UNIVERSIDAD ABIERTA Y A DISTANCIA DE MEXICO

Nombre:

Materia: Qumica Analtica.

Grado:

Tercer Cuatrimestre.

Ttulo:

Unidad 4 Actividad 3 Obtencin del espectro de absorcin de la clorofila.

Introduccin:
La interaccin entre las ondas electromagnticas y la materia de la regin UV-visible es el campo de estudio de la espectroscopia UV-visibles o espectrofotometra. Esta basada en la relacin que presenta un haz de luz incidente en la muestra y el haz de luz que pasa por la solucin. Su estudio se basa en que la cantidad de luz absorbida por la materia presente en la solucin es caracterstica del compuesto. La respuesta de dicho componente es funcin de las caractersticas del haz de luz incidente en la muestra, lo que permite determinar la respuesta en funcin de la calidad del haz proporcionado. Dicho conjunto de respuesta en el rango de longitud de onda de la gama UV-visible se denomina espectro de absorcin; dicha respuesta es caracterstica de cada compuesto. Las actividades consisten en la extraccin de clorofila de las hojas mediante solventes, la separacin de clorofila y xantofila, y la obtencin de los espectros de absorcin de la clorofila. La clorofila es el pigmento de las plantas, le proporciona su color verde y es fundamental para el proceso de la fotosntesis. La obtencin de es interesante para el estudio y conocimiento de las propiedades de las plantas.

Marco teorico:
La espectroscopia de absorcin es la medida de la cantidad de luz absorbida por un compuesto en funcin de la longitud de onda de la luz. En general, e irradia una muestra con una fuente de luz y se mide la cantidad de luz transmitida a varias longitudes de onda, utilizando un detector y registrando el fenmeno en un grfico. Al contrario que en los ensayos qumicos, la mayora de las tcnicas espectroscpicas no son destructivas, es decir, no destruyen las muestras durante el anlisis; se pueden realizar diferentes tipos de espectros sin prdida o perdiendo muy poco de muestra. Cuando un slido incandescente se halla rodeado por un gas ms fro, el espectro resultante presenta un fondo continuo interrumpido por espacios oscuros denominados lneas de absorcin que ocurren porque el gas ha absorbido de la luz aquellos colores que ste irradia por s mismo.

Pero tambin se da el caso que en la naturaleza cohabitan cuerpos que absorben radiacin emitida por otros, eliminando del espectro de radiacin que reciben aquellas bandas absorbidas, las cuales quedan de color negro. A esas bandas, se les suele llamar rayas negras o simplemente rayas espectrales. Por otra parte, suele ocurrir que unos cuerpo absorben slo la radiacin de unas determinadas longitudes de onda y no aceptan absorber otras de otras longitudes, por lo que cada cuerpo, cada elemento qumico en la prctica, tiene su propio espectro de absorcin, el cual se corresponde con su espectro de emisin, al igual como si fuera el negativo con el positivo de una pelcula.

Anlisis de Desarrollo:
Parte Experimental Parte No 1: Extraccin de la Clorofila Materiales:

Acetona al 80% con agua.

Trozos de hojas

Balanza

Mortero

Embudo de filtracin

Algodn

Matraz aforado de 25mL.

Vidrio reloj.

Papel aluminio

Embudo de decantacin.

Desarrollo :
Se preparan 50mL. de una mezcla de acetona al 80% con agua. Los trozos de hojas se pesan en una balanza con un vidrio reloj hasta conseguir 0,1 gr. Las hojas se trituran en el mortero y se aade un poco de acetona, este procedimiento se realiza hasta observar que el lquido va adoptando una coloracin verde. La disolucin obtenida se filtra, se recoge en un matraz aforado y este se cubre con papel aluminio. Se vuelve a agregar acetona a las hojas en el mortero, se vuelve a triturar, filtrar y aadir al matraz aforado. Esta operacin se repite hasta que las hojas pierdan por completo su color verde. Se enrasa la disolucin del matraz aforado con acetona.

Resultados:
Se obtuvo una muestra A, la cual esta formada por clorofila y acetona. Anlisis de los resultados: Parte No 2: Separacin de Clorofila y la Xantofila por extraccin Materiales:

15mL. de Tolueno

Embudo de decantacin de 100mL.

2 Matraz Erlenmeyer de 100mL.

Disolucin anterior. (Clorofila y Acetona)

Desarrollo:
Se toman 10mL. de la disolucin anterior (muestra A), adicionando 15mL.de Tolueno. Esta mezcla es introducida en un embudo de decantacin, en donde se debe agitar varias veces y dejar que se separe la fase acetnica con clorofila de la tolunica, la cual contiene la xantofila y el resto de los componentes como carotenoides, fenoles, etc. La fase tolunica queda en la parte inferior del embudo. Se abre la llave del embudo, expulsando la fase tolunica y una pequea parte de la fase acetnica, en un matraz erlenmeyer. La disolucin de la acetona con clorofila se vierte en otro matraz erlenmeyer (muestra B) Parte No 3: Medicin de las absorvancias (Espectros de absorcin). Materiales:

Espectrofotmetro de absorcin

Cubetas de polietileno

Desarrollo:
Las muestras A y B se agregan en las cubeta de polietileno. Se miden las absorbancia a distintas longitudes de onda

Resultados:
Al introducir la muestra A en el Espectrofotmetro de absorcin se agrega una muestra patrn que en este caso es la acetona al 80% con agua. Al introducir la muestra B en el Espectrofotmetro de absorcin se agrega una muestra patrn que en este caso en el Tolueno. Longitudes de onda para muestra A y B:

MUESTRA "A"

MUESTRA "B"

LONGITUDES DE ONDA

350 370 360 410 430 450

360 380 400 420 440 460

Anlisis de resultados:

La clorofila (muestra A) absorbe la energa solar necesaria para iniciar el ciclo fotosinttico de muchas plantas y bacterias. La principal propiedad fsicoqumica reponsable de este hecho es la elevada absorbancia que presenta la clorofila en el intervalo de longitudes de onda entre 400 nm y 700 nm. Existen dos tipos principales de clorofila, la clorofila a y la clorofila b, que se diferencian por la presencia de un grupo CH o CHO, respectivamente, en uno de los anillos CN. Este grupo funcional da lugar a espectro de absorcin. La clorofila a en disolucin acetnica presenta mximos de absorcin en aproximadamente 430 nm y 662 nm, mientras que la clorofila b los presenta en aproximadamente 453 nm y 642 nm.

REFERENCIAS:
http://www.forest.ula.ve/~rubenhg/fotosintesis/
Wade, L. G., Qumica orgnica, 5 edicin, Prentice hall, Madrid, 2004, Pgs.: 490-495,544. Manual de seguridad de sustancias peligrosas en laboratorio de Q.F.B : Trabajo monogrfico paraobtener el titulo de Q.F.B por Bettina Herrera Fabela 2003, Pg. 160 y 239