cuando se sospecha de neumona, bacteriemia o septicemia. Se requiere una asepsia estricta ya que una pequea contaminacin puede dar un resultado falso positivo. Tomar en el menor tiempo posible despus del ingreso al hospital; se recomienda no obtener la muestra mientras el paciente cursa con pico febril.

No se aconseja la extraccin de la sangre a travs de catteres ya que estos dispositivos pueden albergar bacterias que colonizan, dando lugar a falsos positivos. No realizar la puncin de la regin anatmica donde se encuentre el dispositivo, un catter perifrico o conectado a un equipo de venoclsis. Antes de proceder a la toma de sangre, el lugar de la puncin debe ser desinfectado con alcohol al 70% y posteriormente aplicar solucin yodada al 2%. Dejar secar durante un minuto para que pueda ejercer su accin. Una vez extrada la sangre se inocula al hemocultivo retirando la cobertura ms externa del frasco (sin sacar el resto de la cobertura, ni el tapn de goma). Previa a la inoculacin se debe desinfectar el tapn de goma del hemocultivo con alcohol y dejar secar al menos un minuto. 40 Inocular la botella con la muestra y mezclar por inversin para que la sangre y el medio se mezclen. La inoculacin de la sangre en el frasco de hemocultivo debe realizarse de manera lenta y cuidadosa para evitar la hemlisis de la muestra. El volumen de sangre inoculada depender del volumen del frasco de hemocultivo tomando en cuenta la dilucin 1/10 es decir que para frascos de hemocultivo peditrico de 10 ml inocular 1 ml de sangre y para los frascos de hemocultivo de 20 ml, inocular 2 ml de sangre. Enviar la muestra inmediatamente al laboratorio, caso contrario mantener a temperatura ambiente. No refrigerar los frascos de hemocultivo inoculados con sangre.

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C. LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO (LCR)


La obtencin de la muestra es responsabilidad exclusiva del mdico quien la tomar bajo rigurosas condiciones de asepsia.

El mdico debe pedir a la persona, permanecer acostada sobre uno de sus lados, con las rodillas flexionadas hasta tocar su abdomen y la cabeza inclinada con la barbilla pegada al trax. Limpiar la piel para luego inyectar anestsico local, usualmente entre el 3 y 4 espacio intervertebral lumbar. De forma posterior se realiza la insercin de una delgada aguja espinal, la cual tras cruzar los msculos de la espalda, perfora las meninges y permite la recoleccin del LCR. Una vez retirada la aguja se limpia nuevamente la espalda de la persona, se coloca una banda adhesiva y se le solicita que permanezca acostada por espacio de 6 a 8 horas. A menudo un LCR no revela patgenos bacterianos en frotis ni cultivo cuando se ha administrado un antibitico en las 24 hrs., anteriores.

D. TIMPANOSENTESIS
Es un procedimiento que realiza exclusivamene el mdico especialista (otorrinolaringlogo) utilizando tcnicas y aparatos exclusivos.

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E. OTROS LIQUIDOS ESTRILES


Como estos lquidos se encuentran en cavidades estriles, deben ser recolectados a travs de procedimientos quirrgicos realizados por el mdico especialista y en total condicin de asepsia.

Trasporte y envo de la muestra


Se debe considerar los siguientes criterios para el adecuado transporte de muestras clnicas: La muestra debe ser enviada inmediatamente al laboratorio despus de ser colectada. Se debe instruir al personal mdico, de enfermera y mensajeros en la importancia de un transporte rpido de las muestras clnicas. Su demora permite los cambios de temperatura, humedad, contaminacin y/o muerte del agente infeccioso.

Una vez la muestra en el laboratorio, esta debe ser procesada de manera inmediata, para evitar la contaminacin de la muestra con microorganismos de crecimiento rpido y que pueden perjudicar el crecimiento de los microorganismos fastidiosos; o para evitar la muerte de los microorganismos de difcil aislamiento. En los casos en que el transporte o el procesamiento pudieran demorar, se establecen a continuacin las condiciones de temperatura para algunos tipos de muestras: Mantenimiento a temperatura ambiente, toda muestra de LCR, sangre y lquido pleural. El transporte ptimo depende del volumen de muestra. Mientras menor sea su volumen, con mayor rapidez se debe transportar. Si se anticipa que habr demora en el envo de la muestra o si el cultivo ha de ser enviado a otro laboratorio se recomienda utilizar medios de transporte adecuados como Amies con carbn activado o Stuart. No enviar hisopos. Siempre que sea posible, las muestras clnicas deben ser enviadas directamente al laboratorio de microbiologa, sin utilizar las reas de recibo central u otros departamentos del laboratorio, como secretaria. Toda muestra de paciente con sospecha de neumona o meningitis en nios menores de 5 aos se deposita inmediatamente en el laboratorio.

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II.10. Rotavirus a) Recoleccin de muestras


Es necesario obtener una muestra de heces de todos los casos sospechosos al primer contacto con el paciente. Esta muestra debe ser tomada hasta 48 horas despus de la hospitalizacin. Si el paciente cumple con la definicin de caso sospechoso (ver definicin en Protocolo de Vigilancia Rotavirus) se debe:

Recolectar de 5 a 10 ml de heces fecales (aproximadamente, un pulgar), con la ayuda de una esptula o bajalengua desechable. En caso de que el paciente no presente deposiciones despus de este tiempo se puede estimular el esfnter anal realizando la induccin con hisopo estril y esperar a que se produzca la deposicin en un paal descartable puesto al revs para que no se absorba (Fig. 8) Una vez recolectada la muestra de heces, colocarla en un frasco limpio de tapa rosca debidamente identificado con el nombre del caso, fecha de la toma de muestra y nombre del hospital. Para cumplir con normas de bioseguridad se debe introducir el frasco con la muestra en una bolsita plstica individual, para evitar el derrame accidental del material. Enviar de inmediato al laboratorio. 43
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Toma de Muestras de Heces de Casos Sospechosos de Diarrea por Rotavirus

1
Remover la tapa Paal puesto al reves

4 2 3
Introducir el frasco hermticamente tapado en una bolsa de plstico y enviarlo inmediatamente al laboratorio

Introducir el bajalenguas con 5 ml. de heces en el frasco

Tapar el frasco e identificarlo con etiqueta correspondiente

Fig. 8
Fuente: Proyecto para la Vigilancia de Diarrea Producida por Rotavirus en Nios Menores de Cinco Aos en Paraguay 2004.

Almacenamiento de las muestras


La muestra debe ser almacenada a una temperatura de +2 a +8 C, preferiblemente se utilizar refrigerador para el mantenimiento de la temperatura siempre que sea posible, segn la disponibilidad de equipos en los hospitales, hasta su envo al laboratorio de referencia. Caso contrario de no contar con el refrigerador, a cada hospital se le dotar 1 contenedor de plastoform con paquetes fros de gel para la conservacin de las muestras entre 4C y 8C, hasta que stas sean trasladadas al laboratorio local. Cada hospital o laboratorio de hospital ser responsable del recambio peridico de los paquetes fros (cada 24 horas), con el objeto de mantener la temperatura dentro de los lmites aceptables y as garantizar la calidad de las muestras de materia fecal. La calidad de la red de fro se garantizar por medio de un registro de temperatura 2 veces en el da, utilizando termmetros ubicados en el interior de las conservadoras. Las muestras sern recogidas por los laboratorios locales, seleccionados por el Laboratorio de Referencia, los das lunes, mircoles y viernes, donde se almacenarn a -20C. Estas muestras, sern remitidas cada 15 das al Laboratorio de Referencia IBMB (Instituto de Biologa Molecular y Biotecnologa), donde se procesarn siguiendo el flujograma desarrollado para este fin. El laboratorio de Diagnstico y Caracterizacin Gentica de Rotavirus del IBMB, establecer un libro de registro de las muestras fecales y fichas epidemiolgicas por Hospital. La informacin recolectada ser correlacionada con el libro de registros de cada hospital. Dos veces por mes se controlar la relacin entre la informacin registrada en ambos libros. Los laboratorios departamentales debern verificar dos veces por semana si las fichas clnico - epidemiolgicas corresponden a las muestras en nmero y datos recolectados.

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III
ENVIO Y TRANSPORTE DE MUESTRA

III.1. TRANSPORTE DE MUESTRAS EN CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD


Se debe considerar para el envo de muestras que los Laboratorios de Referencia Nacional son CENETROP que analiza las muestras procedentes de Santa Cruz, Cochabamba, Tarija, Chuquisaca, Beni y Cobija; INLASA apoya a los departamentos de La Paz, Oruro y Potos. El envo y transporte de muestras biolgicas es un tema en el que se debe tener especial cuidado, dado que es un riesgo potencial de contaminacin y o infeccin para el personal que lleva la muestra, pblico en general y destinatario de esta. No existen casos documentados de enfermedades atribuibles a la fuga de material durante su transporte, a pesar que hay informes de incidentes aislados debidos a dao del embalaje exterior de paquetes en que han sido embalados apropiadamente. El envo de substancias infecciosas y especmenes de diagnsticos sin etiquetas y sin identificacin correctas, sobre todo cuando estn embalados inapropiadamente obviamente aumenta el riesgo potencial de exposicin para todas las personas. En este punto se distinguen tres situaciones que merecen una especial atencin: el envo de muestra desde el centro de salud al nivel respectivo; el transporte de las mismas ya sea por va terrestre o area y la recepcin - apertura del recipiente con muestras biolgicas. Antes de describir como se deben hacer cada uno de estos pasos para evitar la exposicin innecesarias a la poblacin en general; es necesario tomar en cuenta la clasificacin de las muestras biolgicas segn IATA 2007 -2008 (Asociacin para el Transporte Areo Internacional), de manera que para el envo y transporte de las mismas se deba tener el embalaje y etiquetado respectivo.

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a) Sustancias Infecciosas o Material Infecciosos


Para propsitos de transporte, sustancia infecciosa o material infeccioso estn definidos como aquellas sustancias las cuales se sabe que contiene patgenos. Patgenos son definidos tanto a microorganismos (tomando en cuenta bacterias, virus, rickettsias, parsitos, hongos) y otros agentes tales como priones, los cuales pueden causar enfermedades en humanos y animales. Las sustancias infecciosas estn definidas en dos categoras:

a.1.) Sustancias infecciosas, categora A.


Una sustancia infecciosas la cual es transportada en una forma que cuando ocurre la exposicin causa permanente discapacidad, vida amenazada o enfermedad fatal en humanos o animales.

a.2.) Sustancias infecciosas, categora B


Son aquellas sustancias las cuales no se encuentran dentro del criterio de inclusin de las de categora A.

b) Cultivos
Cultivos son el resultado de un proceso por el cual los patgenos son propagados intencionalmente. Esta definicin no incluye a especimenes de pacientes humanos o animales Los cultivos pueden ser clasificados tanto en la Categora A o Categora B, dependiendo del microorganismo involucrado.

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c) Especimenes diagnsticos
Son materiales humano o animal recolectado directamente de humanos o animales, incluyendo, pero no limitado a excretas, secreciones, sangre y sus componentes, tejidos, fluidos tisulares y partes del cuerpo colectados, transportados con el propsito de hacer investigacin, diagnstico, actividades investigativas, tratamiento de enfermedades y prevencin.

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d) Productos Biolgicos
Productos biolgicos son aquellos productos derivados de microorganismos atenuados los cuales son fabricados y distribuidos de acuerdo con los requerimientos adecuados de las autoridades nacionales, los cuales pueden tener requerimientos de licencia especial y pueden ser usados para prevencin (vacunacin), tratamiento, o diagnstico de enfermedades en humanos y animales, para desarrollar experimentos o propsitos investigativos. Ellos incluyen pero no esta limitado a productos terminados o sin terminar tales como las vacunas.

e) Microorganismo y organismos genticamente modificados


Son aquellos microorganismos u organismos cuyo material gentico han sido modificados o alterados con algn propsito a travs de la gentica de manera que esa modificacin no ocurre naturalmente.

f) Desechos clnicos
Son materiales derivados de tratamientos mdicos efectuados a los humanos, a los animales o de investigaciones biolgicas en donde existe una baja probabilidad de que estn presentes sustancias infecciosas. Los desechos infecciosos que pueden ser especificados como tales, deben ser asignados al nmero NU 2814 (Sustancia Infecciosa que afecte a los humanos) o NU 2900 (Sustancia Infecciosa que pueda afectar a los animales).

III.2. ENVIO DE MUESTRAS


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Para el envo de material biolgico se debe tener en cuenta aspectos como son el embalaje y el etiquetado. El PAI tiene como uno de sus objetivos el vigilar las enfermedades inmunoprevenibles por esta razn los centros de salud deben realizar la recoleccin, envo y transporte de la muestra, teniendo el cuidado pertinente con los materiales biolgicos clasificndolos de acuerdo a las definiciones mencionadas anteriormente. El envo y transporte se realizar siguiendo las exigencias y recomendaciones de IATA (Asociacin del Transporte Areo Internacional).

III.2.1. EMBALAJE
Para realizar el embalaje se deben tomar en cuenta las siguientes definiciones: Embalaje.- Recipiente y cualquier otro componente o material necesario para que el recipiente desempee su funcin de contencin y para cumplir los requisitos mnimos de la reglamentacin con respecto del embalaje. Embalado.- Arte y operacin por los cuales se envuelven artculos o sustancias en envoltorios y/o se colocan en cajas o se sujetan por otros medios.

Sobreembalaje.- Envoltorio utilizado por un expedidor que contiene un bulto o ms de uno, formando una sola unidad para facilitar la manipulacin y el almacenamiento. Los bultos de mercancas peligrosas contenidos en el sobreembalaje deben estar embalados, marcados y etiquetados y deben estar en buen estado de conformidad con la reglamentacin. El sobreembalaje puede contener dixido de carbono slido (hielo seco) para conservar el contenido, siempre que cumpla los requisitos establecidos. Bulto.- Producto completo de la operacin de embalaje, que consiste en las envolturas y el contenido, preparados para el transporte. Por lo tanto el bulto deben utilizar el sistema de embalaje triple bsico que consta de tres recipientes o estancos.

a) El recipiente primario
Es el recipiente que contiene la muestra y debe ser de vidrio o plstico, impermeable a prueba de filtraciones, etiquetado con todos los datos generales del paciente y el tipo de muestra (ver anexo etiquetas). 50 Debe tener cierre hermtico con tapones de rosca (preferible) o de corcho los cuales deben ser sujetados o sellados con papel parafilm u otro material seguro de manera que se impidan fugas.
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Este recipiente se envolver en material absorbente (toallas de papel absorbente, algodn hidrfilo) en cantidad suficiente para absorber todo el lquido en caso de derrame.

b) El recipiente secundario
Es un segundo recipiente que encierra y protege al recipiente primario por lo tanto, este debe ser de plstico, resistente, impermeable, a prueba de filtraciones. Cuando se colocan varios recipientes primarios dentro de uno secundario, los primarios debern ser envueltos con papel absorbente en forma individual. Se debe usar suficiente material absorbente para proteger a todos los recipientes primarios y evitar choques entre ellos; por lo tanto si existen espacios vacos entre los/el recipiente primario y el secundario, deben ser rellenados con papel absorbente.

Los recipientes primarios o secundarios utilizados para sustancias infecciosas y para especmenes de diagnstico debern ser capaces de soportar sin filtraciones la presin interna que se produzca en una gama de -40 C hasta +55 C.

c) Embalaje exterior o de envo


El recipiente secundario se coloca en una envoltura de envi que debe ser de un material suficientemente slido como caja de cartn grueso o cartn prensado para asegurar proteccin de los daos externos, tales como agua y daos fsicos, durante el transporte y manipulacin. Se registrar en este la informacin sobre el destinatario y remitente (ver anexo etiquetas), as como los adhesivos que exija el transportista sobre su contenido: etiquetas de frgil y/o posicin, las cuales deben ir colocadas en dos lados opuestos del paquete. En la parte interior de este recipiente ira adherido un ejemplar del formulario de datos (fichas epidemiolgicas) relativo a la muestra as como cartas y dems material informativo que permitan identificarla o describirla. Se debe comunicar anticipadamente al destinatario sobre el envo de muestras, permitindole estar prevenido sobre su llegada y poder tomar las disposiciones oportunas para que su manejo se realice en condiciones de seguridad.

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SISTEMA TRIPLE DE EMBALAJE

a
CONTENEDOR PRIMARIO

b
CULTIVO

CONTENEDOR SECUNDARIO

TAPAS

TAPA A PRUEBA DE AGUA CULTIVO CONTENEDOR


DE ENVIO

ETIQUETA DEL AGENTE ETIQUETA DE IDENTIFICACION DE LA MUESTRA MATERIAL DE EMBALAJE (ABSORBENTE) NOMBRE, DIRECCION Y NUMERO TELEFONICO DE LA PERSONA RESPONSABLE DEL ENVIO

SECCION TRANSVERSAL DEL EMPAQUE

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Tomado de: Appendix D. Inportation and interstate shipment of human pathogens and related materials. En: Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. pp. 148-149, 4th cd, 1999.

EMBALADO Y ETIQUETADO

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Recipiente primario Material absorbente de empaque Detalle de contenido (espcimen) Hielo seco Caja de styroform
(TEKNOPORT)

Recipiente secundario Tapa de rosca

Tapa

Paquete externo de envio

Fig. 9

Testa cierre de seguridad con asa amarilla para manejo del Biotarro

Recipiente primario Bolsa de Burbuja

Porta Muestras (opcional) Material Absorbente Envase interior Forro de cartn amortiguante Solapas

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Caja de cartn Embalaje exterior

Etiqueta de peligro

Fig. 10

III.2.2. ENVIOS CON HIELO O HIELO SECO (dixido de carbono slido)


El uso de hielo o hielo seco depende del tipo de muestra que ser enviada de acuerdo a las condiciones de refrigeracin que debe tener sta y el tiempo que se tardar en trasportar el paquete. Se utiliza el envo con hielo comn cuando la muestra debe ser conservada entre los -70 C y los -40 C y si el tiempo de transporte no es muy largo (hasta las 24 hrs). Si se usa hielo comn este deber colocarse en un envase a prueba de fuga de lquido (paquetes fros) y debe ir ubicado fuera del embalaje secundario. Se debe colocar un soporte en el interior para mantener el embalaje secundario en la posicin original. En el caso de envo de muestras que tenga virus o deba existir confirmacin sobre la presencia de virus, se deben enviar las muestras en hielo seco (dixido de carbono slido), ya que estos microorganismos conservan la viabilidad a una temperatura de -40 C y -70 C. El hielo seco deber colocarse fuera del recipiente secundario; tambin se debe colocar un soporte en el interior para mantener el embalaje secundario en la posicin original despus que el hielo seco se disipe. Adems el embalaje exterior debe permitir la salida de gas de dixido de carbono. Actualmente el uso de hielo seco tiene muchas restricciones en el transporte areo internacional. En ambos casos las fichas epidemiolgicas deben ir envueltas en bolsas plsticas (nylon) para evitar el deterioro por la humedad. Se debe tomar en cuenta que los recipientes primarios y secundarios deben ser capaces de mantener sus propiedades de contencin tanto a la temperatura del refrigerante utilizado, como asimismo a las temperaturas y presiones del transporte a que podra ser sometido el recipiente si es que por alguna razn la refrigeracin se perdiera. El Programa Ampliado de Inmunizacin realiza el envo de la muestras de heces sospechosas de Parlisis Flcida Aguda al Laboratorio de MALBRAN - Argentina utilizando como embalaje externo un envase de poliestireno (plastoformo) adems de una caja de cartn como se observa en figura 10.

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III.3. MARCADO Y ETIQUETADO DEL EMBALAJE


El expedidor o remitente es responsable de que todas las marcas y etiquetas necesarias y de acuerdo al bulto o paquete de mercanca se hayan efectuado de acuerdo con la reglamentacin.

III.3.1. MARCADO
Cada paquete debe estar marcado en la parte exterior y en forma legible con los datos del destinatario o consignatario y los datos del expedidor o remitente. Todas las marcas deben ser legibles y colocadas de tal manera que no puedan ser ocultadas u opacadas por cualquier parte o algn agregado hecho al embalaje, ni tampoco por otras marcas o etiquetas del embalaje. Las marcas requeridas deben ser capaces de soportar la exposicin a la intemperie sin una reduccin sustancial de su efectividad. Para cada bulto o sobre embalaje que requiera marcado, el expedidor tiene que comprobar que las marcas en el embalaje o sobre embalaje estn debidamente colocadas. Eliminar o tachar toda marca inadecuada ya existente en el bulto o sobre embalaje. Adems debe asegurarse de que cada embalaje nico o exterior empleado, lleven las marcas de especificacin de acuerdo al contenido. Si se va aplicar una nueva marca, sta debe ser apropiada y ser colocada en el lugar correcto y asegurarse de que es de calidad duradera.

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III.3.2. ETIQUETADO
El material de cada etiqueta, la impresin y cualquier parte adhesiva, ha de ser de duracin suficiente para resistir las condiciones normales del transporte, incluyendo la exposicin a la intemperie, sin que disminuya su efectividad en forma sustancial.

Para cada bulto y sobre embalaje que requiera etiquetado el expedidor tiene que eliminar o tachar todo etiquetado inadecuado que ya exista en el bulto o sobre embalaje; utilizar nicamente etiquetas de calidad duradera y de especificacin correcta. Fijar la etiqueta o etiquetas adecuadas en el lugar o lugares correctos y de forma segura, es decir pegados en las partes laterales del paquete de tal forma que no puedan despegarse fcilmente. Existen diferentes etiquetas que deben ser empleadas de acuerdo al material que se est enviando (ver anexo). Las etiquetas ms comnmente utilizadas son: la etiqueta de riesgo que debe ir en el paquete cuando se trata de sustancias infecciosas categora A que es la siguiente:

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EXCLUSIVO PARA MUESTRAS

RIESGO: INFECCIOSO (PERECIBLE) Responsable: (Nombre de Personal responsable) En caso de emergencia avisar a: (N de celular del responsable)

TELF: N de telef. Para cualquier emergencia

Los paquetes que contengan material biolgico lquido, deben ser empacados de tal forma que las tapas de los recipientes interiores estn orientadas hacia arriba; el lado superior del paquete debe ser sealado por dos etiquetas de Orientacin del paquete, las cuales deben ser colocadas en dos lados opuestos del paquete

Etiqueta orientacin del paquete

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Tambin se pueden utilizar etiquetas con las indicaciones ESTE LADO PARA ARRIBA o ESTE EXTREMO PARA ARRIBA que se colocan en la parte superior del exterior del paquete. En el caso de los bultos que contengan especmenes de diagnstico simplemente debe tener el texto o etiqueta de ESPECIMENES DE DIAGNOSTICO y en el caso de los paquetes que contengan material biolgico lquido, deben ser tratados como se mencion

anteriormente, es decir ser empacados de tal forma que las tapas de los recipientes interiores estn orientadas hacia arriba; el lado superior del paquete debe ser sealado por dos etiquetas de Orientacin del paquete, las cuales deben ser colocadas en dos lados opuestos del paquete.

III.4. TRANSPORTE
Las reglamentaciones acerca del transporte de material biolgico apuntan a asegurar que el pblico y el personal de la cadena de transporte estn protegidos de la exposicin a cualquier agente que se encuentre en el envase. Por esta razn existe una serie de medidas bsicas aceptadas internacionalmente y unas normas de sentido comn que se deben respetar cuando la muestra biolgica se enva desde el lugar en el que se genera hasta el lugar en el que se analiza. En el transporte se puede distinguir diferentes situaciones como es: 58

a) Transporte interno
El Transporte interno de la muestra incluye la transferencia de especimenes de la consulta mdica/bloque operatorio al laboratorio dentro de la propia instalacin; de un hospital o de un punto de toma de muestra perifrico a un laboratorio de diagnstico centralizado; o de un laboratorio a otro. El cuidado que se debe tener con los tubos o recipientes que contienen las muestras es que deben depositarse y ser transportados en gradillas de seguridad de tal forma que mantenga su posicin vertical y no deben ser llevados en la mano o sueltos; ms bien se los debe situar en una gradilla dentro de un contenedor de transporte que pueda retener fugas o derrames y asegurar una proteccin adicional. Si es posible el contenedor de transporte debe tener en la base papel absorbente humedecido con un desinfectante (lavandina al 0.5%).

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b) Transporte por carretera o superficie


En el caso de que las muestras para anlisis tengan un Transporte por carretera o superficie, el contenedor obligatoriamente debe ser hermtico de forma que

impida toda fuga o derrame. Tambin debe contener en la base papel absorbente humedecido con un desinfectante (lavandina al 0.5%) de manera que si existe algn derrame, ste no traiga mayores consecuencias. Una vez cerrado y sellado el recipiente, debe limpiarse con desinfectante y secarse. El conductor del vehculo deber ser conciente del material que transporta y ser instruido sobre lo que deber hacer en caso de accidente o derrame del contenido de los recipientes.

c) Transporte areo
Finalmente se tiene el transporte por correo/areo para lo cual se deben tomar en cuenta adems de las normas mencionadas anteriormente, las normas internacionales como las establecidas por IATA (Asociacin de Transporte Areo Internacional). Dichas normas mencionan adems que est estrictamente prohibido que los pasajeros lleven sustancias infecciosas con ellos o en su equipaje de mano cuando viajan en compaas areas internacionales, as como est prohibido el uso de correo diplomtico. IATA tambin establece la cantidad neta de material que se enva de acuerdo al tipo de material biolgico. Si se trata de sustancias infecciosas de la categora A, la cantidad neta que pueden colocarse en un recipiente exterior de embalaje es de 50 mL o 50 g si se transporta en un avin de pasajeros. Sin embargo el lmite por paquete es de 4 L o 4 Kg si se transporta en avin de carga u otros medios. En el caso de las sustancias infecciosas de la categora B la cantidad aceptable mxima para el recipiente primario es de 1 litro y el peso neto aceptable no debe exceder de los 4 L o 4 Kg. Para el transporte de especmenes de diagnstico los recipientes primarios pueden contener hasta 500 mL cada uno; teniendo en cuenta que el volumen total en el paquete externo de envo no puede exceder los 4 L. Cualquiera sea el sistema de transporte elegido, lo importante es garantizar que la muestra llegue integra al lugar de diagnstico, que no tenga ninguna posibilidad de que esta se haya derramado de los embalajes empleados para el envo.

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III.4.1. PLANIFICACION DEL TRANSPORTE


El transporte y transferencia eficientes de material biolgico requiere una buena coordinacin entre el remitente, la compaa de transporte y el destinatario (laboratorio o centro que recibe), para asegurar que el material es transportado de forma segura y que llega a su destino oportunamente y en buenas condiciones. Este tipo de coordinacin depende de una comunicacin bien establecida y de una relacin de colaboracin entre las tres partes involucradas. Describiremos las responsabilidades especficas de cada uno de los involucrados para que lograr el objetivo.

a) Remitente o Expedidor
Es responsable de la identificacin correcta - completa y clasificacin de todas las muestras biolgicas destinadas a ser transportadas. 60 Con anticipacin debe hacer los arreglos con el destinatario de las muestras incluyendo la determinacin de si se requiere un permiso de importacin. Con anticipacin debe hacer los arreglos con la compaa de transporte para asegurar que el envo ser aceptado para su transporte apropiado, por la ruta ms directa y evitar que su llegada sea en un fin de semana o da feriado. Se encarga de preparar la documentacin necesaria, incluyendo los permisos y los documentos de despacho y envo. Adems notificar al destinatario de los arreglos para el transporte una vez sea conocidos y con suficiente anticipacin a la hora programada de llegada.

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b) Transportador u Operador
Se encarga de proveer al remitente los documentos de despacho y envo, y las instrucciones para su llenado; aconseja al remitente sobre el embalaje apropiado. Ayuda al remitente a hacer los arreglos por la ruta ms directa y luego la confirma; guarda y archiva la documentacin para envo y transporte.

Verifica las condiciones en que el envo debe ser mantenido durante su transporte y notifica al remitente de retrasos que se esperan o que ocurren durante el transporte.

c) Destinatario
Obtiene la autorizacin necesaria de las autoridades nacionales para la importacin; provee al remitente con los permisos, cartas de autorizacin u otros documentos que sean requeridos por las autoridades nacionales. Hace los arreglos para recoger el envo de la forma ms eficiente y oportuna una vez llegue a su destino; inmediatamente despus de recibir el envo, lo notifica al expedidor o remitente.

III.5. RECEPCIN Y APERTURA


Los puntos de recepcin deben estar perfectamente identificados para el personal que transporte las muestras y ser el nico punto donde se puedan entregar. Es conveniente que el personal del servicio de recepcin sepa con antelacin el nmero de muestras que va a recibir, lo que asegura la posibilidad de evitar muestras perdidas o en paradero desconocido. La persona a cargo de la recepcin debe estar capacitada en bioseguridad por si exista algn tipo de derrame pueda tomar todas las medidas necesarias para que no exista contaminacin del ambiente y de su persona. 61
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ANEXOS

FLUJOGRAMA DE ENVO DE MUESTRAS ENFERMEDADES INMUNOPREVENIBLES PROGRAMA AMPLIADO DE INMUNIZACIN

PAI - NACIONAL

(Sarampin, Rubola, Fiebre Amarilla)

CENETROP

(Sarampin, Rubola) 65
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INLASA

SEDES DEPARTAMENTALES

GERENCIAS DE RED

CENTRO DE SALUD

Etiqueta tubo de muestra


Nombre del paciente: Fecha de Recoleccin de muestra: Laboratorio: Ciudad: N de identificacin: Tipo de muestra:

Etiqueta de tercer embalaje - Caja de Envo


Destinatario:

Institucin: Laboratorio:

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Direccin: Telfono: Correo Electrnico: Fax:

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Ciudad - Pas:

Remitente:

Nombre o Institucin: Laboratorio: Direccin: Telfono: Correo Electrnico: Ciudad - Pas: Fax:

Preparacin de Hipoclorito al 1%
El hipoclorito de sodio viene en forma comercial con el nombre de lavandina, cloros, leja o agua sanitaria, generalmente en una concentracin que varia del 5% al 8%. Si viene al 5% es necesario realizar una dilucin 1 en 5 significa que se debe diluir 1 parte de hipoclorito de sodio al 5% en 5 partes totales. Para este fin, a 1 parte de hipoclorito de sodio al 5% (lavandina comercial) se debe aadir 4 partes de agua. Ejemplo: 1 vaso de lavandina ms 4 vasos de agua. Para diluir un producto comercial que tiene inicialmente 8% de hipoclorito de sodio se debe diluir de la siguiente manera: A 1 litro de hipoclorito de sodio al 8% aadir 7 litros de agua, a travs de este procedimiento estamos realizando una dilucin 1 en 8, es decir 1 parte en 8 partes totales. 67
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Etiquetas utilizadas para el envo de muestras

INFECTIOUS SUBSTANCE
In case of damage or leakage immediately notify public health authority

Nombre etiqueta: Sustancia Infecciosa Dimensiones mnimas: 100 x 100 mm (para paquetes pequeos: 50 x 50 mm) N de etiquetas por paquete: 1 Color: Blanco y Negro La frase SUSTANCIA INFECCIOSA debe ser visible

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Nombre etiqueta: Sustancias miscelneas peligrosas Dimensiones mnimas: 100 x 100 mm (para paquetes pequeos: 50 x 50 mm) N de etiquetas por paquete: 1 Color: Blanco y Negro

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NON-FLAMMABLE NON-TOXIC COMPRESSED GAS

Nombre etiqueta: No inflamable, gas no txico Dimensiones mnimas: 100 x 100 mm (para paquetes pequeos: 50 x 50 mm) N de etiquetas por paquete: 1 Color: verde y blanco o verde y negro

Nombre etiqueta: Lquido criognico Dimensiones mnimas: 74 x 105 mm N de etiquetas por paquete: 1 Color: Verde y blanco
CONTAINS

CRYOGENIC LIQUID

Label name: Cryogenic liquid

Bibliografa
Asociacin del Transporte Areo Internacional REGLAMENTACION SOBRE MERCACIAS PELIGROSAS Ao 2001. 42 Edicin. Montreal - Ginebra. CDC NIH BIOSEGURIDAD EN LABORATORIOS DE MICROBIOLOGIA Y BIOMEDICINA. 4 Edicin. Atlanta - USA. Instituto Nacional de Salud, Laboratorio Nacional de Referencia Grupo Microbiologa, Manual de toma y procesamiento de muestras para el diagnstico de Tos Ferina. Ao 2003. Pag. 5. Bogot - Colombia. Koneman y col. DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO. 5ta edicin. Editorial Panamericana. Ministerio de Salud y Deportes, Programa Ampliado de Inmunizacin, Instituto de Biologa Molecular y Biotecnologa, Documento tcnico: Vigilancia Epidemiolgica de la Diarrea por Rotavirus en Bolivia. Ao 2006. Pag. 14 - 15. La Paz - Bolivia. 69
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