Table 1-1 Concordncia em Percentagem com o Mtodo de Referncia Number of Agente Antimicrobiano Strains Tested CIM1 Categrica2 Amoxicilina/K

Clavulanato formato CIM 591 97 -formato Breakpoint 592 -97 Ampicilina formato CIM 592 96 -formato Breakpoint 593 -96 Ampicilina/Sulbactam formato CIM 593 97 -formato Breakpoint 594 -100 Cefamandol formato CIM 594 95 -formato Breakpoint ---Cefazolina formato CIM 592 92 -formato Breakpoint 592 -96 Cefotaxima formato CIM 594 91 -formato Breakpoint 594 -95 Ceftriaxone formato CIM 593 93 -formato Breakpoint 593 -98 Cefuroxime formato CIM 594 93 -formato Breakpoint 594 -95 Cefalotina formato CIM 594 99 -formato Breakpoint 594 -99 Cloranfenicol formato CIM 594 95 -formato Breakpoint 594 -99 Ciprofloxacina formato CIM 594 99 -formato Breakpoint 594 -100 Clindamicina formato CIM 593 91 -formato Breakpoint 594 -94 Eritromicina formato CIM 594 95 -formato Breakpoint 594 -97 Gentamicina3 formato CIM 345 95 -formato Breakpoint 346 -98 Imipenem formato CIM 593 94 -formato Breakpoint 594 -98 NitroFurantona formato CIM 594 98 -formato Breakpoint 594 -98 Norfloxacina formato CIM 593 99 -formato Breakpoint 594 -100 Oxacilina3 formato CIM4 319 91 -formato Breakpoint 320 -93 Penicilina formato CIM 593 93 -formato Breakpoint 594 -96 Rifampina formato CIM 594 98 -formato Breakpoint 594 -99 Tetraciclina formato CIM 594 95 -formato Breakpoint 594 -98 Trimetoprim/Sulfametoxazol5 formato CIM 440 97 -formato Breakpoint 441 -96 Vancomicina formato CIM 593 100 -formato Breakpoint 594 -100 1. Os resultados foram comparados com uma CIM de referncia. A concordncia baseia-se numa variao de 1 poo entre a CIM do teste e a CIM de referncia. 2. A anlise qualitativa dos resultados da CIM baseiam-se nos padres da NCCLS. 3. Os Streptococcaceae foram eliminados dos resultados de Oxacilina e Gentamicina, reduzindo assim o nmero total de organismos. 4. L. monocytogenes foi eliminado, reduzindo assim o nmero total de organismos. 5. Os Beta Estreptococos, Estreptococos Viridans, e S. pneumoniae foram eliminados, reduzindo assim o nmero total de organismos.

Assistncia Tcnica Aps a repetio do teste, se for obtido um ponto final de controlo da qualidade que no coincida com o resultado esperado, ou no caso de surgir qualquer questo ou preocupao relativa aos Painis Rpidos MicroScan ou aos acessrios, contactar o Centro de Assistncia Tcnica da MicroScan ou o distribuidor local.

Material de referncia/Bibliografia
1. Catlin, W.B..1975. Iodometric Detection of Haemophilus influenzae beta-lactamase: rapid presumptive test for ampicillin resistance. Antimicrob. Ag and Chemoth. 7:265. 2. Littel, K.I., and P. A. Hartman. 1983. Fluorogenic selective and differential medium for isolation of fecal streptococci. Appl. Environ. Microbiol. 45: 622. 3. Mandell, G.L., D. Kaye., M.E. Levison, et al. 1970. Enterococcal endocarditis: An analysis of 38 patients observed at the New York Hospital - Cornell Medical Center. Arch. Int. Med. 125: 158. 4. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically. 2003. Approved Standard M7-A6. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Wayne, PA. 5. Moellering, R.C., C. Wennersten, and A.N. Weinberg. 1971. Studies on antibiotic synergism against enterococci: I. Bacteriological Studies. J. Lab. Clin. Med. 77: 821. 6. Murray, P. R., E. J. Baron, J. H. Jorgensen, M.A. Pfaller, and R. H. Yolken (eds), 2003. Manual of Clinical
Microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington D. C.

MicroScan Manual de procedimentos Gram-positivos rpidos

Ateno: As alteraes ao manual de procedimentos so indicadas atravs de sombreamento.

Fim a que se destina

Os Painis Rpidos MicroScan (a partir daqui referenciados como Painis rpidos) so concebidos para utilizao na determinao da identificao ao nvel da espcie e/ou sensibilidade a agentes antimicrobiticos de cocos Gram positivos facultativos e alguns cocos Gram positivos aerbios fastidiosos (Micrococcaceae e Streptococcaceae) e L. monocytogenes. Os Painis rpidos incluem Combo Pos Rpido Tipo 1, Breakpoint Rpido Pos Combo 1, e Rpido Pos CIM Tipo 1 e utilizam painis de microdiluio de 96 poos.

7. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing, 2003. NCCLS Document M100-S13. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Villanova, PA. 8. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing. 1997. NCCLS Document M100-S7. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Wayne, PA. 9. Slifkin, M., and G.M., Gill. 1983. Rapid biochemical tests for the identification of groups A,B,C,F, and G streptococci from throat cultures. J. Clin. Microbiol. 18: 29. 10. Smith, R.E., E.R. Bissell, A.R. Mitchell, and K.W. Pearson. 1980. Direct photometric or fluorometric assay of proteinases using substrates containing 7-amino-4-trifluoromethylcoumarin. Thrombosis Research. 17: 393. 11. Watson, R.R. 1976. Substrate specificities of aminopeptidases: a specific method for microbial differentiation. Methods Microbiol. 9:1. 12. Communiqu CA-SFM 1998. Pathol Biol 1998, 46, n8, I-XVI ou celui de l'anne en cours. 13. Methoden Zur Empfindlichkeitsprfung von bakteriellen Krankheitserregern (auer Mykobakterien) gegen Chemotherapeutika. Oktober 1997. Entwurf Beiblatt 1 zu DIN 58940 Teil 4. 14. Centers for Disease Control and Prevention. 2004. Brief Report: vancomycin-resistant Staphylococcus aureus --- New York, 2004. Morbid. Mortal. Weekly Rep. 53:322-323.

Resumo e Princpios
Os testes de sensibilidade a agentes antimicrobianos so miniaturizaes do teste de sensibilidade com caldo de diluio. Vrios agentes antimicrobianos so diludos em gua destilada em autoclave com compostos fluorognicos para concentraes que cobrem o intervalo de interesse clnico. Trimetoprim/Sulfametoxazol contm timidina-fosforilase para reduzir os nveis de timidina. Aps a inoculao com uma suspenso padronizada do organismo em caldo de inculo Pos Rpido incubado a 35 C no Sistema WalkAway durante 3,5 -15 horas, a CIM do organismo teste determinada atravs da medio do aumento de fluorescncia nas diluies do agente antimicrobiano, em comparao com o aumento de fluorescncia nos poos de controlo de crescimento. So utilizados substratos fluorognicos ou indicadores fluoromtricos para a identificao de Micrococcaceae, Streptococcaceae, L. monocytogenes e Aerococcus viridans. A identificao baseada na hidrlise dos substratos fluorognicos, em alteraes de pH aps a utilizao do substrato, na produo de subprodutos metablicos especficos ou na taxa de produo de subprodutos metablicos especficos aps 2 horas de incubao a 35 C nos Sistemas WalkAway.2, 12-14 Cuidado: A legislao federal nos Estados Unidos limita a venda e distribuio deste dispositivo por um mdico ou por ordem deste, bem como a um laboratrio clnico, estando a sua utilizao restringida ao mdico ou ordem deste.

Agente Antimicrobiano Amoxicilina/Clavulanato de K Ampicilina - Estreptococos No Enteroccitos Ampicilina Ampicilina/Sulbactam Cefamandol Cefazolina Cefotaxima Ceftriaxone Cefuroxime Cefalotina Cloranfenicol Ciprofloxacina Clindamicina Eritromicina Gentamicina Despistes Sinrgicos de Gentamicina Imipenem NitroFurantona Norfloxacina Oxacilina Penicilina Rifampina Despiste Sinrgico da Estreptomicina Tetraciclina Trimetoprim/Sulfametoxazol Vancomicina

Abrev. Aug Am-NE Am A/S Cfm Cfz Cft Cax Crm Cf C Cp Cd E Gm GmS Imp Fd Nxn Ox P Rif StS Te T/S Va

Rapid Pos Combo Type 1 Dilutions g/ml 2/1-4/2 0.12, 2 2-16 8-16 1-4 0.25-2 0.25-4 1-4, 6 2000 2-8 32-64 0.5-4 0.03-2, 8 2000 2-8, 128 2/38, 8/152 2-16

Rapid Pos Breakpoint Combo Type 1 Dilutions g/ml 2/1-4/2 0.12-0.5, 2, 8 8/4-16/8 8-16 8, 32 8, 32 8-16 8-16 8-16 1-4 0.5, 2 0.5, 4 4-8 2000 4-8 32-64 4-8 1-2 0.03-0.12, 0.5-2, 8 1-2 2000 4-8 2/38, 8/152 4, 16

Rapid Pos MIC Type 1 Dilutions g/ml 2/1-4/2 0.12-8 8/4-16/8 8-16 2-16 4-32 4-32 2-16 8-16 4-16 1-4 0.25-2 0.25-4 1-4, 6, 8 2000 1-8 32-64 4-8 0.25-8 0.03-8 1-2 2000 0.5-8, 128 2/38, 8/152 2-16

Declarao da Garantia
Garante-se o desempenho destes produtos como descrito nas etiquetas e na literatura da MicroScan, quando utilizados de acordo com as respectivas instrues. NO EXISTEM QUAISQUER GARANTIAS QUE SE ESTENDAM ALM DESTA GARANTIA EXPRESSA E A DADE BEHRING INC NO RECONHECE QUAISQUER GARANTIAS INFERIDAS DE MERCANTIBILIDADE OU ADEQUAO PARA FIM PARTICULAR. A nica obrigao da Dade Behring Inc. e a compensao exclusiva para o comprador ao abrigo desta garantia ser, por opo da Dade Behring Inc., proceder reparao ou substituio dos produtos. Em nenhum caso ser a Dade Behring Inc. responsvel por quaisquer danos directos, indirectos ou consequenciais relacionados com os produtos.

Resumo do procedimento A. Preparao do painel

1. Retirar os painis a utilizar do local de armazenamento. Os painis no devem ser utilizados se no houver dessecante ou se a integridade da embalagem estiver comprometida (no selada, perfurada ou rasgada). 2. Rasgar a bolsa pelo entalhe e retirar o painel. Permitir que os painis atinjam a temperatura ambiente antes da rehidratao. Os painis podem ser empilhados com uma tampa de tabuleiro limpa colocada por cima dos mesmos.

Precaues
1. Para utilizao apenas em diagnstico in vitro. 2. Respeitar as tcnicas de assepsia e as precaues estabelecidas contra perigos microbiolgicos durante todos os procedimentos, dando especial ateno ao facto dos painis inoculados conterem organismos potencialmente patognicos. 3. Este material contm agentes infecciosos e deve ser autoclavado ou incinerado antes da sua eliminao adequada. 4. At data, nenhum dado demonstrou que os substratos fluorognicos utilizados so oncognicos. 5. Para efeitos de diagnstico e tratamento, os resultados deste teste devem sempre ser interpretados em conjunto com o histrico mdico do doente, a apresentao clnica e outras indicaes.

B. Preparao do inculo
1. Utilizando uma ponta aplicadora de madeira ou uma ansa bacteriolgica estreis, tocar na superfcie de colnias bem isoladas e morfologicamente semelhantes (4-5 colnias grandes ou 5-10 colnias pequenas) contidas numa placa de gelose de soja tripticase com sangue de ovelha a 5%, incubada durante 18-24 horas. 2. Emulsionar em 6.5 ml de soluo salina a 0.4% com PLURONIC. Para garantir uma distribuio uniforme do crescimento bacteriano na soluo salina com PLURONIC, esfregar a ponta aplicadora ou mex-la no fundo ou na lateral do tubo. Esta operao ir reduzir a "agregao" e auxiliar a emulsificao do crescimento mucide. 3. A turvao final deve ser equivalente de um padro de turvao McFarland 0.5 de sulfato de brio. Deve ser feita a comparao da soluo salina com PLURONIC e o padro McFarlandutilizando um nefelmetro ou uma fonte de luz adequada atravs da comparao dos tubos contra um carto branco com linhas negras contrastantes. Colocar uma tampa bem ajustada. 4. Agitar a suspenso no vortex durante 2-3 segundos. 5. Pipetar 300 ml (0,3 ml) da suspenso salina padronizada para 25 ml de caldo de inculo Pos Rpido. Inverter 8-10 vezes para misturar. 6. Conservar os restantes 6,2 ml da suspenso salina padronizada.

Chave dos smbolos

Fabricado por Data "Utilizar at" no formato ano-ms-dia Consultar as instrues de utilizao Txico

Armazenamento
Os Painis Rpidos MicroScan devem ser armazenados a 2-8 C.

Deteriorao do produto
A exposio prolongada a condies de armazenamento diferentes das recomendadas pode resultar numa perda de fora dos agentes antimicrobianos ou na hidrlise dos substratos de identificao com consequente excesso de fluorescncia e perda de actividade.

Representante autorizado

R22
XC XC

Limitao de temperatura

Facilmente inflamvel

Nocivo por ingesto. Evitar o contacto com a pele. Evitar o contacto com os olhos.
Em caso de ingesto, consultar imediatamente um mdico e mostrarlhe a embalagem ou etiqueta.

Colheita e preparao das amostras

As amostras apropriadas devem ser recolhidas, transportadas e colocadas em meios de isolamento primrio, de acordo com os procedimentos recomendados no Manual of Clinical Microbiology.6

S24 S25 S46

IVD

Dispositivo de diagnstico mdico In Vitro

Marca CE

Irritante/ Nocivo

Procedimento Materiais fornecidos

Combo Pos Rpido Tipo 1 (B1017-23) Breakpoint Rpido Pos Combo Tipo 1 (B1017-33) Rpido Pos CIM Tipo 1 (B1017-32) Manual de procedimentos

C. Rehidratao/Inoculao dos painis

1. Combo Pos Rpido e Combo Breakpoint a. A rehidratao e a inoculao so efectuadas utilizando o sistema Rehidratador/Inoculador MicroScan RENOK com Inoculadores R. b. Retirar a tampa de transferncia do conjunto do inoculador. Deitar os 25 ml de caldo de inculo Pos Rpido na poro superior do tabuleiro de sementeira e os 6.2 ml de suspenso salina padronizada na poro inferior do tabuleiro de sementeira. c. Voltar a colocar a tampa de transferncia e fixar o Rehidratador/Inoculador RENOK. Consultar o Manual do Operador do Rehidratador/Inoculador RENOK, para obter instrues de funcionamento. 2. Rpido Pos CIM a. A rehidratao e a inoculao so efectuadas utilizando o sistema Rehidratador/Inoculador MicroScan RENOK com Inoculadores D. b. Retirar a tampa de transferncia do conjunto do inoculador. Deitar os 25 ml de caldo de inoculo Pos Rpido no tabuleiro de sementeira. c. Voltar a colocar a tampa de transferncia e fixar o Rehidratador/Inoculador RENOK. Consultar o Manual do Operador do Rehidratador/Inoculador RENOK, para obter instrues de funcionamento. 3. Se for utilizado um sistema alternativo, rehidratar cada um dos poos com 115 l 10 l da suspenso adequada. NOTA: A concentrao final do poo nos substratos de identificao deve ser de 1.5 X 108 CFU/ml e nos agentes antimicrobianos deve ser de 1.8 X 106 CFU/ml.

L OT

Cdigo de fabrico

REF

Nmero de catlogo

Corrosivo

Materiais no fornecidos mas disponveis na MicroScan

Caldo de inculo Pos Rpido, 25 ml (B1015-14) Soluo salina a 0.4% com PLURONIC*, 6.5 ml (B1015-11) Rehidratador/Inoculador RENOK (B1018-14) ou equivalente Inoculador-R para Painis Combo (B1013-6) ou Inoculador-D para Painis CIM (B1013-4) Sistema WalkAway (B1018-281 o B1018-282) Tampas de tabuleiro do sistema WalkAway (B1018-18) Etiqueta de cdigo de barras do Sistema WalkAway (B1011-16 ou B1018-129) Impressora de cdigos de barras do Sistema WalkAway (B1018-128) Medidor de turvao (B1018-66) Organismos de controlo da qualidade (consultar a seco CQ deste manual)

Materiais no fornecidos
Placas de gelose de soja tripticase com sangue de ovelha a 5% Padro McFarland 0.5 de sulfato de brio Pipetador de 300 ml com pontas esterilizadas descartveis Varetas aplicadoras em madeira esterilizadas ou ansa bacteriolgica Agitador vortex Bacti-Cinerator ou bico de Bunsen Substratos do Painel de Identificao Rpido Pos Substratos de identificao Abreviatura Ureia URE MEU*- -L-Arabinosida ALAR, ALR2 MEU--D-Galactopiranosida AGAL MEU--D-Galactopiranoside BGAL, MEU--D-Glicopiranosida AGL, AGL2 MEU--D-Glicopiranosida BGL, BGL2 MEU--D-Glucurnido BGLR MEU--D-Celobiosida CELB, CLB2 MEU--D-N,N-Diacetilcitobiosida CHB MEU--D-Manopiranosida MANO MEU-N-Acetil--D-Glucosaminida NAG, NAG2 MEU-N-Acetil--D-Galactosaminida NGAL MEU-Fosfato PHO, PHO2 L-Alanina-AMC** ALA, ALA2 L-Arginina-AMC ARG L-Citrulina-AMC CIT -L-cido Glutmico-AMC AGLT Leucina-AMC LEU
* 4-Metilumbeliferill ** 7-Amido-4-Metilcoumarina * Surfactantes PLURONIC. Marca commercial registada da BASF Corporation, Parsippany, NJ EUA.

D. Incubao
1. Etiquetar cada painel com uma etiqueta de cdigo de barras do Sistema WalkAway e colocar uma tampa de tabuleiro do Sistema WalkAway em cada painel. 2. Inserir os painis em qualquer ranhura aberta disponvel do Sistema WalkAway. Consultar o Manual do Operador do Sistema WalkAway, para obter instrues de funcionamento. 3. Os painis so incubados durante um mximo de 15 horas antes da leitura final. Abreviatura LYE MET PHE, PHE2 PYG TYR CEL GLU GLYC LAC MAL MAN MEL RAF SAL SUC TRE TFG OXG

0800-170417 SAC - Servio de Atendimento ao Cliente sac/brazil@dadebehring.com

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Dade Behring Limited Regus House, Atterbury Milton Keynes MK10 9RG United Kingdom

Substratos de identificao L-Lisina-AMC Metionina-AMC L-Fenilalanina-AMC L-cido Piroglutmico-AMC L-Tirosina-AMC Celobiose Glicose Glicerol Lactose Maltose Manitol Melibiose Rafinose Salicina Sucrose Trealose Poo de crescimento sem timidina Poo de crescimento com oxacilina

E. Leitura dos painis

O sistema WalkAway efectua a leitura dos substratos de identificao aps 2 horas de incubao a 35 C. As leituras das CIM so efectuadas passadas 3.5, 4.5, 5.5, 7, 8, 11 e 15 horas. Consultar o Manual do Operador do Sistema WalkAway, para obter instrues de funcionamento. 1. Leitura das sensibilidades a agentes antimicrobianos (CIM) A CIM registada como sendo correspondente ao primeiro poo que apresenta inibio do crescimento, comeando pela concentrao mais baixa. O crescimento detectado como um aumento na fluorescncia, em comparao com o poo de controlo do crescimento e, somente para a oxacilina, com o Poo de crescimento com oxacilina. A inibio de crescimento detectada pela ausncia de fluorescncia, em comparao com o poo de crescimento. NOTA: Se no for detectado qualquer crescimento aps 15 horas no poo de controlo do crescimento, os resultados da CIM no sero registados. Este facto no ter qualquer impacto sobre as leituras de identificao efectuadas anteriormente. 2. As alteraes na intensidade da fluorescncia na Leitura dos Substratos de Identificao so utilizadas como um indicador da positividade ou da negatividade dos substratos de identificao.

F. Controlo da Qualidade
A aceitabilidade dos substratos de identificao e dos agentes antimicrobianos deve ser verificada testando os organismos em reaces e intervalos de CIM conhecidos. Os resultados para os organismos de controlo de qualidade da American Type Culture Collection (ATCC*) recomendados esto registados nas tabelas de controlo da qualidade (CQ). Nota importante: Assegurar-se de que quaisquer alteraes ao controlo da qualidade sejam igualmente efectuadas no Programa de Controlo da Qualidade do Sistema de gesto de dados.

Copyright 2004, Dade Behring Inc. All Rights Reserved.

* American Type Culture Collection, Manassas, VA EUA

Revised Setembro 2004

3250-7842A

1. Substratos de identificao S. epidermidis ATCC 49134 URE ALAR AGAL BGAL1 AGL BGL BGLR CELB CHB MANO NAG NGAL PHO ALA ARG1 CIT1 AGLT LEU1 LYE1 MET PHE1 PYG TYR CEL GLU1 GLYC LAC MAL1 MAN MEL RAF SAL SUC1 TRE + + + v v v v v + + v + + -

Breakpoint Rpido Pos Tipo 13

E. faecalis ATCC 29212
v + + + + + + + v v v + v + + v + + + + + + + v + + + +

Oxacilina1

Ox

E. durans ATCC 49135

+ + + v + + + + + v v v + v v + + + + + + + v v v v v + v

S. bovis II ATCC 49133

+ + + + + + + v + + + + + + v + + + + + + + + +

S. pneumoniae ATCC 49136

+ + + v + + + + + v + + + + v + v v v v v v v v v v

1. Pode ser obtido um resultao negativo atravs da inoculao de 115 l de soluo salina a 0.4% com PLURONIC ao poo contendo o respectivo substrato. Nota: Os organismos de controlo da qualidade so seleccionados para fornecer reaces positivas/negativas para todos os substratos de identificao. Consequentemente, as identificaes de organismos podero ser diferentes do que afirmado na tabela de CQ. A aceitabilidade do desempenho do produto deve ser determinada por comparao dos resultados dos testes, no pela identificao. 2. Agentes Antimicrobianos a. Controlo - fornecido um poo de controlo em cada painel para leitura das CIM Rpidas com o Sistema WalkAway. b. Crescimento - fornecido um poo de controlo de crescimento em cada painel para demonstrar como o organismo ir crescer no meio de teste sem agentes antimicrobianos. c. Crescimento com Oxacilina - fornecido um poo de controlo de crescimento com NaCI em cada painel para demonstrar como o organismo ir crescer no meio de teste sem agentes antimicrobianos e com NaCI adicional. Este poo de controlo utilizado em conjunto com o poo de controlo de crescimento somente para estafilococos e oxacilina. d. Diluies do agente antimicrobiano - A potncia das diluies do agente antimicrobiano deve ser verificada atravs do teste de organismo com pontos finais conhecidos. A deteriorao de um agente antimicrobiano ou outras circunstncias podero resultar em CIM superiores aos intervalos aceitveis. A Norma M7-A6 da NCCLS define a estirpe de CQ ideal como uma com um CIM prximo da mdia das diluies testadas. Contudo, quando so testadas 3 ou menos diluies de um agente antimicrobiano, poder ser difcil obter um ponto final preciso.

E. faecalis 4 S. bovis S. aureus ATCC1 29212 ATCC 49475 ATCC 49476 Agentes Antimicrobianos Abrev. Range2 Range Range Ampicilina Am 8 0.12 >0.25 Ampicilina/Sulbactam A/S 8/4 8/4 8/4 Amoxicilina/K Clavulanate Aug 2/1 2/1 2/1->4/2 Cefazolina Cfz N/A 8 8->16 Cefotaxima Cft N/A 8 32->32 Ceftriaxona Cax N/A 8 32->32 Cefuroxime Crm N/A 8 8->16 Cefalotina Cf N/A 8 8->16 Cloranfenicol C 8-16 8 8 Ciprofloxacina Cp 1 2->4 1 Clindamicina Cd >2 0.5 0.5 Eritromicina E 4->4 0.5 4->4 Gentamicina Gm N/R N/R 8->8 Despiste Sinrgico de Gentamicina GmS 2000 N/R N/R Imipenem Imp 4 4 N/A NitroFurantona Fd 32-64 32->64 32->64 Norfloxacina Nxn 4 4->8 4 Oxacilina Ox N/R N/R >2 Penicilina P 0.5, 8 0.12 >0.12 Rifampina Rif 1->2 1 1 Despiste sinrgico com estreptomicina StS 2000 N/R N/R Tetraciclina Te N/A 8->8 >8 Trimetoprim/Sulfametoxazol T/S 2/38 2/38 2/38 Vancomicina Va 4 4 4 N/R = No relatado no Sistema de Gesto de Dados (SGD) N/A = No aplicvel 1. ATCC = American Type Culture Collection, Manassas, VA EUA 2. Intervalo = Valores esperados (g/ml) 3. Para pontos finais adicionais, consultar a Tabela de pontos finais adicionais de controlo da qualidade de organismos. 4. Os intervalos para E. faecalis ATCC 29212 esto de acordo com os intervalos aceitveis de controlo de qualidade da NCCLS para todos os agentes antimicrobiticos exceptuando Ampicilina/Sulbactam, Ciprofloxacina, Eritromicina, Gentamicina, NitroFurantona, Norfloxacina, Oxacilina, Tetraciclina, e o Despiste Sinrgico da Estreptomicina. O padro M100-S13 da NCCLS no apresenta uma listagem de intervalos de controlo de qualidade aceitveis para a Ampicillin/Sulbactam.

Rifampina

Rif

Despiste sinrgico com estreptomicina StS

Tetraciclina

Te

Trimetoprim/Sulfametoxazol

T/S

Combo Pos Rpido 1 Rpido Pos CIM 1 Rpido Pos BP 1 Rpido Pos CIM 1 Rpido Pos BP 1 Combo Pos Rpido 1 Rpido Pos CIM 1 Rpido Pos BP 1 Combo Pos Rpido 1 Rpido Pos CIM 1 Rpido Pos BP 1 Combo Pos Rpido 1 Rpido Pos CIM 1 Rpido Pos BP 1

S. aureus 1 ATCC 29213 E. avium ATCC 49463 E. avium ATCC 49465 S. epidermidis ATCC 49461 E. faecalis ATCC 49477

0.5-1 0.25-1 1 1-2 >2000 2-8 1-8 4-8 8/152->8/152

Despiste sinrgico com Gentamicina e Estreptomicina

Na endocardite por enterococos, a utilizao isolada de Penicilina ou Ampicilina resulta em frequentes falhas do tratamento. Quando os enterococos so sensveis in vitro a 2.000 g/ml de Estreptomicina ou Gentamicina, a adio deste agente antimicrobiano a Penicilina ou Ampicilina sinrgico e correlaciona-se clinicamente com uma taxa de cura melhorada.3,5

Poo de crescimento sem timidina

Algumas bactrias necessitam de timidina para crescer. Estas bactrias podero exibir uma falsa sensibilidade s sulfonamidas devido presena de timidina-fosforilase no caldo. Se um organismo no crescer no poo TFG, no se deve registar uma CIM para T/S.

Limitaes
1. Os painis Rpidos MicroScan destinam-se utilizao com cocos Gram positivos aerbios e L. monocytogenes. No se destinam a ser utilizados com bactrias anaerbias. 2. A interpretao dos resultados dos testes exige a interveno de pessoal clnico treinado com capacidade de avaliao e conhecimentos para executar testes de confirmao adicionais antes de aceitar a identificao de um organismo, quando tal for necessrio. 3. Se a um determinado nmero de bitipo corresponder mais do que uma identificao de espcie, podero ser necessrios ensaios suplementares determinar a identificao final. 4. Os resultados obtidos com as combinaes de organismo/agente antimicrobiano enumeradas abaixo mostraram CIM discrepantes quando comparados com um mtodo de referncia overnight. Se o agente antimicrobiano for crtico para o tratamento do doente, deve utilizar-se um procedimento alternativo, ou ento o agente antimicrobiano no deve ser referido devido a uma baixa correlao. Diluies das CIM (sequncia de 3 ou mais diluies) Droga para a qual, se for crtica para o tratamento Drogas que no do doente, deve ser utilizado sero um procedimento alternativo mencionadas1 Nenhum Diluies de Breakpoint (sequncia de 1 ou 2 diluies) Frmaco para o qual, se for crtico para o tratamento do doente, deve ser ser Drogas que no utilizado um procedimento sero alternativo mencionadas1 Nenhum Trimetoprim/ Sulfamet oxazole2 Nenhum Todos Clindamicina NitroFurantona Nenhum

1. Este intervalo de CQ no est de acordo com o intervalo aceitvel de controlo da qualidade da NCCLS listado na Tabela 3 do Padro M100-S13 da NCCLS.

Resultados A. Substratos de identificao 1. Princpios das Reaces Ureia (URE) - A enzima urease quebra a ureia formando amnia e CO2. O aumento de pH resultante detectado por um indicador de pH fluoromtrico. Testes fluorognicos (ALAR, AGAL, BGAL, AGL, BGL, BGLR, CELB, CHB, MANO, NAG, NGAL, PHO, ALA, ARG, CIT, AGLT, LEU, LYE, MET, PHE, PYG, TYR) - Se a enzima apropriada estiver presente, o complexo substrato conjugado clivado, libertando 4-metilumbeliferona ou 7amido-4-metilcoumarina, resultando num aumento da fluorescncia. Testes de taxa fluorognica (ALR2, BGL2, PHO2, CLB2, ALA2, PHE2, AGL2, NAG2) - Se a enzima adequada estiver presente, o complexo substrato conjugado clivado, libertando 4metilumbeliferona ou 7-amido-4-metilcoumarina. A taxa de libertao do fluorforo utilizada para determinar uma reaco positiva. Fermentao de hidratos de carbono (CEL, GLU, GLYC, LAC, MAL, MAN, MEL, RAF, SAL, SUC, TRE) - A fermentao de um hidrato de carbono especfico resulta na formao de cido, com a consequente descida de pH, que detectada por um indicador de pH fluoromtrico. 2. Identificao do organismo O Sistema de gesto de dados MicroScan (SGD) e o software do Sistema WalkAway incluem tabelas de probabilidades utilizadas na identificao de um organismo desconhecido. Os substratos de identificao so lidos pelo Sistema WalkAway. Os resultados so convertidos num nmero de bitipo com 15 dgitos e comparados com a base de dados gerada pela MicroScan a partir de isolamentos clnicos e de coleco de 39 espcies de bactrias Gram negativas. Todas as identificaes possveis esto listadas na ordem de maior probabilidade, at um total cumulativo de 99.9%.

Grupos de Organismos

Estafilococos Cefuroxime Imipenem coagulase negativos Estreptococos Nenhum viridans S. pneumoniae L. monocytogenses Cefamandol Ceftriaxone Enterococos Estafilococos Vancomicina

Rpido Pos CIM Tipo 13

Agentes Antimicrobiano Abrev. Amoxicilina/Clavulanato de K Aug Ampicilina Am Ampicilina/Sulbactam A/S Cefamandol Cfm Cefazolina Cfz Cefotaxima Cft Ceftriaxone Cax Cefuroxime Crm Cefalotina Cf Cloranfenicol C Ciprofloxacina Cp Clindamicina Cd Eritromicina E Gentamicina Gm Despiste Sinrgico de Gentamicina GmS Imipenem Imp NitroFurantona Fd Norfloxacina Nxn Oxacilina Ox Penicilina P Rifampina Rif Despiste sinrgico com estreptomicina StS Tetraciclina Te Trimetoprim/Sulfametoxazol T/S Vancomicina Va N/R = No relatado no SGD N/A = No aplicvel 1. ATCC = American Type Culture Collection, Manassas, VA EUA 2. Intervalo = Valores esperados (g/ml) 3. Para pontos finais adicionais, consultar a Tabela de pontos finais adicionais de controlo da qualidade de organismos. 4. Os intervalos para E. faecalis ATCC 29212 esto de acordo com os intervalos aceitveis de controlo de qualidade da NCCLS para todos os agentes antimicrobiticos exceptuando Ampicilina/Sulbactam, Ciprofloxacina, Eritromicina, Gentamicina, NitroFurantona, Norfloxacina, Oxacilina, Tetraciclina, e o Despiste Sinrgico da Estreptomicina. O padro M100-S13 da NCCLS no apresenta uma listagem de intervalos de controlo de qualidade aceitveis para a Ampicillin/Sulbactam.

B. Interpretao dos resultados de CIM

E. faecalis 4 ATCC1 29212 Range2 2/1 0.5-2 8/4 N/A N/A N/A N/A N/A N/A 4-16 1 >2 2->4 N/R 2000 1-2 32-64 4 N/R 1-4 1->2 2000 N/A 2/38 2-4 S. bovis ATCC 49475 Range 2/1 0.12 8/4 8 2 4 4 2 8 4 2->4 0.25 0.25 N/R N/R 1 32->64 4->8 N/R 0.03-0.06 1 N/R 8, 128->128 2/38 2 S. aureus ATCC 49476 Range 2/1->4/2 >0.25 8/4 8-16 16->16 32->32 16->32 16->16 8->16 4 1 0.25-0.5 4->4 8->8 N/R N/A 32->64 4 >8 >0.25 1 N/R 128->128 2/38 2
A sensibilidade determinada por comparao da CIM de um organismo com o nvel do agente antimicrobiano que pode ser atingido no sangue ou na urina. A tabela seguinte enumera os critrios interpretativos, conforme recomendados pelo Documento M100-S13 da NCCLS. Alguns destes diferem dos breakpoints interpretativos do fabricante especificados na edio de 2003 do Physicians' Desk Reference. Breakpoints Interpretativos* Agentes Antimicrobianos Abrev. Sensvel Intermdio Resistente Amoxicilina/Clavulanato de K-Estafilococos Aug 4/2 8/4 Ampicilina1 Am Estafilococos 0.25 0.5 L. monocytogenes 2 Enterococos 8 16 Estreptococos que no S. pneumoniae2 0.25 0.5-4 8 Ampicilina/Sulbactam-Estafilococos A/S 8/4 16/8 32/16 Cefazolin1-Estafilococos Cfz 8 16 32 Cefotaxima1 Cft Estafilococos 8 16-32 64 Estreptococos 2 0.5 1 2 Ceftriazona Cax 8 16-32 64 Cefuroxima axetil (oral)-Estafilococos Crm 4 8-16 32 Cefuroxima sdio (parenteral)-Estafilococos Crm 8 16 32 Cefalotina -Estafilococos Cf 8 16 32 Cloranfenicol C Todos os organismos gram positivos excepto spp. Estreptococos 8 16 32 Estreptococos2 4 8 16 Ciprofloxacina-Estafilococos e Enterococos Cp 1 2 4 Clindamicina Cd Estafilococos1 0.5 1-2 4 Estreptococos2 0.25 0.5 1 Eritromicina1 E Estafilococos e Enterococos 0.5 1-4 8 Gentamicina-Estafilococos Gm 4 8 16 Imipenem-Estafilococos Imp 4 8 16 Nitrofurantona-Estafilococos e Enterococos Fd 32 64 128 Norfloxacina-Estafilococos e Enterococos Nxn 4 8 16 Oxacilina Estafilococos negativos para a coagulase Ox 0.25 0.5 S. aureus 2 4 Penicilina G P Estafilococos1 0.12 0.25 L. monocytogenes1,4 2 1 Enterococos 8 16 Estreptococos que no S. pneumoniae2 0.12 0.25-2 4 Rifampina-Estafilococos e Enterococos Rif 1 2 4 Tetraciclina Te Todos os organismos gram positivos excepto spp. Estreptococos 4 8 16 Estreptococos2 2 4 8 Trimetoprim/Sulfametoxazol-Estafilococos T/S 2/38 4/76 Vancomicina1 Va Todos os organismos gram positivos excepto spp. Estreptococos 4 8-16 32 Estreptococos 2,4 1 *Baseado nos Breakpoints Interpretativos conforme indicado no Documento M100-S13 da NCCLS. H agentes antimicrobianos includos neste painel que no est provado serem seguros e eficazes no tratamento de infeces clnicas para todos os organismos testados. Para comunicaes sobre resultados de agentes antimicrobianos que mostraram ser activos contra grupos de organismos in vitro ou em infeces clnicas, consultar o M100 da NCCLS, Tabelas 1 e 2 ou o folheto farmacutico informativo. 1. Difere do breakpoint do fabricante. 2. Os breakpoints da NCCLS para spp. Streptococcus existem s para os indicados. Os resultados com S. pneumoniae e estreptococos viridans no devem ser comunicados com painis Gram Positivos Desidratados da Microscan. 3. Baseado nos breakpoints do fabricante. 4. A ausncia de estirpes de estreptococos resistentes impede a NCCLS de, no momento, definir quaisquer categorias de resultados alm de "Sensvel". As estirpes que originam resultados sugestivos de uma categoria "no-sensvel" devem ser submetidas a um laboratrio de referncia para testes adicionais.

Cefotaxima Eritromicina Todos Cefazolina, Cefuroxime, Clindamicina Nenhum

Nenhum

Nenhum

Vancomicina

1. Impresso suprimida no Sistema de Gesto de Dados WalkAway (SGD) 2. Apenas para isolamentos resistentes a meticilina NOTA: Os painis podem conter uma combinao de diluies de CIM e breakpoint.

Intervalos de pontos finais do controlo de qualidade Combo Pos Rpido Tipo 13

Agente Antimicrobiano Abrev. Amoxicilina/Clavulanato de K Aug Ampicilina Am Cefazolina Cfz Cefalotina Cf Ciprofloxacina Cp Clindamicina Cd Eritromicina E Gentamicina Gm Despiste Sinrgico de Gentamicina GmS Imipenem Imp NitroFurantona Fd Oxacilina Ox Penicilina P Despiste Sinrgico da Estreptomicina StS Tetraciclina Te Trimetoprim/Sulfametoxazol T/S Vancomicina Va

E. faecalis 4 ATCC 1 29212 Range 2 2/1 2 N/A N/A 1 >2 2->4 N/R 2000 2 32-64 N/R 1-2, 8 2000 N/A 2/38 2-4

S. bovis ATCC 49475 Range 2/1 0.12 2 8 2->4 0.25 0.25 N/R N/R 2 32->64 N/R 0.03-0.06 N/R 8,128->128 2/38 2

S. aureus ATCC 49476 Range 2/1->4/2 N/A 16->16 8->16 1 0.25-0.5 4->4 >6 N/R N/A 32->64 >4 >0.25 N/R 128->128 2/38 2

5. Certos agents antimicrobianos normalmente testados contra Gram positivos tm uma utilizao limitada tanto com estafilococos como com estreptococos. Embora a correlao das combinaes de agente/organismo antimicrobiano enumeradas abaixo tenha sido boa quando comparada com um mtodo de referncia overnight, a MicroScan no relatar os resultados da CIM destas combinaes como nos foi recomendado pelo nosso Antimicrobial Review Committee. Gentamicina - Todos os estreptococos e enterococos Oxacilina - Todos os estreptococos e L. monocytogenes Trimetoprim/Sulfametoxazol - estreptococos Beta, Viridans estreptococos e S. pneumoniae. 6. O teste -lactamase recomendado pela NCCLS para prever a resistncia dos estafilococos aos vrios agentes antimicrobianos -lactmicos.5 Embora o teste -lactamase no esteja incluido nos painis Rpidos Pos, este teste deve realizar-se de forma rotineira nos estafilococos uma vez que os resultados so utlizados na interpretao categrica dos agentes antimicrobianos -lactmicos pelo sistema de gesto de dados. 7. As espcies Staphylococcus que so resistentes Oxacilina sero relatadas como sendo resistentes a Ampicilina, Penicilina, Cefalospirinas, Amoxicillin/K Clavulanate, Ampicilina/Sulbactam e Imipenem. 8. Os relatrios mais recentes na literatura indicam a existncia de problemas em alguns mtodos com a deteco de estafilococos heteroresistentes. O controlo de crescimento com Oxacilina incluido nos painis Rpidos Pos concebido para auxiliar na deteco de tais organismos. Contudo, como recomendado pela NCCLS, devem ser utilizados outros critrios em conjunto com os resultados dos testes de sensibilidade Oxacilina para determinar a heteroresistncia.5 9. A utilizao de outros meios ou aditivos que no aqueles recomendados (TSA com sangue de ovelha a 5%) podem dar resultados aberrantes. Consultar o Centro de Assistncia Tcnica para obter requisitos especficos. 10. Os intervalos de CQ para E. faecalis ATCC 29212 e S. aureus ATCC 29213 no esto de acordo com os intervalos de controlo de qualidade aceitveis da NCCLS includos na Norma M7-A6 da NCCLS. Consultar a seco CQ para obter informaes especficas. 11. Os painis Gram positivos da MicroScan no devem ser utilizados para determinar a sensibilidade de isolamentos pneumococos. Estes isolamentos devem ser despistados relativamente resistncia penicilina utilizando um mtodo aceite como seja o painel MICroSTREP plus. 12. Os painis Gram positivos Rpidos da MicroScan no devem ser utilizados para testar a resistncia a Vancomicina com isolamentos enterococos. Dever ser utilizado um procedimento alternativo se for crtico para o tratamento do doente. 13. A capacidade dos painis Gram Positivos Rpidos da MicroScan para detectar resistncia a vancomicina entre S. aureus (VRSA) desconhecida porque, na altura dos testes comparativos, no estavam disponveis estirpes resistentes. Deve ser utilizado um mtodo alternativo recomendado pelos Centros para Controlo e Preveno de Doenas (CDC).14

Resultados duvidosos
A Norma M7-A6 da NCCLS afirma que podem ocorrer resultados perigosamente duvidosos quando se testam determinados agentes antimicrobianos contra organismos especficos. Para os enterococos, estes agentes antimicrobianos incluem: cefalosporinas, aminoglicsidos (excepto o teste de alto nvel para resistncia), clindamicina e trimetoprim/sulfametoxazol. Para spp. Listeria, estes agentes antimicrobiticos incluem as Cefalosporinas. O sistema de gesto de dados (SGD) da MicroScan comunicar s a CIM, no a interpretao, quando se verificam as combinaes de agente antimicrobiano/organismo referidas acima.

Tabela de pontos finais adicionais de controlo da qualidade de organismos para: Combo Pos Rpido Tipo 1, Rpido Pos CIM Tipo 1, e Breakpoint Rpido Pos Tipo 1
Agente Antimicrobiano Ampicilina/Sulbactam Amoxicilina/Clavulanato de K Abrev. A/S Aug Tipo de Painel Rpido Pos CIM 1 Rpido Pos BP 1 Combo Pos Rpido 1 Rpido Pos CIM 1 Rpido Pos BP 1 Rpido Pos BP 1 Rpido Pos BP 1 Combo Pos Rpido 1 Rpido Pos CIM 1 Rpido Pos BP 1 Combo Pos Rpido 1 Rpido Pos CIM 1 Rpido Pos BP 1 Combo Pos Rpido 1 Rpido Pos CIM 1 Rpido Pos BP 1 Organismo E. avium ATCC 49465 E. avium ATCC 49462 Intervalo 8/4-16/8 2/1-4/2 8, 32 8, 32 6->6 4, 6, 8, >8 4->8 >2000

Valores esperados
Para consultar os valores esperados, consultar as tabelas de percentagens da MicroScan relativas a Micrococcaceae e Streptococcaceae, localizadas no Manual de Microbiologia.

Cefotaxima Ceftriaxona Gentamicina

Cft Cax Gm

S. epidermidis ATCC 49461 S. epidermidis ATCC 49461 S. epidermidis ATCC 49461 E. faecalis ATCC 49478 E. avium ATCC 49462

Caractersticas do desempenho
O desempenho dos painis Rpidos da MicroScan foi estabelecido atravs de avaliaes em vrios laboratrios clnicos. Os agentes antimicrobianos na Tabela 1-1 foram comparados com um sistema de CIM de microdiluio de referncia. Os dados foram analisados e interpretados quantitativa e qualitativamente (S, I, R) de acordo com os padres interpretativos da CIM das normas NCCLS e/ou atravs de concordncia percentual com um mtodo de referncia.5 Os resultados foram considerados como sendo concordantes quando ambos os mtodos resultaram na mesma interpretao. A concordncia geral da CIM foi de 95,5%. A concordncia em percentagem de cada agente antimicrobiano encontra-se listada na Tabela 1-1.

Despiste Sinrgico de Gentamicina

GmS

Imipenem

Imp

2-4 1-4 4

3250-7842A