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Foto: Cludio Nores Rocha

ISSN 1679-6535 Agosto, 2005 Fortaleza, CE

Fermentao em Estado Slido: Uma Alternativa para o Aproveitamento e Valorizao de Resduos Agroindustriais Tropicais
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Gustavo Adolfo Saavedra Pinto 1 Edy Sousa de Brito1 Andrea Maria Rodrigues Andrade2 Sandra Lcia Pinheiro Fraga3 Renata Beltro Teixeira3

A gerao de resduos e subprodutos inerente a qualquer setor produtivo. O aumento da conscientizao ecolgica, iniciado no final do Sculo XX, deixou claro que o grande desafio da humanidade para as prximas dcadas equilibrar a produo de bens e servios, crescimento econmico, igualdade social e sustentabilidade ambiental. Os setores agroindustrial e de alimentos produzem grandes quantidades de resduos, tanto lquidos como slidos. Esses resduos podem apresentar elevados problemas de disposio final e potencial poluente, alm de representarem, muitas vezes, perdas de biomassa e de nutrientes de alto valor. Ao contrrio do que acontecia no passado, quando resduos eram dispostos em aterros sanitrios ou empregados sem tratamento para rao animal ou adubo, atualmente, conceitos de minimizao, recuperao, aproveitamento de subprodutos e bioconverso de resduos so cada vez mais difundidos e necessrios para as cadeias agroindustriais (Laufenberg et al., 2003). Particularmente, a bioconverso dos resduos agrcolas e da indstria de alimentos est recebendo crescente ateno, uma vez que essas matrias residuais representam recursos possveis e utilizveis para a sntese de produtos
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teis. Nesse contexto, a fermentao em estado slido (FSS) desempenha um papel de destaque no aproveitamento de resduos slidos, pois, em virtude do crescimento microbiano, ocorre a sntese de diversos compostos, dos quais muitos apresentam grande interesse para segmentos industriais, alm de elevado valor agregado. Mundialmente, as atuais linhas de pesquisa em FSS so o enriquecimento protico de resduos agroindustriais, onde microrganismos selecionados aumentam o teor protico desses materiais, de modo a serem utilizados na alimentao humana ou animal; a destoxificao de resduos, por meio da eliminao de substncias recalcitrantes que impedem sua aplicao intensiva; e a produo de compostos de alto valor agregado, como enzimas e diferentes metablitos (Raimbault, 1998; Pandey, 2003). O termo fermentao em estado slido, ou fermentao semi-slida, ou fermentao em meio semi-slido aplica-se ao processo de crescimento de microrganismos sobre substratos slidos sem a presena de gua livre. A gua presente nesses sistemas encontra-se ligada fase slida, formando uma fina camada na superfcie das partculas (Raimbault, 1998).

Qumico, D.Sc., Embrapa Agroindstria Tropical, Rua Dra. Sara Mesquita 2.270, Pici, Caixa Postal 3761, CEP 60511-510, Fortaleza, CE. E-mail: gustavo@cnpat.embrapa.br Eng. de Alimentos, B.Sc., Universidade Federal do Cear. Eng. Qumica, B.Sc., Universidade Federal do Cear.

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Fermentao em Estado Slido: Uma Alternativa para o Aproveitamento e Valorizao de Resduos Agroindustriais Tropicais

A FSS, tambm, apresenta as seguintes caractersticas:

extremamente heterogneos, e que servem tanto como fonte de carbono e energia quanto de suporte para o crescimento microbiano (Pandey, 2003). A heterogeneidade dos substratos no diz respeito apenas a variaes existentes entre diferentes lotes de matria-prima utilizada, mas tambm s variaes na estrutura qumica de cada uma das molculas presentes e proporo entre os diferentes componentes, que podem variar de acordo com a espcie e o tecido vegetal. Dessa forma, cada substrato, com potencial de uso em FSS, deve ser cuidadosamente avaliado. Considerando-se o grande potencial do Brasil para a produo agrcola, h uma grande gerao de resduos ou subprodutos agroindustriais. Nesse sentido, a fermentao em estado slido se apresenta como uma tecnologia capaz de propor caminhos alternativos para os resduos gerados, diminuindo possveis problemas ambientais, bem como, de agregar valor a essas matrias-primas, por meio da produo de substncias de interesse econmico, como enzimas, hormnios, cidos orgnicos, aromas, pigmentos e agentes de controle biolgico de pragas (Tabela 1), entre outros, e com isso contribuir para uma maior diversificao do agronegcio nacional. Em escala comercial, uma das principais aplicaes da FSS a produo de cido ctrico a partir de farelo de trigo. Esse processo, conhecido por Koji, representa um quinto de todo o citrato produzido anualmente no Japo (Pandey et al., 2001). Para demonstrar a potencialidade de matrias-primas tropicais produzidas no Estado do Cear, foi avaliada a capacidade de produo de poligalacturonase por Aspergillus niger, em pelcula de amndoa de caju e em casca de maracuj. Primeiro, avaliou-se como a adio de diferentes volumes de gua aos substratos influencia os parmetros umidade e atividade de gua. Na Tabela 2 observam-se os resultados obtidos para casca de maracuj triturada e pelcula da amndoa de caju. Em virtude das caractersticas particulares de cada substrato, como composio qumica, estrutura, umidade inicial, entre outras, os mesmos volumes de gua adicionados levaram obteno de valores similares de umidade nos meios, mas a isotermas de saturao da matriz, representadas pela aw distintas. Em uma segunda etapa, foi acompanhado o crescimento

A fase slida atua como fonte de carbono, nitrognio e demais componentes, alm de servir como suporte para o crescimento das clulas microbianas. O ar, necessrio ao desenvolvimento microbiano, deve atravessar os espaos vazios do meio a presses relativamente baixas. O substrato no deve apresentar aglomerao das suas partculas individuais. O crescimento microbiano ocorre em condies mais prximas s dos habitats naturais. O meio apresenta alta heterogeneidade e os substratos no esto completamente acessveis ao microrganismo.

Diferentes tipos de microrganismos como bactrias, leveduras e fungos filamentosos podem crescer em substratos slidos (Aidoo et al., 1982). Contudo, so os fungos filamentosos os mais adaptveis a esse tipo de processo, pois so capazes de crescerem com pouca gua e muitos slidos presentes, alm de sua forma de crescimento, por meio de hifas, favorecer a colonizao do meio (Durand, 2003). Esse fato se traduz na grande quantidade de aplicaes e produtos obtidos pelo emprego desses microrganismos (Tabela 1). De todos os parmetros que influenciam o processo fermentativo, a gua apresenta papel de destaque na FSS, em virtude do seu elevado grau de interao com as substncias que compem a fase slida (Gervais & Molin, 2003). Na FSS, a gua est relacionada a dois parmetros: o primeiro, a umidade, diz respeito porcentagem de gua na massa total do meio; o segundo, a atividade de gua (aw), de compreenso um pouco mais complicada, um parmetro termodinmico relacionado ao potencial qumico da gua, ou seja, quantidade de molculas de gua disponveis nas vizinhanas imediatas das partculas do substrato. Para o entendimento da FSS, a umidade tem se mostrado menos elucidativa que a atividade de gua, pois esta ltima afeta diretamente o crescimento microbiano e a sntese de metablitos. Os substratos para FSS so, em geral, resduos ou subprodutos da agroindstria (Pandey, 2003). Farelos, cascas, bagaos e outros so materiais considerados viveis para a biotransformao (Tabela 1). So recursos naturais renovveis e produzidos em grandes quantidades, o que, algumas vezes, faz com que se tornem um problema ambiental. A estrutura desses materiais tem como seus principais componentes celulose, hemicelulose, lignina, amido, pectina e protenas, o que os caracteriza como materiais

da linhagem e avaliada a produo de poligalacturonase, onde os diferentes valores de atividade de gua dos meios tiveram grande impacto.

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Tabela 1. Produtos que podem ser obtidos por fermentao em estado slido a partir de diferentes resduos e fungos filamentosos (Adaptado de Pinto, 2003). Produto / Processo Enzimas Pectinases Lentinus edodes Aspergillus carbonarius Aspergillus niger Hemicelulases Trichoderma longibrachiatum Aspergillus tamarii Celulases Amilases Protease Lipases Fitase Tanase Substncias orgnicas cido ctrico Aspergillus niger Aspergillus niger Aspergillus niger Aspergillus niger cido giberlico Pigmentos Carotenides Enriquecimento protico Biorremediao Biopolpao Gibberella fujikoroi Monascus purpureus Penicillium sp. Penicillium decumbens Rhizopus oligosporus Pleurotus ostreatus Pleurotus sp. Resduo de ma Bagao de cana Resduos de goiaba Resduos de abacaxi Farelo de trigo Arroz Sabugo de milho Palha de milho Farinha de colza Materiais lignocelulsicos Farelo de trigo Trichoderma reesei Aspergillus niger Aspergillus niger Rhizopus oryzae Penicillium restrictum Aspergillus niger Aspergillus niger Resduos de frutas Farelo de trigo Polpa de caf Farelo de trigo Farelo de trigo / Sabugo de milho / Bagao de cana Palha de trigo Farelo de trigo Resduos de ch Farelo de trigo Torta de babau Farelo de trigo / Farinha de soja Farelo de trigo Microrganismos principais Substratos

Tabela 2. Umidade e aw dos meios esterilizados obtidos para cada volume de gua adicionado a 100 g de dois resduos agroindustriais tropicais. Volume de gua adicionado a 100 g de resduo (mL) 50 100 150 200 250 Casca de maracuj triturada Umidade (%) 38,0 53,5 62,8 69,0 73,4 aw 0,911 0,962 0,975 0,980 0,985 Pelcula de amndoa de caju Umidade (%) 36,3 52,2 61,8 68,2 72,7 aw 0,968 0,978 0,982 0,986 0,993

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As Figuras 1 e 2 mostram o crescimento da linhagem A. niger CNPAT 001 nos dois meios avaliados. Observou-se que os maiores nveis de crescimento foram obtidos quando a aw inicial foi entre 0,96 e 0,97. Valores de aw inicial muito baixos (0,911), ou muito elevados (0,985), foram desfavorveis ao crescimento. Baixos nveis de aw significam baixa disponibilidade de molculas de gua nas

proximidades das clulas, dificultando a troca de solutos na fase slida e, com isso, diminuindo o metabolismo e acarretando menores taxas de crescimento ou de sntese de metablitos. Em contrapartida, elevados nveis de aw dificultam a difuso de ar pelas partculas slidas; como a linhagem aerbica, esse efeito, tambm, leva reduo no crescimento.

Foto: Cludio Nores Rocha

Fig. 1. Crescimento da linhagem A. niger CNPAT 001 aps 96 horas de crescimento em meio de pelcula de amndoa de caju. As fotografias A, B, C, D e E representam, respectivamente, os meios com 50, 100, 150, 200 e 250 mL de gua adicionados a 100 g de matria slida.

Foto: Cludio Nores Rocha

Fig. 2. Crescimento da linhagem A. niger CNPAT 001 aps 96 horas de crescimento em meio de casca de maracuj triturada. As fotografias A, B, C, D e E representam, respectivamente, os meios com 50, 100, 150, 200 e 250 mL de gua adicionados a 100 g de matria slida.

A produo da poligalacturonase, tambm, foi afetada pelos diferentes nveis de aw inicial (Fig. 3). A resposta de sntese teve seu timo, quando esse parmetro ficou entre 0,96 e 0,97. Nos meios onde foram adicionados 50 e 250 mL de gua por 100 g de fase slida, apesar de se observar crescimento, no foi possvel observar a sntese da enzima. Os perfis de produo foram diferentes para cada meio. Os maiores rendimentos (21,85 U/g) e produtividade (0,91 U/g/h) foram obtidos com casca de maracuj triturada. Este trabalho mostrou a viabilidade do uso de duas dessas matrias-primas testadas, contudo outros experimentos

sero realizados, de forma a maximizar a sntese de poligalacturonase. Outros resduos agroindustriais produzidos na Regio Nordeste, como torta de mamona, casca de coco, torta de babau, cascas, pelculas e bagaos de frutas tropicais obtidas aps despolpamento, tambm, podem ser utilizados na FSS. Outras enzimas e substncias, de interesse de diferentes segmentos industriais, podem ser obtidas por esse tipo de processo, em fbricas de menor porte, porm de elevado nvel tecnolgico, com matrias-primas regionais. Esse fator pode se tornar uma vantagem competitiva, em comparao com empresas que utilizam a fermentao submersa.

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Fig. 3. Atividade de poligalacturonase sintetizada por A. niger CNPAT 001 por FSS de casca de maracuj triturada e pelcula de amndoa de caju.

Referncias
AIDOO, K.E.; HENRY, R.; WOOD, B.J.B. Solid state fermentations. Advances in Applied Microbiology, v.28, p.201-237, 1982. DURAND, A. Bioreactors desings for solid state fermentation. Biochemical Engineering Journal, v.13, n.2/3, p.113-125, 2003. GERVAIS, P.; MOLIN, P. The role of water in solid state fermentation. Biochemical Engineering Journal, v.13, n.2/3, p.85-101, 2003. LAUFENBERG, G.; KUNZ, B.; NYSTROM, M. Transformation of vegetable waste into value added products: (A) The uppgrading concept; (B) Pratical implementations.

Bioresource Technology, v.87, n.2, p.167-198, 2003. PANDEY, A. Solid state fermentation. Biochemical Engineering Journal, v.13, n.2/3, p.81-84. 2003. PANDEY, A.; SOCCOL, C.R.; RODRIGUEZ-LEON, J.A.; NIGAM, P. Solid state fermentation in biotechnology. Nova Deli: Asiatech, 2001. 221p. PINTO, G.A.S. Produo de tanase por Aspergillus niger. 2003. 207p. Tese (Doutorado em Tecnologia de Processos Qumicos e Bioqumicos) - Escola de Qumica, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro. RAIMBAULT, M. General and microbiological aspects of solid substrate fermentation. Eletronic Journal of Biotechnology, v.1, n.3, 1998.

Comunicado Tcnico, 102

Exemplares desta edio podem ser adquiridos na: Embrapa Agroindstria Tropical Endereo: Rua Dra. Sara Mesquita 2270, Pici, CEP 60511-110 Fortaleza, CE Fone: (0xx85) 3299-1800 Fax: (0xx85) 3299-1803 / 3299-1833 E-mail: negocios@cnpat.embrapa.br 1a edio on line: agosto de 2005

Comit de Publicaes

Presidente: Valderi Vieira da Silva Secretrio-Executivo: Marco Aurlio da Rocha Melo Membros: Henriette Monteiro Cordeiro de Azeredo, Marlos Alves Bezerra, Levi de Moura Barros, Jos Ednilson de Oliveira Cabral, Oscarina Maria Silva Andrade e Francisco Nelsieudes Sombra Oliveira. Supervisor editorial: Marco Aurlio da Rocha Melo Reviso de texto: Maria Emlia de Possdio Marques Editorao eletrnica: Arilo Nobre de Oliveira Normalizao bibliogrfica: Ana Ftima Costa Pinto.

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