I.

INTRODUCCIN: Las levaduras se han definido como hongos microscpicos, unicelulares, la mayora se multiplican por gemacin y algunas por escisin. Este grupo de microorganismos comprende alrededor de 60 gneros y unas 500 especies.

II.

OBJETIVOS: Reconocimiento de las levaduras mediante el uso del microscopio

III.

FUNDAMENTO TEORICO: LEVADURAS: Histricamente, los estudios sobre microbiologa enolgica se han centrado en las levaduras pertenecientes al genero Saccharomyces, que son las Responsables de la fermentacin alcohlica. Anteriormente se crea que solo ellas participaban en el proceso de produccin de alcohol, Sin embargo, las diferentes Levaduras no-Saccharomyces Especialmente durante la fase inicial de la fermentacin, pueden influir en las propiedades organolpticas de las bebidas alcohlicas. El papel de las levaduras como agentes fermentadores no fue reconocido sino hasta 1856 por Luis Pasteur. Las teoras cientficas de esa poca reconocan la presencia de estas en la fermentacin alcohlica, pero eran consideradas como compuestos qumicos complejos, sin vida. Esta era la teora mecanistica liderada por los qumicos alemanes von Liebig y Wohler. Las levaduras son los agentes de la fermentacin y se encuentran naturalmente en la superficie de los plantas. El suelo es su principal hbitat encontrndose en invierno en la capa superficial de la tierra. En verano, por medio de los insectos, polvo y animales, son transportados hasta el fruto, por lo que su distribucin se produce al azar. Existe un gran numero de especies que se diferencian por su aspecto, sus propiedades , sus formas de reproduccin y por la forma en la que transforman el azcar. Las levaduras del vino

pertenecen a varios gneros, cada uno dividido en especies. Las especies mas extendidas son Saccharomyces ellipsoideus, Kloeckera apiculata y Hanseniaspora uvarum, las cuales representan por si solas el 90% de las levaduras utilizadas para la fermentacin del vino. Como todos los seres vivos, tienen necesidades precisas en lo que se refiere a nutricin y al medio en que viven. Son muy sensibles la temperatura, necesitan una alimentacin apropiada rica en azucares, elementos minerales y sustancias nitrogenadas , tienen ciclos reproductivos cortos, lo que hace que el inicio de la fermentacin sea tan rpido, pero as como se multiplican, pueden morir por la falta o el exceso de las variables mencionadas. Stanier (2005), si una parte pequea de este material se coloca en una solucin azucarada, tiene lugar a una vigorosa fermentacin lctica y se va formando un deposito grisceo, en el cual al ser observado en el microscopio, se ve que esta constituido por pequeos organismos con forma esfrica y bacilar.

Cmo se reproducen las levaduras?

William (1998), las levaduras son hongos unicelulares, que se reproducen por gemacin. Las levaduras son generalmente, clulas mayores que las bacterias. Las clulas de levaduras son esferoidales; otras son elipsoidales, en forma de salchichas, de limn o cilndricas.

La reproduccin de las levaduras es normalmente asexual, mediante la formacin de yemas en la superficie celular, si bien puede inducirse la reproduccin sexual en condiciones especiales. En el ciclo sexual, una clula diploide normal( una clula con dos conjuntos de cromosomas y por consiguiente con dos dotaciones de genes) da lugar a dos ascas o clulas esporogoneas. que contienen cuatro ascosporas haploides (mas fcil: clulas con una sola dotacin cromosmica y de genes). Las ascosporas son de dos tipos sexuales: a y alpha. Cada tipo puede desarrollar clulas haploides por gemacin. La unin de una clula haploide a con otra alpha da lugar a una celula normal diploude a/alpha. Las clulas haploides del mismo sexo pueden tambin unirse ocasionalmente, formando clulas diploides anormales (a/a o alpha/alpha) que solo pueden reproducirse asexualmente por gemacin. Las levaduras industriales suelen reproducirse por gemacin. A efectos de que se entienda un poquitito mas (solo un poquitito mas) agregamos a continuacin un esquema con las dos formas de reproduccin.

IV.

MATERIALES Y METODOS:

a. Materiales: Vasos de precipitado Placas petri Cocina elctrica Malla de asbesto Microscopio (Leica DM750) Bagueta Portaobjetos Cubreobjetos Levaduras Agua azucarada, lactofenol safranina b. Mtodo: Se disolver con ayuda de una aguja enmangada un poco de levadura sobre porta objeto que contenga 2 o 3 gotas de agua ligeramente azucarada.

Pasos : 1. Se colocara el cubre objeto con la muestra obtenida y se observara en el microscopio

2.

Se repetir el mtodo anterior mezclando sobre el porta objeto la sustancia acuosa de la levadura con una gota de lactofenol-safranina Con este procedimiento se consigue una doble finalidad. De observar mejor las clulas de las clulas de las levaduras, teidas por la safranina. Retrasa un poco el desprendimiento de las clulas hijas gracias a la accin desfavorable del fenol para la vida normal de la levadura.

V.

RESULTADOS Y DISCUSION Observaciones Levadura en agua azucarada: Se produce una rapida formacion de celulas ovoides y bacilar. La reproduccion es asexual,mediante el desprendimiento de las celulas hijas (GEMACION). Se va formando un deposito grisaceo El azucar actua como sustrato Levadura en agua azucarada mas lactofenol safranina: Se observa con mayor nitidez las levaduras. Al adicionar el lactofenol safranina, retrasa el desprendimiento de las celulas hijas. No hay una reproduccion normal. DISCUSION Las levaduras son microorganismos unicelulares importantes para la fermentacin, su reproduccin es por gemacin, presentando en su mayora forma ovoide y bacilar. El lactofenol safranina es un reactivo que retrasa el crecimiento normal de las levaduras por su accin desfavorable.

VI.

CONCLUSION De la prctica realizada, se concluye que: Las levaduras al ser observadas en el microscopio, tienen la forma de clulas esfricas u ovoides aunque tambin se distingue en forma bacilar. RECOMENDACIONES Disolver bien la solucin, hasta homogenizar. Cambiar la malla de asbesto, por otro material menos contaminante. Realizar una mejor distribucin de la muestra en el portaobjetos. Utilizar una aguja enmangad

VII.

VIII.

BIBLIOGRAFIA Roger Y. STANIER, 2005.Microbiologia general. Sarles William Bowen,1998.Microbiologia general y aplicada.Edit. Salvat S.A. Barcelona,Madrid.345p http://www.saberdeciencias.com.ar/index.php/apuntes-de-micologia/160micologia-hongos-morfologia-reproduccion(visto 14 de setiembre 2012) ANEXO

IX.

MUESTRA DE LEVADURA OBSERVADA AL MICROSCOPIO (MUESTRA MAS AGUA AZUCARADA)

PREPARACION DE MUESTRA CON LACTOFENOL

MUESTRA CON LACTOFENOL